具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物的生產(chǎn)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種無(wú)患子提取物的生產(chǎn)方法，尤其涉及一種具有低刺激性異味的無(wú) 患子提取物的生產(chǎn)方法。
[0002] 本發(fā)明還涉及一種利用提取方法提取的無(wú)患子提取物作為化妝品原料或者清洗 劑組合物方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0003] 無(wú)患子主要種植在寺廟，用種子做成（念珠）。無(wú)患子樹作為天然表面活性劑，只 要用手揉搓就會(huì)產(chǎn)生泡沫，從而開始命名為Soapberry。無(wú)患子果實(shí)作為核果，圓并且底部 一邊有未發(fā)育成的（心皮），盤狀殘留，直徑2cm左右，10月份成熟并呈黃褐色。里面有1 個(gè)黑色種子，果皮中含有（saponin)只要用手揉搓就會(huì)有泡沫，以前是用作肥皂。
[0004] 無(wú)患子提取物向來(lái)用作天然表面活性劑，但它有一種異味且使用時(shí)對(duì)皮膚有刺激 性的缺點(diǎn)。特別是使用于眼周圍，會(huì)引發(fā)對(duì)眼黏膜的刺激。為了改善上述問(wèn)題，以前是通過(guò) 加活性炭和柱子的方法，但還是沒(méi)能克服這些缺點(diǎn)。
[0005] 韓國(guó)專利登記第10-1087734號(hào)是從無(wú)患子樹中精致阜苷的方法，無(wú)患子樹的二 氯甲烷分離物及含此分離物的毛發(fā)妝品原料組合物的相關(guān)專利。這些專利采用二氯甲烷分 離，但并沒(méi)有改善無(wú)患子特有的異味及緩和皮膚刺激性。
[0006] 因此，需要提供一種新的技術(shù)方案來(lái)解決上述問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物的生產(chǎn) 方法。
[0008] 本發(fā)明還需要解決的技術(shù)問(wèn)題是利用上述方法提取具有低刺激性異味的無(wú)患子 提取物在化妝品原料或清洗劑組合物方面的應(yīng)用。
[0009] 為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物的生產(chǎn)方法， 包括以下步驟： a) 、對(duì)無(wú)患子細(xì)切及粉碎，得無(wú)患子原料粉末，在無(wú)患子原料粉末中加入溶劑； b) 、加入溶劑后進(jìn)行常溫或加熱提取，在10-90°C下，3-20小時(shí)浸出提??； c) 、提取的無(wú)患子提取物進(jìn)行干燥，干燥溫度10-500°C，得粗提取物； d) 、所得的粗提物加水溶解后，再加入與粗提物溶解液等同量的有機(jī)溶劑分離，得分 離水； e) 、上述得到的分離水經(jīng)過(guò)濾及減壓濃縮得無(wú)患子提取物； 上述a步驟中的溶劑為乙醇及碳酸氫鈉的混合溶劑； 上述d步驟中的有機(jī)溶劑為氯仿、苯、二氯乙烷、二氯甲烷中的一種或多種。
[0010] a步驟中，無(wú)患子原料粉末與溶劑的質(zhì)量比為1:10-15,乙醇與碳酸氫鈉按質(zhì)量比 多少混合。 toon] 根據(jù)上述方法提取的具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物作為化妝品原料的應(yīng)用。
[0012] 根據(jù)上述方法提取的具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物作為清洗劑組合物的應(yīng) 用。
[0013] 上述提取物的特征是以組合物總重量含量約0. 01 - 50重量％。上述提取物的含 量在0. 01重量％以內(nèi)時(shí)，無(wú)法達(dá)到原先預(yù)想的改善了異味及緩和了低刺激性的效果。上述 有效成分提取物的含量超過(guò)總化妝品原料重量占比50 %時(shí)，可能發(fā)生化妝品原料的安全性 問(wèn)題。因此，在化妝品原料的外觀和使用效果上有不能充分發(fā)揮的擔(dān)憂。
[0014] 本發(fā)明的有益效果：將無(wú)患子細(xì)切及粉碎后加入乙醇、碳酸氫鈉，提取及干燥得粗 提物后用超純水溶解，用二氯甲烷分離，所得的分離水過(guò)濾及減壓濃縮得制的無(wú)患子提取 物可改善無(wú)患子特有的異味，緩和皮膚刺激性，解決了以前從未解決的緩和無(wú)患子提取物 皮膚刺激性的問(wèn)題，因改善了異味并緩和了刺激性，可適用于化妝品原料組合物或清洗劑 組合物。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 為了加深對(duì)本發(fā)明的理解，下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述，該實(shí)施例 僅用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的保護(hù)范圍的限定。
