專利名稱：胰高血糖素樣肽1改善葡萄糖耐受不良者體內(nèi)β細(xì)胞對(duì)葡萄糖的應(yīng)答的制作方法
相關(guān)申請(qǐng)?jiān)撋暾?qǐng)是1998年6月12日美國臨時(shí)申請(qǐng)60/089,044的部分續(xù)展申請(qǐng)。
葡萄糖耐受不良的特征是早期的胰β細(xì)胞功能的細(xì)微缺陷，并伴有胰島素耐受性。這些早期缺陷包括β細(xì)胞感知血漿葡萄糖濃度細(xì)微改變并通過正確分泌胰島素進(jìn)行應(yīng)答的能力受損，以及葡萄糖胰島素分泌劑量-應(yīng)答曲線略微右移。在IGT的極早期，β細(xì)胞就喪失了在2-小時(shí)葡萄糖水平升高極小時(shí)的葡萄糖感知和迅速分泌胰島素的應(yīng)答能力。IGT中的葡萄糖控制隨時(shí)間惡化主要是因?yàn)棣录?xì)胞功能的進(jìn)行性破壞。在許多情況下，這將導(dǎo)致高胰島素血癥、肥胖和心血管疾病等不良情況，有時(shí)也稱X綜合征。許多情況下，嚴(yán)重的IGT將導(dǎo)致最終的葡萄糖調(diào)控喪失，以及引發(fā)INDDM。
顯然，IGT嚴(yán)重危害著健康。IGT患者通常肥胖，而且，血漿胰島素水平高，后者常會(huì)造成毒性。高胰島素水平主要是因?yàn)榧∪狻⑵渌M織和脂肪細(xì)胞不能用胰島素使血漿中的葡萄糖被攝取，且持續(xù)加重。IGT會(huì)提高發(fā)生全面心血管疾病的危險(xiǎn)性。
胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)是一種天然腸肽，由腸的L細(xì)胞分泌，作為腸降血糖激素刺激胰β細(xì)胞以葡萄糖依賴性模式分泌胰島素。它治療NIDDM的潛力已被證實(shí)外源性輸注藥學(xué)劑量的GLP-1通常能降低血漿葡萄糖水平。然而，GLP-1并不明顯提高NIDDM的β細(xì)胞功能。Nathan DM,Schreiber E,Fogel H,Mojsov S,Habener JF。胰高血糖素樣肽-1(7-37)在糖尿病和非糖尿病個(gè)體中的促胰島作用。糖尿病治療15:270-276,1992；Gutniak M,Orskov C,Holst JJ,Ahren B,EfendricS。胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺在正常人和糖尿病患者中的抗糖尿病作用。新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志326:1316-1322,1992；Nauck MA,Kleine N.Orskov C,Holst JJ,Willms B,Creutzfeldt W。外源性胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺令Ⅱ型(非胰島素依賴性)糖尿病中的空腹血糖過高恢復(fù)正常。糖尿病學(xué)36:741-744,1993；GutniakMK,Linde B,Holst JJ,Efendie S。皮下注射腸降血糖激素胰高血糖素樣肽-1阻止了NIDDM的餐后血糖過高。糖尿病治療17:1039-1044,1994 Rachman J,GribbleFM,Barrow BA,Levy JC,Buchanan KD,Turner RC。通宵輸注胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺可使NIDDM患者對(duì)葡萄糖的胰島素應(yīng)答恢復(fù)正常。糖尿病45:1524-1530,1996；Rachman J,Barrow BA,Levy JC,Turner RC。連續(xù)給予胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)使NIDDM患者的白天葡萄糖濃度接近正常，糖尿病學(xué)40:205-211,1997。
IGT目前尚無法治愈。然而，它已被公認(rèn)為一種嚴(yán)重威脅健康的疾病。通常，IGT的癥狀會(huì)不斷惡化，常導(dǎo)致血漿葡萄糖失控，從而造成Ⅱ型糖尿病。目前需要一種手段來治療該癥。
過去數(shù)年的大量研究證明，在NIDDM中使用GLP-1降低了血液中的葡萄糖和胰島素水平，因此，應(yīng)該可望成為該病的治療手段。
然而，目前還沒有研究證明GLP-1能夠矯正β細(xì)胞失能，使它在血糖升高時(shí)恢復(fù)感知并通過分泌胰島素迅速作出應(yīng)答。應(yīng)答并感知血糖升高與β細(xì)胞的胰島素分泌密切關(guān)聯(lián)，這一功能的惡化正是IGT的主要原因。在過去的研究中，給NIDDM患者使用GLP-1顯示出使空腹血漿葡萄糖恢復(fù)正常和刺激累積性β細(xì)胞胰島素分泌的能力。然而，通宵輸注的GLP-1卻沒有提高NIDDM患者對(duì)第二日進(jìn)食的葡萄糖應(yīng)答。當(dāng)給NIDDM患者連續(xù)19小時(shí)、通宵或在標(biāo)準(zhǔn)的三餐時(shí)間輸注GLP-1時(shí)，血漿葡萄糖水平被降低，但已損壞的β細(xì)胞的餐后功能只得到了略微改善。
尚未研究過在IGT患者中，β細(xì)胞對(duì)長期輸注GLP-1的反應(yīng)，雖然沒有證據(jù)表明其結(jié)果會(huì)與給NIDDM輸注GLP-1不同，至今，尚未詳細(xì)研究過GLP-1對(duì)于β細(xì)胞應(yīng)答血漿葡萄糖濃度略微升高和下降的作用。
因此，需要有一種方法阻止IGT的發(fā)展，并使葡萄糖代謝恢復(fù)正常。
所以，本發(fā)明目的之一是提供一種在葡萄糖耐受不良患者中恢復(fù)或提高β細(xì)胞功能和敏感性的方法，從而恢復(fù)或改善應(yīng)答血漿葡萄糖水平的胰島素分泌模式。
本發(fā)明的目的還在于提供一種延遲或避免β細(xì)胞功能退化的方法，正是β細(xì)胞功能退化造成葡萄糖耐受不良發(fā)展到標(biāo)志著NIDDM發(fā)生的血漿葡萄糖失控。
本發(fā)明的目的還在于改善IGT的心血管疾病作用，從而降低心血管病和中風(fēng)的危險(xiǎn)性。
以下具體描述將清楚的說明實(shí)現(xiàn)以上及其他目的的方法。
因此，本發(fā)明涉及一種治療葡萄糖耐受不良和耐胰島素患者的方法，即給患者使用恢復(fù)、提高或復(fù)原β細(xì)胞敏感性和功能以及胰島素分泌模式有效量的GLP-1。本發(fā)明還涉及降低IGT患者血漿胰島素水平，同時(shí)降低胰島素耐性及與之并發(fā)的心血管疾病的方法。
