一種夏枯草總黃酮的提取純化方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及化學(xué)及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種夏枯草總黃酮的提取純化方法及 其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 癌癥是一大類惡性腫瘤的統(tǒng)稱，是當(dāng)今世界上第一大嚴(yán)重威脅人類健康的疾病， 多種誘發(fā)因素如環(huán)境污染、化學(xué)污染(化學(xué)毒素)、電離輻射、自由基毒素等都可導(dǎo)致癌癥的 發(fā)生。目前癌癥的治療包括手術(shù)治療、化學(xué)治療、放射治療、中醫(yī)治療等，這些治療手段對(duì) 癌癥均有一定療效，但是其作用效果有限，且放射治療、化學(xué)治療對(duì)正常組織損害也較大， 因此，癌癥的治療仍然是人類面對(duì)的極大考驗(yàn)。中醫(yī)藥治療癌癥現(xiàn)在已經(jīng)被國(guó)內(nèi)外醫(yī)療專 家廣泛的認(rèn)可，大量的臨床試驗(yàn)及科研研宄已經(jīng)證實(shí)了中醫(yī)治療癌癥的效果，無論在抑制 或殺傷腫瘤細(xì)胞方面還是術(shù)后調(diào)理，減輕放、化療不良反應(yīng)，改善癥狀和體征，提高生存質(zhì) 量等方面，均發(fā)揮了重要的作用，因此，近年來中醫(yī)中藥在癌癥的治療方面日益被人們所關(guān) 注。
[0003] 夏枯草為唇形科植物夏枯草的干燥果穗，2010版《中國(guó)藥典》收載的中藥材，始載 于《神農(nóng)本草經(jīng)》?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》言："主寒熱、瘰疬、鼠瘺、頭瘡，破癥，散癭結(jié)氣，腳腫濕痹"； 《本草通玄》:"夏枯草，補(bǔ)養(yǎng)厥陰血脈，又能疏通結(jié)氣。目痛、瘰疬皆系肝癥，故建神功。然久 用亦防傷胃，與參、術(shù)同行，方可久服無弊"；《綱目》:"黎居士《易簡(jiǎn)方》，夏枯草治目疼，用沙 糖水浸一夜用，取其能解內(nèi)熱，緩肝火也。樓全善云，夏枯草治目珠疼至夜則甚者，神效，或 用苦寒藥點(diǎn)之反甚者，亦神效。蓋目珠連目本，肝系也，屬厥陰之經(jīng)。夜甚及點(diǎn)苦寒藥反甚 者，夜與寒亦陰故也。夏枯稟純陽(yáng)之氣，補(bǔ)厥陰血脈，故治此如神，以陽(yáng)治陰也"。從古代各家 本草對(duì)其性狀、產(chǎn)地、用途等方面進(jìn)行考證與目前習(xí)用的夏枯草，即主要為含黃酮類及三萜 皂苷類等物質(zhì)相符。臨床上夏枯草用于淋巴結(jié)核、甲狀腺腫、乳癰、頭目眩暈、口眼歪斜、筋 骨疼痛、肺結(jié)核、血崩、帶下、急性傳染性黃疸型肝炎及細(xì)菌性痢疾等疾病的治療；而有關(guān)其 有效成分之一總黃酮富集物的高純度純化方法、抗肝腫瘤活性研宄迄今為止尚未見報(bào)道。
[0004] 夏枯草中黃酮類化合物作為其中主要的活性成分，具有廣泛的生物活性，在心血 管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、抗炎、抗衰老、抗腫瘤等方面都有較顯著的療 效，但其生物活性的研宄主要集中在抗氧化活性方面。夏枯草化學(xué)成分復(fù)雜，除黃酮類化合 物，還含有其它類多種化學(xué)成分，主要有黃酮類、三萜皂苷類、苯丙素、留體、有機(jī)酸、揮發(fā)油 及糖等。因此，藥材提取液中含有大量非黃酮類雜質(zhì)，不利于闡明藥效物質(zhì)組分和作用機(jī) 制，難以投入到新藥的研發(fā)中，故對(duì)夏枯草總黃酮純化方法的研宄具有現(xiàn)實(shí)意義。根據(jù)文獻(xiàn) 報(bào)道，對(duì)夏枯草中總黃酮富集純度未達(dá)到90%以上，不利于研宄其發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)、作 用機(jī)制及其藥效組分的解析和表征，很難將其研發(fā)成臨床新藥。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對(duì)上述問題，本發(fā)明提供一種夏枯草總黃酮的提取純化方法及其應(yīng)用，該方法 使夏枯草中總黃酮富集物純度達(dá)到94%以上，用于制備治療肝癌的藥物。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供一種夏枯草總黃酮的提取純化方法，包括 以下步驟。
[0007] 步驟1、取夏枯草藥材粉碎過篩，加1-30倍量5-95%的乙醇，回流提取1-3次，每次 1-5 h，過濾，合并濾液，作為提取液，備用。
[0008] 步驟2、將步驟1中的提取液，加熱濃縮至濃度為0. 05-0. 5 g/mL，再用HCl和NaOH 溶液調(diào)節(jié)pH值為1-7,作為上樣液。
[0009] 步驟3、上樣液純化：將步驟2中的上樣液，上NKA-9大孔吸附樹脂，所述夏枯草藥 材與樹脂用量比為〇. 1-1.0 g/mL，用1-10 BV水除雜后，再用1-10BV的10-95%乙醇洗脫。
