專利名稱：脂肪酶抑制聚合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明的背景人類肥胖被認(rèn)為是健康問(wèn)題，在美國(guó)，臨床上認(rèn)定為超重的有約九千七百萬(wàn)人。身體脂肪的積累或保持與熱量攝入有直接關(guān)系。因此，最常用的一種控制體重對(duì)抗肥胖的方法是攝入脂肪含量相對(duì)低的飲食，即，飲食含脂肪量少于“正常飲食”或是含脂肪量少于患者一般的消耗量。
在很多種食物源中的脂肪含量大大地限制了能使用在低脂肪含量飲食中的食物源。此外，脂肪是產(chǎn)生多種食品的味道，外觀及物理特性的原因。因此，低脂肪含量飲食的可接受性和保持這樣的飲食是很困難的。
已建議使用多種化學(xué)方法來(lái)控制肥胖。厭食劑如右旋安非他命，非-安非他命藥物苯丁胺和氟苯丙胺(Phen-Fen)的結(jié)合物，及僅有右旋氟苯丙胺(Redux)，與嚴(yán)重的副作用有關(guān)。不吸收的物質(zhì)如olestra(OLEAN)，礦物油或新戊基酯(參閱美國(guó)專利No.2，962，419)已建議用作飲食用脂肪的替代物。藤黃酸及其衍生物也已被描述通過(guò)干擾脂肪酸合成來(lái)治療肥胖。可膨脹交聯(lián)乙烯基嘧啶樹脂也已被描述通過(guò)提供無(wú)營(yíng)養(yǎng)膨脹體積機(jī)理作為食欲抑制劑，如在美國(guó)專利2，923，662中所述。外科技術(shù)如臨時(shí)回腸側(cè)路手術(shù)，在特別情況中實(shí)施。
然而，治療肥胖的方法，如上述的方法都有嚴(yán)重缺陷，以控制飲食作為控制肥胖的最普遍技術(shù)。因此，需要治療肥胖的新方法。本發(fā)明的概述本發(fā)明描述了一種通過(guò)給患者服用含有一個(gè)或多個(gè)能抑制脂肪酶的基團(tuán)的或被其取代的聚合物來(lái)治療肥胖的方法。脂肪酶在消化系統(tǒng)中是關(guān)鍵酶，其將因太大而不能被小腸吸收的甘油二酯或甘油三酯，分解成能被吸收的脂肪酸。這樣，對(duì)脂肪酶的抑制可致使對(duì)脂肪吸收的減少。在一個(gè)具體實(shí)施中，脂肪酶抑制基團(tuán)可以是一種“自殺性酶底物”，其通過(guò)與酶在活性位點(diǎn)或其他位點(diǎn)形成共價(jià)鍵抑制脂肪酶的活性。在另一個(gè)具體實(shí)施中，脂肪酶抑制基團(tuán)可以是酶的同配抑制劑。本發(fā)明進(jìn)一步涉及使用在本文所描述的方法中的聚合物，以及制備聚合物的新型中間物和方法。本發(fā)明的詳細(xì)描述本發(fā)明描述了一種通過(guò)給患者服用含有一個(gè)或多個(gè)能抑制脂肪酶的基團(tuán)的或被其取代的聚合物來(lái)治療肥胖的方法。因?yàn)橹久肛?fù)責(zé)脂肪的水解，其抑制作用的一個(gè)結(jié)果是減小了脂肪的水解和吸收。本發(fā)明進(jìn)一步涉及使用在本文所描述的方法中的聚合物以及制備聚合物的新型中間物和方法。
在本發(fā)明的一個(gè)方面，脂肪酶抑制基團(tuán)滅活脂肪酶，如胃、胰腺和舌脂肪酶。滅活作用能通過(guò)形成共價(jià)鍵使酶無(wú)活性而產(chǎn)生。共價(jià)鍵能與在酶活性位點(diǎn)或鄰近活性位點(diǎn)的氨基酸殘基形成，或在遠(yuǎn)離活性位點(diǎn)的殘基上形成，只要形成的共價(jià)鍵能對(duì)酶活性產(chǎn)生抑制作用。脂肪酶含有負(fù)責(zé)將脂肪水解成脂肪酸的催化三價(jià)基。催化三價(jià)基包括絲氨酸，天冬氨酸，和組氨酸氨基酸殘基。這種三價(jià)基還負(fù)責(zé)水解絲氨酸蛋白酶中的酰胺鍵，可以預(yù)測(cè)認(rèn)為絲氨酸蛋白酶抑制劑的化合物也會(huì)抑制脂肪酶。因此，能與聚合物共價(jià)結(jié)合的絲氨酸蛋白酶抑制劑是較好的脂肪酶抑制基團(tuán)。如共價(jià)鍵可在脂肪酶抑制基團(tuán)和在酶催化位點(diǎn)或鄰近催化位點(diǎn)的羥基之間形成。如，可與絲氨酸形成共價(jià)鍵。滅活作用也可通過(guò)脂肪酶抑制基團(tuán)與氨基酸如半胱氨酸，其在遠(yuǎn)離活性位點(diǎn)的位置上，形成共價(jià)鍵產(chǎn)生。此外，脂肪酶抑制基團(tuán)和酶之間的非-共價(jià)相互作用也可產(chǎn)生對(duì)酶的滅活作用。如，脂肪酶抑制基團(tuán)可以是脂肪酸的同配體，其能與脂肪酶催化位點(diǎn)非-共價(jià)相互作用。此外，脂肪酶抑制基團(tuán)能與自然的甘油三酸酯競(jìng)爭(zhēng)對(duì)脂肪酶的水解作用。
在本發(fā)明的一個(gè)方面中，脂肪酶抑制基團(tuán)可以由結(jié)構(gòu)式Ⅰ表示 其中，R是氫，疏水基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；R1是活性基團(tuán)；Y是氧，硫，-NR2-或不存在；Z和Z1各自單獨(dú)是，氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；
R2和R3各自單獨(dú)是，氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；m是0或1；n是0或1。
在一個(gè)具體實(shí)施中，結(jié)構(gòu)式Ⅰ的脂肪酶抑制基團(tuán)可由下列結(jié)構(gòu)表示 其中R，R1和Y如上面所定義的。
在另一個(gè)具體實(shí)施中，結(jié)構(gòu)式Ⅰ的脂肪酶抑制基團(tuán)可以表示為下列結(jié)構(gòu)
其中R，R1，R2，R3和Y如上面所定義的，p是整數(shù)(如0到約30之間的整數(shù)，較好地是約2到約10之間的整數(shù))。
在另一個(gè)具體實(shí)施中，結(jié)構(gòu)式Ⅰ的脂肪酶抑制基團(tuán)是混合酐?；旌萧ǖ幌抻冢姿?羧酸，磷酸-磺酸和焦磷酸酯混合酐脂肪酶抑制基團(tuán)，分別由下列結(jié)構(gòu)表示 其中R，R1，Z1和Y如上面所定義的。
在另一方面中，本發(fā)明的脂肪酶抑制基團(tuán)可以是酐。在一個(gè)具體實(shí)施中，酐是環(huán)酐，由結(jié)構(gòu)式Ⅱ表示
其中R，Z和p如上面所定義的，X是-PO2-，-SO2-，或-CO-，k是從1到約10的整數(shù)，較好地是1-4的整數(shù)。
在另一個(gè)具體實(shí)施中，酐脂肪酶抑制基團(tuán)可以是環(huán)酐，其是稠合環(huán)系統(tǒng)的部分。這種類型的環(huán)酐可由結(jié)構(gòu)式Ⅲ表示 其中X和Z如上面所定義的，環(huán)A是任意地取代環(huán)脂肪族基團(tuán)或芳族基團(tuán)，或它們的組合物，在環(huán)中可以包括一個(gè)或多個(gè)雜原子。在一個(gè)特別具體實(shí)施中，環(huán)酐是苯磺酸酐，由下列結(jié)構(gòu)式表示 其中Z如上面所定義的，苯環(huán)可進(jìn)一步被取代。
在另一個(gè)具體實(shí)施中，脂肪酶抑制基團(tuán)是α-鹵代羰基，由結(jié)構(gòu)式Ⅳ表示
其中R和Y如上面所定義的，W1和W2每個(gè)單獨(dú)分別是氫或鹵素，如，-F，-Cl，-Br，-I，其中W1和W2至少一個(gè)是鹵素。
在另一方面，含易受親核攻擊的內(nèi)環(huán)基團(tuán)的環(huán)狀化合物也可以是脂肪酶抑制基團(tuán)。這種類型的脂肪酶抑制基團(tuán)的實(shí)例為內(nèi)酯和環(huán)氧化物，可分別由結(jié)構(gòu)式Ⅴ和Ⅵ表示 其中R，Z，m和p如上面所定義的。
在另一方面，脂肪酶抑制基團(tuán)可以是磺酸酯或二硫化物基團(tuán)，分別由結(jié)構(gòu)式Ⅶ和Ⅷ表示
其中R，Z和p如上面所定義的。R5不存在或是疏水基團(tuán)，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)。
在一個(gè)特別的具體實(shí)施中，二硫化物脂肪酶抑制基團(tuán)可以由下列結(jié)構(gòu)式表示 其中R，Z和p如上面所定義的。
在本發(fā)明的另一方面，脂肪酶抑制基團(tuán)可以是硼酸，其可通過(guò)疏水基團(tuán)與聚合物結(jié)合，或當(dāng)聚合物是疏水的時(shí)，可直接與聚合物結(jié)合。硼酸脂肪酶抑制基團(tuán)可由下列結(jié)構(gòu)式表示 其中R5，Z，n和m如上面所定義的。
在另一方面，同配脂肪酶抑制基團(tuán)可以是與聚合物結(jié)合的石炭酸。石炭酸脂肪酶抑制基團(tuán)可由下列結(jié)構(gòu)式表示
其中Z，R5，n，m如上面所定義的，-CO2H和-OH彼此相鄰或相對(duì)。
