專利名稱：再狹窄的治療的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及能預(yù)防、抑制或減少再狹窄(本領(lǐng)域中有時(shí)也稱作“加速動(dòng)脈硬化”和“血管成形術(shù)后狹窄”)的組合物。
現(xiàn)有技術(shù)從理解本發(fā)明的背景這一目的出發(fā)，我們認(rèn)為相關(guān)的有以下參考文獻(xiàn)。
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上述參考文獻(xiàn)在下文中將通過指出它們在以上目錄中的序號(hào)(顯示在括號(hào)內(nèi))加以引用。
背景技術(shù)：
在過去的十年里，使阻塞性動(dòng)脈粥樣硬化的血管換血管術(shù)的機(jī)械方法已有了很大的改進(jìn)。經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀血管成形術(shù)(PTCA)方法包括但不限于氣囊擴(kuò)張、動(dòng)脈粥樣硬化斑切除術(shù)、腔內(nèi)放置斯滕特固定膜、腐爛脫離(rotablation)和激光切除術(shù)。但是，換血管術(shù)會(huì)導(dǎo)致血栓形成和新內(nèi)膜增生，這又會(huì)在成功的氣囊血管成形術(shù)后引起冠狀動(dòng)脈大面積再狹窄和主動(dòng)脈冠狀動(dòng)脈的隱靜脈帕旁路移植物以及其他冠脈移植物的再狹窄。另外，內(nèi)膜增生會(huì)在許多股骨淺層血管成形術(shù)、頸動(dòng)脈內(nèi)膜切除術(shù)和股遠(yuǎn)側(cè)靜脈旁路中引起再狹窄。血管內(nèi)斯滕特固定膜的引入有助于減少再狹窄的發(fā)生，但這個(gè)問題仍然很重要(1-9)。盡管迄今為止已利用人和動(dòng)物模型對(duì)發(fā)生率、時(shí)間選擇、機(jī)理和藥理學(xué)干預(yù)等進(jìn)行了廣泛的研究，但沒有能始終防止冠脈再狹窄的療法(10-12)。現(xiàn)在我們?nèi)匀环浅Ｐ枰苡糜跍p少或預(yù)防再狹窄的組合物和方法。
雙膦酸類化合物(Bisphosphonates)(BP)(以前叫做二膦酸類化合物(diphosphonates))是以兩個(gè)C-P鍵為特征的化合物。如果這兩個(gè)鍵位于同一碳原子上(P-C-P)，就將它們稱作孿位雙膦酸類化合物。BP是與骨的形成和吸收的調(diào)節(jié)有關(guān)的內(nèi)源性無機(jī)焦磷酸的類似物。術(shù)語“雙膦酸鹽”一般用于指孿位和非孿位雙膦酸類化合物。BP和焦磷酸類化合物有時(shí)可能一起構(gòu)成聚合物鏈。BP因其對(duì)骨礦質(zhì)的親和力而作用于骨，并且是骨吸收和異位鈣化的有效抑制劑。BP或焦磷酸已在臨床上主要用作(a)抗溶骨藥，用于骨的破壞增加的病人，尤其是佩吉特氏病、腫瘤性骨病和骨質(zhì)疏松癥；(b)用于診斷目的的骨骼標(biāo)記(與99mTc相連)；(c)異位鈣化和骨化病人的鈣化抑制劑；以及(d)加入牙膏中的抗牙結(jié)石劑(13)。
發(fā)明概述按照本發(fā)明，BP或焦磷酸(本文中統(tǒng)稱為“活性成分”)用于治療或預(yù)防血管的。本文中所用的術(shù)語“雙膦酸(biphosphonate)(BP)”表示孿位和非孿位雙膦酸類化合物(biophosphonates)。術(shù)語“活性成分”的范圍內(nèi)還包括BP或焦磷酸(pyrophosphate)的聚合物鏈，特別是由最多40個(gè)BP單體組成的鏈。