[0010] 步驟4、連續(xù)多次經(jīng)過步驟3的純化工藝得富集物，將富集物減壓干燥至粉末或浸 膏，即得。
[0011] 本發(fā)明還提供夏枯草總黃酮在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用。
[0012] 所述夏枯草總黃酮可加入藥學(xué)上可接受的輔料或載體，制成不同劑型的治療肝癌 的藥物。
[0013] 與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明的有益效果。
[0014] 本發(fā)明提供夏枯草總黃酮的提取純化方法及其應(yīng)用，該方法從夏枯草干燥果穗中 提取純化總黃酮富集物，純度達(dá)到94%以上，可以有效排除雜質(zhì)對(duì)藥效成分的干擾并且為 藥效物質(zhì)組分的解析及闡明其作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)；通過藥理藥效研宄表明夏枯草總黃酮具 有明顯的抗肝腫瘤活性，并呈明顯的量效關(guān)系，同時(shí)純度增加，可減小服用劑量、降低不良 反應(yīng)，為研宄其發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)，擴(kuò)大了夏枯草的應(yīng)用范圍；同時(shí) 為開發(fā)以夏枯草總黃酮富集物為原料的具有廣泛臨床使用價(jià)值和商業(yè)開發(fā)價(jià)值的抗肝腫 瘤新藥和工業(yè)生產(chǎn)提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明。
[0016] 1、夏枯草總黃酮提取工藝研宄。
[0017] 1.1單因素水平考察。
[0018] 表1 :夏枯草藥材不同粉碎粒徑提取總黃酮的含量（％)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種夏枯草總黃酮的提取純化方法，包括以下步驟： 步驟1、取夏枯草藥材粉碎過篩，加1-30倍量5-95%的乙醇，回流提取1-3次，每次1-5 h，過濾，合并濾液，作為提取液，備用； 步驟2、將步驟1中的提取液，加熱濃縮至濃度為0. 05-0. 5g/mL，再調(diào)節(jié)pH值為1-7， 作為上樣液； 步驟3、上樣液純化：將步驟2中的上樣液，上NKA-9大孔吸附樹脂，用1-10 BV水除雜 后，再用1-10BV的10-95%乙醇洗脫； 步驟4、連續(xù)多次經(jīng)過步驟3的純化工藝得富集物，將富集物減壓干燥至粉末或浸膏， 即得。
2. 如權(quán)利要求1所述的夏枯草總黃酮的提取純化方法，其特征在于，所述步驟2中采用 HCl和NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為1-7。
3. 如權(quán)利要求1所述的夏枯草總黃酮的提取純化方法，其特征在于，所述步驟3中夏枯 草藥材與樹脂用量比為〇. 1-1. 〇g/mL。
4. 如權(quán)利要求1所述的夏枯草總黃酮的提取純化方法，其特征在于，所述純化工藝的 次數(shù)為三次。
5. 如權(quán)利要求1所述的夏枯草總黃酮的提取純化方法，其特征在于，所述連續(xù)三次純 化工藝后得到的夏枯草總黃酮純度大約達(dá)到94%以上。
6. 夏枯草總黃酮在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用。
7. 如權(quán)利要求1所述的夏枯草總黃酮的應(yīng)用，其特征在于，所述夏枯草總黃酮可加入 藥學(xué)上可接受的輔料或載體，制成不同劑型的治療肝癌的藥物。
【專利摘要】一種夏枯草總黃酮的提取純化方法，步驟為：（1）取夏枯草藥材粉碎過篩，加1-30倍量5-95%的乙醇，回流提取1-3次，每次1-5h，過濾，合并濾液，得提取液；（2）將所述提取液加熱濃縮至濃度為0.05-0.5g/mL，再調(diào)節(jié)pH值為1-7，得上樣液；（3）將所述上樣液，上NKA-9大孔吸附樹脂，用1-10BV水除雜后，再用1-10BV的10-95%乙醇洗脫；（4）連續(xù)多次經(jīng)過步驟3的純化工藝得富集物，減壓干燥至粉末或浸膏，即得。本發(fā)明還提供夏枯草總黃酮在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用，通過藥理藥效研究表明夏枯草總黃酮具有明顯的抗肝腫瘤活性，并呈明顯的量效關(guān)系，為開發(fā)以夏枯草總黃酮富集物為原料的具有廣泛臨床使用價(jià)值和商業(yè)開發(fā)價(jià)值的抗肝腫瘤新藥和工業(yè)生產(chǎn)提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【IPC分類】A61K36-536, A61P35-00
【公開號(hào)】CN104873570
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510302298
【發(fā)明人】孟憲生, 李楠楠, 包永睿, 王帥
【申請(qǐng)人】遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【公開日】2015年9月2日
【申請(qǐng)日】2015年6月5日