專利名稱：抑制mrp1的方法
除了外科手術(shù)和放射性治療外，對于許多癌癥，化學(xué)治療方法始終是有效的治療方法。事實上，目前某些種類的癌癥被認為可通過化學(xué)治療治愈，包括霍奇金(Hodgkin)疾病、大細胞淋巴癌、急性淋巴細胞白血病、睪丸癌和早期乳腺癌。其它癌癥，例如卵巢癌、小細胞肺和晚期乳腺癌，盡管還不能治愈，但結(jié)合化學(xué)治療顯示積極的效果。
在癌癥治療中最重要的未解決問題之一是抗藥性。在選擇對單個細胞毒性藥物的抗藥性后，細胞會變得對具有不同結(jié)構(gòu)和細胞目標的藥物，例如烷基化劑、抗代謝藥物、激素、含鉑藥物和天然產(chǎn)物具有全面抗藥性，該現(xiàn)象稱為多藥物抗藥性(MDR)。在某些類型的細胞中，該抗藥性是固有的，而在其它種類中，例如小細胞肺癌，它通常是后天的。
該抗藥性已知是多因素的，由至少兩種蛋白質(zhì)帶來170kDaPglycopro tein(MDR1)和最近鑒定的190kDa多藥物抗藥性蛋白質(zhì)(MRP1)。雖然MDR1和MRP1都屬于運輸?shù)鞍踪|(zhì)的ATP結(jié)合盒樣總科，但它們在結(jié)構(gòu)上是非常不同的，帶有低于15％的氨基酸同源性。盡管兩種蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)分歧，直至1994人們?nèi)圆恢涝贛DR1和MRP1細胞系的抗藥性類型中的一致差異。然而，MRP1的聯(lián)合或不足和對特定溶癌藥物的抗藥性是已知的，參見Cole等，“多藥物抗藥性MRP轉(zhuǎn)染的人體腫瘤細胞的藥理學(xué)表征”，Cancer Research，545902-5910。阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長春新堿和依托伯苷是MRP1的酶作用物，即MRP1能夠結(jié)合這些溶癌藥物，將它們由作用位置，細胞的核和外部移走，重新分布。Id.和Marquardt，D和Center，M.SCancerResearch，523157，1992。
阿霉素、柔紅霉素和表柔比星是溶癌藥物的蒽環(huán)類抗生素，它們是鏈霉菌的不同菌株的分離物，通過抑制核酸合成起作用。這些藥物用于治療骨骼、卵巢、膀胱、甲狀腺和尤其是乳腺腫瘤。它們還用于治療急性成淋巴細胞和成髓細胞白血病、腎胚胎瘤、成神經(jīng)細胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤和支氣管癌。
長春新堿，溶癌藥物的長春花生物堿種類的成員，是常見開花的藥草，長春花植物(Vinca rogea Linn)的提取物，長春新堿作用的機理仍在研究中，蛤與在絲分裂紡錘體中抑制微管形成有關(guān)。長春新堿用于治療急性白血病、霍奇金疾病、非霍奇金噁性淋巴瘤、橫紋肌肉瘤、成神經(jīng)細胞瘤和腎胚胎瘤。
依托伯苷，溶癌藥物的表鬼臼毒素種類的成員是鬼臼毒素的半合成衍生物。依托伯苷用作拓撲異構(gòu)酶抑制劑，和用于治療睪丸和肺的腫瘤。
人們目前仍不知道是什么決定了一個細胞系將以MDR1和MRP1機理獲得抗藥性。由于這些運輸因子的組織特異性和/或在其中一個機理是占優(yōu)勢或排他的情況下，具有不同于其它的一種選擇性抑制劑是有用的。此外，當給藥是蛋白質(zhì)的酶作用物的藥物時，有利的是共同給藥一種藥物，它是蛋白質(zhì)的選擇性抑制劑。因此，人們需要提供用作MDR1和MRP1的選擇性抑制劑。
本發(fā)明涉及式Ⅰ的化合物 其中m是1-6的整數(shù)；R是COR1、氨基、NH-Pg或NHCOR2；R1是羥基、C1-C6烷氧基或NR3R4；Pg是氨基保護基團；R2是C1-C6烷基、取代的C1-C4烷基、芳基、取代的芳基、(CH2)n-雜環(huán)、(CH2)n-取代的雜環(huán)；R3在每種情況下分別是H或C1-C6烷基；R4是C1-C6烷基、降冰片烷-2-基、芳基、取代的芳基、CH2CH(CH3)苯基、(CH2)n雜環(huán)或(CH2)n-取代的雜環(huán)；和n是0、1、或2；或其可藥用的鹽或溶劑化物。
本發(fā)明還涉及在哺乳動物中抑制MRP1的方法，其包括向需要的哺乳動物給藥有效量的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。
在另一實施方案中，本發(fā)明涉及在哺乳動物中抑制抵抗的腫瘤或易受抵抗的腫瘤的方法，其包括向需要的哺乳動物給藥有效量的式Ⅰ化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，并結(jié)合有效量的溶癌藥物。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其含有式Ⅰ化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，結(jié)合一種或多種溶癌藥物、可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
本發(fā)明基于發(fā)現(xiàn)一個選擇組的化合物，式Ⅰ的化合物是多藥物抗藥性蛋白質(zhì)(MRP1)的選擇性抑制劑，因此在抵抗的腫瘤或易受抵抗的腫瘤中用于治療MRP1帶有的多藥物抗藥性。
涉及MRP1的術(shù)語“抑制”和“抑制的MRP1”是指阻止、減輕、改善、停止、抑制、延緩或逆轉(zhuǎn)MRP1將溶癌藥物由作用的溶癌位置，最常見的是細胞的腫瘤核和外部重新分布的進程和降低其能力。
用于本文的術(shù)語“有效量的式Ⅰ化合物”是指本發(fā)明的化合物能夠抑制MRP1的數(shù)量。術(shù)語“有效量的溶癌藥物”是指能夠抑制腫瘤、抵抗等的溶癌藥物的數(shù)量。
術(shù)語“抑制抵抗的腫瘤或易受抵抗的腫瘤”是指阻止、停止、抑制、延緩或逆轉(zhuǎn)抵抗的腫瘤和/或易受抵抗的腫瘤的進程、降低其生長或殺死。
術(shù)語“抵抗的腫瘤”是指腫瘤，它抵抗化學(xué)治療，其中抵抗部分地或全部地由MRP1帶有。該腫瘤包括，但不限于，膀胱、骨骼、乳腺、肺(小細胞)、睪丸和甲狀腺的腫瘤，還包括更具體類型的癌癥，例如，但不限于，急性成淋巴細胞和成髓細胞白血病、腎胚胎腫瘤、成神經(jīng)細胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金腫瘤和支氣管癌。
“易受抵抗的”腫瘤是指腫瘤，其中抵抗性不是固有的或目前存在的，但可以在化學(xué)治療后由MRP1產(chǎn)生。因此，本發(fā)明的方法包括預(yù)防和治療給藥式Ⅰ的化合物。
術(shù)語“化學(xué)治療”是指使用一種或多種溶癌藥物，其中至少一種溶癌藥物是MRP1的酶作用物?！癕RP1的酶作用物”是指溶癌藥物，它結(jié)合MRP1，被由溶癌藥物作用的位置，(腫瘤核)和細胞外部重新分布，因而使得治療失效。
術(shù)語“處理”具有它們通常的含義，其包括防止、阻止、減輕、改善、停止、抑制、延緩或逆轉(zhuǎn)在多藥物抗藥性腫瘤中由抗藥性產(chǎn)生的MRP1的進行或降低其嚴重程度。
在本發(fā)明的通式中，一般的化學(xué)術(shù)語具有其通常的含義。例如，術(shù)語“C1-C4烷基”是指甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、環(huán)丁基、異丁基和叔丁基。術(shù)語“C1-C6烷基”是指含有1-6個碳原子的單價直鏈、支鏈或環(huán)狀飽和烴，包括C1-C4烷基。此外，C1-C6烷基還包括，但不限于，環(huán)戊基、戊基、己基、環(huán)己基等。
術(shù)語“芳基”是指苯基、芐基和萘基。
術(shù)語“雜環(huán)”是指單價、飽和、不飽和或芳香單環(huán)或稠合環(huán)系，總共分別有5-7或8-10個原子，含有1-3個分別選自氧、硫和氮的雜原子。雜環(huán)基團的實例包括，但不限于，呋喃基、吲哚基、噻吩基、異噁唑基，它們所有部分飽和或完全飽和的類似物，例如四氫呋喃等，其中雜環(huán)的連接點是環(huán)上適用于取代的任何位置。
術(shù)語“取代的雜環(huán)”是指分別被C1-C6烷基、鹵素、芐基、苯基、三氟甲基、或氧基取代1或2次的雜環(huán)。
術(shù)語“取代的芳基”是指苯基、芐基和萘基，它們分別被鹵素、羥基、三氟甲基、N(R1)2、NH-Pg、C1-C4烷氧基、芐氧基、CO2R1、SO2NH2、三氟甲氧基或硝基取代1-5次。
術(shù)語“取代的C1-C4烷基”是指C1-C4烷基，其中1-3個氫被相同的鹵化物取代，例如三氟甲基。
術(shù)語“鹵素”或“鹵化物”是指氟、氯、溴或碘。
術(shù)語“C1-C4烷氧基”是指通過氧原子連接的C1-C4烷基。
用于本文的術(shù)語“氨基保護基團”是指在化合物上的其它官能團反應(yīng)時通常用于阻斷或保護氨基官能團的氨基的取代基。該氨基保護基團的實例包括甲?；?、三苯甲基、苯二酰亞氨基、乙酰基、三氯乙酰基、氯乙?；逡阴；偷庖阴；?，尿烷型阻斷基團，芐氧羰基、9-芴基甲氧基羰基(“FMOC”)等和類似的氨基保護基團。所用的氨基保護基團的種類不是關(guān)鍵的，只要衍生的氨基對于在分子的其它的反應(yīng)條件下是穩(wěn)定的和能夠在合適的位置除去而不影響分子的其余部分。在頭胞菌素、青霉素和肽技術(shù)中使用的類似保護基團也包括在上述術(shù)語中。上述術(shù)語所指的基團的其它實例在T.W.Greene，“有機合成中的保護基團”，John Wiley and Sons，New York，N.Y，1991，第7章中描述，下文稱為“Greene”，優(yōu)選的氨基保護基團是叔丁氧羰基。
