專利名稱：用于治療或預(yù)防以異常細(xì)胞增殖為特征之疾病的經(jīng)取代的二苯基茚滿酮、茚滿和吲哚化 ...的制作方法
1、發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及芳香有機(jī)化合物，它們是紅細(xì)胞的Ca2+活化的鉀通道(Gardos通道)和/或哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的特異性、強(qiáng)效和安全的抑制劑。所述化合物可用于原位減少鐮形紅細(xì)胞脫水和/或延遲紅細(xì)胞鐮形化或變形的發(fā)生，用作治療或預(yù)防鐮形細(xì)胞疾病的治療方法。這些化合物還可用于原位抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞的增殖，用作治療或預(yù)防以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病的治療方法。
2、發(fā)明背景在西非識(shí)別出鐮形細(xì)胞疾病已有幾個(gè)世紀(jì)。鐮形細(xì)胞性貧血和鐮形血紅蛋白(Hb s)的存在是在分子水平上理解的第一種遺傳性疾病。現(xiàn)在已認(rèn)識(shí)到其是β珠蛋白鏈的第6位處甘氨酸向纈氨酸取代的形態(tài)學(xué)和臨床結(jié)果(Ingram，1956，Nature 178792-794)。氨基酸變化和疾病的源頭是單核苷酸取代的后果(Marotta等人，1977，J.Biol.Chem.2525040-5053)。
鐮形細(xì)胞疾病患者死亡的主要原因是由于鐮形化細(xì)胞所導(dǎo)致的血管閉塞，這又導(dǎo)致急性和慢性形式的疼痛的重復(fù)發(fā)生，而且還隨時(shí)間進(jìn)一步導(dǎo)致器官的損壞。人們?cè)缫颜J(rèn)識(shí)并接受以下觀點(diǎn)鐮形紅細(xì)胞在完全脫氧時(shí)的變形和扭曲是由于鐮形血紅蛋白--血紅蛋白S(Hb S)的聚合和細(xì)胞內(nèi)凝膠化導(dǎo)致的。Eaton和Hofrichter(1987，Blood 701245)已很好地回顧并討論了該現(xiàn)象。Hb S的細(xì)胞內(nèi)凝膠化和聚合可在紅細(xì)胞由血管中通過(guò)期間的任何時(shí)間時(shí)發(fā)生。因此，鐮形細(xì)胞疾病患者中不包含聚合血紅蛋白S的紅細(xì)胞可由微循環(huán)中通過(guò)，并返回至肺部，不會(huì)發(fā)生鐮形化，而在靜脈中鐮形化或者在毛細(xì)血管中鐮形化。
發(fā)生上述任一事件的可能性是由細(xì)胞內(nèi)凝膠化相對(duì)于合適的毛細(xì)血管通過(guò)時(shí)間的延遲時(shí)間來(lái)決定的(Eaton等人，1976，Blood 47621)。而該延遲時(shí)間取決于血紅蛋白的脫氧狀態(tài)，其中脫氧將縮短延遲時(shí)間。因此，如果細(xì)胞內(nèi)凝膠化在熱動(dòng)力學(xué)上是不可能發(fā)生的，或者在靜脈氧壓下延遲時(shí)間超過(guò)約15秒，則細(xì)胞鐮形化將不發(fā)生。另外，如果延遲時(shí)間在約1-15秒之間，紅細(xì)胞有可能在靜脈中鐮形化。但是，如果延遲時(shí)間低于約1秒，紅細(xì)胞將在毛細(xì)血管中鐮形化。
對(duì)于在毛細(xì)血管內(nèi)鐮形化的紅細(xì)胞，存在大量可能的引發(fā)事件，從對(duì)通過(guò)時(shí)間沒有作用，到毛細(xì)血管的暫時(shí)性閉塞，到可能最終導(dǎo)致周圍細(xì)胞缺血或梗塞、以及紅細(xì)胞破壞的更永久性阻斷。
人們?cè)缫颜J(rèn)識(shí)到，正常紅細(xì)胞的胞漿包括大約70％的水。水在幾毫秒內(nèi)跨過(guò)正常紅細(xì)胞的膜；但是，隨著平均細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)升高超過(guò)約32g/dl，細(xì)胞水的丟失導(dǎo)致胞漿粘度呈對(duì)數(shù)增加。因?yàn)榘麧{粘度是紅細(xì)胞變形和鐮形化的主要決定因素，所以紅細(xì)胞的脫水具有顯著的流變學(xué)和病理學(xué)后果。因此，維持正常紅細(xì)胞的水含量以及可導(dǎo)致水在血液循環(huán)中從紅細(xì)胞中丟失的病理狀態(tài)的生理學(xué)機(jī)理是非常重要的。并不令人驚奇的是，調(diào)節(jié)紅細(xì)胞脫水已作為治療鐮形細(xì)胞疾病的一種重要治療方法。因?yàn)榧?xì)胞水隨細(xì)胞內(nèi)離子濃度的任何滲透壓變化而變化，所以保持紅細(xì)胞的鉀濃度是特別重要的(Stuart和Ellory，1988，Brit J.Haematol.691-4)。
人們已嘗試了許多方法來(lái)醫(yī)治脫水鐮形細(xì)胞(并由此通過(guò)降低血漿的滲透壓來(lái)減少血紅蛋白S的聚合)，并取得了有限成功，其中包括以下方法靜脈內(nèi)灌注蒸餾水(Gye等人，1973，Am.J.Med.Sci.266267-277)；給藥抗利尿激素后葉加壓素，同時(shí)攝入大量的流體，并限制鹽(Rosa等人，1980，M.Eng.J.Med.3031138-1143；Charache和Walker等人，1981，Blood 58892-896)；使用莫能菌素以增加鐮形細(xì)胞的陽(yáng)離子含量(Clark等人，1982，J.Clin.Invest.701074-1080；Fahim和Pressman，1981，LifeSciences 291959-1966)；靜脈內(nèi)給藥檸檬酸西替第爾(cetiedil)(Benjamin等人，1986，Blood 671442-1447；Berkowitz和Orringer，1984，Am.J.Hematol.17217-223；Stuart等人，1987，J.Clin.Pathol.401182-1186)；以及使用己酮可可堿(Stuart等人，1987，J.Clin.Pathol.401182-1186)。
醫(yī)治脫水鐮形細(xì)胞的其他方法涉及給藥咪唑、硝基咪唑、和三唑抗真菌劑如克霉唑(Clotrimazole)(Brugnara等人的第5,273,992號(hào)美國(guó)專利)。克霉唑是一種包含咪唑的抗真菌劑，對(duì)于正常和鐮形紅細(xì)胞的Gardos通道是特異性的強(qiáng)效抑制劑，并可在體外和體內(nèi)防止鐮形細(xì)胞的Ca2+依賴性脫水(Brugnara等人，1993，J.Clin.Invest.92520-526；De Franceschi等人，1994，J.Clin.Invest.931670-1676)。當(dāng)與穩(wěn)定Hb S的氧構(gòu)象的化合物復(fù)合使用時(shí)，克霉唑可誘導(dǎo)小孢子過(guò)濾器之阻塞速率的進(jìn)一步降低，并可減弱不可逆性鐮形細(xì)胞的形成(Stuart等人，1994，J.Haematol.86820-823)。包含雜芳香咪唑樣基團(tuán)并被認(rèn)為可通過(guò)Gardos通道抑制作用來(lái)降低鐮形紅細(xì)胞脫水的其他化合物包括咪康唑、益康唑、布康唑、奧昔康唑和硫康唑。這些化合物都是已知的抗真菌藥。已發(fā)現(xiàn)其他含咪唑的化合物不能抑制Gardos通道和防止鉀的丟失。
從上述討論可以看出，通過(guò)阻斷Gardos通道來(lái)降低鐮形紅細(xì)胞的脫水對(duì)于治療和/或預(yù)防鐮形細(xì)胞疾病是一種非常有用的治療方法。能夠抑制Gardos通道從而作為降低鐮形細(xì)胞脫水的一種方法的化合物是非常令人希望的，并因而是本發(fā)明的一個(gè)目的。
細(xì)胞增殖是哺乳動(dòng)物存在的一個(gè)正常部分，而且對(duì)于生命本身是必須的。但是，細(xì)胞增殖并不總是令人希望的，而且近來(lái)已表明細(xì)胞增殖是許多致命疾病如癌癥、某些皮膚病、炎性疾病、纖維變性病癥和動(dòng)脈粥樣硬化癥的根源。
細(xì)胞的增殖關(guān)鍵取決于離子在各種細(xì)胞組成之間的受控移動(dòng)，而且與DNA的合成有關(guān)。特異性多肽生長(zhǎng)因子與已停止生長(zhǎng)的細(xì)胞中的特異性受體結(jié)合引發(fā)一系列早期離子信號(hào)，這些信號(hào)對(duì)于最終導(dǎo)致DNA合成的級(jí)聯(lián)式促有絲分裂事件是關(guān)鍵性的(Rozengurt，1986，Science 234161-164)。這些事件包括(1)囊Ca2+的快速增加，這主要是因?yàn)橛杉?xì)胞內(nèi)儲(chǔ)庫(kù)中快速釋放Ca2+；(2)應(yīng)答漿膜中進(jìn)一步有助于細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加的、配體結(jié)合的而且超極化敏感性的Ca2+通道打開時(shí)的獲能性Ca2+流入(Tsien和Tsien，1990，Annu.Rev.Cell Biol.6715-760；Peppelenbosch等人，1991，J.Biol.Chem.26619938-19944)；以及(3)漿膜中Ca2+依賴性的K+通道由于K+傳導(dǎo)增加以及膜超極化而活化(Magni等人，1991，J.Biol.Chem.2619321-9327)。這些有絲分裂原誘導(dǎo)的早期離子變化被認(rèn)為是信號(hào)傳導(dǎo)通路中的關(guān)鍵事件，也是抑制正常和惡性細(xì)胞中的細(xì)胞增殖的有用治療目標(biāo)。
對(duì)于以由于離子流入變化而導(dǎo)致的非所希望的或者異常的細(xì)胞增殖為特征的疾病，而該離子流入與早期促有絲分裂信號(hào)有關(guān)，治療該疾病的有效方法涉及給藥克霉唑。如上所討論的，克霉唑已顯示可抑制紅細(xì)胞中Ca2+活化的鉀通道。另外，克霉唑可抑制成核細(xì)胞中電壓和配體刺激的Ca2+流入機(jī)制(Villalobos等人，1992，F(xiàn)ASEB J.62742-2747；Montero等人，1991，Biochem.J.27773-79)，還可體外和體內(nèi)抑制細(xì)胞增殖(Benzaquen等人，1995，Nature Medicine 1534-540)。近來(lái)，克霉唑和其他能夠抑制Ca2+活化的鉀通道的含咪唑抗真菌藥已表明可用于治療動(dòng)脈粥樣硬化(Halperin等人的第5,358,959號(hào)美國(guó)專利)、以及其他以非所希望的或異常的細(xì)胞增殖為特征的疾病。
由以上討論可以看出，通過(guò)改變與早期促有絲分裂信號(hào)有關(guān)的離子流入來(lái)抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖對(duì)于治療和/或預(yù)防以非所希望的或異常的細(xì)胞增殖為特征的疾病是非常有用的治療方法。能夠抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的化合物是非常令人希望的，并因而也是本發(fā)明的一個(gè)目的。
3、發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明提供上述和其他目的，在一個(gè)方面中提供一類作為紅細(xì)胞、特別是鐮形紅細(xì)胞的Ca2+活化的鉀通道(Gardos通道)的抑制劑和/或哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的抑制劑的化合物。這些化合物通常是經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮、茚滿或(3-H)吲哚化合物、或者其類似物。在一個(gè)示意性的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明之能夠抑制Gardos通道和/或哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的化合物是具有以下結(jié)構(gòu)式的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或水合物 其中m是0、1、2、3、或4；各n獨(dú)立地是0、1、2、3、4、或5；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基或(C1-C6)炔基；R1不存在，或者是-OR、-SR、＝O、＝S、＝N-OR、-O-C(O)R、-S-C(O)R、-O-C(S)R、-S-C(S)R，或者與R2一起形成3-8元雜環(huán)烷基或經(jīng)取代的3-8元雜環(huán)烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR′、-SR′、-NR′2、-CN、-NO2、(C3-C8)環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)烷基、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、或-C(S)NR′2；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-R′、-OR′、-SR′、-NR′2、-ONR′2、-SNR′2、-NO2、-CN、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(O)SR′、-C(S)OR′、-CS(S)R′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)NR′(OR′)、-C(S)NR′(OR′)、-C(O)NR′(SR′)、-C(S)NR′(SR′)、-CH(CN)2、-CH[C(O)R′]2、-CH[C(S)R′]2、-CH[C(O)OR′]2、-CH[C(S)OR′]2、-CH[C(O)SR′]2、和-CH[C(S)SR′]2；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基、(C5-C20)芳基、經(jīng)取代的(C5-C20)芳基、(C6-C26)烷芳基和經(jīng)取代的(C6-C26)烷芳基；雜環(huán)烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、和三鹵甲基；各R′獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基和(C1-C6)炔基；以及--代表單鍵或雙鍵。
在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供包含一種或多種本發(fā)明化合物以及藥物學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的藥物組合物。該組合物可在本發(fā)明的方法中給藥。
在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供原位降低鐮形紅細(xì)胞脫水和/或延遲紅細(xì)胞鐮形化或變形發(fā)生的方法。該方法涉及使鐮形紅細(xì)胞原位與一定量的至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥物組合物相接觸，所述量應(yīng)有效地降低鐮形紅細(xì)胞脫水和/或延遲紅細(xì)胞鐮形化或變形的發(fā)生。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，鐮形細(xì)胞脫水被減少，而且在患者微循環(huán)脈管系統(tǒng)中的鐮形紅細(xì)胞內(nèi)延遲了紅細(xì)胞變形，并由此防止或降低了通常由鐮形細(xì)胞導(dǎo)致的血管閉塞以及隨后的副作用。
