中藥組合物在制備抗結(jié)核菌藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥組合物的新用途，尤其涉及中藥組合物在制備抗結(jié)核菌藥物中的 應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO)估計(jì)，目前全球受結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB)感染的人口占世界人口的三分之一，其中5~10%的感染者成為結(jié)核 病患者。我國(guó)每年出現(xiàn)活動(dòng)性肺結(jié)核病人130萬(wàn)例，其中傳染性肺結(jié)核約60萬(wàn)例，其中傳 染性肺結(jié)核約60萬(wàn)例，是全球結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一。自抗結(jié)核藥物相繼問世，使結(jié)核病 的治療起到劃時(shí)代的變化。然而由于結(jié)核病患者的治療管理尚不十分規(guī)范，不規(guī)則化療，濫 用抗結(jié)核藥物，使結(jié)核病耐藥情況日益嚴(yán)重，且耐藥性的變化更趨向于多種藥物同時(shí)耐藥， 這給結(jié)核病的防治工作造成極大困難。因此尋找新的抗結(jié)核藥物，尤其是抗多藥耐藥性的 抗結(jié)核藥物對(duì)保護(hù)人民身體健康，具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供了中藥組合物在制備抗結(jié)核菌藥物中的應(yīng)用。
[0004] -種中藥組合物在制備抗結(jié)核菌藥物中的應(yīng)用，所述中藥組合物由如下重量份數(shù) 的原料制備得到：龍牙草根18份、雞腎參15份、通?；?0份、潺槁樹12份、聚花草20份。
[0005] 所述中藥組合物的制備方法為：取上述中藥，加水煎煮2次，第一次加水量為藥材 重量的10倍量，煎煮2小時(shí)，第二次加水量為藥材重量的8倍量，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濃 縮，干燥，粉碎得中藥組合物顆粒。
[0006] 所述中藥組合物的制備方法中濃縮條件為：0. 07MPa、60-70°C下減壓濃縮至65°C 時(shí)相對(duì)密度為1. 30。噴霧干燥條件為：進(jìn)風(fēng)溫度為120°C，出風(fēng)溫度為80°C，物料溫度為 90°C，霧化壓力為0.4兆帕，噴霧速度為lOml/s。
[0007] 龍牙草根為薔薇科植物龍芽草的根。秋后采收，洗凈，除去蘆頭。味辛澀，溫，無毒。 治赤白痢疾，婦女經(jīng)閉，腫毒，驅(qū)絳蟲。
[0008] 雞腎參為蘭科玉鳳花屬植物雞腎參Habenaria delavayi Finet，以塊根入藥。秋 季采集，洗凈，鮮用或曬干。補(bǔ)腎益氣。用于腎虛腰痛，腎炎，疝氣，神經(jīng)功能癥。
[0009] 通?；?，拉丁名為Abelia engleriana(Graebn. )Rehd.，六道木屬，科中文名：忍冬 科，根：理氣止痛，清熱燥濕。用于牙痛，高熱，火眼。果實(shí)或花：祛風(fēng)濕，解熱毒。用于風(fēng)濕 筋骨疼痛，外用于痛瘡紅腫。本發(fā)明以根入藥。
[0010] 渥槁樹為樟科木姜子屬植物渥槁樹Litsea glutinosa (Lour. )C. B. Rob.，以根、 皮、葉入藥。夏秋采收，根洗凈切片曬干；葉、皮多鮮用。清濕熱，消腫毒，止血，止痛。根：內(nèi) 服治腹瀉，跌打損傷，腮腺炎，糖尿病。皮、葉：外用治腮腺炎，瘡癤癰腫，乳腺炎初起，跌打損 傷，外傷出血。本發(fā)明采用根入藥。
[0011] 聚花草，拉丁名為Floscopa scandens Lour.，為鴨跖草科植物聚花草的全草。產(chǎn) 華南，浙江，江西，福建，臺(tái)灣，湖南，云南，四川，西藏，亞洲熱帶，大洋州熱帶。全草：清熱解 毒，利水消腫，消炎，活血。用于瘡癤腫毒，淋巴結(jié)腫大，水腫，急性腎炎，內(nèi)傷，目赤腫痛。
[0012] 本發(fā)明提供了一種可用于抗結(jié)核病治療的中藥組合物，從而擴(kuò)大了抗結(jié)核菌藥物 的種類；針對(duì)目前結(jié)核病發(fā)病率高、結(jié)核桿菌多重耐藥菌株及人體免疫缺陷病毒雙重感染 的出現(xiàn)，使結(jié)核病發(fā)病率和死亡率呈上升趨勢(shì)的現(xiàn)狀，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)中藥組合物具有抗結(jié)核 菌和耐藥性結(jié)核菌活性的特點(diǎn)，可用于抗結(jié)核藥物的制備，具有非常廣闊的應(yīng)用前景；本 發(fā)明涉及的中藥組合物在制備治療抗結(jié)核菌藥物中的用途屬于首次公開，由于中藥成分復(fù) 雜，而且其對(duì)于結(jié)核菌抑制活性強(qiáng)得意想不到，不存在由其他中藥給出任何啟示的可能，具 備突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)，同時(shí)用于結(jié)核菌感染的防治顯然具有顯著的進(jìn)步。