術(shù)語“羰基活化基團”是指羰基的取代基，它使得羰基有親核加成的傾向。合適的活化基團是在羰基上具有凈吸電子效果的基團，該基團包括，但不限于，烷氧基、芳氧基、含氮的芳香雜環(huán)或氨基，例如氧基苯并三唑、咪唑基、硝基苯氧基、五氯苯氧基、N-氧基琥珀酰亞胺、N，N’-二環(huán)己基異脲-O-基、N-羥基-N-甲氧基氨基等；乙酸根、甲酸根、磺酸根，例如甲磺酸根、乙磺酸根、苯磺酸根或?qū)妆交撬岣龋缓望u化物，例如是氯、溴或碘。
通常術(shù)語“可藥用的”在用作介詞時是指對有生命的生物基本上是無毒的。例如，用于本文的術(shù)語“可藥用的鹽”是指式Ⅰ化合物的鹽，它對有生命的生物基本上是無毒的。參見例如Berge，s.M，Bighley，L.D和Monkhouse，D.C“可藥用的鹽”，J.Pharm.Sci661，1977。典型的可藥用的鹽包括通過將式Ⅰ化合物與無機或有機酸或堿反應(yīng)制備的鹽。這種鹽作為酸加成或堿加成鹽分別是已知的，這些可藥用的鹽與衍生出鹽的化合物相比通常具有改善的溶解特性，因此，作為液體或乳劑通常是更可接受的。
可藥用的酸加成鹽的實例是式Ⅰ化合物的硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯基乳酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、γ-羥基丁酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、杏仁酸鹽等。
可藥用的堿加成鹽的實例是式Ⅰ化合物的銨、鋰、鉀、鈉、鈣、鎂、甲基氨基、二乙基氨基、亞乙氨基、環(huán)己基氨基和乙醇氨基鹽等。
術(shù)語“溶劑化物”是指一種或多種溶質(zhì)分子的聚集物，例如式Ⅰ化合物與一種或多種溶劑分子。
術(shù)語“合適的溶劑”是指對進行的反應(yīng)惰性，充分增溶反應(yīng)物以進行所需反應(yīng)的溶劑。合適溶劑的實例包括，但不限于，二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、乙醚、乙腈、乙酸乙酯、1，3-二甲基-2-咪唑啉酮、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、甲苯、氯苯、二甲基亞砜和它們的混合物等。
術(shù)語“羰基活化試劑”是指將羧酸基團的羰基轉(zhuǎn)化為更有利于親核加成的基團的試劑，包括，但不限于，例如在“肽”，Gross和Meienhofer，EdsAcademic Press(1979)，Ch.2和M.Bodanszky，“肽合成的原理”，2nd Ed，Springer-Verlag BerlinHeidelberg，1993中列出的試劑，下文分別稱為“肽”和“肽合成”。更具體地說，羰基活化試劑包括鹵素親核源，例如磺酰基溴、磺酰基氯、草酰基氯等；醇，例如硝基苯酚、五氯苯酚等；胺，例如N-羥基-N-甲氧基胺等；酰鹵，例如乙酰、甲酰、甲磺酰、乙磺酰、苯磺?；?qū)妆交酋｛u等和化合物，例如1，1’-羰基二咪唑、苯并三唑、咪唑、N-羥基琥珀酰亞胺、二環(huán)己基碳化二亞胺等。
術(shù)語“合適的熱力學(xué)堿”是指用作任何質(zhì)子的質(zhì)子捕集的堿，它可作為所需反應(yīng)的副產(chǎn)物產(chǎn)生，或是指提供酸作用物的可逆去質(zhì)子作用的并且對所需反應(yīng)是足夠有效的而不明顯影響任何不需要的反應(yīng)的堿。熱力學(xué)堿的實例包括，但不限于，碳酸鹽、碳酸氫鹽和氫氧化物(例如鋰、鈉或鉀的碳酸鹽、碳酸氫鹽和氫氧化物)，三-(C1-C4烷基)胺或芳香含氮雜環(huán)(例如吡啶)。
盡管本發(fā)明的化合物是有用的，但某些化合物是尤其感興趣的和優(yōu)選的。如下列出了若干組優(yōu)選化合物、制劑和方法。應(yīng)理解，列出的每個內(nèi)容可與其它列出的內(nèi)容結(jié)合以產(chǎn)生優(yōu)選的實施方案的附加組。a)m是2-6的整數(shù)；b)R是氨基；c)R是叔丁氧羰基氨基；d)R是三氟乙?；被?；e)R是3，4，5-三甲氧基苯甲酰基氨基；f)R是羧基g)R是3，4，5-三甲氧基苯氨基羧基；h)R是3，4，5-三甲氧基芐氨基羧基；i)實施例部分的化合物；j)化合物是可藥用的鹽；k)化合物是鹽酸鹽；l)其中哺乳動物是人的方法m)其中溶癌藥物選自阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長春新堿和依托伯苷的方法；n)其中腫瘤是腎胚胎腫瘤、膀胱、骨骼、乳腺、肺(小細胞)、睪丸和甲狀腺的腫瘤或與急性成淋巴細胞和成髓細胞白血病、成神經(jīng)細胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金腫瘤和支氣管癌有關(guān)的腫瘤的方法；和o)其中溶癌藥物選自阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長春新堿和依托伯苷的制劑。
本發(fā)明的化合物可通過各種方法制備，某些在如下方案中說明。制備式Ⅰ化合物的所需的特定次序取決于所合成的特定化合物、起始化合物和取代基團的相對不穩(wěn)定性。
如如下方案1中式Ⅰ化合物可由式Ⅱ化合物制備，其中R和m是如上所述的。
方案1 式Ⅰ化合物可通過將式Ⅱ化合物溶解或懸浮在合適的溶劑中和加入合適的熱力學(xué)堿制備。通常優(yōu)選和方便的溶劑是二氯甲烷。通常方便和優(yōu)選的熱力學(xué)堿是氫氧化鈉，作為在甲醇中的2N溶液加入。反應(yīng)物通常在室溫下混合，得到的溶液通常反應(yīng)30分鐘-18小時。優(yōu)選混合物被攪拌約1-約10小時，最優(yōu)選攪拌約3.5-7小時。堿通常以大量摩爾過量使用，相對于式Ⅱ化合物通常以約4-約8摩爾過程，優(yōu)選通常采用約5-約7摩爾過量。如下討論的某些式Ⅰ化合物的中間體也可通過上述方法制備。
在式Ⅰ的環(huán)化化合物中存在的任何羥基或氨基保護基團可選擇性地如Greene中所教導(dǎo)除去以得到式Ⅰ化合物的游離氨基酸或游離羥基化合物。保護基團和它們的除去方法的優(yōu)選選擇在如下制備例和實施例部分公開。
其中R是COR1的式Ⅰ化合物還可如方案2中所述由式Ⅰ(a)化合物制備，其中R5是羧基活化基團，R6是C1-C6烷氧基或NR3R4和m是如上所述的。
方案2 如方案1中所述制備的式Ⅰ(a)化合物可轉(zhuǎn)化為本發(fā)明的其它化合物。例如式Ⅰ(a)的酸可通過化學(xué)領(lǐng)域已知的方法活化以形成式Ⅲ的活化羧酸，參見例如肽、肽合成，和如下實施例和制備例部分。
式Ⅰ(b)化合物可通過將式Ⅲ化合物溶解或懸浮在合適的溶劑中，選擇性地在合適的熱力學(xué)堿存在下，加入式Ⅳ的胺制備。通常優(yōu)選和方便的溶劑是二氯甲烷。優(yōu)選的堿是三乙胺和基甲基聚苯乙烯樹脂。胺通常以摩爾過量使用，相對于式Ⅲ化合物通常采用約1.5-約3摩爾過量，優(yōu)選通常約1.8-約2.2摩爾過量。反應(yīng)通常在約0℃至溶劑的回流溫度下進行約10分鐘-18小時。優(yōu)選反應(yīng)在約15℃-約40℃下進行5分鐘-約2.5小時。
此外，式Ⅰ(a)化合物可被活化，式Ⅳ化合物的加成可如下實施例26和38中所述的一步法中進行。
其中R6是C1-C6烷氧基的式(b)化合物，即酯可通過化學(xué)領(lǐng)域中非常已知的方法制備。對于將活化羧酸轉(zhuǎn)化為酯的教導(dǎo)參見例如Larock，“綜合有機轉(zhuǎn)化過程”，978-979頁，VCH Publishers New York，N.Y1989，下文稱為“Larock”。此外，式Ⅰ(b)的這些化合物可如Larock中966-972頁中所教導(dǎo)由式Ⅰ(a)的酸直接制備。
其中R是氨基或NHCOR2的式Ⅰ化合物可如方案3中所述由式Ⅰ(c)化合物制備，其中m、Pg、R2和R5是如上所述的。
方案3 式Ⅰ(c)化合物可轉(zhuǎn)化為本發(fā)明的其它化合物。例如如Greene或如下的實施例部分中所教導(dǎo)，式Ⅰ(c)化合物可除去保護基團以形成式Ⅰ(d)化合物。式Ⅰ(d)的這些化合物可隨后轉(zhuǎn)化為本發(fā)明的其它化合物。例如溶解或懸浮在合適溶劑中的式Ⅰ(d)化合物，選擇性地在熱力學(xué)堿存在下，可用式Ⅵ化合物處理以得到式Ⅰ(e)化合物。通常優(yōu)選和方便的溶劑是二甲基甲酰胺或二氯甲烷和二甲基甲酰胺的混合物。當使用堿時，三乙胺或N-甲基嗎啉是通常優(yōu)選的堿。此外，當使用堿時，堿的式Ⅵ化合物通常以化學(xué)當量至大量摩爾過量使用。例如通常采用相對于式Ⅰ(d)化合物1.0-4的摩爾過量。當不使用堿時，式Ⅵ化合物通常以相對較大的化學(xué)計量過量使用。優(yōu)選在堿存在下用約1.8-2.2當量的式Ⅵ化合物進行反應(yīng)。反應(yīng)通常在約0℃至溶劑的回流溫度下進行約10分鐘-24小時。優(yōu)選反應(yīng)在約15℃-約40℃下進行4-約18小時。
