專利名稱：治療糖尿病的新的脂肪酸類似物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及可用于治療和/或預(yù)防糖尿病的新的脂肪酸類似物。另外，本發(fā)明涉及包含這些脂肪酸類似物的營(yíng)養(yǎng)組合物。
本發(fā)明背景在加拿大和美國(guó)，目前認(rèn)為糖尿病及其并發(fā)癥是第三大死因，僅次于癌癥和心血管疾病。
用改性的脂肪酸治療代表了治療這類疾病的一種新途徑。
EP345,038和PCT/NO95/00195描述了非β可氧化的脂肪酸類似物的應(yīng)用。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)這些脂肪酸類似物具有較廣泛的應(yīng)用。
而且，我們現(xiàn)在已合成了有效治療糖尿病的新的脂肪酸類似物并描述了其特征。
在用該脂肪酸類似物的喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果表明這些化合物可降低脂肪組織的質(zhì)量和體重，因此它們是治療肥胖和超重的有效藥物。
而且，我們還證實(shí)了脂肪酸類似物是有效的抗糖尿病化合物、對(duì)葡萄糖和胰島素的水平具有很強(qiáng)的作用。
我們還證實(shí)了該化合物對(duì)再狹窄具有較好的作用，并且具有較好的抗氧化特性。
在加拿大和美國(guó)，目前認(rèn)為糖尿病及其并發(fā)癥是第三大死因，僅次于癌癥和心血管疾病。雖然可通過胰島素治療來控制糖尿病的急性和常見的致命癥狀，但長(zhǎng)期的并發(fā)癥預(yù)期縮短了三分之一的壽命。與非糖尿病正常人的發(fā)病率相比，糖尿病患者的失明率增加了25倍、腎疾病增加了17倍、壞疽增加了5倍、心臟病增加了2倍。
糖尿病有兩種主要形式。一種是Ⅰ型糖尿病，也叫做胰島素依賴性糖尿病(IDDM)，另一種是Ⅱ型糖尿病，也叫做非胰島素依賴性糖尿病(NIDDM)。大多數(shù)IDDM患者具有共同的病理表現(xiàn)胰島素產(chǎn)生的胰β細(xì)胞幾乎全部消失，導(dǎo)致高血糖。
積累的重要證據(jù)表明大多數(shù)IDDM是多年經(jīng)常蔓延的無癥狀期間β細(xì)胞進(jìn)行性破壞的結(jié)果。通過檢測(cè)循環(huán)的島細(xì)胞自身抗體和胰島素自身抗體可識(shí)別糖尿病前期。
需要一種無毒且無副作用、并可抑制臨床IDDM和NIDDM的化合物。
Ⅰ型糖尿病重度糖尿病，通常成年前突然發(fā)生，特征是血漿咦島素水平低下、煩渴、多尿、食欲增加、體重減輕和發(fā)作性酮酸中毒；也指IDDM。
Ⅱ型糖尿病輕度糖尿病的常見形式，常見逐漸性發(fā)作，多見于成人，特征是血漿胰島素的絕對(duì)水平正常至升高，它相對(duì)于血漿葡萄糖水平相對(duì)地低，也指NIDDM。
Ⅰ和Ⅱ型糖尿病的病因?qū)W分類一致，分別被認(rèn)為是《原發(fā)性》糖尿病。
繼發(fā)性糖尿病包括胰腺性糖尿病、胰腺外糖尿病/內(nèi)分泌性糖尿病或藥物誘導(dǎo)的糖尿病。而且，將糖尿病的一些類型分類為特殊形式。它們包括脂肪萎縮性糖尿病、肌弛緩性糖尿病和由胰島素受體紊亂所引起的糖尿病。
考慮到我們社會(huì)中糖尿病非常流行，和上面所述的與其相關(guān)的嚴(yán)重后果，任何可有效治療和預(yù)防這種疾病的治療藥物都對(duì)其健康具有很大的益處。在該領(lǐng)域需要一種可降低糖尿病患者血液中的葡萄糖濃度而沒有明顯的副作用的藥物。
因此本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種用于降低血葡萄糖而治療糖尿病的治療方法。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種用于降低血胰島素濃度以增強(qiáng)剩余胰島素的作用的治療方法。
作用機(jī)制對(duì)天然脂肪酸進(jìn)行少量改性，即用硫、硒或氧取代脂肪酸主鏈中的一個(gè)或多個(gè)碳。由式Ⅰ所定義的化合物具有獨(dú)特的生物組合作用的特性。
對(duì)十四烷基硫代乙酸(TTA)進(jìn)行了最徹底的研究，我們已證實(shí)了它們?cè)诟鞣N試驗(yàn)動(dòng)物中的一些有益作用。
這些研究表明TTA具有與天然脂肪酸非常相似的特性，主要區(qū)別在于TTA不通過線粒體β氧化系統(tǒng)氧化。但是，已證實(shí)本發(fā)明化合物的存在可增加其它(非取代的脂肪酸)的β氧化。
對(duì)大鼠施用TTA近12周可使單不飽和脂肪酸(主要為油酸)的肝濃度和血漿濃度增加一倍，而多不飽和脂肪酸(主要為亞油酸和DHA)減少了。因此，本發(fā)明化合物可使各種組織中的脂類組合物改性。還證實(shí)了本發(fā)明化合物可改變脂肪含量，并預(yù)期本發(fā)明化合物也能改變脂肪分布。
在治療期間，給大鼠、小鼠、兔和狗之類的動(dòng)物飼以中等劑量的TTA使血漿膽固醇和三甘油酯的水平都降低。我們還證實(shí)了TSA具有同樣的效果，并且已證實(shí)在位置5或7用硫取代的本發(fā)明化合物可增加β氧化，由此預(yù)期這些脂肪酸類似物也可降低三甘油酯和膽固醇的血漿水平。TTA和TSA在這一點(diǎn)的效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于諸如EPA的多不飽和脂肪酸。
如上所述，3-硫代脂肪酸的一個(gè)重要作用機(jī)制是顯著增加線粒體的脂肪酸氧化作用，該氧化作用可減少酯化脂肪酸的利用度。三甘油酯和膽固醇的合成減少了、且來源于肝的VLDL的分泌降低了(10)。這具有減少LDL產(chǎn)生的作用。所有這些作用似乎至少部分通過過氧化物酶體增殖體活化受體(PPAR)、參與脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)的普遍存在的轉(zhuǎn)錄因子來調(diào)節(jié)。我們證實(shí)了TTA是PPAR*的有效配體、調(diào)節(jié)脂肪酸和二十烷類的分解代謝的轉(zhuǎn)錄因子和PPAR*的效果較差的配體，PPAR*參與調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞分化。
肥胖癥是非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM)的通常特征，是其病情發(fā)展的危險(xiǎn)因素。NIDDM通常與高血壓、血脂異常、血漿游離脂肪酸水平升高和日益增加的心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。NIDDM患者的特征是抵抗胰島素對(duì)外周組織攝取的葡萄糖的作用和異常調(diào)節(jié)的胰島素分泌。
