專利名稱：24－羥基－維生素d及其類似物和應(yīng)用的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及24-羥基維生素D類化合物以及它們在治療和預(yù)防甲狀旁腺機能亢進(jìn)和過度增殖性疾病、調(diào)節(jié)免疫和炎性反應(yīng)及治療骨損耗性疾病中的應(yīng)用。
長期以來，有關(guān)維生素D在骨及礦物質(zhì)代謝中所起的重要生物作用已為人所熟知。例如，在促進(jìn)鈣的吸收以及調(diào)節(jié)鈣的代謝中維生素D起到至關(guān)重要的作用。同時，并非維生素D本身而是其在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物起到調(diào)節(jié)鈣代謝作用的論點也已為人所熟知。維生素D的活性形式(M.F.Holick等人，68 Proc.Natl.Acad.Sci.USA，803-804(1971)；G.Jones等人，14Biochemistry，1250-1256(1975))以及其它活性維生素D類似物(M.F.Holick等人，180 Science 190-191(1973)；H.Y.Lam等人，186 Science1038-1040(1974))的發(fā)現(xiàn)造成了很多的轟動以及對這些維生素D類化合物治療骨損耗性疾病的思考。
動物實驗檢查了這些活性維生素D類化合物，特別是作為維生素D3激素活性形式的1α，25-二羥基維生素D3的作用，實驗表明這些化合物有助于鈣平衡的恢復(fù)。早期的臨床研究表明對一組絕經(jīng)后婦女口服給藥0.5μg/天的1α，25-二羥基維生素D3改善了腸道鈣吸收以及鈣平衡。基于這一發(fā)現(xiàn)，第4,225,596號美國專利(“′596專利”)對于1α，25-二羥基維生素D3用于增加鈣吸收和保持作了描述并申請了專利，即、在促進(jìn)腸道鈣吸收以及從骨中再吸收鈣(即骨代謝)方面該化合物高度有效。
但是在防止或治療損耗性骨疾病中，維生素D化合物效能的最佳指示是骨本身而非鈣吸收或鈣平衡。最近的臨床學(xué)數(shù)據(jù)表明在′596專利所規(guī)定的劑量范圍內(nèi)，對于防止或恢復(fù)骨質(zhì)或骨礦物質(zhì)含量損失方面1α，25-二羥基維生素D3最多僅有中等效能(S.M.Ott和C.H.Chesnut，110 Ann.Int.Med.267-274(1 989)；J.C.Gallagher等人，113 Ann.Int.Med.649-655(1990)；J.Aloia等人，84 Amer.J.Med.40 1-408(1988))。
這些有關(guān)1α，25-二羥基維生素D3的臨床研究、以及另一有關(guān)1α-羥基維生素D3的臨床研究(M.Shiraki等人，32 Endocrinol.Japan 305-315(1985))表明，這兩種維生素D化合物恢復(fù)骨質(zhì)或骨礦物質(zhì)含量流失的能力是劑量依賴的。這些研究也表明在這兩種化合物真正發(fā)揮效力所要求的劑量范圍內(nèi)，高血鈣癥和尿鈣過多等毒性作用成為主要問題。具體而言，將1α，25-二羥基維生素D3劑量增至0.5μg/天以上經(jīng)常導(dǎo)致毒性作用的出現(xiàn)。而劑量低于0.5μg/天時，對骨質(zhì)或礦物質(zhì)含量無效。(參見，G.F.Jensen等人，16 Clin.Invest.515-524(1982)；C.Christiansen等人，11 Eur.J.Chlin.Invest.305-309(1981))。
日本一鈣攝入量低人群的臨床數(shù)據(jù)表明，當(dāng)給藥1μg/天時，1α-羥基維生素D3有效(M.Shiraki等人，32 Endocrinol.Japan.305-315(1985)；H.Orimo等人，3 Bone and Mineral 47-52(1987))。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)2μg/天的1α-羥基維生素D3在老年骨質(zhì)疏松癥病人中有增加骨質(zhì)的功效(O.H.Sorensen等人，7 Clin.Endocrinol.169S-175S(1977))。但是，當(dāng)1α-羥基維生素D3劑量為2μg/天時，在約67％的患者中表現(xiàn)出毒性作用，而當(dāng)劑量為1μg/天時，這一比例約為20％。因此，由于其固有的血鈣活性，1α-羥基化維生素D3類化合物可造成危險性的高血鈣濃度。
由于其毒性，所制定的1α-羥基化維生素D3口服劑量在防止或治療骨質(zhì)或骨礦物質(zhì)含量流失方面最多僅能取得中等療效。事實上，Aloia建議尋找其它給藥途徑，使得毒性問題可以避免并且可允許使用更高的劑量水平(J.Aloia等人，84 Amer.J.Med.401-408(1988))。盡管有報道稱1α-羥基維生素D3和1α，25-二羥基維生素D3有毒性，對于很多骨損耗性疾病，這兩種藥物仍是很好的藥物。
盡管這兩種藥物現(xiàn)今并未被所有的主要藥物市場所批準(zhǔn)，但對于治療和預(yù)防由晚期腎病繼發(fā)的甲狀旁腺機能亢進(jìn)，這兩種藥物是僅有的被批準(zhǔn)的1α-羥基化維生素D3類藥物。甲狀旁腺機能亢進(jìn)是1種或多種甲狀旁腺分泌過多的甲狀旁腺激素(PTH)所導(dǎo)致的疾病的總稱。因此，其特征在于甲狀旁腺激素的血濃高。
典型的情況是，一種或多種甲狀旁腺表現(xiàn)為明顯增大。在原發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)時，腺體增大通常是由于新生物或者腫瘤。如果是繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)，甲狀旁腺增生通常是由于對激素代謝作用的耐受性。
繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)發(fā)生在罹患腎衰減、骨軟化癥、腸吸收障礙綜合癥的患者中。在原發(fā)性和繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)中，骨異常如骨質(zhì)流失或礦物質(zhì)含量降低是最常見的，而且有可能發(fā)生腎損傷。因此，甲狀旁腺機能亢進(jìn)還具有異常的鈣、磷和骨代謝的特征。
最近，除調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣平衡作用外，維生素D的其它生物效應(yīng)也已被發(fā)現(xiàn)。在與鈣平衡無關(guān)的多種器官的細(xì)胞中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了1α，25-二羥基維生素D3的特異性核受體。例如，Miller等人(52 Cancer Res.(1992)515-520)已經(jīng)證明在人前列腺癌細(xì)胞系LNCaP中存在生物活性的特異性1α，25-二羥基維生素D3的受體。
現(xiàn)已表明某些維生素D類化合物及類似物是惡性腫瘤細(xì)胞增殖的強效抑制劑以及細(xì)胞分化的誘導(dǎo)劑/促進(jìn)劑。例如，Suda等人的第4,391,802號美國專利公開了1α-羥基維生素D類化合物、具體而言為1α，25-二羥基維生素D3和1α-羥基維生素D3，由于誘導(dǎo)惡性腫瘤細(xì)胞(具體而言如白血病細(xì)胞)分化成非惡性的巨噬細(xì)胞(單核細(xì)胞)而具有強烈抗白血病活性，并可用于白血病的治療。此外，Skowronski等人(136Endocrinology 20-26(1995))報道了1α，25-二羥基維生素D3及其它維生素D類似物對前列腺癌細(xì)胞系的抗增殖及細(xì)胞分化作用。
如上所述的文獻(xiàn)中進(jìn)行的增殖研究僅集中在維生素D3化合物。雖然該化合物的確可以有效地在培養(yǎng)基中分化惡性細(xì)胞，但是由于其具有與影響鈣代謝的藥物相同高的效力，嚴(yán)重地限制了它們在作為抗癌藥物的分化治療中的實際應(yīng)用。在體內(nèi)有效所需的劑量下，如作為抗白血病藥物，因其固有的血鈣活性使這些化合物可誘導(dǎo)出顯著且具有潛在危險性的高血鈣濃度。也就是說，臨床使用1α，25-二羥基維生素D3和其它維生素D3類似物作為抗癌藥物由于高血鈣癥的危險是有障礙的，或嚴(yán)重受限的。
維生素D的其它作用包括免疫響應(yīng)調(diào)節(jié)(參見，如Truitt等人的第4,749,710號美國專利；Gates等人的第5,559,107號美國專利；Daynes等人的第5,540,919、5,518,725和5,562,910號美國專利)以及炎性反應(yīng)(參見,如Hansen等人的第5,589,471號美國專利)。
考慮到維生素D的多種生物活性及其作為治療藥物的可能性，對于具有更強特異性和選擇性的化合物，即具有抗細(xì)胞增殖和細(xì)胞分化作用，但與治療劑量下的已知維生素D類化合物或類似物相比血鈣活性較低的維生素D類化合物存在著需求。
