一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種配方顆粒的制備方法，特別是涉及一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，屬于中藥制劑領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]黃芪具有補(bǔ)氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌的功效。用于氣虛乏力，食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，癰疽難潰，久潰不斂，血虛萎黃，內(nèi)熱消渴?！侗窘?jīng)》記載主癰疽，久敗瘡，排膿止痛。補(bǔ)虛，小兒百病?！薄度杖A子本草》記載助氣壯筋骨，長(zhǎng)肉補(bǔ)血?！?br> 黃芪多糖可顯著增強(qiáng)非特異性免疫功能和體液免疫功能，顯著增強(qiáng)小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬功能，促進(jìn)血清溶血素形成，提高空斑形成細(xì)胞的溶血功能和明顯的碳離廓清作用和明顯增加脾重量。
[0003]黃芪多糖對(duì)多種實(shí)驗(yàn)型腫瘤油明顯的抑制作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，黃芪多糖與IL-2/LAK抗腫瘤作用相似，并對(duì)IL-2/LAK有抗腫瘤效應(yīng)有明顯的增強(qiáng)作用。二者配伍應(yīng)用可明顯提高LAK細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷力。
[0004]黃芪多糖是一種干擾素誘導(dǎo)劑，其抗病毒原理:刺激巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞的功能，使E環(huán)形成細(xì)胞數(shù)增加，誘生細(xì)胞因子，促進(jìn)白細(xì)胞介素誘生，而使動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生內(nèi)源性干擾素，從而達(dá)到抗病毒的目的。
[0005]黃芪多糖是一種結(jié)構(gòu)相當(dāng)復(fù)雜的高分子化合物，它所具有的復(fù)雜的多途徑多環(huán)境，多靶點(diǎn)的生物活性與功能，在國(guó)際學(xué)術(shù)界被稱為生物應(yīng)答疚物，多糖的成分中以葡聚糖為主，是由β_1，3葡萄糖苷鍵結(jié)合的直鏈和β_1，3葡萄糖苷鍵結(jié)合的支鏈形成一個(gè)特殊的空間結(jié)構(gòu)，使其具有了很好的生理活性。
[0006]在適度的壓力下，只要水保持為液體，這種液體水的極性會(huì)隨著溫度變化而變化，這種水被稱為亞臨界水(suberitical water)。在相關(guān)文獻(xiàn)中也有被稱為超熱水和高溫水。亞臨界水與常壓下的水在性質(zhì)上有較大的差別，它更類似于有機(jī)溶劑，這為它的應(yīng)用開(kāi)辟了一個(gè)新的領(lǐng)域。
[0007]用亞臨界水提取分離植物有效成分，與現(xiàn)有超臨界CO2萃取技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):1)而亞臨界水萃取原料無(wú)需干燥，就能很方便地完成對(duì)有效成分的提取；2)亞臨界水萃取通過(guò)改變溫度和壓力來(lái)控制水的介電常數(shù)，就可以選擇性地提取不同極性的化合物，或從強(qiáng)極性、中極性到非極性化合物的連續(xù)提??；3)亞臨界水萃取不需要太高的壓力，萃取裝置相對(duì)比較簡(jiǎn)單，提取時(shí)間可以在數(shù)十分鐘內(nèi)完成。因此，亞臨界水萃取技術(shù)是一種很有前景的變革性技術(shù)，顯示出巨大和決定性的優(yōu)勢(shì)。
[0008]文獻(xiàn)和專利報(bào)道了黃芪多糖微波提取和水提等方法，然后通過(guò)醇沉、脫脂、丙酮和乙醚等洗滌的方式進(jìn)行純化。其文獻(xiàn)和專利情況如下:
《一種黃芪多糖的提取方法(CN 104311689 A)》、《一種黃芪多糖的提取方法(CN103848918A)》、《一種黃芪多糖的提取方法(CN 101619107)》，均公開(kāi)了黃芪中多糖成分的提取和純化方法。這些方法存在的問(wèn)題有:采用水提或者超聲波的方式進(jìn)行提取，另外添加外源性的酶進(jìn)行水解，這些方法雖然獲得多糖，但組分較為復(fù)雜，多糖的相對(duì)含量不高，且提取率較低，沒(méi)有根據(jù)多糖的有效分子量的成分進(jìn)行篩選。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明主要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，以克服現(xiàn)有的提取率低和特異性差的缺陷，提升黃芪多糖配方顆粒的質(zhì)量水平，滿足大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)的需要。