我們已經(jīng)證實(shí)TTA可降低高胰島素血癥，并顯著增強(qiáng)胰島素對(duì)葡萄糖利用的作用。TTA也可阻止食物誘導(dǎo)的胰島素抵抗性。相對(duì)于現(xiàn)有公知的抗糖尿病藥物glitazone,TTA不會(huì)重新增加體重。
這些作用至少可部分通過肝臟日益增加的脂肪酸流入和增強(qiáng)的脂肪酸氧化作用得到解釋。該數(shù)據(jù)因而表明了TTA在體內(nèi)脂質(zhì)和葡萄糖動(dòng)態(tài)平衡中的作用。
如本發(fā)明化合物的實(shí)驗(yàn)部分清楚顯示的，它抑制給予高脂肪或者高蔗糖食物的動(dòng)物體重和脂肪組織質(zhì)量的增長(zhǎng)。這使得本發(fā)明的化合物非常適于作用于肥胖治療的藥劑和/或營(yíng)養(yǎng)劑，即該化合物可用作減輕體重或減少脂肪組織重量的減肥劑。
而且，通過減少血液中葡萄糖的濃度，本發(fā)明的化合物可用作一種抗糖尿病藥物。我們也發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物可減少高胰島素血癥動(dòng)物的血漿胰島素的濃度。對(duì)于對(duì)胰島素具有低敏感性的動(dòng)物來說，本發(fā)明的化合物已經(jīng)顯示出可增強(qiáng)內(nèi)源性胰島素的作用。
術(shù)語(yǔ)《代謝綜合癥》用于描述多代謝綜合癥，尤其是高胰島素血癥、胰島素耐受癥、肥胖、葡萄糖不耐受癥、2型糖尿病、血脂異?；蚋哐獕?。
以上介紹的本發(fā)明的化合物對(duì)上述所有的病癥都顯示出積極的效果，即通過調(diào)節(jié)葡萄糖和脂質(zhì)動(dòng)態(tài)平衡，因此，預(yù)計(jì)本發(fā)明的化合物是用于調(diào)節(jié)上述代謝疾病(有時(shí)稱之為綜合征X)的適合藥劑。
本發(fā)明的詳細(xì)描述本發(fā)明公開了非細(xì)胞毒素濃度的改性脂肪酸類似物可用于治療和預(yù)防肥胖、高血壓和脂肪肝。
本發(fā)明涉及具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑用于制備治療和/或預(yù)防糖尿病的藥物組合物的應(yīng)用-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與-COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。
尤其是，本發(fā)明涉及具有通式Ⅰ的化合物的應(yīng)用，其中糖尿病是Ⅰ型糖尿病。
本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案涉及具有通式Ⅰ的化合物的應(yīng)用，其中糖尿病是Ⅱ型糖尿病。
還有一個(gè)實(shí)施方案涉及糖尿病的類型，它選自繼發(fā)性糖尿病，例如胰腺性糖尿病、胰腺外糖尿病/內(nèi)分泌性糖尿病或藥物誘導(dǎo)的糖尿??；或者糖尿病的特殊形式，例如脂肪萎縮性糖尿病、肌弛緩性糖尿病或由胰島素受體紊亂所引起的糖尿病。
本發(fā)明的一種實(shí)施方案是其中m≥13的式Ⅰ化合物的應(yīng)用。
本發(fā)明目前的優(yōu)選實(shí)施方案包括式Ⅰ，其中Xi=3是選自O(shè)、S、SO、SO2和Se，Xi=5-25為CH2。
十四烷基硫代乙酸(TTA)和十四烷基硒代乙酸(TSA)，即Xi=3是硫和硒，分別是目前優(yōu)選的化合物。
本發(fā)明另一方面還涉及式Ⅰ化合物用于制備治療和/或預(yù)防叫做《代謝綜癥》的多代謝綜合癥的藥物組合物的應(yīng)用，尤其是高胰島素血癥、胰島素耐受癥、肥胖、葡萄糖不耐癥、2型糖尿病、血脂異?；蚋哐獕骸?br> 本發(fā)明另一方面涉及治療或預(yù)防糖尿病的方法，所述的方法包括對(duì)需要治療的動(dòng)物施用有效量的具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑的步驟-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與-COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-R代表氫或C1-C4烷基，一條件是至少Xi之一不是CH2。
按照上述方法，優(yōu)選的實(shí)施方案如下-所述的動(dòng)物是人。
-所述的動(dòng)物是農(nóng)用動(dòng)物，例如鶉雞類的鳥、牛、綿羊、公山羊或豬哺乳動(dòng)物。
-所述的動(dòng)物是家畜或觀賞動(dòng)物，例如狗或貓。
該治療包括對(duì)需要這種治療的患者施用有效治療濃度的藥物，它可以在給藥期間動(dòng)物的血液中大體上持續(xù)保持該有效濃度。
而且，本發(fā)明涉及到一種預(yù)防和/或治療糖尿病的藥物組合物。優(yōu)選地，該藥物組合物包括脂肪酸類似物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的混合物。
本發(fā)明也涉及治療和/或預(yù)防高血糖癥、高胰島素血癥或胰島素敏感性降低的方法，該方法包括對(duì)需要治療的動(dòng)物施用有效量的具有通式(Ⅰ)的脂肪酸類似物的步驟。
本發(fā)明還涉及包括一定量具有通式(Ⅰ)的脂肪酸類似物的營(yíng)養(yǎng)組合物，它可有效地減少或防止人或非人動(dòng)物的血葡萄糖濃度的增加。
本發(fā)明也涉及式ⅠCH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的新的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑；-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與-COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。


圖1表示TTA對(duì)給予高脂肪飲食的大鼠的重量增加的影響；圖2表示TTA對(duì)給予高蔗糖飲食的大鼠的重量增加的影響；圖3表示TTA治療抑制高脂肪飲食誘導(dǎo)的高胰島素血癥；圖4表示TTA治療抑制高脂肪飲食誘導(dǎo)的胰島素耐受性；圖5表示TTA治療減少5周齡Zucker(fa/fa)大鼠的血液胰島素和葡萄糖濃度；圖6表示TTA治法減少4月齡Zucker(fa/fa)大鼠的血液胰島素和葡萄糖濃度(圖5B)；圖7表示相對(duì)于血漿葡萄糖，TTA治療產(chǎn)生的血漿胰島素降低；
圖8表示TTA療法促進(jìn)線粒體β-氧化。
本發(fā)明化合物的給藥方法作為一種藥劑，本發(fā)明化合物可以通過任何適合方法直接對(duì)動(dòng)物給藥，包括腸道外、鼻內(nèi)、口服或通過皮膚吸收的方法。可以將它們局部給藥或系統(tǒng)給藥。每種試劑的特殊給藥途徑有賴于例如動(dòng)物的醫(yī)療史。