很多種聚合物可使用在本文所描述的發(fā)明中。聚合物可以是脂肪族的，脂環(huán)族的，或芳族的或合成的或自然產(chǎn)生的。然而，較好的是脂肪族和脂環(huán)族合成聚合物。并且，聚合物可以是疏水的，親水的或疏水和/或親水單體的共聚物。聚合物可以整體或部分是非離子的(如中性的)，陰離子的或陽(yáng)離子的。并且，聚合物可從烯屬或烯屬單體(如乙烯醇)或從縮合聚合物制備。
如，聚合物可以是聚乙烯醇，聚乙烯胺，聚-N-烷基乙烯胺，聚烯丙基胺，聚-N-烷基烯丙基胺，聚烯烴亞胺)，聚乙烯，聚丙烯，聚醚，聚環(huán)氧乙烷，聚酰胺，聚丙烯酸，聚烷基丙烯酸酯，聚丙烯酰胺，聚甲基丙烯酸，聚烷基甲基丙烯酸酯，聚甲基丙烯酰胺，聚-N-烷基丙烯酰胺，聚-N-烷基甲基丙烯酰胺，聚苯乙烯，乙烯基萘，乙基乙烯基苯，氨基苯乙烯，乙烯基二苯基，乙烯基苯甲醚，乙烯基咪唑基，乙烯基吡啶基，二甲基氨基甲基苯乙烯，三甲基銨乙基甲基丙烯酸酯，三甲基銨乙基丙烯酸酯，碳水化合物，蛋白質(zhì)和上面物質(zhì)的取代的衍生物(如它們的氟代單體)和它們的共聚物。
較好的聚合物包括聚醚，如聚(亞烷基)二醇。聚醚可由下列結(jié)構(gòu)式Ⅸ表示 其中R如上面所定義的，q是整數(shù)。
如，聚合物可以是聚丙二醇或聚乙二醇或它們的共聚物。聚合物可以是無(wú)規(guī)共聚物或嵌段共聚物。并且，聚合物可以是疏水的，親水的，或它們的組合物(如在無(wú)規(guī)共聚物或嵌段共聚物中)。
尤其推薦的聚合物是特點(diǎn)在于有疏水和親水聚合區(qū)域的嵌段共聚物。在這種具體實(shí)施中，“核心聚合物”可以是疏水的，一端或兩端帶有親水聚合物，或者反過(guò)來(lái)。這種聚合物的實(shí)例是聚乙二醇-聚丙二醇-聚乙二醇共聚物，如以商品名PLURONIC_(BASF Wyandotte公司)售出。BRIJ_和IGEPAL_(Aldrich，Milwaukee，WI)是含帶有一個(gè)疏水末端基團(tuán)的聚乙二醇核心的聚合物實(shí)例。BRIJ_聚合物是一個(gè)末端帶有烷氧基基團(tuán)的聚乙二醇，而聚合物鏈的另一端的羥基基團(tuán)是自由的。IGEPAL_聚合物是一個(gè)末端帶有4-壬基苯氧基基團(tuán)的聚乙二醇，而聚合物鏈的另一端的羥基基團(tuán)是自由的。
另一種聚合物包括脂肪族聚合物如，聚乙烯醇，聚烯丙基胺，聚乙烯胺，聚乙烯亞胺。這些聚合物可進(jìn)一步有一個(gè)或多個(gè)取代基的特點(diǎn)，如取代的或未取代的，飽和的或未飽和的烷基和取代的或未取代的芳基。適當(dāng)?shù)娜〈庪x子，陽(yáng)離子或中性基團(tuán)，如烷氧基，芳基，芳氧基，芳烷基，鹵素，胺，和銨基團(tuán)。聚合物可按所需含有一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)官能基團(tuán)，其可直接或間接，與含脂肪酶抑制基團(tuán)的中間物反應(yīng)。在一個(gè)具體實(shí)施中，聚合物含下列重復(fù)單元
其中，q是整數(shù)；R4是-OH，NH2-，-CH2NH2，-SH，或由下列結(jié)構(gòu)式表示的基團(tuán) 其中R，R1，Y，Z，Z1，m和n如上面所定義的。
此外，聚合物也可是碳水化合物，如幾丁聚糖，纖維素，半纖維素或淀粉或它們的衍生物。
聚合物可以是線性的或是交聯(lián)的。可通過(guò)將共聚物與一種或多種交聯(lián)試劑反應(yīng)實(shí)施交聯(lián)，交聯(lián)試劑含兩個(gè)或多個(gè)官能基團(tuán)，如親電子基團(tuán)，其與聚合物的醇反應(yīng)形成共價(jià)鍵。在這種情況中可通過(guò)在親電子基團(tuán)上聚合物羥基基團(tuán)的親核攻擊產(chǎn)生交聯(lián)。這樣形成了橋鍵單元，將不同聚合物鏈的兩個(gè)或多個(gè)醇氧原子連接。這種類型適當(dāng)?shù)慕宦?lián)試劑包括含兩個(gè)或多個(gè)從?；却?，環(huán)氧化物，和烷基-X中選取的基團(tuán)的化合物，其中X是適當(dāng)?shù)碾x去基團(tuán)，如鹵，甲苯磺?；蚣谆酋；鶊F(tuán)。這種化合物的實(shí)例包括，但不限于此，表氯醇，琥珀酰二氯，丙烯酰氯，丁二醇縮水甘油醚，乙二醇縮水甘油醚，1，2，4，5-苯四酸二酐，和二鹵代烷。
聚合物組合物也可通過(guò)在反應(yīng)混合物中含多官能共聚用單體作為交聯(lián)試劑來(lái)交聯(lián)。多官能共聚用單體可摻入到兩條或多條成長(zhǎng)的聚合物鏈中，從而交聯(lián)鏈。適當(dāng)?shù)亩喙倌芄簿塾脝误w包括，但不限于此，二丙烯酸酯，三丙烯酸酯，四丙烯酸酯，二甲基丙烯酸酯，二丙烯酰胺，二烯丙基丙烯酰胺，和二甲基丙烯酰胺。具體實(shí)例包括乙二醇二丙烯酸酯，丙二醇二丙烯酸酯，丁二醇二丙烯酸酯，乙二醇二甲基丙烯酸酯，丁二醇二甲基丙烯酸酯，亞甲基雙(甲基丙烯酰胺)，1，2-亞乙基雙(丙烯酰胺)，1，2-亞乙基雙(甲基丙烯酰胺)，亞乙基雙(丙烯酰胺)，亞乙基雙(甲基丙烯酰胺)，季戊四醇四丙烯酸酯，三羥甲基丙烷三丙烯酸酯，雙酚A二甲基丙烯酸酯，和雙酚A二丙烯酸酯。其他適當(dāng)?shù)亩喙倌軉误w包括聚乙烯基聚乙烯基芳烴，如二乙烯基苯。
聚合物的分子量不是至關(guān)重要的。所需的是聚合物應(yīng)足夠大到在腸胃道中基本上或完全不被吸收。如，分子量可大于900道爾頓。
脂肪的消化和吸收是一個(gè)復(fù)雜過(guò)程，其中不溶于水的脂肪乳化形成油滴直徑約為0.5mm的油在水中的乳液。由于存在脂肪酸和膽汁鹽，它們是主要的乳化試劑，這種乳化油相具有凈負(fù)電荷。存在于水溶相中的脂肪酶水解在乳液表面的乳化脂肪。當(dāng)脂肪酶在水溶液中時(shí)，大部分脂肪酶含有一個(gè)被直接位于活性位點(diǎn)頂部的氨基酸表面環(huán)掩蓋的活性位點(diǎn)。然而，當(dāng)脂肪酶在脂肪乳液的脂肪/水界面的膽汁鹽接觸時(shí)，脂肪酶經(jīng)歷結(jié)構(gòu)上的變化，將表面環(huán)移動(dòng)到一邊而使活性位點(diǎn)暴露。這種結(jié)構(gòu)上的變化使得脂肪酶能催化乳液的脂肪/水界面的脂肪水解。能破壞乳液表面或改變其化學(xué)性質(zhì)的聚合物應(yīng)能抑制脂肪酶的活性。因此，通過(guò)加入一種或多種能改變?nèi)橐罕砻娴木酆衔锟稍黾雍久敢种苹鶊F(tuán)的聚合物的效力?；蛘?，脂肪酶抑制基團(tuán)可直接附著在這樣的聚合物上。
幾種類型的脂肪結(jié)合聚合物已有效地破壞了脂肪乳液的表面或改變了其化學(xué)性質(zhì)。如，含正電荷乳化劑的聚合物能形成穩(wěn)定的多聚陽(yáng)離子脂肪乳液。在這種乳液中的脂肪不再是腸胃脂肪酶的基質(zhì)，因?yàn)槿橐罕砻婧瑑粽姾啥皇峭ǔ５膬糌?fù)電荷。另一種類型的脂肪結(jié)合聚合物破壞乳液使得乳液的油滴結(jié)合，這樣減小了脂肪酶是活性的乳液表面區(qū)域，因此降低了脂肪水解。脂肪結(jié)合聚合物在共同待審的1998年1月9日提交的、序列號(hào)為No.09/004，963的申請(qǐng)中，及在1998年10月5日提交的、序列號(hào)為No.09/166，453的申請(qǐng)中作了進(jìn)一步的描述，這些文獻(xiàn)的內(nèi)容通過(guò)在此引述而收入本篇。
本文所描述的取代的聚合物可通過(guò)此領(lǐng)域中通常已知的方法制備。如，具有反應(yīng)活性組成的脂肪酶抑制中間物可與具有與所說(shuō)的反應(yīng)活性組成反應(yīng)的官能基團(tuán)的聚合物接觸。參閱March.J，高級(jí)有機(jī)化學(xué)，第三版，紐約John Wiley和Sons，有限公司；(1985)。
本文所使用的“疏水基團(tuán)”，是這樣的一種基團(tuán)，其作為獨(dú)立實(shí)體在辛醇中比在水中溶解性大。如，辛基(C8H17)是疏水的，因?yàn)槠洹澳浮蓖?，辛烷，在辛醇中比在水中溶解性大。疏水基團(tuán)可以是飽和的或不飽和的，取代的或未取代的烴基團(tuán)。這樣的基團(tuán)包括取代的和未取代的，正常的，支鏈的或環(huán)狀的含至少4個(gè)碳原子的脂肪族基團(tuán)，取代的或未取代的芳烷基或雜芳烷基基團(tuán)及取代的或未取代的芳基或雜芳基。較好地，疏水基團(tuán)包括含約6個(gè)到30個(gè)碳原子的脂肪族基團(tuán)。適當(dāng)?shù)氖杷鶊F(tuán)的具體實(shí)例包括下列烷基丁基，戊基，己基，庚基，辛基，壬基，癸基，十二烷基，十四烷基，十六烷基，十八烷基，二十二烷基，膽固醇基，法呢基，芳烷基，苯基，萘基，和它們的組合物。其他適當(dāng)?shù)氖杷鶊F(tuán)實(shí)例包括含至少4個(gè)碳原子的鹵代烷基(如10-鹵代癸基)，含至少6個(gè)碳原子的羥烷基(如11-羥十一烷基)，芳烷基(如芐基)。本文所使用的脂肪族基團(tuán)包括完全飽和的或含一個(gè)或多個(gè)不飽和單元的直鏈，支鏈或環(huán)狀C4-C30碳?xì)浠衔铩?br> 適用在本發(fā)明中的芳族基團(tuán)包括但不限于，芳環(huán)，如苯基和取代的苯基，雜芳環(huán)，如吡啶基，呋喃基，苯硫基，稠合多環(huán)芳族環(huán)系統(tǒng)，其中碳環(huán)芳族環(huán)或雜芳環(huán)與一個(gè)或多個(gè)其他碳環(huán)或雜芳環(huán)稠合。稠合多環(huán)芳族環(huán)系統(tǒng)的實(shí)例包括取代的或未取代的菲基，蒽基，萘基，2-苯并噻嗯基，3-苯并噻嗯基，2-苯并呋喃基，3-苯并呋喃基，2-吲哚基，3-吲哚基，2-喹啉基，3-喹啉基，2-苯并噻唑基，2-苯并惡唑基，2-苯并咪唑基，2-喹啉基，3-喹啉基，1-異喹啉基，3-喹啉基，1-異吲哚基，3-異吲哚基，和丫啶基。