優(yōu)選的活性成分是下式(Ⅰ)表示的化合物 其中R代表O或CR1R2基；R1是H、OH或鹵素基；和R2是鹵素；任選地被雜芳基或雜環(huán)基C1-C10烷基氨基或C3-C8環(huán)烷基氨基(其中氨基可能是伯氨基、仲氨基或叔氨基)取代的直鏈或支鏈C1-C10烷基或C2-C10鏈烯基；-NHY，其中Y是氫、C3-C8環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或者R2是-SZ，其中Z是氯取代的苯基或吡啶基；本發(fā)明因此提供了所述活性成分、所述活性成分的絡(luò)合物(complex)或其可藥用鹽或酯在制備用于預(yù)防或治療血管再狹窄的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了治療再狹窄的方法，該方法包括對(duì)需要的個(gè)體給藥有效量的所述活性成分、其絡(luò)合物或其可藥用鹽或酯。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了用于預(yù)防或治療再狹窄的藥物組合物，包含作為活性成分的有效量的所述活性成分、其可藥用游離酸、絡(luò)合物或鹽，任選地加上可藥用載體或稀釋劑。特別優(yōu)選的載體是脂質(zhì)體制劑。
術(shù)語“有效量”的意思是指能有效地達(dá)到所需治療結(jié)果，即預(yù)防或減少血管再狹窄的活性成分的量。有效量可取決于許多因素，包括所治療個(gè)體的體重和性別；醫(yī)學(xué)方法的類型，例如，要抑制的血管再狹窄是否是在氣囊血管成形術(shù)后，是否在氣囊血管成形術(shù)后配置斯滕特固定膜，等等；活性成分的給藥方式(即是系統(tǒng)給藥還是直接給藥到病變部位)；所用載體的類型(例如，是迅速釋放活性成分的載體還是在一定期間內(nèi)釋放活性成分的載體)；治療方案(例如，活性成分是每天給藥一次、一日數(shù)次還是幾天一次)；影響再狹窄發(fā)展速度的臨床因素諸如糖尿病、吸煙、血膽甾醇過多、腎病等；解剖學(xué)因素，諸如是否有嚴(yán)重的血管成形術(shù)前狹窄、全部閉塞、左前位下行性冠狀動(dòng)脈特定區(qū)域、隱靜脈移植物損害、長的損害、多脈管或多損害PTCA；組合物的劑型；等等。此外，方法上的變化也可能與劑量有關(guān)，諸如PTVA后較大的殘余狹窄、重解剖、內(nèi)膜撕裂、氣囊的適宜大小以及血栓的存在。技術(shù)人員通過常規(guī)形式的實(shí)驗(yàn)應(yīng)當(dāng)能基本上沒有困難地確定每種情況下的有效量。
本發(fā)明可以用于預(yù)防、減少或治療血管再狹窄，主要但不限于血管成形術(shù)后的冠狀再狹窄(coronary restenosis)。血管再狹窄產(chǎn)生于各種血管成形術(shù)操作，包括氣囊血管成形術(shù)、血管內(nèi)斯滕特固定膜植入或其他經(jīng)皮血管成形術(shù)方法(包括冠狀動(dòng)脈、頸動(dòng)脈和經(jīng)得起血管成形術(shù)的其他血管的血管成形術(shù))，以及用于產(chǎn)生于血管移植狹窄的再狹窄(例如在旁路手術(shù)后)(16)。此外，本發(fā)明還可用于預(yù)防、減少或治療周圍動(dòng)脈和靜脈中的血管再狹窄。
本發(fā)明的一個(gè)范例性的應(yīng)用是用于預(yù)防和治療斯滕特固定膜(stent)內(nèi)再狹窄。在血管成形術(shù)操作中在血管內(nèi)配置斯滕特固定膜來支持血管壁，這是一個(gè)可廣泛接受的醫(yī)療方法。但是，盡管血管內(nèi)存在斯滕特固定膜，仍常常發(fā)生再狹窄。按照本發(fā)明，可以給藥上述活性成分，無論是全身性給藥還是直接給藥到某部位，以預(yù)防或抑制這種再狹窄?？赡艿兀龌钚猿煞挚梢杂檬蛊鋼饺氲剿闺毓潭ど系姆绞脚渲?，這事實(shí)上將使所述活性成分直接在某部位給藥?；钚猿煞挚梢杂眠@樣的方式配制，例如將其包含在斯滕特固定膜的涂層中。涂層的實(shí)例是聚合物涂層，例如由聚氨酯或凝膠制成。