[0016] 比較例1:無(wú)患子：乙醇粗提物的生產(chǎn) 切細(xì)無(wú)患子果皮500g，加上80%乙醇1L，10小時(shí)常溫（10-25°C )放置后，將300目過(guò) 濾的濾液用減壓蒸發(fā)器減壓濃縮，得取干燥重量125g的無(wú)患子粗提物。
[0017] 實(shí)施例1:無(wú)患子：乙醇加上碳酸氫鈉粗提物的生產(chǎn) 切細(xì)無(wú)患子果皮500g，加上80%乙醇1L，加上碳酸氫鈉 IOg后，10小時(shí)常溫（10-25°c ) 放置后，將300目過(guò)濾的濾液用減壓蒸發(fā)器減壓濃縮，得取干燥重量IlOg的無(wú)患子粗提物。
[0018] 比較例2:無(wú)患子：乙醇粗提物的生產(chǎn) 切細(xì)無(wú)患子果皮500g，加上80%乙醇1L，在有冷卻凝結(jié)器的提取機(jī)上加熱3小時(shí)提取 后，將300目過(guò)濾的濾液用減壓蒸發(fā)器減壓濃縮，取得干燥重量100g的無(wú)患子粗提物。
[0019] 實(shí)施例2:無(wú)患子：乙醇加上碳酸氫鈉粗提物的生產(chǎn) 切細(xì)無(wú)患子果皮500g，加上80%乙醇1L，加上碳酸氫鈉 IOg后，在有冷卻凝結(jié)器的 提取機(jī)上加熱3小時(shí)提取后，將300目過(guò)濾的濾液用減壓蒸發(fā)器減壓濃縮，取得干燥重量 98g的無(wú)患子粗提物。
[0020] 比較例3:無(wú)患子：二氯甲烷分離提取物的生產(chǎn) 在比較例1中，無(wú)患子粗提物125g里加超純水0.5L溶解。在這個(gè)溶液里加同等量的 二氯甲烷（0.51)分離3次。把上述得取的二氯甲烷分離層用減壓蒸發(fā)器減壓濃縮，取得干 燥重量25g的無(wú)患子分離提取物。
[0021] 實(shí)施例3:無(wú)患子：二氯甲烷分離提取物的生產(chǎn) 實(shí)施例1中，在無(wú)患子粗提物IlOg里加超純水0. 5L溶解。在這個(gè)溶液里加同等量的 二氯甲烷（0.5L)分離3次。把上述得取的二氯甲烷分離層用減壓蒸發(fā)器減壓濃縮，得取干 燥重量27g的無(wú)患子分離提取物。
[0022] 比較例4:無(wú)患子：二氯甲烷分離提取物的生產(chǎn) 在比較例2中得取的無(wú)患子粗提物100g，加超純水0. 5L溶解。在這個(gè)溶液加同等量的 二氯甲烷（0.5L)分離3次。把上述得取的二氯甲烷分離層用減壓蒸發(fā)器減壓濃縮，得取干 燥重量17g的無(wú)患子分離提取物。
[0023] 實(shí)施例4:無(wú)患子：二氯甲烷分離提取物的生產(chǎn) 在實(shí)施例2中得取的無(wú)患子粗提物98g，加超純水0.5L溶解。在這個(gè)溶液加同等量的 二氯甲烷（0.5L)分離3次。把上述得取的二氯甲烷分離層用減壓蒸發(fā)器減壓濃縮，得取干 燥重量18g的無(wú)患子分離提取物。
[0024] 實(shí)驗(yàn)例1:細(xì)胞毒性的測(cè)量 對(duì)上述無(wú)患子提取物（比較例3-4，實(shí)施例3-4)測(cè)量了單層細(xì)胞培養(yǎng)里的細(xì)胞毒性。
[0025] [試驗(yàn)方法] MTT assay[參考文獻(xiàn)：Mossman T. (1983) Rapid colorimetric assay for cellular growth & survival: application to proliferation & cytotoxicity assays. Journal of Immunological Methods 65，55~63]是測(cè)量活細(xì)胞的數(shù)量，多用 于細(xì)胞增殖或毒性的試驗(yàn)方法，稱為標(biāo)準(zhǔn)比色分析法（standard colorimetric assay)。 是利用了活細(xì)胞的線粒體內(nèi)黃色水溶性屬性的MTT在（3_[4, 5- dimethylthiazole-2-y 1]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide, Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide)脫氫 酶作用下（succinate dehydrogenase 或者也口H mitochondrial dehydrogenase)還原 成非水溶性藍(lán)色甲（formazan)衍生物的還原原理。