本發(fā)明的可藥用的鹽通常通過將式Ⅰ化合物與等摩爾或過量酸或堿反應(yīng)制備。反應(yīng)物通常在共有溶劑，例如對于酸加成鹽的乙醚、四氫呋喃、甲醇、乙醇、異丙醇、苯等或?qū)τ趬A加成鹽的水、醇或氯化溶劑，例如二氯甲烷中混合。鹽通常在約1小時-約10天內(nèi)由溶液中沉淀出來，可通過過濾或其它常規(guī)方法分離。
通常用于形成酸加成鹽的酸是無機酸，例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸等，和有機酸，例如對甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、草酸、對溴苯基磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、酒石酸、苯甲酸、乙酸等。優(yōu)選的可藥用的酸加成鹽是用無機酸，例如鹽酸、氫溴酸和硫酸形成的鹽，和用有機酸，例如馬來酸、酒石酸和甲磺酸形成的鹽。
通常用于形成可藥用的堿加成鹽的堿是無機堿，例如銨或堿金屬或堿土金屬的氫氧化鈉、碳酸鹽、碳酸氫鹽等，因此，用于制備本發(fā)明的鹽的堿包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣、碳酸鈣等，鉀和鈉鹽形式是尤其優(yōu)選的。
應(yīng)認識到形成本發(fā)明的任何鹽的部分的特定抗衡離子不是關(guān)鍵的性質(zhì)，只要鹽作為整體是可藥用的和抗衡離子不對鹽的整體帶來不需要的質(zhì)量。
用于本發(fā)明的方法的起始物料可通過許多途徑獲得。例如，式Ⅱ、Ⅰ(a)和Ⅰ(c)化合物可根據(jù)方案4中所示的途徑制備，其中m和R是如上所述的。
方案4 式Ⅱ化合物可通過將式Ⅶ化合物溶解或懸浮在合適的溶劑中，加入式Ⅷ化合物和合適的熱力學(xué)堿制備。二氯甲烷是方便的溶劑，通常是優(yōu)選的。三乙胺通常是優(yōu)選的熱力學(xué)堿。該酰胺形成反應(yīng)還2城二甲基氨基吡啶(DMAP)存在下進行，式Ⅷ化合物通常并優(yōu)選以相對于式Ⅶ化合物等摩爾量使用，但稍稍過量(約0.05-0.15摩爾過量)是允許的。熱力學(xué)堿通常以稍稍摩爾過量使用，例如相對式Ⅶ化合物，通常采用約1.01-約1.2摩爾過量，約1.05-約1.15摩爾過量通常是優(yōu)選的。DMAP以催化方式使用，例如相對于式Ⅶ化合物，通常使用約5摩爾％-約15摩爾％，10摩爾％通常是優(yōu)選的。
雖然在方案1中描述的環(huán)化過程之前可進行方案2和3中所述的轉(zhuǎn)化以得到帶有完全加工的取代基的式Ⅶ化合物，但優(yōu)選在環(huán)化反應(yīng)后進行這些反應(yīng)。因此，用于方案1和4的反應(yīng)的優(yōu)選起始物料是式Ⅱ和Ⅶ化合物，其中R是NH-Pg或COR1，其中R1是C1-C6烷氧基。此外，如果方案1的反應(yīng)用其中R是COR1，和R1是C1-C6烷氧基的化合物在用于環(huán)化的條件下進行，酯將斷裂為酸，即將得到式Ⅰ(a)化合物。
式Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ和Ⅷ化合物是現(xiàn)有技術(shù)中已知的，對于商業(yè)上無法獲得的物質(zhì)可通過現(xiàn)有技術(shù)中采用的標準方法容易地合成。
用于進行方案1-4的反應(yīng)的最佳時間可通過用常規(guī)色譜法技術(shù)監(jiān)測反應(yīng)過程確定。此外，優(yōu)選在惰性氣氛下進行本發(fā)明的反應(yīng)，例如氬氣，或尤其是氮氣。溶劑的選擇通常不是關(guān)鍵的，只要所用的溶劑對于進行的反應(yīng)是惰性的和充分增溶反應(yīng)物以進行所需的反應(yīng)即可。式Ⅰ(d)和Ⅱ化合物優(yōu)選在用于隨后反應(yīng)之前分離和純化，這些化合物可在其形成過程中由反應(yīng)溶液中結(jié)晶，隨后通過過濾收集，或通過提取、蒸發(fā)或傾析除去反應(yīng)溶劑。如果需要，式Ⅰ的這些中間體和最終產(chǎn)物可通過常規(guī)技術(shù)，例如重結(jié)晶或在固體載體，例如硅膠或氧化鋁上的色譜法進一步純化。
提供如下制備例和實施例以更好地說明本發(fā)明的實踐，不應(yīng)解釋為以任何方式限制本發(fā)明的范圍。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認識到可進行各種改性而不違背本發(fā)明的精神和范圍。在說明書中提到的所有出版物是對本發(fā)明的領(lǐng)域中技術(shù)人員的指示。用于制備例和實施例的術(shù)語和縮寫具有其通常的含義，除非另有說明。例如“℃”、“N”、“mmol”、“g”、“ml”、“M”、“IR”、“MS(FD)”和“MS(IS)”是指攝氏度、當量或當量濃度、毫摩爾或毫摩爾數(shù)、克或克數(shù)、毫升或毫升數(shù)、摩爾或摩爾濃度、紅外光譜、場解吸質(zhì)譜和離子噴灑質(zhì)譜。此外，在IR光譜中列出的吸收最大值只是感興趣的數(shù)值，不是所有觀察到的最大值。
制備例制備例1N-叔丁氧羰基-N’-(3-[2-氯-6-氟苯基]-5-甲基異噁唑-4-酮基)-1，2-二氨基乙烷將N-叔丁氧羰基-1，2-二氨基乙烷(355mg，2.22mmol)、二甲基氨基吡啶(27mg，0.222mmol)和三乙胺(247mg，2.44mmol)在5ml無水二氯甲烷中混合，緩慢加入3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基氯化物(607mg，2.22mmol)。反應(yīng)物在室溫下和氮氣中攪拌3小時，反應(yīng)物用乙酸乙酯和水稀釋，分離出乙酸乙酯，用25ml1鹽酸水溶液和鹽水洗滌三次，用硫酸鈉干燥，過濾和真空濃縮。殘余物用己烷處理以結(jié)晶出794mg標題化合物。(90％)。C18H21N3O4ClF的EA計算值C，54.34；H，5.32；N，10.56。實驗值C，54.30；H，5.36；N，10.44。MS(IS)m/z 398(M+)。
制備例2N-叔丁氧羰基-N’-(3-[2-氯-6-氟苯基]-5-甲基異噁唑-4-酮基)-1，3-二氨基丙烷采用制備例1中的方法將N-叔丁氧羰基-1，3-二氨基丙烷(574mg，3.29mmol)和3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基氯化物(903mg，3.29mmol)轉(zhuǎn)化為1.36g標題化合物。(100％)。C19H23N3O4ClF的EA計算值C，55.41；H，5.63；N，10.20。實驗值C，55.17；H，5.71；N，9.99。MS(IS)m/z 412(M+)。
制備例3N-叔丁氧羰基-N’-(3-[2-氯-6-氟苯基]-5-甲基異噁唑-4-酮基)-1，4-二氨基丁烷除了反應(yīng)時間為約18小時之外，采用制備例1中的方法將N-叔丁氧羰基-1，4-二氨基丁烷(9.85mg，5.23mmol)和3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基氯化物(1.43g，5.23mmol)轉(zhuǎn)化為2.23g標題化合物。(100％)。C20H25N3O4ClF的EA計算值C，56.41；H，5.92；N，9.87。實驗值C，56.12；H，5.75；N，9.67。MS(FD)m/z 426(M+)。
制備例4N-叔丁氧羰基-N’-(3-[2-氯-6-氟苯基]-5-甲基異噁唑-4-酮基)-1，5-二氨基戊烷采用制備例1中的方法將N-叔丁氧羰基-1，5-二氨基戊烷(1.04g，5.14mmol)和3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基氯化物(1.41g，5.14mmol)轉(zhuǎn)化為2.14g標題化合物。(95％)。MS(IS)m/z412(M+)。IR(CHCl3)3496，3012，2936，1708，1663，1611，1510cm-1。
制備例5N-叔丁氧羰基-N’-(3-[2-氯-6-氟苯基]-5-甲基異噁唑-4-酮基)-1，6-二氨基己烷采用制備例1中的方法將N-叔丁氧羰基-1，6-二氨基己烷(1.02g，4.03mmol)和3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基氯化物(1.11g，4.03mmol)轉(zhuǎn)化為1.84g標題化合物。(100％)。C22H28N3O4ClF的EA計算值C，58.21；H，6.44；N，9.26。實驗值C，57.97；H，6.20；N，9.43。MS(IS)m/z 454(M+)。
制備例6甲基-4-氨基丁酸酯鹽酸鹽將N-叔丁氧羰基-4-氨基丁酸(1g，4.92mmol)溶解在10ml新鮮制備的鹽酸和甲醇的混合物(在35ml甲醇中的2.5ml乙?；?。反應(yīng)物攪拌2小時，隨后汽提。將殘余物溶解在乙酸乙酯中，用含水碳酸氫鈉和鹽水洗滌3次，用硫酸鈉干燥和過濾并濃縮，得到708mg標題化合物。(94％)。C5H12ClNO2的EA計算值C，39.10；H，7.87；N，9.12。實驗值C，38.89；H，7.65；N，8.94。MS(FD)m/z 118(M+游離胺)。