腸道外給藥的例子包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)和腹膜內(nèi)給藥。
通常認(rèn)為，每劑量腸道外給藥的每化合物的總藥學(xué)有效量?jī)?yōu)選按患者體重計(jì)為約5 mg/kg/天-1000mg/kg/天，盡管如上所述，這將產(chǎn)生許多治療的自行處理權(quán)。對(duì)于TTA，認(rèn)為100-500mg/kg/天的劑量為優(yōu)選，對(duì)于TSA，劑量可以是10-100mg/kg/天。
如果連續(xù)給藥，典型的是本發(fā)明化合物每次通過1-4次注射/天或連續(xù)皮下注射皮下輸注給藥，例如使用微型泵。也可采用靜脈內(nèi)袋溶液。選擇適當(dāng)劑量時(shí)的關(guān)鍵因素是所得到的結(jié)果，這可通過總體重或脂肪與無脂肪量的比例的減少、或通過其它衡量有關(guān)對(duì)照或預(yù)防肥胖或預(yù)防肥胖相關(guān)疾病的標(biāo)準(zhǔn)來確定，這些是醫(yī)師認(rèn)為適當(dāng)?shù)摹?br> 對(duì)于腸道外給藥，在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物通常是按以下配制即將每個(gè)組分按所需的純度、可注射的單位劑型(溶液、懸浮液或乳劑)與藥學(xué)上可接受的載體混合，即該載體在其所使用的劑量和濃度時(shí)對(duì)接受者是無毒的、且與制劑的其它成分是相容的。
一般來說，通過將本發(fā)明化合物分別與液體載體或粉碎的固體載體或這兩者均勻并緊密地結(jié)合來制備這些制劑。然后，如需要，將產(chǎn)品制成所需的制劑。載體優(yōu)選腸道外載體，更優(yōu)選是與接受者的血液等滲的溶液。這些載體的例子包括水、鹽水、林格式溶液和右旋糖溶液。諸如固定油和油酸乙酯之類的非水載體、以及脂質(zhì)體也可用于本發(fā)明。
該載體可適當(dāng)含有少量添加劑，例如增加等滲性和化學(xué)穩(wěn)定性的物質(zhì)。這些物質(zhì)在其所使用的劑量和濃度時(shí)對(duì)接受者是無毒的，其包括緩沖劑，例如磷酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、乙酸和其它有機(jī)酸或其鹽；抗氧化劑，例如抗壞血酸；免疫球蛋白；親水聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，例如甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或精氨酸；單糖、二糖和其它碳水化合物，其包括纖維素或其衍生物、葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，例如EDTA；糖醇，例如甘露糖醇或山梨糖醇；抗衡離子，例如鈉；和/或非離子表面活性劑，例如聚山梨酯，泊洛沙姆或PEG。
對(duì)于口服藥物組合物，可以使用諸如水、明膠、樹膠、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、滑石、油、聚二醇、礦脂之類的載體物質(zhì)。這種藥物制劑可以是單位劑型，且可另外包含其它有治療價(jià)值的物質(zhì)或常見藥物佐劑，例如防腐劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、緩沖劑等等。這些藥物制劑可以是常規(guī)的液體形式例如片劑、膠囊、糖錠劑、安瓿劑等，可以是常規(guī)劑型，例如干安瓿劑和栓劑等。
采用本發(fā)明化合物的這種治療可以不限制飲食或配合飲食限制，例如限定每天的食物或卡路里攝取，這些是個(gè)別患者所需要的。
另外，本發(fā)明化合物可適當(dāng)與其它對(duì)抗或預(yù)防肥胖的療法結(jié)合進(jìn)行給藥。
參考下面的實(shí)施例可以更全面地理解本發(fā)明。但是，不應(yīng)認(rèn)為是對(duì)本實(shí)驗(yàn)部分方法肥胖的Zucker(fa/fa)大鼠這里研究用的肥胖的Zucker(fa/fa)大鼠在U 465 INSERM動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)，其最初的一對(duì)是由Harriet G.Bird實(shí)驗(yàn)室(Stow,MA,USA)提供。除另有說明，在連續(xù)的白晝-黑夜循環(huán)(早上7:00至晚上7:00光照)于21±1℃供養(yǎng)動(dòng)物，并且食物和水可自由進(jìn)食。每籠三只大鼠。每天記錄增加的重量。
Wistar大鼠重280-358雄性Wistar查爾斯河大鼠購(gòu)自AnLab有限公司(布拉格，捷克共和國(guó))，置于鐵絲網(wǎng)籠中，控制房間的溫度(21±1℃)和光照(早上7:00至晚上7:00光照)。它們都能自由進(jìn)食和飲水。每籠三只大鼠。每天記錄增加的重量和食物攝取量。
動(dòng)物飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中采用的飲食(按重量％給予)標(biāo)準(zhǔn)飲食以購(gòu)自Velaz，布拉格，捷克共和國(guó)的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室大鼠食物ST1飼養(yǎng)大鼠。
高蔗糖飲食(HS)50.3％蔗糖、4.8％明膠、3.2％干草、2.3％維它命和礦物、8.7％酵母、8.7％奶粉、12.3％酪蛋白、9％牛脂、1％葵花油。
HS+TTA即溶解在牛脂中的HS+O.3％TTA。
HS+魚油(FO)以10％Triomar代替牛脂和葵花油，Triomar購(gòu)自Pronova Biocare，挪威，它含有33.4％EPA,3.1％DPA和20.2％DHA。
高脂肪(HF)1.9％明膠、5.7％麥麩、7.7％維它命和礦物、25.4％玉米淀粉、25.7％酪蛋白、26.8％牛脂和7.1％葵花油。
HF+TTA即溶解在牛脂中的HF+0.4％TTA。
HF+FO以10％Triomar代替10％牛脂。
靜脈內(nèi)葡萄糖耐受試驗(yàn)5小時(shí)禁食后，通過腹膜內(nèi)注射戊巴比妥鈉(50mg/kg)麻醉雄性Zucker(fa/fa)大鼠(5周齡)。在隱靜脈中注射葡萄糖(0.55g/kg)，葡萄糖注入后0、5、10、15、20和30分鐘時(shí)從尾靜脈收集血樣至有肝素的試管中。將樣本置于冰上、離心并且將血漿貯存在-20℃直到分析。