發(fā)明簡述本發(fā)明提供將在以下描述的由通式(I)表示的24-羥基維生素D類化合物，其中C-17側(cè)鏈?zhǔn)秋柡突虿伙柡?、取代或未取代、直鏈、支鏈或環(huán)狀C4-C18烴基，其中在C-24位或等價位置是羥基化的。本發(fā)明還提供使用該化合物治療或預(yù)防某些疾病和紊亂的方法。所述疾病和紊亂包括(i)通過降低(或者維持低的)血清甲狀旁腺激素濃度來治療的甲狀旁腺機能亢進(jìn)；(ii)過度增殖性疾病；(iii)免疫應(yīng)答不平衡；以及(iv)骨損耗紊亂。
式(I)的化合物是24-羥基維生素D化合物，其具強效生物活性，但與維生素D3的活性形式相比具有低的血鈣活性。此等化合物優(yōu)選為24-羥基化前藥，該前藥在體內(nèi)在C-1位被羥基化形成1，24-二羥基化的化合物。
在此所用的術(shù)語“維生素D化合物”是指具有維生素激素活性并在式(I)的總結(jié)構(gòu)范圍之內(nèi)的化合物。還應(yīng)注意的是，通常使用縮寫來表示D激素，例如1α-羥基維生素D2可簡單地表示為1α-OH-D2。
在另一個方面中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，其中式(I)化合物是活性成分。此等組合物適當(dāng)?shù)匾詥卧獎┝縿┬痛嬖?，其中包括有效量的?I)維生素D化合物和藥物學(xué)上可接受的賦形劑。
本發(fā)明的治療方法是作為常規(guī)使用1α，25-二羥基維生素D3或者1α-羥基維生素D3的治療方法的替代方法。本發(fā)明方法的特征在于提供具有相等生物活性但比常規(guī)治療方法毒性更低的式(I)化合物。
在閱讀以下附圖、優(yōu)選實施方案詳述和所附權(quán)利要求后可了解本發(fā)明的其它優(yōu)點，并對本發(fā)明的特征作較全面的了解。應(yīng)深刻認(rèn)識到附圖僅起描述和解釋作用，并不是用來對本發(fā)明進(jìn)行界定。
附圖簡述以下以附圖為參考對本發(fā)明示例性的優(yōu)選實施方案進(jìn)行描述，其中全文采用相同的符號指示相同的部件，其中


圖1為制備24-羥基-維生素D2的示例性反應(yīng)圖；圖2為制備24-羥基-25-烯-維生素D2的示例性反應(yīng)圖；圖3為24(S)-羥基維生素D2的IR譜；以及圖4為圖3化合物的NMR譜。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及24-羥基-維生素D化合物。本發(fā)明的化合物最適合用于治療和預(yù)防某些疾病和紊亂，如過度增殖性疾病、甲狀旁腺機能亢進(jìn)和某些免疫應(yīng)答病癥。所述過度增殖性疾病包括皮膚、乳腺、結(jié)腸和前列腺癌和牛皮癬。甲狀旁腺機能亢進(jìn)包括原發(fā)性和繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)。免疫應(yīng)答病癥包括自體免疫糖尿病、多發(fā)性硬化和移植物排斥。因此，本發(fā)明將在這些方面進(jìn)行詳細(xì)的描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員還應(yīng)認(rèn)識到，本發(fā)明的這些描述僅是說明性的，而絕非對其范圍的限制。
本發(fā)明提供具有藥物價值24-羥基維生素D類化合物。這些化合物適合用作1α，24-二羥基化維生素D化合物的前藥，其在體內(nèi)在1α位被羥基化，形成維生素D的活性形式。作為前藥，這些化合物有效地避免了調(diào)節(jié)腸道鈣吸收的腸維生素D受體結(jié)合的首過效應(yīng)，與相似劑量的已知活性維生素D化合物如1α，25-二羥基維生素D3相比，使高血鈣癥減輕或消失。
在以下對本發(fā)明的方法的描述中，除非另有說明，各步驟都是在室溫和大氣壓下進(jìn)行的。
在此所用術(shù)語“基本上純”或者“基本上沒有”是指至少90％的純度。術(shù)語“基本上低于”是指與對比物質(zhì)相比至少低25％。同樣，作為烷基、鏈烯基、氟代烷基、氟代鏈烯基或環(huán)烷基的修飾詞，術(shù)語“低級”指含1至4個碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)狀、飽和或不飽和烴基。這些烴基的具體例子為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、特丁基、乙烯基、丙烯基、丁烯基、異丁烯基、異丙烯基、甲?；⒁阴；?、丙?；?、丁酰基或環(huán)丙基。此處術(shù)語“烴片斷”用于指直鏈、支鏈或環(huán)狀、飽和或不飽和的C1-C4烴基，如低級烷基、低級鏈烯基或低級環(huán)烷基。此處術(shù)語“等價位置”，如C-24或等價位置，是指在維生素D類化合物C-17側(cè)鏈上的特定碳原子，其中碳可為24-位碳，但是指同系列側(cè)鏈中的等同位置。
在一個方面中，可用于本發(fā)明中的維生素D化合物可用通式(I)表示 其中Z代表飽和或不飽和、取代或未取代、直鏈、支鏈或環(huán)狀C4-C18烴基，其中C-24或等價位置被羥基化；如果與Y是雙鍵連接在A環(huán)上的，則Y為亞甲基，或者如果與Y為單鍵，則Y為甲基或氫，即當(dāng)Y為氫時，式(I)化合物是一種19-降化合物；而X為氫、低級烷基或低級氟代烷基。應(yīng)注意的是，如果X是氫，則式(I)的化合物是一種18-降化合物。
優(yōu)選地，Z是以下式(IIA)表示的側(cè)鏈 其中m是0或1；沿側(cè)鏈的虛線表示任選添加的C-C鍵；R1和R2分別是低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基、低級氟代鏈烯基、低級環(huán)烷基，或者與它們所連接的碳(如m＝0時的C-25碳)一起形成C3-C8環(huán)烴基；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；R5和R6分別為氫或者一起形成在C-22和C-23之間的雙鍵。對于m所指的鍵，該鍵可以是單、雙或叁鍵，換言之，-CH2-、-CH＝CH-或者-C≡C-。
例如，Z包括式(IIB)表示的側(cè)鏈 其中R5和R6分別為氫或者一起形成在C-22和C-23之間的雙鍵；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；而R1和R2分別是氫、低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基、低級氟代鏈烯基、低級環(huán)烷基，或者與它們所連接的碳(如C-25碳)一起形成C3-C8環(huán)烴基；。
Z還包括式(IIC)表示的側(cè)鏈 其中n為選目1或2的整數(shù)；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4和R7分別為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；A為碳、氧、硫或氮；當(dāng)A為氮時，r為1而s為0；當(dāng)A為碳時，r和s為1；當(dāng)A為硫或氧時，r和s為0；以及R9和R10分別為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基。對于m所指的鍵，該鍵可以是-CH2-或-CH＝CH-。
例如，Z包括其中n是1、A是碳、r和s為1的側(cè)鏈，并可用式(IID)表示 其中R3、R9和R10分別為氫、低級烷基、低級氟代烷基、和低級氟代鏈烯基，而R4和R7為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基。
同樣，Z還包括式(IIE)表示的側(cè)鏈 其中側(cè)鏈上的虛線表示任選添加的C-C鍵；q為0或選自1或2的整數(shù)；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4和R7為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；A為碳、氧、硫或氮；當(dāng)A為氮時，r為1而s為0；當(dāng)A為碳時，r和s為1；當(dāng)A為硫或氧時，r和s為0；R9和R10分別為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基。對于任選添加的鍵，例如，如果q＝0，C-22和C-23間的鍵可為單鍵、雙鍵或三鍵。而q所表示的基團(tuán)為-CH2-。