“取代的脂肪族或芳族基團(tuán)”可含一個(gè)或多個(gè)取代基，如一個(gè)芳基基團(tuán)(包括碳環(huán)芳基基團(tuán)或雜芳基基團(tuán))，取代的芳基基團(tuán)，-O-(脂肪族基團(tuán)或芳基基團(tuán))，-O-(取代的脂肪族基團(tuán)或取代的芳基基團(tuán))，芳基，-CHO-，-CO-(脂肪族或取代的脂肪族基團(tuán))，-CO-(芳基或取代的芳基)，-COO-(脂肪族或取代的脂肪族基團(tuán))，-COO-(芳基或取代的芳基基團(tuán))，-NH-(?；?，-O-(?；?，芐基，取代的芐基，鹵代小分子烷基(如三氟代甲基和三氯代甲基)，氟代，氯代，溴代，碘代，氰基，硝基，-SH，-S-(脂肪族或取代的脂肪族基團(tuán))，-S-(芳基或取代的芳基)，-S-(?；?等等。
“活性基團(tuán)”是提供官能基團(tuán)或反應(yīng)活性組成的基團(tuán)。通常，吸電子基團(tuán)是“活性基團(tuán)”。上面結(jié)構(gòu)式的R1或Y-R1，是好的離去基團(tuán)或吸電子基團(tuán)。好的離去基團(tuán)實(shí)例是磷酸酯，對(duì)-硝基苯酚，鄰，對(duì)-二硝基苯酚，N-羥基琥珀酰亞胺，咪唑，抗壞血酸，吡哆素，三甲基乙酸酯，羰基化金剛烷，對(duì)-氯代苯酚，鄰，對(duì)-二氯代苯酚，磺?；淄?，磺酰化莢基化氧，和三異丙基苯磺酰。較好的離去基團(tuán)是N-羥基琥珀酰亞胺。
間隔基團(tuán)可以是含一個(gè)到約三十個(gè)原子并與脂肪酶抑制劑，與聚合物，或與疏水基團(tuán)共價(jià)結(jié)合的基團(tuán)。通常，間隔基團(tuán)可通過(guò)官能基團(tuán)與脂肪酶抑制劑，聚合物或疏水基團(tuán)共價(jià)結(jié)合。官能基團(tuán)的實(shí)例有氧，亞烷基，硫，-SO2-，-CO2-，-NR2-，或-CONR2-。間隔基團(tuán)可以是親水的或是疏水的。間隔基團(tuán)的實(shí)例包括氨基酸，多肽，碳水化合物，及任意取代的亞烷基或芳族基團(tuán)。間隔基團(tuán)可從如表氯醇，二鹵代烷，鹵代烷基酯，聚乙二醇，聚丙二醇和其他交聯(lián)的或雙官能化合物制備。溴代烷基乙酸酯是較好的間隔基團(tuán)。
給受試體服用的聚合物的量取決于疾病的類型和嚴(yán)重性，還取決于受試體的特點(diǎn)，如通常的健康情況，年齡，體重，和耐藥性。它還取決于肥胖的程度及與肥胖相關(guān)的并發(fā)癥。根據(jù)這些及其他因素技術(shù)人員能確定適當(dāng)?shù)膭┝?。一般，在人類受試體內(nèi)，聚合物的有效量范圍對(duì)于成年人約10mg每天到約50mg每天。較好地，劑量范圍為約10mg每天到約20mg每天。
聚合物可通過(guò)適當(dāng)?shù)耐緩椒?，包括如以膠囊，懸浮液或片劑口服。與食物混合口服是較好的服用方式。
聚合物也可與作為部分藥組合物的可接受藥用載體結(jié)合服用。用來(lái)服用的聚合物配方根據(jù)所選取的服用途徑(如溶液，乳液，膠囊)而變化。適當(dāng)?shù)乃幱幂d體可含有惰性組分，其不與聚合物的脂肪酶抑制基團(tuán)作用?？墒褂脴?biāo)準(zhǔn)藥用配方技術(shù)，如在PA，Easton，Mack出版公司的Remington藥物科學(xué)中所描述的。將組合物裝入膠囊的方法(如包裹在硬凝膠或環(huán)糊精中)在此領(lǐng)域中是眾所周知的(Baker等人“生物活性試劑的控釋給藥”，John Wiley和Sons，1986)。試驗(yàn)聚合物的合成實(shí)例1制備含n-苯基疏水基團(tuán)和p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的聚乙二醇將在無(wú)水二氯甲烷(40 ml)中的n-戊醇(19.5毫摩爾，1.72g)和N-甲基咪唑(19.5毫摩爾，1.6 g)混合物在無(wú)水條件下經(jīng)20分鐘緩慢加入到p-硝基苯基二氯代磷酸酯(19.5毫摩爾，5.0 g)的無(wú)水二氯甲烷(100 ml)溶液中。加料期間反應(yīng)燒瓶在水浴中冷卻。加料完成后，將水浴移開，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。在無(wú)水條件下將在無(wú)水二氯甲烷(150 ml)中的聚乙二醇(MW=8，000，10毫摩爾，80 g)和N-甲基咪唑(19.5毫摩爾，1.6 g)加入到反應(yīng)燒瓶?jī)?nèi)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?5小時(shí)。真空移出溶劑，依據(jù)方法A提純殘留物，獲得白色粉末聚合物(70 g)。提純過(guò)程方法A將殘留物溶解在去離子水(100 ml)中。使用Spectra/PorMembrane MWCO3，500將溶液透析24小時(shí)。將透析的溶液凍干，獲得白色粉末聚合物。方法B將殘留物倒入到0.5 L的二乙基醚中并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將溶劑輕輕倒出并加入新鮮的二乙基醚(0.25 L)。混合物攪拌1小時(shí)。將溶劑倒出，在室溫真空下干燥聚合物。方法C將反應(yīng)混合物用10％水溶硫酸鈉溶液(3×100 ml)沖洗。用硫酸鎂干燥有機(jī)相。將溶劑移出，在室溫下干燥聚合物。
使用上述過(guò)程，合成下列化合物，在下面的表中列出。
表1有不同疏水基團(tuán)的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團(tuán)的聚乙二醇(PEG)
實(shí)例29制備含n-十四烷基疏水基團(tuán)和p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的PLURONIC_聚合物將在無(wú)水二氯甲烷(75 ml)中的n-十四醇(70毫摩爾，15g)和N-甲基咪唑(70毫摩爾，5.6 ml)混合物在無(wú)水條件下經(jīng)20分鐘緩慢加入到p-硝基苯基二氯代磷酸酯(70毫摩爾，17.92 g)的無(wú)水二氯甲烷(50 ml)溶液中。加料期間反應(yīng)燒瓶在水浴中冷卻。加料完成后，將水浴移開，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。在無(wú)水條件下將在無(wú)水二氯甲烷(150 ml)中的PLURONIC_(MW=1，100，35毫摩爾，39g)和N-甲基咪唑(70毫摩爾，5.6 ml)加入到反應(yīng)燒瓶?jī)?nèi)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?4小時(shí)。反應(yīng)混合物用冷的飽和氯化鈉溶液(3×150 ml)提取，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥。過(guò)濾出硫酸鈉，收集過(guò)濾物。減壓條件下將溶劑從過(guò)濾物中移出，得到65 g暗黃色粘稠液體。在真空室溫下干燥物料一周。這種物料可直接用于體內(nèi)和體外測(cè)試。
使用上述過(guò)程制備下列實(shí)例。
表2有不同疏水基團(tuán)的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團(tuán)的PLURONIC_聚合物(PLU)
