專(zhuān)利名稱(chēng)：棘白菌素衍生物、其制備方法及其作為抗真菌劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的棘白菌素衍生物、其制備方法及其作為抗真菌劑的用途。
本發(fā)明的主題為任何可能的異構(gòu)體形式的式(Ⅰ)化合物以及其混合物 其中R1和R2彼此相同或不同，代表氫原子、羥基、含有多至8個(gè)碳原子的線(xiàn)性、支鏈或環(huán)狀的烷基，任選被氧原子間斷并任選被鹵原子、羥基、 基團(tuán)取代，a和b彼此相同或不同，代表氫原子或含有多至8個(gè)碳原子的烷基，a和b任選與氮原子形成任選含有一個(gè)或幾個(gè)另外的雜原子的雜環(huán)，或者R1與帶有基團(tuán) 的橋環(huán)碳原子形成雙鍵，或者R2代表XRa基團(tuán)，X代表氧原子或者NH或者含有多至8個(gè)碳原子的N-烷基，Ra代表氫原子；線(xiàn)性、支鏈或環(huán)狀的含有多至8個(gè)碳原子的烷基，該烷基任選被一個(gè)或幾個(gè)鹵原子取代、任選被一個(gè)或幾個(gè)羥基、羧基、CO2alc基團(tuán)取代、任選被 取代，a’和b’代表氫原子、含有多至8個(gè)碳原子的烷基，a’和b’能形成任選含有一個(gè)或幾個(gè)另外的雜原子的雜環(huán)，和/或任選被含有一個(gè)或幾個(gè)雜原子的雜環(huán)取代；或者R2代表基團(tuán) 其中，d、e、f和g代表氫原子或含有多至8個(gè)碳原子的烷基，此外，f和g可以代表含有多至8個(gè)碳原子的?；?，e和f也可以形成任選含有一個(gè)或幾個(gè)雜原子的環(huán)，R3代表氫原子、甲基或羥基，R4代表氫原子或羥基，R代表含有多至30個(gè)碳原子的線(xiàn)性或支鏈或環(huán)狀鏈，任選含有一個(gè)或幾個(gè)雜原子，一個(gè)或幾個(gè)雜環(huán)，或含有多至30個(gè)碳原子的線(xiàn)性、支鏈或環(huán)狀的酰基，任選含有一個(gè)或幾個(gè)雜原子和/或一個(gè)或幾個(gè)雜環(huán)，T代表氫原子、甲基、CH2CONH2、CH2C≡N基團(tuán)、(CH2)2NH2或(CH2)2Nalc+X-基團(tuán)，X為鹵原子，alc代表含有多至8個(gè)碳原子的烷基，Y代表氫原子、羥基或鹵原子或OSO3H基團(tuán)或該基團(tuán)的鹽之一，W代表氫原子或羥基，Z代表氫原子或甲基，以及式(Ⅰ)產(chǎn)物的酸的加成鹽。
在與所述酸的加成鹽中，可以提到的有與下列無(wú)機(jī)酸形成的鹽氫氯酸、氫溴酸、硫酸或磷酸，或者與下列有機(jī)酸形成的鹽像甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、馬來(lái)酸、富馬酸、琥珀酸、酒石酸、檸檬酸、草酸、乙醛酸、天冬氨酸，烷基磺酸例如甲磺酸或乙磺酸，芳基磺酸像苯磺酸鹽或?qū)妆交撬帷?br> 在取代基的定義中，-烷基、鏈烯基或炔基優(yōu)選為甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、癸基或十二烷基、乙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基，-鹵素優(yōu)選為氟或氯或溴，-芳基優(yōu)選為苯基，-雜環(huán)基優(yōu)選為吡咯基、吡咯烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哌啶基、哌嗪基、奎寧環(huán)基、唑基、異唑基、嗎啉基、吲哚基、咪唑基(imidozoyl)、苯并咪唑基、三唑基、噻唑基、吖丁啶基、吖丙啶基。
作為所述SO3H基團(tuán)的鹽可以特別提及的是鈉鹽、鉀鹽乃至胺的鹽。
可以特別提到的作為本發(fā)明的優(yōu)選化合物有-式(Ⅰ)化合物，其中T代表氫原子，-式(Ⅰ)化合物，其中Y代表氫原子，-式(Ⅰ)化合物，其中W代表氫原子，-式(Ⅰ)化合物，其中Z代表甲基，-式(Ⅰ)化合物，其中R3代表甲基，-式(Ⅰ)化合物，其中R4代表羥基，-式(Ⅰ)化合物，其中R代表基團(tuán) 和尤其是其中R代表以下鏈的化合物 或者其中R代表以下鏈的化合物 -式(Ⅰ)化合物，其中R1與帶有NR1R2基團(tuán)的橋環(huán)碳原子形成雙鍵，特別是其中R2代表下式基團(tuán)的那些化合物O(CH2)nNY’2其中，n代表1-8的整數(shù)(尤其是那些n代表2的化合物)，Y’代表氫原子或含有多至8個(gè)碳原子的烷基，以及其中R2代表下式基團(tuán)的那些化合物 本發(fā)明同樣具有作為其主題的其中R2代表以下基團(tuán)的式(Ⅰ)化合物(CH2)pNY”其中，Y”代表氫原子或含有多至8個(gè)碳原予的烷基，p代表1-8的整數(shù)，特別是其中p代表2的化合物。
本發(fā)明尤其具有作為其主題的其中R1代表氫原子的化合物。
在本發(fā)明優(yōu)選的化合物中，可以提到實(shí)施例8、9、11、13和14的產(chǎn)物。
式(Ⅰ)化合物顯示顯著的抗真菌性質(zhì)；它們對(duì)于白假絲酵母(Candida albicans)和其它假絲酵母菌如Candida glabrata、克魯斯假絲酵母(krusei)、熱帶假絲酵母(tropicalis)、偽熱帶假絲酵母(pseudotropicalis)、近平滑假絲酵母(parapsilosis)和煙曲霉(Aspergillusfunigatus)、黃曲霉(Aspergillus flavus)、新型隱球酵母(Cryptococcusneoformans)顯示明顯的活性。