例如，Z包括其中q是0、A是碳、r和s是1；R3、R9和R10分別為氫、低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基和低級氟代鏈烯基，而R4和R7為氫、低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基的側(cè)鏈，并可用式(IIF)表示 本發(fā)明范圍的維生素D化合物還包括其中適當(dāng)?shù)匕ㄅc如上所述相同的Z側(cè)鏈的24-羥基維生素D化合物，所述側(cè)鏈包括那些式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIE)和(IIF)表示的并在C-24位或等價位置被羥基取代者。前維生素D是相應(yīng)維生素D類化合物的熱異構(gòu)體，如24-羥基前維生素D2是24-羥基維生素D2的熱異構(gòu)體，并存在于其熱平衡中。根據(jù)本發(fā)明的24-羥基前維生素D化合物可適當(dāng)?shù)赜檬?III)表示 其中X、Y和Z都如上所定義。
優(yōu)選的式(I)化合物為作為1α，24-雙羥化維生素D前藥的24-羥基化合物。式(I)化合物的例子為24-羥基維生素D2[24-(OH)-D2]24-羥基-25-氟維生素D2[24-(OH)-25-F-D2]24-羥基-25-烯-維生素D2[24-OH-25-烯-D2]24-羥基-25-羰基-維生素D2[24-OH-25-羰基-D2]24-羥基維生素D4[24-(OH)-D4]24-羥基-25-氟維生素D4[24-(OH)-25-F-D4]24-羥基-25-烯-維生素D4[24-OH-25-烯-D4]24-羥基-25-羰基-維生素D4[24-OH-25-羰基-D4]優(yōu)選的式(III)化合物為24-羥基前維生素D類化合物，它們也是1α，24-雙羥基化維生素D的前藥和異構(gòu)體。式(III)化合物的例子為24-羥基前維生素D2[24-(OH)-前D2]24-羥基-25-氟前維生素D2[24-(OH)-25-F-前D2]24-羥基-25-烯-前維生素D2[24-OH-25-烯-前D2]24-羥基-25-羰基-前維生素D2[24-OH-25-羰基-前D2]24-羥基前維生素D4[24-(OH)-前D4]24-羥基-25-氟前維生素D4[24-(OH)-25-F-前D4]24-羥基-25-烯-前維生素D4[24-OH-25-烯-前D4]24-羥基-25-羰基-前維生素D4[24-OH-25-羰基-前D4]對于側(cè)鏈中具有手性中心如C-20或C-24位的化合物，應(yīng)認(rèn)識到兩種非對映體(如R和S)及其混合物均在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
式(I)的化合物通常用圖1所示的示例性反應(yīng)方法來制備。圖1顯示了使用麥角甾醇作為起始物來制備24-羥基維生素D2的方法，其中形成的24-羥基維生素D2然后分離，如果需要立體化學(xué)純的，則制備24(S)-羥基維生素D2非對映體和24(R)-羥基維生素D2非對映體。除非另有說明，以下在說到24-羥基化合物時，該化合物是R和S形式的非對映體混合物。
具體而言，麥角甾醇通過六步法轉(zhuǎn)化為24-羥基麥角甾醇(5，7，22麥角三烯-3β，24-二醇(7))。然后照射24-羥基麥角甾醇，并用本領(lǐng)域已知的方法熱轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生24-羥基維生素D2，并由其分離非對映體。
如圖1所示，麥角甾醇被乙?；纬?β-乙酸酯(2)。3β-乙酸酯與三唑啉二酮反應(yīng)，由此與麥角甾醇結(jié)構(gòu)的B環(huán)形成加成物(3)。加成物(3)然后被臭氧化，以截短側(cè)鏈，形成C-21醛(4)。所得醛與合適的酮基化合物反應(yīng)產(chǎn)生24-烯酮(5)，從而使側(cè)鏈重新組成。將烯酮轉(zhuǎn)化為24-甲基，3β，24-二羥基加成物(6)。該加成物與氫化鋁鋰反應(yīng)，使加成物脫保護(hù)，并產(chǎn)生24-羥基麥角甾醇(7)。然后照射并熱處理24-羥基麥角甾醇，形成24-羥基維生素D2(8)。24-羥基維生素D2進(jìn)行反相高壓液相色譜分離，以分離兩種非對映體，然后回收本發(fā)明的非對映體形式，24(S)-羥基維生素D2(9)和24(R)-羥基維生素D2(10)。
其中側(cè)鏈用式(IIC)或(IIE)表示的式(I)化合物通常用圖2所示的示例性方法制備。圖2顯示了使用維生素D2作為起始物并形成25-烯-維生素D2來制備24-羥基-25-烯-維生素D2的方法，其中使得自于人肝瘤細(xì)胞的經(jīng)培養(yǎng)的細(xì)胞如HEP3B或HEPG2與25-烯-維生素D2溫孵，產(chǎn)生代謝物24-羥基-25-烯-維生素D2，然后用高壓液相色譜分離并純制。
如圖2所示，維生素D2(11)與SO2反應(yīng)，而且C-3位的羥基官能團(tuán)用特丁基二甲基甲硅烷氧基氯(TBDMSCl)保護(hù)，生成中間體(12)。臭氧分解并還原得到醇(13)。擠出SO2，異構(gòu)化，然后用已知的Swern氧化法氧化得到醛(14)。醛(14)與Wittig試劑或者苯基砜反應(yīng)引入側(cè)鏈，得到25-烯-維生素D2化合物(15)。25-烯化合物(15)然后與得自于人肝瘤細(xì)胞的細(xì)胞系一起溫孵，并提取和純制24-羥基-25-烯-維生素D2(16)。制備24-羥基-25-烯-維生素D的方法也描述在共同未決并共同擁有的題目為“制備羥基-25-烯-維生素D化合物的方法”的專利申請中，其在此并入作為參考。
式(III)化合物一般可采用圖1和2列舉的方法制備，其中可利用如Pauli等人的第5,252,191號美國專利；Coethals等人的第5,035,783和4,388,243號美國專利中的示例性反應(yīng)方法制備起始原料前維生素，此處引用這些專利作為參考。式(I)的19-降化合物一般也可由此處給出的示例性反應(yīng)方法制備，19-降起始原料可按第5,710,294號美國專利中給出的方法制備，此處引用該專利作為參考，其使用合適的維生素D起始物。
本發(fā)明的化合物可在藥物組合物中用作活性成分，其與活性形式的維生素D3相比具有更少的副作用和低毒性。這些化合物特別適合局部和全身治療以及預(yù)防具有以下特征的疾病(i)異常細(xì)胞增殖和/或細(xì)胞分化例如癌癥，如皮膚、乳腺、結(jié)腸和前列腺癌，以及皮膚疾病如牛皮癬；(ii)免疫系統(tǒng)失衡例如自體免疫疾病，如多發(fā)性硬化和糖尿病，以及移植物的排斥；(iii)異常白介素-1產(chǎn)生例如炎性反應(yīng)疾病，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和哮喘；(iv)異常甲狀旁腺激素產(chǎn)生，例如甲狀旁腺機能亢進(jìn)，包括原發(fā)性和繼發(fā)性的；以及(v)骨質(zhì)或者骨礦物質(zhì)含量流失。
本發(fā)明的24-羥基維生素D化合物具有較低的產(chǎn)生非所希望的高鈣血癥和/或高鈣尿癥副作用的趨勢或者沒有此能力。換言之，本發(fā)明的化合物可以如下劑量給藥該劑量使它們在與惡性或者其他過度增殖性細(xì)胞接觸時起到抗增殖劑和細(xì)胞分化劑的作用，而不會顯著地改變鈣代謝。該作用的選擇性和特異性使本發(fā)明的24-羥基維生素D化合物可用于并優(yōu)選作為安全抑制過度增殖并促進(jìn)惡性或者增生性細(xì)胞分化的藥物。因此，本發(fā)明的24-羥基維生素D化合物克服了上述已知活性維生素D3化合物的缺陷，而且可以優(yōu)選作為用于控制和治療以下疾病的藥物惡性疾病如前列腺癌以及良性前列腺增生，皮膚疾病如皮膚癌和牛皮癬，乳腺癌和結(jié)腸癌，免疫和炎性反應(yīng)疾病，以及甲狀旁腺機能亢進(jìn)。例如對于后者，當(dāng)給藥于甲狀旁腺機能亢進(jìn)患者時，式(I)的類似物的毒性基本上比它們的維生素D3相應(yīng)物低。對于使用口服磷酸鈣黏合劑的患者，以高于維生素D3化合物時的劑量給藥式(II)的類似物可在治療甲狀旁腺機能亢進(jìn)時產(chǎn)生比前者更高的效力。
本發(fā)明的藥理學(xué)活性化合物適合使用藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法來處理，以制備用于給藥于患者的藥物組合物，所述患者例如是哺乳動物，包括人。所述組合物是活性化合物與藥物學(xué)上可接受的有機或無機載體物質(zhì)的混合物，并任選包括其他治療成分，其中所述載體物質(zhì)不損害性地與活性化合物反應(yīng)?？墒褂萌魏魏线m的給藥途徑來給藥根據(jù)本發(fā)明的化合物的優(yōu)選劑量。例如，可使用口服、直腸、局部、非胃腸道、靜脈、肌肉內(nèi)、皮下、眼、鼻、頰部等途徑。
治療和預(yù)防性組合物是那些適用于上述各種給藥途徑的組合物，但是最合適的途徑在任何情況下都取決于待治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重程度、以及活性成分的性質(zhì)。它們通常為單元劑量劑型。
適用于本發(fā)明的組合物和方法的合適的藥物學(xué)上可接受的載體包括但不限于水、鹽溶液(如緩沖液)、醇包括芐醇、阿拉伯膠、礦物和植物油(如玉米油、棉籽油、花生油、橄欖油、椰子油)、魚肝油、油性酯(如Polysorbate 80)、聚乙二醇和丙二醇、明膠、碳水化合物(如乳糖、支鏈淀粉或淀粉)、硬脂酸鎂、滑石、硅酸、黏性石蠟、脂肪酸單甘油酯和二甘油酯、季戊四醇脂肪酸酯、羥甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等。