高胰島素血癥的正常血糖控制(clamp)給予它們各自食物21天后(參見上述)，通過注射甲苯噻嗪鹽酸鹽(Rometar SPOFA，布拉格，捷克共和國(guó)；10mg/ml)和氯胺酮鹽酸鹽(Narkamon SPOFA，布拉格，捷克共和國(guó)；75mg/ml)麻醉大鼠，并且如Koopmans等人描述的(Koopmans,S.J.，等，Biochim Biophys Acta,1115,2130-2138 1992.)以長(zhǎng)期的(chronic)頸動(dòng)脈和頸靜脈導(dǎo)管注入。按照Kraegen等人的方案實(shí)施(Kraegen,E.W.等人，Am J Physiol,248,E353-E362 1983)，控制研究前的手術(shù)后，插入導(dǎo)管的大鼠允許恢復(fù)2天。如此，手術(shù)后第三天，給意識(shí)未受限制的大鼠連續(xù)灌輸劑量為6.4mU/kg/分鐘的豬胰島素(Actrapid,Novo Nordisk，丹麥)，以達(dá)到血漿胰島素水平在生理學(xué)范圍之上。通過30％w/v葡萄糖溶液(Leciva，布拉格，捷克共和國(guó))的可調(diào)灌輸，動(dòng)脈的血糖濃度控制在基礎(chǔ)禁食水平。每隔15分鐘從葡萄糖灌輸起始收集用于確定血漿葡萄糖和胰島素濃度的血液樣本。90分鐘后，斷開大鼠的灌輸，立即處死，收集血液并分離血漿，解剖肝臟和附睪脂肪組織墊并稱重。
血漿參數(shù)的測(cè)量采用酶法測(cè)量葡萄糖(GLU,Boehringer Mannheim，德國(guó))，游離脂肪酸(NEFA,C ACS-ACOD試劑盒；Wako Chemicals,Dalton,USA)和b-羥基丁酸鹽(310-A試劑盒；Sigma Diagnostics Inc.,St.Louis,USA)濃度。通過Zucker大鼠標(biāo)準(zhǔn)的大鼠胰島素的放射性免疫測(cè)定(CIS國(guó)際生物公司，Gif sur Yvette，法國(guó))確定胰島素濃度。對(duì)于Wistar查爾斯河大鼠，借助于Beckman葡萄糖分析儀(Fullerton,CA,USA)測(cè)定血漿葡萄糖濃度。采用Linco研究公司(St.Charles,MO,USA)的放射免疫分析試劑盒測(cè)定血漿胰島素水平。通過法國(guó)bioM*rieux,Marcy-l’Etoile的酶法檢測(cè)磷脂。通過美國(guó)no.SA4-0324L90 Technicon法，檢測(cè)三?；视?，通過美國(guó)no.SA4-0305L90 Technicon法檢測(cè)膽固醇。
核后和線粒體片段的制備和酶活性的檢測(cè)將從單個(gè)的老齡的Zucker大鼠新鮮分離的肝臟以冰冷的蔗糖緩沖液(0.25M蔗糖，10mM HEPES(pH7.4)和2mM EDTA)均質(zhì)化。采用按照DeDuve等人的制備差示離心法(DeDuve,C.，等，《生物化學(xué)雜志》，60,604-6171955.)制備核后和線粒體片段。改性、純度和收率如早期所述(Garras，A.,等，Biochim.Biophs.Acta.1255,154-160 1995)。如早期描述的(willumsen,N.，等，《脂類研究雜志》，34,13-22 1993)，采用[1-14C]-棕櫚酰-輔酶A和[1-14C]-棕櫚酰-L-肉毒堿(放射化學(xué)中心，Amersham,英國(guó))作為底物，檢測(cè)核后和富含線粒體片段的酸溶物。如Bremer描述的(Bremer,J.,Biochim.Biophys.Acta,665,628-631 1981.)，檢測(cè)主要在核后和線粒體片段中的肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-Ⅰ和-Ⅱ活性，按照Clinkenbeard等人的方法(Clinkenbeard,K.D.，等，《生物化學(xué)雜志》,250,3108-3116 1975.)，檢測(cè)3-羥基-3-甲基戊二?；?輔酶A合酶。
RNA分析按照以前所述(Vaagenes,H.，等，《生化藥理學(xué)》(Biochem.Pharmacol.),56,1571-1582 1998.)進(jìn)行RNA提取(Chomczynski,P.，等，《分析生化》(Anal.Biochem.),162,156-159 1987.)、尼龍濾器上的RNA的Northern印跡法分析和狹線印跡分析，以及固定RNA的雜化作用。下列cDNA片段用作探針CPT-Ⅰ,(Esser,V.等，《生物化學(xué)雜志》(J.Biol.Chem.),268,5817-5822,1993),CPT-Ⅱ(Woeltje,K.F.,等，《生物化學(xué)雜志》(J.Biol.Chem.),265,10720-10725 1990.),3-羥基-3-甲基戊二?；?輔酶A合酶(Ayte,J.，等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.,87,3874-3878 1990.)，和激素敏感脂酶(Holm,C.，等，Biochim.Biophys.Acta,1006,193-197 1989.)。預(yù)計(jì)相關(guān)的RNA表達(dá)的水平與對(duì)相應(yīng)的28S rRNA水平雜交的放射活性探針的數(shù)量相同。
結(jié)果實(shí)施例1．化合物的制備和表征a)新化合物的合成根據(jù)有關(guān)具有下列改性的3-取代類似物(見下文)的一般描述來合成具有不定位的雜原子的脂肪酸烷基-鹵被鏈烷酸(Alcanoic)-鹵取代，HS-CHCOOR被烷基-SH取代。
對(duì)下列脂肪酸類似物進(jìn)行制備和表征

按如下所述純化產(chǎn)物。純度＞95％。通過質(zhì)譜測(cè)定法驗(yàn)證其結(jié)構(gòu)。
b)3-取代的脂肪酸類似物的合成根據(jù)下列常用方法可制備本發(fā)明所用的其中取代基Xi=3是硫原子或硒原子的化合物X為硫原子本發(fā)明的硫取代化合物可以根據(jù)下面所示的常規(guī)方法制備 按照EP-345,038所述制備硫化合物，即十四烷基硫代乙酸(TTA)(CH3-(CH2)13-S-CH2-COOH)。
X為硒原子本發(fā)明的硒取代化合物可以根據(jù)下面所示的常規(guī)方法制備1．烷基-鹵+KSeCN烷基-SeCN…2．烷基-SeCN+BH4-烷基-Se-3．烷基-Se-+O2烷基-Se-Se-烷基此化合物可通過從乙醇或甲醇的仔細(xì)結(jié)晶而純化。 5．烷基-Se-+鹵-CH2-COOH烷基-SeCH2-COOH可以通過從乙醚和己烷的結(jié)晶來純化最終化合物，例如當(dāng)烷基是十四烷基，CH3-(CH2)13-Se-CH2-COOH(十四烷基硒代乙酸(TSA))。可以通過NMR、IR和分子量測(cè)定來全面表述該成品的特性。