制備例7
甲基-5-氨基戊酸酯鹽酸鹽采用制備例6的方法將N-叔丁氧羰基-5-氨基戊酸(1g，4.60mmol)轉(zhuǎn)化為705mg標題化合物。(91％)。C6H14ClNO2的EA計算值C，42.99；H，8.42；N，8.36。實驗值C，43.02；H，8.15；N，8.18。MS(FD)m/z132(M+游離胺)。
制備例8甲基-6-氨基己酸酯鹽酸鹽采用制備例6的方法將N-叔丁氧羰基-6-氨基己酸(500mg，2.16mmol)轉(zhuǎn)化為357mg標題化合物。(91％)。C7H16ClNO2的EA計算值C，46.28；H，8.88；N，7.71。實驗值C，46.04；H，8.88；N，7.51。MS(FD)m/z 146(M+游離胺)。
制備例9甲基-7-氨基庚酸酯鹽酸鹽采用制備例6的方法將N-叔丁氧羰基-7-氨基庚酸(1g，4.08mmol)轉(zhuǎn)化為742mg標題化合物。(93％)。C8H17ClNO2的EA計算值C，49.10；H，9.27；N，9.27。實驗值C，49.10；H，9.18；N，7.03。MS(FD)m/z160(M+游離胺)。
制備例10甲基-N-(3-[2-氯-6-氟苯基]-5-甲基異噁唑-4-酮基)-4-氨基丁酸酯除了殘余物不用己烷處理之外，采用制備例1中的方法，將甲基-4-氨基丁酸酯鹽酸鹽(668mg，4.34mmol)和3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基氯化物(1.19g，4.52mmol)轉(zhuǎn)化為1.60g標題化合物。(100％)。C16H16N2O4ClF的EA計算值C，54.17；H，4.55；N，7.90。實驗值C，54.41；H，4.58；N，7.78。MS(FD)m/z 355(M+)。
制備例11甲基-N-(3-[2-氯-6-氟苯基]-5-甲基異噁唑-4-酮基)-5-氨基戊酸酯采用制備例10中的方法，將甲基-5-氨基戊酸酯鹽酸鹽(694mg，4.14mmol)和3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基氯化物(1.24g，4.52mmol)轉(zhuǎn)化為1.36g標題化合物。(100％)。C17H18N2O4ClF的EA計算值C，55.37；H，4.92；N，7.60。實驗值C，55.44；H，5.00；N，7.52。MS(FD)m/z 368(M+)。
制備例12甲基-N-(3-[2-氯-6-氟苯基]-5-甲基異噁唑-4-酮基)-6-氨基己酸酯采用制備例10中的方法，將甲基-6-氨基己酸酯鹽酸鹽(349mg，1.92mmol)和3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基氯化物(527mg，1.92mmol)轉(zhuǎn)化為2.23g標題化合物。(100％)。C18H20N2O4ClF的EA計算值C，56.48；H，5.27；N，7.32。實驗值C，56.66；H，5.20；N，7.07。MS(FD)m/z 382.2(M+)。
制備例13甲基-N-(3-[2-氯-6-氟苯基]-5-甲基異噁唑-4-酮基)-7-氨基庚酸酯采用制備例10中的方法，將甲基-7-氨基庚酸酯鹽酸鹽(733mg，3.75mmol)和3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基氯化物(1.03g，3.75mmol)轉(zhuǎn)化為1.48g標題化合物。(100％)。C19H22N2O4ClF的EA計算值C，57.51；H，5.59；N，7.06。實驗值C，57.78；H，5.70；N，6.80。MS(IS)m/z 396.1(M+)。
實施例實施例11-(N-叔丁氧羰基-2-氨乙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮N-叔丁氧羰基-N’-(3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基)亞乙-1，2-二胺(772mg，1.94mmol)溶解在10ml無水二甲基甲酰胺中，在氮氣中在室溫下攪拌。加入含水氫氧化鈉(5ml)，將得到的溶液攪拌4小時。反應(yīng)物在50ml1N含水鹽酸和乙酸乙酯之間分配。乙酸乙酯用25ml鹽水洗滌3次，用硫酸鈉干燥。真空濃縮溶液得到721mg標題化合物。C15H20ClN3O4的EA計算值C，57.22；H，5.34；N，11.12。實驗值C，57.21；H，5.23；N，10.97。MS(IS)m/z 376(M-H)。
實施例21-(N-叔丁氧羰基-3-氨丙基)-異噁唑開[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮除了反應(yīng)時間為6小時外，采用實施例1的方法將N-叔丁氧羰基-N’-(3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基)-1，3-二氨基丙烷(1.31g，3.18mmol)轉(zhuǎn)化為1.22g標題化合物。(99％)。C19H22ClN3O4的EA計算值C，58.24；H，5.66；N，10.72。實驗值C，58.48；H，5.52；N，10.73。MS(IS)m/z 392(M+)
實施例31-(N-叔丁氧羰基-4-氨丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮除了在濃縮后殘余物用二甲苯共沸蒸餾以除去殘余二甲基甲酰胺外，采用實施例1的方法將N-叔丁氧羰基-N’-(3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基)-1，4-二氨基丁烷(2.23g，5.23mmol)轉(zhuǎn)化為2.11g標題化合物。(99％)。C20H24ClN3O4的EA計算值C，59.19；H，5.96；N，10.35。實驗值C，58.71；H，5.92；N，9.96。MS(IS)m/z 405(M+)實施例41-(N-叔丁氧羰基-5-氨戊基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮除了反應(yīng)時間為6小時和在濃縮后殘余物由二氯甲烷∶己烷重結(jié)晶外，采用實施例1的方法將N-叔丁氧羰基-N’-(3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基)-1，5-二氨基戊烷(2.11g，4.80mmol)轉(zhuǎn)化為1.13g標題化合物。(56％)。C21H26ClN3O4的EA計算值C，60.07；H，6.24；N，10.01。實驗值C，60.07；H，6.30；N，10.11。MS(IS)m/z 420(M+)實施例51-(N-叔丁氧羰基-6-氨己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例3的方法將N-叔丁氧羰基-N’-(3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基)-1，6-二氨基己烷(1.84g，4.05mmol)轉(zhuǎn)化為1.45g標題化合物。(82％)。C22H28ClN3O4的EA計算值C，60.89；H，6.50；N，9.68。實驗值C，61.19；H，6.33；N，9.51。MS(IS)m/z 434.6(M+)實施例61-(2-氨乙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽將1-(N-叔丁氧羰基-2-氨乙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮(687mg，1.82mmol)溶解在10ml二氯甲烷中，加入三氟乙酸(3ml)。混合物在氮氣中在室溫下攪拌2小時。除去溶劑，殘余物在乙酸乙酯/己烷之間分配得到830mg標題化合物。(100％)。MS(FD)m/z 277(M+游離胺)實施例71-(3-氨丙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽除了反應(yīng)時間為3小時外，采用實施例6的方法，將1-(N-叔丁氧羰基-3-氨丙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮(922mg，2.35mmol)轉(zhuǎn)化為837mg標題化合物。(88％)。C16H15ClF3N3O4的EA計算值C，47.36；H，3.73；N，10.36。實驗值C，47.44；H，3.70；N，10.34。MS(IS)m/z 292(M+游離胺)實施例81-(4-氨丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽采用實施例7的方法，將1-(N-叔丁氧羰基-4-氨丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮(3.14g，7.75mmol)轉(zhuǎn)化為2.90g標題化合物。(89％)。