式(Ⅰ)化合物可以用作人或動(dòng)物藥物以顯著對(duì)抗消化、泌尿、陰道或皮下念珠菌病，隱球菌病如神經(jīng)腦膜、肺或皮下隱球菌病，支氣管肺和肺曲霉病以及免疫減弱的侵害性曲霉病。
本發(fā)明的化合物可以同樣用于預(yù)防人類(lèi)帶有先天性或獲得性免疫減弱的真菌病。
本發(fā)明化合物不限于藥用，它們同樣可以用作除藥物外的其它領(lǐng)域中的抗真菌劑。
從而，本發(fā)明具有作為其主題的抗真菌化合物，式(Ⅰ)化合物以及它們與酸的加成鹽。
本發(fā)明同樣具有作為其主題的作為藥物的式(Ⅰ)化合物。
本發(fā)明尤其具有作為其主題的含有至少一種式(Ⅰ)化合物或一種其與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽作為活性成分的藥用組合物。
這些化合物可以通過(guò)口、直腸、胃腸外途徑或通過(guò)局部施加到皮膚和粘膜上的局部途徑給予，然而優(yōu)選的途徑是口服。
它們可以是固體或液體，并以通常用于人類(lèi)藥物中的藥用形式提供，例如像普通片劑或糖衣片、膠囊、顆粒劑、栓劑、注射劑、膏劑、霜?jiǎng)?、凝膠劑；它們可以按照通用方法制備。可以將所述活性成分摻入到通常用于這些藥用組合物中的賦形劑例如滑石粉、阿拉伯膠、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、可可脂、含水或非水介質(zhì)、動(dòng)物或植物來(lái)源的脂肪類(lèi)化合物、石蠟衍生物、二元醇、各種潤(rùn)濕劑、分散劑或乳化劑、防腐劑。
這些組合物同樣可以以臨用時(shí)溶于合適的溶媒(例如無(wú)熱原無(wú)菌水)中的粉末形式提供。
根據(jù)所治療的疾病、有關(guān)的患者、給藥途徑和所考慮的產(chǎn)品，可以改變給藥量。例如成人每日的口服劑量為50-300mg實(shí)施例8、9、11、13和14的產(chǎn)物。
本發(fā)明同樣具有作為其主題的制備式(Ⅰ)化合物的方法，其特征在于使式(Ⅱ)化合物經(jīng)歷下列物質(zhì)的作用，式(Ⅱ)如下 其中R、R3、R4、T、W、Y和Z保留其前述的意義，經(jīng)歷胺或胺的衍生物作用可能導(dǎo)入基團(tuán) 其中，R1和R2保留其前述的意義，如果需要可經(jīng)歷還原劑的作用和/或所述胺的官能化劑，和/或酸以便形成所得產(chǎn)物的鹽，和/或所得不同異構(gòu)體的分離劑，從而得到目標(biāo)式(Ⅰ)化合物 其中R1、R2、T、W、Y、R和Z保留其在所有可能的異構(gòu)體以及其混合物和/或與所述酸的鹽形式中的前述的意義。
用作本發(fā)明方法的初始化合物的式(Ⅱ)化合物為新的化合物，其本身為本發(fā)明的主題，在實(shí)驗(yàn)部分給出的其制備方法以下用流程圖表示 可以使用ISi-(CH3)3或任何其它Lewis酸。
制備式(Ⅱ)化合物的一個(gè)詳細(xì)實(shí)例在實(shí)驗(yàn)部分給出，本發(fā)明尤其具有作為其主題的新的化學(xué)產(chǎn)物1-[4-氧代-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸-棘白菌素B。
相應(yīng)于制備1的初始產(chǎn)物的產(chǎn)物(Ⅳ)為歐洲專(zhuān)利438813中所述和提出權(quán)利要求的已知產(chǎn)物。
下列實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明，而不對(duì)其加以限制。
本發(fā)明同樣具有作為其主題的制備方法，其特征在于使式(Ⅲ)化合物 其中各種取代基保留其前述意義，經(jīng)歷能用NHR代替NH2的試劑的作用，R保留其前述意義，得到式(Ⅳ)化合物 其中各種取代基保留前述意義，并受到碘化三甲基甲硅烷的作用，得到式(Ⅱ)化合物。
用作初始產(chǎn)物的式(Ⅲ)化合物為新的產(chǎn)物，它們本身是本發(fā)明的主題。制備式(Ⅲ)化合物的實(shí)例在以后的實(shí)驗(yàn)部分給出。
本發(fā)明尤其具有作為其主題的脫氧牟倫多菌素環(huán)，式(Ⅲ)化合物，其制備方法在以下實(shí)驗(yàn)部分中給出。
除牟倫多菌素和脫氧牟倫多菌素外的以上所述的式(Ⅳ)化合物為新產(chǎn)物，它們本身為本發(fā)明的主題。
本發(fā)明尤其具有作為其主題的式(Ⅳ)化合物，其制備方法在此后的實(shí)驗(yàn)部分給出。
以下這些實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明，而不對(duì)其進(jìn)行限制。
制備11-[N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-4-氧代-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B。
在磁力攪拌下、在氮?dú)猸h(huán)境中，將1g的1-[(4R，5R)-4，5-二羥基-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸-棘白菌素B導(dǎo)入25ml乙腈中。加入455μl碘化三甲基甲硅烷。于55℃將其加熱40分鐘。用3％的硫代硫酸鈉溶液將其水解。攪拌10分鐘后，將其減壓干燥，并通過(guò)硅膠層析純化。得到62％的目標(biāo)產(chǎn)物。