在歐洲專利號(hào)345,038和國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朩O97/03663中描述了這些硫和硒化合物以及其中式Ⅰ的X為氧(O)、硫的一氧化物(SO)和二氧化物(SO2)的化合物的合成和分離方法。
實(shí)施例2TTA的毒性研究根據(jù)GLP原則由英國(guó)Corning Hazleton(歐洲)進(jìn)行了狗的28天毒性研究?？诜o予劑量達(dá)500mg/kg/天的TTA通常完全能忍受。在給予高劑量的動(dòng)物中，一些脂類相關(guān)參數(shù)降低了。這與TTA的藥理活性一致。
500mg/kg/天的劑量也使體重減輕了。50或500mg/天/kg的劑量沒有出現(xiàn)毒性。
英國(guó)Covance有限實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了誘變活性試驗(yàn)。結(jié)論是TTA和TSA沒有誘導(dǎo)鼠沙門氏桿菌和大腸桿菌的菌株突變。而且，當(dāng)在小鼠淋巴瘤細(xì)胞和L5178Y中試驗(yàn)時(shí)，TTA沒有致突變。
在鼠沙門氏桿菌和大腸桿菌中試驗(yàn)的化合物的濃度為3-1000mg/平板(TTA)和2-5000mg/平板(TSA)。在小鼠淋巴瘤細(xì)胞、L5178Y中，濃度為2,5-50mg/ml。
在這些試驗(yàn)中沒有發(fā)現(xiàn)TTA和TSA產(chǎn)生致突變。在培養(yǎng)的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞中對(duì)TSA和TTA進(jìn)行了染色體畸變?cè)囼?yàn)，試驗(yàn)劑量(12-140mg/ml)沒有誘導(dǎo)畸變。
因此本發(fā)明化合物在這方面作為藥物化合物具有潛在作用。
實(shí)施例3．在肥胖動(dòng)物中TTA產(chǎn)生的降脂作用實(shí)驗(yàn)開始時(shí)將重100g的雄性肥胖Zucker fa/fa大鼠成對(duì)地置于金屬絲籠中，室內(nèi)保持12小時(shí)白晝一黑夜循環(huán)和20±3℃恒溫。在實(shí)驗(yàn)開始之前，動(dòng)物在這些條件下至少要適應(yīng)一周。
將按照先前描述所制備的TTA(十四烷基硫代乙酸)，和棕櫚酸(對(duì)照)，懸浮在0.5(w/v)羧甲基纖維素(CMC)中。兩組都采用六只動(dòng)物。TTA(十四烷基硫代乙酸)和棕櫚酸給藥劑量為300mg/天/kg體重，經(jīng)胃插管(管飼法)給藥10天，每天1次。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束之前大鼠禁食2小時(shí)。收集血液和器官。如方法部分所述的，采用自動(dòng)分析儀測(cè)定血漿中的脂質(zhì)濃度。表1報(bào)告了所得結(jié)果。
表1TTA對(duì)肥胖Zucker fa/fa大鼠的脂質(zhì)水平的作用

結(jié)果清楚地顯示TTA降低了血漿中甘油三脂、膽固醇和磷酯的水平。
實(shí)施例4正常動(dòng)物(Wistar大鼠)中TTA和TSA產(chǎn)生的降脂作用實(shí)驗(yàn)開始時(shí)將重180-200g的雄性Wistar大鼠分別置于金屬絲籠中，室內(nèi)保持12小時(shí)的白晝-黑夜循環(huán)和20±3℃恒溫。在實(shí)驗(yàn)開始之前，動(dòng)物在這些條件下至少要適應(yīng)一周。
將TTA、TSA和二十碳五烯酸(EPA)懸浮在0.5％(w/v)羧甲基纖維素(CMC)中。每個(gè)治療采用六只動(dòng)物，同時(shí)給予大鼠0.5％CMC溶液作為對(duì)照。在施用試驗(yàn)化合物后，大鼠禁食12小時(shí)并以鹵乙烷麻醉。將EPA和脂肪酸衍生物經(jīng)胃插管(管飼法)給藥7天，一天一次。通過心臟穿刺收集血樣，如方法部分總結(jié)的，確定血漿中的脂質(zhì)濃度。結(jié)果如表2所示表2TTA、TSA和EPA對(duì)大鼠血漿脂質(zhì)水平的作用

表2顯示TTA對(duì)大鼠血液內(nèi)的脂質(zhì)具有良好的降低作用。顯然要達(dá)到與TSA獲得的血漿脂質(zhì)濃度下降相同的效果，需要100倍劑量的EPA。此外，本發(fā)明取代的脂肪酸化合物比純的EPA和魚油在降低血漿脂質(zhì)上更有效。因此，它們可有效地用作醫(yī)用化合物。
實(shí)施例5TTA對(duì)高脂肪飲食飼養(yǎng)的Wistar查爾斯河大鼠的影響以三種不同的飲食(參見方法)隨意飼養(yǎng)雄性Wistar查爾斯河大鼠(280-360g)3周。之后，斬首處死，解剖肝臟和附睪脂肪組織墊并稱重。
給Wistar大鼠食用高脂肪食物，從而提高了附睪和腹膜后的脂肪墊重量。TTA治療抑制了脂肪組織質(zhì)量的增長(zhǎng)，并且該作用與食物的消耗無關(guān)，這點(diǎn)是相同的(高脂肪15.1±1.1對(duì)比高脂肪+TTA14.8±1.3g/鼠/天)。
表3三周期間，添加和不添加TTA的高脂肪飲食對(duì)高脂肪飲食飼養(yǎng)的Wistar查爾斯河大鼠的體重增長(zhǎng)、肝臟重量和脂肪組織重量的影響。

數(shù)值以平均值±SEM表示。
實(shí)施例6TTA降低正常大鼠總體重隨機(jī)選擇2組6只雄性Wistar大鼠，研究它們?cè)?2周期間重量的增長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)開始測(cè)量每只Wistar大鼠的體重。在12周的實(shí)驗(yàn)期間，所有兩組動(dòng)物分別食用同樣數(shù)量的食物(營(yíng)養(yǎng)物)。兩組中的一組動(dòng)物口服給予含有TTA的藥物。其它一組是對(duì)照組(CMC)。12周后再測(cè)量大鼠的體重。
表4給出的結(jié)果顯示口服給藥TTA導(dǎo)致顯著的重量損失。
表4TTA對(duì)12周治療后的雄性Wistar大鼠體重的影響

實(shí)施例7TTA對(duì)高脂肪飲食飼養(yǎng)的Wistar查爾斯可大鼠的影響圖1表示經(jīng)3周后體重增長(zhǎng)(g)/食用食物總量(g)的累積值。通過每天平均增長(zhǎng)的體重除以當(dāng)天食用的食物平均數(shù)量，計(jì)算該數(shù)值。飲食的縮寫和說明參見方法部分。
方法部分給出了食物組合物。
實(shí)施例8TTA對(duì)高蔗糖飲食飼養(yǎng)的Wistar查爾斯河大鼠的影響圖2表示經(jīng)3周體重增長(zhǎng)(g)/食用食物總量(g)的累積值。通過每天平均增長(zhǎng)的體重除以當(dāng)天食用的食物平均數(shù)量，計(jì)算該數(shù)值。飲食的縮寫和說明參見方法部分。
方法部分給出了食物組合物。
