專利名稱：苦瓜素的提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物胰島素的提取方法。
苦瓜為葫蘆科苦瓜屬植物，性味苦寒。它具有清熱解涼，消渴引飲之功效。但直接食用苦瓜其需用量較大，而且達不到理想的治療糖尿病的效果。近年來人們采取多種辦法將苦瓜素從苦瓜中提取出來，并應(yīng)用于臨床治療糖尿病。但都因提取的純度不高，使其療效不佳。
本發(fā)明的目的是研制一種苦瓜素的提取工藝，該工藝提取的苦瓜素的純度較高，所以用于臨床治療糖尿病其療效也就很好。
本發(fā)明的工藝流程為取新鮮苦瓜100g，加入蒸餾水10ml、95％濃度的乙醇45ml、濃硫酸3.6ml，在25～28℃下勻漿10～15分鐘。再加入60ml水、95％濃度乙醇250ml，攪拌10～15分鐘后再抽濾。向濾液內(nèi)加入濃度為2.8％的NH4OH，逐漸調(diào)至PH值達到3為止。再向溶液內(nèi)加入冷無水乙醇1.5L、乙醚2L，將溶液放入0.5℃的冰箱中冷藏12小時。將上清液回收后得到白色絮狀沉淀物，將沉淀物溶于無水乙醇∶NH4OH為1∶2的溶液中，再向溶液內(nèi)加入微量鋅，在室溫下靜置18小時。析出無色針狀結(jié)晶，將粗結(jié)晶溶于乙醇∶NH4OH為1∶2的溶液中。用硅膠G進行薄層層析，在100℃下層析0.5小時。再加入展開劑，展開劑由N·J醇、水、醋酸組成，N·J醇∶水∶醋酸＝(10～12)∶(4～5)∶(1～2)，使遷移率達到0.19～0.24為止。再以乙醇∶NH4OH＝1∶(2～3)的溶液進行洗脫，再過濾進行真空干燥，得純無色結(jié)晶1g。將無色結(jié)晶1g與6NHCE進行回流加熱20小時。再將水鮮液過濾干燥，然后再將干燥物溶于50％濃度的乙醇中，再進行紙層析即得純結(jié)晶苦瓜素。紙層析時加入的展開劑為N·J醇∶水∶醋酸＝(55～60)∶(16～20)∶(14～20)的溶液。
本發(fā)明從苦瓜中提取的苦瓜素的純度可達到7％左右，用于臨床治療糖尿病100例有效率為82％，治愈率為40％。而現(xiàn)有其它方法提取的苦瓜素的純度一般只能達到2％左右，用于臨床治療糖尿病的有效率為50％左右，治愈率為20％左右。本發(fā)明的工藝具有操作簡單、成本低、一致性好的優(yōu)點。本發(fā)明提取的苦瓜素可制成注射劑或口服劑，經(jīng)動物的藥理、毒理實驗和臨床試驗，它無毒副作用，可減輕糖尿病的并發(fā)癥，可有效地降低血糖，解決了植物人工胰島素不能口服的難題，消除了應(yīng)用西藥等降糖藥物久用易產(chǎn)生耐藥性及毒副作用的危害，達到了持久穩(wěn)定的降低血糖的效果。
實施例取新鮮苦瓜100g，加入蒸餾水10ml、95％濃度的乙醇45ml、濃硫酸3.6ml，在26℃下勻漿13分鐘。再加入60ml水、95％濃度乙醇250ml，攪拌13分鐘后再抽濾。再向溶液內(nèi)加入冷無水乙醇1.5L、乙醚2L，將溶液放入0.5℃的冰箱中冷藏12小時。將上清液回收后得到白色絮狀沉淀物，將沉淀物溶于無水乙醇∶NH4OH為1∶2的240ml溶液中，再向溶液內(nèi)加入5～10ml的鋅，在室溫下靜置18小時。析出無色針狀結(jié)晶，將粗結(jié)晶溶于乙醇∶NH4OH為1∶2的溶液240ml中。