按照本發(fā)明所用的活性成分可以利用本領(lǐng)域中已知的任何一種常規(guī)技術(shù)配制成藥物組合物(參見，例如Alfonso等，1995年(17))。組合物可以制備成各種形式，諸如膠囊，片劑，氣溶膠，溶液，懸浮液，作為醫(yī)用設(shè)備諸如斯滕特固定膜的涂層(參見上文)，等等。此外，本發(fā)明的藥物組合物可以用載體配制成適于局部給藥的形式，或者配制成允許活性成分通過皮膚滲透到體內(nèi)以便起全身作用的釋放形式。每種情況下的優(yōu)選給藥方式將取決于所需釋放模式，它通常是在生理學(xué)上與患者的病情、患者接受的其他治療等最相容的。按照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，所述活性成分配制成微粒形式。這可以通過將活性成分包封或浸漬到顆粒，例如聚合物顆粒、脂質(zhì)囊泡或脂質(zhì)體中達(dá)到。另外，這些顆?？梢允蔷酆匣钚猿煞值念w粒(參見下文)。特別優(yōu)選的是所述活性成分的脂質(zhì)體制劑。脂質(zhì)體可以利用本領(lǐng)域中已知的任何方法制備(關(guān)于脂質(zhì)體的制備方法參見Mnkknen等，1994年(14)和Mnkknen等，(18)。脂質(zhì)體可能是帶正電荷的、中性的或帶負(fù)電荷的(負(fù)電荷脂質(zhì)體是目前優(yōu)選的)，可能是單層或多層的。有時(shí)，也可以使用包含游離活性成分(即未包封的)和所述包封在脂質(zhì)體中的活性成分的組合的組合物。
利用本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，活性成分是優(yōu)選地選自能經(jīng)受細(xì)胞內(nèi)代謝的化合物的BP。這類的一種優(yōu)選的活性成分是具有下式(Ⅱ)的化合物氯甲雙磷酸(clodronate) 氯甲雙磷酸，以前的記載是在與骨質(zhì)溶解相關(guān)的腫瘤的治療中用于治療因惡性腫瘤導(dǎo)致的高鈣血癥(13)，和作為巨噬細(xì)胞的抑制劑(14,18)。
其他這樣的優(yōu)選活性成分是分別具有下式(Ⅲ)和(Ⅳ)的羥乙二磷酸(Etidronate)和Tiludronate 按照本發(fā)明，具有與氯甲雙磷酸類似活性的其他BP也是優(yōu)選的。這些BP可以在它們模擬氯甲雙磷酸的生物活性的能力的基礎(chǔ)上進(jìn)行選擇。這包括，例如抑制吞噬細(xì)胞(例如巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞)的吞噬活性的體外活性；抑制IL-1和/或IL-6和/或TNF-α從巨噬細(xì)胞的分泌的體外活性；體內(nèi)活性，例如所測試的BP預(yù)防或減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型(諸如象下面的實(shí)施例1中描述的大鼠或兔頸動(dòng)脈導(dǎo)管損傷模型，或再狹窄的豬模型)的再狹窄的能力；等等。
本發(fā)明的另一組優(yōu)選的活性成分是氨基-BP和具有下列通式(Ⅴ)的任何其他含氮的BP 其中X代表C1-C10烷基氨基或C3-C8環(huán)烷基氨基，此處氨基可以是伯氨基、仲氨基或叔氨基；或者X代表NHY，其中Y是氫、C3-C8環(huán)烷基、芳基或雜芳基。
屬于該組中的BP據(jù)信不會(huì)被代謝并已顯示在相對(duì)低的濃度下能誘導(dǎo)白介素IL-1的分泌，并且在相對(duì)高的濃度下能使巨噬細(xì)胞產(chǎn)生編程性細(xì)胞死亡(18)。屬于該組中的優(yōu)選的BP是例如分別具有下列結(jié)構(gòu)式(Ⅵ)和(Ⅶ)的氨羥二磷酸(Pamidronate)和阿侖特羅(Alendronate)
盡管孿位BP是本發(fā)明中優(yōu)選的BP，但非孿位BP，通稱之為膦酸類化合物的BP的一膦酸類化合物(monophosphonates)，也可用作本發(fā)明中的活性成分。
另一種優(yōu)選的活性成分是具有結(jié)構(gòu)式(Ⅷ)的焦磷酸(pyrophosphate) 焦磷酸優(yōu)選在脂質(zhì)體中或聚合物顆粒制劑配制并給藥。