在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供治療和/或預(yù)防患者如人的鐮形細(xì)胞疾病的方法。該方法涉及向患有鐮形細(xì)胞疾病的患者給藥預(yù)防或治療有效量的至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥物組合物。所述患者可患有急性鐮形病或者慢性鐮形細(xì)胞疾病。
在又一個(gè)方面中，本發(fā)明提供原位抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的方法。該方法涉及使哺乳動(dòng)物細(xì)胞原位與一定量的至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥物組合物相接觸，所述量應(yīng)有效地抑制細(xì)胞增殖?；衔锘蚪M合物可抑制細(xì)胞生長(zhǎng)地、產(chǎn)生細(xì)胞毒性地或者以這兩種機(jī)制結(jié)合地發(fā)揮作用，抑制細(xì)胞增殖。按此方式治療的哺乳動(dòng)物細(xì)胞包括血管平滑肌細(xì)胞、成纖細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、各種類型的癌變前細(xì)胞和各種類型的癌細(xì)胞。
在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供用于治療和/或預(yù)防患者如人中非所希望的或異常的細(xì)胞增殖的方法。在該方法中，向需要此等治療的患者給藥至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥物組合物，它們的量應(yīng)有效地抑制非所希望的或異常的哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖。化合物和/或組合物可局部地施用在正在增殖的細(xì)胞上，或者向患者全身給藥。優(yōu)選的是，將化合物和/或組合物給藥于患有以非所希望的或異常的細(xì)胞增殖為特征的疾病的患者。此等疾病包括但不限于癌、上皮癌前期損傷、非癌性血管原病癥或動(dòng)脈粥樣硬化。
在最后一個(gè)方面中，本發(fā)明提供一種用于治療和/或預(yù)防以非所希望的和/或異常的哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖為特征的疾病的方法。該方法涉及向需要此等治療的患者給藥預(yù)防或治療有效量的至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥物組合物。以異常哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖為特征并可用本發(fā)明方法治療或預(yù)防的疾病包括但不限于癌、血管增殖性疾病、纖維變性疾病和動(dòng)脈粥樣硬化癥。3.1、定義在此所用的以下術(shù)語(yǔ)具有以下的含意“烷基”是指飽和的支鏈、直鏈或環(huán)狀烴基。典型的烷基包括單不限于甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基等。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，烷基是(C1-C6)烷基，并特別優(yōu)選(C1-C3)烷基。
“經(jīng)取代的烷基”是指其中一個(gè)或多個(gè)氫原子分別獨(dú)立地被其他取代基置換的烷基。
“雜環(huán)烷基”是指飽和的環(huán)狀烴基，其中一個(gè)或多個(gè)碳原子被其他原子如Si、Ge、N、O、S或P置換。典型的雜環(huán)烷基包括但不限于嗎啉代基、thiolino、piperadyl、pynolidinyl、piperazyl、吡唑烷基等。優(yōu)選的是，雜環(huán)烷基包含3-8個(gè)原子。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，雜原子是氧，而且雜環(huán)烷基是3-8元環(huán)氧烷基，優(yōu)選2，3-環(huán)氧乙烷或5-8元二氧環(huán)烷基，優(yōu)選1，3-二氧戊環(huán)烷基。
“經(jīng)取代的雜環(huán)烷基”是指其中一個(gè)或多個(gè)氫原子分別獨(dú)立地被其他取代基置換的雜環(huán)烷基。
“烯基”是指不飽和的支鏈、直鏈或環(huán)狀烴基，其至少具有一個(gè)碳-碳雙鍵。該基團(tuán)在雙鍵處可為順式或反式構(gòu)型。典型的烯基包括但不限于乙烯基、丙烯基、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基、叔丁烯基、戊烯基、己烯基等。在優(yōu)選實(shí)施方案中，烯基是(C1-C6)烯基，特別優(yōu)選(C1-C3)烯基。
“經(jīng)取代的烯基”是指其中一個(gè)或多個(gè)氫原子分別獨(dú)立地被其他取代基置換的烯基。
“炔基”是指不飽和的支鏈、直鏈或環(huán)狀烴基，其至少具有一個(gè)碳-碳三鍵。典型的烯基包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、異丁炔基、戊炔基、己炔基等。在優(yōu)選實(shí)施方案中，炔基是(C1-C6)炔基，特別優(yōu)選(C1-C3)炔基。
“經(jīng)取代的炔基”是指其中一個(gè)或多個(gè)氫原子分別獨(dú)立地被其他取代基置換的炔基。
“烷氧基”是指-OR基團(tuán)，其中R是如上定義的烷基、烯基或炔基。
“烷磺基”是指-SR基團(tuán)，其中R是如上定義的烷基、烯基或炔基。
“芳基”是指具有共軛π電子系統(tǒng)的不飽和環(huán)狀烴基。典型的芳基包括但不限于戊-2，4-二烯基、苯基、萘基、蒽基、奧基、indacenyl等。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，芳基是(C5-C20)烷基，特別優(yōu)選的是(C5-C10)芳基。
“經(jīng)取代的芳基”是指其中一個(gè)或多個(gè)氫原子分別獨(dú)立地被其他取代基置換的芳基。
“烷芳基”是指其中連接在端碳原子上的一個(gè)氫原子被芳基基團(tuán)置換的直鏈烷基、烯基或炔基。典型的烷芳基包括但不限于芐基、亞芐基、次芐基、苯基芐基、萘基芐基等。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，烷芳基是(C6-C26)烷芳基，如烷芳基中的烷基、烯基或炔基是(C1-C6)，而芳基部分是(C5-C20)。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，烷芳基是(C6-C13)烷芳基，如烷芳基中的烷基、烯基或炔基是(C1-C3)，而芳基部分是(C5-C10)。
“經(jīng)取代的烷芳基”是指烷芳基中的芳基部分上的一個(gè)或多個(gè)氫原子分別獨(dú)立地被其他取代基置換的烷芳基。
“原位”是指并包括術(shù)語(yǔ)“體內(nèi)”、“來(lái)自體內(nèi)”和“體外”，而這些術(shù)語(yǔ)對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言是可以理解的。另外，在此所用“原位”一詞在最廣泛的意義上是用于表明所發(fā)現(xiàn)的或者在其位置上的單位、細(xì)胞或組織，而無(wú)論其起源、狀況或地位或其在所處位置上的持續(xù)時(shí)間或者壽命。
4、附圖簡(jiǎn)述

圖1是合成某些本發(fā)明化合物的總反應(yīng)路線圖；以及圖2是合成某些本發(fā)明化合物的總反應(yīng)路線圖。
5、發(fā)明的詳細(xì)描述如在背景部分中所述，通過(guò)抑制Gardos通道來(lái)阻斷鐮形細(xì)胞脫水對(duì)于治療和/或預(yù)防鐮形細(xì)胞疾病是非常有用的治療方法。體外研究表明克霉唑(一種含咪唑的抗真菌藥)可阻斷鐮形紅細(xì)胞中Ca2+活化的K+轉(zhuǎn)運(yùn)和細(xì)胞脫水(Brugnara等人，1993，J.Clin.Invest.92520-526)。在用于鐮形細(xì)胞疾病的轉(zhuǎn)基因鼠模型中的研究(SAD鼠，Trudel等人，1991，EMBO J.113157-3165)表明口服給藥克霉唑可抑制紅細(xì)胞Gardos通道，增加紅細(xì)胞K+含量，降低平均細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)，并降低細(xì)胞密度(De Franceschi等人，1994，J.Clin.Invest.931670-1676)。另外，用口服克霉唑進(jìn)行的治療可誘導(dǎo)Gardos通道的抑制，降低患有鐮形細(xì)胞疾病的患者中紅細(xì)胞脫水(Brugnara等人，1996，J.Clin.Invest.971227-1234)。其他體外抑制Gardos通道的抗真菌藥包括咪康唑、益康唑、布康唑、奧昔康唑和硫康唑(Brugnara等人的第5,273,992號(hào)美國(guó)專利)。所有這些化合物都包括咪唑樣環(huán)，即包含兩個(gè)或更多個(gè)氮的雜芳香環(huán)。
還如背景部分中所述，調(diào)節(jié)早期離子促有絲分裂信號(hào)和抑制細(xì)胞增殖對(duì)于治療和/或預(yù)防以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病是非常有用的治療方法。已表明，除抑制紅細(xì)胞的Gardos通道外，克霉唑還調(diào)節(jié)離子促有絲分裂信號(hào)，而且在體外和體內(nèi)都可抑制細(xì)胞增殖。
例如，克霉唑在體外以可逆和劑量依賴性的方式抑制正常和癌細(xì)胞系的細(xì)胞增殖率(Benzaquen等人，1995，Nature Medicine 1534-540)。克霉唑還可耗竭細(xì)胞內(nèi)Ca2+儲(chǔ)存，并防止通常在有絲分裂原刺激之后的囊Ca2+增加。另外，在有嚴(yán)重的組合性免疫缺陷疾病(SCID)并接種有MM-RU人黑素瘤細(xì)胞的小鼠中，每日給藥克霉唑可使觀察到的肺轉(zhuǎn)移瘤數(shù)量顯著下降(Benzaquen等人，同上)。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮、茚滿和(3-H)吲哚化合物以及這些類化合物的類似物也可抑制紅細(xì)胞的Gardos通道和/或哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖。因此，在一個(gè)方面中，本發(fā)明提供一類能夠抑制紅細(xì)胞、特別是鐮形紅細(xì)胞Ca2+活化的鉀通道(Gardos通道)和/或抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖、特別是有絲分裂原誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖的新化合物。
這些化合物的活性是非常令人驚奇的。明顯的是，本發(fā)明的化合物不包括咪唑或咪唑樣基團(tuán)。大家已經(jīng)認(rèn)識(shí)到，咪唑或咪唑樣基團(tuán)是克霉唑以及其他上述抗真菌藥發(fā)揮抗真菌和其他活性的基本官能團(tuán)。因此，本發(fā)明之經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮、茚滿或(3-H)吲哚化合物和類似物提供了一類全新的能夠有效抑制Gardos通道和/或哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的化合物。
在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供原位降低鐮形細(xì)胞脫水和/或延遲紅細(xì)胞鐮形化發(fā)生的方法，作為治療鐮形細(xì)胞疾病的治療方法。在其最廣泛的意義上，該方法僅涉及一個(gè)單獨(dú)的步驟--向鐮形紅細(xì)胞原位給藥至少一種本發(fā)明的藥理活性化合物或其組合物，其量應(yīng)有效地降低脫水和/或延遲細(xì)胞鐮形化或變形的發(fā)生。
雖然不想囿于任何具體的理論，據(jù)信原位向鐮形紅細(xì)胞給藥合適量的在此所述的化合物可幾乎完全抑制鐮形細(xì)胞的Gardos通道，并由此降低鐮形細(xì)胞的脫水和/或延遲細(xì)胞鐮形化或變形的發(fā)生。在優(yōu)選實(shí)施方案中，在宿主微循環(huán)脈管系統(tǒng)的鐮形細(xì)胞中降低了鐮形細(xì)胞的脫水和/或延遲了鐮形化的發(fā)生，并由此降低或消除了通常由鐮形細(xì)胞導(dǎo)致的血管閉塞。
部分基于Gardos通道作為鐮形細(xì)胞疾病治療中的治療目標(biāo)而總結(jié)出的重要性，本發(fā)明還涉及治療或預(yù)防鐮形細(xì)胞疾病的方法。在該方法中，向患有鐮形細(xì)胞疾病的患者給藥有效量的一種或多種根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥物組合物。該方法可用于預(yù)防性地治療鐮形細(xì)胞疾病，以降低細(xì)胞內(nèi)Hb S的濃度和/或聚合，并由此使血液循環(huán)中的紅細(xì)胞鐮形化的時(shí)間和持續(xù)長(zhǎng)度以及血管閉塞最小。該方法還可治療性地用于患有急性鐮形細(xì)胞疾病的患者中、以及患有慢性鐮形細(xì)胞疾病的患者中，以控制疾病的發(fā)生頻率和持續(xù)時(shí)間。
本發(fā)明的化合物還是細(xì)胞增殖作用的強(qiáng)效、特異性抑制劑。因此，在另一個(gè)方面中，本發(fā)明提供抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的方法，作為治療或預(yù)防以非所希望的或異常的細(xì)胞增殖為特征的疾病的治療方法。在其最廣泛的意義上，該方法僅涉及一個(gè)單獨(dú)步驟--原位向哺乳動(dòng)物細(xì)胞給藥有效量的至少一種根據(jù)本發(fā)明的藥理活性化合物?；衔锟杉?xì)胞抑制性地、細(xì)胞毒性地、或者以兩種機(jī)制的組合來(lái)發(fā)生作用，抑制細(xì)胞增殖?？捎么朔绞街委煹牟溉閯?dòng)物細(xì)胞包括血管平滑肌細(xì)胞、成纖細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、各種癌前期細(xì)胞和各種癌細(xì)胞。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，在患有以非所希望的或異常的細(xì)胞增殖為特征的疾病的患者中抑制細(xì)胞增殖。此等疾病將在以下詳細(xì)描述。
部分地基于在某些疾病中對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的作用，本發(fā)明還涉及治療或預(yù)防以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病的方法。在該方法中，向患有以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病的患者給藥有效量的至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥物組合物。雖然不想囿于任何具體的理論，據(jù)信向患者給藥合適量的根據(jù)本發(fā)明的化合物可通過(guò)改變與早期促有絲分裂信號(hào)有關(guān)的離子流入來(lái)抑制細(xì)胞增殖。離子流入的此等變化被認(rèn)為是由于本發(fā)明化合物之抑制細(xì)胞的鉀通道、特別是Ca2+活化的鉀通道的能力。該方法可預(yù)防性地用于治療非所希望的或異常的細(xì)胞增殖，或可治療性地用于降低或停止異常增殖細(xì)胞的增殖。所述化合物或其藥物組合物可局部地施用在增殖細(xì)胞上，以在所希望的時(shí)間停止或抑制增殖作用，或者全身給藥于患者，以停止或抑制細(xì)胞增殖。
