大切刀5和細(xì)端小切刀2材質(zhì)均為不銹鋼；保護(hù)罩6材質(zhì)為醫(yī)用級(jí)PMMA塑料或高密度聚四氟乙烯塑料；固定帶4材質(zhì)為醫(yī)用硅橡膠。
[0110]本發(fā)明在使用時(shí)先手持漏斗狀殼體1，卸掉所述粗端大切刀5上的保護(hù)罩6，下壓粗端大切刀5裁切胎盤邊緣羊膜交界處，去除胎盤之外所有羊膜，裝好粗端保護(hù)罩6。然后用固定帶3固定細(xì)端，將臍帶從細(xì)端小切刀2穿入，從粗端大切刀5穿出，手持粗端保護(hù)罩6及部分漏斗狀殼體1，下壓旋轉(zhuǎn)漏斗狀殼體I對(duì)臍帶周圍羊膜環(huán)切，完成后卸除固定帶3，再手持粗端保護(hù)罩6及部分殼體I，將細(xì)端小切刀2對(duì)準(zhǔn)羊膜環(huán)切切口下壓漏斗狀殼體1，使細(xì)端小切刀2呈中心輻射狀散開(kāi)，再旋轉(zhuǎn)漏斗狀殼體I即可利用輻射狀細(xì)端小切刀2將胎盤上的羊膜與胎盤分離，得到胎盤之上羊膜。
[0111]采用本發(fā)明可大大縮短剝離取材胎盤之上羊膜的操作時(shí)間，平均I?3分鐘內(nèi)即可完成操作。相比之前在操作人員經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)時(shí)間培訓(xùn)及實(shí)際操作的條件下，僅用手工操作將胎盤之上羊膜從胎盤完整剝離，至少需要20?30分鐘；使用本發(fā)明可大大提高操作效率，有效縮短羊膜取材時(shí)間。
[0112]如圖2所示，所述沖壓羊膜裁剪裝置包括平板載體7和裁刀8，若干所述裁刀8排列固定在所述平板載體7 —側(cè)表面上。所述平板載體7的邊長(zhǎng)尺寸為20?30cm，厚度為2?10mm。相鄰所述裁刀8之間的最小間距為0.1?0.5mm。所述裁刀8的邊長(zhǎng)為3?10mm，厚度為0.1?0.5mm。所述平板載體7和裁刀8材質(zhì)均為不銹鋼。優(yōu)選的，所述平板載體7的邊長(zhǎng)尺寸為23?28cm，厚度為4?6mm。相鄰所述裁刀8之間的最小間距為0.2?0.4mm。所述裁刀8的邊長(zhǎng)為25?45mm，厚度為0.2?0.4mm。最優(yōu)的，所述平板載體7的邊長(zhǎng)尺寸為25cm，厚度為5mm。相鄰所述裁刀8之間的最小間距為0.3mm。所述裁刀8的邊長(zhǎng)為30mm，厚度為0.3mm。上述尺寸在裁切時(shí)最節(jié)省，且能符合手術(shù)的各種要求。所述裁刀的刀口形狀可為正方形、三角形、圓形、梯形或矩形。使用本裝置時(shí)，先將羊膜及濾紙平鋪于低溫操作臺(tái)，然后手持平板7將裁刀8面向羊膜，迅速向下沖壓即可將羊膜裁切為所需規(guī)格及形狀。
[0113]本發(fā)明的使用方法是通過(guò)多個(gè)均勻排列的小型裁刀沖壓裁切羊膜，可迅速將羊膜批量裁切為所需規(guī)格及大小，大大減少羊膜裁切所需操作時(shí)間，在I?3分鐘內(nèi)將一張羊膜裁切為臨床適用規(guī)格及大小的羊膜，操作快速，裁切得到羊膜也適用于臨床手術(shù)需求，滿足產(chǎn)業(yè)化規(guī)?；a(chǎn)的需求。
[0114]以下針對(duì)上述實(shí)施例，結(jié)合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和圖片資料進(jìn)行分析:
[0115]圖3是本發(fā)明制備得到的生物膜與新鮮羊膜主要成分定量檢測(cè)對(duì)比結(jié)果圖。圖中COL I為I型膠原，COL III為III型膠原，COL IV為IV型膠原，bFGF為堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子，EGF為表皮生長(zhǎng)因子，TIMP為金屬蛋白酶組織抑制因子，HGF為肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子，KGF為角質(zhì)生長(zhǎng)因子。BA代表本發(fā)明制備的生物膜，F(xiàn)AM代表新鮮羊膜。通過(guò)觀察圖片顯示，可以看出生物膜所包含的各類天然膠原及因子成分含量與天然新鮮羊膜無(wú)明顯差異。
