專利名稱：神經(jīng)保護(hù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及神經(jīng)保護(hù)，特別是涉及神經(jīng)保護(hù)(neuroprotection)方面的生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素類似物或功能等效配體的一種新的治療學(xué)上的應(yīng)用。
與本發(fā)明相關(guān)的背景技術(shù)已經(jīng)報(bào)道過(guò)生長(zhǎng)激素受體/結(jié)合蛋白(GHR/BP)存在于未成年小鼠(Lobie等1993)和成年小鼠(Burton等1992)的大腦中，尤其在未成年小鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，其分布顯然更為廣泛。生長(zhǎng)激素受體和結(jié)合蛋白的表現(xiàn)度的個(gè)體發(fā)育顯然類似于發(fā)育中的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的IGF-1和IGF-2受體的表現(xiàn)度，主要產(chǎn)生于胎兒和新生兒體內(nèi)，以后便逐漸下降(Bartlett等1991,Bondy和Lee1993,Garofalod等1989)。對(duì)于轉(zhuǎn)基因鼠的研究表明，無(wú)論是IGF-1消除或是生長(zhǎng)激素缺乏，試驗(yàn)小鼠都表現(xiàn)出髓鞘生成減退和大腦變小。(Beck等1995,Noguchi(1991)，因此表明了生長(zhǎng)激素和IGF-1在大腦發(fā)育、生長(zhǎng)和髓鞘生長(zhǎng)中的作用。最近一項(xiàng)對(duì)生長(zhǎng)激素缺乏兒童的研究，顯示了下丘腦障礙影響生長(zhǎng)激素的分泌，與在直觀的運(yùn)動(dòng)心理測(cè)試中評(píng)分的顯著相關(guān)性，表明一種反常的促進(jìn)生長(zhǎng)中樞與減弱的識(shí)別表現(xiàn)間的關(guān)系。(Andronikof-sanglade等1997)。
迄今為止，還沒(méi)有對(duì)生長(zhǎng)激素的神經(jīng)保護(hù)(neuroprotective)功能的論證。(此處“neuroprotective”意為在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中顯示出的神經(jīng)預(yù)防性的和/或神經(jīng)保護(hù)性的能力)。而美國(guó)專利4,791,099中描述了運(yùn)用生長(zhǎng)激素和雄性激素結(jié)合治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的情況，但是沒(méi)有單獨(dú)地進(jìn)行生長(zhǎng)激素給藥的描述。當(dāng)然，在美國(guó)專利4,791,099中，也沒(méi)有生長(zhǎng)激素合成代謝方面的學(xué)說(shuō)，以提供給病人關(guān)于雄性激素的恢復(fù)的作用和更有接受力的治療效果，沒(méi)有提到神經(jīng)預(yù)防性和神經(jīng)保護(hù)性。
是本專利申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)激素本身具有神經(jīng)保護(hù)性能。該發(fā)現(xiàn)是驚人的，盡管在生長(zhǎng)激素與IGF-1之間存在促生長(zhǎng)關(guān)系，且已證明了IGF-1在體內(nèi)外都具有神經(jīng)保護(hù)性的關(guān)系(Knusel等1990,Guan等1993)。這是因?yàn)镮GF-1是通過(guò)IGF-1受體發(fā)揮作用，而生長(zhǎng)激素不是那樣。因此，生長(zhǎng)激素在丘腦中具有神經(jīng)保護(hù)性，有報(bào)道在丘腦中有生長(zhǎng)激素受體免疫活性的分配，(Lobie等1993，《發(fā)展的腦研究》(Developmental Brain Research 74:225))，而在紋狀體中則不是這樣，與此相反，IGF-1在紋狀體中具有神經(jīng)保護(hù)性能，IGF-1受體在紋狀體中已被報(bào)道其存在，(Hill等1986《神經(jīng)系統(tǒng)科學(xué)》(neuroscience)17:1127；Lesinak等1988，《內(nèi)分泌學(xué)》(Endocrinology)123:2089)，這與丘腦的情況不同。進(jìn)一步由于本發(fā)明申請(qǐng)人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)激素中樞給藥對(duì)大腦是具有神經(jīng)保護(hù)性的，而又不影響并存的IGF-1水平的增長(zhǎng)。
正是這些驚人的發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的基礎(chǔ)。
發(fā)明簡(jiǎn)述首先，本發(fā)明提供了一種在病人的大腦中誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用的方法，包括向所述病人大腦進(jìn)行生長(zhǎng)激素、其類似物或相同功效配體的給藥的步驟。
在此，“類似物”是指一種活性劑的斷片或衍生物，該類似物至少與所述活性劑具有實(shí)質(zhì)性等效的生物活性。
“功能等效配體”是指能與大腦中的神經(jīng)系統(tǒng)受體結(jié)合，并使之激活的藥劑，如同生長(zhǎng)激素能與神經(jīng)系統(tǒng)受體結(jié)合并使之激活。
進(jìn)一步，本發(fā)明提供了一種誘導(dǎo)病人大腦中的神經(jīng)保護(hù)作用效應(yīng)的方法，包括在所述病人的大腦中增加生長(zhǎng)激素和相同功效的配體的有效濃度。
優(yōu)選的是，所述生長(zhǎng)激素/類似物/配體的有效濃度通過(guò)直接給藥使之增加。
或者，生長(zhǎng)激素或配體的有效濃度是通過(guò)給予一種藥劑而增加，該藥劑刺激生長(zhǎng)激素或配體的產(chǎn)生，或者減少或阻止對(duì)生長(zhǎng)激素或配體活性的抑制作用。
優(yōu)選的是，這種神經(jīng)保護(hù)作用是一種神經(jīng)修復(fù)作用。
或者，這種神經(jīng)保護(hù)作用是一種神經(jīng)預(yù)防作用。
更進(jìn)一步的優(yōu)選實(shí)施例中，本發(fā)明提供了一種修復(fù)病人神經(jīng)元的方法，所述病人在先的神經(jīng)元損害結(jié)果是注定導(dǎo)致神經(jīng)元死亡的；該方法包括增加所述病人大腦中的生長(zhǎng)激素、類似物或相同功效的配體有效量的步驟。
這里所用的“神經(jīng)元損害”具有廣泛的可能性，包括由創(chuàng)傷(損傷)、突變性疾病和機(jī)能紊亂、運(yùn)動(dòng)性疾病和障礙、脫髓鞘疾病和病癥、神經(jīng)綜合癥、眼部疾病和睡眠障礙引起的神經(jīng)損害。
本發(fā)明申請(qǐng)人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)激素的神經(jīng)保護(hù)作用是通過(guò)神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體來(lái)介導(dǎo)的。“神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體”是指大腦中發(fā)現(xiàn)的任何生長(zhǎng)激素與之結(jié)合并激活的受體，或是指任何生長(zhǎng)激素能與之結(jié)合并激活的受體。這些受體包括生長(zhǎng)激素受體(GHR)和催乳激素受體(PRL-R)。
因此，進(jìn)一步講，這項(xiàng)發(fā)明提供了一種誘導(dǎo)病人大腦的神經(jīng)保護(hù)功能的方法，包括引起所述病人大腦中神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體的活性提高的步驟。
優(yōu)選的是，這種活性的提高是通過(guò)用一種藥劑對(duì)上述病人大腦直接給藥，提高所述神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體的活性。
優(yōu)選的是，上述藥劑直接和神經(jīng)激素受體結(jié)合。這種藥劑可以是生長(zhǎng)激素、一種生長(zhǎng)激素類似物或是一種等效功能的配體，如催乳激素、一種催乳激素的類似物、胎盤催乳激素或胎盤催乳激素的類似物。
另一種選擇，這種藥劑是能導(dǎo)致另一種藥劑有效濃度提高，后者可與神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體結(jié)合(即這種藥劑的間接投藥作用)。優(yōu)選的是，這種藥劑選自生長(zhǎng)激素釋放蛋白(GRP)、生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)、同等功效的促泌素和生長(zhǎng)激素抑制素釋放的抑制因子(SRIF)。
這種方法的實(shí)用之處是有神經(jīng)保護(hù)作用。
另外，所述方法誘導(dǎo)產(chǎn)生一種神經(jīng)修復(fù)的作用。
更進(jìn)一步，本發(fā)明提供了一種治療由于神經(jīng)方面的損傷會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元死亡，修復(fù)病人神經(jīng)元的方法，該方法包括提高所述病人大腦中神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體活性的步驟。
申請(qǐng)人也打算采用一種結(jié)合治療方法，用生長(zhǎng)激素或生長(zhǎng)激素類似物/配體給藥來(lái)修復(fù)第一類病人神經(jīng)細(xì)胞，以及輔助神經(jīng)保護(hù)劑用來(lái)給藥保護(hù)第二類病人的神經(jīng)細(xì)胞。因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療病人用以保護(hù)神經(jīng)元的方法，所述方法包括在與另一種神經(jīng)保護(hù)劑結(jié)合的同時(shí)進(jìn)行生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素類似物或某種同等功效的配體給藥。