在實(shí)施以下實(shí)施例時(shí)，發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，給IGT患者使用GLP-1，與IGT患者中常見的無規(guī)律非協(xié)調(diào)性胰島素應(yīng)答相反，出人意料地重建了β細(xì)胞對(duì)血漿葡萄糖水平細(xì)微波動(dòng)的靈敏、迅速而協(xié)調(diào)的胰島素分泌應(yīng)答，接近常人的胰島素分泌模式。
圖2是各受試者在輸注葡萄糖的同時(shí)輸注鹽水(O)或GLP-1(·)時(shí)，平均胰島素分泌率(ISR)和平均葡萄糖濃度的比較。圖2A顯示IGT患者內(nèi)的比較。圖2B顯示NIDDM患者內(nèi)的比較。
圖3顯示兩名IGT患者，即受試者D01和D02的葡萄糖、胰島素分泌率(ISR)和胰島素濃度曲線。圖3A和3C顯示對(duì)鹽水輸注的應(yīng)答。圖3B和3D顯示對(duì)GLP-1輸注的應(yīng)答。
圖4是兩名NIDDM患者，即受試者D07和D-09的葡萄糖水平、胰島素分泌率(ISR)和胰島素水平的比較。圖4A和4C顯示鹽水輸注期間的曲線。圖4B和4D顯示GLP-1輸注期間的曲線。
圖5是鹽水和GLP-1輸注期間對(duì)受試者胰島素分泌的光譜分析比較。左邊顯示IGT患者的光譜分析結(jié)果。右邊顯示NIDDM患者的光譜分析結(jié)果。
圖6是生理鹽水和GLP-1輸注期間的已歸一化光譜功率的比較。圖6A顯示IGT患者(D02)在鹽水和GLP-1輸注期間的已歸一化光譜功率的比較。圖6B顯示NIDDM患者(D07)在生理鹽水和GLP-1輸注期間的已歸一化光譜功率的比較。
本發(fā)明的詳細(xì)描述本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，使用GLP-1在葡萄糖耐受不良(IGT)者中恢復(fù)或增強(qiáng)胰β細(xì)胞的功能和能力，即對(duì)血漿葡萄糖水平的細(xì)微升高或改變迅速作出應(yīng)答，并以與之協(xié)調(diào)的模式分泌胰島素，即胰島素的脈動(dòng)性分泌，接近非IGT常人胰島素分泌模式。在以血漿葡萄糖失控為特征的已發(fā)展成為NIDDM的患者中，未能恢復(fù)這一胰島素分泌模式。
用歸一化的光譜功率來定量測定β細(xì)胞的功能。光譜功率測定不依賴于胰島素敏感性調(diào)節(jié)的β細(xì)胞功能。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在IGT患者中，GLP-1將光譜功率提高到了正常范圍。光譜功率圖顯示，使用GLP-1后，IGT患者的血漿葡萄糖與胰島素分泌波動(dòng)的導(dǎo)引關(guān)系或密切協(xié)調(diào)恢復(fù)到了正常水平。這一胰島素分泌波動(dòng)模式的改善對(duì)于維持血糖平衡非常重要。例如，已證明，在120分鐘內(nèi)以模擬亞晝夜波動(dòng)的方式輸注胰島素比恒速輸注胰島素降低血漿葡萄糖濃度更有效(27)。
本發(fā)明提供了一種組合物，它含有在IGT患者體內(nèi)與胰高血糖素樣肽-1的受體結(jié)合，并能夠增強(qiáng)β細(xì)胞對(duì)血漿葡萄糖濃度細(xì)微改變感知和應(yīng)答能力的化合物。實(shí)施例之一中，該受體結(jié)合性化合物是胰高血糖素樣肽-1。另一實(shí)施例中，該受體結(jié)合性化合物是一種變異肽，其區(qū)別于胰高血糖素樣肽-1的取代、缺失和變異總共不超過10個(gè)氨基酸。該受體結(jié)合性化合物還可以是激活GLP-1釋放的聚核苷酸或物質(zhì)，激活GLP-1受體的分子，或GLP-1受體結(jié)合性化合物，這包括化學(xué)構(gòu)建的分子、肽類似物或GLP-1激動(dòng)劑。
發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，使用人GLP-1增強(qiáng)或恢復(fù)胰島素分泌應(yīng)答受血漿葡萄糖細(xì)微改變的導(dǎo)引。因此，本發(fā)明組合物可用于治療，以使異常的葡萄糖耐受性恢復(fù)正常。
發(fā)明人在此證明，低劑量GLP-1輸注能增強(qiáng)β細(xì)胞應(yīng)答血漿葡萄糖水平升高而分泌胰島素的功能。因此，GLP-1可用于加強(qiáng)IGT患者的β細(xì)胞功能的保持。給予GLP-1還能調(diào)節(jié)IGT患者的胰島素分泌模式或使其恢復(fù)正常，從而全面降低血漿胰島素水平。這種正?；饔脛t繼而降低胰島素耐受性。
“GLP-1”或胰高血糖素樣肽-1包括GLP-1的類似物，用于本發(fā)明時(shí)包括胰高血糖素樣肽及相關(guān)肽及胰高血糖素樣肽-1的類似物，它們與胰高血糖素樣肽(GLP-1)受體蛋白-例如GLP-1(7-36)酰胺受體蛋白-結(jié)合，并象GLP-1天然生物活性形式GLP-1(7-36)酰胺那樣具有相應(yīng)的對(duì)胰島素分泌的生物作用。參見，Goke,B和Byrne,M，糖尿病醫(yī)學(xué)，1996,13:854-860。GLP-1受體是一種存在于例如產(chǎn)胰島素β細(xì)胞上的細(xì)胞表面蛋白。胰高血糖素樣肽及其類似物包括具有促胰島活性，并且是例如產(chǎn)胰島素β細(xì)胞上GLP-1受體分子及其第二信使活性的激動(dòng)劑(即具有激活作用)的物質(zhì)。對(duì)于通過該受體表現(xiàn)出活性的胰高血糖素樣肽的激動(dòng)劑已有所描述EP0708179A2；Hjorth,S.A.等，生物化學(xué)雜志269(48):30121-30124(1994)；Siegel,E.G.等，美國糖尿病協(xié)會(huì)第57屆學(xué)術(shù)會(huì)議，Boston(1997)；Hareter,A.等，美國糖尿病協(xié)會(huì)第57屆學(xué)術(shù)會(huì)議，Boston(1997)；Adelhorst,K.等，生物化學(xué)雜志269(9):6275-6278(1994),Deacon C.T.等，第16屆國際糖尿病聯(lián)合會(huì)會(huì)議摘要，糖尿病學(xué)增刊(1997)；Irwin,D.M.等，美國科學(xué)院院報(bào)94:7915-7920(1997)；Mosjov,S.國際肽與蛋白質(zhì)研究雜志40:333-343(1992)。胰高血糖素樣分子包括表達(dá)GLP-1激動(dòng)劑，即例如產(chǎn)胰島素β細(xì)胞上GLP-1受體分子及其第二信使活性的活化劑的聚核苷酸。同是β細(xì)胞激動(dòng)劑的GLP-1類似物包括，例如，特地設(shè)計(jì)成激活GLP-1受體的化合物。胰高血糖素樣肽-1拮抗劑也是已知的，參見，例如，Watanabe,Y.等，內(nèi)分泌學(xué)雜志140(1):45-52(1994)，這包括exendin(9-39)胺，這是一種exendin類似物，是GLP-1受體的強(qiáng)拮抗劑(參見，例如，WO97/46584)。最近公開的有Black Widow GLP-1和Ser2GLP-1，參見G.G.Holz,J.F.Hakner/比較生物化學(xué)與生理學(xué)，B部121(1998)177-184和Ritzel等，“一種提高了血漿穩(wěn)定性的合成胰高血糖素樣肽-1類似物”，內(nèi)分泌學(xué)雜志1998年10月；159(1):93-102。
