一種中藥組合物及其應(yīng)用與制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，尤其涉及一種中藥組合物及其應(yīng)用與制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃褐斑俗稱"蝴蝶斑"，"肝斑"或者"妊娠斑"，一種獲得性色素沉著皮膚病，表現(xiàn)為 色素對稱性沉著，主要發(fā)生在面部，以顴部、頰部、鼻、前額、頦部為主，輕者為淡黃色或淺褐 色；重者呈深褐色或淺黑色。多發(fā)于中青年女性，是臨床上常見而又難以治愈的皮膚病之 一。流行病學(xué)顯示黃褐斑多發(fā)生于女性，而且隨年齡增長，病情加重。并且大多數(shù)患者伴有 不同程度的月經(jīng)失調(diào)、失眠、心煩易怒等內(nèi)分泌及植物神經(jīng)功能紊亂，給患者帶來生活及精 神方面諸多煩惱和痛苦。
[0003] 中醫(yī)學(xué)認為，黃褐斑的發(fā)生多由于腎陰不足，腎水不能上承，或肝郁氣結(jié)、肝失條 達，郁久化熱，灼傷陰血，致使顏面氣血失和而發(fā)病。臨床上黃褐斑患者常出現(xiàn)月經(jīng)不調(diào)、腰 膝酸軟等腎陰不足之證，或表現(xiàn)出性格抑郁、情志不暢、急躁易怒等肝氣不舒癥狀。而現(xiàn)代 醫(yī)學(xué)認為，黃褐斑主要是由于黑色素在皮膚內(nèi)增多而引起，黑素細胞增多和黑色素生成增 多是引起黑色素增多的兩個主要因素。紫外線、內(nèi)分泌、遺傳、氧自由基、微生物等因素是引 起黑色素增多的因素。另外，還有研宄發(fā)現(xiàn)，黃褐斑的形成與下列因素有關(guān)：內(nèi)分泌失調(diào)、妊 娠雌激素和孕激素水平、口服避孕藥、子宮卵巢疾病、遺傳因素、氧自由基、紫外線照射、血 清銅含量、甲乙型肝炎、膽囊炎、酪氨酸功能障礙、化妝品、光毒性藥物、抗癲癇藥及情緒波 動等。
[0004] 因此，從中醫(yī)辨證論治的角度，大多是理氣活血，疏肝解郁，調(diào)和心脾等整體辨證 論治治療本病，從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療的角度，主要從抑制黑色素的生成酶即酪氨酸酶，調(diào)節(jié)體內(nèi) 雌孕激素水平，清除自由基和脂質(zhì)過氧化物等方面治療。
[0005] 目前市場上流通的聲稱具有祛斑作用的產(chǎn)品種類繁多，既包括定位于美容修飾作 用的膏霜、乳液、水劑型態(tài)的化妝品，也包括膠囊、口服液等用于內(nèi)服的保健食品，此外，還 有一些針對皮膚病變而產(chǎn)生的斑點為治療目的的外用藥品。這些產(chǎn)品中，大多數(shù)包括中藥 組合物或中藥提取物的組合物。中藥或中藥提取物配伍是否合理決定著這些產(chǎn)品能夠起到 很好的治療黃褐斑是作用。不合理的配方不但不能達到治療黃褐斑的作用，反而可能會導(dǎo) 致黃褐斑的加重。
[0006] 因此，進一步開發(fā)配伍合理，能夠有效治療黃褐斑的中藥組合物十分必要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種能夠有效治療黃褐斑的中藥組 合物及其應(yīng)用制備方法。
[0008] 本發(fā)明提供了一種中藥組合物，由以下原料制得：葛根、當歸、白芍、牡丹皮和茯 苓。
[0009] 在本發(fā)明的實施例中，本發(fā)明提供的中藥組合物由以下質(zhì)量份的原料制得：葛根 1份~8份、當歸1份~10份、白茍1份~6份、牡丹皮1份~8份、茯苳1份~6份。
[0010] 在一些實施例中，本發(fā)明提供的中藥組合物由以下質(zhì)量份的原料制得：葛根3 份~5份、當歸4份~6份、白芍2份~4份、牡丹皮3份~5份、茯苓2份~4份。
[0011] 在一些實施例中，本發(fā)明提供的中藥組合物由以下質(zhì)量份的原料制得：葛根4份、 當歸5份、白芍3份、牡丹皮4份、茯苓3份。
[0012] 在一些實施例中，本發(fā)明提供的中藥組合物由以下質(zhì)量份的原料制得：葛根5份、 當歸6份、白芍4份、牡丹皮5份、茯苓4份。
[0013] 在一些實施例中，本發(fā)明提供的中藥組合物由以下質(zhì)量份的原料制得：葛根3份、 當歸4份、白芍2份、牡丹皮3份、茯苓2份。