發(fā)明人先用卡介 苗做應(yīng)試菌株，采用紙片擴(kuò)散法對(duì)中藥組合物的抗結(jié)核菌活性進(jìn)行初步試驗(yàn)，根據(jù)初步試 驗(yàn)的結(jié)果，本發(fā)明再用固體培養(yǎng)基稀釋法測(cè)定了該化合物對(duì)卡介苗、結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株 H37Rv株和耐多藥結(jié)核分枝桿菌（MDR MTB)三種結(jié)核菌的最小抑菌濃度，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)中 藥組合物具有很強(qiáng)的抗結(jié)核菌和抗耐藥性結(jié)核菌活性，可作為治療結(jié)核菌感染疾病的先導(dǎo) 化合物，也可用于制備治療結(jié)核病藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
[0014] 實(shí)施例1 :取龍牙草根18份、雞腎參15份、通梗花20份、潺槁樹12份、聚花草 20份，加水煎煮2次，第一次加水量為藥材重量的10倍量，煎煮2小時(shí)，第二次加水量為 藥材重量的8倍量，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濃縮，干燥，粉碎得中藥組合物顆粒，濃縮條件 為：0. 07MPa、60-70°C下減壓濃縮至65°C時(shí)相對(duì)密度為1. 30。噴霧干燥條件為：進(jìn)風(fēng)溫度 為120°C，出風(fēng)溫度為80°C，物料溫度為90°C，霧化壓力為0. 4兆帕，噴霧速度為lOml/s。
[0015] 實(shí)施例2 :固體培養(yǎng)基稀釋法測(cè)定中藥組合物抗卡介苗（BCG)絕對(duì)濃度
[0016] 1、試驗(yàn)藥品：按照上述實(shí)施例1的方法制備試驗(yàn)藥品。
[0017] 2、方法：從斜面上刮取卡介苗培養(yǎng)物，加入到3ml Middlebrook7H9肉湯培養(yǎng) 基中，加入少量玻璃珠，旋緊試管蓋，于漩渦振蕩器上劇烈振動(dòng)研磨，與標(biāo)準(zhǔn)麥?zhǔn)媳葷峁?(MacFarlandNo. 1)比池，即配成lmg/ml的卡介苗（BCG)菌懸液。將中藥組合物用DMSO配 成高濃度的原液，用含5%的吐溫-80無菌超純水稀釋原液至所需濃度，將稀釋好的中藥組 合物按所需劑量加入到4ml Middlebr〇〇k7Hll瓊脂培養(yǎng)基（該培養(yǎng)基已經(jīng)121°C高壓蒸 汽滅菌15分鐘、冷卻至50~55°C )，混勻，制成含中藥組合物，濃度分別為6. Og生藥量/ ml，4. Og生藥量/ml，3. Og生藥量/ml，2. Og生藥量/ml，I. 5g生藥量/ml，1.0 g生藥量/ml， 0. 75g生藥量/ml，0. 5g生藥量/ml等濃度的斜面培養(yǎng)基。
[0018] 將濃度為lmg/ml的卡介苗（BCG)菌懸液用接種環(huán)蘸取數(shù)環(huán)，分別接種于含中藥組 合物系列濃度的培養(yǎng)基和空白對(duì)照培養(yǎng)基斜面上，置于37°C培養(yǎng)4~8周，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果， 結(jié)果如表1所示。
[0019] 本實(shí)施例中所用Middlebrook7H9肉湯培養(yǎng)基和Middlebrook7Hll瓊脂培養(yǎng)基為 本領(lǐng)域技術(shù)人員進(jìn)行結(jié)核菌培養(yǎng)時(shí)的常用培養(yǎng)基，其配方采用常規(guī)配方即可。
[0020] 實(shí)驗(yàn)例2固體培養(yǎng)基稀釋法測(cè)定中藥組合物抗結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株H37Rv株絕對(duì) 濃度
[0021] 1、試驗(yàn)藥品：按照上述實(shí)施例1的方法制備試驗(yàn)藥品。
[0022] 2、方法：從斜面上刮取結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株H37Rv株培養(yǎng)物，加入到 3mlMiddlebr 〇〇k7H9肉湯培養(yǎng)基中，加入少量玻璃珠，旋緊試管蓋，于漩渦振蕩器上劇烈振 動(dòng)研磨，與標(biāo)準(zhǔn)麥?zhǔn)媳瘸毓埽∕acFarland No. 1)比池，即配成lmg/ml的H37Rv株菌懸液。