其他實(shí)施例包括化學(xué)合成的胰高血糖素樣肽及與之基本同源的多肽或片段。“基本同源”既可用于核酸序列也可用于氨基酸序列，表示，一段特定的序列，例如一段突變序列，因一處或多處取代、缺失或插入而區(qū)別于一段參照序列，但區(qū)別的凈結(jié)果不造成該序列與參照序列之間相反的功能差異。就本發(fā)明目的而言，將同源性高于50％，更好的是高于90％，增強(qiáng)β細(xì)胞應(yīng)答血漿葡萄糖水平的生物活性相當(dāng)，且表達(dá)特征相當(dāng)?shù)男蛄姓J(rèn)為是基本同源的。為了測定同源性，必須忽略成熟序列的截短。將同源性、生物活性可比性和表達(dá)特征較低的序列認(rèn)為彼此不相當(dāng)。
哺乳動(dòng)物的GLP肽和胰高血糖素由同一基因編碼。在回腸內(nèi)，給表型經(jīng)加工而成為兩類主要的GLP肽類激素，既GLP-1和GLP-2。已知從這些表型肽加工得到了4種GLP-1相關(guān)肽。GLP-1(1-37)的序列為His Asp Glu Phe Glu Arg HisAla Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys GluPhe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly(SEQ ID NO:1)。GLP-1(1-37)經(jīng)翻譯后加工酰胺化則得到GLP-1(1-36)NH2，其序列為His Asp Glu Phe Glu Arg His Ala GluGly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu Phe IleAla Trp Leu Val Lys Gly Arg(NH2)(SEQ ID NO:2)；或者，經(jīng)酶處理則得到GLP-1(7-37)，其序列為His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu GlyGln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly(SEQ ID NO:3)。GLP-1(7-37)也可被酰胺化，則得到GLP-1(7-36)酰胺，這是GLP-1分子天然形式，其序列為His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln AlaAla Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg(NH2)(SEQ ID NO:4)。
腸L細(xì)胞以1∶5的比例分泌GLP-1(7-37)(SEQ ID NO:3)和GLP-1(7-36)酰胺(SEQ ID NO:4)。這些GLP-1截短形式的原位半衰期短，少于10分鐘，并分別被氨基二肽酶Ⅳ滅活成為Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu GlyGln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly(SEQ ID NO:5)；和Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu PheIle Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg(NH2)(SEQ ID NO:6)。據(jù)估計(jì)，肽Glu Gly Thr PheThr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp LeuVal Lys Gly Arg Gly(SEQ ID NO:5)和Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser TyrLeu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg(NH(NH2)(SEQ ID NO:6)影響肝的葡萄糖產(chǎn)生，但不刺激胰產(chǎn)生或分泌胰島素。
在巨蜥毒液中有6種肽與GLP-1同源。在表1中，將它們序列與GLP-1的序列進(jìn)行了比較。
表1a．HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRNH2b．HSDGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSNH2c．DLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSNH2d．HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPSNH2e．HSDATFTAEYSKLLAKLALQKYLESILGSSTSPRPPSSf．HSDATFTAEYSKLLAKLALQKYLESILGSSTSPRPPSg．HSDAIFTEEYSKLLAKLALQKYLASILGSRTSPPPNH2h．HSDAIFTQQYSKLLAKLALQKYLASILGSRTSPPPNH2a=GLP-1(SEQ ID NO:4)b=Exendin3(SEQ ID NO:7)c=Exendin4(9-39)NH2(SEQ ID NO:8)