[0014] 黑色素是一種生物多聚體，廣泛存在于人和動物的皮膚、毛發(fā)和眼睛中。黑色素的 生成與酪氨酸酶密切相關(guān)，其主要發(fā)生在黑色素細胞中。黑色素的的形成過程大致如下：體 內(nèi)酪氨酸在酪氨酸酶催化下形成3, 4-二羥基苯丙氨酸（即多巴）、多巴進一步氧化形成多 巴醌、多巴醌經(jīng)多聚合反應(yīng)與氧化反應(yīng)生成多巴色素、多巴色素又經(jīng)一系列羥化反應(yīng)、脫羧 反應(yīng)、氧化反應(yīng)形成5,6-吲哚醌，再與其他中間產(chǎn)物結(jié)合形成黑色素。因此，黃褐斑的形成 與黑色素細胞活性以及體內(nèi)存在的酪氨酸酶活性密切相關(guān)，鑒于此，本發(fā)明在相關(guān)的藥效 實驗過程中選擇了檢測小鼠 B-16黑素瘤細胞活性、酪氨酸酶活性以及黑色素生成量來探 討本專利發(fā)明組合物對于黃褐斑的祛除效果。
[0015] 本發(fā)明通過比較不同拆方組的結(jié)果發(fā)現(xiàn)缺葛根、當歸、白芍、牡丹皮、茯苓對于抑 制小鼠 B-16黑素瘤細胞活性、酪氨酸酶活性以及黑色素生成的作用依次減弱，且葛根、當 歸、白芍的添加與否對于結(jié)果具有顯著影響。說明，本發(fā)明提供的中藥組合物具有合理的配 方，其中各組分缺一不可。
[0016] 本發(fā)明提供的中藥組合物在制備祛除黃褐斑的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0017] 實驗結(jié)果表明：（1)本發(fā)明組合物在極低濃度時，可刺激B16細胞的增殖；但當其 濃度介于50 μ g/ml-350 μ g/ml時，隨濃度增高，抑制作用增強；當本發(fā)明組合物濃度大于 350 μ g/ml時，對B-16黑色素瘤細胞增殖的抑制作用趨于平衡，不再增強；（2)本發(fā)明組合 物在極低濃度時，對酪氨酸酶活性有一定促進作用，但當其濃度介于100 μ g/ml-300 μ g/ml 時，隨濃度增高，抑制作用增強；當本發(fā)明組合物濃度大于300 μ g/ml時，對酪氨酸酶活性 抑制作用趨于平衡，不再增強；（3)本發(fā)明組合物在極低濃度時，對黑色素生成有一定促進 作用，但當其濃度介于50 μ g/ml-100 μ g/ml時，隨濃度增高，抑制作用增強；當本發(fā)明組合 物濃度大于100 μ g/ml時，對黑色素生成抑制作用趨于平衡，不再增強?？梢姡景l(fā)明提供 的中藥組合物能夠抑制小鼠 B-16黑素瘤細胞活性、酪氨酸酶活性以及黑色素生成，表明本 發(fā)明提供的中藥組合物能夠具有去除黃褐斑的作用。
[0018] 在本發(fā)明的實施例中，祛黃褐斑的產(chǎn)品為口服產(chǎn)品。
[0019] 作為優(yōu)選，口服產(chǎn)品的劑型為片劑、丸劑、膠囊劑、飲液或顆粒劑。
[0020] 作為優(yōu)選，祛黃褐斑的產(chǎn)品為保健品、食品或藥物。
[0021] 本發(fā)明還提供了一種祛除黃褐斑的產(chǎn)品，包括本發(fā)明提供的中藥組合物。
[0022] 作為優(yōu)選，祛除黃褐斑的藥物包括本發(fā)明提供的中藥組合物及藥學(xué)上可接受的輔 料。
[0023] 優(yōu)選的，藥學(xué)上可接受的輔料為：稀釋劑、吸收劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑 劑、包衣材料或膠囊材料中任一種或兩者以上的組合。
[0024] 作為優(yōu)選，祛除黃褐斑的保健品包括本發(fā)明提供的中藥組合物及保健品中可接受 的輔料。
[0025] 優(yōu)選的，保健品中可接受的輔料為：微晶纖維素、二氧化硅、預(yù)膠化淀粉、硬脂酸 鎂、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、甲基硅油、乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、甜菊糖苷、玉米淀粉、小麥 淀粉、稻米淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃芪膠、聚乙烯吡咯烷酮或磷酸鈣中任一種或兩者以上 的組合。
[0026] 作為優(yōu)選，祛除黃褐斑的食品包括本發(fā)明提供的中藥組合物及食品中可接受的原 料和輔料。
[0027] 優(yōu)選的，輔料為檸檬酸、蘋果酸、山梨酸鉀、馬鈴薯淀粉、玉米淀粉、小麥淀粉、微晶 纖維素、乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇、甜菊糖甙、羥丙纖維素、羧甲基纖維素鈉、明膠、大豆 油、黃芪膠、氯化鈉、氯化鉀或磷酸鈣。
[0028] 優(yōu)選的，原料為蜂蜜、蜂王漿或蜂膠。
[0029] 本發(fā)明提供的中藥組合物的制備方法，包括：將葛根、當歸、白芍、牡丹皮和茯苓以 水提取后濃縮，得到中藥組合物。
[0030] 作為優(yōu)選，水的質(zhì)量為葛根、當歸、白芍、牡丹皮和茯苓質(zhì)量之和的10倍。