以異常細(xì)胞增殖為特征并可用本發(fā)明的方法治療或預(yù)防的疾病包括血管增殖性疾病、纖維變性疾病、動(dòng)脈粥樣硬化疾病和各種癌癥。
血管增殖性疾病是指通常導(dǎo)致血管異常增殖的血管生成和血管發(fā)生的疾病。血管形成和擴(kuò)展或者血管發(fā)生和血管生成分別在各種生理過(guò)程中扮演著重要的角色，所述生理過(guò)程例如是胚胎發(fā)育、黃體形成、傷口愈合以及器官再生。它們?cè)诎┌Y發(fā)展中也起著關(guān)鍵性的作用。血管增殖性疾病的其他例子包括其中新的毛細(xì)血管侵入關(guān)節(jié)中并損壞軟骨的關(guān)節(jié)炎，以及其中視網(wǎng)膜中的新毛細(xì)血管侵入玻璃體中、出血并導(dǎo)致失明和新血管青光眼的眼疾病如糖尿病性視網(wǎng)膜病。
異常的新血管化的其他例子是與實(shí)體腫瘤有關(guān)者。現(xiàn)已確認(rèn)，腫瘤不受限制的生長(zhǎng)依賴于血管生成，而且由血管生成因子釋放誘發(fā)的血管生成在癌發(fā)生中是重要的一步。例如，基礎(chǔ)成纖生長(zhǎng)因子(bFGF)由一些癌細(xì)胞中釋放出來(lái)，并在癌血管生成中起著關(guān)鍵的作用。當(dāng)抑制血管生成時(shí)某些動(dòng)物腫瘤縮小，該事實(shí)對(duì)于血管生成在腫瘤生長(zhǎng)中的作用提供了最有力的證據(jù)。與新血管化有關(guān)的其他癌癥包括血管內(nèi)皮瘤、血管瘤和卡波濟(jì)肉瘤。
內(nèi)皮和血管平滑肌細(xì)胞的增殖是新血管化的主要特征。本發(fā)明可用于抑制此等增殖作用，并因此可用于抑制或停止完全或部分地依賴于所述新血管化的血管生成病癥的發(fā)展。當(dāng)所述病癥具有并不一定與新血管化有關(guān)的其他內(nèi)皮或血管平滑肌細(xì)胞因素時(shí)，本發(fā)明是特別有用的。例如，牛皮癬可另外涉及內(nèi)皮細(xì)胞增殖，該增殖不依賴于與新血管化有關(guān)的內(nèi)皮細(xì)胞增殖。同樣，需要新血管化以繼續(xù)生長(zhǎng)的實(shí)體瘤也可是內(nèi)皮或血管平滑肌細(xì)胞的腫瘤。在此情況下，腫瘤細(xì)胞本身的生長(zhǎng)以及新血管化可用在此所述的化合物抑制。
本發(fā)明還可用于治療纖維變性疾病，如纖維變性以及其他完全或部分地由成纖細(xì)胞增殖所導(dǎo)致的纖維變性的醫(yī)療并發(fā)癥。涉及纖維變性的醫(yī)療病癥(除動(dòng)脈粥樣硬化，如下所述)包括由手術(shù)或受傷導(dǎo)致的非所希望的組織粘連。
可用本發(fā)明治療的其他細(xì)胞增殖性疾病包括動(dòng)脈粥樣硬化癥。動(dòng)脈粥樣硬化是用于描述動(dòng)脈壁變厚、變硬的術(shù)語(yǔ)。在此所用的動(dòng)脈粥樣硬化癥是指典型的動(dòng)脈粥樣硬化、加速的動(dòng)脈粥樣硬化、動(dòng)脈粥樣硬化損傷、以及以非所希望的內(nèi)皮和/或血管平滑肌細(xì)胞增殖為特征的任何其他動(dòng)脈粥樣硬化癥，包括糖尿病的血管并發(fā)癥。
血管平滑肌細(xì)胞的增殖是典型動(dòng)脈粥樣硬化的主要病理特征。據(jù)信，由內(nèi)皮細(xì)胞中釋放生長(zhǎng)因子可刺激血管內(nèi)膜下的平滑肌的增殖，而該增殖作用又降低了血管口徑，并最終阻塞動(dòng)脈。本發(fā)明可用于抑制此等增殖作用，并因此可用于延遲此等增殖作用以及有關(guān)的動(dòng)脈粥樣硬化病癥的開始、抑制其發(fā)展、或甚至使其發(fā)展停止。
血管平滑肌細(xì)胞的增殖產(chǎn)生加速的動(dòng)脈粥樣硬化，該類型的動(dòng)脈粥樣硬化是沒有排斥的心臟移植物衰竭的主要原因。該增殖也被認(rèn)為是通過(guò)生長(zhǎng)因子來(lái)調(diào)節(jié)的，并可最終導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈的阻塞。本發(fā)明可用于抑制此等阻塞，以及降低或甚至防止所述衰竭。
血管損傷也可導(dǎo)致內(nèi)皮和血管平滑肌細(xì)胞增殖。該損傷可由許多外傷事件或介入導(dǎo)致，包括血管手術(shù)和氣球血管形成術(shù)。再狹窄是成功的冠狀動(dòng)脈氣球血管形成術(shù)的主要并發(fā)癥。據(jù)信是由于生長(zhǎng)因子釋放導(dǎo)致的，而生長(zhǎng)因子釋放是冠狀動(dòng)脈的襯里內(nèi)皮細(xì)胞的機(jī)械損傷的結(jié)果。因此，通過(guò)抑制非所希望的內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞增殖，在此所述的化合物可用于延遲、或甚至避免再狹窄的開始。
可用本發(fā)明治療或預(yù)防的其他動(dòng)脈粥樣硬化癥包括涉及內(nèi)皮和/或血管平滑肌細(xì)胞之增殖作用的動(dòng)脈壁疾病，如糖尿病的并發(fā)癥、糖尿病性腎小球硬化癥以及糖尿病性視網(wǎng)膜病。
在此所述的化合物還是強(qiáng)效的抗腫瘤藥，并因此可用于治療或預(yù)防各種類型的腫瘤疾病?？捎帽景l(fā)明治療的腫瘤疾病包括但不限于膽管癌；腦癌，包括成膠質(zhì)細(xì)胞瘤和成神經(jīng)管細(xì)胞瘤；乳腺癌；宮頸癌；絨膜癌；結(jié)腸癌；子宮內(nèi)膜癌；食管癌；胃癌；血液腫瘤，包括急性和慢性淋巴細(xì)胞性和骨髓性白血病，多發(fā)性骨髓瘤，與AIDS有關(guān)的白血病和成人T-細(xì)胞白血病淋巴瘤；上皮內(nèi)腫瘤，包括鮑恩病和佩吉特病；肝癌；肺癌；淋巴瘤，包括何杰金病和淋巴細(xì)胞性淋巴瘤；成神經(jīng)細(xì)胞瘤；口腔癌，包括鱗狀細(xì)胞癌；卵巢癌，包括由上皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、生殖細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞中產(chǎn)生的癌；胰腺癌；前列腺癌；直腸癌；肉瘤，包括平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤、纖維肉瘤和骨肉瘤；皮膚癌，包括黑素瘤、卡波濟(jì)肉瘤、嗜堿性細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌；睪丸癌，包括胚腫瘤(精原細(xì)胞瘤、非精原細(xì)胞瘤(畸胎瘤、絨膜癌))、基質(zhì)腫瘤和生殖細(xì)胞腫瘤；甲狀腺癌，包括甲狀腺癌和髓質(zhì)癌；以及腎癌，包括腺癌和Wilms腫瘤。
本發(fā)明的化合物可用于激素依賴性的以及非激素依賴性的癌癥。它們還可用于前列腺和乳腺癌。它們進(jìn)一步還可用于癌癥的多藥物耐受性株。
除上述具體的疾病外，本發(fā)明還可用于治療或預(yù)防皮膚病，包括瘢痕瘤、肥大性疤痕、皮脂溢性皮炎、乳頭瘤病毒感染(如產(chǎn)生尋常疣、足底疣、扁平疣、濕疣等)、濕疹和上皮癌前期損傷如光化性角化病；其他炎性疾病，包括增殖性腎小球腎炎；紅斑狼瘡；硬皮?。婚]塞性血栓血管炎；暫時(shí)性關(guān)節(jié)炎；粘膜皮膚性淋巴結(jié)綜合癥；以及通過(guò)生長(zhǎng)因子介導(dǎo)的其他病理疾病包括尿道平滑肌瘤。
本發(fā)明的化合物和方法與常規(guī)用于治療鐮形細(xì)胞疾病和/或細(xì)胞增殖性疾病的藥物和方法相比具有多種優(yōu)點(diǎn)。與用克霉唑或其他抗真菌藥治療鐮形細(xì)胞疾病和/或細(xì)胞增殖性疾病相比，本發(fā)明的化合物和方法也具有多種優(yōu)點(diǎn)。最顯著的是，與克霉唑和其他抗真菌藥相比，本發(fā)明的化合物降低了毒性，并因而可在臨床中提供更有益的治療作用。例如，對(duì)于克霉唑，已知咪唑部分起到抑制寬范圍的細(xì)胞色素P-450同功酶催化的反應(yīng)的作用，這構(gòu)成了其主要的毒理作用(Pappas和Franklin，1993，Toxicology 8027-35；Matsuura等人，1991，Biochemical Pharmacology 411949-1956)。本發(fā)明的化合物不包含咪唑或咪唑樣部分，并因此不會(huì)具有與克霉唑相同的已知毒性作用。5.1、化合物根據(jù)本發(fā)明能夠抑制Gardos通道和/或哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖作用的化合物通常是經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮、茚滿和(3-H)吲哚化合物，其中環(huán)1和2位上的原子是通過(guò)雙鍵連接的。
在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明之能夠抑制Gardos通道和/或哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的化合物是具有以下結(jié)構(gòu)式的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或水合物 其中m是0、1、2、3、或4；
各n獨(dú)立地是0、1、2、3、4、或5；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基或(C1-C6)炔基；R1不存在，或者是-OR、-SR、＝O、＝S、＝N-OR、-O-C(O)R、-S-C(O)R、-O-C(S)R、-S-C(S)R，或者與R2一起形成3-8元雜環(huán)烷基或經(jīng)取代的3-8元雜環(huán)烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR′、-SR′、-NR′2、-CN、-NO2、(C3-C8)環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)烷基、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、或-C(S)NR′2；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-R′、-OR′、-SR′、-NR′2、-ONR′2、-SNR′2、-NO2、-CN、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(O)SR′、-C(S)OR′、-CS(S)R′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)NR′(OR′)、-C(S)NR′(OR′)、-C(O)NR′(SR′)、-C(S)NR′(SR′)、-CH(CN)2、-CH[C(O)R′]2、-CH[C(S)R′]2、-CH[C(O)OR′]2、-CH[C(S)OR′]2、-CH[C(O)SR′]2、和-CH[C(S)SR′]2；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基、(C5-C20)芳基、經(jīng)取代的(C5-C20)芳基、(C6-C26)烷芳基和經(jīng)取代的(C6-C26)烷芳基；雜環(huán)烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、和三鹵甲基；各R′獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基和(C1-C6)炔基；以及--代表單鍵或雙鍵。
在通式(I)的化合物中，環(huán)1和2位處的原子之間的鍵(以--表示)可以是單鍵或雙鍵。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識(shí)到，如果該鍵是單鍵，某些取代基則必須不存在。還應(yīng)認(rèn)識(shí)到，具體的X也影響某些取代基的存在與否。因此，應(yīng)理解的是，如果X是N而--是雙鍵，則R1、R2和R3不存在；如果X是C而--是雙鍵，則R2和R3不存在。如果X是N而--是單鍵，則R1和R2之一存在，另一個(gè)不存在，R3存在；如果X是C而--是單鍵，則R1、R2和R3都存在。
在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，式(I)化合物中的硫?qū)僭邮茄?。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，化合物是如下的式(I)化合物，其中m是0、1、2、3、或4；各n獨(dú)立地是0、1、2、3、4、或5；X是C或N
Y不存在，或者是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基或(C1-C6)炔基；R1不存在，或者是-OR、＝O、＝N-OR、-O-C(O)R，或者與R2一起形成3-8元環(huán)氧烷基或經(jīng)取代的3-8元環(huán)氧烷基；R3不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR′、-NR′2、-CN、-NO2、(C3-C8)環(huán)烷基、3-8元環(huán)氧烷基、5-8元二氧環(huán)烷基、-C(O)R′、-C(O)OR′、或-C(O)NR′2；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中-鹵素、-R′、-OR′、-NR′2、-ONR′2、-NO2、-CN、-C(O)R′、-C(O)OR′、-C(O)NR′2、-C(O)NR′(OR′)、-CH(CN)2、-CH[C(O)R′]2、和-CH[C(O)OR′]2；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基、(C5-C20)芳基、經(jīng)取代的(C5-C20)芳基、(C6-C26)烷芳基和經(jīng)取代的(C6-C26)烷芳基；環(huán)氧烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、-C(O)NR′2、-C(O)OR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-C(O)R′、-C(O)OR′、-C(O)NR′2、和三鹵甲基；各R′獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基和(C1-C6)炔基；以及
--代表單鍵或雙鍵。