[0116]圖4是本發(fā)明制備得到的生物膜體外細(xì)胞毒性檢測(cè)結(jié)果圖，圖中BA代表本發(fā)明制備的生物膜，CK代表空白對(duì)照組，PE代表高密度聚乙烯陰性對(duì)照組，DMSO代表二乙烯基砜陽(yáng)性對(duì)照組?？v坐標(biāo)百分率表示L929細(xì)胞的體外培養(yǎng)增殖率。通過(guò)觀察圖片顯示，可以看出生物膜與空白對(duì)照組及陰性對(duì)照組的體外細(xì)胞增殖率無(wú)顯著差異，均在100%左右。而陽(yáng)性對(duì)照組細(xì)胞增殖率低于20%，表明生物膜具有良好的體外細(xì)胞相容性。
[0117]圖5是本發(fā)明制備得到的生物膜體外淋巴細(xì)胞增殖檢測(cè)結(jié)果圖。圖中BA代表本發(fā)明制備的生物膜，CK代表空白對(duì)照組，F(xiàn)AM代表新鮮羊膜。縱坐標(biāo)百分率表示人淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)增殖率。通過(guò)圖片顯示可以看出生物膜以及新鮮羊膜組與空白對(duì)照組相比，均未引起人淋巴細(xì)胞體外異常增殖或凋亡，表明生物膜具有良好的免疫原性。
[0118]圖6是本發(fā)明制備得到的生物膜應(yīng)用于犬青光眼治療的眼壓監(jiān)測(cè)結(jié)果圖。圖中檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)為檢測(cè)犬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物眼壓的時(shí)間點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)組為采用本發(fā)明制備的生物膜作為青光眼小梁切除術(shù)后填充支架的犬動(dòng)物組，健康組則為無(wú)任何手術(shù)操作的犬動(dòng)物組。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù)均表示為均值土偏差，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)每個(gè)實(shí)驗(yàn)組均檢測(cè)8只犬眼壓，眼壓數(shù)據(jù)的單位為mmHgo通過(guò)圖片顯示可以看出生物膜實(shí)驗(yàn)組在術(shù)后短期即表現(xiàn)出良好的治療效果，實(shí)驗(yàn)組犬眼壓得到大幅降低，隨著愈合時(shí)間延長(zhǎng)，生物膜也能夠較好維持引流作用，未發(fā)生后期瘢痕生成堵塞引流通道的現(xiàn)象，犬眼壓保持良好，與健康組犬眼壓無(wú)顯著性差異。
[0119]以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的較佳具體實(shí)施例，應(yīng)當(dāng)理解，本領(lǐng)域的普通技術(shù)無(wú)需創(chuàng)造性勞動(dòng)就可以根據(jù)本發(fā)明的構(gòu)思做出諸多修改和變化。因此，凡本技術(shù)領(lǐng)域中技術(shù)人員依本發(fā)明構(gòu)思在現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)上通過(guò)邏輯分析、推理或者根據(jù)有限的實(shí)驗(yàn)可以得到的技術(shù)方案，均應(yīng)該在由本權(quán)利要求書(shū)所確定的保護(hù)范圍之中。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用于青光眼治療的生物膜，其特征在于，由羊膜浸泡于質(zhì)量百分比為I?5%的高分子多糖水溶液進(jìn)行增厚后，然后在在-16?-4°C下輻照滅菌制成，其厚度為0.2?0.5_。