本發(fā)明組合物可包含所述活性成分，該活性成分可以是其游離酸形式，與金屬陽離子諸如鈣、鎂或有機(jī)堿形成的絡(luò)合物形式，或者可以是鹽或酯形式，或者它們可以聚合成多達(dá)40個(gè)單體的聚合物。鹽可以是鈉、鉀、銨或鈣鹽或與其他任何適宜的堿性陽離子(例如有機(jī)氨基化合物)形成的鹽。鹽或聚合物可以是直徑在大約0.01-10μm范圍內(nèi)，優(yōu)選直徑在大約0.1-5μm范圍內(nèi)的微粉化顆粒形式。本發(fā)明組合物中的無論是游離酸形式還是鹽形式的活性成分可以帶有或不帶有結(jié)晶水(含水的和無水的)。
通過優(yōu)選的實(shí)施方案，活性成分包封在利用本領(lǐng)域中已知的任何一種方法制備的脂質(zhì)體中。本發(fā)明中適宜的脂質(zhì)體優(yōu)選無毒脂質(zhì)體，諸如象用磷脂酰-膽堿磷脂酰甘油和膽固醇制備的那些，例如在下文中描述的。在許多情況下，使用包封在脂質(zhì)體中的活性成分使得活性成分經(jīng)由胞吞作用被細(xì)胞的攝取增加了(14,18)(這種攝取可在治療效果中起作用)。下面的實(shí)施例中所用的脂質(zhì)體的直徑在0.15nm至300nm之間。不過，這不是限制性的，而只是一個(gè)例子，其他尺寸范圍的脂質(zhì)體也可以使用。
此外，活性成分可以包封或包埋在惰性聚合物顆粒中，諸如象本領(lǐng)域中已知的任何一種微膠囊、納米膠囊、納米顆粒、納米球、微球、微粒等(19)?；钚猿煞謴倪@類顆粒的釋放可以是可控釋放，在有些情況下，這導(dǎo)致了所述活性成分的長時(shí)間和增強(qiáng)的作用和攝取。
用于本發(fā)明組合物的藥物載體或稀釋劑可以是本領(lǐng)域中已知的任何一種常規(guī)固體或液體載體。例如固體載體可以是乳糖、蔗糖、滑石、明膠、瓊脂等。當(dāng)載體為液體載體時(shí)，它可以是例如花生油、磷脂、水等。當(dāng)固體載體是用于口服給藥時(shí)，組合物可以是片劑、硬膠囊劑(例如明膠膠囊)、粉末劑或糖丸等形式。當(dāng)使用液體載體時(shí)，制劑可以是糖漿、乳劑、脂質(zhì)體、軟明膠膠囊或無菌可注射液體等形式，諸如脂質(zhì)體制劑、含水或無水液體懸浮液或溶液(17)。
注射用的本發(fā)明組合物可以選自含有適宜添加劑的乳液、溶液、懸浮液、膠體溶液等。
本發(fā)明的組合物可以利用能有效地將活性化合物轉(zhuǎn)輸?shù)胶线m或所需的作用部位的任何途徑給藥。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，給藥方式是靜脈內(nèi)注射(i.v.)和動(dòng)脈內(nèi)注射(i.a.)(特別適用于在線給藥)。其他給藥方式包括肌內(nèi)注射(i.m.)或皮下注射(s.c.)。這種注射可以是濃注或輸液。該組合物也可以局部給藥到動(dòng)脈的病變部位，例如借助本領(lǐng)域中已知的合適的滲液性/滲出性氣囊。另外的給藥方式可以是借助血管周圍釋放、氣囊或斯滕特固定膜上的釋放系統(tǒng)的涂層或借助本領(lǐng)域中已知的其他任何一種心血管藥物釋放系統(tǒng)的方法。本發(fā)明中也可以使用上述給藥途徑的任何組合方式。
要使用的活性成分的劑量也取決于所用活性成分的特定活性、給藥方式(例如系統(tǒng)給藥或局部釋放)、活性成分的形式(例如是藥物形式、聚合物形式，還是包封在顆粒諸如脂質(zhì)體中，等等)，以及本質(zhì)上已知的其他因素。
按照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，個(gè)體用活性成分進(jìn)行治療可以是為了在再狹窄發(fā)生前預(yù)防其發(fā)生。對(duì)于預(yù)防來說，活性成分可以在血管成形術(shù)操作前、操作中或操作后對(duì)個(gè)體給藥，也可以是這幾種給藥方式的組合形式。
按照本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案，活性成分對(duì)患有再狹窄的個(gè)體給藥，目的是減少或治療再狹窄。在這種情況下，活性成分也可以在發(fā)現(xiàn)了再狹窄后的不同時(shí)期對(duì)給體給藥，單獨(dú)的或與其他治療方式結(jié)合。