[0010]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的一個(gè)技術(shù)方案是:提供一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，其包括以下步驟:
(1)將黃芪根粉碎過(guò)篩，加入酶液水解，獲得水解產(chǎn)物；
(2)將水解混合物加入到亞臨界萃取釜中萃取，過(guò)濾得萃取液；
(3)將萃取液經(jīng)過(guò)膜過(guò)濾，獲得特異性黃芪多糖濾過(guò)液；
(4)濃縮，加入輔料，噴霧干燥，得特異性黃芪多糖配方顆粒。
[0011]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，步驟(I)中所述的黃芪根經(jīng)過(guò)粉碎后的顆粒度為10-50目；所述的酶是纖維素酶、果膠酶、α-淀粉酶中的一種或組合；酶液中酶的濃度為
0.1 -2% ;水解pH為4.0 -7.0 ;水解時(shí)間為5~8h ;水解溫度為20-35°C。
[0012]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，步驟(2)中所述的亞臨界水萃取溫度為100~200°C，壓力為l~10MPa，萃取時(shí)間為20~80 min。
[0013]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，所述步驟(3)中包括以下步驟:
Ca)萃取液采用陶瓷膜過(guò)濾，獲得澄清多糖溶液；
(b)將步驟(a)中液體通過(guò)超濾膜過(guò)濾，得特異性多糖溶液。
[0014]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，所述步驟(4)中所述輔料為麥芽糊精、淀粉、微晶纖維素中的一種；添加量為相對(duì)投料藥材質(zhì)量的1~5%。
[0015]在本發(fā)明一個(gè)較佳實(shí)施例中，步驟(a)和(b)中所述的陶瓷膜孔徑為0.1~0.5微米；所述的超濾膜孔徑為10kDa~30kDa，超濾溫度4~20°C，壓力為0.2-0.6MPa。
[0016]本發(fā)明的有益效果是:
1.本發(fā)明一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
[0017]2.本發(fā)明方法分離純化所得配方顆粒中黃芪多糖分子量在10~30kDa，適用于開(kāi)發(fā)成特異性高的配方顆粒。
[0018]3.本發(fā)明方法的多糖的轉(zhuǎn)移率大于80%，產(chǎn)品收率高，生產(chǎn)成本低。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅是本發(fā)明的一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其它實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0020]本發(fā)明實(shí)施例一:
取30kg黃芩中藥飲片，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎過(guò)10目藥篩。加入240L純凈水，添加500mL的酶活為1000U纖維素酶，充分混勻升溫至25°C，保溫水解8 ho水解結(jié)束后將酶解混合液裝入亞臨界水提取罐中萃取，萃取溫度為120°C，壓力為3MPa，萃取時(shí)間為50 min。降壓、降溫之后通過(guò)板框過(guò)濾，獲得濾液231L提取液。將提取液采用陶瓷膜0.5微米的陶瓷膜澄清過(guò)濾，澄清液利用GE公司生產(chǎn)的超濾膜分子量為10 ~30kDa的高分子膜錯(cuò)流過(guò)濾，超濾溫度為4°C，壓力為0.5MPa，獲得純化多糖溶液，通過(guò)旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)濃縮至20L，過(guò)300目篩，加入1.5 kg麥芽糊精，充分混勻，噴霧干燥，得干粉1.6 kg干粉，然后采用雙層PVC代包裝儲(chǔ)存。
[0021]本發(fā)明實(shí)施例二:
