注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及重組人粒細(xì)胞刺激因子制備領(lǐng)域，特別是一種注射用重組人粒細(xì)胞刺 激因子凍干粉針劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 重組人粒細(xì)胞刺激因子（rHuG-CSF)的穩(wěn)定劑常采用人血蛋白，但由于人血白蛋 白為血液制品，不可避免的存在潛在的病毒及交叉感染風(fēng)險，還有可能發(fā)生蛋白過敏。近來 來，眾多研宄致力于開發(fā)替代人血蛋白的重組人促紅素穩(wěn)定劑。如市售藥品格拉諾賽特中 采用L-精氨酸，L-苯丙氨酸和L-蛋氨酸的復(fù)合氨基酸組合物作為穩(wěn)定劑，成本較高，增加 了配伍難度和工序。CN102028661A的專利文獻(xiàn)中也公開了精氨酸、甘氨酸等作為重組人粒 細(xì)胞刺激因子中的凍干保護(hù)劑使用，以使其在不同溫度下具備長期穩(wěn)定性。但是現(xiàn)有的重 組人粒細(xì)胞刺激因子產(chǎn)品均未考慮在高濕和光照條件下的產(chǎn)品穩(wěn)定性，其產(chǎn)品也無法在高 濕、光照條件下長期貯存。
[0003] 此外，在復(fù)雜的貯存環(huán)境中，貯存溫度經(jīng)常會出現(xiàn)變化或反復(fù)，因此重組人粒細(xì)胞 刺激因子制劑還應(yīng)當(dāng)可以在復(fù)雜多變的溫度下進(jìn)行貯存，目前還沒有變溫貯存的相關(guān)報 道。申請人驚奇地發(fā)現(xiàn)，在采用特定的配伍和配比后，得到重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針 劑，可以在反復(fù)驟變的環(huán)境下貯存，從而得到了本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑，不含人血白 蛋白，不含有氨基酸類穩(wěn)定劑，可常溫、高溫、高濕、光照條件下保存，特別是可以在溫度反 復(fù)、多變的貯存環(huán)境下貯存。
[0005] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的一種注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針 劑，由以下組分組成：
[0006] 藥用量的重組人粒細(xì)胞刺激因子；
[0007] 甘露醇；
[0008] 枸櫞酸鹽緩沖劑；以及
[0009] 吐溫 80。
[0010] 優(yōu)選地，各組分的配比為：每1000 ml的凍干粉針劑水溶液中含有100-500mg重組 人粒細(xì)胞刺激因子，40-45mg吐溫80,45-55g甘露醇，適量的枸櫞酸鹽緩沖劑能夠調(diào)節(jié)溶液 的pH值為 3. 5-4. 5。
[0011] 優(yōu)選地，各組分的配比為：各組分的配比為：每1000 ml的凍干粉針劑水溶液中含 有250mg重組人粒細(xì)胞刺激因子，43. 2mg吐溫80, 50g甘露醇，適量的枸櫞酸鹽緩沖劑能夠 調(diào)節(jié)溶液的pH值為3. 9-4. 1。
[0012] 優(yōu)選地，制備方法包括如下工序：準(zhǔn)確稱取的枸櫞酸和枸櫞酸鈉用一定體積的注 射用水溶解，溶解完全后，取樣檢測pH值和內(nèi)毒素；待枸橡酸鹽緩沖液pH值和內(nèi)毒素檢測 合格后，再準(zhǔn)確量取吐溫-80、甘露醇、重組人粒細(xì)胞刺激因子原液加入到已檢測合格的枸 櫞酸鹽緩沖液中，混合均勻即得配制好的半成品液；將配制好的半成品液用〇. 22ym濾膜 進(jìn)行無菌過濾，對濾后的半成品液進(jìn)行取樣檢測無菌、pH值、內(nèi)毒素；待pH值、內(nèi)毒素檢測 結(jié)果合格后，進(jìn)行無菌灌裝，半加塞；將灌裝好的半成品轉(zhuǎn)移至凍干機(jī)箱體內(nèi)，關(guān)閉凍干機(jī) 門，啟動凍干機(jī)進(jìn)行凍干；凍干結(jié)束后，壓塞；將壓好塞的半成品轉(zhuǎn)移至軋蓋間進(jìn)行軋蓋； 軋蓋結(jié)束后包裝。