d=Exendin4(SEQ ID NO:9)e=Helospectin Ⅰ(SEQ ID NO:10)f=Helospectin Ⅱ(SEQ ID NO:11)g=Helodermin(SEQ ID NO:12)h=Q8,Q9Helodermin(SEQ ID NO:13)表1勾勒區(qū)域所顯示的主要同源性是肽c和h分別來自b和g。全部6種天然肽(a,b,d,e,f和g)在1、7、11和18位是同源的。GLP-1與Exendin3和Exendin4(a,b和d)在4、5、6、8、9、15、22、23、25、26和29位也同源。在2位，A、S和G結(jié)構(gòu)相似。在3位，殘基D和E(Asp和Glu)結(jié)構(gòu)相似。在22和23位，F(xiàn)(Phe)和I(Ile)分別與Y(Tyr)和L(Leu)結(jié)構(gòu)相似。同樣，在26位，L與I結(jié)構(gòu)相似。
因此，在GLP-1的30個(gè)殘基中，Exendin3和Exendin4在15個(gè)位置上與之相同，在另5個(gè)位置上與之相當(dāng)?；鶊F(tuán)結(jié)構(gòu)明顯改變的位置只有16、17、19、21、24、27、28和30位上的殘基。Exendin在羧基末端還多9個(gè)殘基。
可用固相化學(xué)肽合成法來制備GLP-1樣肽。也可以用標(biāo)準(zhǔn)方法，例如Sambrook和Maniaitis所述，用常規(guī)重組技術(shù)來制備GLP-1?！爸亟M”在此表示，蛋白質(zhì)衍生自重組(例如微生物或哺乳動(dòng)物)表達(dá)系統(tǒng)，該系統(tǒng)經(jīng)遺傳修飾而含有GLP-1或其生物活性類似物的表達(dá)基因。
可從重組細(xì)胞培養(yǎng)物中回收并純化GLP-1樣肽，方法包括但不限于硫酸銨或乙醇沉淀，酸萃取，陰離子或陽離子交換層析，磷酸纖維素層析，疏水作用層析，親和性層析，羥基磷灰石層析和外源凝集素層析?？蓪⒏咝阅芤合鄬游?HPLC)用于最后的純化步驟。
本發(fā)明的多肽可以是自然純產(chǎn)物，或化學(xué)合成產(chǎn)物，或靠重組技術(shù)由原核或真核宿主(例如培養(yǎng)的細(xì)菌、酵母、植物、昆蟲或哺乳動(dòng)物細(xì)胞或體內(nèi))產(chǎn)生。根據(jù)重組生產(chǎn)中所用的宿主，本發(fā)明多肽通常是非糖基化的，但也可能是糖基化的。
通常，可用標(biāo)準(zhǔn)方法，通過受體結(jié)合活性篩選過程來測定GLP-1活性，這包括提供在表面表達(dá)GLP-1受體的合適細(xì)胞，例如胰島瘤細(xì)胞系，例如RINmSF細(xì)胞和INS-1細(xì)胞。參見，Moosjov,S.(1992)和EP0708170A2。除了用放射性免疫試驗(yàn)測定示蹤劑與細(xì)胞膜的特異性結(jié)合之外，還可以測定cAMP活性或葡萄糖依賴性胰島素的產(chǎn)生。方法之一中，用一段編碼本發(fā)明受體的聚核苷酸轉(zhuǎn)染細(xì)胞，表達(dá)GLP-1受體蛋白。因此，例如，將這些細(xì)胞與待選化合物接觸，并測定這些化合物是否產(chǎn)生信號(hào)即激活受體，如此，可用這些方法來篩選受體激動(dòng)劑。
可用多克隆和單克隆抗體檢測、純化和鑒定GLP-1樣肽，供本發(fā)明方法使用?？贵w，例如ABGA1178，可檢測完整的未剪接的GLP-1(1-37)或N末端截短的GLP-1(7-37)或(7-36)酰胺。其他抗體檢測前體分子的C末端極端，該過程可通扣除計(jì)算具有生物活性的截短肽即GLP-1(7-37)或(7-36)酰胺的量(Orskov等，糖尿病1993,42:658-661；Orskov等，臨床研究雜志，1991,87:415-423)。
其他篩選技術(shù)包括，用表達(dá)GLP-1受體的細(xì)胞，例如轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞，在一系統(tǒng)內(nèi)測定受體活化引起的胞外pH或離子的變化。例如，可將候選激動(dòng)劑與表達(dá)GLP-1蛋白受體的細(xì)胞接觸，并測定第二信使應(yīng)答，例如信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)或離子或pH變化，從而確定該候選激動(dòng)劑是否有效。
可將本發(fā)明的胰高血糖素樣肽-1受體結(jié)合性蛋白與合適的藥物運(yùn)載體聯(lián)用。這樣的組合物含有治療有效量的多肽，和藥學(xué)上認(rèn)可的運(yùn)載體或賦形劑。所述載體包括但不限于鹽水，緩沖鹽溶液，葡萄糖，水，甘油，乙醇，乳糖，磷酸鹽，甘露醇，精氨酸，海藻糖，以及它們的組合。這樣的制劑必須與給藥方式相適應(yīng)，并易于由本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員確定。GLP-1肽還可以與本領(lǐng)域已知延長該肽體內(nèi)半衰期的制劑聯(lián)用，以增強(qiáng)或延長該肽的生物活性。例如，可在給予前，將一種分子或化學(xué)基團(tuán)與本發(fā)明組合物共價(jià)連接。另外，可將增強(qiáng)劑與組合物同時(shí)給予。此外，所述的制劑可含有已知與GLP-1樣肽組合物同時(shí)或在其后給予時(shí)可抑制GLP-1樣肽酶解的分子。所述的分子可以通過例如口服或注射給予。
GLP-1可通過靜脈或皮下給予，可以連續(xù)給予，也可通過推注給予。可以在葡萄糖注射或輸液的同時(shí)、之前或之后給藥?？捎靡韵聞┝快o脈連續(xù)輸液(I.V.)，0.1-10pmol/kg/min，皮下連續(xù)輸液(S.C.),0.1-75pmol/kg/min，一次I.V.注射(推注)，0.005-20nmol/kg，一次S.C.注射，0.1-100nmol/kg。
給予GLP-1肽的優(yōu)選方法是連續(xù)給藥。然而，也可以通過皮下、肌內(nèi)、腹腔內(nèi)、注射緩釋儲(chǔ)庫，緩釋肺部深度吸入以及靜脈、經(jīng)頰、貼片，或其他遞送方法。
有效治療IGT還可降低發(fā)生心血管和腦血管疾病的危險(xiǎn)性。所以，這可以用來對(duì)此類疾病的高?；颊哌M(jìn)行預(yù)防。
以下實(shí)施例將進(jìn)一步說明本發(fā)明。然而，不應(yīng)該認(rèn)為本發(fā)明的范圍就僅限于這些實(shí)施例。