優(yōu)選的是，所述的輔助神經(jīng)保護(hù)劑選自IGF-1、GPE、苯丙酸諾龍、NGF、TGF-β、生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白、IGF結(jié)合蛋白和bFGF。
這種方法實(shí)用之處在于誘導(dǎo)神經(jīng)修復(fù)的效果來(lái)復(fù)活神經(jīng)元，否則由于神經(jīng)傷害會(huì)導(dǎo)致(神經(jīng)元)死亡。
在一個(gè)實(shí)施例中，這類傷害是亨廷頓氏(Huntington)疾病或阿爾海默氏(Alzheimer)疾病，并且所述的生長(zhǎng)激素/類似物/配體和一種或多種GPE、IGF-1和苯丙酸諾龍結(jié)合進(jìn)行給藥。
在另一個(gè)實(shí)施例中，這種傷害是皮質(zhì)基質(zhì)的變性或斯蒂爾-里查德森-奧茨斯基綜合癥(Steel-Richardson-Olszewski)，并且所述的生長(zhǎng)激素/類似物/配體與IGF-1結(jié)合進(jìn)行給藥。
在另一個(gè)實(shí)施例中，這種傷害是戴韋克氏病(Devic)或皮克氏病(Pick)，并且所述的生長(zhǎng)激素/類似物/配體和GPE、IGF-1二者或二者之一結(jié)合進(jìn)行給藥。
再一個(gè)實(shí)施例中，這種傷害是糖尿病性神經(jīng)病，并且所述的生長(zhǎng)激素/類似物/配體和苯丙酸諾龍、IGF-1二者或二者之一結(jié)合進(jìn)行給藥。
更進(jìn)一步，本發(fā)明提供了一種治療由于神經(jīng)方面的損傷會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元死亡，修復(fù)病人神經(jīng)元的藥物，該藥物包括結(jié)合使用生長(zhǎng)激素、一種生長(zhǎng)激素類似物或一種功能等效配體，以及一種或多種輔助類神經(jīng)保護(hù)劑，除IGF-1外，優(yōu)選的是一種或多種GPE、苯丙酸諾龍、NGF、TGF-β、一種生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白、一種IGF結(jié)合蛋白以及bFGF。
優(yōu)選的是，所述藥物進(jìn)一步包括IGF-1。
此外，本發(fā)明提供了生長(zhǎng)激素或一種生長(zhǎng)激素類似物或功能等效配體，用于一種神經(jīng)保護(hù)藥物的制備。
優(yōu)選的是，所述的藥物是一種用于治療由于神經(jīng)方面的損傷會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元死亡，修復(fù)病人神經(jīng)元的藥物。


圖1適度的HI(缺氧傷害)之后，GH(生長(zhǎng)激素)對(duì)ICV鼠在血清及CSF IGF-1的水平的治療效果。
圖2適度的HI之后，以神經(jīng)元記分表示對(duì)ICV鼠治療效果；以及圖3適度的HI之后，以神經(jīng)元存活顯示GH對(duì)ICV鼠的治療效果。
發(fā)明詳述如上所述，本發(fā)明涉及到神經(jīng)保護(hù)。包括神經(jīng)預(yù)防和神經(jīng)修復(fù)兩個(gè)方面，但更側(cè)重于神經(jīng)修復(fù)。
申請(qǐng)者已經(jīng)發(fā)現(xiàn)能夠使用兩種方法影響神經(jīng)預(yù)防，特別是神經(jīng)修復(fù)，第一種方法主要通過(guò)側(cè)重生長(zhǎng)激素及其類似物和功能等效配體。申請(qǐng)者已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在病人的大腦內(nèi)提高生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素類似物或功能等效配體的有效濃度，可以誘發(fā)產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)的效果，特別是神經(jīng)修復(fù)的效果。
這種方法中使用的生長(zhǎng)激素可以是任何哺乳動(dòng)物的生長(zhǎng)激素，例如人生長(zhǎng)激素、鼠生長(zhǎng)激素、豬生長(zhǎng)激素。優(yōu)選的用于人類疾患的生長(zhǎng)激素最好是人生長(zhǎng)激素。
本發(fā)明所用的生長(zhǎng)激素可以是充分提純的、天然的、重組技術(shù)生產(chǎn)的，或是化學(xué)合成的形式。例如，這種生長(zhǎng)激素可以用已知方法直接從血液中(如血清或血漿)中分離出來(lái)。例如，參見(jiàn)Phillips(1980)新英格蘭藥學(xué)雜志(New Eng J.Med)302:371-380；Svoboda等(1980)《生物化學(xué)》(Biochemistry)19:790-797；Comell和Boughdady(1982)《生物化學(xué)制劑》(Prep.Biochem.)12:57；Comell和Boughdady(1984)《生物化學(xué)制劑》14:123；歐洲專利EP123,228號(hào)；以及美國(guó)專利4,769,361號(hào)。另外，運(yùn)用那些肽類專業(yè)人員已經(jīng)掌握的幾種技術(shù)中任何一種，可以化學(xué)合成生長(zhǎng)激素。例如，Li等(1983)《美國(guó)國(guó)家化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊》(Proc.Natl.Acad.SciUSA)80:2216-2220,Stewart和Young(1984)《固相縮氨酸合成》(Solid Phase Peptide Synthesis)(美國(guó)伊利諾斯州羅克福德皮爾斯化學(xué)公司)，以及Barany和Merrifilield(1980)《生物化學(xué)上肽的分析與合成》(The peptides:Analysis,Synthesis,Biology),Gross和Meienhofer在紐約學(xué)院快報(bào)(Academic Press,Mew York)1980卷2,3-254頁(yè)《關(guān)于固相肽合成技術(shù)》；Bodansky(1984)《肽合成原理》(Principles of Peptide Synthesis)(柏林springer-Verlag)；Gross和Meienhofer編輯(1980)《生物化學(xué)上肽的分析與合成》紐約學(xué)院快報(bào)卷1關(guān)于經(jīng)典液相合成。生長(zhǎng)激素也可通過(guò)同時(shí)存在的其它多肽合成方法進(jìn)行化學(xué)制備。例如，參見(jiàn)Houghten(1985)《美國(guó)國(guó)家化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊》82:5131-5135和美國(guó)專利4,631,211號(hào)。
用重組DNA技術(shù)的基因工程可以成為制造生長(zhǎng)激素的最有效的方法。我們知道人體DNA序列編碼了這些蛋白質(zhì)，并且以表現(xiàn)度值傳入宿主細(xì)胞。在E.Coli、酵母、昆蟲(chóng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中利用重組基因技術(shù)制造蛋白質(zhì)。隱藏的多肽可以通過(guò)增加標(biāo)志序列到DNA序列以編碼神經(jīng)學(xué)療法。另外，DNA序列可以被調(diào)整用來(lái)制造各種片段、類似物或衍生物。這些DNA重組技術(shù)在專業(yè)領(lǐng)域是普遍運(yùn)用的。
最方便的方法是，使用生長(zhǎng)激素本身或某種生長(zhǎng)激素前體藥物(一種在體內(nèi)被分裂以釋放藥物的方式)來(lái)直接給藥，提高生長(zhǎng)激素的有效濃度。但是，本申請(qǐng)人并不排除通過(guò)生長(zhǎng)激素顯效藥或促泌素給藥來(lái)提高生長(zhǎng)激素濃度(直接作用增加大腦產(chǎn)生生長(zhǎng)激素的物質(zhì)，例如生長(zhǎng)激素釋放肽(GHRP)，如GHRP-1,GHRP-2,GHRP-6,Hexarelin,G-7039,G-7502,L-692,429,L-692,585,L-163,191,[Deghenghi等1994，《生命科學(xué)》(Life Sci.)54:1321；Bowers 1993，《兒科內(nèi)分泌學(xué)學(xué)報(bào)》(J.Paed Endocrinol.)6:21；Smith等(1993)《科學(xué)》260:1640；McDowell等1995,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 92:11165；Patchett等1995，《美國(guó)國(guó)家化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)92:7001；Clark和Robinson(1996)《細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子回顧》(Cytokine Growth Factor Reviews)7(1):65]或生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)[Frohman等(1992)《前沿神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)》(FrontNeuroendocrinol.)13:344；Clark和Robinson(1996)《細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子回顧》7(1):65]或生長(zhǎng)激素抑制劑拮抗劑(與生長(zhǎng)激素結(jié)合，或者以其他方式阻止或減少體內(nèi)生長(zhǎng)激素的產(chǎn)生)。后者是通過(guò)干擾某種抑制機(jī)理來(lái)對(duì)生長(zhǎng)激素的有效濃度發(fā)生間接的作用，包括物質(zhì)如生長(zhǎng)激素抑制因子(生長(zhǎng)激素釋放抑制因子(SRIF)[Gillees(1997)《藥理科學(xué)趨勢(shì)》(Trends in Pharmacol.Sci.)18(3):87]。