實(shí)例51制備含n-十六烷基疏水基團(tuán)和p-肖基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的聚丙二醇將在無(wú)水二氯甲烷(75 ml)中的n-十六醇(117毫摩爾，28.41 g)和N-甲基咪唑(117毫摩爾，9.34 ml)混合物在無(wú)水條件下經(jīng)20分鐘緩慢加入到p-硝基苯基二氯代磷酸酯(117毫摩爾，30 g)的無(wú)水二氯甲烷(60 ml)溶液中。加料期間反應(yīng)燒瓶在水浴中冷卻。加料完成后，將水浴移開，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。在無(wú)水條件下將在無(wú)水二氯甲烷(150 ml)中的聚丙二醇(MW=1，000，58.5毫摩爾，58.5 g)和N-甲基咪唑(117毫摩爾，9.3 ml)加入到反應(yīng)燒瓶?jī)?nèi)。混合物在室溫下攪拌24小時(shí)。反應(yīng)混合物用冷的飽和硫酸鈉溶液(3×150 ml)提取，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鎂干燥。過(guò)濾出硫酸鎂，收集過(guò)濾物。減壓條件下將溶劑從過(guò)濾物中移出，得到77 g產(chǎn)物。在真空室溫下干燥物料4天。
使用上述過(guò)程制備下列聚丙二醇p-硝基苯基磷酸酯。
表3有不同疏水基團(tuán)的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團(tuán)的聚丙二醇(PPG)
實(shí)例57制備含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)和戊基疏水基團(tuán)的聚乙二醇聚合物A．制備O，O-二甲基n-戊基磷酸酯在氮氛圍下，將O，O-二甲基n-戊基磷酸酯(220 g，2摩爾)滴加到無(wú)水THF(600 ml)的NaH(48 g，2摩爾)懸浮液中。1小時(shí)后，緩慢加入在THF(400 ml)中的1-溴代戊烷(248ml，2摩爾)，反應(yīng)混合物回流12小時(shí)。真空移出溶劑，加入二乙基醚(1L)，過(guò)濾移出鹽。醚溶液用水(3×100 ml)沖洗，有機(jī)層在無(wú)水硫酸鈉上干燥。減壓移出醚，真空蒸餾提純粗制產(chǎn)物，得到171 g的O，O-二甲基n-戊基磷酸酯。B．制備n-戊基二氯代磷酸酯將O，O-二甲基n-戊基磷酸酯(158 g，0.88摩爾)和N，N-二甲基甲酰胺(700 mg)溶解在亞硫酰氯(200 ml)中，得到的混合物回流48小時(shí)。室溫真空下移出揮發(fā)物，蒸餾提純粗制產(chǎn)物，得到無(wú)色液體(135 g)。C．制備含p-硝基苯基n-戊基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的聚乙二醇在無(wú)水條件下，在n-戊基二氯代磷酸酯(2.65 g，14毫摩爾)的40 ml無(wú)水二氯甲烷溶液中加入亮橙色p-硝基苯酚的鈉鹽(2.3 g，14毫摩爾)。亮橙色在5-10分鐘內(nèi)消失。45分鐘后，在室溫加入聚乙二醇(MW=8400，56 g，7毫摩爾)和N-甲基咪唑(1.5 mL，20毫摩爾)的混合物并攪拌24小時(shí)。反應(yīng)混合物用2％碳酸鉀溶液(6×100 ml)沖洗，接著用氯化鈉溶液(6×100 ml)沖洗。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥，真空移出溶劑得到粘稠液體。將產(chǎn)物倒入到200 ml的二乙基醚中，并攪拌10分鐘。輕輕倒出醚部分，將過(guò)程再重復(fù)三次。獲得白色粉末產(chǎn)物在室溫真空下干燥一周。
使用這個(gè)過(guò)程制備下列含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的聚乙二醇聚合物表4有不同疏水基團(tuán)的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團(tuán)的聚乙二醇
實(shí)例61制備含被n-戊基-1，5二氧接頭連接的p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)及含n-十六烷基疏水基團(tuán)的PLURONIC_聚合物在1L的園底燒瓶?jī)?nèi)加入氫化鈉(4.0 g，60％NaH的礦物油分散體，0.1摩爾)，然后用無(wú)水庚烷(3×25 ml)沖洗。加入無(wú)水四氫呋喃(THF)(150 ml)，在氮氛圍下室溫?cái)嚢钁腋∫?。在室溫加入無(wú)水PLURONIC_(MW=1900，50wt％聚乙二醇，50wt％聚丙二醇；95 g，0.05摩爾)的無(wú)水THF(200 ml)溶液。在無(wú)水條件下加入溴代戊基乙酸酯(20.9 g，0.1摩爾)的無(wú)水THF(50 ml)溶液。反應(yīng)混合物在60℃回流16小時(shí)。真空移出溶劑，產(chǎn)物漿懸浮到二氯甲烷(300 ml)中。過(guò)濾移出固體，過(guò)濾物用水(3×100 ml)沖洗。有機(jī)層在無(wú)水硫酸鈉上干燥，移出溶劑得到暗棕色粘稠液體(110 g)。將這種物質(zhì)溶解在甲醇(500 ml)中，并用水溶4N氫氧化鈉(40 ml)處理。4小時(shí)后，反應(yīng)混合物用濃鹽酸酸化，真空移出溶劑。將粘稠油溶解在二氯甲烷中，將其用水(4×100 ml)沖洗。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥，移出溶劑得到暗棕色粘稠液體雙-5-羥基戊氧基PLURONIC_(98 g)。
在另一個(gè)燒瓶?jī)?nèi)，將在無(wú)水二氯甲烷(40 ml)中的n-十六醇(29.0毫摩爾，7.02 g)和N-甲基咪唑(290毫摩爾，2.3 ml)混合物在無(wú)水條件下經(jīng)20分鐘緩慢加入到p-硝基苯基二氯代磷酸酯(29.0毫摩爾，7.41 g)的無(wú)水二氯甲烷(100 ml)溶液中。加料期間反應(yīng)燒瓶在水浴中冷卻。加料完成后，將水浴移開，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。在無(wú)水條件下將在無(wú)水二氯甲烷(150 ml)中的雙-5-羥基戊氧基PLURONIC_(14.48毫摩爾，30 g)和N-甲基咪唑(2.3 ml)加入到反應(yīng)燒瓶?jī)?nèi)。混合物在室溫下攪拌24小時(shí)。反應(yīng)混合物用冷的飽和氯化鈉溶液(3×100 ml)沖洗。收集有機(jī)層并用硫酸鈉干燥。移出溶劑得到粘稠液體。將用沸騰的己烷(6×50 ml)沖洗。在真空室溫下干燥產(chǎn)物過(guò)夜，得到暗黃色粘稠液體(39 g)。
使用上述過(guò)程制備下列實(shí)例。
表5含被不同二烷氧基連接的p-硝基苯基脂肪酶抑制基團(tuán)及含不同疏水基團(tuán)的PLURONIC_聚合物
實(shí)例67制備含被n-戊基-1，5二氧接頭連接的p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)及含n-十六烷基疏水基團(tuán)的聚乙二醇聚合物在1L的園底燒瓶?jī)?nèi)加入氫化鈉(7.67 g，60％NaH的礦物油分散體，0.19摩爾)，然后用無(wú)水庚烷(3×25 ml)沖洗。加入無(wú)水四氫呋喃(THF)(200 ml)，在氮氛圍下室溫?cái)嚢钁腋∫?。在室溫?zé)o水條件下加入聚乙二醇(MW=1500，150 g，0.1摩爾)的無(wú)水THF(200 ml)溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時(shí)，然后向反應(yīng)混合物中加入溴代戊基乙酸酯(41.82 g，0.2摩爾)的無(wú)水THF(100 ml)溶液。反應(yīng)混合物在60℃回流16小時(shí)。真空移出溶劑，產(chǎn)物漿懸浮到二氯甲烷(300 ml)中。過(guò)濾移出固體，過(guò)濾物用水(3×100 ml)沖洗。有機(jī)層在無(wú)水硫酸鈉上干燥，移出溶劑得到暗棕色粘稠液體(110 g)。將這種物質(zhì)溶解在甲醇(500 ml)中，并用水溶4N氫氧化鈉(80 ml)處理。4小時(shí)后，反應(yīng)混合物用濃鹽酸酸化，真空移出溶劑。將粘稠油溶解在二氯甲烷中，將其用水(4×100 ml)沖洗。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥，移出溶劑得到暗棕色粘稠液體雙-5-羥基戊氧基聚乙二醇(98 g)。用與實(shí)例61的過(guò)程類似的方法加入p-硝基苯基磷酸酯基團(tuán)。
使用上述過(guò)程制備下列實(shí)例。
表6含被二烷氧基接頭連接的p-硝基苯基脂肪酶抑制基團(tuán)及含不同疏水基團(tuán)的聚乙二醇
實(shí)例75制備含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)及十六烷基疏水基團(tuán)的BRIJ聚合物將在無(wú)水二氯甲烷(300 ml)中的p-硝基苯基二氯代磷酸酯(75 g，0.29摩爾)加入到已經(jīng)用氮?dú)獯祾哌^(guò)的1L三頸口帶攪拌槳的園底燒瓶?jī)?nèi)。經(jīng)2小時(shí)將十六醇(71.03 g，0.29摩爾)和N-甲基咪唑(23.35 ml，0.29摩爾)的無(wú)水二氯甲烷(250 ml)溶液滴加到燒瓶中。在倒入到分液漏斗之前將反應(yīng)混合物攪拌1個(gè)小時(shí)。N-甲基咪唑氫氯鹽為油狀在底部分離，從漏斗中移出。在真空低于30℃從混合物中分離出二氯甲烷，得到琥珀色油，溶解在己烷(400 ml)中，置于冷凍室過(guò)夜。然后將反應(yīng)混合物解凍，將溶解部分過(guò)濾移出p-硝基苯基二氯代磷酸酯晶體。通過(guò)在低于35℃的旋轉(zhuǎn)汽化，將溶劑從過(guò)濾物中移出得到n-己基p-硝基苯基氯代磷酸酯。