此外，活性成分也可以在可能導(dǎo)致加速動(dòng)脈硬化的任何其他疾病之前給藥，以及在該方法已開始抑制病情的進(jìn)一步發(fā)展之后急性給藥。
附圖的簡要描述

圖1-3是說明在實(shí)驗(yàn)大鼠頸動(dòng)脈導(dǎo)管損傷模型中，包封在脂質(zhì)體中的氯甲雙磷酸對(duì)再狹窄的減少的作用與不含氯甲雙磷酸的對(duì)照脂質(zhì)體對(duì)相同大鼠的作用進(jìn)行對(duì)比的結(jié)果的條型圖。在這些圖中圖1顯示了在用含有氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體治療的大鼠中與用對(duì)照脂質(zhì)體治療的大鼠比較，平均腔內(nèi)膜形成和平均新內(nèi)膜與血管中層比值的程度。
圖2顯示了用含有氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體治療的大鼠的狹窄百分?jǐn)?shù)與用對(duì)照脂質(zhì)體治療的大鼠的狹窄百分?jǐn)?shù)的對(duì)比情況；和圖3顯示了在用含有氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體治療的大鼠中與僅用對(duì)照脂質(zhì)體治療的大鼠比較，作為平滑肌細(xì)胞活力的間接指數(shù)和作為總動(dòng)脈面積和原始腔面積之間的差值而測定的血管中層面積范圍。
實(shí)施例現(xiàn)在將利用非限制性實(shí)施例并參照附圖來闡述本發(fā)明實(shí)施例1材料和方法氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體通過將藥物以0.11M,pH7的濃度溶解于去離子水中而制備氯甲雙磷酸的儲(chǔ)備溶液。
脂質(zhì)體制劑在圓底燒瓶中精確稱取38.9mg二硬脂酰磷脂酰甘油(DSPG)、118.5mg二硬脂酰-磷脂酰膽堿(DSPC)和38.7mg膽固醇并將它們?nèi)苡?0ml氯仿∶甲醇(9∶1)。將燒瓶溫和加熱，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸發(fā)溶劑。之后加入20ml水合二異丙醚并將該燒瓶放入水浴中，直至內(nèi)容物溶解。加入如上制備的8ml氯甲雙磷酸溶液，并將該溶液在55℃下超聲處理45分鐘。有機(jī)相在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中蒸發(fā)(55℃,100rpm)。類似地，可以制備其他含有藥物的脂質(zhì)體。
制得的脂質(zhì)體的純化通過將2.6gr Sephadex G-50溶于40ml水中并穩(wěn)定化過夜而制得Sephadex凝膠。分析柱用100ml緩沖液(50mM Mes+50mMHEPES+75mM NaCl,pH7.2)沖洗。將脂質(zhì)體加到分析柱上，該分析柱用緩沖液沖洗。脂質(zhì)體可以通過其顏色而在分析柱中觀察到它的條帶。從分析柱收集大約20滴到每個(gè)試管中。
動(dòng)物按照耶路撒冷Hebrew大學(xué)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物的照料和使用標(biāo)準(zhǔn)，獲得動(dòng)物并將其關(guān)在耶路撒冷Hebrew大學(xué)醫(yī)學(xué)系的動(dòng)物設(shè)備中。使用重350-420g的Sabra種雄性大鼠。動(dòng)物食用標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室食物并隨意飲用自來水。所有體內(nèi)實(shí)驗(yàn)在用80mg/kg氯胺酮和5mg/kg甲苯噻嗪腹膜內(nèi)注射達(dá)到全身麻醉的條件下進(jìn)行。