另一種給藥形式可采用一種具有復(fù)制功能，用以編碼生長(zhǎng)激素的媒介物。此類媒介物(可以是一種修正過(guò)的細(xì)胞系或病毒，可在病人體內(nèi)進(jìn)行生長(zhǎng)激素表達(dá))，具有有較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)在病人體內(nèi)提高生長(zhǎng)激素濃度的能力。[Maxwell等(1998)Neurosurgery 43(5):1157]此類媒介物可以構(gòu)成大腦植入物的一部分。
除了生長(zhǎng)激素本身以外，值得考慮利用生長(zhǎng)激素類似物或其功能等效配體。
這里所說(shuō)“類似物”是指某種蛋白質(zhì)或肽，是一種經(jīng)過(guò)修改的生長(zhǎng)激素變體(如經(jīng)過(guò)插入、刪除或替代一種或多種氨基酸，糖基化作用，磷酸化作用或增加一種或多種外來(lái)成分)，但是保持至少實(shí)質(zhì)上的功能等效。
某種蛋白質(zhì)是另一種蛋白質(zhì)的一種特定功能等效蛋白質(zhì)，則要滿足該等效蛋白質(zhì)與原蛋白質(zhì)具有免疫交叉反應(yīng)，并至少實(shí)質(zhì)上與原蛋白質(zhì)具有等效功能。所述等效物可以是，例如，某種蛋白質(zhì)片段，如C端或A端被刪除，一種蛋白質(zhì)與另一種蛋白質(zhì)或載體融合，或某種片段與另一種氨基酸融合。例如，可能是利用常規(guī)技術(shù)在序列中采用等效氨基酸進(jìn)行替代，常見(jiàn)等效的氨基酸組是(a)Ala,Ser,Thr,Pro,Gly；(b)Asn,Asp,Glu,Gln；(c)His,Arg,Lys；(d)Met,Leu,Ile,Val；和(e)Phe,Tyt,Trp功能等效蛋白質(zhì)一般有至少70％，優(yōu)選的是至少80％，更理想的是90％到95％或更多，并且最理想的是98％或更多氨基酸序列與參照分子的氨基酸序列一致?！皡⒄辗肿印笔侵笇?duì)照比較的序列，既可能是完整的序列，也可能是特定序列的片段?！靶蛄幸恢滦浴笔侵杆霭被嵝蛄凶凅w的一種特定的、相鄰的節(jié)段被排列，并與參照分子氨基酸序列比較時(shí)，在變體和參照分子中可以發(fā)現(xiàn)相同的氨基酸殘基。
為了優(yōu)化兩個(gè)序列調(diào)整的目的，所述變體的氨基酸序列的鄰接節(jié)段可以附加氨基酸殘基或刪除氨基酸殘基。用于和參照分子氨基酸序列比較的鄰接的節(jié)段會(huì)包含至少20個(gè)鄰接的核苷酸，并且可以是30,40,50或100或更多的核苷酸。為了提高序列一致性的修正，包括對(duì)變體中氨基酸序列的間隙進(jìn)行不利間隙修正(assigninggap penalties)。序列調(diào)整方法對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域?qū)I(yè)人士來(lái)說(shuō)是熟知的。
應(yīng)用數(shù)學(xué)方法可以完成兩個(gè)序列間百分比一致性的測(cè)定。一個(gè)用序列比較數(shù)學(xué)算法的非限定例子是Myers和Miller算法(1998)CABIOS 4:11-17。這個(gè)算法被編入ALIGN程序2.0版，是GCG序列調(diào)整軟件包的一部分。當(dāng)應(yīng)用所述ALIGN程序用來(lái)比較氨基酸序列時(shí)，可用一個(gè)PAM120重量殘數(shù)表，間隙長(zhǎng)度障礙12(a gaplength penalty)和一個(gè)間隙長(zhǎng)度障礙4。另一個(gè)更好的程序是成對(duì)調(diào)整程序(Pairwise Alignment Program)(序列探測(cè)者)，是用缺省參數(shù)。另一個(gè)數(shù)學(xué)算法用來(lái)比較兩個(gè)序列的非限定例子是Karlin和Altschul(1990)《美國(guó)國(guó)家化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)87:2264,在Karlin和Altschul(1993)《美國(guó)國(guó)家化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)90:5873-5877進(jìn)行了修正。這樣的算法被編進(jìn)Altschul等人的NBLAST和XBLAST程序(1990)J.Mol.Biol.215:403。與本發(fā)明中生長(zhǎng)激素核酸分子類似的核苷酸序列可以通過(guò)執(zhí)行NBLAST程序，用BLAST核酸序列獲得，計(jì)數(shù)=100，碼長(zhǎng)=12。BLAS蛋白質(zhì)搜索可以用XBLAST程序進(jìn)行，計(jì)數(shù)=50，碼長(zhǎng)=3，從而獲得與本發(fā)明生長(zhǎng)激素蛋白質(zhì)分子類似的氨基酸序列。為了比較的目的而獲得由間隙的排列，可以利用有間隙的BLAST，在Altschul等人1997《核酸研究》25:3389中有表述?；蛘?，PSI-Blast可用來(lái)進(jìn)行重復(fù)搜索，以檢測(cè)分子間遠(yuǎn)族關(guān)系。見(jiàn)Altschul等人(1997)前述。當(dāng)利用BLAST，有間隙的BLAST，以及PSI-BLAST程序時(shí)，可以使用對(duì)應(yīng)程序缺省參數(shù)(例如XBLAST和NBLAST)。參見(jiàn)http:/www.ncbi.nlm.nih.gov.
功能等效的生長(zhǎng)激素類似物可以參照該類似物結(jié)合并激活適當(dāng)受體的能力，容易地進(jìn)行篩分。在這種情況下，所述受體是神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體。
如上面指出的，術(shù)語(yǔ)“神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體”是應(yīng)作廣義理解，包括在神經(jīng)細(xì)胞群上所有生長(zhǎng)激素可與之結(jié)合或激活的受體。兩種這樣的受體是生長(zhǎng)激素受體(GHR)和催乳激素受體(PRL-R)。特別指出，術(shù)語(yǔ)“神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體”包括人類GHR和人類PRL-R。
人類生長(zhǎng)激素受體(GHR)是一種620氨基酸單鏈蛋白質(zhì)，包括一個(gè)糖基化的246氨基酸細(xì)胞外配體結(jié)合區(qū)域，一單獨(dú)的24氨基酸透膜區(qū)和一350氨基酸的細(xì)胞質(zhì)區(qū)[Postel-Vinal和Kelly(1996)《拜利樂(lè)瑞斯臨床內(nèi)分泌和代謝》(Baillieres Clinical Endicrinologyand Metabolism)10:323]。所述GHR單體與一種生長(zhǎng)激素(GH)在結(jié)合位置1上結(jié)合，然后要求第二GHR在位置2與同樣的GH結(jié)合，在此之后，受體發(fā)生雙聚反應(yīng)和轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。單獨(dú)的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用包括細(xì)胞質(zhì)激酶的激活，從而導(dǎo)致大量細(xì)胞質(zhì)多肽的糖基化。
人類催乳激素的受體(PRL-R)是一590氨基酸單鏈多肽，帶一經(jīng)糖基化的210氨基酸外細(xì)胞配體結(jié)合區(qū)，一單獨(dú)的24氨基酸透膜區(qū)，以及一358氨基酸的細(xì)胞內(nèi)區(qū)域。該P(yáng)RL-R單體結(jié)合一單獨(dú)的催乳激素(PRL)。然后要求第二PRL-R與同樣的PRL結(jié)合，在此之后，受體發(fā)生雙聚反應(yīng)和轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。單獨(dú)的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用包括細(xì)胞質(zhì)激酶的激活，從而導(dǎo)致機(jī)理上與GHR非常相似的大量細(xì)胞質(zhì)多肽的糖基化。
PRL-R的第二短結(jié)構(gòu)已被表征出來(lái)(Kelly等(1991)EndocrineReviews 12:235)。此類受體與較長(zhǎng)受體在細(xì)胞外和透膜區(qū)相同，但是有小得多的細(xì)胞質(zhì)區(qū)域，僅有57個(gè)氨基酸。
這就引出了發(fā)明者第二種神經(jīng)保護(hù)，特別是神經(jīng)修復(fù)方法。這種方法集中在如上面定義的神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體，并且通過(guò)使用結(jié)合并激活那些受體的藥劑，起到神經(jīng)保護(hù)作用。
若能獲得生長(zhǎng)激素和其類似物則是最好的。實(shí)際上，使用生長(zhǎng)激素及其類似物是本發(fā)明優(yōu)選的一面。但是，并不限于使用生長(zhǎng)激素及其類似物，可延伸于任何在結(jié)合與激活(刺激)神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體方面具有等效功能的配體。也就是說(shuō)所述配體具有影響細(xì)胞內(nèi)信息傳輸?shù)墓πА?br> 這些配體例如是催乳激素及其類似物，及胎盤催乳素及其類似物。這些也能結(jié)合并激活神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體(Lowman等(1991),J.Biol.Chem.266:10982)。