用氮?dú)獯祾邘嚢铇?00 ml燒瓶。加入n-己基p-硝基苯基氯代磷酸酯(20 g，0.043摩爾)的無(wú)水THF(25 ml)溶液，接著緩慢加入BRIJ_58(聚氧乙烯(20)鯨蠟基醚，48.56 g，0.043摩爾)和N-甲基咪唑(3.45 ml，0.043摩爾)的無(wú)水THF(200ml)溶液。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物24小時(shí)。在低于35℃下通過(guò)旋轉(zhuǎn)汽化移出溶劑，油狀殘留物溶解在甲醇(50 ml)中。加入甲醇/水溶液(200 ml，85 ml∶15 ml)。過(guò)濾收集固體雙-n，n-硝基苯基磷酸酯。在低于35℃下通過(guò)旋轉(zhuǎn)汽化分離除去甲醇。凍干除去水。
表7中的實(shí)例可通過(guò)上述過(guò)程制備，用下列結(jié)構(gòu)表示
表7有不同疏水基團(tuán)的含末端p-硝基苯基脂肪酶抑制基團(tuán)的BRIJ_聚合物
實(shí)例76制備含末端p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)及十六烷基疏水基團(tuán)的IGEPAL_聚合物用氮?dú)獯祾邘嚢铇?00 ml燒瓶，加入n-己基p-硝基苯基氯代磷酸酯(20 g，0.043摩爾)的無(wú)水THF(25 ml)溶液，接著緩慢加入IGEPAL_720(32.41 g，0.043摩爾)和N-甲基咪唑(3.45 ml，0.043摩爾)的無(wú)水THF(200 ml)溶液。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物24小時(shí)。在真空室溫下移出溶劑，油狀產(chǎn)物溶解在甲醇(50 ml)中。加入甲醇/水溶液(200 ml，85∶15)到產(chǎn)物中。過(guò)濾出雙-n，n-二己基p-硝基苯基磷酸酯。在低于35℃真空下分離除去甲醇。凍干除去水。
表8中的實(shí)例可通過(guò)上述過(guò)程制備，用下列結(jié)構(gòu)表示
表8有不同疏水基團(tuán)的含末端p-硝基苯基脂肪酶抑制基團(tuán)的IGEPAL_聚合物
實(shí)例80制備有n-己基疏水基團(tuán)含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的[聚(丙二醇)嵌段-聚(乙二醇)嵌段-聚(丙二醇)]聚合物用氮?dú)獯祾邘嚢铇?00 ml燒瓶，加入n-己基p-硝基苯基氯代磷酸酯(20 g，0.043摩爾)的無(wú)水THF(25 ml)溶液，接著緩慢加入[聚(丙二醇)嵌段-聚(乙二醇)嵌段-聚(丙二醇)](平均MW=2000，50wt％乙二醇；49.36 g，0.0215摩爾)和N-甲基咪唑(3.45 ml，0.043摩爾)的無(wú)水THF(200 ml)溶液。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物24小時(shí)。在真空室溫下移出溶劑，油狀殘余物溶解在甲醇(50 ml)中。加入甲醇/水溶液混合物(200ml，85∶15)。過(guò)濾出雙-n，n-二己基p-硝基苯基磷酸酯。在低于35℃真空下分離除去甲醇。凍干除去水。
下列實(shí)例可通過(guò)上述過(guò)程制備。
表9有不同疏水基團(tuán)的含p-硝基苯基脂肪酶抑制基團(tuán)的[聚(丙二醇)嵌段-聚(乙二醇)嵌段-聚(丙二醇)]聚合物
實(shí)例83制備含癸基疏水基團(tuán)和氯磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的PLURONIC_聚合物用氮?dú)獯祾吆?，將氯氧化?30 g，0.1956摩爾)的無(wú)水THF(100 ml)溶液加入到3L燒瓶?jī)?nèi)，混合物冷卻到0-5℃。新鮮蒸餾的三乙基胺(27.27 ml，0.1956摩爾)和1-癸醇(30.97 g，0.1956摩爾)的無(wú)水THF(300 ml)溶液混合物以最大流速75 ml/小時(shí)滴加到燒瓶?jī)?nèi)，并保持溶液溫度在5℃。加料完成后，新鮮蒸餾的三乙基胺(13.7 ml，0.0978摩爾)和PLURONIC_(平均MW=2900，142 g，0.0489摩爾)的無(wú)水THF(300 ml)溶液混合物以最大流速75 ml/小時(shí)滴加到燒瓶?jī)?nèi)，并保持溶液溫度在5℃。加料完成后，反應(yīng)物升溫到室溫并攪拌24小時(shí)。過(guò)濾除去氫氯化三乙基銨鹽。在30℃真空除去溶劑，產(chǎn)物油用己烷(6×250 ml)沖洗以除去未反應(yīng)的n-癸基二氯代磷酸酯。在高度真空(0.003 mmHg)室溫將產(chǎn)物，雙-n-癸基氯代磷酸酯干燥過(guò)夜。實(shí)例84制備含癸基疏水基團(tuán)和N-羥基琥珀酰亞胺基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的PLURONIC_聚合物用氮?dú)獯祾?25 ml帶攪拌槳的燒瓶，加入雙-n-癸基氯代磷酸酯PLURONIC_(如在實(shí)例81中制備的，30 g，0.0178摩爾)溶液。以固體加入N-羥基琥珀酰亞胺(2.05 g，0.0178摩爾)并使其溶解。加入新鮮蒸餾的三乙基胺(2.48 ml，0.0178摩爾)。反應(yīng)混合物攪拌0.5小時(shí)。過(guò)濾除去氫氯化三乙基銨鹽。在30℃旋轉(zhuǎn)汽化除去過(guò)濾物中的THF。在高度真空(0.003mmHg)下將產(chǎn)物干燥過(guò)夜。實(shí)例85制備含癸基疏水基團(tuán)和吡哆素基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的PLURONIC_聚合物用氮?dú)獯祾?25 ml帶攪拌槳的燒瓶，加入雙-n-癸基氯代磷酸酯PLURONIC_(如在實(shí)例82中制備的，30 g，0.0178摩爾)的無(wú)水二氯甲烷(30 ml)溶液。以固體加入氫氯化吡哆素(2.54 g，0.0178摩爾)并使其溶解。加入新鮮蒸餾的三乙基胺(4.96 ml，0.0356摩爾)。反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)。過(guò)濾除去氫氯化三乙基銨鹽，在低于35℃通過(guò)旋轉(zhuǎn)汽化除去溶劑。將油溶解在THF(50 ml)中并重新過(guò)濾。旋轉(zhuǎn)汽化除去溶劑。在高度真空(0.003 mmHg)及室溫下將產(chǎn)物干燥過(guò)夜。
表10列出實(shí)例83，84和85中制備的聚合物表10含不同離去基團(tuán)的PLURONIC_聚合物
實(shí)例86制備含β-內(nèi)酯脂肪酶抑制基團(tuán)的PLURONIC_聚合物(方案Ⅰ)
方案Ⅰ合成中間物5。
中間物1將10-羥基甲基癸酸酯(20 g，98毫摩爾)，苯甲氧基2，2，2-三氯代亞胺逐乙酸酯(30 g，118毫摩爾)，二氯甲烷(50 ml)和環(huán)己烷(100ml)加入到1L園底燒瓶?jī)?nèi)。混合物在室溫?cái)嚢?分鐘。在氮氛圍下將三氟甲烷磺酸(1.3 ml)加入到反應(yīng)混合物中。在幾分鐘內(nèi)將溫度從室溫升高到37℃。反應(yīng)通過(guò)TLC(己烷∶乙基乙酸酯；9∶1)監(jiān)控。16小時(shí)后，起始物料全部消失。過(guò)濾將固體從反應(yīng)物中分離，過(guò)濾物用水溶重碳酸鈉溶液(3×100ml)沖洗，接著用水(3×100 ml)沖洗。收集有機(jī)相并在無(wú)水硫酸鈉上干燥。在真空室溫下除去溶劑。殘留物在硅膠柱上提純，使用梯度醚/己烷作為移動(dòng)相。產(chǎn)物用醚/己烷(8∶2)從柱上洗脫。真空除去溶劑得到固體(10 g)10-苯氧基甲基癸酸酯(中間物1)。
中間物2將中間物1(30 g)在6N氫氧化鈉溶液(100 ml)中皂化12小時(shí)，然后用濃鹽酸酸化。產(chǎn)物用氯仿(5×100 ml)提取。有機(jī)層被結(jié)合，在硫酸鈉上干燥。真空除去溶劑得到10-苯氧基癸酸(中間物2)(27 g)，其在下一個(gè)反應(yīng)中直接使用。