在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，化合物是以下結(jié)構(gòu)的式(I)化合物，其中m是0或1；各n獨(dú)立地是0或1；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基或(C1-C3)炔基；R1不存在，或者是-H、-OR、＝O、-NR2、＝N-OR、-O-C(O)R，或者與R2一起形成3-5元環(huán)氧烷基或經(jīng)取代的3-5元環(huán)氧烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR、-NR2、-CN、-C(O)OR、-C(O)NR2、或5-6元二氧環(huán)烷基；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中-R′、-F、-Cl或-Br；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基、(C1-C3)炔基、(C5-C10)芳基、經(jīng)取代的(C5-C10)芳基、(C6-C13)烷芳基、經(jīng)取代的(C6-C13)烷芳基；環(huán)氧烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-F、-Cl、-Br、-CN、-NO2、-NR′2、-C(O)R′、-C(O)OR′、和三鹵甲基；各R′獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基和(C1-C3)炔基；以及--代表單鍵或雙鍵。
在又一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，化合物是以下結(jié)構(gòu)的式(I)化合物，其中m是0、1、2、3、或4；各n獨(dú)立地是0、1、2、3、4、或5；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基或(C1-C6)炔基；R1不存在，或者是-OR、-SR、＝O、＝S、＝N-OR、-O-C(O)R、-S-C(O)R、-O-C(S)R、-S-C(S)R，或者與R2一起形成3-8元雜環(huán)烷基或經(jīng)取代的3-8元雜環(huán)烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR′、-SR′、-NR′2、-CN、-NO2、(C3-C8)環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)烷基、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、或-C(S)NR′2；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-R′、-OR′、-SR′、-NR′2、-ONR′2、-SNR′2、-NO2、-CN、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(O)SR′、-C(S)OR′、-CS(S)R′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)NR′(OR′)、-C(S)NR′(OR′)、-C(O)NR′(SR′)、-C(S)NR′(SR′)、-CH(CN)2、-CH[C(O)R′]2、-CH[C(S)R′]2、-CH[C(O)OR′]2、-CH[C(S)OR′]2、-CH[C(O)SR′]2、和-CH[C(S)SR′]2；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基、(C5-C20)芳基、經(jīng)取代的(C5-C20)芳基、(C6-C26)烷芳基和經(jīng)取代的(C6-C26)烷芳基；雜環(huán)烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、和三鹵甲基；各R′獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基和(C1-C6)炔基；--代表單鍵或雙鍵；以及如果X是C而R1是＝O、＝S或-OR′，則R5、R6或R7中的至少一個(gè)不是-R′，優(yōu)選不是-H，或者Y存在或R4不是-H；以及如果X是N，--是雙鍵，而且R1、R2、R3和Y都不存在，則R4不是-NR′2，優(yōu)選不是-NH2。
在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，化合物是以下結(jié)構(gòu)的式(I)化合物，其中m是0、1、2、3、或4；各n獨(dú)立地是0、1、2、3、4、或5；X是C；Y不存在，或者是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基或(C1-C6)炔基；R1不存在，或者是-OR、-SR、＝O、＝S、＝N-OR、-O-C(O)R、-S-C(O)R、-O-C(S)R、-S-C(S)R，或者與R2一起形成3-8元雜環(huán)烷基或經(jīng)取代的3-8元雜環(huán)烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR′、-SR′、-NR′2、-CN、-NO2、(C3-C8)環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)烷基、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、或-C(S)NR′2；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-R′、-OR′、-SR′、-NR′2、-ONR′2、-SNR′2、-NO2、-CN、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(O)SR′、-C(S)OR′、-CS(S)R′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)NR′(OR′)、-C(S)NR′(OR′)、-C(O)NR′(SR′)、-C(S)NR′(SR′)、-CH(CN)2、-CH[C(O)R′]2、-CH[C(S)R′]2、-CH[C(O)OR′]2、-CH[C(S)OR′]2、-CH[C(O)SR′]2、和-CH[C(S)SR′]2；
各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基、(C5-C20)芳基、經(jīng)取代的(C5-C20)芳基、(C6-C26)烷芳基和經(jīng)取代的(C6-C26)烷芳基；雜環(huán)烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、和三鹵甲基；各R′獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基和(C1-C6)炔基；--代表單鍵或雙鍵；以及如果X是C而R1是＝O或-OH，則R5、R6或R7中的至少一個(gè)不是-R′，優(yōu)選不是-H，或者Y存在或R4不是-H。
在又一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，式(I)的化合物選自于以下組中所示的化合物
在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，式(I)的化合物選自于化合物4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20組成的組中。
在此所述的化學(xué)結(jié)構(gòu)式可具有互變異構(gòu)、構(gòu)象異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或幾何異構(gòu)體現(xiàn)象。因?yàn)楸菊f(shuō)明書中的結(jié)構(gòu)式圖僅能代表可能的互變異構(gòu)、構(gòu)象異構(gòu)、對(duì)映體或幾何異構(gòu)形式中的一種，所以應(yīng)理解的是，本發(fā)明包括具有如在此所述的生物或藥理活性的任何互變異構(gòu)、構(gòu)象異構(gòu)、對(duì)映體或幾何異構(gòu)形式。
本發(fā)明的化合物可以是游離酸、游離堿或藥物學(xué)上有效的鹽的形式。所述鹽可容易地通過(guò)用合適的酸處理化合物來(lái)制備。所述酸包括但不限于無(wú)機(jī)酸如氫鹵酸(如鹽酸、氫溴酸等)、硫酸、硝酸、磷酸等；和有機(jī)酸如乙酸、丙酸、2-羥基乙酸、2-羥基丙酸、2-氧丙酸、丙二酸、丁二酸等。相反地，用堿進(jìn)行處理，可將鹽轉(zhuǎn)化為游離堿的形式。
除上述化合物及其藥物學(xué)上可接受的鹽外，如果合適的話，本發(fā)明還使用化合物的溶劑化物以及非溶劑化物(如水合物形式)。
在此所述的化合物可通過(guò)任何已知適用于制備化學(xué)化合物的方法來(lái)制備。合適的方法在本領(lǐng)域中是已知的。優(yōu)選的方法見代表性的實(shí)施例。必須的起始物可由市售得到，或者通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的有機(jī)化學(xué)方法來(lái)制得。另外，許多化合物可市售得到。
可使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)測(cè)定單個(gè)化合物作為影響鐮形細(xì)胞脫水或變形和/或哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的藥物的相對(duì)活性和效力。優(yōu)選的是，化合物經(jīng)過(guò)一系列的篩選，以測(cè)定其藥理活性。
在大多數(shù)的情況下，本發(fā)明的活性化合物具有兩種藥理活性抑制紅細(xì)胞的Gardos通道和抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖。但是在某些情況下，本發(fā)明的化合物僅具有這些藥理活性的一種。任何具有至少一種這些藥理活性并包括在通式(I)中的化合物都被認(rèn)為是在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
通常情況下，本發(fā)明的活性化合物是可誘導(dǎo)至少約25％的紅細(xì)胞Gardos通道抑制作用(以約10μM測(cè)定)和/或約25％的哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖抑制作用(以約10μM測(cè)定)的化合物，它們是在本領(lǐng)域已知的體外實(shí)驗(yàn)中測(cè)得的(參見例如Brugnara等人，1993，J.Biol.Chem.268(12)8760-8768；Benzaquen等人，1995，Nature Medicine 1534-540)。另外，本發(fā)明的活性化合物通常在抑制Gardos通道時(shí)具有低于約10μM的IC50(產(chǎn)生50％抑制作用時(shí)的化合物濃度)和/或在抑制細(xì)胞增殖時(shí)具有低于約10μM的IC50，它們是在本領(lǐng)域已知的體外實(shí)驗(yàn)中測(cè)得的(參見例如Brugnara等人，1993，J.Biol.Chem.268(12)8760-8768；Benzaquen等人，1995，Nature Medicine 1534-540)。
根據(jù)本發(fā)明的代表性化合物是如上所示的化合物1-20。
在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，優(yōu)選僅具有一種藥理活性的化合物，或者一種活性更高的化合物。因此，如果化合物用在治療或預(yù)防鐮形細(xì)胞疾病的方法中，或者在原位降低鐮形細(xì)胞脫水和/或延遲紅細(xì)胞鐮形化或變形發(fā)生的方法中，優(yōu)選的是化合物具有至少約75％的Gardos通道抑制作用(以約10μM測(cè)定)和/或Gardos通道抑制作用的IC50低于約1μM，特別優(yōu)選的是至少約90％的抑制作用和/或IC50低于約0.1μM。
用于與Gardos通道抑制作用和鐮形細(xì)胞疾病有關(guān)的方法中的示例性優(yōu)選化合物包括第1、2、3、4、7、9、12、13和14號(hào)化合物。
如果化合物用在治療或預(yù)防以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病的方法中，或者在原位抑制細(xì)胞增殖的方法中，優(yōu)選的是化合物具有至少約75％的有絲分裂原誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖抑制作用(以約10μM測(cè)定)和/或細(xì)胞增殖抑制作用的IC50低于約3.5μM，特別優(yōu)選的是至少約90％的抑制作用和/或IC50低于約1μM。
用于抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖或者治療或預(yù)防以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病的方法中的示例性優(yōu)選化合物包括第1、2、3、4、6、7、8、10、11、15、16、17、19和20號(hào)化合物。5.2、制劑和給藥途徑在此所述的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或水合物可用各種給藥途徑或方式給藥于患者。合適的給藥途徑包括但不限于吸入、透皮、口服、直腸、經(jīng)粘膜、腸道和非胃腸道給藥，包括肌肉內(nèi)、皮下和靜脈注射。
在此所述的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽和/或水合物可單獨(dú)給藥，或者與本發(fā)明的其他化合物組合給藥，和/或與其他治療劑以雞未酒的方式給藥。當(dāng)然，可與本發(fā)明的化合物共同給藥的治療劑的選擇部分地取決于待治療的病癥。
例如，當(dāng)給藥于鐮形細(xì)胞疾病患者時(shí)，本發(fā)明的化合物可以雞未酒的方式與用于治療疼痛、感染、和其他癥狀以及與鐮形細(xì)胞疾病有關(guān)的常見副作用的治療劑共同給藥。此等治療劑包括例如鎮(zhèn)痛藥、抗生素等?；衔镆部梢噪u未酒的方式與常規(guī)治療鐮形細(xì)胞疾病所用的其他治療劑共同給藥，這些其他治療劑包括丁酸和丁酸衍生物(Perrine等人，1993，N.Engl.J.Med.328(2)81-86)；羥基脲(Charache等人，1995，N.Engl.J.Med.323(20)1317-1322)；紅細(xì)胞生成素(Goldberg等人，1990，N.Engl.J.Med.323(6)366-372)；以及可食用的鹽如鎂(De Franceschi等人，1996，Blood 88(648a)2580)。
當(dāng)給藥于正進(jìn)行癌癥治療的患者時(shí)，化合物可以雞未酒的方式與其他抗癌藥和/或增補(bǔ)強(qiáng)化藥共同給藥?；衔镆部梢噪u未酒的方式與治療放射療法之副作用的藥物如止吐劑、放射保護(hù)劑等共同給藥。
可與本發(fā)明的化合物共同給藥的抗癌藥物包括例如氨魯米特；天冬酰胺酶；博來(lái)霉素；白消安；卡鉑；卡莫司汀(BCNU)；苯丁氯氮芥；順鉑(cis-DDP)；環(huán)磷酰胺；鹽酸阿糖胞苷；達(dá)卡巴嗪；放線菌素D；鹽酸柔紅霉素；鹽酸阿霉素；雌莫司汀磷酸鈉；依托泊甙(VP-16)；氟尿苷；氟尿嘧啶(5-FU)；氟他胺；羥基脲(hydroxycarbamide)；異環(huán)磷酰胺；干擾素α-2a、α-2b；乙酸Lueprolide(LHRH釋放因子類似物)；洛莫司汀(CCNU)；鹽酸氮芥(氮芥)；美法侖；巰嘌呤；美司鈉；甲氨蝶呤(MTX)；絲裂霉素；米托坦(o.p′-DDD)；鹽酸米托蒽醌；奧曲肽；普卡霉素；鹽酸丙卡巴肼；鏈佐星；枸櫞酸他莫昔芬；硫鳥嘌呤；噻替派；硫酸長(zhǎng)春堿；硫酸長(zhǎng)春新堿；安吖啶(m-AMSA)；阿扎胞苷；六甲密胺(HMM)；白介素2；米托胍腙(甲基-GAG；甲基乙二醛二-脒基腙；MGBG)；噴司他??；司莫司汀(甲基-CCNU)；替尼泊甙(VM-26)；紫杉醇和其他紫杉烷；以及硫酸長(zhǎng)春地辛。