[0013] 優(yōu)選地，在凍干結(jié)束時，向凍干箱體內(nèi)注入無菌高純氮?dú)庠賶喝?br>[0014] 本發(fā)明提供注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑，配伍簡單，不含復(fù)雜的穩(wěn) 定劑成分，安全且節(jié)約成本。在常溫、高溫、高濕、光照等條件下均具備長期的穩(wěn)定性，能夠 適應(yīng)多種貯存環(huán)境。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 為了使本技術(shù)領(lǐng)域的人員更好地理解本發(fā)明方案，下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā) 明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0016] 實(shí)施例1
[0017]
[0019] 制備方法：準(zhǔn)確稱取的枸櫞酸和枸櫞酸鈉用一定體積的注射用水溶解，溶解完全 后，取樣送質(zhì)檢檢測pH值和內(nèi)毒素。待枸櫞酸鹽緩沖液pH值和內(nèi)毒素檢測合格后，再準(zhǔn)確 量取吐溫-80溶液、甘露醇、重組人粒細(xì)胞刺激因子原液加入到已檢測合格的枸櫞酸鹽緩 沖液中，混合均勻即得配制好的半成品液。將配制好的半成品液用0. 22ym濾膜進(jìn)行無菌 過濾，對濾后的半成品液進(jìn)行取樣送質(zhì)檢測無菌、pH值、內(nèi)毒素。待pH值、內(nèi)毒素檢測結(jié)果 合格后，進(jìn)行無菌灌裝，半加塞。將灌裝好的半成品轉(zhuǎn)移至凍干機(jī)箱體內(nèi)，關(guān)閉凍干機(jī)門，啟 動凍干機(jī)進(jìn)行凍干。凍干過程為預(yù)凍、抽空、干燥。凍干結(jié)束后，向凍干箱內(nèi)注入無菌高純 氮?dú)?，壓塞。將壓好塞的半成品轉(zhuǎn)移至軋蓋間進(jìn)行軋蓋。軋蓋結(jié)束后交接給包裝間，包裝人 員對半成品進(jìn)行燈檢、包裝。
[0020] 上述制備方法中，各組分的稱量或量取均按上表中的標(biāo)準(zhǔn)配伍（下同）。
[0021] 實(shí)施例2
[0022]
[0030] 制備方法同實(shí)施例I，其中pH調(diào)節(jié)劑枸緣酸和枸緣酸鈉的用量可將產(chǎn)品的pH值維 持在 4. 0-4. 1。
[0031] 試驗(yàn)例1
[0032] 對實(shí)施例1中的重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑復(fù)溶于注射用水中進(jìn)行穩(wěn)定 性測試，結(jié)果記錄在如下各表中。
[0033] 表1光照條件貯存試驗(yàn)結(jié)果
[0037] 表3高溫加速試驗(yàn)結(jié)果
[0038]
[0042] 試驗(yàn)例2
[0043] 將實(shí)施例1產(chǎn)品與市售產(chǎn)品分別溶于等量注射用水中，定性分析溶解效果，見下 表：
[0044] 表5復(fù)溶性定性試驗(yàn)結(jié)果
[0045]
[0046] 試驗(yàn)例3
[0047] 臨床及動物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明中提供的重組人促紅制劑在刺激性、過敏性、溶血性 三方面均無給藥局部毒性，安全可靠。
[0048] 試驗(yàn)例4
[0049] 變溫貯存試驗(yàn)
[0050] 試驗(yàn)方法：取待測凍干粉針劑，以I. 4*107IU每支的標(biāo)準(zhǔn)復(fù)溶于注射用水中，在變 化的溫度環(huán)境下貯存，溫度變化的方式為：
[0051] 0~5天：32°C;
[0052] 6 ~10 天：45°C;
[0053] 11 ~15 天：25°C;
[0054] 16~20天：32 °C ;
[0055] 21 ~25 天 45°C;
[0056] 從第26天開始按照第0天的溫度設(shè)置依次循環(huán)，直至200天結(jié)束。
[0057] 實(shí)施例1試驗(yàn)結(jié)果
[0058]
[0059] 對比例1試驗(yàn)結(jié)果
[0060]