CCMrf=0.25(洗脫劑二氯甲烷-甲醇-水86-13-1)。
實(shí)施例11-[4-氨基-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(異構(gòu)體B)的三氟乙酸鹽。
在4的活化siliporite存在下，將50mg制備1的產(chǎn)物導(dǎo)入到2.5ml甲醇中。于20℃下，加入158mg乙酸銨。于50℃加熱得到的溶液，加入5.5mgNaBH3CN。將其攪拌3小時(shí)15分。加入1ml脫鹽水并將該溶液濃縮至干。得到166mg產(chǎn)物，將其經(jīng)HPLC(C18)純化，經(jīng)乙腈-水-三氟乙酸(50-50-0.02)洗脫。得到17mg目標(biāo)產(chǎn)物。MH+=975。
實(shí)施例21-[4-[[2-二甲基氨基乙基-氨基-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(異構(gòu)體A和B)的三氟乙酸鹽。
于20℃下，在4的siliporite存在下，將80mg制備1的產(chǎn)物導(dǎo)入到含有1ml甲醇、160μl2-二甲基-氨基乙胺、8ml的1M鹽酸的甲醇溶液的溶液中。加入35mg氰基硼氫化鈉，于20℃攪拌20小時(shí)。將其過(guò)濾，在甲醇中洗滌并濃縮至干。得到325mg產(chǎn)物，將其經(jīng)HPLC(C18)純化，經(jīng)乙腈-水-三氟乙酸(45-55-0.02)、然后乙腈-水-三氟乙酸(42-58-0.02)洗脫。得到8.1mg目標(biāo)異構(gòu)體A產(chǎn)物和9.4mg異構(gòu)體B目標(biāo)產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=1046MNa+=1068實(shí)施例31-[4-[(3-氨基丙基)氨基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(A和B異構(gòu)體)的三氟乙酸鹽。
于0℃下，將30ml的1M的鹽酸的甲醇溶液加入到含有200mg的制備1的產(chǎn)物、2ml的甲醇和300μl的二氨基丙烷的溶液中。于0℃下將其攪拌15分鐘，加入84mg 95％的氰基硼氫化鈉。于室溫下將其攪拌6小時(shí)，減壓干燥。將所得的殘留物在乙腈中制成糊狀物、脫水并減壓干燥。得到312mg產(chǎn)物，將其通過(guò)HPLC(C18)純化，經(jīng)乙腈-水-三氟乙酸(45-55-002)洗脫，得到15mg異構(gòu)體A和10mg異構(gòu)體B。質(zhì)譜MH+=1032。
實(shí)施例4(Z+E)1-[4-[(4,5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B的三氟乙酸鹽。
將350mg制備1的產(chǎn)物、12ml甲醇和130mg的2-肼基2-咪唑啉氫溴酸鹽于回流、攪拌下保持2小時(shí)。蒸發(fā)至干后，得到510mg產(chǎn)物，將其經(jīng)硅膠層析純化，用混合的二氯甲烷-甲醇-水(86-13-1)洗脫，然后經(jīng)半制備HPLC(C18)純化，經(jīng)混合的乙腈-水-三氟乙酸(55-45-0.02)洗脫。得到133mg目標(biāo)產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=1056。MNa+=1078。
實(shí)施例5(Z)1-[4-[(2-羥基乙氧基)亞氨基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B和相應(yīng)的E異構(gòu)體。
將36mg的O-(2-羥基乙基)羥胺、5ml乙醇、12μl吡啶、4μl純的乙酸和150mg制備1的產(chǎn)物的混合物于回流下保持4小時(shí)。通過(guò)硅膠層析純化獲得的205mg產(chǎn)物，用二氯甲烷-甲醇-水(86-13-1)洗脫。分離到兩種rf分別為0.2和0.25的產(chǎn)物(異構(gòu)體Z和異構(gòu)體E)。質(zhì)譜MH+=1033。MNa+=1055。
實(shí)施例6(E)1-[4-(羥基亞氨基)-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B和相應(yīng)的Z異構(gòu)體。
將含200mg制備1的產(chǎn)物、8ml乙醇、36mg羥胺鹽酸鹽的混合物置于回流下1小時(shí)，同時(shí)攪拌。將其干燥，通過(guò)HPLC(C18)純化，用乙腈-水(60-40)洗脫。得到72mgZ異構(gòu)體和60mgE異構(gòu)體。質(zhì)譜MH+=989。MNa+=1011。
實(shí)施例71-[4-(羥基氨基)-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(異構(gòu)體A和異構(gòu)體B)的三氟乙酸鹽。
將70mg在前述實(shí)施例中獲得的E+Z肟的混合物、1ml三氟乙酸、12mg為95％的氰基硼氫化鈉的混合物攪拌3小時(shí)。將其減壓干燥。通過(guò)HPLC(C18)純化，得到目標(biāo)產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=991。MNa+=1013。