可與本發(fā)明的化合物共同給藥的增補(bǔ)強(qiáng)化劑包括例如三環(huán)抗抑郁藥(如米帕明、地昔帕明、阿米替林、氯米帕明、曲米帕明、多塞平、去甲替林、普羅替林、阿莫沙平和馬普替林)；非三環(huán)抗抑郁藥(如舍曲林、曲唑酮和西酞普蘭)；Ca++拮抗劑(如維拉帕米、硝苯地平、尼群地平和卡羅維林)；兩性霉素(如Tween 80和馬來(lái)酸沛心達(dá))；曲帕拉醇類似物(如他莫昔芬)；抗心律失常藥(如奎尼丁)；抗高血壓藥(如利血平)；硫醇排除劑(如buthionine和sulfoximine)；以及亞葉酸鈣。
可用活性化合物本身或者以藥物組合物的形式給藥化合物，在藥物組合物中，活性化合物與一種或多種藥物學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑混合。用于本發(fā)明中的藥物組合物可用常規(guī)方法配制，使用一種或多種包括賦形劑和輔劑的生理相容載體，該載體應(yīng)有利于活性化合物在制劑中的處理。合適的制劑取決于所選擇的給藥途徑。
在注射給藥時(shí)，本發(fā)明的藥物可配制成水溶液，優(yōu)選在生理相容的緩沖液中，如Hanks溶液、Ringer溶液或生理鹽水溶液。在經(jīng)粘膜給藥時(shí)，在制劑中使用對(duì)于待滲透的屏蔽而言為合適的滲透劑。此等滲透劑在本領(lǐng)域中是已知的。
在口服給藥時(shí)，化合物可容易地通過(guò)混合活性化合物和本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的藥物學(xué)上可接受的載體來(lái)配制。此等載體可使本發(fā)明的化合物配制成片劑、丸劑、糖衣片劑、膠囊劑、液體制劑、凝膠劑、糖漿劑、膏劑、混懸劑等，用于待治療患者經(jīng)口服用?？诜褂玫乃幬镏苿┛捎霉腆w賦形劑來(lái)得到，其中任選地研磨所得混合物，然后在添加合適的輔劑后處理顆?；旌衔?，由此制得片劑或糖衣芯。合適的賦形劑具體地是填料如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露糖或山梨醇；纖維素制劑如玉米淀粉、小麥淀粉、稻米淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可添加崩解劑，如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、或藻酸或其鹽如藻酸鈉。
糖衣芯有合適的包衣。為此目的，可使用濃的糖溶液，該溶液可選擇地包含阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、carbopol凝膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦、清漆溶液、以及合適的有機(jī)溶劑或溶劑混合物?？稍谄瑒┗蛱且掳轮刑砑尤玖匣蝾伭?，以辨別或區(qū)別活性化合物的不同劑量組合。
可口服使用的藥物制劑包括由明膠制得的push-fit膠囊，以及由明膠和增塑劑如甘油或山梨醇制得的軟的密封膠囊。Push-fit膠囊可包含與填料如乳糖、粘合劑如淀粉、和/或潤(rùn)滑劑如滑石或硬脂酸鎂以及任選的穩(wěn)定劑混合的活性成分。在軟膠囊中，活性成分可溶解或懸浮在合適的液體中，如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇。另外，可添加穩(wěn)定劑?？诜o藥的所有制劑都應(yīng)為適合于此等給藥方式的劑量。
對(duì)于經(jīng)頰給藥，組合物可為用常規(guī)方式配制成的片劑或錠劑的形式。
在通過(guò)吸入給藥時(shí)，用于本發(fā)明中的化合物可方便地以氣霧劑的形式由加壓包裝或噴霧器中釋放，其中使用合適的噴射劑，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合適的氣體。如果是加壓氣霧劑，可用閥門釋放經(jīng)計(jì)量的量，由此確定劑量單元。用于吸入器或吹入器中的例如明膠制的膠囊和藥筒可配制成包含化合物與合適粉末基質(zhì)如乳糖或淀粉的粉末混合物。
化合物可配制成通過(guò)注射如濃液注射或連續(xù)灌注給藥的非胃腸道給藥制劑。用于注射給藥的制劑可為單元?jiǎng)┬?，例如在安瓿中，或者在多劑量容器中，其中添加防腐劑。組合物為在油基或水基載體中的混懸液、溶液或乳液的劑型，并可包含配制試劑如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。
用于非胃腸道給藥的藥物制劑包括水溶形式的活性化合物水溶液。另外，也可將活性化合物的懸浮液制成合適的油性注射混懸液。合適的親脂性溶劑或載體包括脂肪油如芝麻油，或者合成脂肪酸酯如油酸乙酯或甘油三酯，或者脂質(zhì)體。含水注射混懸液可包含增加懸浮液粘度的物質(zhì)，如羧甲基纖維素鈉、山梨醇、或葡萄糖。任選地，混懸液還可包含合適的穩(wěn)定劑或者增加化合物之溶解度的試劑，以使制劑具有更高的濃度。
另外，活性成分可為粉末形式，以在使用前與合適的載體如無(wú)菌無(wú)熱源的水混合。
化合物還可配制成直腸組合物，如栓劑或保留灌腸劑，例如包含常規(guī)栓劑基質(zhì)如可可脂或其他甘油酯。
除上述制劑外，化合物還可配制成緩釋制劑。此等長(zhǎng)效作用的制劑可通過(guò)植入或經(jīng)皮釋放(例如皮下或肌肉內(nèi))、肌肉注射或透皮藥貼來(lái)給藥。因此，作為略溶于水的衍生物例如略溶于水的鹽，化合物例如可與合適的聚合物或疏水性物質(zhì)(例如在可接受的油中的乳液)或離子交換樹脂一起配制。
藥物組合物還可包含合適的固態(tài)或凝膠相載體或賦形劑。此等載體或賦形劑的例子包括但不限于碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖、淀粉、纖維素衍生物、明膠、以及聚合物如聚乙二醇。5.3 有效劑量適合用于本發(fā)明中的藥物組合物包括其中活性成分為有效治療量的組合物，即可有效實(shí)現(xiàn)其目的的量。當(dāng)然，對(duì)于具體的應(yīng)用，有效的實(shí)際量取決于待治療的病癥。例如，當(dāng)在原位降低鐮形細(xì)胞脫水和/或延遲紅細(xì)胞鐮形化或變形的發(fā)生的方法中給藥時(shí)，所述組合物包含有效實(shí)現(xiàn)該結(jié)果的量的活性成分。當(dāng)在抑制細(xì)胞增殖的方法中給藥時(shí)，所述組合物包含有效實(shí)現(xiàn)該結(jié)果的量的活性成分。當(dāng)在給藥于鐮形細(xì)胞疾病或者患有以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病的患者時(shí)，所述組合物所包含的化合物的量應(yīng)有效地防止已有癥狀的發(fā)展或者緩解該癥狀，或者延長(zhǎng)所治療患者的壽命。在治療癌癥時(shí)，治療有效量進(jìn)一步包括所述化合物或組合物的量應(yīng)使腫瘤的生長(zhǎng)停止或消退。有效量的確定是在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)的，尤其是可參考在此的詳細(xì)描述。
對(duì)于在此所述的任何化合物，治療有效量首先由細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定。目標(biāo)血漿濃度是在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中化合物能夠誘導(dǎo)至少約25％的Gardos通道抑制作用和/或至少約25％的細(xì)胞增殖抑制作用的濃度，這當(dāng)然取決于具體所希望的應(yīng)用。在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中能夠誘導(dǎo)至少約50％、75％、或甚90％或更高的Gardos通道抑制作用和/或細(xì)胞增殖抑制作用的活性化合物的血漿濃度是優(yōu)選的。檢測(cè)在患者中對(duì)Gardos通道和/或細(xì)胞增殖的抑制作用的百分?jǐn)?shù)，以評(píng)估所達(dá)到的血漿藥物濃度的合適程度，并向上或向下調(diào)節(jié)劑量以實(shí)現(xiàn)所希望的抑制百分?jǐn)?shù)。
用于在人中的治療有效量也可由動(dòng)物模型中確定。例如，可配制用于人的劑量，以實(shí)現(xiàn)在動(dòng)物中有效的循環(huán)濃度。對(duì)于鐮形細(xì)胞疾病特別有用的動(dòng)物模型是SAD鼠模型(Trudel等人，1991，EMBO J.113157-3165)。對(duì)于以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病有用的動(dòng)物模型在本領(lǐng)域中是已知的。具體而言，以下文獻(xiàn)對(duì)于癌異種移植物(Corbett等人，1996，J.Exp.Ther.Oncol.195-108；Dykes等人，1992，Contrib.Oncol.Basel.Karger 421-22)、再狹窄(Carter等人，1994，J.Am.Coll.Cardiol.24(5)1398-1405)、動(dòng)脈粥樣硬化(Zhu等人，1994，Cardiology 85(6)370-377)以及新血管形成(Epstein等人，1987，Cornea 6(4)20-257)提供了合適的動(dòng)物模型。對(duì)于人的劑量可如上所述通過(guò)檢測(cè)Gardos通道抑制作用和/或細(xì)胞增殖的抑制作用、然后向上或向下調(diào)節(jié)來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)。
治療有效劑量也可由已知具有類似藥理活性的化合物如克霉唑和其他抗真菌藥的人數(shù)據(jù)來(lái)確定(參見例如Brugnara等人，1995，JPET 273266-272；Benzaquen等人，1995，Nature Medicine 1534-540；Brugnara等人，1996，J.Clin.Invest.97(5)1227-1234)。所用劑量可根據(jù)給藥化合物與克霉唑相比的相對(duì)生物利用度和效力來(lái)調(diào)節(jié)。
根據(jù)上述方法或本領(lǐng)域中已知的其他方法來(lái)調(diào)節(jié)劑量以在人中實(shí)現(xiàn)最大的效力是在本領(lǐng)域普通技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)的。
當(dāng)然，如果是局部給藥，給藥化合物的全身循環(huán)濃度就不是非常重要的。在此情況下，可給藥化合物以在局部區(qū)域達(dá)到對(duì)于實(shí)現(xiàn)所希望的結(jié)果是有效的濃度。
在預(yù)防和/或治療鐮形細(xì)胞疾病時(shí)，包括慢性鐮形細(xì)胞疾病和急性鐮形細(xì)胞疾病，約0.001-20μM的給藥化合物的循環(huán)濃度被認(rèn)為是有效的，并優(yōu)選0.1-5μM。
口服給藥在此所述的化合物對(duì)于預(yù)防或治療慢性鐮形細(xì)胞疾病是優(yōu)選的給藥方式，在此情況下，患者的劑量通常為80-16000mg/天，更通常為800-8000mg/天，而最通常為800-4000mg/天。以患者的體重計(jì)，典型的劑量是1-200mg/kg/天，更優(yōu)選為10-100mg/kg/天，而最優(yōu)選為10-50mg/kg/天。以患者的體表面積計(jì)，典型的劑量為40-8000mg/m2/天，更優(yōu)選為400-4000mg/m2/天，而最優(yōu)選為400-2000mg/m2/天。
在治療以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病時(shí)，包括治療癌癥、動(dòng)脈粥樣硬化和血管生成疾病如再狹窄，約0.001-20μM的給藥化合物的循環(huán)濃度被認(rèn)為是有效的，并優(yōu)選0.1-5μM。
口服給藥在此所述的化合物時(shí)，對(duì)于預(yù)防和治療細(xì)胞增殖性疾病的患者劑量通常為80-16000mg/天，更通常為800-8000mg/天，而最通常為800-4000mg/天。以患者的體重計(jì)，典型的劑量是1-200mg/kg/天，更優(yōu)選為10-100mg/kg/天，而最優(yōu)選為10-50mg/kg/天。以患者的體表面積計(jì)，典型的劑量為40-8000mg/m2/天，更優(yōu)選為400-4000mg/m2/天，而最優(yōu)選為400-2000mg/m2/天。
對(duì)于其他給藥方式，可單獨(dú)調(diào)節(jié)劑量和給藥間隔，以使給藥化合物的血漿濃度對(duì)于待治療的具體臨床適應(yīng)癥而言是有效的。例如，如果急性鐮形細(xì)胞疾病是最主要的臨床癥狀，可以相對(duì)高濃度地每日多次給藥根據(jù)本發(fā)明的化合物。另外，如果患者僅非經(jīng)常性或階段性或無(wú)規(guī)律地表現(xiàn)出階段性鐮形細(xì)胞疾病，則更希望以最小有效濃度給藥本發(fā)明的化合物，并使用頻率較低的給藥方案。這將使治療方案與鐮形細(xì)胞疾病的嚴(yán)重程度相匹配。
在治療腫瘤性癌癥時(shí)，可在手術(shù)切除腫瘤之前、期間或之后給藥本發(fā)明的化合物。例如，可在手術(shù)前以單或幾個(gè)劑量通過(guò)注射將化合物給藥于腫瘤并進(jìn)入腫瘤體中。然后可手術(shù)切除腫瘤或者盡可能多的腫瘤。在切除后可在腫瘤部位處施用另外劑量的藥物?；蛘撸中g(shù)切除盡可能多的腫瘤可在向腫瘤部位給藥化合物之前進(jìn)行。
如上所述，通過(guò)選擇各種活性化合物以及重要因素如效力、相對(duì)生物利用度、患者體重、副作用的嚴(yán)重程度以及優(yōu)選的給藥方式，可計(jì)劃有效的預(yù)防或治療方案，而不產(chǎn)生明顯的毒性，而且對(duì)于具體患者表現(xiàn)出的臨床癥狀是完全有效的。當(dāng)然，在確定適用于具體適應(yīng)癥或患者的治療方案中許多因素都是重要的。與不太嚴(yán)重的病癥如鐮形細(xì)胞疾病相比，嚴(yán)重的病癥如癌癥需要給藥更高的劑量。5.4 毒性對(duì)于具體的化合物，毒性和治療效果的比是其治療指數(shù)，而且可用LD50(50％致死時(shí)的化合物量)與ED50(50％有效時(shí)的化合物量)之間的比來(lái)表示。優(yōu)選治療指數(shù)高的化合物。由細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)和/或動(dòng)物研究中得到的治療指數(shù)數(shù)據(jù)可用于計(jì)算用于人的劑量范圍。所述化合物的劑量?jī)?yōu)選在包括ED50而且?guī)缀鯖]有或根本沒有毒性的血漿濃度范圍內(nèi)。劑量可根據(jù)所用的劑型和給藥途徑而在上述范圍內(nèi)變化。每個(gè)臨床醫(yī)師可根據(jù)患者的狀況選擇精確的制劑、給藥途徑和劑量。(例如參見Fingl等人，1975，InThe Pharmacological Basis of Therapeutics，Ch.1 p1)。
已描述了本發(fā)明，以下實(shí)施例僅是用于描述而不是限制本發(fā)明。
6、實(shí)施例化合物合成該實(shí)施例證實(shí)合成本發(fā)明的通用方法，以及合成本發(fā)明的某些示例性化合物的優(yōu)選方法。在所用反應(yīng)路線中，合適的起始物都可市售得到或者用有機(jī)合成中的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)容易地制得。如果需要，保護(hù)各種官能團(tuán)的合適基團(tuán)和路線在本領(lǐng)域中都是已知的，而且可參見例如Kocienski，Protecting Groups，Georg Thieme Verlag，New York，1994，以及Greene &Wuts，Protective Groups in Organic Chemistry，John Wiley & Sons，New York，1991。