通過(guò)使用某種神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體的至少是配體結(jié)合區(qū)的篩分方案，可以識(shí)別其他有刺激作用的配體。例如，這個(gè)篩分方案可以利用非洲蟾蜍的母卵細(xì)胞中的神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體表達(dá)的信息，應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)的DNA重組方法和測(cè)定方法(即刺激配體引起受體傳達(dá)的信號(hào)的轉(zhuǎn)到作用)。并且，經(jīng)典的“研磨和粘合”變體結(jié)合試驗(yàn)也可利用。這里，整個(gè)大腦或特定腦區(qū)被均勻化，并且，與神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體特定結(jié)合的化合物被賦予特征。這項(xiàng)技術(shù)允許化合物的特定性和親和(功效)進(jìn)一步特征化(Frielle等(1989)Clin.Chem.35(5):721-725)。
本發(fā)明方法有治療功效?！爸委煿πА笔侵甘艿絺?，比起未進(jìn)行治療藥劑給藥情況，神經(jīng)元有任何生存能力改善、增生和生長(zhǎng)?！吧窠?jīng)元生存能力改善”是指通過(guò)治療藥劑給藥，降低至少1％-10％的神經(jīng)損失，優(yōu)選的是10％-50％，更優(yōu)選的是大約10％-90％，并且最優(yōu)選的是大于90％，是指超出未給藥情況。
確定神經(jīng)傷害程度的方法，以及確定用治療藥劑給藥后神經(jīng)的生存能力是否提高的方法，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域?qū)I(yè)人員來(lái)說(shuō)是應(yīng)知的。這類方法包括但不限定于組織學(xué)的方法、分子標(biāo)記分析法和功能/行為分析法。例如，在發(fā)生缺血性損傷后，ω3(外周型苯二氮結(jié)合位置的密度會(huì)顯著增加(Benazodes，J.等(1990)《腦研究》(BrainRes.)522:275-289)。一致測(cè)定ω3位置的方法，并且，可以用這種方法來(lái)測(cè)定大腦缺血性損傷的程度。參見(jiàn)下例，Gotti,B.等(1990)《腦研究》522:290-307和此處的引述。另外生長(zhǎng)結(jié)合蛋白-43(GAP-43)可用作中樞神經(jīng)系統(tǒng)受到損傷后新的軸索生長(zhǎng)情況的標(biāo)記。例如Stroemer等(1995)《中風(fēng)》(Stroke)26:2135-2144,Vaudano等(1995)J.《神經(jīng)科學(xué)》15:3594-3611。這種治療效果也可通過(guò)病人的運(yùn)動(dòng)技能、認(rèn)知機(jī)能、感官的感知能力、語(yǔ)言能力的提高，和/或引起癲癇發(fā)作傾向的減少來(lái)衡量。這種功能/行為的測(cè)試用，來(lái)評(píng)估知覺(jué)運(yùn)動(dòng)的功能和反射的功能在以下例舉的文獻(xiàn)中有記載，如Bederson等(1986)《中風(fēng)》17:472-476,DeRyck等(1992《腦研究》573:44-60,Markgraf等(1992)《腦研究》575:238-246,Alexis等(1995)《中風(fēng)》(Stroke)26:2338-2346。也可用斯堪的納維亞人中風(fēng)量表(Scandinavian Stroke Scale(SSS))或百撒爾索引(Barthel Index)來(lái)衡量神經(jīng)存活情況的改善。
為實(shí)現(xiàn)預(yù)期的醫(yī)療上的應(yīng)用，這種活性化合物(生長(zhǎng)激素，類似物或配體)將按配方制成藥劑。配方具體細(xì)節(jié)將取決于最終所意圖獲得的神經(jīng)保護(hù)效果。當(dāng)所述神經(jīng)保護(hù)效果是一種神經(jīng)修復(fù)效果時(shí)，其配方主要取決于需挽回的傷害和給藥途徑，但是通常包括結(jié)合活性物質(zhì)的合適的載體、賦形劑或稀釋劑。對(duì)本領(lǐng)域?qū)I(yè)人士來(lái)說(shuō)，如何對(duì)常用給藥方式選用載體、賦形劑或稀釋劑是應(yīng)知的。
為了發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)劑的作用，可選用多種給藥途徑。例如包括腰部穿刺，腦內(nèi)(ICV)或心室內(nèi)給藥，包括利用神經(jīng)外科手術(shù)植入一個(gè)室內(nèi)管，帶有一個(gè)腹部泵，儲(chǔ)存管和藥物。另外，可通過(guò)嗅覺(jué)神經(jīng)通路進(jìn)行中樞神經(jīng)直接給藥，例如可參考美國(guó)專利5,624,898。
劑量比也要根據(jù)配方具體條件。不過(guò)，舉例來(lái)說(shuō)，注射劑的配方中，生長(zhǎng)激素劑量范圍高于0.01ug/100g。
我們可以認(rèn)為，前面的各種敘述，將就以下的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行介紹，兩者都是示范性和說(shuō)明性的，而不應(yīng)該被解釋成對(duì)權(quán)利要求范圍的限制，并且意味著為本發(fā)明的權(quán)利要求提供進(jìn)一步的解釋。實(shí)驗(yàn)材料和方法動(dòng)物準(zhǔn)備以下實(shí)驗(yàn)所用指標(biāo)是經(jīng)奧克蘭大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)認(rèn)可的。將體重在40-50克之間，斷奶21天的Wistar鼠放與12小時(shí)晝夜交替的環(huán)境，并且在整個(gè)研究過(guò)程中，他們可自由接近食物和水。鼠依性別和體重搭配，隨機(jī)分配到治療組和對(duì)照組中。根據(jù)前面描述(Sirimanne等J Neuroscience Methods,55:7-14,1994)，用改進(jìn)型Levine述準(zhǔn)備進(jìn)行誘導(dǎo)損傷。簡(jiǎn)而言之，將該鼠麻醉并放在含2％氟烷/氧氣混合其體中，通過(guò)中腹頸暴露的切口，將右頸動(dòng)脈結(jié)扎。手術(shù)后該鼠被放在精確控制的，溫度45℃，相對(duì)濕度85±5％的環(huán)境中。然后將他們置于缺氧狀態(tài)15分鐘(8％氧氣/氮?dú)?。治療在缺氧處理結(jié)束兩小時(shí)后，治療組鼠(n=12)注入重組的鼠生長(zhǎng)激素20μg,10μl，對(duì)照組僅注入賦形劑，為防止動(dòng)物著涼，注射過(guò)程在高熱燈照下進(jìn)行。所有溶液和針頭均應(yīng)保證在無(wú)菌條件下準(zhǔn)備和貯存。
用0.15ml靜脈麻醉劑SaffanTM(新西蘭Pitman-Moore公司)再次對(duì)該鼠進(jìn)行輕度麻醉。使用最初由Jirikowski描述(J NeuroscienceMethods,42:115-118,1992)的改進(jìn)技術(shù)，將金屬帽置于鼠頭上，以確保注射針正確定位，引導(dǎo)對(duì)右后外側(cè)腦室進(jìn)行注射。在校正過(guò)的微注射泵控制下，以單劑量速率1.0ul/分鐘，對(duì)鼠進(jìn)行重組鼠生長(zhǎng)激素(2mg/ml于8.77mg/ml NaCl,2.5mg/ml苯酚，2.0mg/ml多山醇酯20，和10mM檸檬酸鈉pH6.0)，或單獨(dú)的賦形劑。為防止回流，注射針應(yīng)多放置3分鐘。CSF取樣缺氧處理3天后，進(jìn)行腦脊髓液(CSF)取樣。將鼠用Saffan麻醉劑麻醉，并放于2％氟烷環(huán)境。然后將鼠放于定向框架，使頭前屈，將肌肉鈍解剖置于解剖池magna，以露出硬膜。在雙目放大鏡下，用一支精密30號(hào)針取出腦脊髓液。通過(guò)腹膜進(jìn)行戊巴比妥鈉過(guò)量給藥使鼠致死，直接從心臟取血樣。顯微解剖學(xué)經(jīng)賁門灌注鹽水，然后是新制的修正Bouin溶液(0.1M PBS,4％多聚甲醛(重量/體積)，0.08％戊二酸(體積/體積)，15％苦味酸(體積/體積)飽和溶液)，進(jìn)行原位固定后，收集腦組織，進(jìn)行顯微結(jié)剖學(xué)處理。取出腦，稱重然后置于修正Bouin溶液室溫過(guò)夜。次日將腦放于70％.乙醇中3-4天。每目乙醇換新。將腦包埋于石蠟處理(通過(guò)分級(jí)乙醇脫水，用氯仿脫脂，用石蠟浸潤(rùn)，封存于石蠟)。從組織上切下8um切片，并放于預(yù)涂聚-L-賴氨酸的載玻片上。用酸性品紅/勞氏紫著色。神經(jīng)元計(jì)數(shù)步驟在每個(gè)大腦中，神經(jīng)結(jié)果用兩個(gè)層次進(jìn)行評(píng)價(jià)，在紋狀體中層(前囟點(diǎn)+0.8mm)，和在海馬狀突起的灰質(zhì)前角背側(cè)(前囟點(diǎn)-3.3)。用兩種技術(shù)進(jìn)行神經(jīng)元結(jié)果評(píng)估1)在皮質(zhì)和海馬狀突起計(jì)分用遮光測(cè)試儀對(duì)額頂?shù)钠べ|(zhì)和海馬狀突起評(píng)定，對(duì)神經(jīng)元計(jì)分使用一種標(biāo)準(zhǔn)的5點(diǎn)神經(jīng)元損傷計(jì)分(Willams等Pediatric Research,27:561-565,1990):4=無(wú)損傷，3=0-10％細(xì)胞損失，2=11-50％細(xì)胞損失，1=51-90％細(xì)胞損失，0=＞90％細(xì)胞損失。
皮質(zhì)在紋狀體水平(前囟點(diǎn)-8.0mm)和海馬狀突起的灰質(zhì)前角背側(cè)(前囟點(diǎn)-3.3)進(jìn)行評(píng)分，并被分為5個(gè)區(qū)。對(duì)海馬狀突起分別在CA1/2,CA3和齒狀腦回計(jì)分。然后對(duì)神經(jīng)元計(jì)分結(jié)合每一結(jié)構(gòu)與治療組進(jìn)行比較。
