稠李提取物在制備抗腫瘤藥物及保健品中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明主要涉及稠李提取物在制備抗腫瘤藥物及保健品中的應(yīng)用，主要對稠李提 取物的抗腫瘤活性及應(yīng)用進行申請保護；屬于中藥提取物的新生物活性的醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 腫瘤是危害人類健康最嚴重的一類常見病、多發(fā)病，其發(fā)病率高，死亡率也高。目 前大多數(shù)的腫瘤治療方法仍然是傳統(tǒng)的治療方法，比如化療放療，手術(shù)和綜合治療，而中藥 尤其是藥食兩用的中藥作為輔助治療，可減輕放、化療的不良反應(yīng)，同時在遠期療效方面， 可提高腫瘤患者的生存質(zhì)量，減少復發(fā)、轉(zhuǎn)移，從而提高生存率(鄭京勝，等.藥食兩用中藥 抗癌作用及其與歸經(jīng)的相關(guān)性研宄，海峽藥學，2015，27，106-108)。
[0003] 稠李屬植物在我國種類繁多，為多年生喬木，在我國廣泛種植，因耐寒耐陰在東北 地區(qū)成長密集。主要包括山桃稠李（/?^^ ?aacAii)，星毛稠李toergeriafla)，稠 李racefflosa)，褐毛稠李以及紫葉稠李Firgifliaaa) 等。因該屬植物整體美觀，在我國是一種重要的觀賞物種。其中山桃稠李，稠李和紫葉稠李 為薔薇科李屬植物，在東北分布較廣。
[0004] 研宄表明：稠李屬植物的葉子可以用于制作產(chǎn)品(稠李葉茶及其制備方法，專 利，ZL. 200610010198. 7)，花因含有大量的苯甲醛可以做防腐用料(趙秋雁，稠李 Linn.揮發(fā)油化學組成分析，《植物研宄》，2003)，此外，稠李含有的豐富黃酮類成分 (何映霞，紫葉稠李葉片中黃酮的提取工藝優(yōu)化《北方園藝》，2013年）和花色苷類成分(辛 越，稠李屬三種果實花色苷抗氧化活性研宄，東北林業(yè)大學碩士論文，2013年)。上述文獻報 道了稠李的抗氧化和對H印G2的細胞毒活性(冷梅，紫葉稠李果實花色苷的抗氧化活性，食 品科學，2013年；辛越，稠李屬三種果實花色苷對H印G2細胞的增殖抑制作用比較，食品工 業(yè)科技，2013年)。
[0005] 本申請人已經(jīng)對稠李提取物的制備方法進行專利公開"一種稠李提取物的制備方 法及在降血脂藥品及保健品中的應(yīng)用"（CN : 104367659A)，本發(fā)明是在已公開的專利基礎(chǔ)上 而新發(fā)現(xiàn)該提取物的抗腫瘤活性，屬于首次報道稠李提取物的抗腫瘤活性及在制備藥物及 保健品中的應(yīng)用?？傊景l(fā)明創(chuàng)新性的提出了稠李提取物在制備抗腫瘤藥物及保健品中 的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明提供了稠李提取物在抗腫瘤藥物或保健品及食品添加劑的應(yīng)用。
[0007] 根據(jù)發(fā)明人已經(jīng)公開的"一種稠李提取物的制備方法及在降血脂藥品及保健品 中的應(yīng)用"（CN :104367659A)專利申請，稠李提取物的制備方法具有如下特征：稠李提取物 通過如下步驟獲得：干燥的稠李樣品，粉碎過20目篩，經(jīng)適當?shù)娜軇┖吞崛》椒ǎ玫教崛?液，減壓濃縮至干；用水混懸至無沉淀，上大孔樹脂吸附柱色譜，依次用水和70%以上的乙 醇進行洗脫，收集醇洗脫部分，即得稠李提取物。
[0008] 前述的稠李，選自山桃稠李?aach'i)，稠李racefflosa)或紫葉稠 李rirgifliafla)的任何一種；提取部位選自其果實，莖葉或花等任一部位，其優(yōu)選果 實。提取方法選自浸泡提取、回流提取、超聲提取、逆流提取、超臨界萃取等的任何一種；提 取溶劑選自水，甲醇，乙醇任何一種及不同比例混合物；用于樣品后續(xù)純化處理的大孔吸附 柱色譜，包括藥學上能夠接受的，可以用于分離的多種常規(guī)樹脂，選自D101，NKA12或ADS等 的任何一種。
[0009] 前述的稠李提取物，主要包含黃酮，花色苷等抗氧化成分。
[0010] 前述的稠李提取物，具有抗腫瘤作用，可以用于藥物、保健品及食品添加劑中的應(yīng) 用。
[0011] 當本發(fā)明用于上述用途時，其口服或胃腸外給藥，均是安全的，在口服情況下，其 可以以任何常規(guī)的形式給藥，如片劑，膠囊劑，粉針劑，注射劑，丸劑，軟膠囊，顆粒劑和貼劑 等。
[0012] 本發(fā)明制備具有抗腫瘤作用的稠李提取物可以與藥用載體或食品載體混合，這 里使用的固體或液體的賦形劑在本領(lǐng)域是眾所周知的，下面舉幾個例子，散劑是內(nèi)服的粉 末劑，它的賦形劑有乳糖，淀粉，糊精，碳酸鈣，合成或天然硫酸鋁，氧化鎂，硬脂酸鎂，碳酸 氫鈉，干燥酵母等；溶液劑的賦形劑有水，甘油，1，2-丙二醇，單糖漿，乙醇，乙二醇，聚乙二 醇，山梨糖醇等；軟膏劑的賦形劑可以使用脂油，含水羊毛脂、凡士林、甘油、蜂蠟、木蠟、液 體石賭等組合成的疏水劑或親水劑。
[0013] 本發(fā)明可以通過下面的實驗例進一步說明。
