基于醇提法提取金銀花提取物的酶法加工的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及中藥材金銀花提取物的一種新型加工方法。
【背景技術(shù)】
[0002]金銀花提取物的主要指標(biāo)性成分是綠原酸，即由咖啡酸與奎尼酸組成縮酚酸，異名為咖啡糅酸，化學(xué)名為3-0-咖啡?？崴幔侵参矬w在有氧呼吸過(guò)程中經(jīng)莽草酸途徑產(chǎn)生一種苯丙素類化合物。
[0003]綠原酸具有清除自由基、抗菌消炎、抗病毒、降糖、降脂、保肝利膽等多種功效，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)綠原酸類物質(zhì)有抗癌、抗艾滋病的作用，可作為先導(dǎo)設(shè)計(jì)開發(fā)抗癌、抗艾滋病藥物，同時(shí)，作為良好的抗氧化劑，綠原酸在醫(yī)藥、日用化工、食品等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。
[0004]在我國(guó)，綠原酸的生產(chǎn)技術(shù)落后，大多采用乙醇法，產(chǎn)量低，應(yīng)用范圍不大，有些品種尚屬空白，大量生產(chǎn)綠原酸對(duì)發(fā)展國(guó)民經(jīng)濟(jì)的生產(chǎn)具有重要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提出一種能夠提升綠原酸純度、安全綠色，提高綠原酸利用率的一種新型金銀花提取物的加工方法。
[0006]本發(fā)明實(shí)現(xiàn)目的的技術(shù)方案是:
[0007]一種新型金銀花提取物的加工方法，包括以下組分及質(zhì)量分?jǐn)?shù):金銀花10 — 20份，纖維素酶70%乙醇溶液。
[0008]中藥材金銀花提取物的新型加工方法，步驟是:
[0009](I)取經(jīng)干燥粉碎后的樣品5g，加30mL水；
[0010](2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標(biāo)準(zhǔn)酶液，在上述金銀花樣品中分別加
0.5ml, 1.0ml, 1.5ml, 2.0ml, 2.5ml，45°C溫度下酶處理 2h ；
[0011](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液；
[0012](4)真空減壓濃縮至50mL，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10mL容量瓶中；
[0013](5)在324nm處測(cè)定吸光度，定量。平行三次。
[0014]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和有益效果為:
[0015]1.本發(fā)明創(chuàng)新了金銀花提取物加工方法，該法綠原菌酸得率比乙醇回流法提高25.97%，充分體現(xiàn)了該法在金銀花提取過(guò)程中的優(yōu)勢(shì)，是國(guó)內(nèi)金銀花提取加工的重大突破，為國(guó)內(nèi)提取方法開辟了新途徑。
[0016]2.本工藝提取條件較為溫和，避免了綠原酸在高溫條件下分解，大大地提高了綠原酸的產(chǎn)率。
[0017]3.本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單、操作容易，涉及設(shè)備設(shè)施少，適合規(guī)?；a(chǎn)和產(chǎn)業(yè)化等多種優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)上切實(shí)可行，可為金銀花中提取綠原酸的工業(yè)化大生產(chǎn)提供參考。
【具體實(shí)施方式】
[0018]下面通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述，以下實(shí)施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0019]首先確定最適的酶用量、酶解時(shí)間、溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響,包括如下步驟:
[0020]酶的用量對(duì)綠原酸得率的影響
[0021]設(shè)置了0.5，1.0, 1.5，2.0, 2.5，3.0, 3.5，4.0, 4.5，5.0%10 個(gè)水平纖維素酶用量對(duì)纖維素酶處理效果的影響，以不加酶液為對(duì)照，45°C條件下酶處理2h。
[0022]酶解時(shí)間對(duì)綠原酸得率的影響
[0023]金銀花樣品中加1.0ml酶液，酶解溫度45 °C，酶解時(shí)間
0.5，1.0, 1.5，2.0, 2.5，3.0, 3.5h金銀花提取物的平均得率和綠原酸得率。
[0024]酶處理溫度對(duì)綠原酸得率的影響
[0025]設(shè)置了25°C，30°C 35°C，40°C，45°C , 50°C , 55°C , 60°C 8 個(gè)水平研究溫度對(duì)纖維素酶處理效果的影響，試驗(yàn)時(shí)每個(gè)金銀花樣品加酶液1.0ml，酶處理2h。