實(shí)施例9TTA對(duì)肥胖動(dòng)物的體重增長(zhǎng)、肝臟和脂肪組織重量的影響還試驗(yàn)了TTA對(duì)肝臟和脂肪組織重量的影響。結(jié)果如表5所示。
按300/kg/天給5周齡的雄性Zucker(fa/fa)大鼠食用懸浮于0.5％CMC中的TTA。對(duì)照動(dòng)物僅給予CMC。治療11天后，脫頸椎處死大鼠，解剖肝臟和附睪脂肪組織墊并稱重。數(shù)值是對(duì)照組6只動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)組6只動(dòng)物的平均值±SD。表5TTA對(duì)幼齡肥胖Zucker(fa/fa)大鼠的體重增長(zhǎng)、肝臟和脂肪組織重量的影響。

實(shí)施例10．
TTA引起狗的體重減輕實(shí)驗(yàn)期間將3只雄性狗(4-6月齡)單獨(dú)放置。每天早上定量給藥后，提供每個(gè)動(dòng)物400g的SQC食物A，在下午清除任何殘留食物。該藥物以膠囊形式口服給藥28天，一天一次。
表6以500mg TTA/kg/天治療4周的雄性狗的平均體重

實(shí)施例11．TTA療法抑制HF飲食引起的正常大鼠的高胰島素血癥將重280-360g的大鼠分成3組(n=6)，并且以三種不同的飲食飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)鼠食，高脂肪飲食(HF)和添加TTA的HF。分別給予飲食21天，在頭天晚上禁食后從尾靜脈收集血液。數(shù)值以平均值±SEM表示。通過ANOVA分析結(jié)果，不同的字母表示統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性(p＜0.05)。
圖3顯示TTA療法抑制高脂肪飲食引起的Wistar查爾斯河大鼠的高胰島素血癥。
實(shí)施例12TTA治療抑制HF飲食引起的正常大鼠的胰島素耐受性將重330±20g的大鼠分成3組(n=9)，并且食用三種不同的食物標(biāo)準(zhǔn)鼠食、高脂肪飲食(HF)和添加TTA的HF。分別給予食物21天后，如材料和方法部分所述的，在意識(shí)清醒的動(dòng)物中進(jìn)行90分鐘的高胰島素血癥的血糖正常控制。從血糖變得穩(wěn)定的控制期間，即，控制開始后45-90分鐘檢測(cè)葡萄糖灌輸速度(GIR)，數(shù)值以平均值±SEM表示。
制定一項(xiàng)高胰島素血癥的血糖正?？刂品桨福栽囼?yàn)攝取TTA飲食是否會(huì)提高喂養(yǎng)高脂肪引起的大鼠胰島素功能的損傷。90分鐘的高胰島素血癥的血糖正?？刂飘a(chǎn)生穩(wěn)定水平的血漿葡萄糖和血漿胰島素，研究的三組均無區(qū)別。相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)飲食喂養(yǎng)的Wistar大鼠，HF組中外源性葡萄糖輸注速率(GIR)有顯著的下降以維持血糖正常(圖4)。有趣的是，如完全正常的GIR所證明的，添加TTA的HF飲食抑制了這些大鼠的胰島素耐受性的發(fā)展。這顯示了TTA對(duì)體內(nèi)胰島素功能的有益作用。
圖4顯示TTA療法抑制高脂肪飲食引起的Wistar查爾斯河大鼠的胰島素耐受性。
實(shí)施例13TTA對(duì)肥胖動(dòng)物的血漿胰島素和葡萄糖水平的作用5周齡Zucker(fa/fa)大鼠如圖5所示，TTA療法減少了近40％血漿胰島素濃度，同時(shí)血糖濃度大約降低15％。
用口服管飼法對(duì)大鼠(n=6)施用劑量為300mg/kg/天的懸浮在O.5％CMC中的TTA。治療11天后，脫頸椎處死大鼠。如方法部分所示，收集血液、并測(cè)量胰島素和葡萄糖的水平。數(shù)值為平均值±S.D。
按照Z(yǔ)ucker,L.M.等所述(Sparks,J.D.等，《代謝》(Metabolism)，47,1315-1324 1998.)，這些幼齡動(dòng)物并沒有發(fā)生高血糖癥。
4月齡肥胖Zucker(fa/fa)大鼠圖6表示TTA對(duì)4月齡Zucker(fa/fa)大鼠、即已發(fā)生高血糖癥的大鼠的血液胰島素和葡萄糖水平的作用(Sparks,J.D.等，《代謝》(Metabolism),47,1315-1324 1998.)。
給大鼠食用含(n=5)或不含(n=6)0.15％TTA的標(biāo)準(zhǔn)飲食。治療21天后，收集血液，并測(cè)量胰島素和葡萄糖的水平。數(shù)值為平均值±S.D。
實(shí)施例15相對(duì)于葡萄糖，TTA治療降低血漿胰島素為了研究TTA治療是否引起胰島素對(duì)葡萄糖利用的作用增強(qiáng)，進(jìn)行了靜脈內(nèi)葡萄糖耐受試驗(yàn)(IVGTT)。5周齡Zucker(fa/fa)大鼠中，相對(duì)于葡萄糖，TTA療法導(dǎo)致顯著的低血漿胰島素(圖7A)。IVGTT葡萄糖曲線是正常的，且在TTA治療組和對(duì)照組大鼠之間比較起來是類似的(圖7B)。
實(shí)施例16TTA對(duì)線粒體β-氧化作用的影響給肥胖Zucker(fa/fa)大鼠食用含(n=5)或不含(n=6)0.15％TTA的標(biāo)準(zhǔn)飲食。治療21天后，脫頸椎處死大鼠并摘除肝臟。從個(gè)體肝臟中分離線粒體片段。采用[1-14C]-棕櫚酰-輔酶A和[1-14C]-棕櫚酰-L-肉毒堿作底物測(cè)定脂肪酸氧化速率，在線粒體片段中測(cè)定(A)CPT-Ⅰ(B)和CPT-Ⅱ(C)。進(jìn)行RNA純化和雜交實(shí)驗(yàn)。通過放射自顯影圖的光密度分析(densiometric)掃描測(cè)定有關(guān)的mRNA水平，不同的mRNA水平恢復(fù)正常至相應(yīng)的28s rRNA，對(duì)照組的平均值設(shè)為1。分別用棕櫚酰-輔酶A和棕櫚酰-L-肉毒堿作為底物，對(duì)照組肥胖動(dòng)物的酸溶性產(chǎn)品的形成是1.3±0.7和5.3±2.2nmol/g肝臟/分鐘。對(duì)照組大鼠的CPT-Ⅰ活性是22±4.9nmol/g肝臟/分鐘，對(duì)照組大鼠CPT-Ⅱ活性是270±115nmol/g肝臟/分鐘。數(shù)值表示為平均值±S.D。
TTA給藥提高酮體的血漿濃度，引起FFA/酮體比率顯著下降(表7)。這些數(shù)據(jù)顯示4月齡肥胖Zucker(fa/fa)大鼠的TTA治療，促進(jìn)了肝臟的線粒體β-氧化作用和生酮作用。的確，以棕櫚酰-輔酶A和棕櫚酰-L-肉毒堿作為底物(圖8A)測(cè)量時(shí)，對(duì)肥胖Zucker(fa/fa)大鼠的TTA治療增加了超過7倍的肝臟脂肪酸氧化作用。這種β-氧化作用的誘導(dǎo)伴隨著CPT-Ⅰ(圖8B)和CPT-Ⅱ(圖8C)mRNA活性和水平的提高。
此外，生酮作用中的限速酶的活性也提高了(表7)。
表7TTA對(duì)老齡肥胖Zucker大鼠血漿游離脂肪酸(FFA)和酮體(4-羥基丁酸鹽)濃度的影響。