在圖1和2中，各種取代基如上述結(jié)構(gòu)(I)所述。6.1 合成經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮參考圖1，如下合成經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮化合物在室溫下攪拌經(jīng)取代的三苯基丙酸100(0.25-0.50M，在硫酸中)共1小時(shí)，然后傾倒在等體積的冷水中。用等體積的乙酸乙酯萃取含水混合物，而有機(jī)物在硫酸鈉上干燥。蒸發(fā)產(chǎn)生所希望的經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮化合物102，產(chǎn)率約為60-75％。6.2 合成經(jīng)取代的1-羥基-3，3-二苯基茚滿化合物參考圖1，如下合成經(jīng)取代的1-羥基-3，3-二苯基茚滿化合物在0-5℃下將經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮102(0.25M，在四氫呋喃中)的溶液滴加至0.25體積的1.0M氫化鋁鋰于四氫呋喃中的溶液內(nèi)。將化合物加熱至回流，并回流2.5小時(shí)，冷卻至0-5℃，并緩慢加入等體積的1M鹽酸。然后用等體積的乙酸乙酯萃取該化合物三次。合并的有機(jī)萃取物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，并在硫酸鈉上干燥。蒸發(fā)產(chǎn)生所希望的經(jīng)取代的1-羥基-3，3-二苯基茚滿化合物104，產(chǎn)率為約45-90％。6.3 合成經(jīng)取代的1-N-肟-3，3-二苯基茚滿參考圖1，如下合成經(jīng)取代的1-N-肟-3，3-二苯基茚滿化合物混合經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮102(1當(dāng)量)和5當(dāng)量的鹽酸羥胺及10當(dāng)量的乙酸鈉，然后溶解在甲醇中。在室溫下攪拌該溶液16小時(shí)，然后加入等體積的水。用等體積的乙酸乙酯萃取混合物，而合并的有機(jī)萃取物在硫酸鈉上干燥。蒸發(fā)產(chǎn)生經(jīng)取代的1-N-肟-3，3-二苯基茚滿化合物106(其為cis和trans異構(gòu)體的混合物)，產(chǎn)率約為90-98％。6.4 合成經(jīng)取代的2-烷基-3，3-二苯基茚滿酮參考圖1，如下合成合成經(jīng)取代的2-烷基-3，3-二苯基茚滿酮化合物將經(jīng)取代的3，3-二苯基茚滿酮102(1當(dāng)量)溶解在四氫呋喃(0.4-1.0M)中，然后添加1.2當(dāng)量的氫化甲。在室溫下攪拌混合物直至氣體形成停止，然后添加溴代烷(1.2當(dāng)量)。在室溫下攪拌混合物，并用TLC監(jiān)測(cè)。用水使反應(yīng)停止，并用乙酸乙酯萃取混合物。用硅膠色譜分離所希望的經(jīng)取代的2-烷基-3，3-二苯基茚滿酮化合物108，產(chǎn)率約為50-75％。6.5 合成經(jīng)取代的1-烷氧基-3，3-二苯基茚滿參考圖1，如下合成經(jīng)取代的1-烷氧基-3，3-二苯基茚滿化合物在N，N-二甲基甲酰胺中混合經(jīng)取代的1-羥基-3，3-二苯基茚滿酮104(1當(dāng)量)和2當(dāng)量的氫化鈉，然后在室溫下攪拌至氣體形成停止。添加鹵代烷(2當(dāng)量)，并在室溫下攪拌16-20小時(shí)。添加等體積的水，然后用2倍體積的乙酸乙酯萃取混合物4次。合并的有機(jī)萃取物在硫酸鈉上干燥，然后真空除去溶劑。通過(guò)真空蒸餾分離所希望的經(jīng)取代的1-烷氧基-3，3-二苯基茚滿化合物110。6.6 合成經(jīng)取代的3，3-二苯基-3H-吲哚參考圖2，如下合成經(jīng)取代的3，3-二苯基-3H-吲哚化合物在磷酸中混合經(jīng)取代的苯肼120和等摩爾量的經(jīng)取代的1，1-二苯基-2-酮122。在100-120℃下攪拌該混合物，直至用TLC確定反應(yīng)完全。將反應(yīng)物冷卻至60-70℃，然后用2倍體積的水稀釋并同時(shí)攪拌。冷卻至室溫后，過(guò)濾混合物，用水洗滌，然后通過(guò)柱色譜或結(jié)晶法純制粗固體的經(jīng)取代的3，3-二苯基吲哚化合物124。6.7 合成經(jīng)取代的3，3-二苯基-3H-二氫吲哚參考圖2，如下合成經(jīng)取代的3，3-二苯基-3H-二氫吲哚化合物用硼氫化鈉或氰基硼氫化鈉在合適的溶劑中還原經(jīng)取代的3，3-二苯基吲哚化合物124，產(chǎn)生經(jīng)取代的3，3-二苯基-3H-二氫吲哚化合物126。6.8 合成經(jīng)取代的N-取代-3，3-二苯基二氫吲哚參考圖2，如下合成經(jīng)取代的N-取代-3，3-二苯基二氫吲哚化合物在乙腈中混合經(jīng)取代的3，3-二苯基二氫吲哚126(1當(dāng)量)和鹵代烷(1當(dāng)量)及碳酸鉀(3-4當(dāng)量)。在回流下攪拌混合物，直至用TLC確定反應(yīng)完全。添加水和乙酸乙酯，并用乙酸乙酯萃取混合物。蒸發(fā)經(jīng)合并的乙酸乙酯萃取物，形成粗的經(jīng)取代的N-取代-3，3-二苯基二氫吲哚化合物128，該化合物用柱色譜進(jìn)行純制。6.9 合成3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)如下合成3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)在50ml濃硫酸中攪拌三苯基丙酸(12g，0.04mol)1小時(shí)。在冰浴中冷卻反應(yīng)混合物，然后用50ml水稀釋。用乙酸乙酯萃取該混合物3次。合并乙酸乙酯萃取物，在硫酸鈉上干燥，然后真空除去溶劑，產(chǎn)生9.0g(78％產(chǎn)率)的3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)，其為白色固體，熔點(diǎn)為119-123℃。6.10 合成1-羥基-3，3-二苯基茚滿(化合物3)如下合成1-羥基-3，3-二苯基茚滿(化合物3)在0-5℃下將2g(0.007mol)3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)于20ml四氫呋喃中的溶液滴加至0.34g(0.009mol)氫化鋁鋰于10ml四氫呋喃內(nèi)的溶液中。將混合物加熱至回流，并回流3小時(shí)，然后冷卻至0-5℃，再緩慢加入30ml 1M鹽酸。用60ml乙酸乙酯萃取混合物三次。合并乙酸乙酯萃取物，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，然后在硫酸鈉上干燥。蒸發(fā)溶劑，得到0.9g(45％產(chǎn)率)的1-羥基-3，3-二苯基茚滿(化合物3)，其為白色晶體，熔點(diǎn)為133-135℃。6.11 合成1-N-肟-3，3-二苯基茚滿(化合物4)如下合成1-N-肟-3，3-二苯基茚滿(化合物4)混合3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)(2.0g，0.007mol)和2.4g(0.035mol)鹽酸羥胺及5.8g(0.07mol)乙酸鈉，然后溶解在30ml甲醇中。在室溫下攪拌該溶液16小時(shí)，然后添加100ml水。用100ml乙酸乙酯萃取混合物，有機(jī)層在硫酸鈉上干燥。蒸發(fā)溶劑，得到1.9g(90％產(chǎn)率)的1-N-肟-3，3-二苯基茚滿(化合物4)，其為白色固體，熔點(diǎn)為138-141℃。6.12 合成螺[3，3-二苯基-2，3-二氫(H)茚-1，3′-2′-氰基環(huán)氧乙烷](化合物5)和2-氰甲基-3，3-二苯基茚滿酮(化合物9)如下合成螺[3，3-二苯基-2，3-二氫(H)茚-1，3′-2′-氰基環(huán)氧乙烷](化合物5)和2-氰甲基-3，3-二苯基茚滿酮(化合物9)在40ml四氫呋喃中于室溫下攪拌5.0g(0.0176mol)的3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)和2.62g(0.0229mol)的氫化鉀。氣體形成停止后(約45分鐘)，添加1.5ml(0.0215mol)的溴代乙腈。攪拌黑紅色的混合物1小時(shí)，然后添加50ml水。用75ml乙酸乙酯萃取混合物3次。真空濃縮經(jīng)合并的有機(jī)萃取物，加裝在硅膠柱上，并用10％乙酸乙酯于己烷內(nèi)的溶液洗脫。收集三個(gè)餾分。蒸發(fā)溶劑后，第一個(gè)餾分產(chǎn)生未反應(yīng)的起始物(3.5g)。第二個(gè)餾分產(chǎn)生0.49g(9％產(chǎn)率)的螺[3，3-二苯基-2，3-二氫(H)茚-1，3′-2′-氰基環(huán)氧乙烷](化合物5)，其為白色固體。而第三個(gè)餾分產(chǎn)生1.05g(18％產(chǎn)率)的2-氰甲基-3，3-二苯基茚滿酮(化合物9)，其為黃色油狀物。6.13 合成2-(2′-丙烯基)-1-(2′-丙烯氧基)-3，3-二苯基茚滿(化合物6)如下合成2-(2′-丙烯基)-1-(2′-丙烯氧基)-3，3-二苯基茚滿(化合物6)在40ml二甲基甲酰胺中于室溫下攪拌2.0g(0.007mol)的3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)和0.28g(0.0084mol)的氫化鈉共1小時(shí)。然后在-50℃下將反應(yīng)混合物滴加至0.64ml(0.0078mol)的烯丙基溴中。將混合物加熱至回流，并回流1小時(shí)。冷卻至室溫后，加入50ml水。用乙酸乙酯萃取混合物，在硫酸鈉上干燥，然后真空濃縮。在硅膠柱上用10％二氯甲烷的己烷溶液洗脫，以30％的產(chǎn)率作為第一個(gè)餾分分離出2-(2′-丙烯基)-1-(2′-丙烯氧基)-3，3-二苯基茚滿(化合物6)。6.14 合成1-乙酰氧基-3，3-二苯基茚滿(化合物7)如下合成1-乙酰氧基-3，3-二苯基茚滿(化合物7)在10ml二氯甲烷中混合1-羥基-3，3-二苯基茚滿(化合物3)(0.06g，0.0021mol)和0.3ml(0.0022mol)的三乙基胺。將混合物加熱至回流，并同時(shí)攪拌，以溶解所有起始物。停止加熱，然后在溫?zé)岬娜芤褐刑砑?.16ml(0.0022mol)的乙酰氯。再回流混合物，并在回流下攪拌1小時(shí)。冷卻至室溫后，添加5ml水使反應(yīng)停止。用二氯甲烷萃取反應(yīng)混合物，而有機(jī)層在硫酸鈉上干燥。蒸發(fā)溶劑，得到0.008g(產(chǎn)率11％)的1-乙酰氧基-3，3-二苯基茚滿酮(化合物7)，其為奶白色固體，熔點(diǎn)為90℃。6.15 合成6-氯-3，3-二(4-氯苯基)茚滿酮(化合物8)如下合成6-氯-3，3-二(4-氯苯基)茚滿酮(化合物8)于室溫下在10ml濃硫酸中攪拌3，3，3-三(4-氯苯基)丙酸(1.5g，0.004mol)共1.5小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物傾倒至10ml冰水中，并用二氯甲烷萃取混合物。蒸發(fā)溶劑，得到0.8g(產(chǎn)率54％)6-氯-3，3-二(4-氯苯基)茚滿酮(化合物8)，其為奶白色固體，熔點(diǎn)為134℃。6.16 合成6-氯-2-氰甲基-3，3-二(4′-氯苯基)茚滿酮(化合物10)如下合成6-氯-2-氰甲基-3，3-二(4′-氯苯基)茚滿酮(化合物10)6-氯-3，3-二(4-氯苯基)茚滿酮(化合物8)(1.0g，0.0026mol)溶解在5ml四氫呋喃中，然后添加0.124g(0.0031mol)的氫化鈉。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物1.5小時(shí)，然后添加0.22ml(0.0215mol)的溴代乙腈。在過(guò)夜攪拌后，用水使反應(yīng)停止，然后用乙酸乙酯萃取。合并萃取物，并真空除去溶劑。殘留物在硅膠柱上用5％乙酸乙酯的己烷溶液作為洗脫劑進(jìn)行純制。從柱中流出的第一個(gè)餾分是經(jīng)回收的起始物(1.05g)。第二個(gè)餾分包含非所希望的副產(chǎn)物。第三個(gè)餾分包含所希望的產(chǎn)物。蒸發(fā)溶劑后，得到0.179g(16％產(chǎn)率)的6-氯-2-氰甲基-3，3-二(4′-氯苯基)茚滿酮(化合物10)，其為淡黃色固體。6.17 合成6-氯-3，3-二(4′-氯苯基)-2-N-肟-3，3-二苯基茚滿(化合物11)如下合成6-氯-3，3-二(4′-氯苯基)-2-N-肟-3，3-二苯基茚滿(化合物11)使6-氯-3，3-二(4′-氯苯基)茚滿酮(化合物8)(0.80g，0.0021mol)與0.72g(0.0103mol)的鹽酸羥胺和1.69g(0.0206mol)的乙酸鈉混合，然后溶解在25ml甲醇中。在室溫下攪拌該溶液16小時(shí)，然后添加水。用乙酸乙酯萃取混合物，并在硫酸鈉上干燥有機(jī)層。蒸發(fā)溶劑，制得0.85g(100％產(chǎn)率)的6-氯-3，3-二(4′-氯苯基)-2-N-肟-3，3-二苯基茚滿(化合物11)，其為白色固體，熔點(diǎn)為85℃。6.18 合成2-乙酰胺-3，3-二苯基茚滿酮(化合物12)如下合成2-乙酰胺-3，3-二苯基茚滿酮(化合物12)使2-氰甲基-3，3-二苯基茚滿酮(0.685g，0.0021mol)與10ml濃硫酸和10ml冰乙酸混合。在室溫下攪拌該溶液3小時(shí)，然后添加水。在冰浴中使混合物冷卻，然后用濃氨水中和至pH為7，再用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層在硫酸鎂上干燥。蒸發(fā)溶劑，制得0.77g的亮橙色固體。該固體在乙酸乙酯和己烷的混合物中重結(jié)晶，由此制得2-乙酰胺-3，3-二苯基茚滿酮(化合物12)0.527g(73％產(chǎn)率)，其為奶白色晶體，熔點(diǎn)為169-171℃。6.19 合成2-氰甲基-3，3-二苯基茚滿醇(化合物13)如下合成2-氰甲基-3，3-二苯基茚滿醇(化合物13)在室溫下將2-氰甲基-3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)(0.311g，0.001mol)溶解在5ml乙醇中。添加硼氫化鈉(0.437g，0.011mol)，并在室溫下攪拌混合物15分鐘。用乙酸乙酯稀釋混合物，并用2N鹽酸將pH調(diào)節(jié)為2。分離各層，并用乙酸乙酯萃取含水層2次。合并的有機(jī)層真空蒸發(fā)，并在硅膠柱上用20％乙酸乙酯的己烷溶液純制粗產(chǎn)物。第一個(gè)餾分是未反應(yīng)的起始物。第二個(gè)餾分在蒸發(fā)溶劑后制得0.16g(產(chǎn)率51％)的2-氰甲基-3，3-二苯基茚滿醇(化合物13)，其為白色固體，熔點(diǎn)為79-85℃。6.20 合成2-乙酰胺-3，3-二苯基茚滿醇(化合物14)如下合成2-乙酰胺-3，3-二苯基茚滿醇(化合物14)在室溫下將2-乙酰胺-3，3-二苯基茚滿酮(化合物12)(0.100g，0.0003mol)溶解在2ml乙醇和0.5ml甲醇中。添加硼氫化鈉(0.136g，0.0004mol)，并在室溫下攪拌混合物3小時(shí)。用2N鹽酸將混合物調(diào)節(jié)至pH為1。用乙酸乙酯萃取混合物，并在硫酸鎂上干燥經(jīng)合并的萃取物。蒸發(fā)溶劑，制得奶白色固體，該固體在乙酸乙酯/己烷的混合物中重結(jié)晶。