C17H17ClF3N3O4的EA計算值C，48.64；H，4.08；N，10.01。實驗值C，48.49；H，3.95；N，9.91。MS(IS)m/z306(M+游離胺)實施例91-(5-氨戊基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽采用實施例7的方法，將1-(N-叔丁氧羰基-5-氨戊基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮(1.08g，2.57mmol)轉(zhuǎn)化為1.01g標題化合物。(56％)。C18H19ClF3N3O4的EA計算值C，49.84；H，4.41；N，9.69。實驗值C，50.08；H，4.23；N，9.69。MS(IS)m/z320(M+游離胺)實施例101-(6-氨己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽采用實施例7的方法，將1-(N-叔丁氧羰基-6-氨己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮(1.40g，3.23mmol)轉(zhuǎn)化為1.30g標題化合物。(90％)。C19H21ClF3N3O4的EA計算值C，50.96；H，4.73；N，9.38。實驗值C，51.20；H，4.62；N，9.31.MS(IS)m/z334(M+游離胺)實施例11和121-(N-三氟乙酸-2-氨乙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮1-(N-3，4，5-三甲氧基苯甲酰基-2-氨基乙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮將1-(2-氨乙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽(50mg，0.128mmol)懸浮在3ml無水二氯甲烷中，加入N-甲基嗎啉(12.9mg，0.128mmol)和1ml無水二甲基甲酰胺。得到的溶液在氮氣中在室溫下攪拌，加入3，4，5-三甲氧基苯甲酰基氯(59mg，0.255mmol)，得到的混合物攪拌18小時。反應(yīng)混合物通過加入乙酸乙酯和水加工，分離出乙酸乙酯，用25ml1N含水鹽酸、碳酸氫鈉和鹽水洗滌3次，在硫酸鈉上干燥乙酸乙酯并過濾。除去乙酸乙酯，殘余物用色譜法(硅膠，1∶1乙酸乙酯∶己烷)純化得到21mg三氟乙酸酰胺標題化合物和12mg苯甲酰胺標題化合物。(20％)。三氟乙酸酰胺MS(IS)m/z 372(M-H)。苯甲酰胺MS(IS)m/z 472(M+)。
實施例13和141-(N-三氟乙酸-3-氨丙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮1-(N-3，4，5-三甲氧基苯甲?；?3-氨丙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例11和12的方法，將1-(3-氨丙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽和3，4，5-三甲氧基苯甲?；?0.9當量)轉(zhuǎn)化為標題化合物，得到6mg三氟乙酸酰胺標題化合物和48mg苯甲酰胺標題化合物。(65％)。三氟乙酸酰胺MS(IS)m/z 388(M+)。苯甲酰胺MS(IS)m/z 485(M+)。IR(KBr)3284，1673，1634，1585，1339cm-1。
實施例151-(N-3，4，5-三甲氧基苯甲酰基-4-氨丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮將1-(4-氨丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽(75mg，0.179mmol)溶解在2ml無水二甲基甲酰胺中，在氮氣中在室溫下攪拌。加入三乙胺(54mg，0.537mmol)，溶液變?yōu)樽仙＜尤?，4，5-三甲氧基苯甲?；?62mg，0.268mmol)，得到的混合物攪拌18小時。反應(yīng)混合物擴乙酸乙酯稀釋，用25ml1N含水鹽酸、碳酸氫鈉和鹽水洗滌3次，在硫酸鈉上干燥乙酸乙酯，過濾和濃縮。殘余物用色譜法(硅膠，乙酸乙酯)純化，合適的餾分由二氯甲烷中重結(jié)晶得到40mg標題化合物。(45％)。MS(IS)m/z500(M+)。IR(KBr)1674，1634，1597，1585，1501cm-1。
實施例16和171-(N-三氟乙酸-5-氨戊基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮和1-(N-3，4，5-三甲氧基苯甲?；?5-氨戊基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例11和12的方法，將1-(5-氨戊基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽和3，4，5-三甲氧基苯甲?；?0.9當量)轉(zhuǎn)化為標題化合物，得到0.7mg三氟乙酸酰胺標題化合物和41mg苯甲酰胺標題化合物。(51％)。三氟乙酸酰胺MS(IS)m/z 416(M+)。苯甲酰胺MS(FD)m/z 513(M+)。IR(KBr)1667，1629，1597，1580，1500cm-1。
實施例18和191-(N-三氟乙酸-6-氨己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮和1-(N-3，4，5-三甲氧基苯甲?；?6-氨己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例11和12的方法，將1-(6-氨己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮三氟乙酸鹽和3，4，5-三甲氧基苯甲?；?0.9當量)轉(zhuǎn)化為標題化合物，得到10.7mg三氟乙酸酰胺標題化合物和36mg苯甲酰胺標題化合物。(45％)。三氟乙酸酰胺C19H19ClF3N3O3的EA計算值C，53.09；H，4.46；N，9.78。實驗值C，53.34；H，4.37；N，9.72。MS(IS)m/z 430(M+)。苯甲酰胺C27H30ClF3N3O6的EA計算值C，61.42；H，5.73；N，7.96。實驗值C，61.25；H，5.79；N，7.69。MS(IS)m/z 528(M+)。
實施例201-(3-羧基丙基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮除了反應(yīng)時間為3小時外，采用實施例1的方法將甲基-N-(3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基)-4-氨基丁酸酯(1.54g，4.35mmol)轉(zhuǎn)化為1.15g標題化合物。(82％)。MS(FD)m/z320(M+)。IR(KBr)3154，2925，1740，1732，1651，1627，1598cm-1。
實施例211-(4-羧基丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例20的方法將甲基-N-(3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基)-5-氨基戊酸酯(200mg，0.542mmol)轉(zhuǎn)化為180mg標題化合物。(100％)。C16H15ClN2O4的EA計算值C，57.41；H，4.52；N，8.37。實驗值C，57.43；H，4.53；N，8.08。MS(FD)m/z 334.1(M+)。
實施例221-(5-羧基戊基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例21的方法將甲基-N-(3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基)-6-氨基己酸酯(735mg，1.92mmol)轉(zhuǎn)化為499mg標題化合物。(74％)。C17H17ClN2O4的EA計算值C，58.54；H，4.91；N，8.03。實驗值C，58.51；H，4.99；N，7.89。MS(FD)m/z 348(M+)。
實施例231-(6-羧基己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例21的方法將甲基-N-(3-(2-氯-6-氟苯基)-5-甲基異噁唑-4-酮基)-7-氨基庚酸酯(1.49g，3.75mmol)轉(zhuǎn)化為1.07g標題化合物。(79％)。C18H19ClN2O4的EA計算值C，59.59；H，5.28；N，7.72。實驗值C，59.66；H，5.49；N，7.64。MS(FD)m/z 362(M+)。
實施例241-(4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例26的方法將5-(異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)丁酸和3，4，5-三甲氧基苯胺轉(zhuǎn)化為67mg標題化合物。(88％)。C24H24ClN3O6的EA計算值C，59.32；H，4.98；N，5.12。實驗值C，59.52；H，5.12；N，8.41。MS(FD)m/z 484.9(M-H)。