用硅膠G進行薄層層析，在100℃下層析0.5小時。再加入展開劑，展開劑由N·J醇、水、醋酸組成，取N·J醇∶水∶醋酸＝12∶5∶2比例的溶液1520ml，使遷移率達到0.21為止。再以乙醇∶NH4OH＝1∶2的溶液240ml進行洗脫，再過濾。將溶液進行真空干燥，得純無色結(jié)晶1g。將無色結(jié)晶1g與6NHCL80ml進行回流加熱20小時。再將水鮮液過濾干燥，然后再將干燥物溶于50％濃渡的乙醇240ml中，再進行紙層析，即得純潔晶苦瓜素。濾紙采用WhatmanNO1型號，紙層析時加入的展開劑為N·J醇、水、醋酸混合液，N·J醇∶水∶醋酸＝58∶18∶18容量為7920ml。紙層析結(jié)束時用顯色劑進行檢測，顯色劑為0.25％濃度的卯三酮丙酮溶液。得到的苦瓜素結(jié)晶的熔點為232～234℃，而標(biāo)準(zhǔn)胰島素的熔點為233℃。
權(quán)利要求
1.苦瓜素的提取工藝，取新鮮苦瓜100g，加入蒸餾水10ml、95％濃度的乙醇45ml、濃硫酸3.6ml，在25～28℃下勻漿10～15分鐘；再加入60ml水、95％濃度乙醇250ml，攪拌10～15分鐘后再抽濾；向濾液內(nèi)加入濃度為2.8％的NH4OH，逐漸調(diào)至PH值達到3為止；再向溶液內(nèi)加入冷無水乙醇1.5L、乙醚2L，將溶液放入0.5℃的冰箱中冷藏12小時；將上清液回收后得到白色絮狀沉淀物，將沉淀物溶于無水乙醇NH4OH為1∶2的溶液中，再向溶液內(nèi)加入微量鋅，在室溫下靜置18小時；析出無色針狀結(jié)晶，將粗結(jié)晶溶于乙醇NH4OH為1∶2的溶液中；其特征在于用硅膠G進行薄層層析，在100℃下層析0.5小時；再加入展開劑，展開劑由N·J醇、水、醋酸組成，N·J醇∶水∶醋酸＝(10～12)∶(4～5)∶(1～2)，使遷移率達到0.19～0.24為止；再以乙醇∶NH4OH＝1∶(2～3)的溶液進行洗脫，再過濾進行真空干燥，得純無色結(jié)晶1g，將無色結(jié)晶1g與6NHCE進行回流加熱20小時；再將水鮮液過濾干燥，然后再將干燥物溶于50％濃度的乙醇中，再進行紙層析即得純結(jié)晶苦瓜素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的苦瓜素的提取工藝，其特征在于紙層析時加入的展開劑為N·J醇∶水∶醋酸＝(55～60)∶(16～20)∶(14～20)的溶液。
全文摘要
苦瓜素的提取工藝,采用已有的提取工藝提取出的苦瓜素純度不高,故將其用于治療糖尿病的效果就不佳。用本發(fā)明的提取工藝提取出的苦瓜素純度可達7%,用于治療糖尿病的有效率達82%,治愈率為40%,而且無毒副作用,可達到持久穩(wěn)定的降低血糖的效果。其主要步驟是勻漿、攪拌、抽濾、調(diào)pH值、冷藏、沉淀、靜置、析出無色針狀結(jié)晶,用硅膠G進行薄層層析、洗脫、過濾、真空干燥、得無色結(jié)晶、再進行回流加熱、過濾干燥,最后進行紙層析即得純結(jié)晶苦瓜素。
文檔編號A61P3/10GK1244531SQ99111188
公開日2000年2月16日 申請日期1999年7月30日 優(yōu)先權(quán)日1999年7月30日
發(fā)明者王力, 李志建 申請人:王力