實(shí)施例8(Z)1-[(S)-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)4-[[(3-哌啶基)氧基]亞氨基]-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B的鹽酸鹽。
階段A將146mg制備1的產(chǎn)物和60μl乙酸加入含有45mg苯基甲基的R-3-(氨基氧基)-1-哌啶羧酸酯和2ml甲醇的溶液中。于室溫下將其攪拌2小時(shí)。將其濃縮，通過(guò)硅膠層析純化，用98-2二氯甲烷-甲醇混合液洗脫。得到目標(biāo)產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=1206。MNa+=1228。階段B將含有61mg在階段A中制備的產(chǎn)物、20mg披鈀炭和1ml乙酸的混合物置于氫氣環(huán)境下，并劇烈攪拌5小時(shí)。將其過(guò)濾并濃縮。得到65％的目標(biāo)產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=1072。
實(shí)施例91-[4-[(2-氨基乙基)氨基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(異構(gòu)體A和異構(gòu)體B)的三氟乙酸鹽。
在375μl的乙二胺存在下，向300mg制備1的產(chǎn)物的6ml甲醇溶液中加入63ml的1M鹽酸的甲醇溶液。攪拌15分鐘后，加入氰基硼氫化鈉(NaBH3CN)。攪拌該反應(yīng)介質(zhì)5小時(shí)。過(guò)濾并干燥，經(jīng)過(guò)HPLC(C18)純化產(chǎn)物，用乙腈-水-三氟乙酸(40-60-0.02)的混合物洗脫。從而得到目標(biāo)產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=1018MNa+=1040實(shí)施例10(E)1-[4-[(2-溴代乙氧基)亞氨基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B和相應(yīng)的Z異構(gòu)體。
將402mg溴代-2-乙氧基胺氫溴酸鹽加入含有710mg制備1的產(chǎn)物和28ml無(wú)水乙醇的溶液中。使所述混合物回流55分鐘。將其減壓濃縮。通過(guò)硅膠快速層析純化所得的產(chǎn)物，用(9-1)二氯甲烷-甲醇的混合物洗脫。得到目標(biāo)產(chǎn)物異構(gòu)體ARf=0.54，異構(gòu)體BRf=0.47。質(zhì)譜MH+=1095MNa+=1117實(shí)施例11(±)1-[4-[(氨基亞氨基甲基)亞肼基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B的三氟乙酸鹽。
將162mg氨基胍鹽酸鹽加入到含有260mg制備1的產(chǎn)物和10ml正丁醇的溶液中。使反應(yīng)介質(zhì)回流2小時(shí)30分鐘。將其減壓濃縮。將所得產(chǎn)物經(jīng)半制備HPLC純化。得到225mg為50/50的異構(gòu)體的混合物的產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=1030MNa+=1052實(shí)施例12(Z)1-[4-[[2(二甲氨基)乙氧基亞氨基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B和相應(yīng)的E異構(gòu)體。
將80.5mg實(shí)施例10的產(chǎn)物導(dǎo)入32ml二甲胺的乙醇溶液中。使反應(yīng)介質(zhì)回流45分鐘。將其濃縮。通過(guò)HPLC(C18)(乙腈-水-三氟乙酸60-40-0.02)純化所得的產(chǎn)物。從而得到目標(biāo)產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=1060實(shí)施例13(E)1-[4-[(2-氨基乙氧基)亞氨基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B和相應(yīng)的Z異構(gòu)體。
將50mg實(shí)施例10產(chǎn)物導(dǎo)入氨中。在壓力下將其攪拌16小時(shí)，同時(shí)使其達(dá)到室溫。再次將反應(yīng)介質(zhì)置于(45-55)的乙腈-水混合物中，通過(guò)HPLC(C18)純化。得到目標(biāo)產(chǎn)物。質(zhì)譜MH+=1032。
制備2脫氧牟倫多菌素“環(huán)”將2g脫氧牟倫多菌素溶于20ml二甲亞砜中。將該溶液傾入含有120g FH2264 Actinoplanes utahensis的懸浮液(在870ml磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀(pH 6.8)的緩沖液中)中。于30℃下，將該反應(yīng)混合物攪拌70小時(shí)。過(guò)濾。用磷酸鹽緩沖液(pH6.8)洗滌菌絲體。合并洗液和濾液。所得產(chǎn)物經(jīng)DIAION HP 20樹(shù)脂層析，得到產(chǎn)物，將其直接用于以下。
實(shí)施例141-[4-[(2-氨基乙基)氨基]-N2-[[4’-(辛基氧基)[1，1’-聯(lián)苯]-4-基]羰基]-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(異構(gòu)體A)的三氟乙酸鹽。