實施例251-(4-氧代-4-(3，4，5-三甲氧基芐基氨基)丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例26的方法將5-(異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)丁酸和3，4，5-三甲氧基芐胺轉(zhuǎn)化為37mg標題化合物。(47％)。C24H24ClN3O6的EA計算值C，60.06；H，5.24。實驗值C，60.20；H，5.49。MS(FD)m/z 498.9(M-H)。
實施例261-(5-氧代-5-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)戊基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮將1-(4-羧基丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮(46mg，0.137mmol)溶解在3ml二氯甲烷中，在氮氣中在室溫下攪拌。加入1-乙基-3-[3-(二甲基氨基)-丙基]碳化二亞胺鹽酸鹽(EDCI，26mg，0.137mmol)，隨后加入3，4，5-三甲氧基苯胺(25mg，0.137mmol)，將得到的混合物攪拌18小時。TLC(乙酸乙酯)顯示反應(yīng)未完全，因此，加入催化量的二甲基氨基吡啶，使反應(yīng)物攪拌約18小時。反應(yīng)物用乙酸乙酯稀釋，用1N含水鹽酸、碳酸氫鈉、鹽水洗滌3次，用硫酸鈉干燥，過濾和除去乙酸乙酯得到41mg標題化合物。(60％)。C25H26ClN3O6的EA計算值C，60.06；H，5.24；N，8.41。實驗值C，59.94；H，5.47；N，8.14。MS(FD)m/z 498.9(M-H)。
實施例271-(5-氧代-5-(3，4，5-三甲氧基芐基氨基)戊基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮將1-(4-羧基丁基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮(40mg，0.119mmol)懸浮在3ml無水二氯甲烷中，在氮氣中在室溫下攪拌。加入EDCI(23mg，0.119mmol)，隨后加入3，4，5-三甲氧基苯胺(23.6mg，0.119mmol)和催化量的DMAP，將得到的混合物攪拌18小時。TLC(乙酸乙酯)顯示反應(yīng)基本上完成。反應(yīng)物用乙酸乙酯稀釋，用1N含水鹽酸、碳酸氫鈉、鹽水洗滌3次，用硫酸鈉干燥，過濾和除去乙酸乙酯得到43mg標題化合物。(70％)。C26H28ClN3O6的EA計算值C，60.76；H，5.49；N，8.18。實驗值C，60.89；H，5.66；N，7.93。MS(FD)m/z 512.8(M-H)。
實施例281-(6-氧代-6-(3，4，6-三甲氧基苯基氨基)己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例26的方法將5-(異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)己酸和3，4，5-三甲氧基苯胺轉(zhuǎn)化為56mg標題化合物。(77％)。C26H28ClN3O6的EA計算值C，60.76；H，5.49；N，8.17。實驗值C，60.18；H，5.34；N，7.82。MS(FD)m/z 513.0(M-H)。
實施例291-(6-氧代-6-(3，4，5-三甲氧基芐基氨基)己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例26的方法將5-(異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)己酸和3，4，5-三甲氧基芐胺轉(zhuǎn)化為63mg標題化合物。(83％)。C27H30ClN3O6的EA計算值；C，61.42；H，5.73；N，7.96。實驗值C，61.32；H，5.67；N，7.68。MS(FD)m/z 527.0(M-H)。
實施例301-(7-氧代-7-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)庚基)-異噁唑并[3，4-c]]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例26的方法將5-(異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)庚酸和3，4，5-三甲氧基苯胺轉(zhuǎn)化為52mg標題化合物。(71％)。C27H30ClN3O6的EA計算值C，61.42；H，5.73；N，7.96。實驗值C，61.34；H，5.82；N，7.68。MS(FD)m/z 526.9(M-H)。
實施例311-(7-氧代-7-(3，4，5-三甲氧基芐基氨基)己基)-異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮采用實施例26的方法將5-(異噁唑并[3，4-c]-1，2-二氫-3-甲基-6-氯喹啉-2-酮基)庚酸和3，4，5-三甲氧基芐胺轉(zhuǎn)化為69mg標題化合物。(92％)。C28H32ClN3O6的EA計算值C，62.05；H，5.95；N，7.75。實驗值C，61.78；H，5.82；N，7.49。MS(FD)m/z 541(M-H)。
本發(fā)明的化合物是MRP1的抑制劑，因此，本發(fā)明的化合物可用于抑制任何具有內(nèi)在的和/或部分或全部由MRP1帶來的抗藥性的任何腫瘤。換句話說，用有效量的本發(fā)明的化合物治療該腫瘤將導(dǎo)致腫瘤對由于MRP1而使得不太有效的化學(xué)治療更敏感。
長春新堿、表柔比星、柔紅霉素、阿霉素和依托伯苷是溶癌藥物，它們是MRP1的酶作用物，參見Cole等，“多藥物抗藥性MRP轉(zhuǎn)染的人體腫瘤細胞的藥理學(xué)表征”，Cancer Research，545902-5910。由于MRP1在哺乳動物中，尤其在人體中是普遍存在的，Nooter，K，等，“在人體癌癥中與多藥物抗藥性有關(guān)的蛋白質(zhì)(MRP)基因的表達”，Clin.Can.Res，11301-1310，(1995)，其目的是采用任何試劑抑制腫瘤的化學(xué)治療會由于MRP1而變得不太有效。因此，膀胱、骨骼、乳腺、肺(小細胞)、睪丸和甲狀腺的腫瘤，和更具體類型的癌癥，例如急性成淋巴細胞和成髓細胞白血病、腎胚胎腫瘤、成神經(jīng)細胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金腫瘤和支氣管癌可用一種或多種上述溶癌藥物和本發(fā)明的化合物的結(jié)合抑制。
本發(fā)明的化合物的生物學(xué)活性用初期的篩選試驗評價，它迅速和準確地測定所測試的化合物抑制MRP1或MDR1活性。用于該逆轉(zhuǎn)能力的試驗是現(xiàn)有技術(shù)中已知的。參見例如McGrath等，BiochemicalPharmacology，383611，1989；D.Marquardt和M.S.Center，Cancer Research，523157，1992；D.Mar quardt等Cancer Research，501426，1990；和Cole等，“多藥物抗藥性MRP轉(zhuǎn)染的人體腫瘤細胞的藥理學(xué)表征”，Cancer Research，54592-5910，1994。用于MRP1傳遞的阿諾素抗藥性和MDR1傳遞的長春新堿抗藥性逆轉(zhuǎn)的試驗HL60/ADR和HL60/VCR是連續(xù)細胞系，分別用于阿諾素和長春新堿抗藥性，在增加濃度的阿諾素或長春新堿中培養(yǎng)HL60，人體急性原始粒細胞性白血病細胞系直至獲得高抗藥性變體。
HL/60ADR和HL60/VCR細胞在含有10％牛犢胎血清(FBS)和250μM/m 1GENTAMICINTM(Sigma)的RPMI 1640(Gibco)中生長。收獲細胞，用試驗介質(zhì)(與培養(yǎng)介質(zhì)相同)洗滌兩次，計數(shù)，在試驗介質(zhì)中稀釋至2×105細胞/ml。將15微升細胞等分至加入96孔組織培養(yǎng)板的孔中，每個96孔板的一欄用作負對照，加入不含有細胞的試驗介質(zhì)。
將試驗化合物和參考化合物以5mM的濃度溶解在二甲基亞砜(DMSO)，樣品在試驗介質(zhì)中稀釋至20μM，在6個孔中加入25μl每種化合物。試驗標準一式四份，將25μl0.4％DMSO加入4個孔中作為溶劑對照，將試驗介質(zhì)加入所有孔中以獲得每個孔100μl的最終體積。
將板在具有5％二氧化碳氣氛的潮濕培養(yǎng)器中在37℃培養(yǎng)72小時，采用標準條件通過四唑翁鹽的氧化測定細胞生活力和活力，板在37℃下培養(yǎng)3小時，用微量滴定板計數(shù)儀在490nm測定吸光率。