藥物制劑可以是無菌的，而且如果需要，可與輔劑混合，例如潤滑劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、濕潤劑、乳化劑、增加滲透壓的鹽、緩沖劑、著色劑和調(diào)味劑。如果使用固體載體，本發(fā)明化合物的劑型可以是片劑、膠囊、粉末、栓劑或錠劑。如果使用液體載體，則劑型可以是軟明膠膠囊、透皮藥貼、氣霧噴霧劑、局部用乳膏、糖漿劑或者混懸劑、乳劑或者溶液劑。
但是應(yīng)注意的是，24-羥基前維生素D的劑型最優(yōu)選用以下載體配制淀粉、乳糖或支鏈淀粉，它們不損害性地與活性化合物反應(yīng)。制劑可制成為片劑、膠囊、粉末或者錠劑。但是，在使用任何配制方法時，應(yīng)注意避免與溶劑或熱接觸，因為在這些條件下24-羥基前維生素D會轉(zhuǎn)化為24-羥基維生素D，即、式(III)的化合物優(yōu)選以無溶劑、晶體、熱穩(wěn)定的形式配制。因為要避免熱和溶劑，所以優(yōu)選的片劑配制方法是干燥制粒法。
對于胃腸道給藥時，特別合適的是可注射的無菌溶液，優(yōu)選油或水溶液，以及混懸劑、乳劑、或植入劑，包括栓劑。安瓿是常規(guī)的單元劑量。根據(jù)本發(fā)明的類似物在非胃腸道給藥時的劑量通常為1-30μg，每周給藥1-3次。
如上所述，在腸道給藥時，特別合適的是片劑、糖衣片、液體、滴劑、栓劑或膠囊劑?？梢允褂锰菨{劑、甘香酒劑等，其中使用甜味載體。
在直腸給藥時，化合物配制成包含栓劑基質(zhì)如可可油或其他三甘油酯的藥物組合物。為延長儲存期，組合物可有利地包含抗氧劑，如抗壞血酸、丁基化羥基茴香醚或氫醌。
在局部使用時，也可以使用非噴霧劑型、黏性至半固體劑型，其包括與局部使用相匹配的載體，并優(yōu)選具有比水更大的動態(tài)黏性。合適的局部用制劑包括透皮給藥裝置、溶液、混懸劑、乳劑、氣霧劑、乳膏、軟膏、涂抹劑、油膏劑、洗劑、粉塵劑等，而且如果需要，這些制劑可進(jìn)行滅菌或者與輔劑混合如防腐劑等。
本發(fā)明化合物的預(yù)防或治療劑量可根據(jù)待治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重程度、具體的組合物以及給藥途徑來變化。優(yōu)選口服給藥本發(fā)明的藥物組合物。
通常情況下，根據(jù)本發(fā)明的化合物的劑量為約0.025-7.5nmol/kg患者體重，優(yōu)選為0.025-1nmol/kg。本發(fā)明的化合物通常用在藥物學(xué)可接受的載體中的單元劑量劑型來分配，每單元劑量在藥物學(xué)上可接受的載體中包含約0.25-50.0μg所述化合物。根據(jù)本發(fā)明的化合物的劑量通常為3.5-1000μg/周，優(yōu)選為10-500μg/周。
在治療過度增殖性疾病如癌癥和牛皮癬時，本發(fā)明化合物的腸道劑量為每單元劑量1-100nmol，在治療甲狀旁腺機能亢進(jìn)時為每單元劑量約0.5-50nmol，在治療炎性疾病時為每單元劑量1-150nmol，在免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)時為每單元劑量1-150nmol。因此，日有效劑量為0.01-3.0μg/kg體重/天。
另外，本領(lǐng)域技術(shù)人員還可認(rèn)識到，所述劑量可進(jìn)行包膠以隨時間釋放，例如持續(xù)釋放、緩釋或直接釋放給藥系統(tǒng)，如脂質(zhì)體給藥系統(tǒng)，具有緩慢釋放機制的多糖，salistic或其他聚合植入物或微球，以及其中活性成分被適當(dāng)?shù)赜靡环N或多種具有不同分解性的包衣保護(hù)者，例如微包膠、腸溶包衣、多層包衣等，以及可連續(xù)給藥所包含組分的裝置。例如，腸溶包衣是一種可以耐受胃液崩解的合適裝置。還可以凍干活性成分，然后使用所得到的凍干物例如制備注射產(chǎn)品。
還可以認(rèn)識到，活性類似物的實際優(yōu)選用量在具體情況下可根據(jù)所用的具體化合物、具體配制的組合物、給藥方式、以及待治療的具體部位來變化?？墒褂贸Ｒ?guī)方法來確定劑量，例如通過常規(guī)對比目標(biāo)化合物和已知藥物的不同活性，或者通過合適的常規(guī)藥代動力學(xué)方法。
對于每個具體患者的具體用量取決于許多因素，例如具體給藥化合物的效力、患者的年齡、體重、總的健康狀況、性別、飲食、給藥的時間和方式、排泄速率、以及組合使用的藥物和具體疾病的嚴(yán)重程度。
如以上所述，本發(fā)明的化合物優(yōu)選以口服制劑給藥于人(或者動物)患者。隨著根據(jù)本發(fā)明的化合物從口服制劑中釋放，其可經(jīng)由腸被吸收到血液中。本發(fā)明的化合物然后在維生素環(huán)結(jié)構(gòu)的D環(huán)的1α-位進(jìn)行羥基化，由此產(chǎn)生維生素D化合物的活性形式，其是1α，24-二羥基化的。對于式(I)的化合物，希望幾乎沒有或者沒有與腸維生素D受體的首過相互反應(yīng)，由此幾乎沒有或者不產(chǎn)生對腸鈣吸收的刺激作用。如果是式(III)的24-羥基前維生素D化合物，因為這些化合物被動物或人的內(nèi)部溫度溫?zé)幔运鼈冝D(zhuǎn)化為相應(yīng)的1-羥基維生素D，然后被24-羥基化，形成1，24-二羥基化合物。應(yīng)注意的是，24-羥基前維生素D化合物在熱和代謝活化之前不與腸維生素D受體相互作用，并因此不會刺激首過腸鈣吸收。
制劑也可包含輔劑以及其他治療有用的物質(zhì)，或者可混合包含一種以上的在此所述化合物。
因此，本發(fā)明范圍的其他方面是與其他激素或者其他在治療所述疾病中具有效力的藥物共同給藥有效劑量的本發(fā)明化合物。
例如，本發(fā)明的化合物可合適地與已知用于改善骨疾病的藥物共同給藥。此等骨劑可包括結(jié)合雌激素或其等價物、抗雌激素、降鈣素、雙膦酸酯、鈣添加劑、鈣受體激動劑、鈷胺、百日咳毒素、硼、脫氫異雄酮(DHEA)和其他骨生長因子如轉(zhuǎn)化生長因子β、苯丙酸諾龍或者骨形態(tài)發(fā)生蛋白。這些共同給藥的藥物的可能劑量范圍見表1所示。
表1各種可以與1α-羥基維生素D2共同給藥的藥物的可能口服劑量范圍
抗雌激素如TamoxifenTM已知不僅是骨劑而且還是抗增殖藥物，而且適于與本發(fā)明的24-羥基維生素D和24-羥基前維生素D化合物共同給藥。
雖然上述例子詳細(xì)地描述了口服劑量，當(dāng)應(yīng)理解的是，藥物的組合也可以其他方式給藥，包括鼻內(nèi)、透皮、直腸內(nèi)、陰道內(nèi)、皮下、靜脈、以及肌肉內(nèi)給藥。
本發(fā)明還提供與已知細(xì)胞毒性劑共同給藥的化合物。此等細(xì)胞毒性劑包括雌莫司汀、磷酸酯、潑尼莫司汀、順鉑、5-氟尿嘧啶、美法侖、羥基脲、絲裂霉素、伊達(dá)比星、甲氨蝶呤、阿霉素和柔紅霉素。可以預(yù)期的是，與各種抗癌藥物組合使用的式(II)或(III)維生素D可顯著增強對癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用，因此增加治療效果。具體而言，因為與單獨使用抗癌藥物的治療方案相比，如上所述組合使用較低濃度的抗癌藥物也可得到明顯增強的生長抑制作用，所以有可能使治療中與抗癌藥物有關(guān)的副作用與單獨大劑量使用時正常觀察到的副作用相比顯著下降。這些共同給藥的第二抗癌藥物的可能劑量范圍是0.1-1μg/kg/天。
根據(jù)本發(fā)明的化合物也適合于與已知抗炎藥物共同給藥。此等抗炎藥物包括甾體(如皮質(zhì)類甾醇)和非甾體(如水楊酸酯、萘普生)抗炎藥?？梢灶A(yù)期的是，與各種抗炎藥物組合使用的本發(fā)明化合物可顯著增強抗炎活性，因此增加治療效果。
共同給藥本發(fā)明的化合物和已知免疫應(yīng)答增強劑也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。此等免疫應(yīng)答增強劑包括環(huán)孢菌素、DHEA和DHEA衍生物如DHEA-硫酸酯、16α-溴-DHEA、7-氧-DHEA、16α-溴-DHEA硫酸酯和7-氧-DHEA硫酸酯?？梢灶A(yù)期的是，與各種免疫應(yīng)答增強藥物組合使用的本發(fā)明化合物可顯著增強免疫調(diào)節(jié)活性，因此增加治療效果。