大鼠頸動(dòng)脈導(dǎo)管損傷模型通過脖子上的中線切口暴露出遠(yuǎn)側(cè)左頸總動(dòng)脈和頸外動(dòng)脈。左頸總動(dòng)脈利用通過頸外動(dòng)脈引入的2F氣囊導(dǎo)管的管腔內(nèi)通道剝?nèi)?nèi)皮。導(dǎo)管利用用鹽水足夠擴(kuò)張的氣囊通過三次以產(chǎn)生輕微的抗性。然后除去導(dǎo)管，將頸外動(dòng)脈結(jié)扎，傷口用手術(shù)釘關(guān)閉。
用7只大鼠組成對(duì)照組，6只大鼠組成治療組(隨機(jī)選定)。在動(dòng)脈損傷前的一天對(duì)“治療組”靜脈內(nèi)注射氯甲雙磷酸脂質(zhì)體(每只大鼠注射6mg氯甲雙磷酸)并在第6天時(shí)重復(fù)注射。在對(duì)照組中，用“空”脂質(zhì)體(沒有氯甲雙磷酸)進(jìn)行類似注射。
所有動(dòng)物在損傷14天后利用過量戊巴比妥處死。動(dòng)脈用150ml 4％甲醛溶液pH7.4在100mmHg下灌注固定。將右心房切開，將與灌注系統(tǒng)相連的18G導(dǎo)管插入左心室。將動(dòng)脈段切開，切割，輕輕與聚合物分離，并在相同的固定溶液中后固定至少48小時(shí)。將動(dòng)脈段包埋在石蠟中并距離600μm切割8-10處，將6μm的切片封固并用Verhoeff彈性蛋白染劑染色以用于組織學(xué)檢查。
形態(tài)測定分析玻片由不知道實(shí)驗(yàn)組類型的檢驗(yàn)員用顯微鏡檢查。每個(gè)玻片上的6-8個(gè)切片利用計(jì)算機(jī)形態(tài)測定分析進(jìn)行評(píng)估，切片的平均數(shù)據(jù)進(jìn)一步用作整個(gè)玻片的代表用于組間對(duì)比。殘余的腔、由內(nèi)彈性層限定的區(qū)域(原始腔)和由外彈性層環(huán)成的區(qū)域(“總動(dòng)脈面積”)直接測量。新內(nèi)膜增厚的程度表示為新內(nèi)膜的面積與原始腔之間的比值(％狹窄)，和新內(nèi)膜的面積與中層的面積之間的比值(N/M)。中層面積(SMC活力的間接指數(shù))測定為總動(dòng)脈面積和原始腔面積之間的差值。
結(jié)果手術(shù)操作和處理沒有引起動(dòng)物的死亡或表觀發(fā)病。
從圖1可以看出，在用包封了氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體治療后，平均新內(nèi)膜形成和平均新內(nèi)膜與中層的比值(N/M)的范圍明顯減小了。用氯甲雙磷酸治療的大鼠的N/M比值為0.28±0.23，對(duì)照組為1.42±0.26(均值±SD,p＜0.01)。類似地，如圖2中所示，治療組中達(dá)到了％狹窄的明顯抑制治療組和對(duì)照組分別為9.8±7.76和41.53±7.9(均值±SD,p＜0.01)。如圖3中所示，沒有明顯的全身性副作用，對(duì)軀體的生長也沒有任何影響。
結(jié)論從頸動(dòng)脈的氣囊損傷后的新內(nèi)膜形成情況可以看出，用含有氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體治療的大鼠的再狹窄明顯減少了。
實(shí)施例2材料和方法用氣囊損傷大鼠和動(dòng)脈粥樣硬化兔的頸動(dòng)脈模型研究氯甲雙磷酸脂質(zhì)體注射的抗再狹窄作用。大鼠用含有氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體、空的脂質(zhì)體(對(duì)照)和在溶液中的氯甲雙磷酸(另外的對(duì)照)進(jìn)行治療。氯甲雙磷酸的注射劑量在手術(shù)操作前的一天(-1)和/或損傷后的第6天(+6)為1.5和15mg/kg。兔子(喂食動(dòng)脈粥樣硬化飲食30天后)在氣囊血管成形術(shù)之前的一天用氯甲雙磷酸脂質(zhì)體治療(10mg/kg)。對(duì)于大鼠和兔模型，利用組織學(xué)切片的數(shù)字面積測量學(xué)，分別在損傷后的第14和30天，測量治療和對(duì)照動(dòng)物組中動(dòng)物的腔、新內(nèi)膜、中層和血管的面積和體積。