對(duì)照和實(shí)驗(yàn)組的數(shù)據(jù)均是六只動(dòng)物的平均值±SD。測(cè)定血漿中游離脂肪酸(FFA)和酮體(4-羥基丁酸鹽)，并且測(cè)定由21周齡雄性肥胖Zucker(fa/fa)大鼠肝臟制備的線粒體片段中的3-羥基-3-甲基戊二酰(HMG)，這些大鼠食用15天的標(biāo)準(zhǔn)飲食(對(duì)照)，或者食用含有0.15％TTA的標(biāo)準(zhǔn)飲食。
實(shí)施例17TTA對(duì)肝臟三酰甘油水平的作用由TTA引起的顯著增加的線粒體脂肪酸氧化作用將減少脂肪酸的酯化利用度。因而，減少了三酰甘油和膽固醇的合成，且減少了肝臟的VLDL分泌。這反應(yīng)在肝臟的三酰甘油水平降低，血漿中的三酰甘油降少，以及脂肪組質(zhì)量的減少。基本的和總的lypolysis并沒有變化(數(shù)據(jù)未顯示)，血漿游離脂肪酸和酮體的比率下降(數(shù)據(jù)未顯示)。這表明，增加了來自外周組織的脂肪酸至肝臟氧化的流量。
甚至增長(zhǎng)的肝臟三酰甘油水平也可以通過TTA減少。食用脂肪酸氧化作用抑制劑的大鼠會(huì)提高導(dǎo)致脂肪肝的肝臟三酰甘油水平。十四烷基-4-硫代丙酸(TTP)是一種4位上具有硫原子的脂肪酸類似物。由于線粒體抑制因子形成，這種類似物抑制脂肪酸的β-氧化作用。用這種類似物飼養(yǎng)的大鼠可產(chǎn)生肥胖。然而，如果給大鼠喂食TTA和TTP的混合物，則可以避免脂肪肝的形成(表8)。這證明了TTA可用于肝臟三酰甘油水平升高的疾病的治療。
雄性Wistar大鼠可自由獲取水和鼠平衡飲食。給它們食用懸浮在0.5％CMC中的棕櫚酸或脂肪酸類似物6天。在一些實(shí)驗(yàn)中，在同時(shí)給予6天TTA和TTP之前，單獨(dú)食用3天TTA或TTP。實(shí)驗(yàn)?zāi)?，前天晚上大鼠禁食，處死，摘除肝臟并均質(zhì)化。在勻漿中測(cè)定三酰甘油。
表8以棕櫚酸和脂肪酸類似物治療6天的大鼠的肝臟三酰甘油水平(TTA150mg/kg/天－TTP300mg/kg/天)

實(shí)施例18硫原子自脂肪酸的羧酸基團(tuán)進(jìn)一步移動(dòng)至預(yù)定位置，這樣合成了脂肪酸類似物。當(dāng)硫原子取代于奇數(shù)位(5,7,9等)的碳鏈時(shí)，這些類似物被部分β-氧化。β-氧化每次從脂肪酸的羧基端去掉兩個(gè)C原子，這些類似物從而可β-氧化直到硫原子轉(zhuǎn)至3-位。因而可以認(rèn)為這些類似物具有類似于TTA的生物效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)已經(jīng)顯示，與碳鏈奇數(shù)位為硫原子相關(guān)的脂肪酸類似物均會(huì)提高線粒體的β-氧化作用(表9)。
如實(shí)施例16，采用[1-14C]-棕櫚酰-L-肉毒堿作為底物，測(cè)定線粒體的β-氧化。
表9不同脂肪酸類似物對(duì)大鼠肝臟內(nèi)線粒體β-氧化作用的影響

實(shí)施例19實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，將重100g的雄性肥胖Zucker fa/fa大鼠成對(duì)地置于金屬絲籠中，室內(nèi)保持12小時(shí)白晝-黑夜循環(huán)和20±3℃恒溫。在實(shí)驗(yàn)開始之前，動(dòng)物在這些條件下至少要適應(yīng)一周。
將TTA和棕櫚酸(對(duì)照)懸浮于0.5％(w/v)羧甲基纖維素(CMC)中，其給藥劑量為300mg/天/kg體重，經(jīng)胃插管(管飼法)給藥10天，每天1次。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束之前大鼠禁食2小時(shí)。收集血液和器官。從肝臟和血漿中提取總的脂質(zhì)。用Carlo Erba 2900氣相色譜分離之前，蒸發(fā)、皂化和酯化該脂質(zhì)。
表10化合物Ⅰ(十四烷基硫代乙酸)對(duì)肥胖Zucker fa/fa大鼠的脂肪酸組合物的作用

表10表示TTA口服給藥能提高肝臟和血漿中油酸的水平。另外TTA的δ-9-去飽和產(chǎn)物累積在血漿和肝臟中。
權(quán)利要求
1．具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑用于制備治療和/或預(yù)防糖尿病的藥物組合物的應(yīng)用-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與-COOR相關(guān)的位置，和-其中Xj相互無關(guān)、選白O、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。
2．根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中糖尿病為Ⅰ型糖尿病。
3．根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中糖尿病為Ⅱ型糖尿病。
4．根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中糖尿病是選自下組的一種形式繼發(fā)性糖尿病，例如胰腺性糖尿病、胰腺外糖尿病/內(nèi)分泌性糖尿病或藥物誘導(dǎo)的糖尿病，或者糖尿病的特殊形式，例如脂肪萎縮性糖尿病、肌弛緩性糖尿病或由胰島素受體紊亂所引起的糖尿病。
5．根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中m≥13。
6．根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中Xi=3是選自O(shè)、S、SO、SO2和Se，且其中Xi=5-25為CH2。
7．根據(jù)權(quán)利要求6的應(yīng)用，其中Xi=3是硫。
8．根據(jù)權(quán)利要求6的應(yīng)用，其中Xi=3是硒。
9．具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與-COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑用于制備治療和/或預(yù)防叫做《代謝綜合征》的多代謝綜合癥的藥物組合物的應(yīng)用，尤其是該綜合征的特征為高胰島素血癥、胰島素耐受癥、肥胖、葡萄糖不耐癥、2型糖尿病、血脂異常和/或高血壓。
10．根據(jù)權(quán)利要求9的應(yīng)用，其中其中m≥13。
11．根據(jù)權(quán)利要求9的應(yīng)用，其中Xi=3是選自O(shè)、S、SO、SO2和Se，Xi=5-25為CH2。
12．根據(jù)權(quán)利要求11的應(yīng)用，其中其中Xi=3是硫。