將根據(jù)以下實施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，但這些實施例不是用于限制本發(fā)明的范圍。實施例1合成24-羥基維生素D2[24-OH-D2](22E)-5，7，22-三麥角甾三烯-3β-基乙酸酯(2)向50g(0.13mol)麥角甾醇(1)在300ml無水吡啶的溶液中添加33.3ml(0.35mol)乙酸酐。室溫下攪拌混合物過夜，然后添加水(600ml)。過濾沉淀并用200ml乙腈洗滌3次，然后空氣干燥，得到42.0g(74％)的(2)22-氧-5α，8α-(4-苯基-3，5-二氧-1，2，4-三唑啉-1，2-二基)23，24-二降-6-膽烯-3β-基-乙酸酯(4)向33.0(0.075mol)麥角甾醇乙酸酯(2)在1000ml氯仿中的溶液內(nèi)添加13.2g(0.075mol)的4-苯基-1，2，4-三唑啉-3，5-二酮。將所形成的溶液(3)在室溫下攪拌30分鐘，然后添加5ml吡啶。將溶液冷卻至-78℃，然后在-78℃下用臭氧-氧混合物處理2小時，接者用氮氣徹底清洗。添加50ml的二甲基亞砜，并用300ml水洗滌混合物，然后用200ml的2N鹽酸和300ml的水洗滌。分離有機層，在無水硫酸鎂上干燥，然后真空濃縮至干。殘留物在硅膠柱上用30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫進(jìn)行純制，得到16.0g泡沫固體狀的標(biāo)題化合物1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm0.85(3H，s，18CH3)，1.10(3H，s，19-CH3)，1.15(3H，d，21-CH3)，1.99(3H，s，3β-CH3CO)，5.45(1H，m，3α-H)，6.26(1H，d，7-H)，6.40(1H，d，6-H)，7.42(5H，m，Ph)，9.58(1H，d，HCO)22(E)5α，8α-(4-苯基-3，5-二氧-1，2，4-三唑啉-1，2-二基)膽甾-6，22-二烯-3β-基-乙酸酯(5)在攪拌和氮氣下將丁基鋰(1.6M在己烷中的溶液，8.94ml，0.014mol)添加在二異丙基胺(1.45g，0.014mol)于無水四氫呋喃(20ml)中的0℃溶液內(nèi)。在15分鐘的時間內(nèi)于0℃下滴加3-甲基丁烷-2-酮(1.23g，0.014mol)在無水四氫呋喃(6ml)中的溶液。在0℃下攪拌該溶液1小時，然后冷卻至-70℃，并添加醛(4)(6.0g，0.011mol)在無水四氫呋喃(60ml)中的溶液。溫度升高至-20℃，并在該溫度下保持3小時。在-20℃下添加冰乙酸(20ml)，然后使溶液達(dá)到室溫。添加醚(800ml)和水(400ml)，分離有機層，用10％鹽酸(2×300ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(2×300ml)、和水(2×300ml)洗滌。濃縮得到粗產(chǎn)物(7.5g)，將其溶解在四氫呋喃(100ml)中，該四氫呋喃中包含1.5N鹽酸(12ml)?；亓?.5小時后，用醚(600ml)稀釋混合物，用5％碳酸鈉水溶液(2×200ml)和水(2×200ml)洗滌，然后干燥(無水硫酸鎂)。減壓濃縮，得到粗產(chǎn)物(7.0g)。在硅膠上進(jìn)行色譜分離(50％乙酸乙酯的己烷溶液)得到烯酮(5)4.0g(59％)1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm0.83(3H，s，18CH3)，0.99(3H，s，19-CH3)，1.09(6H，dd，26和27-CH3)，1.12(3H，d，21-CH3)，2.0(3H，s，3β-CH3CO)，2.84(1H，m，25-H)，5.45(1H，m，3α-H)，6.06(1H，d，23-H)，6.24(1H，d，7-H)，6.39(1H，d，6-H)，6.71(1H，dd，22-H)，7.42(5H，m，Ph)22(E)-5α，8α-(4-苯基-3，5-二氧-1，2，4-三唑啉-1，2-二基)-6，22-麥角甾二烯-3β，24-二醇(6)將烯酮(5)(3.5g，5.7mmol)在干燥乙醚(100ml)中的溶液冷卻至0℃，然后滴加甲基溴化鎂(3.0M，乙醚溶液，6.8ml，0.02mol)。在0℃下1小時后，添加飽和氯化銨(100ml)。分離有機層。含水層用乙醚(2×200ml)萃取。合并的醚相用無水硫酸鎂干燥，然后真空濃縮至干，得到粗產(chǎn)物(6)3.0g(90％)。(22E)-5，7，22-麥角甾三烯-3β，24-二醇(7)向3.0g(5.1mmol)的(6)無水四氫呋喃(250ml)中的溶液內(nèi)添加氫化鋁鋰3.6g(0.09mol)。在回流下加熱混合物3小時，用冰浴冷卻，然后小心滴加冰水(5ml)使反應(yīng)混合物分解。過濾混合物，濾液真空濃縮，以除去大多數(shù)的四氫呋喃。殘留物溶解在200ml的乙酸乙酯中，并用飽和氯化鈉溶液(2×200ml)洗滌兩次，用無水硫酸鎂干燥，然后真空濃縮。殘留物在硅膠柱上用30％乙酸乙酯己烷溶液純制，得到1.5g(71％)的(7)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ ppm0.64(3H，s，18-H)，0.88(6H，dd，26和27-CH3)，0.93(3H，s，19-CH3)，1.06(3H，d，21-CH3)，1.19(3H，s，28-CH3)，3.55(1H，m，3α-H)，5.36(1H，d，7-H)，5.42(2H，m，22和23-H)，5.52(1H，d，6-H).UV(乙醇)λmax282nm24-羥基維生素D2(8)將1g(2.4mmol)的(7)溶解在250ml的乙醚和苯(4∶1)中，在氮氣和攪拌下在水冷卻的石英浸沒井中使用Hanovia中等壓力的UV燈照射2小時。真空濃縮溶液，重新溶解在100ml乙醇中，然后在回流下加熱過夜。真空濃縮溶液至干，殘留物在硅膠柱上用30％乙酸乙酯己烷溶液純制，得到0.55g(55％)的(8)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm0.57(3H，s，18-CH3)，0.92(6H，dd，26和27-CH3)，1.06(3H，d，21-CH3)，1.20(3H，s，28-CH3)，3.93(1H，m，3-H)，4.79(1H，m(尖)，19-H)，5.01(1H，m(尖)，19-H)，5.43(2H，m，22和23-H)，6.02(1H，d，7-H)，6.22(1H，d，6-H).UV(乙醇)λmax265nm實施例2合成24(S)-羥基維生素D2(9)[24(S)-OH-D2]在Zorbax-SIL柱(用己烷/異丙醇/甲醇91∶7∶2洗脫)或者反相SupelcoC-8制備柱(25cm×21.2mm，粒徑12μm，其溶劑系統(tǒng)為乙腈∶水60∶40，10ml/min)上對產(chǎn)物(8)進(jìn)行高于液相色譜(HPLC)純制。洗脫出非對映體(9)和(10)。
24(S)-羥基維生素D2表征如下[α]D24.0℃＝+120.4(c＝1.0，乙醇)，m.p.123-126℃；TLC∶Rf＝0.10(4∶1己烷∶乙酸乙酯，硅膠，Whitman No.4500-101)；元素分析計算值c＝81.50，H＝10.75；實測值c＝81.62，H＝10.66。紅外光譜(IR)(KBr)見圖3所示，而核磁共振(NMR)譜(300MHz，1H在CDCl3)見表4所示。實施例3由24(S)-OH-D2體內(nèi)產(chǎn)生1α，24(S)-二羥基維生素D2將24-OH-D2給藥(口服或者腹膜內(nèi)添加)于維生素D缺乏的大鼠。制備血漿的脂質(zhì)提取物，然后使用以下所述用于合成標(biāo)準(zhǔn)生物1α，24-(OH)2D2的方法(Horst，R.L.，Koszewski，N.J.和Reinhardt，T.A.，Biochem.，29578-82(1990)，并在此并入作為參考)純制代謝物。
標(biāo)準(zhǔn)生物1α，24-(OH)2-D2體外如下由24-OH-D2來合成在包含5ml的20％由維生素D缺乏雞制得的腎勻漿的燒杯中溫孵10μg的24-OH-D2。該反應(yīng)的產(chǎn)物通過HPLC純制，并用質(zhì)譜鑒別。在給藥維生素D或者24-OH-D2的維生素D缺乏大鼠的血漿的脂質(zhì)提取物中，發(fā)現(xiàn)分離出的一種代謝物在HPLC中與1α，24-(OH)2-D2一起移動這表明是1α，24-(OH)2-D2是維生素D2的天然代謝物。相反地，在給藥維生素D3的對比鼠中沒有檢測到24-OH-D3。實施例4由24(S)-OH-前維生素D2體內(nèi)產(chǎn)生1α，24(S)-(OH)2-D2向雄性剛斷奶的鼠喂以維生素D缺乏和正常鈣(0.47％)的飼料。四周后，將鼠分為兩個組，并口服給藥在載體如乳糖中的24-OH-前D2(0.25μg/kg)或者載體(對照)。給藥后4小時，殺死鼠，并使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)測量1α，24-(OH)2-D2的血液濃度。