結(jié)果結(jié)果顯示在下表1中。
可以看出，在用空脂質(zhì)體和在溶液中的游離氯甲雙磷酸治療的組間沒有明顯差異(參見上表)，顯示出顯著的新內(nèi)膜形成。用裝載氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體治療后，平均新內(nèi)膜形成、平均新內(nèi)膜與中層的比值(N/M)和％狹窄的范圍明顯減小了。中層面積不受各種治療的影響，表明對(duì)休眠細(xì)胞沒有毒害作用。另外，既沒有明顯的全身性副作用，對(duì)骨和軀體的生長也沒有任何影響。顯著更有效的治療是1×15mg/kg(-1)和2×15mg/kg(-1和+6)注射，在它們之間沒有顯著差異。在用兔子進(jìn)行的研究中觀察到?jīng)]有副作用的類似結(jié)果。在減少新內(nèi)膜形成和％狹窄方面，氯甲雙磷酸脂質(zhì)體明顯有效。
注射二氧化硅顆粒也減少了內(nèi)膜的形成(表1)。這一作用可歸因于已知的二氧化硅對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用。
結(jié)果顯示，用含有氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體進(jìn)行治療顯著減少了大鼠和兔模型的氣囊損傷后的新內(nèi)膜形成。既沒有明顯的全身性和局部副作用，對(duì)身體的生長也沒有任何影響。應(yīng)當(dāng)注意盡管已知BP對(duì)骨有影響，但在用氯甲雙磷酸的脂質(zhì)體制劑進(jìn)行治療后，既沒有觀察到對(duì)骨的作用，也沒有觀察到對(duì)骨和血液中的鈣和磷的濃度的作用。
權(quán)利要求
1.活性成分雙膦酸(BP)、或焦磷酸(PP)、BP或PP的絡(luò)合物、BP或PP的聚合物或其可藥用鹽或酯在制備用于預(yù)防或治療血管再狹窄的藥物組合物中的用途。
2.按照權(quán)利要求1的用途，其中所述活性成分具有通式(Ⅰ) 其中R代表O或CR1R2基；R1是H、OH或鹵素基；和R2是鹵素；任選地被雜芳基或雜環(huán)C1-C10烷基氨基或C3-C8環(huán)烷基氨基取代的直鏈或支鏈C1-C10烷基或C2-C10鏈烯基，其中氨基可能是伯氨基、仲氨基或叔氨基；-NHY，其中Y是氫、C3-C8環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或者R2是-SZ，其中Z是氯取代的苯基或吡啶基；或所述BP的絡(luò)合物或其可藥用鹽或酯，在制備用于預(yù)防或治療血管再狹窄的藥物組合物中的用途。
3.按照權(quán)利要求2的用途，其中所述活性成分選自氯甲雙磷酸、羥乙二磷酸、Tiludronate、氨羥二磷酸、阿侖特羅、焦磷酸或其可藥用鹽或酯。
4.按照權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的用途，其中所述再狹窄是動(dòng)脈再狹窄。
5.按照權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的用途，其中所述用途包括將所述活性成分摻入顆粒中或包封在顆粒中。
6.按照權(quán)利要求5的用途，包括用脂質(zhì)體包封所述活性成分。
7.按照權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的用途，其中所述用途包括將所述活性成分包埋到聚合物顆粒中。
8.按照權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的用途，包括制備用于全身性給藥的組合物。
9.按照權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的用途，包括制備用于摻入到斯滕特固定膜中的組合物。
10.治療再狹窄的方法，包括對(duì)需要的個(gè)體給藥有效量的選自下列的活性成分雙膦酸(BP)、焦磷酸(PP)、BP或PP的絡(luò)合物、BP或PP的聚合物或其可藥用鹽或酯。