中間物3將在己烷中n-丁基鋰(1.6 M溶液，68 ml，108毫摩爾)滴加入到保持在0℃的N，N-二異丙基胺(15.14 ml，108毫摩爾)的THF(50 ml)溶液中。加料完成后，混合物在0℃攪拌10分鐘。將混合物冷卻到-50℃，然后滴加入中間物2(15 g，54毫摩爾)的THF(100 ml)溶液。加料完成后，混合物溫度升高到室溫。將混合物冷卻到-78℃，然后滴加入癸基乙醛(8.44g，54毫摩爾)的THF(40 ml)溶液。在-78℃攪拌3小時(shí)，混合物溫度升高到室溫，然后加入氯化銨溶液(50 ml)急冷。用二乙基醚(5×50 ml)提取混合物。有機(jī)層被結(jié)合，并用硫酸鈉干燥，過(guò)濾及汽化得到中間物3(22 g)。
中間物4將苯磺酰氯(9.8 g，56毫摩爾)加入到保持在0℃的中間物3(12 g，28毫摩爾)的嘧啶(200 ml)溶液中。加料完成后，混合物保持在4℃的冰箱內(nèi)24小時(shí)，然后倒入到碎冰(2公斤)中，并在室溫下攪拌20分鐘。用二乙基醚(6×150 ml)提取混合物。結(jié)合的有機(jī)層用水沖洗，用硫酸鈉干燥，真空過(guò)濾濃縮。產(chǎn)物在使用己烷∶乙基乙酸酯(9∶1)的硅膠柱上提純，得到油狀中間物4(9.8 g)。
中間物5中間物4()溶解在二氯甲烷中，然后使用10％Pd/C(1 g)作為催化劑在50 psi的氫下氫化。溶液過(guò)濾，真空除去溶劑得到油狀中間物5(6.9 g)。
中間物6將PLURONIC_(MW=1900，570 g，300毫摩爾)的THF(500 ml)溶液滴加到攪拌的氫化鈉(15 g)的THF(150 ml)懸浮溶液中。加料完成后，混合物在室溫下攪拌30分鐘。滴加乙基4-溴代丁酸酯溶液(117 g，600毫摩爾)，在60℃攪拌混合物16小時(shí)。冷卻到室溫后，過(guò)濾除去鹽，真空除去溶劑，得到淡棕色粘稠物質(zhì)，將其懸浮在二氯甲烷(1 L)中，并用水(3×200 ml)沖洗。收集有機(jī)層，并用硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空除去溶劑得到粘稠液體中間物6(770 g)。
中間物7將中間物6溶解在甲醇(1L)溶液和50％氫氧化鈉溶液(100ml)中，然后在室溫?cái)嚢?4小時(shí)。反應(yīng)混合物用濃鹽酸酸化，真空除去溶劑。殘留物重新懸浮在二氯甲烷(1L)中，然后用水(4×250 ml)沖洗。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空除去溶劑得到粘稠液體中間物7(650 g)。
中間物8在園底燒瓶?jī)?nèi)，在氮?dú)夥諊聦渎然?-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二胺(4.8g，25毫摩爾)加入到中間物7(20.72g，10毫摩爾)的二氯甲烷(100 ml)溶液中。在室溫下攪拌混合物10分鐘，然后加入N-羥基琥珀酰亞胺(2.3 g)。在室溫?cái)嚢杌旌衔?2小時(shí)，然后轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，并用水(3×30 ml)沖洗。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空除去溶劑得到直接使用在下面步驟中的22 g中間物8。實(shí)例86將三乙基胺(3 ml)加入到中間物8(22 g，約10毫摩爾)和中間物5(6.5 g，20毫摩爾)的二氯甲烷(150 ml)溶液中。在室溫下攪拌混合物4小時(shí)，然后倒入到分液漏斗中，并用5％鹽酸(3×20 ml)和水(3×50 ml)沖洗。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空除去溶劑。實(shí)例86得到粘稠液體(26 g)。這種物質(zhì)直接在體內(nèi)和體外測(cè)試中使用。實(shí)例87制備含二硫化物脂肪酶抑制基團(tuán)的PLURONIC_聚合物 中間物9將1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二胺(1.1g，5毫摩爾)加入到5，5’-二硫基雙(2-硝基苯甲酸)(3.96 g，10毫摩爾)的二氯甲烷(100 ml)溶液中。10分鐘后加入N-羥基琥珀酰亞胺(0.5 g，5毫摩爾)，然后在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)物6小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入到分液漏斗中，然后用水(3×20 ml)沖洗。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空除去溶劑得到直接使用在下面步驟中的中間物9。
在中間物9的二氯甲烷(100 ml)溶液中加入PLURONIC_(MW=1900，9.5 g，5毫摩爾)的二氯甲烷(50 ml)溶液，接著加入三乙基胺(0.5 ml)。在室溫?cái)嚢杌旌衔?6小時(shí)，然后倒入分液漏斗中，用水(3×30 ml)沖洗。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空除去溶劑，得到實(shí)例87的粘稠液體(12 g)。實(shí)例88制備含酐脂肪酶抑制基團(tuán)的PLURONIC_聚合物 中間物10將1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二胺(2.2 g，10毫摩爾)加入到1，2，3-苯三羧酸酐(2.1 g，10毫摩爾)的二氯甲烷(100 ml)溶液中。混合物攪拌10分鐘，然后加入N-羥基琥珀酰亞胺(1.0 g，10毫摩爾)，在室溫?cái)嚢璺磻?yīng)物6小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入到分液漏斗中，然后用水(3×20 ml)沖洗。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空除去溶劑得到直接使用在下面步驟中的中間物10。
在中間物10的二氯甲烷(100 ml)溶液中加入PLURONIC_(MW=1900，9.5 g，5毫摩爾)和三乙基胺(0.5 ml)的二氯甲烷(50 ml)溶液。在室溫?cái)嚢杌旌衔?6小時(shí)，然后倒入分液漏斗中，用水(3×30 ml)沖洗。有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空除去溶劑，得到實(shí)例88的粘稠液體(11.2 g)。體外測(cè)試過(guò)程Ⅰ三丁酸甘油酯基質(zhì)采用滴定法使用pH Stat儀器(美國(guó)輻射計(jì)，Westlake OH)評(píng)估胰腺脂肪酶活性的潛在抑制劑?；|(zhì)(1 ml三丁酸甘油酯)加入到29.0 ml的Tris-HCl緩沖液(pH 7.0)中，緩沖液含100 mM氯化鈉，5 mM氯化鈣，和4 mM牛磺脫氧膽酸鈉。攪拌溶液，之后加入210個(gè)單位的溶解在測(cè)試緩沖液中的豬胰腺脂肪酶(Sigma，21，000單位/毫克)。通過(guò)用0.02 M氫氧化鈉滴定測(cè)試系統(tǒng)恒定pH7.0，監(jiān)控10分鐘脂肪酶丁酸釋放情況。酶活性表示為每克酶每分鐘加入的堿的毫克當(dāng)量。在隨后的測(cè)試中，根據(jù)化合物的溶解特性，在三丁酸甘油酯中或緩沖液中溶解不同量的抑制劑，并在零時(shí)加入到測(cè)試系統(tǒng)中。
過(guò)程2棕櫚油基質(zhì)采用滴定法使用PH Stat儀器(美國(guó)輻射計(jì)，Westlake OH)評(píng)估胰腺脂肪酶活性的潛在抑制劑。基質(zhì)(15 ml棕櫚油乳液，含80 mM棕櫚油和2 mM油酸，溶解并超聲處理在緩沖液中，緩沖液含10 mM Tris-HCl pH 8.0，110 mM氯化鈉，10 mM氯化鈣，2 mM卵磷脂，1.32 mM膽固醇，1.92 mM甘氨膽酸鈉和1.92mM牛磺脫氧膽酸鈉)加入到15 ml測(cè)試緩沖液(Tris-HCl緩沖液pH 8.0含110 mM氯化鈉和10 mM氯化鈣)中。攪拌溶液4分鐘，之后加入1050單位的溶解在測(cè)試緩沖液中的豬胰腺脂肪酶(Sigma，21，000單位/毫克)。通過(guò)用0.02 M氫氧化鈉滴定測(cè)試系統(tǒng)恒定pH 8.0，監(jiān)控30分鐘三甘油酯的水解情況。酶活性表示為每克酶每分鐘加入的堿的毫克當(dāng)量。在隨后的測(cè)試中，在乙醇或DMSO中制備儲(chǔ)備抑制劑溶液，以不同量在零時(shí)加入到測(cè)試系統(tǒng)中。
如上所述，使用過(guò)程1或2實(shí)施測(cè)試，通過(guò)比較存在及不存在抑制劑的情況中的酶活性得到抑制作用百分?jǐn)?shù)。測(cè)試了三種濃度的抑制劑，為了確定50％抑制作用(IC50)發(fā)生的濃度，以抑制劑濃度的對(duì)數(shù)標(biāo)繪抑制作用百分?jǐn)?shù)。測(cè)試了下列化合物，IC50的指示值在在表11-17中列出。
表11