實(shí)施例本發(fā)明對(duì)10名受試者進(jìn)行了研究，根據(jù)他們口服葡萄糖耐受性測試的血漿葡萄糖應(yīng)答，采用世界衛(wèi)生組織規(guī)定的葡萄糖耐受性程度標(biāo)準(zhǔn)(21)，將他們分成2組。5人患有IGT，5人患有NIDDM。各受試者的性別、年齡、體重指數(shù)(BMK)、空腹葡萄糖基線水平、2小時(shí)葡萄糖、空腹胰島素和HBA1c，見表2。糖尿病患者的年齡大于IGT患者，但兩組的BMI互配。IGT組的平均空腹葡萄糖水平和糖基化血紅蛋白濃度低于NIDDM組。兩組的空腹胰島素水平?jīng)]有差異。
表2IGT和NIDDM患者的基線臨床參數(shù)
用葡萄糖氧化酶法(YSI,1500G,Schlag Company,Bergisch-Gladbach,Germany)測定血漿葡萄糖水平。該方法的變差系數(shù)小于2％。用Abbott IMx微粒酶免疫試驗(yàn)測定血漿胰島素。平均測定內(nèi)變差系數(shù)為5％。用已知方法，F(xiàn)aderOK,Binder C,Markussen,J,Heding LG,Naithani VK,Kuzuya H,Blix P,Horwitz DL,Rubenstein AH，“7種C肽抗血清的特征描述”，糖尿病學(xué)27，增刊1:170-177,1978(22)，測定血漿C肽水平。該測定試驗(yàn)的靈敏度下限是0.02pmol/ml，平均測定內(nèi)變差系數(shù)為6％。用市售放射性免疫試驗(yàn)試劑盒(Biermann,Bad Nauheim,Germany)測定胰高血糖素，平均測定內(nèi)變差系數(shù)為8％。用特異性多克隆抗體GA1178(Affinity Research,Nottingham,UK)(23)測定IR-GLP-1。GLP-1(1-36)酰胺和截短的GLP-1(7-36)酰胺的反應(yīng)性為100％。在C-18柱上用乙腈洗脫，從血漿樣品中提取免疫活性的GLP-1樣物質(zhì)。該試驗(yàn)的檢測限是2fmol/管?？寡宀慌cGIP，胰高血糖素，glicentin,oxyntomodulin或GLP-2交叉反應(yīng)。測定內(nèi)和測定間的變差系數(shù)分別是3.4％和10.4％。
所有結(jié)果都表示為平均值±SEM。用統(tǒng)計(jì)分析系統(tǒng)(SAS第六版，個(gè)人電腦版，SAS Institute,Inc.,Cary,NC)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。用配對(duì)T檢驗(yàn)測定GLP-1輸液誘導(dǎo)的個(gè)體差異顯著性。如果P＜0.05，則認(rèn)為差異顯著。
采用對(duì)年齡、性別和體表面積校正過的C肽清除標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)力學(xué)參數(shù)(Van CauterE,Mestrez,F,Sturis J,Polonsky KS,24)。根據(jù)C肽水平估測胰島素分泌率個(gè)體的C肽清除動(dòng)力學(xué)參數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)值之間的比較(糖尿病41:368-377,1992)。每隔15分鐘取一次血樣，根據(jù)文獻(xiàn)記載(25,26)，通過解卷積，用這些數(shù)據(jù)由血漿C肽濃度推算ISR。
糖尿病受試者只接受飲食治療，但患者D70除外，他曾口服降血糖制劑，但已在研究前4周停止。這些糖尿病患者都不曾接受過胰島素。在研究前的2周內(nèi)，所有受試者都接受每日至少200g碳水化合物的維持體重的飲食。
在3種情況下對(duì)各受試者進(jìn)行研究。所有研究都在12小時(shí)通宵禁食后從0700開始(除非另有說明)，受試者取臥位時(shí)進(jìn)行。分別在兩前臂置靜脈導(dǎo)管，一側(cè)用來取血樣，另一側(cè)用來根據(jù)需要給予葡萄糖和GPL-1。實(shí)驗(yàn)中，進(jìn)行取樣的手臂在一加熱毯內(nèi)保溫，從而確保靜脈樣品的動(dòng)脈血化。在以下實(shí)施例中，給予受試者的GLP-1是GLP-1(7-36)酰胺形式。
實(shí)施例2(口服葡萄糖耐受性測試)攝入75g葡萄糖(Boehringer,Mannheim,Mannheim,Germany)后的120分鐘內(nèi)，每隔30分鐘抽取血樣，測定葡萄糖、C肽、胰島素、胰高血糖素和GLP-1。計(jì)算葡萄糖、C肽、胰島素、胰高血糖素和GLP-1的0-120分鐘內(nèi)增加的曲線下面積(AUC)。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的標(biāo)準(zhǔn)，用葡萄糖濃度定義葡萄糖不耐受性程度。IGT和NIDDM組對(duì)口服葡萄糖的應(yīng)答結(jié)果見表3。
受試者對(duì)75mg葡萄糖的葡萄糖、胰島素和GLP-1應(yīng)答見

圖1。IGT組的葡萄糖0-120分鐘AUC較低，但兩組的胰島素、C肽和胰高血糖素和GLP-1的AUC沒有區(qū)別。
表3
對(duì)口服葡萄糖的應(yīng)答
*IGT與NIDDM之間的P＜0.05當(dāng)平均ISR對(duì)平均葡萄糖水平做圖時(shí)發(fā)現(xiàn)，GLP-1明顯降低葡萄糖水平，但平均胰島素分泌率的改變不明顯(圖2)。
實(shí)施例3(波動(dòng)式葡萄糖輸注)波動(dòng)式外周給予葡萄糖引起血漿葡萄糖的規(guī)律性波動(dòng)。在一健康受試者中，β細(xì)胞能夠檢測到葡萄糖的反復(fù)升高和下降，并通過與之協(xié)同的胰島素分泌變化作出應(yīng)答。這種胰島素分泌波動(dòng)隨葡萄糖波動(dòng)的調(diào)節(jié)稱之為導(dǎo)引。IGT和輕度NIDDM個(gè)體內(nèi)缺乏葡萄糖的導(dǎo)引是β細(xì)胞功能紊亂的早期表現(xiàn)。
我們采用低劑量波動(dòng)葡萄糖輸注方案，因?yàn)檫@是測定β細(xì)胞感知血漿葡萄糖濃度細(xì)微變化并作出應(yīng)答的能力的高靈敏度實(shí)驗(yàn)。它檢測將葡萄糖與胰島素分泌相連鎖的反饋回路是否健全。正常的應(yīng)答要求有健全的葡萄糖感測功能。
為了確定β細(xì)胞能否檢測葡萄糖的波動(dòng)并作出應(yīng)答，將葡萄糖與少量鹽水一起以波動(dòng)方式輸液12小時(shí)。給藥波動(dòng)幅度為平均速度4mg/kg/min上下33％，周期為144分鐘。