2)在紋狀體和丘腦的計(jì)分在放大200倍的光學(xué)顯微鏡下，用一個(gè)目鏡測(cè)微計(jì)對(duì)每個(gè)紋狀體和丘腦的四個(gè)區(qū)域計(jì)分。在顯微鏡下200um2/格，對(duì)每區(qū)域用4格計(jì)數(shù)。受損傷區(qū)的健康神經(jīng)元被計(jì)數(shù)，以及每腦對(duì)側(cè)，根據(jù)以下方法計(jì)算存活率百分?jǐn)?shù)每區(qū)RHS計(jì)數(shù)/LHS計(jì)數(shù)×100。對(duì)每一結(jié)構(gòu)存活計(jì)數(shù)，然后比較治療組與對(duì)照組。對(duì)血漿中的IGF-1和腦脊髓液(CSF)的放射性免疫測(cè)定用IGF結(jié)合蛋白(IGFBP)阻斷放射性免疫測(cè)定(RIA)測(cè)定血漿中的IGF-1和腦脊髓液(CSF)，首次披露于Blum和Breier(Growth Regulation,4:11-19,)。多克隆抗體(#878/4)孵育于對(duì)IGF-1具有高親和力和專一性，對(duì)IGF-Ⅱ(0.01％)低交叉反應(yīng)的新西蘭白兔。該測(cè)定使用非提取過(guò)程，用酸性緩沖也稀釋樣品，用過(guò)量IGF-Ⅱ復(fù)培養(yǎng)。稀釋到pH2.8，過(guò)量的IGF-Ⅱ提供功能阻斷結(jié)合蛋白干擾。
血漿在酸性緩沖液(20mM磷酸鈉pH=2.8,0.1Mm NaCl,0.1％BSA,0.02％NaN3,0.1％聚乙二醇辛基苯基醚)稀釋，和CSF樣品被稀釋于(1∶11)在0.5M磷酸鈉，0.1％BSA,0.1％聚乙二醇辛基苯基醚，0.1％NaN3,1Mm PMSF,pH1.25以使IGFs從IGFBPs中脫掉。初級(jí)抗體，帶過(guò)量IGF-Ⅱ于25ng/管，稀釋于一種緩沖溶液，恢復(fù)中性pH(100mM磷酸鈉[pH7.8],40Mm NaCl,0.02％,NaN3,0.2％BSA,0.1％聚乙二醇辛基苯基醚)，并達(dá)到起始工作稀釋值1∶50000)。0.1ml的稀釋樣品，對(duì)照品或標(biāo)準(zhǔn)品(rh-IGF-1，由舊金山的基因技術(shù)公司提供)用0.1ml抗體-IGF-Ⅱ溶液和0.1ml 125I-IGF-Ⅰ達(dá)每管計(jì)數(shù)15-20000進(jìn)行孵育。4℃下孵育48小時(shí)后，加入1m1次級(jí)抗體復(fù)合物，室溫下管內(nèi)繼續(xù)孵育1小時(shí)。接著，在3800轉(zhuǎn)/30分鐘，4℃條件下，進(jìn)行離心處理，試管用沉淀法分取，沉淀小丸用伽瑪計(jì)數(shù)計(jì)(gamma counter)計(jì)數(shù)。
rh-IGF-Ⅰ的碘化使用一種修正的氯氨-T法，由Hunter和Greenwood提出[《生物化學(xué)雜志》(Biochemical Journal),91:43-56,1964]。此測(cè)定系統(tǒng)是根據(jù)第三國(guó)際胰島素樣生長(zhǎng)因素研討會(huì)推薦進(jìn)行的[Bang等《內(nèi)分泌學(xué)》(Endocrinology),136:816-81,(1995)]，包括CSF標(biāo)準(zhǔn)曲線的平行位移，冷IGF-Ⅰ的收回。在CSF中收回的未標(biāo)記的IGF-Ⅰ是89.6％(n=2)。ED-50是0.1ng/管，測(cè)試內(nèi)和測(cè)試間的變化系數(shù)分別是5％和9％。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析采用成對(duì)t-測(cè)試或者非參數(shù)方程，Wilcoxon分級(jí)測(cè)試。用SigmastatTM2.0版進(jìn)行計(jì)算(加利福尼亞圣來(lái)佛Jandel科學(xué)協(xié)會(huì))。所有結(jié)果以平均值±偏差表示。結(jié)果結(jié)果見(jiàn)圖1-3。
用生長(zhǎng)激素治療和僅用賦形劑治療的動(dòng)物，死后比較腦重沒(méi)有任何區(qū)別(1.432±0.032vs1.455±0.028g)。
用生長(zhǎng)激素治療能引發(fā)減少由于HI傷害(159±7.3vs 135±11.7ng/ml,p=0.068)引起的血清中IGF-Ⅰ降低趨勢(shì)。CSF IGF-Ⅰ水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于血漿之中的水平。生長(zhǎng)激素治療(3.82±0.35vs3.86±0.27ng/ml)后CSF IGF-Ⅰ水平?jīng)]有變化。參見(jiàn)圖1。
用生長(zhǎng)激素治療后，皮質(zhì)神經(jīng)元計(jì)分明顯提高。在紋狀體水平和海馬狀突起水平所有5個(gè)皮質(zhì)區(qū)聯(lián)合計(jì)分是(3.54±0.074vs2.98±0.124,p＜0.001)。參見(jiàn)圖2。
用生長(zhǎng)激素治療后，海馬狀突起神經(jīng)元計(jì)分明顯提高。在CA1/2,CA3和齒狀腦回聯(lián)合計(jì)分為(3.03±0.176vs1.818±0.259,p=0.005)。參見(jiàn)圖2。
用生長(zhǎng)激素治療后，背外側(cè)丘腦神經(jīng)元存活數(shù)明顯提高。四個(gè)區(qū)域聯(lián)合計(jì)分，與腦對(duì)側(cè)計(jì)數(shù)比較是(104±2.18vs87.4±4.67％,p=0.006)，參見(jiàn)圖3。
用生長(zhǎng)激素治療后，背外側(cè)紋狀體神經(jīng)元存活數(shù)無(wú)明顯提高。四個(gè)區(qū)域聯(lián)合計(jì)分，與腦對(duì)側(cè)計(jì)數(shù)比較是(83.8±4.7vs75.3±6.1％,p=0.178)，參見(jiàn)圖3。結(jié)論用生長(zhǎng)激素中樞給藥作為神經(jīng)元修復(fù)劑是有效的。神經(jīng)元修復(fù)效果的出現(xiàn)，不伴隨CSF-IGF-1的提高，說(shuō)明神經(jīng)保護(hù)效果是獨(dú)立于IGF-1的。
生長(zhǎng)激素作為一種神經(jīng)元修復(fù)劑在一定腦區(qū)域是有效的，該區(qū)域有內(nèi)源性生長(zhǎng)激素受體表現(xiàn)(皮質(zhì)、海馬狀突起和丘腦)，而在如紋狀體區(qū)則沒(méi)有。這表明生長(zhǎng)激素的神經(jīng)保護(hù)效果，主要通過(guò)生長(zhǎng)激素受體或催乳激素受體運(yùn)作。工業(yè)應(yīng)用本發(fā)明提供一種新的神經(jīng)保護(hù)途徑。特別是提供新的神經(jīng)元修復(fù)方法。該發(fā)明可用于治療和預(yù)防。特別是應(yīng)用于遭受以下神經(jīng)損傷病人的治療，包括由創(chuàng)傷、突變性疾病和機(jī)能紊亂、運(yùn)動(dòng)性疾病和障礙、脫髓鞘疾病和病癥、神經(jīng)綜合癥、眼部疾病和睡眠障礙引起的神經(jīng)損害。創(chuàng)傷擊傷、腦外傷、窒息、脊柱受傷和CO中毒。突變性疾病和機(jī)能紊亂家族或非家族的阿爾海默氏病、多重梗塞癡呆、非阿爾海默氏型前葉癡呆、皮克病、亨廷頓氏舞蹈病、韋希尼-霍夫曼病、韋尼克腦病、共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張癥、皮質(zhì)基底退化、蒙古種病(Down’ssyndrome)、萊特綜合癥(Rett syndrome)、胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)遲緩(IUGR)、阿爾佩病(Alper disease)、斯蒂爾-里查德森-奧茨斯基綜合癥(Steele-Richardson-Olszewski)、顳葉癲癇、癲癇持續(xù)狀態(tài)和不明因的智力遲鈍。運(yùn)動(dòng)性疾病和障礙脊髓小腦性運(yùn)動(dòng)失調(diào)、進(jìn)行性肌陣攣失調(diào)綜合癥、Leigh氏癥、多重系統(tǒng)萎縮癥、腦癱瘓、Friedeich氏遺傳性運(yùn)動(dòng)失調(diào)、完全遺傳性突發(fā)性半身不遂、脊髓肌肉萎縮、糖尿病神經(jīng)病、遺傳感覺(jué)神經(jīng)病Ⅰ型，ALS(肌肉萎縮型脊索側(cè)索硬化)、慢性先天性運(yùn)動(dòng)機(jī)能失調(diào)型神經(jīng)病、Tangier氏病。脫髓鞘疾病和病癥炎癥包括急性傳染性腦脊髓炎、眼神經(jīng)炎、橫脊髓炎、Devic氏病，白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)障礙病、復(fù)合硬化癥；非炎癥包括漸進(jìn)性多病灶腦白質(zhì)病，中央橋腦脫髓鞘病變。神經(jīng)性綜合癥胎兒酒精綜合癥、自閉癥和肌震攣運(yùn)動(dòng)失調(diào)。眼疾病青光眼睡眠障礙發(fā)作性睡病進(jìn)一步，本發(fā)明探討的生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素受體可單獨(dú)用來(lái)治療以上疾病，也可結(jié)合起來(lái)應(yīng)用。后者涉及給藥，特別是，生長(zhǎng)激素或其類似物/配體，結(jié)合使用輔助神經(jīng)保護(hù)劑。所述的輔助神經(jīng)保護(hù)劑通常是，或至少部分地，對(duì)不同于受生長(zhǎng)激素或其類似物/配體保護(hù)的神經(jīng)元細(xì)胞具有保護(hù)性。