階段A1-[(4R，5R)-4，5-二羥基-N2-[[4’-(辛基氧基)[1，1’-聯(lián)苯]-4-基]羰基]-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B1-所述酯的制備將632g的2，3，4，5，6五氟苯酚的695mg N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺液加入到1g的4’-辛基氧基-[1，1’-聯(lián)苯]4-羧酸的22ml四氫呋喃溶液中，于室溫下攪拌22小時(shí)，過(guò)濾，減壓除去溶劑，將殘留物溶于乙醚中，于約35℃下攪拌，過(guò)濾，蒸發(fā)溶劑，將其干燥，得到1.46g預(yù)期的產(chǎn)物，可直接使用。
2-偶合將677mg在制備2中得到的脫氧牟倫多菌素<環(huán)>導(dǎo)入到16ml二甲基甲酰胺中。攪拌所得到的溶液5分鐘，加入793mg以上得到的五氟苯基4’-(辛基氧基)-[1，1’-聯(lián)苯-4-羧酸酯。
將所述反應(yīng)混合物在攪拌和氮?dú)庀卤３?4小時(shí)。將其過(guò)濾并濃縮。殘留物置于乙醚中，研磨，攪拌25分鐘，脫水，用乙醚洗滌，經(jīng)硅膠層析，用(86/13／1)，然后(80/20／1)二氯甲烷/甲醇/水的混合物洗脫。從而得到目標(biāo)產(chǎn)物。收率73％。
階段B1-[N2-[[4’-(辛基氧基)-[1，1’-聯(lián)苯]-4-基]羰基]-4-氧代-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B將311μl碘化三甲基甲硅烷加入到含有809mg階段A的產(chǎn)物和19ml乙腈的懸浮液中。于60℃、氮?dú)庀聦⒃摲磻?yīng)混合物攪拌15分鐘。將該混合物傾入硫代硫酸鈉的飽和溶液中。蒸發(fā)，所得到的殘留物經(jīng)硅膠層析，用86/13/1的二氯甲烷/甲醇/水的混合物洗脫。得到目標(biāo)產(chǎn)物。收率55％。
階段C1-[4-[(2-氨基乙基)氨基]-N2-[[4’-(辛基氧基)-[1，1’-聯(lián)苯]-4-基]羰基]-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(異構(gòu)體A)的三氟乙酸鹽將560μl乙酸加入到含有900mg前一階段產(chǎn)物、16ml甲醇和250μl乙二胺的溶液中。將其攪拌15分鐘，加入64mg氰基硼氫化鈉。將其攪拌18小時(shí)，過(guò)濾并濃縮。將殘留物置于水介質(zhì)中，研磨，脫水并經(jīng)制備性HPLC純化，用乙腈/水/三氟乙酸(55/45/0．2)洗脫。得到目標(biāo)產(chǎn)物。收率26％。
NMR譜(CDCl3)9.07(m寬的)1H；8.48(d1，J=8)1H；8.00(d1，J=8)2H；7.96(d1，J=8.5)2H；7.71(d1，J=8.5)2H；7.64(d1，J=8.5)2H；7.60(d1，J=9)1H；7.37 (d1，J=9.5)1H；7.02(d1，J=8.5)2H；6.97(d1，J=8.5)2H；6.65(d1，J=8.5)2H；4.90(m)1H；4.77(m)1H；4.66(m)1H；4.45(m)1H；4.42(m)1H；4.39(m)1H；4.34(s1)1H；4.26(m)1H；4.22(m)1H；4.08(m)1H；4.01(t，J=6.5)2H；3.88(m)3H；3.70(m)2H；3.51(m)2H；3.48(m)1H；3.31(m)2H；3.28(m)1H；3.16(m)2H；2.53(dd，J=6和13.5)1H；2.44(dd，J=7.5和13.5)1H；2.27(m)1H；2.25(m)1H；2.15(m)2H；1.94(m)1H；1.74(m)2H；1.44(m)2H；1.22-1.40(m)8H；1.13(d，J=6)3H；0.99(d，J=6.5)3H；0.88(t，J=7)3H。
實(shí)施例151-[4-[(氨基亞氨基甲基)hydrano]-N2-[[4-[4-[4-(戊氧基)-苯基]-1-哌嗪基]苯基]羰基]-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B階段A1-[(4R，5R)-4，5-二羥基-N2-[[4-[4-[4-(戊氧基)苯基]-1-哌嗪基]苯基]羰基-]-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B1-所述酯的制備將55mg的五氟苯酚和61mg N，N’-二環(huán)己基碳二亞胺加入到100mg[4-[4-[4-(戊氧基)苯基]-1-哌嗪基]苯基]羧酸和3ml四氫呋喃的混合物中。于20℃下將該反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)，過(guò)濾，用四氫呋喃洗滌并濃縮至干。將其置于乙醚中，過(guò)濾，洗滌并濃縮。得到71mg產(chǎn)物。
2-偶合將含有71mg上述的酯、70mg如以上制備2得到的脫氧牟倫多菌素<環(huán)>、2.5ml二甲基甲酰胺的懸浮液在4?；罨膕iliporite存在下，于20℃攪拌一夜。將其濃縮，將所得產(chǎn)物置于乙醚中并過(guò)濾。所得產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析，用乙腈/水/三氟乙酸混合物(60/40/0.02)洗脫。得到30mg目標(biāo)產(chǎn)物。