為了確定GLP-1對(duì)于β細(xì)胞應(yīng)答葡萄糖波動(dòng)的能力的作用，以相同方式輸注葡萄糖，并在整個(gè)12小時(shí)內(nèi)以0.4pmol/kg/min的恒速輸注GLP-1。每次研究包括達(dá)到穩(wěn)態(tài)所需的最早的2小時(shí)(0700-0900)。隨后的10小時(shí)中(0900-1900)，每隔15分鐘取一次血樣，測定葡萄糖、胰島素、C肽和胰高血糖素，每隔60分鐘測定一次GLP-1。
與輸注鹽水相比，輸注GLP-1期間，兩組的平均葡萄糖水平都明顯降低，IGT受試者平均降低2.4±0.6mM(P＜0.02)，糖尿病受試者平均降低5.2±0.5mM(P＜0.0005)。盡管血漿葡萄糖濃度顯著降低，但與輸注鹽水相比，輸注GLP-1期間，兩組的平均ISR沒有明顯變化(表4)。
表4
對(duì)12小時(shí)鹽水或GLP-1輸液的平均葡萄糖和ISR應(yīng)答
*P＜0.05，配對(duì)t檢驗(yàn)，是鹽水輸注和GLP-1輸注間的比較。
平均胰島素水平在輸注GLP-1期間保持穩(wěn)定，與輸注鹽水相比，IGT患者升高102±90pmol/12,P為0.3；NIDDM的患者升高7±12pmol/l，P為0.56。IGT和NIDDM患者在輸注期間，輸注GLP-1和輸注鹽水，平均胰島素水平也沒有區(qū)別(IGT:39.3±5.4pg/ml相比39.4±5.9pg/ml；P=0.94。NIDDM:46.4±3.2pg/ml相比42.8±5.4pg/ml；P=0.4)。輸注GLP-1達(dá)到的GLP-1水平為15.6±4.6pmol/l，輸注生理鹽水則為2.0±0.8pmol/l(P＜0.001)。以上水平相應(yīng)于餐后生理水平。
實(shí)施例4(IGT患者葡萄糖與ISR之間的關(guān)系)正常人的每次葡萄糖脈動(dòng)都與一次ISR脈動(dòng)密切偶聯(lián)。已知，IGT患者的這種偶聯(lián)存在缺陷。圖3A和3C顯示了IGT患者D02在波動(dòng)式葡萄糖鹽水輸注期間的葡萄糖與ISR情況。結(jié)果顯示，IGT患者在鹽水輸注期間，葡萄糖與ISR之間沒有密切的偶聯(lián)，有許多不依賴于葡萄糖的ISR波動(dòng)。在生理餐后水平的GLP-1存在下(圖3B和3D)，IGT患者應(yīng)答胰島素葡萄糖的胰島素模式得到了改善，每次葡萄糖脈動(dòng)后必跟隨一次ISR脈動(dòng)。因此，GLP-1改善了IGT患者β細(xì)胞受外源葡萄糖輸注導(dǎo)引的能力。
實(shí)施例5(NIDDM患者葡萄糖與ISR之間的關(guān)系)圖4顯示NIDDM患者D07的葡萄糖與ISR情況。與IGT患者截然相反，盡管血漿葡萄糖濃度降低，ISR水平穩(wěn)定，但在GLP-1輸注期間，應(yīng)答葡萄糖的胰島素分泌模式?jīng)]有改善(圖4B和4D)，ISR持續(xù)有許多非葡萄糖依賴性波動(dòng)。圖4A和4C顯示的是波動(dòng)式輸注葡萄糖與鹽水時(shí)的葡萄糖與ISR情況。
實(shí)施例6(GLP-1對(duì)IGT和NIDDM患者光譜功率的影響)為了測定各受試者體內(nèi)的胰島素分泌是否受葡萄糖的導(dǎo)引，用光譜分析分析胰島素分泌的時(shí)間特征。用光譜功率分析來評(píng)價(jià)葡萄糖波動(dòng)與ISR波動(dòng)之間存在相互偶聯(lián)的情況。該方法以預(yù)定的頻度評(píng)價(jià)胰島素分泌波動(dòng)的規(guī)律性。光譜峰對(duì)應(yīng)于主周期，峰高對(duì)應(yīng)于光譜功率。按每一系列試驗(yàn)的方差總和為100％的假設(shè)對(duì)各光譜進(jìn)行歸一化，并表示為歸一化的光譜功率。
IGT患者葡萄糖的歸一化光譜功率在輸注鹽水期間是11.2±1.5，輸注GLP-1期間是13.2±1.6(P=0.19)，NIDDM患者在輸注鹽水期間是6.5±1.8，輸注GLP-1期間是9.8±0.7(P=0.18)。圖5清楚地顯示，給IGT患者輸注GLP-1增強(qiáng)了胰島素分泌對(duì)血漿葡萄糖波動(dòng)的應(yīng)答，獲得了葡萄糖對(duì)胰島素分泌更高程度的導(dǎo)引。通過胰島素分泌情況歸一化光譜功率之間的比較對(duì)結(jié)果進(jìn)行定量。ISR的光譜功率從輸注鹽水期間的2.9±1.4提高到輸注GLP-1期間的8.9±1.7(P＜0.006)，NIDDM患者則沒有改變(1.1±0.5至1.5±0.8；P=0.6)。
對(duì)葡萄糖波動(dòng)情況的光譜分析證實(shí)，在對(duì)應(yīng)于外源性葡萄糖輸注的第144分鐘，確實(shí)存在著血漿葡萄糖光譜峰。圖6是一名IGT患者(圖6A)和一名NIDDM患者(圖6B)各自的在鹽水輸注和GLP-1輸注期間的葡萄糖和ISR功率光譜。這與圖3C和3D，圖4A和4B的數(shù)據(jù)相對(duì)應(yīng)。IGT患者的光譜功率從0.6提高到8.9，NIDDM則僅從0.28提高到1.51。血漿葡萄糖峰值出現(xiàn)在第144分鐘。在鹽水輸注期間，ISR主光譜峰沒有出現(xiàn)在第144分鐘，而出現(xiàn)在第0.2分鐘。GLP-1輸注的光譜功率為1.5。
鹽水輸注期間，導(dǎo)引作用差，第144分鐘的ISR光譜功率僅為0.6(圖3A)。在GLP-1輸注期間(圖3B)，ISR主光譜峰出現(xiàn)在第144分鐘，說明GLP-1在該受試者內(nèi)使β細(xì)胞被導(dǎo)引。
記載中，葡萄糖耐受性正常的體重相當(dāng)?shù)膶?duì)照的歸一化光譜功率平均值為7.2±0.6(9)。
該研究的結(jié)果顯示，連續(xù)輸注生理餐后水平的GLP-1，能在IGT和NIDDM患者中降低血漿葡萄糖濃度，并刺激胰島素分泌。最重要的是，GLP-1在全部IGT受試者中恢復(fù)了β細(xì)胞感知血漿葡萄糖并作出應(yīng)答的能力(用歸一化光譜功率定量)，但在已發(fā)展成NIDDM的患者中，應(yīng)答卻不一致。
GLP-1改善β細(xì)胞功能的機(jī)制可能包括上調(diào)葡萄糖感知元件，消除葡萄糖毒性，以及改善胰島素耐受性。GLP-1與葡萄糖對(duì)β細(xì)胞產(chǎn)生協(xié)同的促胰島作用，包括刺激環(huán)化AMP形成，胰島素分泌，胰島素生物合成和胰島素原的基因表達(dá)。
以上實(shí)施例證明，連續(xù)輸注生理水平的GLP-1在IGT和NIDDM患者中能降低血漿葡萄糖濃度，并刺激胰島素分泌。最重要的是，GLP-1能恢復(fù)IGT患者β細(xì)胞感知血漿葡萄糖濃度細(xì)微變化并作出應(yīng)答的能力，但NIDDM的反應(yīng)卻不一致。在IGT患者中，我們發(fā)現(xiàn)作為β細(xì)胞功能量度之一的光譜功率不依賴于胰島素敏感性調(diào)節(jié)地顯著升高。