表12含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)和二烷氧基接頭的PLUROMC聚合物的IC50值
表13含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)和二烷氧基接頭的聚乙二醇聚合物的IC50值
表14含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的BRIJ_聚合物的IC50值
表15含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的IGEPAL_聚合物的IC50值
表16含p-硝基苯基磷酸酯脂肪酶抑制基團(tuán)的PPG-PEG-PPG聚合物的IC50值
表17含n-十六烷基疏水基團(tuán)和不同離去基團(tuán)的PLURONIC_聚合物的IC50值
體內(nèi)研究與對(duì)照組相比，在正常鼠中經(jīng)6天時(shí)間，評(píng)估實(shí)例8，35，36，41，42，48，62，63，67-69，71-75，78，81和82通過(guò)增加排泄物中的脂肪排泄而降低每日熱量吸收并降低體重的增加的能力。雄性Sprague-Dawley鼠(5到6周齡)分別關(guān)住并自由喂給粉末“高脂肪食物”，包括補(bǔ)充有15％重量比脂肪(包括55％可可油和45％玉米油)的標(biāo)準(zhǔn)嚙齒動(dòng)物食物。將這種食物喂給動(dòng)物5天后，稱重動(dòng)物并分類成治療組和對(duì)照組(每組6-8只動(dòng)物，每組具有相同的平均體重)。用測(cè)試化合物治療動(dòng)物6天，測(cè)試化合物加在“高脂肪食物”中，濃度(w/w)占食物的0.0％(對(duì)照組)，0.3或1.0百分比。
測(cè)量每只動(dòng)物在整個(gè)研究過(guò)程中食物消耗，并表示為每只動(dòng)物在6天治療期間消耗的總食物量。在第6天，稱重動(dòng)物，計(jì)算治療期間的總體重增加。
治療6天中的最后3天收集鼠排泄物樣品。將樣品凍干并磨成粉末。稱出樣品克數(shù)的一半轉(zhuǎn)移到提取細(xì)胞中。樣品在加速溶劑提取器(ASE200加速溶劑提取器，Dyonex公司，Sunnyvale，CA)中用95％乙醇，5％水和100 mM氫氧化鉀提取。樣品在150℃1500 psi提取17分鐘。將提取物的等分份轉(zhuǎn)移到含過(guò)量摩爾數(shù)的鹽酸的測(cè)試試管中。然后蒸發(fā)樣品并再置于含2％ Triton X-1200，1％聚氧乙烯月桂基醚和0.9％氯化鈉的清潔劑溶液中。用比色工具(德國(guó)Neuss，Wako Chemical GmbH，NEFAC)從酶上定量脂肪酸。
表18包括對(duì)照動(dòng)物和測(cè)試動(dòng)物的排泄物脂肪/消耗脂肪(如上面從酶上確定的)的值，以及與對(duì)照動(dòng)物相比經(jīng)6天時(shí)間食物消耗和體重的增加。
排泄物脂肪/消耗脂肪的計(jì)算酶測(cè)試得到的脂肪酸濃度表示為毫摩爾/毫升。毫摩爾/毫升的脂肪酸乘以從500 mg樣品中得到提取物的毫升數(shù)，得到脂肪酸的總毫摩爾數(shù)。使用中鏈到長(zhǎng)鏈脂肪酸的平均分子量將脂肪酸的總毫摩爾值轉(zhuǎn)換為脂肪酸的總毫克值。這個(gè)值對(duì)于樣品處理期間的任何稀釋都是正確的。當(dāng)結(jié)果表示為mgs/gm排泄物時(shí)，脂肪酸的總毫克數(shù)乘以2。當(dāng)結(jié)果表示為24小時(shí)內(nèi)排泄脂肪酸的總毫克數(shù)時(shí)，mgs/gm排泄物值乘以24小時(shí)內(nèi)排泄的排泄物重量克數(shù)。當(dāng)結(jié)果表示為24小時(shí)內(nèi)排泄脂肪占消耗脂肪的百分比時(shí)，24小時(shí)內(nèi)排泄的脂肪除以24小時(shí)消耗的脂肪酸的重量并乘以100。
表18選取的含脂肪酶抑制基團(tuán)的聚合物的體內(nèi)研究結(jié)果
動(dòng)物用1.0％劑量治療*p＜0.05**p＜0.01雖然本發(fā)明已特別演示并描述了其較好的具體實(shí)施，但本領(lǐng)域中的技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不背離本發(fā)明的精神和所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明范圍的情況下，可作形式上和細(xì)節(jié)上的多種變化。本領(lǐng)域中的技術(shù)人員可認(rèn)出或僅使用常規(guī)試驗(yàn)?zāi)艽_定，本文特別描述的本發(fā)明的特別具體實(shí)施的許多等同物。這樣的等同物都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟； 其中，R是氫，疏水基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；R1是活性基團(tuán)；Y是氧，硫，-NR2-或不存在；Z和Z1各自分別是，氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2和R3各自分別是，氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；m是0或1；n是0或1。
2．依據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中Y，Z和Z1每個(gè)是氧；n和m是1。
3．依據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中Y-R1是從下列基團(tuán)選取的，包括
4．依據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中-Y-R1是
5．依據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中聚合物末端被至少一個(gè)脂肪酶抑制基團(tuán)取代。
6．依據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中聚合物是聚醚。
7．依據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中聚合物包含具有下列結(jié)構(gòu)式的重復(fù)單元 其中，R是氫，疏水基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；q是整數(shù)。
8．依據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中聚合物是共聚物。
9．依據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中共聚物含親水和疏水嵌段。
10．依據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中聚合物含有一個(gè)中間疏水嵌段和在疏水嵌段每個(gè)末端的一個(gè)親水嵌段。
11．依據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中中間疏水嵌段是聚丙二醇，在聚丙二醇的每個(gè)末端的親水嵌段是聚乙二醇。
12．依據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中聚合物含有一個(gè)中間親水嵌段和在親水嵌段每個(gè)末端的一個(gè)疏水嵌段。
13．依據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中中間親水嵌段是聚乙二醇，在聚乙二醇的每個(gè)末端的疏水嵌段是聚丙二醇。
14．依據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中聚合物中間被脂肪酶抑制基團(tuán)取代。
15．依據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中聚合物包含具有下列結(jié)構(gòu)式的重復(fù)單元 其中，q是整數(shù)；R4是-OH，-NH2，-CH2NH2，-SH，或下列結(jié)構(gòu)式所表示的基團(tuán) 其中，R是氫，疏水基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；R1是活性基團(tuán)；Y是氧，硫，NR2或不存在；Z和Z1各自分別是，氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2和R3各自分別是，氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；m是0或1；n是0或1。