13．根據(jù)權(quán)利要求11的應(yīng)用，其中其中Xi=3是硒。
14．一種治療或預(yù)防糖尿病的方法，該方法包括對(duì)需要治療的動(dòng)物施用有效量的具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑的步驟-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與-COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。
15．根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述的動(dòng)物是人。
16．根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述的動(dòng)物是農(nóng)用動(dòng)物，例如鶉雞類的鳥、牛、綿羊、公山羊或豬哺乳動(dòng)物。
17.根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中所述的動(dòng)物是家畜或觀賞動(dòng)物，例如狗或貓。
18．根據(jù)權(quán)利要求14的應(yīng)用，其中m≥13。
19．根據(jù)權(quán)利要求14的方法，其中Xi=3是選自O(shè)、S、SO、SO2和Se，且Xi=5-25為CH2。
20．根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中Xi=3是硫。
21．根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中Xi=3是硒。
22．根據(jù)前述權(quán)利要求之一的方法，其中施用脂肪酸類似物以便給藥期間動(dòng)物的血液中大體上持續(xù)保持治療上的有效濃度。
23．根據(jù)前述權(quán)利要求之一的方法，其中所述的脂肪酸類似物組合物是單位劑型的形式。
24．根據(jù)前述權(quán)利要求之一的方法，其中所述的脂肪酸類似物是經(jīng)口服給藥或非腸道給藥。
25．一種治療或預(yù)防高血糖癥的方法， 該方法包括對(duì)需要治療的動(dòng)物施用有效量的具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑的步驟-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與-COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。
26．一種治療或預(yù)防高胰島素血癥的方法，該方法包括對(duì)需要治療的動(dòng)物施用有效量的具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑的步驟-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與-COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。
27．一種治療和/或預(yù)防對(duì)胰島素的敏感性降低的方法，該方法包括對(duì)需要治療的動(dòng)物施用有效量的具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑的步驟-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。
28．一種預(yù)防和/或治療動(dòng)物糖尿病的藥物組合物，該藥物組合物包括具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。
29．根據(jù)權(quán)利要求28的藥物組合物，其中所述的藥物組合物包括脂肪酸類似物與藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的混合物。
30．根據(jù)權(quán)利要求28的藥物組合物，其中m≥13。
31．根據(jù)權(quán)利要求28的藥物組合物，其中Xi=3是選自O(shè)、S、SO、SO2和Se，且其中Xi=5-25為CH2。
32．根據(jù)權(quán)利要求31的藥物組合物，其中Xi=3是硫。
33．根據(jù)權(quán)利要求31的藥物組合物，其中Xi=3是硒。
34．一種包含一定量的具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與-COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑的營(yíng)養(yǎng)組合物，它可有效地減少或防止人或非人動(dòng)物的血葡萄糖濃度的增加。
35．一種降低需要治療的人或非人動(dòng)物的血葡萄糖濃度的方法，該方法包括對(duì)其施用有效量包含具有通式(Ⅰ)CH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑的組合物-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。
36．根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中其中m≥13。
37．根據(jù)權(quán)利要求32的方法，其中Xi=3是選自O(shè)、S、SO、SO2和Se，且Xi=5-25為CH2。
38．根據(jù)權(quán)利要求37的方法，其中Xi=3是硫。
39．根據(jù)權(quán)利要求37的方法，其中Xi=3是硒。
40．根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其中所述的動(dòng)物是人。
41．一種具有通式ⅠCH3-[CH2]m-[Xi-CH2]n-COOR的新的脂肪酸類似物或其鹽、前體藥物或復(fù)合劑-其中n為1-12的整數(shù)，和-其中m為0-23的整數(shù)，和-其中i為奇數(shù)、它表示與COOR相關(guān)的位置，和-其中Xi相互無關(guān)、選自O(shè)、S、SO、SO2、Se和CH2，和-其中R代表氫或C1-C4烷基，-條件是至少Xi之一不是CH2。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有通式(Ⅰ):CH
文檔編號(hào)A61K31/28GK1302204SQ99805966
公開日2001年7月4日 申請(qǐng)日期1999年4月23日 優(yōu)先權(quán)日1998年5月8日
發(fā)明者羅爾夫·貝格 申請(qǐng)人:西爾醫(yī)療有限公司