權(quán)利要求
1．一種組合物，含有一種與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物，和藥物載體，所述化合物的含量是在IGT患者體內(nèi)提高胰β細(xì)胞對(duì)血漿葡萄糖水平變化的敏感性并作出應(yīng)答的有效量，該有效量是通過測定胰島素分泌應(yīng)答血漿葡萄糖升高的的時(shí)間和分泌量而得出的。
2．根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中的受體結(jié)合性化合物選自(a)具有胰高血糖素樣肽-1的氨基酸序列的肽和(b)氨基酸序列與胰高血糖素樣肽-1相差一處或多處取代、缺失或插入的變異肽。
3．根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中的受體結(jié)合性化合物是胰高血糖素樣肽-1。
4．根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其中的受體結(jié)合性化合物是序列為His AlaGlu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu PheIle Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly(SEQ ID NO:3)的胰高血糖素樣肽-1(7-37)。
5．根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，其中的受體結(jié)合性化合物是序列為His AlaGlu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu PheIle Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg(NH2)(SEQ ID NO:4)的胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺。
6．根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中的受體結(jié)合性化合物是一種變異肽，其中區(qū)別于胰高血糖素樣肽-1的氨基酸序列的取代、缺失和插入總共不超過10處。
7．根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，還含有一種延長所述化合物體內(nèi)半衰期的物質(zhì)。
8．根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中的受體結(jié)合性化合物由一段聚核苷酸表達(dá)。
9．根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中的受體結(jié)合性化合物是分子量不超過5000的有機(jī)分子。
10．一種治療葡萄糖耐受不良患者的方法，包括給予患者含有與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物和藥物載體的組合物，所述組合物中所述化合物的含量是增強(qiáng)胰島素應(yīng)答血漿葡萄糖改變的規(guī)律和強(qiáng)度的有效量。
11．根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物選自(a)具有胰高血糖素樣肽-1的氨基酸序列的肽和(b)氨基酸序列與胰高血糖素樣肽-1相差一處或多處取代、缺失或插入的變異肽。
12．根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是胰高血糖素樣肽-1。
13．根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是序列為His AlaGlu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu PheIle Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly(SEQ ID NO:3)的胰高血糖素樣肽-1(7-37)。
14．根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是序列為His AlaGlu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu PheIle Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg(NH2)(SEQ ID NO:4)的胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺。
15．根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是一種變異肽，其中區(qū)別于胰高血糖素樣肽-1的氨基酸序列的取代、缺失和插入總共不超過10處。
16．根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物由一段聚核苷酸表達(dá)。
17．根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是分子量不超過5000的有機(jī)分子。
18．根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中的給予步驟選自靜脈內(nèi)，皮下，肌內(nèi)，腹膜內(nèi)，注射緩釋儲(chǔ)庫，緩釋肺部深度吸入，經(jīng)頰或貼片。
19．根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，還包括給予延長所述受體結(jié)合性化合物體內(nèi)半衰期的物質(zhì)。
20．根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中的物質(zhì)與所述組合物同時(shí)給予。
21．根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中的物質(zhì)與所述受體結(jié)合性化合物共價(jià)連接。