16．依據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中R4是-OH或由下列結(jié)構(gòu)式所表示的基團(tuán)
17．依據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中R4是-CH2NH2或由下列結(jié)構(gòu)式所表示的基團(tuán)
18．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟 其中，R是氫，疏水基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；Z是氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2和R3各自分別是，氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；p是從0到約30的整數(shù)。
19．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟 其中，環(huán)A是取代的或未取代的環(huán)脂肪族基團(tuán)或芳族基團(tuán)，或它們的組合物，含一個(gè)或多個(gè)雜原子；Z是氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2是氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；X是-PO2-，-SO2-或-CO-。
20．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟 其中，R是氫，疏水基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；Z是氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2和R3各自分別是，氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；X是-PO2-，-SO2-或-CO-；k是0到約10；p是從0到約30的整數(shù)。
21．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟 其中，在苯環(huán)上的-CO2H和-OH取代基彼此是相對(duì)或相鄰的；R5是疏水基團(tuán)，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；Z是氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2是氫，或取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)。
22．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟 其中，R是氫，疏基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；R5是疏水基團(tuán)，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；Z是氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2和R3是，任意地，氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)。
23．依據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中脂肪酶抑制基團(tuán)是 其中，p是從0到約30的整數(shù)。
24．依據(jù)權(quán)利要求23的方法，其中聚合物是聚丙烯酰胺，聚乙烯醇，聚醚，聚烯丙基胺，碳水化合物或蛋白質(zhì)。
25．依據(jù)權(quán)利要求24的方法，其中聚合物是共聚物。
26．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟 其中，R5是疏水基團(tuán)，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；Z是氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2是氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)。
27．依據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中聚合物是聚丙烯酰胺，聚乙烯醇，聚醚或聚烯丙基胺。
28．依據(jù)權(quán)利要求27的方法，其中聚合物是共聚物。
29．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟 其中，R是氫，疏水基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代發(fā)的芳族基團(tuán)；W1和W2每個(gè)任意地是氫或鹵素，其中W1或W2至少一個(gè)是鹵素；Y是氧，硫，NR2或不存在；R2和R3各自分別是氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)。
30．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟 其中，R是氫，疏水基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；Z是氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2和R3各自分別是氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；m是0或1；p是從0到約30的整數(shù)。
31．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的由至少一個(gè)含下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán)取代的聚合物的步驟 其中，R是氫，疏水基團(tuán)，-NR2R3，-CO2H，-OCOR2，-NHCOR2，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；Z是氧，亞烷基，硫，-SO3-，-CO2-，-NR2-，-CONR2-，-PO4H-或間隔基團(tuán)；R2和R3各自分別是氫，取代的或未取代的脂肪族基團(tuán)，或取代的或未取代的芳族基團(tuán)；p是從0到約30的整數(shù)。
32．依據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中聚合物是脂肪結(jié)合聚合物。
33．一種治療哺乳動(dòng)物高甘油三酯血癥的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的被一個(gè)或多個(gè)脂肪酶抑制基團(tuán)取代的聚合物的步驟。
34．一種治療哺乳動(dòng)物肥胖的方法，包括給哺乳動(dòng)物口服有效量的被至少一個(gè)脂肪酶抑制基團(tuán)取代的聚合物的步驟。
35．依據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中脂肪酶抑制基團(tuán)與脂肪酶反應(yīng)形成共價(jià)鍵。
36．依據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中脂肪酶抑制基團(tuán)與在脂肪酶活性位點(diǎn)的氨基酸殘基形成共價(jià)鍵。
37．依據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中脂肪酶抑制基團(tuán)與不在脂肪酶活性位點(diǎn)的氨基酸殘基形成共價(jià)鍵。
38．依據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中脂肪酶抑制基團(tuán)是脂肪酸的同配體。
全文摘要
本發(fā)明描述了一種通過(guò)給患者服用已被一個(gè)或多個(gè)抑制脂肪酶的基團(tuán)取代的聚合物治療患者肥胖的方法,脂肪酶是負(fù)責(zé)脂肪水解的酶。本發(fā)明進(jìn)一步涉及使用在本文所描述的方法中的聚合物,以及制備聚合物的新型中間物和方法。
文檔編號(hào)A61P43/00GK1287489SQ99802023
公開日2001年3月14日 申請(qǐng)日期1999年1月6日 優(yōu)先權(quán)日1998年1月9日
發(fā)明者W·哈瑞·曼德維勒三世, 莫莉·凱特·博利, 維凱特·R·加里加佩 申請(qǐng)人:吉爾特藥品公司