生成的甲衍生物加溶劑（一般使用 DMSCKdimethylsulfoxide)溶解后檢測(cè)吸光度。生成的甲衍生物溶解于DMSO并測(cè)量吸光 度（Optical Density)。測(cè)量的吸光度直接表現(xiàn)活細(xì)胞的數(shù)量和相互關(guān)系。更具體的說(shuō)，把 human fibroblasts cell line (ATCC, CRL-2310)以 IxlO cells/ml 的濃度接種于24well plate。培養(yǎng)基使用了含牛血清 10% 的 DMEM (Dubelcco'S Modified Eagle Medium, BRL, USA) 〇 接種 24 后，用含牛血清 2% 的 DMEM (Dubelcco'S Modified Eagle Medium, BRL，USA)交替，加上試驗(yàn)樣品50 μ g/ml的濃度，加 IOyL后，在37°C，5% CO2孵化器培 養(yǎng)了 3天。培養(yǎng)結(jié)束后，移除相等量液后，重新各加了 PBS(phosphate buffered saline) 200 μ L，洗滌后，把MTT溶液每well各加 LOml后，4小時(shí)后移除MTT，把DMSO (Dimethy I Sulfoxide)每 well 各加 1.0 ml 后，在 37°C解化器一天后，利用 ELISA reader (sunrise, Austria)在wave length 570nm測(cè)量了吸光度。其結(jié)果為表1。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物的生產(chǎn)方法，其特征在于，包括以下步驟： a)、對(duì)無(wú)患子細(xì)切及粉碎，得無(wú)患子原料粉末，在無(wú)患子原料粉末中加入溶劑； b) 、加入溶劑后進(jìn)行常溫或加熱提取，在10-90°C下，3-20小時(shí)浸出提?。? c) 、提取的無(wú)患子提取物進(jìn)行干燥，干燥溫度10-500°C，得粗提取物； d) 、所得的粗提物加水溶解后，再加入與粗提物溶解液等同量的有機(jī)溶劑分離，得分 離水； e) 、上述得到的分離水經(jīng)過(guò)濾及減壓濃縮得無(wú)患子提取物； 上述a步驟中的溶劑為乙醇及碳酸氫鈉的混合溶劑； 上述d步驟中的有機(jī)溶劑為氯仿、苯、二氯乙烷、二氯甲烷中的一種或多種。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物的生產(chǎn)方法，其特征在 于：a步驟中，無(wú)患子原料粉末與溶劑的質(zhì)量比為1:10-15,乙醇與碳酸氫鈉按質(zhì)量比多少 混合。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述方法提取的具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物作為 化妝品原料的應(yīng)用。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述方法提取的具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物作為 清洗劑組合物的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了具有低刺激性異味的無(wú)患子提取物的生產(chǎn)方法，本發(fā)明是關(guān)于無(wú)患子細(xì)切及粉碎后加入乙醇及碳酸氫鈉，提取及干燥得粗提物后用超純水溶解，用二氯甲烷萃取，所得的水層分離液，過(guò)濾及減壓濃縮得制的無(wú)患子提取物。本發(fā)明還公開了含有此無(wú)患子提取物的化妝品原料組合物或者清洗劑組合物。本發(fā)明生產(chǎn)方法提取的無(wú)患子提取物，可改善刺激性異味，緩和皮膚，可適用于敏感性皮膚的化妝品原料組合物或者清洗劑組合物。
【IPC分類】C11D3-382, A61K8-97, C11D1-83, A61Q19-00
【公開號(hào)】CN104840387
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510207763
【發(fā)明人】金基洙, 盧勇, 金庚泰, 陳秀玉, 劉暢
【申請(qǐng)人】百朗德生物化學(xué)海門有限公司
【公開日】2015年8月19日
【申請(qǐng)日】2015年4月28日