該方法表明1α，24-(OH)2-D2的濃度顯著增加。實施例5在給藥24-OH-25-烯-D2的骨質(zhì)疏松癥婦女中產(chǎn)生1α，24(S)-(OH)2-25-烯-D2已被診斷患有骨質(zhì)疏松癥的女性患者每日給藥25μg/天的24-OH-25-烯-D2共1周。收集血液，并分析代謝物1α，24(S)-(OH)2-25-烯-D2。從血液中提取脂質(zhì)，使用標(biāo)準(zhǔn)方法用HPLC純制代謝物，并用Incstar(Stillwater，Minnesota)制造的放射受體分析進(jìn)行定量。在最后給藥25μg那天，結(jié)果表明血液中有顯著量的1α，24(S)-(OH)2-25-烯-D2。實施例6用24(S)-OH-前D2治療骨質(zhì)疏松用年齡在55-75歲之間的絕經(jīng)后婦女進(jìn)行臨床研究。該研究涉及120位患者，它們隨機分為三個治療組，并持續(xù)24個月。兩個治療組接受恒定劑量的口服給藥的24-OH-前D2(u.i.d.，兩種5.0μg以上的不同劑量)，而另一個組接受匹配量的安慰劑。所有患者保持正常的飲食鈣攝入(500-800mg/天)，但限制使用鈣添加劑。在以下方面通過患者組治療前和治療后的對比來評估效力(a)用X射線吸收計(DEXA)測量的總的身體、橈骨、股骨和/或脊椎骨的礦物密度；(b)髂骨的骨活組織檢查；以及(c)測定血清骨鈣蛋白。通過對比羥基脯氨酸的尿排泄、血清和尿鈣濃度、肌酸清除、血尿氮、和其他常規(guī)檢查來評估安全性。
該研究表明，通過口服給藥24-OH-前D2治療的患者與用安慰劑治療的患者相比表現(xiàn)出顯著更高的總身體、橈骨、股骨和/或脊椎骨骨密度。經(jīng)治療的患者還表現(xiàn)顯著升高的血清骨鈣蛋白。治療患者的骨活組織檢查表明，24-OH-前D2刺激正常的骨形成。所監(jiān)測的安全參數(shù)證實24-OH-前D2導(dǎo)致不明顯的高鈣血癥或高鈣尿癥的發(fā)生率、或者任何其他代謝紊亂。實施例7用24(S)-OH-D2預(yù)防性治療的絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松婦女中的骨質(zhì)流失用年齡在55-75歲之間的絕經(jīng)后婦女進(jìn)行臨床研究。該研究涉及120位患者，它們隨機分為三個治療組，并持續(xù)24-36個月。兩個治療組接受恒定劑量的口服給藥的24(S)-OH-25-烯-D2(u.i.d.，兩種5.0μg或者以上的不同劑量)，而另一個組接受匹配量的安慰劑。所有患者保持正常的飲食鈣攝入(500-800mg/天)，但限制使用鈣添加劑。在以下方面通過患者組治療前和治療后的對比來評估效力(a)總的身體鈣保留；以及(b)用雙光子吸收計(DPA)或者雙能X射線吸收計(DEXA)測量的橈骨和脊椎骨的礦物密度。通過對比羥基脯氨酸的尿排泄、血清和尿鈣濃度、肌酸清除、血尿氮、和其他常規(guī)檢查來評估安全性。
該研究表明，通過口服給藥24(S)-OH-25-烯-D2治療的患者與用安慰劑治療的患者相比表現(xiàn)出顯著更高的總身體鈣、以及橈骨和脊椎骨骨密度。所監(jiān)測的安全參數(shù)證實24(S)-OH-25-烯-D2導(dǎo)致不明顯的高鈣血癥或高鈣尿癥的發(fā)生率、或者任何其他代謝紊亂。實施例8用24-OH-D2治療牛皮癬在一個雙盲研究中評估包含24-OH-D2的口服制劑對治療皮炎(接觸和異位)的效力。所評估的制劑包含10.0-20.0μg的24-OH-D2。對照制劑是相同的，但其不包含24-OH-D2。患者在門診臨床中進(jìn)行治療，并分為實驗組和對照組。指示他們每天服藥一次，在早飯之前的早晨。
在每個患者(實驗和對照)中，所選擇的包含損傷的皮膚面積通常被衣服覆蓋，并指示患者不要將所選擇用于研究的皮膚面積暴露于陽光。損傷面積進(jìn)行估算并記錄，然后對損傷照相。記錄照相程序的相關(guān)細(xì)節(jié)，以在下一次照相時重復(fù)進(jìn)行(距離、孔徑、角度、背景等)。
醫(yī)師以每周間隔對紅斑、鱗屑和厚度進(jìn)行評估。最終的評估通常在治療4-6周結(jié)束時進(jìn)行。該研究的結(jié)果表明，與對照患者相比，每日口服給藥24-OH-D2顯著降低紅斑、鱗屑和厚度的程度。實施例9用24(S)-OH-前D2治療牛皮癬在一個雙盲研究中評估包含24(S)-OH-前D2的口服制劑對治療皮炎(接觸和異位)的效力。所評估的制劑包含10.0-20.0μg的24(S)-OH-前D2。對照制劑是相同的，但其不包含24(S)-OH-前D2?；颊咴陂T診臨床中進(jìn)行治療，并分為實驗組和對照組。指示他們每天服藥一次，在早飯之前的早晨。
在每個患者(實驗和對照)中，所選擇的包含損傷的皮膚面積通常被衣服覆蓋，并指示患者不要將所選擇用于研究的皮膚面積暴露于陽光。損傷面積進(jìn)行估算并記錄，然后對損傷照相。記錄照相程序的相關(guān)細(xì)節(jié)，以在下一次照相時重復(fù)進(jìn)行(距離、孔徑、角度、背景等)。
醫(yī)師以每周間隔對紅斑、鱗屑和厚度進(jìn)行評估。最終的評估通常在治療4-6周結(jié)束時進(jìn)行。該研究的結(jié)果表明，與對照患者相比，每日口服給藥24(S)-OH-前D2顯著降低紅斑、鱗屑和厚度的程度。實施例10用24-OH-D2治療前列腺癌患有晚期非雄激素依賴性前列腺癌的患者參加24-OH-D2的開標(biāo)研究中。符合要求的患者為至少40歲，表現(xiàn)出前列腺癌的組織學(xué)證據(jù)，而且具有以前應(yīng)答激素治療的進(jìn)行性疾病。在允許參加該研究時，患者開始口服24-OH-D2的治療，療程為26周，同時停止任何以前使用的鈣添加劑、維生素D添加劑、和維生素D激素替代治療。在治療期間，以固定間隔監(jiān)測(1)高鈣血癥、高磷血癥、高鈣尿癥、高磷尿癥和其他毒性；(2)轉(zhuǎn)移疾病發(fā)展變化的證據(jù)；以及(3)對預(yù)定測試藥物劑量的順應(yīng)性。
該研究進(jìn)行兩期。在第一期中，每日口服24-OH-D2的最大耐受劑量(MTD)是通過向連續(xù)組的患者給藥逐漸增高的劑量來確定的。所有劑量都是在早餐之前的早晨給藥。第一組患者用25.0μg的24-OH-2-D2治療。隨后組的患者用50.0、75.0和100.0μg/天治療。在研究期間不間斷地連續(xù)給藥，除非血清鈣超過11.6mg/dl，或者觀察到3或4級的其他毒性，在此情況下中止給藥，直至所觀察的毒性作用解除，然后以降低10.0μg的劑量重新開始。
該研究的第一期結(jié)果表明，24-OH-D2的MTD是25.0μg/天以上，其是用1α，25-(OH)2-D3時所達(dá)到的濃度的10-50倍。分析從參加患者中定期收集的血樣，其表明24-(OH)-D2的循環(huán)濃度與給藥劑量成比例地增加，在最高劑量時升高至100pg/ml以上的最大濃度，而且1α，25-(OH)2-D3的循環(huán)濃度受到抑制，通常至檢測不到的水平。血清和尿鈣劑量依賴性地升高。用MTD的24-OH-D2治療患者至少6個月表明，與轉(zhuǎn)移疾病有關(guān)的骨痛顯著消失。
在第二期中，患者用24-OH-D2以0.5和1.0倍于MTD的劑量治療24個月。在治療1和2年后，用于評估轉(zhuǎn)移疾病的發(fā)展的CAT掃描、X射線和骨掃描都表明，以低劑量治療的許多患者中疾病穩(wěn)定或者部分康復(fù)，而以高劑量治療的許多患者中疾病穩(wěn)定以及部分或者完全康復(fù)。實施例11用24-OH-前D2治療前列腺癌用維生素D化合物重復(fù)實施例8的研究。第一期研究的結(jié)果表明，用MTD的24-OH-前D2治療患者至少6個月，與轉(zhuǎn)移疾病有關(guān)的骨痛顯著消失。第二期研究的結(jié)果表明，2年后用于評估轉(zhuǎn)移疾病的發(fā)展的CAT掃描、X射線和骨掃描都表明以低劑量治療的許多患者中疾病穩(wěn)定或者部分康復(fù)，而以高劑量治療的許多患者中疾病穩(wěn)定以及部分或者完全康復(fù)。實施例12用24-OH-D4治療由于繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)而具有高血PTH的老年患者用患有繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)的40位患者進(jìn)行12個月雙盲安慰劑對照臨床實驗。所選患者的年齡為60-100歲，而且具有繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)史?；颊哌€有股頸骨質(zhì)稀少(股頸骨礦物密度小于等于0.70g/cm2)。
所有患者進(jìn)行6周的對照期，之后他們隨機分為兩個治療組一組接受恒定劑量為15μg/天的24-OH-D4，而另一個組接受匹配的安慰劑。兩個組都保持正常的飲食鈣攝入，但不使用鈣添加劑。在以下方面比較治療前和治療后的患者進(jìn)行效力評估(a)完整的PTH(iPTH)；(b)橈骨、股骨和脊椎骨的礦物密度；以及(c)骨特異性尿標(biāo)記物(如吡啶翁交聯(lián)物)。安全性用(a)血清鈣和磷、以及(b)尿鈣和磷來評估。
臨床數(shù)據(jù)分析表明，24-OH-D4顯著降低iPTH和骨特異性尿標(biāo)記物。用該化合物治療的患者與基線值相比表現(xiàn)出正常的血清鈣濃度和穩(wěn)定的橈骨和脊椎骨密度。相反，用安慰劑治療的患者沒有表現(xiàn)出iPTH和骨特異性尿標(biāo)記物的下降。而且在治療組中觀察到高鈣血癥不顯著的發(fā)生率。實施例13用24-OH-前D2治療由于繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)而具有高血PTH的老年患者用患有繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)的40位患者進(jìn)行12個月雙盲安慰劑對照療程實驗。所選患者的年齡為60-100歲，而且具有繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)史?；颊哌€有股頸骨質(zhì)稀少(股頸骨礦物密度小于等于0.70g/cm2)。