[0023] 將中藥組合物分別用DMSO配成高濃度的原液，用含5%的吐溫-80無菌超純水稀 釋原液至所需濃度，將稀釋好的中藥組合物按所需劑量加入到4ml Middlebrook7Hll瓊脂 培養(yǎng)基（該培養(yǎng)基已經(jīng)121 °C高壓蒸汽滅菌15分鐘、冷卻至50~55°C )，混勻，制成含中藥 組合物，濃度分別為6. Og生藥量/ml，4. Og生藥量/ml，3. Og生藥量/ml，2. Og生藥量/ml， I. 5g生藥量/ml，1.0 g生藥量/ml，0. 75g生藥量/ml，0. 5g生藥量/ml等濃度的斜面培養(yǎng) 基。
[0024] 將濃度為lmg/ml的H37Rv株菌懸液用接種環(huán)蘸取數(shù)環(huán)，分別接種于含中藥組合物 系列濃度的培養(yǎng)基和空白對(duì)照培養(yǎng)基斜面上，置于37°C培養(yǎng)4~8周，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)果 如表1所示。
[0025] 實(shí)驗(yàn)例3固體培養(yǎng)基稀釋法測(cè)定中藥組合物抗結(jié)核分支桿菌臨床分離耐ISRE MTB株絕對(duì)濃度
[0026] 1、試驗(yàn)藥品：按照上述實(shí)施例1的方法制備試驗(yàn)藥品。
[0027] 2、方法：從斜面上刮取結(jié)核分枝桿菌臨床分離耐ISRE MTB株（耐異煙肼、鏈霉素、 利福平、乙胺丁醇結(jié)核分枝桿菌臨床分離柱）培養(yǎng)物，加入到3ml Middlebrook7H9肉湯培 養(yǎng)基中，加入少量玻璃珠，旋緊試管蓋，于漩渦振蕩器上劇烈振動(dòng)研磨，與標(biāo)準(zhǔn)麥?zhǔn)媳葷峁?(MacFarland No. 1)比池，即配成lmg/ml的菌懸液。
[0028] 將中藥組合物分別用DMSO配成高濃度的原液，用含5%的吐溫-80無菌超純水稀 釋原液至所需濃度，將稀釋好的中藥組合物按所需劑量加入到4ml Middlebrook7Hll瓊脂 培養(yǎng)基（該培養(yǎng)基已經(jīng)121 °C高壓蒸汽滅菌15分鐘、冷卻至50~55°C )，混勻，制成含中藥 組合物，濃度分別為6. Og生藥量/ml，4. Og生藥量/ml，3. Og生藥量/ml，2. Og生藥量/ml， I. 5g生藥量/ml，1.0 g生藥量/ml，0. 75g生藥量/ml，0. 5g生藥量/ml等濃度的斜面培養(yǎng) 基。
[0029] 將濃度為lmg/ml的結(jié)核分枝桿菌臨床分離耐ISRE MTB株菌懸液用接種環(huán)蘸取數(shù) 環(huán)，分別接種于含中藥組合物系列濃度的培養(yǎng)基和空白對(duì)照培養(yǎng)基斜面上，置于37°C培養(yǎng) 4~8周，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)果如表1所示。
[0030] 表1固體培養(yǎng)基稀釋法測(cè)定中藥組合物抗結(jié)核菌絕對(duì)濃度結(jié)果
[0031]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種中藥組合物在抗結(jié)核菌藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合物由如下重量 份數(shù)的原料制備得到：龍牙草根18份、雞腎參15份、通?；?0份、潺槁樹12份、聚花草20 份。
2. 如權(quán)利要求1所述中藥組合物在抗結(jié)核菌藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合 物的制備方法為：取上述中藥，加水煎煮2次，第一次加水量為藥材重量的10倍量，煎煮2 小時(shí)，第二次加水量為藥材重量的8倍量，煎煮1小時(shí)，合并煎液，濃縮，干燥，粉碎得中藥組 合物顆粒。
3. 如權(quán)利要求1所述中藥組合物在抗結(jié)核菌藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述中藥組合 物的制備方法中濃縮條件為：〇. 07MPa、60-70°C下減壓濃縮至65°C時(shí)相對(duì)密度為1. 30。噴 霧干燥條件為：進(jìn)風(fēng)溫度為120 °C，出風(fēng)溫度為80 °C，物料溫度為90 °C，霧化壓力為0. 4兆 帕，噴霧速度為lOml/s。
【專利摘要】本發(fā)明公開了中藥組合物在制備抗結(jié)核菌藥物中的應(yīng)用，中藥組合物由龍牙草根18份、雞腎參15份、通梗花20份、潺槁樹12份、聚花草20份制備而成，本發(fā)明具有顯著抑制結(jié)核菌的活性，同時(shí)用于結(jié)核菌感染的防治顯然具有顯著的進(jìn)步。
【IPC分類】A61P31-06, A61K36-898
【公開號(hào)】CN104815175
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510202566
【發(fā)明人】田麗華
【申請(qǐng)人】淄博齊鼎立專利信息咨詢有限公司
【公開日】2015年8月5日
【申請(qǐng)日】2015年4月24日