試驗化合物逆轉(zhuǎn)HL60/ADR和HL60/VCR細胞對阿諾素的抗藥性的能力通過比較含有除溶癌藥物(阿諾素)之外的試驗化合物的孔的吸光率和含有溶癌藥物而不含試驗化合物的孔的吸光率測定。對照組用于確定基礎(chǔ)以確保結(jié)果是非人工的。試驗結(jié)果用細胞生長的百分抑制率表示。在試驗濃度下單獨的溶癌藥物通常不能抑制HL60/ADR和HL60/VCR細胞的生長。
式Ⅰ的代表性化合物說明在逆轉(zhuǎn)MRP1多藥物抗藥性方面的明顯效果，與單獨的溶癌藥物相反，與溶癌藥物結(jié)合許多化合物顯示非常明顯的活性提高。此外，所試驗的大部分化合物顯示對HL60/ADR細胞系比對HL60/VCR細胞系的明顯程度的選擇性抑制。
在本發(fā)明的方法中當給藥溶癌藥物時，所使用的溶癌藥物的數(shù)量是可變的。應(yīng)理解實際給藥的溶癌藥物的量將由醫(yī)師根據(jù)有關(guān)事項，包括所治療的癥狀、所選擇的給藥途徑、給藥的實際溶癌藥物、每個患者(哺乳動物)的年齡、體重和響應(yīng)和患者癥狀的嚴重程度確定。當然，給藥的溶癌藥物的數(shù)量將患者的醫(yī)師決定和密切監(jiān)督。在決定所使用的溶癌藥物之后，“The Physician’s Desk Reference”，MedicalEconomics Company，Montvale，NJ 07645-1742出版，對于醫(yī)師在決定給藥的溶癌藥物的數(shù)量方面是有用的資源，是每年更新的。
優(yōu)選的制劑和使用這些制劑的本發(fā)明的方法是不包含溶癌藥物的方法，因此，優(yōu)選本發(fā)明的化合物與溶癌藥物分開給藥。在說明書中提到的上述溶癌藥物是商業(yè)可獲得的，可以適用于本發(fā)明方法的預(yù)配制形式給藥。
單獨的式Ⅰ化合物，或選擇性地與溶癌藥物的結(jié)合通常以藥物制劑的形式給藥，這些制劑可通過各種途徑給藥，包括口服、直腸、眼內(nèi)、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)和鼻內(nèi)。該制劑以藥物領(lǐng)域中已知的方法制備，其包括至少一種式Ⅰ的活性化合物。
本發(fā)明還包括使用藥物制劑的方法，所述制劑含有作為活性組分的式Ⅰ化合物，和選擇性地一種溶癌藥物和可藥用載體。在制備本發(fā)明的制劑過程中，活性組分通常與賦形劑混合，用賦形劑稀釋或封閉在該載體中，它們可以是膠囊、藥囊、紙或其它容器形式。當賦形劑用作稀釋劑時，它可以是固體、半固體或液體物質(zhì)，它們用作活性組分的賦形劑、載體或介質(zhì)。因此制劑可以是片劑、丸劑、粉末、錠劑、藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮劑、乳劑、溶液、糖漿、氣溶膠(作為固體或在液體介質(zhì)中)、含有例如按重量計至多10％活性化合物的軟膏、軟和硬明膠膠囊、栓劑、無菌注射溶液和無菌包裝粉末。
在制備制劑過程中，在與其它組分混合之前將需要粉碎活性化合物以得到合適的顆粒尺寸。如果活性化合物是基本上不溶解的，它通常粉碎至小于200目的顆粒尺寸。如果活性化合物是基本上溶解于水的，顆粒尺寸通常通過粉碎調(diào)節(jié)到提供在制劑中基本上均勻的分布，例如約40目。
合適賦形劑的某些實例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、黃芪膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、水、糖漿劑和甲基纖維素。制劑還可附加地包括潤滑劑，例如滑石、硬脂酸鎂和礦物油；潤濕劑；乳化和懸浮劑；防腐劑，例如甲基和丙基羥基苯甲酸酯；增甜劑；和香料劑。本發(fā)明的制劑可配制以便在給藥后通過采用本領(lǐng)域中已知的方法向患者提供快速、持續(xù)或延遲釋放的活性組分。
制劑優(yōu)選配制成單位劑量形式，每個劑量含有約5-約100mg，更常見的約10-約30mg的活性組分。術(shù)語“單位劑量形式”是指適用于人體受體和其它哺乳動物的單元劑量的物理分散的單位，每個單位含有得到所需治療效果的預(yù)定數(shù)量的活性物質(zhì)和合適的藥物賦形劑。
式Ⅰ化合物在各種劑量范圍內(nèi)是有效的，例如日劑量通常為約0.5-約30mg/kg體重。在治療成年人時，以單個或分開的劑量，約1-約15mg/kg/天的范圍是尤其優(yōu)選的。然而，應(yīng)理解化合物實際給藥的數(shù)量將由醫(yī)師根據(jù)有關(guān)事項，包括所治療的癥狀、所選擇的給藥途徑、給藥的實際化合物、每個患者(哺乳動物)的年齡、體重和響應(yīng)和患者癥狀的嚴重程度確定，因此，上述劑量范圍不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍。在某些情況下，劑量水平低于上述范圍的下限將是非常足夠的，而在其它情況下，會采用更大的劑量而不產(chǎn)生任何有害的副作用，只要在一整天內(nèi)該較大劑量首先分成若干較小劑量給藥即可。
為制備固體制劑，例如片劑，主要的活性組分與藥物賦形劑混合以形成含有本發(fā)明的化合物的均勻混合物的預(yù)配制組合物。當稱這些預(yù)配制的組合物為均勻物時，它是指活性組分平均分散在整個制劑，使得制劑可容易地分成相等有效的單位劑量形式，例如片劑、丸劑和膠囊，該固體預(yù)配制物隨后分成含有0.1-約500mg本發(fā)明的活性組分的上述類型的單位劑量形式。
本發(fā)明的片劑或丸劑可涂覆或另外化合以得到提供延長作用優(yōu)點的劑量形式。例如片劑或丸劑可含有內(nèi)劑量和外劑量組分，后者是前體之上的膜形式。兩種組分可由腸溶衣隔開，腸溶衣用于防止在胃中破碎，允許內(nèi)組分完整地進入十二指腸或延緩釋放。各種物質(zhì)可用于該腸溶衣或涂層，例如包括各種聚合物酸和聚合物酸與諸如蟲膠、十六醇和纖維素乙酸酯的物質(zhì)的混合物的物質(zhì)。
液體形式的新制劑可以用于口服或通過注射給藥，包括水溶液、有合適香味的糖漿、含水或油懸浮液和含有可食用油，例如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油的加香味的乳液，以及酏劑和類似藥物賦形劑。
用于吸入或吹入的制劑包括在藥物、水或有機溶劑或它們的混合物中的溶液和懸浮液和粉末。液體或固體制劑可含有上述合適的藥物賦形劑。制劑優(yōu)選通過用于表面或系統(tǒng)效果的口腔或鼻腔呼吸途徑給藥。在優(yōu)選藥物溶劑中的組合物可通過使用惰性氣體噴霧，可噴霧的溶液可直接由噴霧裝置呼吸或噴霧裝置可連接于面罩、帷或間歇正壓呼吸機呼吸。溶液、懸浮液或粉末制劑可優(yōu)選由以合適方式提供制劑的裝置優(yōu)選由口腔或鼻腔給藥。
如下制劑實施例僅用于舉例說明，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍?！盎钚越M分”是指式Ⅰ的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，并選擇性地含有一種或多種溶癌藥物。
制劑實施例1制備含有如下組分的更明膠膠囊數(shù)量組分(mg/膠囊)活性組分30.0淀粉305.0硬脂酸鎂5.0混合上述組分，以340mg的數(shù)量填充入硬明膠膠囊中。
制劑實施例2使用如下組分制備片劑制劑數(shù)量組分 (mg/片)活性組分 25.0微晶纖維素 200.0膠體二氧化硅 10.0硬脂酸 5.0混合組分，壓制每個重240mg的片。
制劑實施例3制備含有如下組分的干粉吸入制劑組分 重量％活性組分 5乳糖 95將活性組分與乳糖混合，將混合物加入干粉吸入器具中。
制劑實施例4制備如下含有30mg活性組分的片劑組分數(shù)量(mg/片)活性組分30.0mg淀粉45.0mg微晶纖維素 35.0mg聚乙烯基吡咯烷酮(水中的10％溶液)4.0mg羧甲基淀粉鈉4.5mg硬脂酸鎂0.5mg滑石1.0mg總共120mg活性組分、淀粉和纖維素通過20號目US篩，充分混合。聚乙烯基吡咯烷酮的溶液與得到的粉末混合，隨后它們通過16目US篩。所產(chǎn)生的顆粒在50-60℃下干燥，通過16目US篩。將預(yù)先通過30號目US篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石加入顆粒中，在混合后在壓片機上壓制產(chǎn)生每個重120mg的片。
制劑實施例5
制備如下含有40mg藥物的膠囊數(shù)量組分(mg/膠囊)活性組分40.0mg淀粉109.0mg硬脂酸鎂1.0mg總共150.0mg將活性組分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過20號目US篩，填充入每個150mg的硬明膠膠囊。
制劑實施例6制備如下每個含有25mg活性組分的栓劑組分 數(shù)量活性組分 25mg飽和脂肪酸甘油酯至2000mg將活性組分通常60號目US篩，懸浮在用最少所需加熱預(yù)先熔融的飽和脂肪酸甘油酯，隨后將混合物傾入正常2.0g容量的栓劑模型中，使其冷卻。
制劑實施例7制備如下每5.0ml劑量含有50mg藥物的懸浮液組分數(shù)量活性組分 50.0mg黃原膠 4.0mg羧甲基纖維素鈉(11％) 50.0mg微晶纖維素(89％)蔗糖 1.75mg苯甲酸鈉 10.0mg香料和色素 q.v.