過(guò)濾收集2-乙酰胺-3，3-二苯基茚滿醇(化合物14)(0.026g，產(chǎn)率25％)，其為白色固體，熔點(diǎn)為218-220℃。6.21 合成3，3-二苯基茚滿酮-2-甲基乙酸酯(化合物15)如下合成3，3-二苯基茚滿酮-2-甲基乙酸酯(化合物15)在室溫下將3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)(3.84g，0.0135mol)溶解在30ml四氫呋喃中。添加氫化鉀(1.85g，0.0162mol)，然后在室溫下攪拌混合物1小時(shí)。添加氯甲酸甲酯(1.25ml，0.0162mol)，并在室溫下攪拌混合物1小時(shí)。用水使反應(yīng)停止，然后用乙酸乙酯萃取。合并的萃取物在硫酸鎂上干燥。蒸發(fā)溶劑，形成暗棕色固體，該固體在硅膠柱上用5％乙酸乙酯的己烷溶液作為洗脫劑進(jìn)行純制。由柱中的第二個(gè)餾分收集產(chǎn)物。蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生略微潮濕的粉紅色固體，該固體在己烷中攪拌。過(guò)濾收集3，3-二苯基茚滿酮-2-甲基乙酸酯(化合物15)(2.06g，45％產(chǎn)率)，其為奶白色固體，熔點(diǎn)為140-142℃。6.22 合成3，3-二苯基-1-茚滿基2-萘基甲基醚(化合物16)如下合成3，3-二苯基-1-茚滿基2-萘基甲基醚(化合物16)將1-羥基-3，3-二苯基茚滿(化合物3)(0.25g，0.87mmol)溶解在10ml二甲基甲酰胺中，然后在攪拌下冷卻至0℃。添加酰胺鈉(0.042g，1.04mmol)，并在0℃下攪拌反應(yīng)物0.5小時(shí)，然后添加0.23g(1.04mmol)的2-溴甲基萘。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，并攪?5小時(shí)。在混合物中添加等體積的水，并用50ml的乙酸乙酯萃取2次。在硫酸鎂上干燥后，蒸發(fā)溶劑，所得固體在硅膠柱上用2％乙酸乙酯的己烷溶液作為洗脫劑進(jìn)行純制。收集的第二個(gè)餾分是所希望的產(chǎn)物。蒸發(fā)溶劑，制得0.300g(81％產(chǎn)率)的3，3-二苯基-1-茚滿基2-萘基甲基醚(化合物16)，其為奶白色粘性固體。6.23 合成3，3-二苯基-1-茚滿基α-(4-甲基甲苯甲酸酯)醚(化合物17)如下合成3，3-二苯基-1-茚滿基α-(4-甲基甲苯甲酸酯)醚(化合物17)在10ml二甲基甲酰胺中混合1-羥基-3，3-二苯基茚滿(化合物3)(0.505g，1.8mmol)和0.069g(2.9mmol)的酰胺鈉，然后在室溫下攪拌1.5小時(shí)，再添加0.667g(2.9mmol)的4-(溴甲基)苯甲酸甲酯。攪拌反應(yīng)混合物18小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾倒至50ml水中，并用25ml乙酸乙酯萃取4次。合并的萃取物用鹽水洗滌，在硫酸鈉上干燥，然后蒸發(fā)溶劑，制得一黃色油狀物。該油狀物通過(guò)真空蒸餾進(jìn)行純制，得到0.370g(47％產(chǎn)率)的3，3-二苯基-1-茚滿基α-(4-甲基甲苯甲酸酯)醚(化合物17)，其為黃色固體，熔點(diǎn)為50-52℃。6.24 合成3，3-二苯基-1-茚滿基α-(2-氯甲苯基)醚(化合物18)如下合成3，3-二苯基-1-茚滿基α-(2-氯甲苯基)醚(化合物18)在10ml二甲基甲酰胺中混合1-羥基-3，3-二苯基茚滿(化合物3)(0.503g，1.8mmol)和0.075g(3.1mmol)的酰胺鈉，然后在室溫下攪拌1.5小時(shí)，再添加0.40ml(3.2mmol)的2-氯芐基氯。攪拌反應(yīng)混合物21小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾倒至50ml水中，并用25ml乙酸乙酯萃取4次。合并的萃取物用鹽水洗滌，在硫酸鈉上干燥，然后蒸發(fā)溶劑，制得一黃色油狀物。該油狀物通過(guò)真空蒸餾進(jìn)行純制，得到0.520g(70％產(chǎn)率)的3，3-二苯基-1-茚滿基α-(2-氯甲苯基)醚(化合物18)，其為固體，熔點(diǎn)為27-29℃。6.25 合成3-(3′，3′-二苯基-2′-茚滿基-1′-酮)丙醇(化合物19)如下合成3-(3′，3′-二苯基-2′-茚滿基-1′-酮)丙醇(化合物19)將3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)(2g，0.007mol)溶解在10ml四氫呋喃中，在冰浴中冷卻，然后添加0.97g(0.0085mol)的氫化鉀。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物0.5小時(shí)，然后添加0.72ml(0.0077mol)的3-溴-1-丙醇。過(guò)夜攪拌后，用水使反應(yīng)停止，并用乙酸乙酯萃取。合并的萃取物在硫酸鎂上干燥，然后真空除去溶劑。殘留物在硅膠柱上用15％乙酸乙酯的己烷溶液作為洗脫劑進(jìn)行純制。由柱中流出的第一個(gè)餾分是回收的起始物(1.05g)。第二個(gè)餾分包含產(chǎn)物。蒸發(fā)溶劑后，制得0.84g(35％產(chǎn)率)的3-(3′，3′-二苯基-2′-茚滿基-1′-酮)丙醇(化合物19)，其為米黃色固體，熔點(diǎn)為98℃。6.26 合成2-(乙基-2′-(1，3-二氧雜環(huán)戊烷))-1-羥基-3，3-二苯基茚(化合物20)如下合成2-(乙基-2′-(1，3-二氧雜環(huán)戊烷))-1-羥基-3，3-二苯基茚(化合物20)在室溫下將3，3-二苯基茚滿酮(化合物2)(4.0g，0.0141mol)溶解在30ml四氫呋喃中。添加氫化鉀(2.4g，0.0175mmol)，然后在室溫下攪拌混合物0.5小時(shí)。添加2-(2-溴乙基)-1，3-二氧雜環(huán)戊烷(2.0ml，0.0170mol)，并繼續(xù)在室溫下攪拌混合物過(guò)夜。用水使反應(yīng)停止，然后用乙酸乙酯萃取混合物。合并的萃取物在硅膠柱上用8％乙酸乙酯的己烷溶液、然后用10％乙酸乙酯的己烷溶液作為洗脫劑進(jìn)行純制。在從柱中流出的第二個(gè)餾分中收集產(chǎn)物。蒸發(fā)溶劑，制得2-(乙基-2′-(1，3-二氧雜環(huán)戊烷))-1-羥基-3，3-二苯基茚(化合物20)(0.47g，產(chǎn)率9％)，其為白色固體，熔點(diǎn)為124-126℃。6.27 其他化合物可根據(jù)上述合成法的改進(jìn)或者通過(guò)本領(lǐng)域中已知的其他方法來(lái)合成本發(fā)明的其他化合物?；衔?可從Maybridge Chemical Company(分銷商Ryan Scientific，South Carolina)得到。7、實(shí)施例體外活性本實(shí)施例證實(shí)式(I)的幾個(gè)示例性化合物體外對(duì)紅細(xì)胞的Gardos通道(Gardos通道實(shí)驗(yàn))和/或有絲分裂原誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖(有絲分裂實(shí)驗(yàn))的抑制能力。這些實(shí)驗(yàn)通常適用于式(I)的其他化合物的體外活性。7.1 實(shí)驗(yàn)方案根據(jù)Brugnara等人，1993，J.Biol.Chem.268(12)8760-8768所述測(cè)定Gardos通道的抑制百分?jǐn)?shù)(10μM化合物)和IC50。如Benzaquen等人(1995，Nature Medicine 1534-540)所述用NIH 3T3鼠成纖細(xì)胞(ATCC No.CRL 1658)測(cè)定對(duì)有絲分裂原誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖的抑制百分?jǐn)?shù)和IC50。在細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中還可使用其他細(xì)胞系，如癌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和成纖細(xì)胞以及許多其他細(xì)胞。具體細(xì)胞系的選擇取決于所希望的應(yīng)用，而且這也在本領(lǐng)域普通技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)。7.2 結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1所示?？嗣惯虻臄?shù)據(jù)用于比較。所測(cè)試的大多數(shù)化合物在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中都具有明顯的活性。所有的測(cè)試化合物都在至少一個(gè)實(shí)驗(yàn)中顯示出明顯的活性。
表1各種化合物的藥理活性(在10μM時(shí)測(cè)定的％抑制)
8、實(shí)施例在癌細(xì)胞系中的活性本實(shí)施例證實(shí)式(I)的幾個(gè)示例性化合物對(duì)各種癌細(xì)胞系的抗增殖作用。該實(shí)驗(yàn)也適用于式(I)的其他化合物的抗增殖活性。8.1 細(xì)胞發(fā)育在此所述的抗增殖實(shí)驗(yàn)是使用標(biāo)準(zhǔn)的無(wú)菌程序和使用組織時(shí)的常規(guī)方法來(lái)進(jìn)行的。用包含2％或5％胎牛血清(Biowhittaker)的RPMI 1640培養(yǎng)基(Gibco)在37℃、5％CO2和95％濕度的條件下使細(xì)胞增殖。使用胰蛋白酶(Gibco)使細(xì)胞傳代。在添加測(cè)試化合物之前，收集細(xì)胞，計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量，并在96孔板中以10000細(xì)胞/孔接種在100μl包含5％胎牛血清(FCS)的RPMI培養(yǎng)基中，然后在37℃、5％CO2和95％濕度的條件下培養(yǎng)過(guò)夜。
在處理的那天，在100μl包含F(xiàn)CS的培養(yǎng)基中添加測(cè)試化合物原料液(10mM化合物/DMSO)，至最終濃度為10-0.125μM，并在37℃、5％CO2和95％濕度的條件下培養(yǎng)細(xì)胞2、3或5天。
培養(yǎng)后，用硫若丹明B(Sulforhodamine B)(SRB)實(shí)驗(yàn)(Skehan P等人，1990，J.Natl.Cancer Inst.821107-1112)測(cè)定細(xì)胞蛋白。通過(guò)曲線擬合測(cè)定發(fā)育抑制作用，其用測(cè)試化合物50％抑制細(xì)胞增殖時(shí)的濃度(IC50)來(lái)代表。
VP-16(一種標(biāo)準(zhǔn)抗癌藥物)的值用于進(jìn)行比較。
除MMRU細(xì)胞外，所有測(cè)試用的癌細(xì)胞系都得自于美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC，Rockville，MD)。ATCC保藏號(hào)如下HeLa(CCL-2)、CaSki(CRL-1550)、MDA-MB-231(HTB-26)、MCF-7(HTB-22)、A549(CCL-185)、HTB-174(HTB-174)、HEPG2(HB-8065)、DU-145(HTB-81)、SK-MEL-28(HTB-72)、HT-29(HTB-38)、HCT-15(CCL-225)、ACHN(CRL-1611)、U-118MG(HTB-15)、SK-OV-3(HTB-77)。
MMRU細(xì)胞(Stender等人，1993，J.Dermatology 20611-617)是由作者之一提供。8.2 結(jié)果細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果見下表2和3所示。
表2SRB實(shí)驗(yàn)結(jié)果(5％FCS，培養(yǎng)5天)
表3SRB結(jié)果
9、實(shí)施例制劑以下實(shí)施例提供示例性而非限制性的用于向哺乳動(dòng)物、特別是人患者給藥本發(fā)明化合物的制劑。任何在此所述的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或水合物都可按照以下實(shí)施例來(lái)配制。9.1 片劑制備如下組成并包含60mg活性成分的片劑。
由45目US篩網(wǎng)中篩選活性成分、淀粉和纖維素，并充分混合。使聚乙烯吡咯烷酮溶液與接著由14目US篩網(wǎng)中通過(guò)的上述粉末混合。在50-60℃下干燥顆粒，然后由18目US篩網(wǎng)中通過(guò)。由60目US篩網(wǎng)中篩選羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石，然后添加至上述顆粒中，在混合后用壓片機(jī)壓制，形成重量為150mg的片劑。
也可用所列的成分通過(guò)濕法制粒、然后壓制來(lái)制備片劑。9.2 明膠膠囊使用以下成分制備硬明膠膠囊。
混合上述成分，然后以460mg的量填入硬明膠膠囊中。9.3 氣霧劑溶液制備包含以下組成的氣霧劑溶液
使活性成分與乙醇混合，然后將混合物添加至一部分噴射劑22中，冷卻至-30℃，轉(zhuǎn)移至填充裝置中。將所需要的量填入不銹鋼容器中，然后用剩余的噴射劑稀釋。在該容器上安裝閥裝置。9.4 栓劑由以下成分制備分別包含225mg活性成分的栓劑
使活性成分由60目US篩網(wǎng)中通過(guò)，然后懸浮在已預(yù)先用最小熱量熔融的飽和脂肪酸甘油酯中。然后將該混合物傾倒至標(biāo)稱為2g的栓劑模具中，接著冷卻。9.5 混懸劑由以下成分制備每5ml劑量分別包含50mg藥物的混懸劑
使活性成分由45目US篩網(wǎng)中通過(guò)，然后與羧甲基纖維素鈉及糖漿混合，形成平滑的糊狀物。苯甲酸溶液、調(diào)味劑和一些著色劑用一些水稀釋，并在攪拌下加入。然后加入足量的水，以產(chǎn)生所需要的體積。
上述說(shuō)明應(yīng)足以使本領(lǐng)域技術(shù)人員實(shí)施本發(fā)明。在上述實(shí)施本發(fā)明的方式中對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的各種改進(jìn)也在所附權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。
所引用的所有文獻(xiàn)在此并入作為參考。
權(quán)利要求