22．根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中靜脈給藥的劑量是每分鐘0.3-2.0pmol/kg。
23．根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中連續(xù)皮下給藥的劑量是每分鐘1.0-20.0pmol/kg。
24．一種治療葡萄糖耐受不良患者的方法，包括給予患者含有與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物和藥物載體的組合物，所述組合物中所述化合物的含量為抑制或阻斷血漿葡萄糖失控和非胰島素依賴性糖尿病發(fā)生的有效量。
25．根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物選自(a)具有胰高血糖素樣肽-1的氨基酸序列的肽和(b)氨基酸序列與胰高血糖素樣肽-1相差一處或多處取代、缺失或插入的變異肽。
26．根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是胰高血糖素樣肽-1。
27．根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是序列為His AlaGlu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu PheIle Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly(SEQ ID NO:3)的胰高血糖素樣肽-1(7-37)。
28．根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是序列為His AlaGlu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly Gln Ala Ala Lys Glu PheIle Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg(NH2)(SEQ ID NO:4)的胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺。
29．根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是一種變異肽，其中區(qū)別于胰高血糖素樣肽-1的氨基酸序列的取代、缺失和插入總共不超過5處。
30．根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物由一段聚核苷酸表達(dá)。
31．根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中的受體結(jié)合性化合物是分子量不超過5000的有機(jī)分子。
32．根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中的給予步驟選自靜脈內(nèi)，皮下，肌內(nèi)，腹膜內(nèi)，注射緩釋儲(chǔ)庫，緩釋肺部深度吸入，經(jīng)頰或貼片。
33．根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其中靜脈給藥的劑量是每分鐘0.1-10.0pmol/kg。
34．根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其中連續(xù)皮下給藥的劑量是每分鐘0.1-75.0pmol/kg。
35．一種治療葡萄糖耐受不良患者的方法，包括給予患者含有與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物和藥物載體的組合物，所述組合物中所述化合物的含量為改善應(yīng)答外源性葡萄糖波動(dòng)而誘導(dǎo)β細(xì)胞胰島素分泌的有效量。
36．一種治療葡萄糖耐受不良患者的方法，包括給予患者含有與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物和藥物載體的組合物，所述組合物中所述化合物的含量為在葡萄糖耐受不良患者體內(nèi)促進(jìn)胰島素分泌模式恢復(fù)正常的有效量。
37．一種治療葡萄糖耐受不良患者的方法，包括給予患者與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物和藥物載體，所述組合物中所述化合物的含量為在葡萄糖耐受不良患者體內(nèi)降低血漿胰島素水平的有效量。
38．一種治療葡萄糖耐受不良患者的方法，包括給予患者含有與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物和藥物載體的組合物，所述組合物中所述化合物的含量為在葡萄糖耐受不良患者體內(nèi)降低胰島素耐受性的有效量。
39．一種治療癥狀顯示有心血管疾病高發(fā)可能性的患者的方法，包括給予患者含有與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物和藥物載體的組合物，所述組合物中所述化合物的含量是改善對(duì)血漿葡萄糖改變的胰島素應(yīng)答規(guī)律和強(qiáng)度并降低血漿胰島素水平的有效量。
40．一種治療癥狀顯示有腦血管疾病高發(fā)可能性的患者的方法，包括給予患者含有與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物和藥物載體的組合物，所述組合物中所述化合物的含量是改善對(duì)血漿葡萄糖改變的胰島素應(yīng)答規(guī)律和強(qiáng)度并降低血漿胰島素水平的有效量。
全文摘要
一種用于治療葡萄糖耐受不良(IGT)的組合物,其中含有一種與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物,和藥物載體。該化合物的含量是在IGT患者體內(nèi)提高胰β細(xì)胞對(duì)血糖水平敏感性的有效量。本發(fā)明還涉及一種改善IGT患者體內(nèi)胰島素分泌應(yīng)答模式的方法,即給予所述患者含有與胰高血糖素樣肽1的受體結(jié)合的化合物和藥物載體的組合物。
文檔編號(hào)A61K38/26GK1311687SQ99809181
公開日2001年9月5日 申請(qǐng)日期1999年5月7日 優(yōu)先權(quán)日1998年6月12日
發(fā)明者B·格克, M·拜恩 申請(qǐng)人:拜爾內(nèi)布拉斯加股份有限公司