階段B1-[N2-[[4-[4-[4-(戊氧基)苯基]-1-哌嗪基]-苯基]-羰基]-4-氧代-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B
1-所述酯的制備將1g階段A的產(chǎn)物、25ml乙腈的混合物在4?；罨膕iliporite存在下加熱至55℃。加入430ml碘化三甲基硅烷。將其攪拌45分鐘，然后加入150μl的30％硫代硫酸鈉的水溶液。于20℃，將其攪拌40分鐘并濃縮。將所述干燥的提取物置于水中，于20℃下攪拌1小時(shí)，脫水并洗滌。所得產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析，用86/13/1的二氯甲烷/甲醇/水的混合物洗脫。得到497mg目標(biāo)產(chǎn)物。收率42％。
階段C1-[4-[(氨基亞氨基甲基)亞肼基]-N2-[[4-[4-[4-(戊氧基)苯基]-1-哌嗪基]苯基]羰基]-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B將含有400mg階段B的產(chǎn)物、4.8ml正丁醇和221mg氨基胍鹽酸鹽的懸浮液于130℃加熱3小時(shí)。將其濃縮，得到705mg產(chǎn)物，將其經(jīng)硅膠層析，用二氯甲烷/甲醇混合物(85/15)洗脫，然后通過(guò)半制備HPLC(kromasil C18)純化，用(40/60/0.02)乙腈/水/三氟乙酸混合物洗脫。得到64mg目標(biāo)產(chǎn)物。
NMR譜(CDCl3)10.75(s)0.66H；10.45(s)0.33H；8.39(d，J=8)0.33H；8.34(m)1H；8.10(d，J=7.5)0.66H；8.08(d，J=8)0.33H；7.99(d，J=8.5)0.66H；7.74(d，J=8.5)1.33H；7.71(d，J=8.5)0.66H；7.60(d，J=8.5)0.66H；7.50(m)1.33H；7.00(m)6H；6.86(d，J=8.5)2H；6.65(d，J=8)2H；5.08(dr，J=2和11.5)0.66H；4.94(m)1H；4.88(m)0.33H；4.75(dm，J=8)0.33H；4.67(dd，J=3和7.5)0.66H；4.43(m)1H；4.38(m)1.66H；4.33(m)0.66H；4.26-4.20(大量的)2.33H；4.12(d，J=9)0.66H；4.00-3.68(大量的)7.33H；3.90(t，J=7)2H；3.62(d，J=12)0.33H；3.43(s寬的)2H；3.30-3.20(m)1H；3.20(s寬的)2H；2.91(d，J=14)0.66H；2.86(m)0.33H；2.76(m)0.33H；2.63(dd，J=14和12.5)0.66H；2.52(dt，J=6和13)1H；2.44(dd，J=8和13)1H；2.35(m)0.33H；2.25(m)1.66H；1.93(t寬的，J=13)1H；1.69(m)2H；1.42-1.30(大量的)4H；1.15(d，J=6)1.98H；1.10(，J=6)0.99H；0.98(d，J=6.5)3H；0.90(t，J=7)3H。
實(shí)施例161-[4-[(2-氨基乙基)氨基]-N2-[4-[4”-(戊氧基)[1，1’∶4’，1”-聯(lián)三苯]-4-基]羰基]-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(異構(gòu)體A和異構(gòu)體B)。
同前操作，由按制備2中所述制備的脫氧牟倫多菌素<環(huán)>開(kāi)始，通過(guò)得到1-[(4R，5R)-4，5-二羥基-N2-[[4”-(戊氧基)[1，1’∶4’，1”-聯(lián)三苯]-4-基]羰基]-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B和相應(yīng)的4-氧代衍生物作為中間體產(chǎn)物，最終得到目標(biāo)產(chǎn)物。
NMR譜(CDCl3)9.00(寬的)1H；8.37(d1，J=8.5)1H；8.28(m)1H；8.10(d1，J=6)1H；8.02(d1，J=8)2H；7.82(m)4H；7.73(d1，J=8)2H；7.66(d1，J=8)2H；7.38(d1，J=9) 1H；7.32(d1，J=9)1H；7.03(d1，J=8.5)2H；6.96(d1，J=8)2H；6.66(d1，J=8)2H；5.03(m)1H；4.84(m)1H；4.67(m)1H；4.45(m)2H；4.36(dd，J=7.5和10.5)1H；4.23(m)2H；4.18(s1)1H；4.04(m)1H；4.02(t，J=6.5)2H；4.00(m)1H；3.87(d1，J=9.5)1H；3.76(m)1H；3.72(m)2H；3.55(m)1H；3．44(m)1H；3.35(m)2H；3.30(m)1H；3.19(m)2H；3.12(m)1H；2.53(m)1H；2.45(m)1H；2.12-2.30(m)3H；1.90-2.05(m)2H；1.74(m)2H；1.30-1.55(m)4H；1.20(d，J=5.5)3H；0.96(d，J=6.5)3H；0.91(t，J=7)3H。
實(shí)施例E藥用組合物制備含有下列成分的片劑-實(shí)施例14的產(chǎn)物……………………………150mg-賦形劑q.s.p……………………………………1g(具體的賦形劑為淀粉、滑石粉、硬脂酸鎂)。
藥理學(xué)研究A-抑制白假絲酵母的葡聚糖合成。