輔助神經(jīng)保護(hù)劑可非限定地選自有生長(zhǎng)因子組成的組?！吧L(zhǎng)因子”是指一種記號(hào)細(xì)胞外多肽的分子，能刺激細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞分裂繁殖。優(yōu)選的是那些對(duì)廣泛細(xì)胞類型有反應(yīng)的生長(zhǎng)因子。例如神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)型生長(zhǎng)因子，非限定性地包括，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子族成員，如基礎(chǔ)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)(Abraham等(1986)《科學(xué)》233:545-48)，酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF)(Jaye等(1986)《科學(xué)》233:541-45),hst/Kfgf基因產(chǎn)品，F(xiàn)GF-3[Dickson等(1987)《自然》(nature)326-833],FGF-4[Zhan等(1988)《分子細(xì)胞生物學(xué)》(Mol.Cell.Biol.)8:3487-3495],FGF-6[deLapeyriere等91990《致癌基因》(Oncogene)5:823-831]，角質(zhì)化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)(Finch等(1989)《科學(xué)》(Science)245:752-755)和雄性激素誘發(fā)生長(zhǎng)因子(AIGF)[Tanaka等(1992)《美國(guó)國(guó)家化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊》(Proc.Natl.Acad.Sci USA)89:8928-8923]。附加的FGF族成員包括，例如，int-2，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子異體同型因子-1(FHF-1)(美國(guó)專利No.5,872,226),FHF-2(美國(guó)專利No.5,876,697),FHF-3和FHF-4[Smallwood等(1996)《美國(guó)國(guó)家化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊》93:9850-9857],Karatinocyte生長(zhǎng)因子2[Emoto等(1997)《生物化學(xué)雜志》(J.Biol Chem)272:23191-23194]，神經(jīng)膠質(zhì)激活因子(Miyamoto等(1993)《分子細(xì)胞生物學(xué)》13-4251-4259),FGF-18(Hu等(1998)《分子細(xì)胞生物學(xué)》18:6063-6074)，并且FGF-16(Miyake等(1998)《生物化學(xué)生物物理學(xué)研究通訊》(Biochem.Biophys.Res.Commun)243:148-152。
附加的輔助神經(jīng)保護(hù)劑包括纖毛神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)，神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NFG)(Seiler,M.(1984)《腦研究》300:33-39；Hagg T，等(1988)《神經(jīng)病學(xué)指數(shù)》(Exp Neurol)101:303-312；KromerL F(1987)《科學(xué)》235:214-216；以及Hagg T等(1988)《神經(jīng)病學(xué)指數(shù)》101:303-312:Kromer L F(1987)《科學(xué)》235-214-216；和Hagg T等(1990)《神經(jīng)科學(xué)雜志》(J.Neurosci)10(9)3087-3092)，腦衍生神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)[(Kiprianova,1等(1999)《神經(jīng)科學(xué)研究雜志》(J.Neurosci.Res),56:21-27)，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT3)，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT4)，轉(zhuǎn)換生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)(Henrick-Noack,P等(1996)《中風(fēng)》27:1609-14)，骨形體發(fā)育蛋白(BMP-2)[Hattori,A等(1999)《神經(jīng)化學(xué)雜志》(J.Neurochem)72:2264-71]，神經(jīng)膠質(zhì)-細(xì)胞系衍生神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)[Miyazaki,H等(1999)《神經(jīng)科學(xué)通信》(Neurosci Letter)264:9-12]，白血病抑制因子(LIF)(Blesch,A等(1999)《神經(jīng)科學(xué)雜志》19:3356-66)，制瘤素M，白細(xì)胞間素和胰島素樣生成因子1和2。
其它形式輔助神經(jīng)保護(hù)劑包括，例如，氯美噻唑(Zendra)(Marshal,J W等(1999)《神經(jīng)病學(xué)指數(shù)》156:121-9)；4-羥基二喹啉酸(KYAN)[Salvati,P等(1999)《神經(jīng)精神生藥理學(xué)、生物學(xué)、精神病學(xué)進(jìn)展》(Prog.Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry)23:741-52],Semax(Miasoedova,N.F.等(1999)Zh Nevrol PsikhiatrImss Korsakova 99:15-19),FK506(免疫抑制劑)[Gold,B G等(1999)《藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)療法雜志》(J.Pharmacol.Exp.Ther.)289:1202-10],L-蘇型-1-苯-2-癸醇-3-嗎啉-1-丙醇[Inokuchi,J.等(1998)《生物化學(xué)聚合物效應(yīng)》(Act Biochim Pol)45:479-92]雄性促腎上腺皮質(zhì)激素-(4-9)類似物(ORG 2766)和地唑西平(dizolcipine)(MK-801)[Herz,RC等(1998)《歐洲藥理學(xué)雜志》(Eur.J.Pharmacol)346:159-65],腦白細(xì)胞素-6[Loddick,SA等(1998)，《結(jié)合胞二鄰膽堿血液流動(dòng)轉(zhuǎn)移》(J.Cereb Blood Flow Metab)18:176-9]，西啉給啉(selegiline)(Semkova,Ⅰ等(1996)《歐洲藥理學(xué)雜志》315:19-30),MK-801(Barth,A等(1996)，《神經(jīng)學(xué)報(bào)告》(Neuro Report)7:1461-4；谷氨酸拮抗劑如，NPS1506,GV1505260,MK801(Baumgartner,WA等(1999)《安·托洛克外科術(shù)》(Ann Thorac Surg)67:1871-3),GV150526(Dyker,AG等(1999)《中風(fēng)》30:986-92)；AMPA拮抗劑，如NBQX(Baumgartner,WA(1999)等《安·托洛克外科術(shù)》(Ann Thora Surg)67:1871-3,PD152247(PNQX)(Schielke,GP等(1999)《中風(fēng)》30:1472-7),SPD 502(Nielsen,EO等(1999)《藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)療法雜志》289:1492-501),LY303070和LY300164(May,PC等(1999)《神經(jīng)科學(xué)通信》262:219-221)。
《生物化學(xué)生物物理學(xué)研究通訊》生物活性變異體。IGF-1是一種70氨基酸神經(jīng)保護(hù)性多肽激素。廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，并顯示出胰島素樣和分生生長(zhǎng)生物活性[Baskin,DG等(1988)《神經(jīng)科學(xué)趨勢(shì)》(Trends inNeuroscience)11:107-111]。在體外研究表明，IGF-1神經(jīng)保護(hù)的作用在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中擴(kuò)展到多種類型的神經(jīng)元(Knusel等(1990)《神經(jīng)科學(xué)雜志》10:558-570,Svezic和Schubert(1990)《生物化學(xué)生物物理學(xué)研究通訊》172:54-60,McMorris和Dubois(1988)，《神經(jīng)科學(xué)研究雜志》(J.Neurosci Res)21:199-209。另外，用多種動(dòng)物模型的體內(nèi)研究表明，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)剛剛受損后，外源性給予IGF-1，誘導(dǎo)出神經(jīng)保護(hù)作用(Guan等(1993)《結(jié)合胞二鄰膽堿血液流動(dòng)轉(zhuǎn)移》(J.Cereb Blood FlowMetab)13:609-616，以及Johnston等(1996)《臨床調(diào)查雜志》(J.Clin.Invest.)97:300-308，美國(guó)專利號(hào)5,861,373，美國(guó)專利號(hào)5,093,317，美國(guó)專利號(hào)5,776,897，均在這里引述為參考文獻(xiàn)。
優(yōu)選的輔助神經(jīng)保護(hù)劑包括IGF-1、GPE、苯丙酸諾龍、NGF、TGF-β生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白、IGF結(jié)合蛋白(特別是IGFBP-3)和bFGF。