1.一種具有以下結(jié)構(gòu)式的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或水合物 其中m是0、1、2、3、或4；各n獨(dú)立地是0、1、2、3、4、或5；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基或(C1-C6)炔基；R1不存在，或者是-OR、-SR、＝O、＝S、＝N-OR、-O-C(O)R、-S-C(O)R、-O-C(S)R、-S-C(S)R，或者與R2一起形成3-8元雜環(huán)烷基或經(jīng)取代的3-8元雜環(huán)烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR′、-SR′、-NR′2、-CN、-NO2、(C3-C8)環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)烷基、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、或-C(S)NR′2；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中-鹵素、-R′、-OR′、-SR′、-NR′2、-ONR′2、-SNR′2、-NO2、-CN、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(O)SR′、-C(S)OR′、-CS(S)R′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)NR′(OR′)、-C(S)NR′(OR′)、-C(O)NR′(SR′)、-C(S)NR′(SR′)、-CH(CN)2、-CH[C(O)R′]2、-CH[C(S)R′]2、-CH[C(O)OR′]2、-CH[C(S)OR′]2、-CH[C(O)SR′]2、和-CH[C(S)SR′]2；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基、(C5-C20)芳基、經(jīng)取代的(C5-C20)芳基、(C6-C26)烷芳基和經(jīng)取代的(C6-C26)烷芳基；雜環(huán)烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、和三鹵甲基；各R′獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基和(C1-C6)炔基；--代表單鍵或雙鍵；以及如果X是C而R1是＝O或-OH，則R5、R6或R7中的至少一個(gè)不是-H，或者Y存在或R4不是-H；以及如果X是N，--是雙鍵，而且R1、R2、R3和Y都不存在，則R4不是-NH2。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中，所述化合物是選自于以下組中的化合物化合物4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20。
3.一種藥物組合物，其包括一種化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或水合物以及藥物學(xué)上可接受的賦形劑、載體或稀釋劑，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)式 其中m是0、1、2、3、或4；各n獨(dú)立地是0、1、2、3、4、或5；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基或(C1-C6)炔基；R1不存在，或者是-OR、-SR、＝O、＝S、＝N-OR、-O-C(O)R、-S-C(O)R、-O-C(S)R、-S-C(S)R，或者與R2一起形成3-8元雜環(huán)烷基或經(jīng)取代的3-8元雜環(huán)烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR′、-SR′、-NR′2、-CN、-NO2、(C3-C8)環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)烷基、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、或-C(S)NR′2；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中-鹵素、-R′、-OR′、-SR′、-NR′2、-ONR′2、-SNR′2、-NO2、-CN、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(O)SR′、-C(S)OR′、-CS(S)R′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)NR′(OR′)、-C(S)NR′(OR′)、-C(O)NR′(SR′)、-C(S)NR′(SR′)、-CH(CN)2、-CH[C(O)R′]2、-CH[C(S)R′]2、-CH[C(O)OR′]2、-CH[C(S)OR′]2、-CH[C(O)SR′]2、和-CH[C(S)SR′]2；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基、(C5-C20)芳基、經(jīng)取代的(C5-C20)芳基、(C6-C26)烷芳基和經(jīng)取代的(C6-C26)烷芳基；雜環(huán)烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、和三鹵甲基；各R′獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基和(C1-C6)炔基；以及--代表單鍵或雙鍵。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其中，在結(jié)構(gòu)式(I)的化合物中m是0或1；各n獨(dú)立地是0或1；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基或(C1-C3)炔基；R1不存在，或者是-H、-OR、＝O、-NR2、＝N-OR、-O-C(O)R，或者與R2一起形成3-5元環(huán)氧烷基或經(jīng)取代的3-5元環(huán)氧烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR、-NR2、-CN、-C(O)OR、-C(O)NR2、或5-6元二氧環(huán)烷基；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中-R′、-F、-Cl或-Br；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基、(C1-C3)炔基、(C5-C10)芳基、經(jīng)取代的(C5-C10)芳基、(C6-C13)烷芳基、經(jīng)取代的(C6-C13)烷芳基；環(huán)氧烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-F、-Cl、-Br、-CN、-NO2、-NR′2、-C(O)R′、-C(O)OR′、和三鹵甲基；R′是-H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基和(C1-C3)炔基；以及--代表單鍵或雙鍵。
5.如權(quán)利要求4所述的組合物，其中，所述化合物選自于以下組中化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20。
6.一種抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖的方法，該方法包括使哺乳動(dòng)物細(xì)胞原位與有效量的具有以下結(jié)構(gòu)式的化合物或其藥物學(xué)上可接受的鹽或水合物相接觸的步驟， 其中m是0、1、2、3、或4；各n獨(dú)立地是0、1、2、3、4、或5；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基或(C1-C6)炔基；R1不存在，或者是-OR、-SR、＝O、＝S、＝N-OR、-O-C(O)R、-S-C(O)R、-O-C(S)R、-S-C(S)R，或者與R2一起形成3-8元雜環(huán)烷基或經(jīng)取代的3-8元雜環(huán)烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR′、-SR′、-NR′2、-CN、-NO2、(C3-C8)環(huán)烷基、3-8元雜環(huán)烷基、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、或-C(S)NR′2；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中-鹵素、-R′、-OR′、-SR′、-NR′2、-ONR′2、-SNR′2、-NO2、-CN、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(O)SR′、-C(S)OR′、-CS(S)R′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)NR′(OR′)、-C(S)NR′(OR′)、-C(O)NR′(SR′)、-C(S)NR′(SR′)、-CH(CN)2、-CH[C(O)R′]2、-CH[C(S)R′]2、-CH[C(O)OR′]2、-CH[C(S)OR′]2、-CH[C(O)SR′]2、和-CH[C(S)SR′]2；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基、(C1-C6)炔基、(C5-C20)芳基、經(jīng)取代的(C5-C20)芳基、(C6-C26)烷芳基和經(jīng)取代的(C6-C26)烷芳基；雜環(huán)烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中鹵素、-C(O)R′、-C(S)R′、-C(O)OR′、-C(S)OR′、-C(O)SR′、-C(S)SR′、-C(O)NR′2、-C(S)NR′2、和三鹵甲基；各R′獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烯基和(C1-C6)炔基；以及--代表單鍵或雙鍵。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中，在結(jié)構(gòu)式(I)的化合物中m是0或1；各n獨(dú)立地是0或1；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基或(C1-C3)炔基；R1不存在，或者是-H、-OR、＝O、-NR2、＝N-OR、-O-C(O)R，或者與R2一起形成3-5元環(huán)氧烷基或經(jīng)取代的3-5元環(huán)氧烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR、-NR2、-CN、-C(O)OR、-C(O)NR2、或5-6元二氧環(huán)烷基；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中-R′、-F、-Cl或-Br；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基、(C1-C3)炔基、(C5-C10)芳基、經(jīng)取代的(C5-C10)芳基、(C6-C13)烷芳基、經(jīng)取代的(C6-C13)烷芳基；環(huán)氧烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-F、-Cl、-Br、-CN、-NO2、-NR′2、-C(O)R′、-C(O)OR′、和三鹵甲基；R′是-H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基和(C1-C3)炔基；以及--代表單鍵或雙鍵。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述化合物選自于以下組中化合物1、2、3、4、6、7、8、10、11、15、16、17、19和20。
9.如權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述哺乳動(dòng)物細(xì)胞是內(nèi)皮細(xì)胞、纖維變性細(xì)胞、或血管平滑肌細(xì)胞。
10.一種治療或預(yù)防以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病的方法，所述方法包括向需要此等治療的患者給藥有效量的如權(quán)利要求3所述的藥物組合物的步驟。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中，在結(jié)構(gòu)式(I)的化合物中m是0或1；各n獨(dú)立地是0或1；X是C或N；Y不存在，或者是(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基或(C1-C3)炔基；R1不存在，或者是-H、-OR、＝O、-NR2、＝N-OR、-O-C(O)R，或者與R2一起形成3-5元環(huán)氧烷基或經(jīng)取代的3-5元環(huán)氧烷基；R2不存在或者是-H；R3不存在或者是-H；R4是-H、-OR、-NR2、-CN、-C(O)OR、-C(O)NR2、或5-6元二氧環(huán)烷基；各R5、R6和R7獨(dú)立地選自于以下組中-R′、-F、-Cl或-Br；各R獨(dú)立地選自于以下組中-H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基、(C1-C3)炔基、(C5-C10)芳基、經(jīng)取代的(C5-C10)芳基、(C6-C13)烷芳基、經(jīng)取代的(C6-G13)烷芳基；環(huán)氧烷基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-CN、-NO2、-NR′2、-OR′、和三鹵甲基；芳基和烷芳基取代基分別獨(dú)立地選自于以下組中-F、-Cl、-Br、-CN、-NO2、-NR′2、-C(O)R′、-C(O)OR′、和三鹵甲基；R′是-H、(C1-C3)烷基、(C1-C3)烯基和(C1-C3)炔基；以及--代表單鍵或雙鍵。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中，所述化合物選自于以下組中化合物1、2、3、4、6、7、8、10、11、15、16、17、19和20。
13.如權(quán)利要求10所述的方法，其中，所述以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病是癌癥、血管增殖性疾病、纖維變性疾病或動(dòng)脈粥樣硬化癥。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其中，是經(jīng)口、非胃腸道、或靜脈內(nèi)給藥所述化合物。
15.如權(quán)利要求10所述的方法，其中，所述以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病是皮膚病或卡波濟(jì)肉瘤，而所述給藥是透皮給藥。
16.如權(quán)利要求15所述的方法，其中，所述皮膚病選自于以下組中瘢痕瘤、肥大性疤痕、皮脂溢性皮炎、乳頭瘤病毒感染、濕疹和光化性角化病。
全文摘要
本發(fā)明提供經(jīng)取代的3,3－二苯基茚滿酮、茚滿和吲哚化合物以及它們的類似物,這些物質(zhì)對(duì)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖是特異性的、強(qiáng)效且安全的抑制劑。這些化合物可用于原位抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖,作為治療或預(yù)防以異常細(xì)胞增殖為特征的疾病入癌癥的治療方法。
文檔編號(hào)A61K31/22GK1306422SQ98813176
公開日2001年8月1日 申請(qǐng)日期1998年11月20日 優(yōu)先權(quán)日1997年11月20日
發(fā)明者卡爾羅·布魯尼亞拉, 何塞·阿爾佩林, 魯?shù)婪颉べM(fèi)拉基格, 小埃米爾·M·貝洛特, 理查德·約翰·隆巴迪, 約翰·J·克利福德, 高英鐸, 里姆·M·海德爾, 尤金·W·凱萊赫, 阿德爾·M·穆薩, 葉什·P·薩赫杰娃, 孫明華, 希瑟·N·塔夫特 申請(qǐng)人:哈佛學(xué)院校長(zhǎng)及員工, 兒童醫(yī)療中心公司, 紐凱姆制藥公司