根據(jù)Tang等所述的方法純化白假絲酵母的膜(Antimicrob.AgentsChemother 35，99-103，1991)。將22.5μg膜蛋白在體積為100μl的2Mm的14C-UDP葡萄糖(比活性=0.34mCi./mmol)、50Lg的α-淀粉酶、1Mm的二硫蘇糖醇(DTT)、1Mm EDTA、100Mm NaF、7μM的GTP-γ-S、1M的蔗糖和50Mm的Tris-HCl(pH7.8)的混合物中孵育。將所述培養(yǎng)基于25℃下孵育小時(shí)，通過(guò)加入TCA至終濃度為5％終止反應(yīng)。將該反應(yīng)培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至預(yù)濕潤(rùn)的玻璃纖維濾膜中。洗滌該濾膜，干燥并計(jì)數(shù)其放射活性。
使用牟倫多菌素作為陽(yáng)性對(duì)照。
采用同樣量的1％二甲亞砜進(jìn)行溶媒對(duì)照試驗(yàn)。所得結(jié)果顯示本發(fā)明產(chǎn)物在本試驗(yàn)中具有良好活性，尤其是實(shí)施例9、11和14的產(chǎn)物。
B-對(duì)于煙曲霉的活性根據(jù)Beaulieu等的方法制備所述酶(Antimicrob.Agents Chenother38，937-944，1994)。
所用的方案與以上所述用于白假絲酵母酶的方案相同，除了在反應(yīng)混合物中不使用二硫蘇糖醇。
所述產(chǎn)物在本試驗(yàn)中顯示良好的活性。
權(quán)利要求
1．所有可能的異構(gòu)體形式的式(Ⅰ)化合物以及其混合物 其中R1和R2彼此相同或不同，代表氫原子、羥基、含有多至8個(gè)碳原子的線(xiàn)性、支鏈或環(huán)狀的烷基，任選被氧原子間斷并任選被鹵原子、羥基、 基團(tuán)取代，a和b彼此相同或不同，代表氫原子或含有多至8個(gè)碳原子的烷基，a和b可任選與氮原子一起形成任選含有一個(gè)或幾個(gè)另外的雜原子的雜環(huán)，或者R1與帶有基團(tuán) 的橋環(huán)碳原子形成雙鍵，或者R2代表XRa基團(tuán)，X代表氧原子或者NH或者含有多至8個(gè)碳原子的N-烷基，Ra代表氫原子；線(xiàn)性、支鏈或環(huán)狀的含有多至8個(gè)碳原子的烷基，該烷基任選被一個(gè)或幾個(gè)鹵原子取代，任選被一個(gè)或幾個(gè)羥基、羧基、CO2alc基團(tuán)取代，任選被 取代，a’和b’代表氫原子、含有多至8個(gè)碳原子的烷基，a’和b’能形成任選含有一個(gè)或幾個(gè)另外的雜原子的雜環(huán)，和/或任選被含有一個(gè)或幾個(gè)雜原子的雜環(huán)取代；或者R2代表基團(tuán) 其中，d、e、f和g代表氫原子或含有多至8個(gè)碳原子的烷基，此外，f和g可代表含有多至8個(gè)碳原子的?；?，e和f也可形成任選含有一個(gè)或幾個(gè)雜原子的環(huán)，R3代表氫原子、甲基或羥基，R4代表氫原子或羥基，R代表含有多至30個(gè)碳原子的線(xiàn)性或支鏈或環(huán)狀鏈，任選含有一個(gè)或幾個(gè)雜原子、一個(gè)或幾個(gè)雜環(huán)，或含有多至30個(gè)碳原子的線(xiàn)性、支鏈或環(huán)狀的?；?，任選含有一個(gè)或幾個(gè)雜原子和/或一個(gè)或幾個(gè)雜環(huán)，T代表氫原子、甲基、CH2CONH2、CH2C≡N基團(tuán)、(CH2)2NH2或(CH2)2Nalc+X-基團(tuán)，X為鹵原子和alc代表含有多至8個(gè)碳原子的烷基，Y代表氫原子、羥基或鹵原子或OSO3H基團(tuán)或該基團(tuán)的鹽之一，W代表氫原子或羥基，Z代表氫原子或甲基，以及式(Ⅰ)產(chǎn)物的酸的加成鹽。
2．權(quán)利要求1所述的式(Ⅰ)化合物，其中T代表氫原子。
3．權(quán)利要求1或2所述的式(Ⅰ)化合物，其中W代表氫原子。
4．權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物，其中Z代表甲基。
5．權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物，其中Y代表氫原子。
6．權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物，其中R3代表甲基。
7．權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物，其中R4代表羥基。
8．權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物，其中R代表以下基團(tuán)
9．權(quán)利要求8中所述的式(Ⅰ)化合物，其中R代表以下鏈
10．權(quán)利要求8中所述的式(Ⅰ)化合物，其中R代表以下鏈
11．權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物，其中R1與帶有NR1R2基團(tuán)的橋環(huán)碳原子形成雙鍵。
12．權(quán)利要求11中所述的式(Ⅰ)化合物，其中R2代表以下基團(tuán)O(CH2)nNY’2其中，n代表1-8的整數(shù)，Y’代表氫原子或者含有多至8個(gè)碳原子的烷基。
13．權(quán)利要求12中所述的式(Ⅰ)化合物，其中n代表2。
14．權(quán)利要求8中所述的式(Ⅰ)化合物，其中R2代表以下基團(tuán)