包括生長(zhǎng)激素和一種或多種IGF-1、GPE、苯丙酸諾龍的特定結(jié)合，用來(lái)治療亨廷頓舞蹈病或阿爾海默氏??；生長(zhǎng)激素和IGF-1，用來(lái)治療皮質(zhì)基質(zhì)的變性或斯蒂爾-里查德森-奧茨斯基綜合癥；生長(zhǎng)激素和GPE、IGF-1二者或二者之一，用來(lái)治療戴韋克(Devic)氏病或皮克??；生長(zhǎng)激素和苯丙酸諾龍、IGF-1二者或二者之一，用于治療糖尿病性神經(jīng)病。
結(jié)合治療方法是令人滿意的，各組分活性劑可按配方共同給藥，包括以單一藥劑形式。因此，本發(fā)明提供這類神經(jīng)保護(hù)藥劑，包括生長(zhǎng)激素或其類似物，與一種或多種，輔助類神經(jīng)保護(hù)劑，除IGF-1外，特別是一種或多種GPE、苯丙酸諾龍、NGF、TGF-β以及bFGF。其中最好進(jìn)一步包括IGF-1。
這類藥可用任何常規(guī)方式制備，并且可進(jìn)一步包括標(biāo)準(zhǔn)藥物采用的載體、賦形劑或稀釋劑。
本領(lǐng)域?qū)I(yè)人士可以理解以上描述僅提供示例。
參考文獻(xiàn)Andronikof-Sanglade,A.,Fjellestad-Paulsen,A.,Ricard-Malivoir,S.,和Evain-Brion,D.(1997)所著《對(duì)異常生長(zhǎng)激素分泌矮小兒童視覺(jué)運(yùn)動(dòng)心理特定變異的測(cè)試》(Specific abnormalities in a visualmotor psychological test in short children with abnormal growthhormone secretion)，《兒科學(xué)報(bào)》(Acta Paediatrica)86[2],154-159.
Bartlltt,W.P.,Li,X.S.,Williams,M.,和Benkovic,S.(1991)所著《在鼠出生后中樞神經(jīng)系統(tǒng)的類胰島素生長(zhǎng)因子-1mRNA定位》(Localisation of insulin-like growth factor-1mRNA in murine centralnervous system during postnatal development)，見(jiàn)《發(fā)展的生物化學(xué)》(Developmental Biology)147,239-250.
Beck,K.D.,Powellbraxton,L.,Widmer,H.R.,Valverde,J.和Hefti,F(1995)所著《IGF-1因子損害導(dǎo)致腦變小、中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘形成低下、海馬回顆粒及紋狀體細(xì)小白蛋白包含神經(jīng)元損失》(IGF-1gene disruption results in reduced brain size,CNS hypomyelination,and loss of hippocampal granule and striatal parvalbumin-containingneurons)見(jiàn)《神經(jīng)元》(Neuron)14,717-730.
Bondy,C.和Lee,W.H.(1993)《在腦成長(zhǎng)過(guò)程中類胰島素生長(zhǎng)因子(IGF)結(jié)合蛋白質(zhì)-5和IGF-1基因表達(dá)相關(guān)性》(Correlationbetween insulin-like growth factor(IGF)binding protein-5 and IGF-1gene expression during brain development)。見(jiàn)《神經(jīng)科學(xué)雜志》(Journal of Neuroscience)13,5092-5104.
Burton,K.A.,Kabigting,E.B.,Clifton,D.K.和Steiner,R.A.(1992).《在成年雄鼠腦部及其海馬回生長(zhǎng)激素抑制因子神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)激素受體信使核酸損害》(Growth hormone receptor messengerribonucleic acid distribution in the adult male rat brain and itscolocalisation in hypothalamic somatostatin neurons)，見(jiàn)《內(nèi)分泌學(xué)》(Endro crinology)131,958-963.
Garofalo,R.S.和Rosen,O.M.(1989)著《在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中胰島素和類胰島素生長(zhǎng)因子1(IGF-1)受體兩個(gè)免疫學(xué)上獨(dú)立的IGF-1β亞單位的表現(xiàn)》(Insulin and insulin-iike growth factor1(IGF-1)receptors during central nervous system development:expression of two immunologically distinct IGF-1 receptor betasubunits)，見(jiàn)《分子和細(xì)胞生物學(xué)》(Molecular & cellular Biology)(9,2816-2817)。
Lobie,P.E.、Garcia Aragon,J.、Lincoln,D.T.、Barnard,R.、Wilcox,J.N.和Waters,M.J.(1993)著《生長(zhǎng)激素受體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的基因表達(dá)的定位和個(gè)體發(fā)育》(Localisation and ontogeny of growthhormone receptor gene expression in the central nervous system),見(jiàn)《發(fā)展的腦研究》(Developmental Brain Research)74[2],225-233.
Noguchi,T.(1991)，《鼠激素缺失的腦發(fā)育遲緩》(Retardedcerebral growth of hormone-deficient mice)，《比較生物化學(xué)和生理學(xué)及比較藥理學(xué)和毒理學(xué)》(Comparative Biochemistry&Physiology-C:Comparative Pharmacology & Toxicology)98[1],239-248.
Clark,R.G.和Robinson,I.C.A.F.(1996)?！渡L(zhǎng)激素向上和向下調(diào)整》(Up and down the Growth Hormone Cascade)見(jiàn)《細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子回顧》(Cytokine and Growth Factor Reviews)卷7,No.1pp65-80.
Bowers,C.y.(1993).《GH釋放肽結(jié)構(gòu)和動(dòng)力學(xué)》(GH releasingpeptides-structure and kinetics)見(jiàn)《兒科內(nèi)分泌學(xué)雜志》(J.Paed.Endocrinology),6:21-31.
Clark,R.G.,Robinson,I.C.A.F.(1996).《生長(zhǎng)激素向上和向下調(diào)整》(Up and down the growth hormone cascade)見(jiàn)《細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子回顧》75(1),65-80.
Deghenghi,R.,Cananzi,M.M.,Torsello,A.,Battisti,C.,Muller,E.E.,Locatelli,V.(1994)?！禜exaelin-在幼鼠和成年鼠的體內(nèi)的一種新的生長(zhǎng)激素釋放肽的GH釋放活性》(GH-releasing activity ofhexaelin,A new growth hormone releasing peptide,in infant and adultrats)。見(jiàn)《生命科學(xué)》(LifeSci.)54,1321-1328.
Frielle,T.Caron,M.G.,Leftowitz,R.J.(1989)著《通過(guò)分子復(fù)制揭示β-1和β-2腎上腺素受體亞型特性》(Properties of the beta 1-andbeta 2-adrenergic receptor subtypes revealed by molecular cloning)，見(jiàn)《臨床應(yīng)用化學(xué)》(Clinical Chemistry)35(5):721-5.
Frohman,L.A.Downs,T.R.,Chomczynski,P.(1992)著《生長(zhǎng)激素分泌調(diào)節(jié)》(Regulation of growth-hormone secretion.)，見(jiàn)《前庭神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)》(Front Neuroendocrinol)13,344-405.
Gillies,G.(1997)著《生長(zhǎng)激素抑制素神經(jīng)內(nèi)分泌情況》(Somatostatin:the neuroendocrine story)見(jiàn)《藥理學(xué)科學(xué)趨勢(shì)》(Trends in Pharmacological science)18(3),87-95.
Kelly,P.A.,Dijane,J.,Postel-Vinay,M-C.,Ederly,M.(1991)著《催乳激素/生長(zhǎng)激素受體家族》(The prolactin/growth hormone receptorfamily)12(3),235-251.