所有患者進(jìn)行6周的對照期，之后他們隨機分為兩個治療組一組接受恒定劑量為15μg/天的24-OH-前D2，而另一個組接受匹配的安慰劑。兩個組都保持正常的飲食鈣攝入，但不使用鈣添加劑。在以下方面比較治療前和治療后的患者進(jìn)行效力評估(a)完整的PTH(iPTH)；(b)橈骨、股骨和脊椎骨的礦物密度；以及(c)骨特異性尿標(biāo)記物(如吡啶翁交聯(lián)物)。安全性用(a)血清鈣和磷、以及(b)尿鈣和磷來評估。
臨床數(shù)據(jù)分析表明，24-OH-前D2顯著降低iPTH和骨特異性尿標(biāo)記物。用該化合物治療的患者與基線值相比表現(xiàn)出正常的血清鈣濃度和穩(wěn)定的橈骨和脊椎骨密度。相反，用安慰劑治療的患者沒有表現(xiàn)出iPTH和骨特異性尿標(biāo)記物的下降。而且在該治療組中觀察到高鈣血癥不顯著的發(fā)生率。實施例14用24-OH-D2治療晚期腎疾病中繼發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)的患者30位腎病患者參加研究原發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)的研究?；颊叩膇PTH濃度大于1000pg/ml。這些大大升高的濃度表明疾病的一部分是腺體原發(fā)性的以及一部分是腎功能丟失導(dǎo)致的繼發(fā)性的。根據(jù)需要增加(最大為100μg/天，3次/周)或者降低24-OH-D2的初始劑量(50μg 3次/周)，以實現(xiàn)并保持150-300pg/ml范圍的iPTH。治療11-12周后，患者的iPTH濃度降低至低于1000pg/ml，而在許多情況下低于500pg/ml。在研究期間患者幾乎沒有高鈣血癥發(fā)生。實施例15用24-OH-前D2治療原發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)20位腎病患者參加研究原發(fā)性甲狀旁腺機能亢進(jìn)的研究?；颊叩膇PTH濃度大于200pg/ml。根據(jù)需要增加(最大為10μg/天)或者降低24-OH-前D2的初始劑量(2-4μg/天)，以實現(xiàn)并保持正常范圍的iPTH。治療11-12周后，患者的iPTH濃度降低至低于100pg/ml，而在許多情況下低于60pg/ml。在研究期間患者幾乎沒有高鈣血癥發(fā)生。實施例1624-OH-D2的免疫學(xué)測試使用9-12周齡的雌性C57BL/6小鼠。小鼠隨意給以食物和水，而且保持12小時光照和12小時黑暗的循環(huán)。
制備已知的平衡鹽溶液(BSS)，并用HEPES緩沖液補充至0.01摩爾濃度。
測試化合物24-OH-D2溶解在二甲基亞砜中，至最終濃度為0.2或0.4mg/ml。當(dāng)與維生素D化合物一起作用時，使用減少光照的條件。
小鼠每4只分為一組，并腹膜內(nèi)接種3×106同種異體P815腫瘤細(xì)胞，并在10天后評估所得的細(xì)胞毒性胸腺衍生的淋巴細(xì)胞(CTL)活性。通過腹膜內(nèi)途徑用溶解在二甲基亞砜中的測試化合物或者僅用二甲基亞砜(載體對照)25微升處理小鼠。在實驗1中，從免疫接種前1天開始，每天給藥5微克24-OH-D2對小鼠進(jìn)行處理，然后持續(xù)至分析前那天。在實驗2中，小鼠僅用10微克24-OH-D2處理兩次開始免疫接種前那天和免疫接種那天。
使小鼠免疫接種P815細(xì)胞后10天，使脾由鋼網(wǎng)中通過進(jìn)入BSS，然后用BSS洗滌兩次，由此制備單個脾細(xì)胞懸浮液。進(jìn)一步處理脾細(xì)胞、用Cr標(biāo)記P815靶細(xì)胞、分析機理、以及用CTL計算結(jié)果都是已知的，而且描述在第4,749,710號美國專利中，其在此并入作為參考。單獨地由每組動物的脾細(xì)胞測定細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞活性，結(jié)果用每組的平均CTL活性(百分特異性Cr釋放)±標(biāo)準(zhǔn)偏差來表示。
結(jié)果表明，在載體對照組中，用P815細(xì)胞免疫接種的小鼠在10天內(nèi)產(chǎn)生顯著的CTL活性。在用24-OH-D2處理的兩個組中都觀察到CTL活性在統(tǒng)計學(xué)上顯著性地降低，由此證明在給藥于動物時該化合物的免疫抑制活性。
還應(yīng)理解的是，雖然上述實施例具體地使用了具體的24-OH-D和24-OH-前D類化合物，在本發(fā)明范圍內(nèi)的其他化合物也可容易地用于本發(fā)明的治療中，而且具有基本上等價的結(jié)果。
總而言之，本發(fā)明提供了24-羥基-維生素D類化合物及其在某些疾病和紊亂中的治療方法，包括甲狀旁腺機能亢進(jìn)、過度增殖性疾病以及骨損耗性疾病、免疫和炎性應(yīng)答條件，而且具有顯著低的高鈣血癥和高磷血癥。
雖然采用一些具體內(nèi)容已對本發(fā)明作了描述和舉例，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識到對于已描述的內(nèi)容可以有多種改動，包括改變，添加或刪減。因此，這些改動也應(yīng)包含在本發(fā)明之中，本發(fā)明的范圍僅由最廣義的解釋作界定，其中最廣義的解釋依據(jù)于具有法律效力的所附權(quán)利要求。
權(quán)利要求
1.維生素D化合物在制備用于治療或預(yù)防骨質(zhì)或骨礦物質(zhì)含量流失和/或甲狀旁腺機能亢進(jìn)、和/或細(xì)胞過度增殖、和/或調(diào)節(jié)免疫和炎性應(yīng)答的藥物中的應(yīng)用，其中所述維生素D化合物是24-羥基維生素D或者24-羥基前維生素D。
2.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，所述24-羥基維生素D是式(I)的化合物 其中Z代表飽和或不飽和、取代或未取代、直鏈、支鏈或環(huán)狀C4-C18烴基，其中C-24或等價位置被羥基化；如果與Y是雙鍵連接在A環(huán)上的，則Y為亞甲基，或者如果與Y為單鍵，則Y為甲基或氫；而X為氫、低級烷基或低級氟代烷基。
3.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，所述24-羥基前維生素D是式(III)的化合物 其中Z代表飽和或不飽和、取代或未取代、直鏈、支鏈或環(huán)狀C4-C18烴基，其中C-24或等價位置被羥基化；Y為甲基或氫；而X為氫、低級烷基或低級氟代烷基。
4.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，Z是式(IIA)表示的側(cè)鏈 其中沿側(cè)鏈的虛線表示任選添加的C-C鍵；m是0或1；R1和R2分別是低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基、低級氟代鏈烯基、低級環(huán)烷基，或者與它們所連接的碳一起形成C3-C8環(huán)烴基；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；R5和R6分別為氫或者一起形成在C-22和C-23之間的雙鍵。
5.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，Z是括式(IIB)表示的側(cè)鏈 其中R5和R6分別為氫或者一起形成在C-22和C-23之間的雙鍵；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；而R1和R2分別是氫、低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基、低級氟代鏈烯基、低級環(huán)烷基，或者與它們所連接的碳一起形成C3-C8環(huán)烴基。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其中，所述24-羥基維生素D是24-羥基維生素D2、24(S)-羥基維生素D2、24-羥基維生素D4、和24(R)-羥基維生素D4。
7.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，Z是式(IIC)表示的側(cè)鏈 其中n為選自1或2的整數(shù)；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4和R7分別為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；A為碳、氧、硫或氮；當(dāng)A為氮時，r為1而s為0；當(dāng)A為碳時，r和s為1；當(dāng)A為硫或氧時，r和s為0；以及R9和R10分別為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基。