15．權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物，其中R2代表以下基團(tuán)(CH2)pNY”其中，Y”代表氫原子或者含有多至8個(gè)碳原子的烷基，p代表1-8的整數(shù)。
16．權(quán)利要求1-10和15中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物，其中R1代表氫原子。
17．權(quán)利要求15中所述的式(Ⅰ)化合物，其中p代表2。
18．權(quán)利要求1中所述的式(Ⅰ)化合物，其名稱(chēng)如下1-[(S)-N2(12-甲基-1-氧代十四基)4-[[(3-哌啶基)氧基]亞氨基]-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B，1-[4-[(2-氨基乙基)氨基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(異構(gòu)體A和異構(gòu)體B)，1-[4-[(氨基亞氨基甲基)亞肼基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B，1-[4-[(2-氨基乙氧基)亞氨基]-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B和相應(yīng)的Z異構(gòu)體，1-[4-[(2-氨基乙基)氨基]-N2-[[4’-(辛基氧基)-[1，1’-聯(lián)苯]-4基]羰基]-L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B(異構(gòu)體A)及其與酸的加成鹽。
19．制備權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物的方法，其特征在于使式(Ⅱ)化合物經(jīng)歷下列物質(zhì)的作用，式(Ⅱ)如下 其中R、R3、R4、T、Y、W和Z保留其前述的意義，經(jīng)歷胺或胺的衍生物作用可能導(dǎo)入基團(tuán) 其中R1和R2保留其前述的意義，如果需要，經(jīng)歷還原劑作用和/或所述胺的官能化劑，和/或酸以便形成所得產(chǎn)物的鹽，和/或所得不同異構(gòu)體的分離劑，從而得到目標(biāo)式(Ⅰ)化合物 其中R1、R2、R3、R4、T、Y、W、R和Z保留其前述的意義，然后如果需要，使式(Ⅰ)化合物經(jīng)歷酸的作用以便形成鹽，如果需要，分離得到的不同的異構(gòu)體。
20．在權(quán)利要求19中所述的式(Ⅱ)化合物作為新的化學(xué)產(chǎn)物。
21．作為權(quán)利要求20中所述的新的化學(xué)產(chǎn)物，式(Ⅱ)化合物的名稱(chēng)如下1-[4-氧代-N2-(12-甲基-1-氧代十四基)L-鳥(niǎo)氨酸]4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸-棘白菌素B，1-[N2-[[4’-(辛基氧基)-[1，1’-聯(lián)苯]-4-基]羰基]-4-氧代-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B，1-[N2-[[4-[4-[4-(戊氧基)苯基]-1-哌嗪基]-苯基]-羰基]-4-氧代-L-鳥(niǎo)氨酸]-4-[4-(4-羥基苯基)-L-蘇氨酸]-5-L-絲氨酸棘白菌素B。
22．根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其特征在于使式(Ⅲ)化合物 其中各種取代基保留其前述的意義，經(jīng)歷能用NHR代替NH2的試劑的作用，R保留其前述意義，以便得到式(Ⅳ)化合物 使其經(jīng)歷碘化三甲基甲硅烷的作用以便得到相應(yīng)的式(Ⅱ)化合物
23．在權(quán)利要求中所述的式(Ⅲ)化合物作為新的化學(xué)產(chǎn)物。
24．以下式(Ⅲ)的脫氧牟倫多菌素環(huán)作為權(quán)利要求23中所述的新的化學(xué)產(chǎn)物
25．除了牟倫多菌素和脫氧牟倫多菌素外，權(quán)利要求22中所述的式(Ⅳ)化合物作為新的化學(xué)產(chǎn)物。
26．權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物及其與酸的加成鹽作為抗真菌化合物。
27．藥用組合物，它含有作為藥物的至少一種權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)所述的式(Ⅰ)化合物及其與藥學(xué)上可接受的酸的加成鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)化合物,其中:R1和R2為氫、羥基、任選取代的烷基;或者NR1與帶有NR1R2的碳原子形成雙鍵;R2為XRa,X為O、NH或N－烷基,Ra為H、任選取代的烷基;R為含有多至30個(gè)碳原子的鏈;任選含有一個(gè)或幾個(gè)雜原子、一個(gè)或幾個(gè)雜環(huán);T=H、CH
文檔編號(hào)A61K38/00GK1284084SQ9881341
公開(kāi)日2001年2月14日 申請(qǐng)日期1998年12月9日 優(yōu)先權(quán)日1997年12月10日
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