Lowman,H.B.,Cunningham,B.C.,Wells,J.A.(1991)著《在人類胎盤催乳激素受體結(jié)合決定性因素的突變分析與蛋白質(zhì)工程》，(Mutational analysis and protein engineering of receptor-bindingdeterminants in human placental lactogen)，見(jiàn)《生物化學(xué)雜志》(Journal of Biological chemistry)266,10982-10988.
Maxwell,M.,Allegra,C.,MacGillivary,J.,Hsu,D.W.,Hedley-Whyte,E.T.,Riskind,P.,Madsen,J.R.,Black,P.M.(1998)著《鼠的垂體的功能性移植》(Functional transplantation of the ratpituitary gland)，見(jiàn)《神經(jīng)外科》(Neurosurgery)43(5),1157-1163.
McDowell,R.S.,Elias,K.A.,Stanley,M.S.，等(1995)著《生長(zhǎng)激素促分泌素特異性、功效以及最小的生物活性一致性》(Growthhormone secretagogues:characterization,efficacy and minimalbioactive conformation)，見(jiàn)《美國(guó)國(guó)家化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊》92,11165-11169.
Patchett,A.A.,Nargund,R.p.,Tata,J.R.等(1995)著《L-163,191(MK-0677)-一種有效的經(jīng)口的活性生長(zhǎng)激素促分泌劑的設(shè)計(jì)和生物活性》(Design and biological activities of L-163,191(MK-0677):apotent,orally active growth hormone secretagogue),《美國(guó)國(guó)家化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)刊》92,7001-7005.
Postel-Vinay,M-C.,和Kelly,P.A.(1996)，《生長(zhǎng)激素受體信號(hào)》《Growth hormone receptor signalling》，見(jiàn)《拜厲賴瑞斯臨床內(nèi)分泌學(xué)和新陳代謝》(Baillieres Clinical Endocrinology and Metabolism)10,323-336。
Guan等(1993)《胞二磷膽堿結(jié)合血流轉(zhuǎn)移》(J.Cereb.BloodFlow Metab.)13:609-616。
Knusel等(1990)《神經(jīng)科學(xué)雜志》10:558-570.
權(quán)利要求
1 一種在病人的大腦中誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用的方法，所述的方法包括對(duì)所述的病人大腦進(jìn)行生長(zhǎng)激素、其類似物或相同功效的配體的給藥的步驟。
2 一種在病人的大腦中誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)作用的方法，所述的方法包括在所述的病人大腦中增加所述的生長(zhǎng)激素或相同功效的內(nèi)源的配體的有效濃度的步驟。
3 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述的生長(zhǎng)激素或配體的有效濃度是通過(guò)直接給藥增加的。
4 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述的生長(zhǎng)激素或配體的有效濃度，是通過(guò)給予一種藥劑而增加，該藥劑刺激生長(zhǎng)激素或配體的產(chǎn)生，或者減少或阻止對(duì)生長(zhǎng)激素或配體活性的抑制作用。
5 根據(jù)權(quán)利要求1-4所述的任何一種方法，其中所述的神經(jīng)保護(hù)作用是一種神經(jīng)修復(fù)作用。
6 根據(jù)權(quán)利要求1-4所述的任何一種方法，其中所述的神經(jīng)保護(hù)作用是一種神經(jīng)預(yù)防作用。
7 一種治療病人修復(fù)其神經(jīng)元的方法，所述病人在先的神經(jīng)元損害結(jié)果是注定導(dǎo)致神經(jīng)元死亡的；該方法包括增加所述病人大腦中的生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素類似物或相同功效的配體有效量的步驟。
8 一種誘導(dǎo)病人大腦的神經(jīng)保護(hù)功能的方法，包括引起所述病人大腦中神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體的活性提高的步驟。
9 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述的活性的提高是通過(guò)用一種藥劑對(duì)上述病人大腦直接給藥，提高所述神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體的活性。
10 根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述的藥劑和神經(jīng)激素受體結(jié)合。
11 根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述的藥劑選自生長(zhǎng)激素、一種生長(zhǎng)激素類似物、催乳激素、一種催乳激素的類似物、胎盤催乳激素或胎盤催乳激素的類似物。
12 根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述的藥劑是能導(dǎo)致另一種藥劑活性濃度提高，后者可與神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體結(jié)合。
13 根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述的藥劑選自生長(zhǎng)激素釋放蛋白(GRP)、生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)、同等功效的促泌素和生長(zhǎng)激素抑制素釋放的抑制因子(SRIF)。
14 根據(jù)權(quán)利要求8-13所述的方法，其中所述的是一種神經(jīng)預(yù)防方法。
15 根據(jù)權(quán)利要求8-13所述的方法，其中所述的是一種神經(jīng)修復(fù)方法。
16 一種治療由于在先的神經(jīng)方面的損傷會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元死亡，修復(fù)病人神經(jīng)元的方法，該方法包括提高所述病人大腦中神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體活性的步驟。
17 一種治療病人用以保護(hù)神經(jīng)元的方法，所述方法包括在與另一種神經(jīng)保護(hù)劑結(jié)合的同時(shí)進(jìn)行生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素類似物或某種同等功效的配體給藥。
18 根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述的輔助神經(jīng)保護(hù)劑選自IGF-1、GPE、苯丙酸諾龍、NGF、TGF-β生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白、IGF結(jié)合蛋白和bFGF。
19 根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，所述的方法誘導(dǎo)一種修復(fù)病人神經(jīng)元作用以修復(fù)神經(jīng)元，否則神經(jīng)元損害結(jié)果是注定導(dǎo)致神經(jīng)元死亡的。
20 根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的傷害是Huntington氏疾病或Alzheimer氏疾病，并且所述的生長(zhǎng)激素、類似物或配體與一種或多種GPE、IGF-1和苯丙酸諾龍結(jié)合進(jìn)行給藥。
21 根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的傷害是皮質(zhì)基質(zhì)的變性或Steel-Richardson-Olszewski綜合癥，并且所述的生長(zhǎng)激素，類似物或配體與IGF-1結(jié)合進(jìn)行給藥。
22 根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的傷害是Devic氏病或Pick氏病，并且所述的生長(zhǎng)激素，類似物或配體與GPE、IGF-1二者或二者之一結(jié)合進(jìn)行給藥。
23 根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的傷害是糖尿病性神經(jīng)病，并且所述的生長(zhǎng)激素，類似物或配體與苯丙酸諾龍、IGF-1二者或二者之一結(jié)合進(jìn)行給藥。
24 一種治療由于神經(jīng)方面的損傷會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元死亡，修復(fù)病人神經(jīng)元的藥物，該藥物包括結(jié)合使用生長(zhǎng)激素、一種生長(zhǎng)激素類似物或一種功能等效配體，以及一種或多種選自輔助類神經(jīng)保護(hù)劑，附帶條件是，當(dāng)給一種輔助類神經(jīng)保護(hù)劑時(shí)，不是IGF-1。
25 根據(jù)權(quán)利要求24所述的藥劑，所述藥劑是一種或多種GPE、苯丙酸諾龍、NGF、TGF-β、一種生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白、一種IGF結(jié)合蛋白以及bFGF。
26 根據(jù)權(quán)利要求25所述的藥劑，所述藥物進(jìn)一步包括IGF-1。
27 生長(zhǎng)激素或一種生長(zhǎng)激素類似物或功能等效配體，用于神經(jīng)保護(hù)藥物的制備應(yīng)用。
28 根據(jù)權(quán)利要求27的所述的應(yīng)用，其中所述的藥劑，用來(lái)修復(fù)病人神經(jīng)元，否則由于神經(jīng)方面的損傷注定會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元死亡。
29 根據(jù)權(quán)利要求27的所述的應(yīng)用，其中所述的藥劑進(jìn)一步包括一種或多種選自輔助神經(jīng)保護(hù)藥劑，假如有一種輔助神經(jīng)保護(hù)藥劑，則不是IGF-1。
全文摘要
本發(fā)明涉及使用神經(jīng)保護(hù)物質(zhì)和藥物，神經(jīng)保護(hù)物質(zhì)是由激活神經(jīng)系統(tǒng)生長(zhǎng)激素受體誘導(dǎo)產(chǎn)生的。主要使用藥物包括生長(zhǎng)激素、生長(zhǎng)激素類似物或功能等效配體。那些藥物也可包括一種或多種輔助的神經(jīng)保護(hù)劑。
文檔編號(hào)A61P25/28GK1316908SQ99810613
公開(kāi)日2001年10月10日 申請(qǐng)日期1999年9月3日 優(yōu)先權(quán)日1998年9月3日
發(fā)明者阿簡(jiǎn)·史潘絲, 克瑞絲·愛(ài)德華·威廉姆斯, 皮特·大衛(wèi)·格盧克曼, 羅絲·格雷厄姆·克拉克 申請(qǐng)人:諾蘭茲公司