[0014] 實驗例稠李提取物對H22移植瘤小鼠的抑瘤作用 1. 1實驗材料、試劑及儀器 前述的稠李提取物，來源為紫葉稠李的果實。
[0015] ICR小鼠，雄性，體重22-25g，[SPF級，動物合格證號：SCXK(吉）2011-0004]雄 性，購自長春億斯實驗動物技術(shù)有限公司。
[0016] H22肝癌細胞株(購自中國科學院上海細胞所）；注射用環(huán)磷酰胺(購于上海華聯(lián)制 藥有限公司）；小鼠白細胞介素-2(IL_2)、腫瘤壞死因子-a (TNF-a)ELISA試劑盒，美 國R&D公司，國內(nèi)分裝；蛋白質(zhì)測試盒(購于北京北化康泰臨床試劑有限公司）；超凈工作臺 (BEKMAN GS-15R)，電子分析天平（Sartorious公司），酶標儀（Bio-Tek公司）。
[0017] 實驗方法 I. 2. I H22皮下移植瘤模型制備 常規(guī)方法復蘇H22小鼠肝癌細胞，取0. 2 mL細胞懸液注射到雄性ICR小鼠腹腔內(nèi)，連 續(xù)傳兩代。于無菌條件下抽取H22腹水瘤小鼠的腹水，用無菌生理鹽水稀釋后，1000 r/ min 離心5 min，洗滌細胞2次，調(diào)整細胞密度為I X IO7個/mL，取0. 2 mL瘤細胞懸液接種到雄 性ICR小鼠的右腋窩皮下。
[0018] 動物分組及處理 ICR小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，接種后第2天，小鼠隨機分成模型組，稠李提取物高、低劑量 (400,200 mg/kg)組和環(huán)磷酰胺（CTX，30 mg/kg)陽性對照組，每組10只。采用灌胃方式給 藥，每日1次，模型組和空白對照組以等量的生理鹽水灌胃。各組動物給藥連續(xù)給藥15 d， 末次給藥后禁食不禁水16 h后斷頸處死，收集血液及組織。
[0019] 小鼠H22肝癌皮下移植瘤的抑瘤率、免疫器官指數(shù)以及血清相關(guān)指標的測定 分別稱取小鼠體質(zhì)量、瘤質(zhì)量，計算抑瘤率。并稱取肝臟、胸腺、脾臟質(zhì)量，計算肝臟指 數(shù)、胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。眼球取血后頸椎脫白處死，完整剝離瘤塊，分離血清，采用酶標儀 測定TNF-α和IL-2等指標。
[0020] 抑瘤率=(模型組瘤質(zhì)量一藥物組瘤質(zhì)量）/模型組瘤質(zhì)量 胸腺(脾臟、肝臟）指數(shù)=胸腺(脾臟、肝臟）質(zhì)量/體質(zhì)量。
[0021] 統(tǒng)計學分析 數(shù)據(jù)以X ±s表示，組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，以SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行 統(tǒng)計學處理，代0. 01或代0. 05具有統(tǒng)計學意義。
[0022] 實驗結(jié)果 1. 3. 1對H22移植瘤小鼠腫瘤生長的影響 給藥2周后，與模型組比較，稠李提取物低、高劑量兩個劑量組（200和400mg/kg)小 鼠肝癌H22移植瘤的生長明顯受到抑制，荷瘤小鼠瘤質(zhì)量顯著減輕（產(chǎn)< 0.05);陽性藥環(huán) 磷酰胺CTX組，稠李提取物200mg/kg和400mg/kg兩個給藥組的抑瘤率為分別為57. 14%， 26. 78%，和 41. 07%，結(jié)果見表 1。
[0023] 表1稠李提取物對肝癌H22移植瘤小鼠腫瘤生長的影響（
【主權(quán)項】
1. 稠李提取物在制備抗腫瘤藥物及保健品中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述的抗腫瘤是指抑制移植瘤小鼠的腫瘤 增長及誘導凋亡。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于移植瘤為H22肝腹水瘤。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物或保健品可以是片劑，膠囊劑，粉 針劑，注射劑，丸劑，軟膠囊，顆粒劑和貼劑等多種劑型。
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，主要公開了稠李提取物在制備抗腫瘤藥物和保健品中的新用途。經(jīng)實驗研究表明：該稠李提取物對H22移植瘤小鼠具有明顯抑瘤作用，能夠顯著提高腫瘤小鼠機體免疫力，延長小鼠的生存時間，誘導腫瘤細胞凋亡等。因此，可以使用該提取物制備抗腫瘤藥物、保健品、食品添加劑或復方制劑等。其藥物或保健品可以是現(xiàn)有的任何劑型，如片劑，膠囊劑，粉針劑，注射劑，丸劑，軟膠囊，顆粒劑和貼劑等。
【IPC分類】A61P35-00, A61K36-736, A23L1-29
【公開號】CN104825581
【申請?zhí)枴緾N201510171507
【發(fā)明人】李偉, 王梓, 毛欣欣, 張晶, 李慧萍, 李新殿, 王英平
【申請人】吉林農(nóng)業(yè)大學
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年4月13日