2.一種用于青光眼治療的生物膜的制備方法，其特征在于，其步驟包括: (1)、取材 在I?3分鐘內(nèi)將臍帶周圍附著于胎盤之上的羊膜取下，并在2?10°C冷藏，I小時(shí)內(nèi)運(yùn)輸至潔凈車間進(jìn)行后續(xù)處理； (2)、沖壓裁剪 將羊膜上皮面向上迅速鋪展于硝酸纖維素濾膜上，在I?3分鐘內(nèi)將羊膜裁剪； (3)復(fù)合增厚 將羊膜膜片浸泡于質(zhì)量百分比濃度為I?5%的醫(yī)藥級(jí)別高分子多糖水溶液I?3分鐘，使羊膜膜片厚度增厚至0.2?0.5_，然后置于含有醫(yī)用級(jí)甘油的包裝袋中，封口密封，-16?-4°C下冷藏并立即送輻照滅菌； (4)輻照滅菌 將增厚的羊膜膜片在-16?-4°C的低溫保護(hù)條件下，采用電離輻射滅菌處理。
3.按照權(quán)利要求2所述的一種用于青光眼治療的生物膜的制備方法，其特征在于，所述⑴步驟中所取羊膜厚度在0.1?0.2mm。
4.按照權(quán)利要求2所述的一種用于青光眼治療的生物膜的制備方法，其特征在于，所述(I)步驟中采用羊膜快速取材裝置進(jìn)行取材，所述羊膜快速取材裝置包括中空的漏斗狀殼體和粗端大切刀，所述漏斗狀殼體的粗端設(shè)置粗端大切刀；所述粗端大切刀上設(shè)置可拆卸的保護(hù)罩。
5.按照權(quán)利要求2所述的一種用于青光眼治療的生物膜的制備方法，其特征在于，所述(2)步驟中，羊膜裁剪采用沖壓裁剪裝置來(lái)進(jìn)行，所述沖壓裁剪裝置包括平板載體和裁刀，若干所述裁刀排列固定在所述平板載體一側(cè)表面上。
6.按照權(quán)利要求2所述的一種用于青光眼治療的生物膜的制備方法，其特征在于，所述醫(yī)藥級(jí)別高分子多糖為分子量100?150萬(wàn)的透明質(zhì)酸或羧甲基纖維素鈉中一種。
7.按照權(quán)利要求2所述的一種用于青光眼治療的生物膜的制備方法，其特征在于，所述電離輻射滅菌用伽馬射線輻照或是高能電子束輻照，劑量為20?30kGy ;輻照后立即將生物膜置于-90?-10 °C下冷藏保存。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種用于青光眼治療的生物膜及其制備方法。用于青光眼治療的生物膜，由羊膜浸泡于濃度為1～5％高分子多糖水溶液進(jìn)行增厚后，在-16～-4℃下輻照滅菌制成，其厚度為0.2～0.5mm。用于青光眼治療的生物膜的制備方法，是以臍帶周圍較厚羊膜為原料，經(jīng)快速取材、沖壓裁剪、復(fù)合增厚、輻照滅菌等步驟。本發(fā)明的有益技術(shù)效果是：(1)可有效保留羊膜各種天然活性成分，包括膠原、生長(zhǎng)因子、抗炎因子等；(2)具有與新鮮羊膜同等的生物活性；(3)極大地提高了臨床使用的安全性；(4)厚度及降解性能可完全滿足青光眼治療鞏膜瓣下填充的材料需求，生物膜可有效發(fā)揮術(shù)后早期預(yù)防黏連，后期預(yù)防瘢痕形成的治療功效。
【IPC分類】A61L27-54, A61L27-20, A61L27-36
【公開(kāi)號(hào)】CN104826166
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510227920
【發(fā)明人】張明昌, 劉博文, 王二浩, 劉艷麗, 何海娜, 葉偉初, 李翊翔, 林永亮, 謝麗君
【申請(qǐng)人】廣州優(yōu)適清生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2015年8月12日
【申請(qǐng)日】2015年5月6日