11.按照權(quán)利要求10的方法，包括對(duì)個(gè)體給藥含有通式(Ⅰ)所示化合物的活性成分 其中R代表O或CR1R2基；R1是H、OH或鹵素基；和其中R1是H、OH或鹵基；和R2是鹵素；任選地被雜芳基或雜環(huán)C1-C10烷基氨基或C3-C8環(huán)烷基氨基取代的直鏈或支鏈C1-C10烷基或C2-C10鏈烯基，其中氨基可能是伯氨基、仲氨基或叔氨基；-NHY，其中Y是氫、C3-C8環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或者R2是-SZ，其中Z是氯取代的苯基或吡啶基；或其絡(luò)合物、鹽、酯或聚合物。
12.按照權(quán)利要求11的方法，其中所述活性成分是氯甲雙磷酸、羥乙二磷酸、Tiludronate、氨羥二磷酸、阿侖特羅、焦磷酸或其可藥用鹽或酯。
13.按照權(quán)利要求10-12任一項(xiàng)所述的方法，其中所述再狹窄是冠狀再狹窄。
14.按照權(quán)利要求10-12任一項(xiàng)所述的方法，它包括對(duì)個(gè)體給藥由所述活性成分形成或具有摻入其中的所述活性成分的顆粒。
15.按照權(quán)利要求14的方法，包括給藥含有所述活性成分的脂質(zhì)體。
16.按照權(quán)利要求10-15任一項(xiàng)所述的方法，其中所述活性成分全身性給藥。
17.按照權(quán)利要求10-16任一項(xiàng)所述的方法，其中所述活性成分局部給藥到所需部位。
18.一種藥物組合物，它包含作為活性成分的雙膦酸(BP)、焦磷酸(PP)、BP或PP的絡(luò)合物、BP或PP的聚合物或其可藥用鹽或酯，以及可藥用載體或稀釋劑，用于預(yù)防或治療血管再狹窄。
19.按照權(quán)利要求16的藥物組合物，其中所述活性成分具有通式(Ⅰ) 其中R代表O或CR1R2基；R1是H、OH或鹵素基；和R2是鹵素；任選地被雜芳基或雜環(huán)C1-C10烷基氨基或C3-C8環(huán)烷基氨基取代的直鏈或支鏈C1-C10烷基或C2-C10鏈烯基，其中氨基可能是伯氨基、仲氨基或叔氨基；-NHY，其中Y是氫、C3-C8環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或者R2是-SZ，其中Z是氯取代的苯基或吡啶基。
20.按照權(quán)利要求19的組合物，其中所述活性成分是氯甲雙磷酸、羥乙二磷酸、Tiludronate、氨羥二磷酸、阿侖特羅、焦磷酸或所述化合物的可藥用鹽和酯。
21.按照權(quán)利要求18-20任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述再狹窄是冠狀再狹窄。
22.按照權(quán)利要求19-21任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述組合物包含由所述活性成分制成的顆?；蚓哂袚饺肫渲械乃龌钚猿煞值念w粒。
23.按照權(quán)利要求22的藥物組合物，其中所述顆粒是包封了所述活性成分的脂質(zhì)體顆粒。
24.按照權(quán)利要求22的藥物組合物，其中所述活性成分包埋在聚合物顆粒中。
25.按照權(quán)利要求18-24任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述活性成分為微粉化顆粒形式。
全文摘要
雙膦酸(BP)、焦磷酸(PP)、BP或PP的絡(luò)合物、BP或PP的聚合物或其可藥用鹽或酯,用于預(yù)防或治療血管再狹窄。
文檔編號(hào)A61P9/10GK1321090SQ99810638
公開日2001年11月7日 申請(qǐng)日期1999年7月14日 優(yōu)先權(quán)日1998年7月14日
發(fā)明者G·格羅姆, H·達(dá)尼博格 申請(qǐng)人:耶路撒冷希伯來語大學(xué)依蘇姆研究開發(fā)公司, 哈達(dá)斯特醫(yī)療研究服務(wù)和開發(fā)有限公司