純水至 5.0ml將活性組分、蔗糖和黃原膠混合，通過10號目US篩，隨后與預(yù)先制備的微晶纖維素和羧甲基纖維素的水溶液混合。苯甲酸鈉、香料和色素用一些水稀釋，在攪拌下加入。隨后加入足夠的水以產(chǎn)生所需的體積。
制劑實施例8制備如下每個含有15mg藥物的膠囊數(shù)量組分 (mg/膠囊)活性組分 15.0mg淀粉 407.0mg硬脂酸鎂 3.0mg總共 425.0mg將活性組分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過20號目US篩，以425mg的數(shù)量填充入硬明膠膠囊中。
制劑實施例9制備如下靜脈內(nèi)制劑組分 數(shù)量活性組分 250.0mg等滲鹽水 1000ml制劑實施例10制備如下表面制劑組分數(shù)量活性組分 1-10g乳化蠟 30g液體石蠟 20g白色軟石蠟 至100g將白色軟石蠟加熱直至熔融，加入液體石蠟和乳化蠟，攪拌直至溶解。加入活性組分，持續(xù)攪拌直至分散，隨后將混合物冷卻直至固化。
制劑實施例11制備如下每個含有10mg活性組分的舌下或口腔片組分 數(shù)量/片活性組分 10.mg甘油 210.5mg水143.0mg檸檬酸鈉 4.5mg
聚乙烯醇 26.5mg聚乙烯吡咯烷酮 15.5mg總共 410.0mg將甘油、水、檸檬酸鈉、聚乙烯醇和聚乙烯吡咯烷酮通過連續(xù)攪拌和保持約90℃的溫度混合在一起。當聚合物溶解在溶液中時，將溶液冷卻至約50-55℃，緩慢加入活性組分。將均勻混合物倒入由惰性物質(zhì)制造的模型中以產(chǎn)生含有厚度為約2-4mm的擴散基質(zhì)的藥物。該擴散基質(zhì)隨后切割以形成單個的具有合適尺寸的片劑。
另一用于本發(fā)明方法的優(yōu)選制劑采用經(jīng)皮提供裝置(“補片”)。該經(jīng)皮的補片可用于以控制的數(shù)量提供連續(xù)或不連續(xù)的本發(fā)明化合物的擴散，用于提供藥物的經(jīng)皮補片的結(jié)構(gòu)和用途在現(xiàn)有技術(shù)中是已知的，參見例如1991年6月11日頒布的US5023252，列為本文參考文獻。該補片可構(gòu)成用于藥物的連續(xù)、搏動或所需提供。
通常人們想要或需要將藥物制劑直接或間接輸入大腦。直接技術(shù)通常包括將藥物輸送導(dǎo)管放置在患者心室系統(tǒng)以旁路心腦障壁。一種用于將生物學(xué)因子輸送至身體的特定解剖學(xué)區(qū)域的植入提供系統(tǒng)在1991年4月30日頒布的US5011472中描述，列為本文參考文獻。
通常是優(yōu)選的間接技術(shù)通常包括配制組合物以通過將親水藥物轉(zhuǎn)化為脂溶藥物或前藥提供藥物潛伏化作用。潛伏化作用通常通過阻斷在藥物中存在的羥基、羰基、硫酸根和伯胺基團使得藥物更加脂溶和會被接納以輸送通過心腦障壁。此外，親水藥物的提供可通過高滲溶液的動脈內(nèi)擴散提高，它可方便地打開心腦障壁。
權(quán)利要求
1．式Ⅰ的化合物 其中m是1-6的整數(shù)；R是COR1、氨基、NH-Pg或NHCOR2；R1是羥基、C1-C6烷氧基或NR3R4；Pg是氨基保護基團；R2是C1-C6烷基、取代的C1-C4烷基、芳基、取代的芳基、(CH2)n-雜環(huán)、(CH2)n-取代的雜環(huán)；R3在每種情況下分別是H或C1-C6烷基；R4是C1-C6烷基、降冰片烷-2-基、芳基、取代的芳基、CH2CH(CH3)苯基、(CH2)n雜環(huán)或(CH2)n-取代的雜環(huán)；和n是0、1、或2；或其可藥用的鹽或溶劑化物。
2．權(quán)利要求1的化合物，其中m是2-6的整數(shù)，R選自叔丁氧羰基氨基、三氟乙?；被?，4，5-三甲氧基苯甲?；被?、3，4，5-三甲氧基苯氨基羧基、3，4，5-三甲氧基芐氨基羧基；或其可藥用的鹽或溶劑化物。
3．抑制哺乳動物MRP1的方法，其包括向需要的哺乳動物給藥有效量的式Ⅰ化合物 其中m是1-6的整數(shù)；R是COR1、氨基、NH-Pg或NHCOR2；R1是羥基、C1-C6烷氧基或NR3R4；Pg是氨基保護基團；R2是C1-C6烷基、取代的C1-C4烷基、芳基、取代的芳基、(CH2)n-雜環(huán)、(CH2)n-取代的雜環(huán)；R3在每種情況下分別是H或C1-C6烷基；R4是C1-C6烷基、降冰片烷-2-基、芳基、取代的芳基、CH2CH(CH3)苯基、(CH2)n雜環(huán)或(CH2)n-取代的雜環(huán)；和n是0、1、或2；或其可藥用的鹽或溶劑化物。
4．權(quán)利要求3的方法，其中哺乳動物是人體。
5．權(quán)利要求4的方法，其中式Ⅰ化合物是其中m是2-6的整數(shù)，R選自叔丁氧羰基氨基、三氟乙酰基氨基、3，4，5-三甲氧基苯甲?；被?，4，5-三甲氧基苯氨基羧基、3，4，5-三甲氧基芐氨基羧基的化合物；或其可藥用的鹽或溶劑化物。
6．抑制哺乳動物抗藥性腫瘤或易受抗藥性的腫瘤的方法，其包括向需要的哺乳動物給藥有效量的式Ⅰ化合物 其中m是1-6的整數(shù)；R是COR1、氨基、NH-Pg或NHCOR2；R1是羥基、C1-C6烷氧基或NR3R4；Pg是氨基保護基團；R2是C1-C6烷基、取代的C1-C4烷基、芳基、取代的芳基、(CH2)n-雜環(huán)、(CH2)n-取代的雜環(huán)；R3在每種情況下分別是H或C1-C6烷基；R4是C1-C6烷基、降冰片烷-2-基、芳基、取代的芳基、CH2CH(CH3)苯基、(CH2)n雜環(huán)或(CH2)n-取代的雜環(huán)；和n是0、1、或2；或其可藥用的鹽或溶劑化物；結(jié)合有效量的一種或多種溶癌藥物。
7．權(quán)利要求6的方法，其中哺乳動物是人體。
8．權(quán)利要求7的方法，其中式Ⅰ化合物是其中m是2-6的整數(shù)，R選自叔丁氧羰基氨基、三氟乙?；被?，4，5-三甲氧基苯甲?；被?、3，4，5-三甲氧基苯氨基羧基、3，4，5-三甲氧基芐氨基羧基的化合物；或其可藥用的鹽或溶劑化物。
9．權(quán)利要求7的方法，其中溶癌藥物選自阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長春新堿和依托伯苷。
10．權(quán)利要求7的方法，其中腫瘤是腎胚胎腫瘤、膀胱、骨骼、乳腺、肺(小細胞)、睪丸和甲狀腺的腫瘤或與急性成淋巴細胞和成髓細胞白血病、成神經(jīng)細胞瘤、軟組織肉瘤、霍奇金和非霍奇金腫瘤和支氣管癌有關(guān)的腫瘤。
11．藥物制劑，其含有式Ⅰ化合物 其中m是1-6的整數(shù)；R是COR1、氨基、NH-Pg或NHCOR2；R1是羥基、C1-C6烷氧基或NR3R4；Pg是氨基保護基團；R2是C1-C6烷基、取代的C1-C4烷基、芳基、取代的芳基、(CH2)n-雜環(huán)、(CH2)n-取代的雜環(huán)；R3在每種情況下分別是H或C1-C6烷基；R4是C1-C6烷基、降冰片烷-2-基、芳基、取代的芳基、CH2CH(CH3)苯基、(CH2)n雜環(huán)或(CH2)n-取代的雜環(huán)；和n是0、1、或2；或其可藥用的鹽或溶劑化物；結(jié)合一種或多種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
12．藥物制劑，其含有(a)式Ⅰ化合物 其中m是1-6的整數(shù)；R是COR1、氨基、NH-Pg或NHCOR2；R1是羥基、C1-C6烷氧基或NR3R4；Pg是氨基保護基團；R2是C1-C6烷基、取代的C1-C4烷基、芳基、取代的芳基、(CH2)n-雜環(huán)、(CH2)n-取代的雜環(huán)；R3在每種情況下分別是H或C1-C6烷基；R4是C1-C6烷基、降冰片烷-2-基、芳基、取代的芳基、CH2CH(CH3)苯基、(CH2)n雜環(huán)或(CH2)n-取代的雜環(huán)；和n是0、1、或2；或其可藥用的鹽或溶劑化物；(b)一種或多種溶癌藥物；和(c)一種或多種可藥用載體、稀釋劑或賦形劑。
13．權(quán)利要求12的制劑，其中溶癌藥物選自阿霉素、柔紅霉素、表柔比星、長春新堿和依托伯苷。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)化合物,它用于抑制抗藥性腫瘤,其中抗藥性部分或全部由MRP1帶來。
文檔編號A61K45/00GK1296408SQ99804810
公開日2001年5月23日 申請日期1999年4月7日 優(yōu)先權(quán)日1998年4月8日
發(fā)明者J·M·格魯博, B·H·諾爾曼 申請人:伊萊利利公司