[0061] 由上表結(jié)果可知，實(shí)施例1中的凍干粉針劑在溫度跨度大且多次反復(fù)的變溫條 件貯存下仍能保持較高的生物學(xué)活性，而對比例1中的凍干粉針劑在變溫環(huán)境貯存能力 差，在90天時活性便降至5. 31*105,損失了兩個數(shù)量級。
[0062] 以上對本發(fā)明所提供的注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑進(jìn)行了詳細(xì)介 紹。本文中應(yīng)用了具體個例對本發(fā)明的原理及實(shí)施方式進(jìn)行了闡述，以上實(shí)施例的說明只 是用于幫助理解本發(fā)明的核心思想。應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不 脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對本發(fā)明進(jìn)行若干改進(jìn)和修飾，這些改進(jìn)和修飾也落入 本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 一種注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑，其特征在于，由以下組分組成： 藥用量的重組人粒細(xì)胞刺激因子； 甘露醇； 枸櫞酸鹽緩沖劑以及 吐溫80。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑，其特征在于，各 組分的配比為：每1000 ml的凍干粉針劑水溶液中含有100-500mg重組人粒細(xì)胞刺激因子， 40-45mg吐溫80,45-55g甘露醇，適量的枸櫞酸鹽緩沖劑能夠調(diào)節(jié)溶液的pH值為3. 5-4. 5。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑，其特征在于， 各組分的配比為：每1000 ml的凍干粉針劑水溶液中含有250mg重組人粒細(xì)胞刺激因子， 43. 2mg吐溫80, 50g甘露醇，適量的枸櫞酸鹽緩沖劑能夠調(diào)節(jié)溶液的pH值為3. 9-4. 1。4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑，其特征在 于，制備方法包括如下工序：準(zhǔn)確稱取枸櫞酸和枸櫞酸鈉用注射用水溶解，溶解完全后得到 枸櫞酸鹽緩沖液，取樣檢測其pH值和內(nèi)毒素；待枸櫞酸鹽緩沖液pH值和內(nèi)毒素檢測合格 后，再準(zhǔn)確量取吐溫-80、甘露醇和重組人粒細(xì)胞刺激因子原液加入到已檢測合格的枸櫞酸 鹽緩沖液中，混合均勻即得配制好的半成品液；將配制好的半成品液用〇. 22ym濾膜進(jìn)行 無菌過濾，對濾后的半成品液取樣進(jìn)行無菌檢測并檢測pH值和內(nèi)毒素；待pH值和內(nèi)毒素 檢測結(jié)果合格后，進(jìn)行無菌灌裝，半加塞；將灌裝好的半成品轉(zhuǎn)移至凍干機(jī)箱體內(nèi)，關(guān)閉凍 干機(jī)門，啟動凍干機(jī)進(jìn)行凍干；凍干結(jié)束后，壓塞；將壓好塞的半成品轉(zhuǎn)移至軋蓋間進(jìn)行軋 蓋；乳蓋結(jié)束后包裝。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑，其特征在于，在 凍干結(jié)束時，向凍干箱體內(nèi)注入無菌高純氮?dú)庠賶喝?br>【專利摘要】本發(fā)明公開了一種注射用重組人粒細(xì)胞刺激因子凍干粉針劑，由以下組分組成：藥用量的重組人粒細(xì)胞刺激因子；甘露醇；枸櫞酸鹽緩沖劑；以及吐溫80。本產(chǎn)品不含人血白蛋白，不含有氨基酸類穩(wěn)定劑，可常溫、高溫、高濕、光照條件下保存，特別是可以在溫度反復(fù)、多變的貯存環(huán)境下貯存。
【IPC分類】A61K47/10, A61K47/12, A61K38/19, A61K9/19, A61K47/34
【公開號】CN104906053
【申請?zhí)枴緾N201510324554
【發(fā)明人】程度勝, 桑建彬, 龍應(yīng)國, 韓明娣, 薛霞, 郭峰
【申請人】北京四環(huán)生物制藥有限公司
【公開日】2015年9月16日
【申請日】2015年6月12日