[0031] 作為優(yōu)選，提取的時間為2h，溫度為90~100°C。
[0032] 作為優(yōu)選，提取的次數(shù)為2次。
[0033] 作為優(yōu)選，濃縮采用真空濃縮。
[0034] 作為優(yōu)選，濃縮至密度為I. 2g/mL~I. 5g/mL。
[0035] 本發(fā)明提供了一種中藥組合物，由以下原料制得：葛根、當歸、白芍、牡丹皮和茯 苓。本發(fā)明通過比較不同拆方組的結(jié)果發(fā)現(xiàn)缺葛根、當歸、白芍、牡丹皮、茯苓對于抑制小鼠 B-16黑素瘤細胞活性、酪氨酸酶活性以及黑色素生成的作用依次減弱，且葛根、當歸、白芍 的添加與否對于結(jié)果具有顯著影響。說明，本發(fā)明提供的中藥組合物具有合理的配方，其中 各組分缺一不可。
【具體實施方式】
[0036] 本發(fā)明提供了一種中藥組合物及其應(yīng)用與制備方法，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本 文內(nèi)容，適當改進工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù) 人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳 實施例進行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
【發(fā)明內(nèi)容】
、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方 法和應(yīng)用進行改動或適當變更與組合，來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。
[0037] 本發(fā)明采用的原料皆為普通市售品，皆可由市場購得。
[0038] 其中，小鼠 B-16黑素瘤細胞株，由華神集團提供；
[0039] 酶標儀：Bio_Rad，Model 550 ;
[0040] 尚;L·、機：LDZ5_2，北足醫(yī)用尚;L·、機J~ ；
[0041] 倒置顯微鏡：Nikon DEAPHOT Fx-35DX ;
[0042] 二氧化碳細胞培養(yǎng)箱：BNA-311，ESPEC ;
[0043] 精密電子天平（精密度0.0 lg) :EB-3200D，日本島津；
[0044] 電子天平（精密度0.0 Olg) :JA1003A，上海精天電子儀器有限公司；
[0045] 離心沉淀器：80_2,上海手術(shù)器械廠；
[0046] 連續(xù)定量可調(diào)移動移液槍：10ul-100ul、20ul-200ul、100-1000ul、l-5ml，芬蘭雷 勃 Finnpipette ;
[0047] 石英紫外線殺菌燈：揚州通達衛(wèi)生器械有限公司；
[0048] 智能立式不銹鋼滅菌器：LDZM-40KCS，上海申安醫(yī)療器械有限公司；
[0049] SOD試劑：南京建成生物工程研宄所提供，批號20031225 ;
[0050] MDA試劑：南京建成生物工程研宄所提供，批號20031226 ;
[0051] 硫化鈉：500g/瓶，化學(xué)純，成者化學(xué)試劑廠，批號980923 ;
[0052] 生理鹽水：0· 9%氯化鈉注射液，500ml :4. 5g。國藥準字H51021158,四川科倫大藥 廠有限責任公司，批號20030921-18 ;
[0053] RPMI-1640 :GIBC0 公司；
[0054] 胎牛血清、胎牛血清：HyClone公司；
[0055] L多巴：美國Slpa公司產(chǎn)品，批號D9628 ;
[0056] 胰蛋白酶：上海華美生物公司產(chǎn)品，批號2186 ;
[0057] MTT，SDS，ConA，瓊脂：Sigma 公司；
[0058] 另有谷氨酰胺，青霉素，慶大霉素，Tris Base及其它國產(chǎn)分析純試劑。
[0059] 下面結(jié)合實施例，進一步闡述本發(fā)明：
[0060] 實施例1中藥組合物的制備
[0061] 取葛根40g、當歸50g、白芍30g、牡丹皮40g、茯苓30g，清洗干凈后備用；加1900g 飲用水，100°C，提取2次，每次2小時，過濾得濾液；將濾液進行真空濃縮至密度為I. 2g/ cm3~I. 5g/cm3,獲得中藥組合物。
[0062] 實施例2中藥組合物的制備
[0063] 取葛根50g、當歸60g、白芍40g、牡丹皮50g、茯苓40g，清洗干凈后備用；加2400g 飲用水，100°C，提取2次，每次2小時，過濾得濾液；將濾液進行真空濃縮至密度為I. 2g/ mL~I. 5g/mL，獲得中藥組合物。
[0064] 實施例3中藥組合物的制備
[0065] 取