[0026]實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:當(dāng)酶用量為2.5%時(shí)，綠原酸得率最高；酶解時(shí)間2小時(shí)時(shí)綠原酸得率最高；纖維素酶處理的最適溫度范40°C _50°C，在45°C時(shí)綠原酸得率最高，當(dāng)高于50°C時(shí)，綠原酸得率降低，可以看出，纖維素酶的最適溫度為45°C。
[0027]實(shí)施例1:
[0028]金銀花，纖維素酶，乙醇
[0029](I)取經(jīng)干燥粉碎后的樣品5g，加30ml水；
[0030](2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標(biāo)準(zhǔn)酶液，在上述金銀花樣品中分別加0.5ml,
1.0ml, 1.5ml, 2.0ml, 2.5ml,以不加酶液為對(duì)照，45°C溫度下酶處理2h。
[0031](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液；
[0032](4)真空減壓濃縮至50ml，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10ml容量瓶中；
[0033](5)在324nm處測(cè)定吸光度，定量，平行三次。
[0034]實(shí)施例2:
[0035]金銀花，纖維素酶，乙醇
[0036](I)取經(jīng)干燥粉碎后的樣品5g，加30mL水；
[0037](2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標(biāo)準(zhǔn)酶液，在上述金銀花樣品中分別加0.5，
1.0，1.5,2.0,2.5mL,以不加酶液為對(duì)照，45°C溫度下酶處理2h。
[0038](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液；
[0039](4)真空減壓濃縮至50mL，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10mL容量瓶中；
[0040](5)在324nm處測(cè)定吸光度，定量，平行三次。
[0041]實(shí)施例3:
[0042]金銀花，纖維素酶，乙醇
[0043](I)取經(jīng)干燥粉碎后的樣品5g，加30ml水；
[0044](2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標(biāo)準(zhǔn)酶液，在上述金銀花樣品中分別加0.5，1.0,1.5,2.0,2.5mL,不加酶液為對(duì)照，45°C溫度下酶處理2h。
[0045](3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液；
[0046](4)真空減壓濃縮至50ml，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10ml容量瓶中；
[0047](5)在324nm處測(cè)定吸光度，定量，平行三次。
[0048]本發(fā)明提取的綠原菌酸得率比單獨(dú)乙醇回流法提高約25.97%，反應(yīng)條件溫和，采用該工藝綠原酸得率最高可達(dá)6.38%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.基于醇提法提取金銀花提取物的酶法加工，其特征在于:包括以下組分及其質(zhì)量分?jǐn)?shù):金銀花10 — 20份，纖維素酶70份，乙醇溶液。2.基于醇提法提取金銀花提取物的酶法加工，其特征在于: (1)取經(jīng)干燥粉碎后的樣品5g，加30ml水； (2)將纖維素酶配成含量為2.5%的標(biāo)準(zhǔn)酶液，在上述金銀花樣品中分別加0.5ml,.1.0ml, 1.5ml, 2.0ml, 2.5ml,以不加酶液為對(duì)照，45°C溫度下酶處理2h ； (3)加入10倍量70%的乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h，離心，收集上清液； (4)真空減壓濃縮至50ml，用0.2mol/L鹽酸溶解并定容至10ml容量瓶中，在324nm處測(cè)定吸光度，定量，平行三次。
【專利摘要】本發(fā)明公開了中藥材金銀花提取物的新型加工方法，綠原酸是金銀花的主要藥用成分，具有抗菌消炎、降脂降糖、調(diào)節(jié)免疫、抑制突變和抗腫瘤等作用，目前國(guó)內(nèi)提取的方法主要是醇提法，這種方式雖簡(jiǎn)單易行，但綠原酸得率較低，本發(fā)明在醇提的基礎(chǔ)上加上酶提，研究了酶的用量、酶反應(yīng)時(shí)間、溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響，在此基礎(chǔ)上運(yùn)用醇提方法進(jìn)行提取，與原有技術(shù)相比，該法綠原菌酸得率比乙醇回流法提高約25.97%，反應(yīng)條件溫和，采用該工藝綠原酸得率最高可達(dá)6.38%，由此可見，酶法提取新工藝能夠顯著提高綠原酸得率。
【IPC分類】A61K36/355
【公開號(hào)】CN104922186
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410098541
【發(fā)明人】張剛
【申請(qǐng)人】天津綠格瑞科技發(fā)展有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請(qǐng)日】2014年3月18日