8.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，Z是式(IID)表示的側(cè)鏈 其中R3、R9和R10分別為氫、低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基和低級氟代鏈烯基，而R4和R7為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基。
9.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，Z是式(IIE)表示的側(cè)鏈 其中側(cè)鏈上的虛線表示任選添加的C-C鍵；q為0或選自1或2的整數(shù)；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4和R7為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；A為碳、氧、硫或氮；當(dāng)A為氮時，r為1而s為0；當(dāng)A為碳時，r和s為1；當(dāng)A為硫或氧時，r和s為0；R9和R10分別為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基。
10.如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其中，所述24-羥基維生素D化合物是24-OH-25-烯-D2和24-OH-25-羰基-D2。
11.維生素D化合物在制備用于增加或保持骨質(zhì)或骨礦物質(zhì)含量、和/或降低或保持甲狀旁腺激素水平、和/或抑制過度增殖作用、和/或誘導(dǎo)或增強調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的細(xì)胞分化、和/或調(diào)節(jié)炎性應(yīng)答的藥物中的應(yīng)用，其中，所述維生素D化合物是24-羥基維生素D或者24-羥基前維生素D。
12.權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其中，所述24-羥基維生素D是式(I)的化合物 其中Z代表飽和或不飽和、取代或未取代、直鏈、支鏈或環(huán)狀C4-C18烴基，其中C-24或等價位置被羥基化；如果與Y是雙鍵連接在A環(huán)上的，則Y為亞甲基，或者如果與Y為單鍵，則Y為甲基或氫；而X為氫、低級烷基或低級氟代烷基。
13.如權(quán)利要求11所述的應(yīng)用，其中，所述24-羥基前維生素D是式(III)的化合物 其中Z代表飽和或不飽和、取代或未取代、直鏈、支鏈或環(huán)狀C4-C18烴基，其中C-24或等價位置被羥基化；Y為甲基或氫；而X為氫、低級烷基或低級氟代烷基。
14.維生素D化合物在制備用于治療骨質(zhì)疏松、和/或甲狀旁腺機能亢進(jìn)、和/或牛皮癬、和/或皮膚癌、和/或乳腺癌、和/或結(jié)腸癌、和/或前列腺癌、和/或前列腺增生、和/或免疫應(yīng)答受損的藥物中的應(yīng)用，其中，所述維生素D化合物是24-羥基維生素D或者24-羥基前維生素D。
15.一種包含有效量的、基本上純的、經(jīng)合成的24-羥基維生素D或者24-羥基前維生素D以及藥物學(xué)上可接受的載體、輔劑或賦形劑的藥物組合物。
16.如權(quán)利要求15所述的組合物，其中，組合物可口服給藥。
17.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，所述24-羥基維生素D化合物的給藥劑量為3.5-1000μg/周。
18.如權(quán)利要求15所述的組合物，其中，所述藥物還包括骨劑、細(xì)胞毒性劑、免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑、抗炎劑或它們的組合。
19.24-羥基維生素D化合物，其是式(I)表示的化合物 其中Z代表飽和或不飽和、取代或未取代、直鏈、支鏈或環(huán)狀C4-C18烴基，其中C-24或等價位置被羥基化；如果與Y是雙鍵連接在A環(huán)上的，則Y為亞甲基，或者如果與Y為單鍵，則Y為甲基或氫，條件是式(I)的化合物不是24-羥基維生素D2；而X為氫、低級烷基或低級氟代烷基，條件是式(I)的化合物不是24-羥基維生素D2。
20.一種24-羥基前維生素D，其是式(III)的化合物 其中Z代表飽和或不飽和、取代或未取代、直鏈、支鏈或環(huán)狀C4-C18烴基，其中C-24或等價位置被羥基化；Y為甲基或氫；而X為氫、低級烷基或低級氟代烷基。
21.如權(quán)利要求19所述的化合物，其中，Z是式(IIC)表示的側(cè)鏈 其中n為選自1或2的整數(shù)；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4和R7分別為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；A為碳、氧、硫或氮；當(dāng)A為氮時，r為1而s為0；當(dāng)A為碳時，r和s為1；當(dāng)A為硫或氧時，r和s為0；以及R9和R10分別為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基。
22.如權(quán)利要求19所述的化合物，其中，Z是式(IIE)表示的側(cè)鏈 其中側(cè)鏈上的虛線表示任選添加的C-C鍵；q為0或選自1或2的整數(shù)；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4和R7為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；A為碳、氧、硫或氮；當(dāng)A為氮時，r為1而s為0；當(dāng)A為碳時，r和s為1；當(dāng)A為硫或氧時，r和s為0；R9和R10分別為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基。
23.如權(quán)利要求20所述的化合物，其中，Z是式(IIC)表示的側(cè)鏈 其中n為選自1或2的整數(shù)；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4和R7分別為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；A為碳、氧、硫或氮；當(dāng)A為氮時，r為1而s為0；當(dāng)A為碳時，r和s為1；當(dāng)A為硫或氧時，r和s為0；以及R9和R10分別為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基。
24.如權(quán)利要求20所述的化合物，其中，Z是式(IIE)表示的側(cè)鏈 其中側(cè)鏈上的虛線表示任選添加的C-C鍵；q為0或選自1或2的整數(shù)；R3為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基；R4和R7為低級烷基、低級氟代烷基、低級鏈烯基或低級氟代鏈烯基；A為碳、氧、硫或氮；當(dāng)A為氮寸，r為1而s為0；當(dāng)A為碳時，r和s為1；當(dāng)A為硫或氧時，r和s為0；R9和R10分別為氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級氟代烷基或低級氟代鏈烯基。
25.作為制成品的片劑，以在給藥后的時間中測量的維生素D的血濃計，其具有相當(dāng)高的維生素D吸收速率，其包括維生素D化合物以及藥物學(xué)上可接受的載體、輔劑或賦形劑的藥物，其中所述維生素D化合物是4-羥基維生素D或者24-羥基前維生素D。
26.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中，所述藥物還包括骨劑、細(xì)胞毒性劑、免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)劑、抗炎劑或它們的組合。
27.如權(quán)利要求26所述的應(yīng)用，其中，所述骨劑是其他維生素D化合物、結(jié)合雌激素、氟化鈉、雙膦酸酯、鈷胺、鈣受體激動劑、百日咳毒素、硼或DHEA。
全文摘要
本發(fā)明提出了24－羥基維生素D類化合物以及它們在治療和預(yù)防甲狀旁腺機能亢進(jìn)和過度增殖性疾病、調(diào)節(jié)免疫和炎性反應(yīng)及治療骨損耗性疾病中的應(yīng)用。
文檔編號A61K31/59GK1379675SQ99806763
公開日2002年11月13日 申請日期1999年5月28日 優(yōu)先權(quán)日1998年5月29日
發(fā)明者查爾斯·W·畢曉普, 喬伊斯·C·克努森, 斯蒂芬·斯特拉格內(nèi)爾 申請人:骨療國際公司