取30kg黃芩中藥飲片，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎過(guò)50目藥篩。加入240L純凈水，添加500mL的酶活為10000U纖維素酶和果膠酶，充分混勻升溫至35°C，保溫水解5h。水解結(jié)束后將酶解混合液裝入亞臨界水提取罐中萃取，萃取溫度為180°C，壓力為10 MPa，萃取時(shí)間為20 min。降壓、降溫之后通過(guò)板框過(guò)濾，獲得濾液227L提取液。將提取液采用陶瓷膜0.2微米的陶瓷膜澄清過(guò)濾，澄清液利用GE公司生產(chǎn)的超濾膜分子量為10 ~30kDa的高分子膜錯(cuò)流過(guò)濾，超濾溫度為20°C，壓力為0.2 MPa,獲得純化多糖溶液，通過(guò)旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)濃縮至20L，過(guò)300目篩，加入0.3 kg微晶纖維素，充分混勻，噴霧干燥，得干粉0.5 kg干粉，然后采用雙層PVC代包裝儲(chǔ)存。
[0022]本發(fā)明實(shí)施例三:
取30kg黃芩中藥飲片，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎過(guò)30目藥篩。加入240L純凈水，添加500mL的酶活為10000U纖維素酶，充分混勻升溫至20°C，保溫水解6 ho水解結(jié)束后將酶解混合液裝入亞臨界水提取罐中萃取，萃取溫度為150°C，壓力為6MPa，萃取時(shí)間為40 min。降壓、降溫之后通過(guò)板框過(guò)濾，獲得濾液229L提取液。將提取液采用陶瓷膜0.2微米的陶瓷膜澄清過(guò)濾，澄清液利用GE公司生產(chǎn)的超濾膜分子量為10~30kDa的高分子膜錯(cuò)流過(guò)濾，超濾溫度為15°C，壓力為0.4MPa，獲得純化多糖溶液，通過(guò)旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)濃縮至20L，過(guò)300目篩，加入0.9 kg麥芽糊精，充分混勻，噴霧干燥，得干粉1.13 kg干粉，然后采用雙層PVC代包裝儲(chǔ)存。
[0023]本發(fā)明一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法的有益效果是:
1.本發(fā)明制備特異性黃芪多糖的方法工藝路線簡(jiǎn)單，篩選出的多糖單一性強(qiáng)，純度尚O
[0024]2.本發(fā)明制備特異性黃芪多糖的方法多糖轉(zhuǎn)移率大于80%，產(chǎn)品收率高，生產(chǎn)成本低，活性強(qiáng)。
[0025]以上所述僅為本發(fā)明的實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專利范圍，凡是利用本發(fā)明說(shuō)明書內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換，或直接或間接運(yùn)用在其它相關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將黃芪根粉碎過(guò)篩，加入酶液水解，獲得水解產(chǎn)物； (2)將水解混合物加入到亞臨界萃取釜中萃取，過(guò)濾得萃取液； (3)將萃取液經(jīng)過(guò)膜過(guò)濾，獲得特異性黃芪多糖濾過(guò)液； (4)濃縮，加入輔料，噴霧干燥，得特異性黃芪多糖配方顆粒。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述的黃芪根經(jīng)過(guò)粉碎后的顆粒度為10 -50目；所述的酶是纖維素酶、果膠酶和α -淀粉酶中的一種或組合；酶液中酶的濃度為0.1 -2% ;水解pH為4.0 -7.0 ;水解時(shí)間為5~8h ;水解溫度為20~35°C。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的亞臨界水萃取溫度為100~200°C，壓力為l~10MPa，萃取時(shí)間為20~80 min。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中包括以下步驟: (a)萃取液采用陶瓷膜過(guò)濾，獲得澄清多糖溶液； (b)將步驟(a)中液體通過(guò)超濾膜過(guò)濾，得特異性多糖溶液。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中所述輔料為麥芽糊精、淀粉、微晶纖維素中的一種，添加量為相對(duì)投料藥材質(zhì)量的1~5%。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，其特征在于，所述的陶瓷膜孔徑為0.1-0.5微米。7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，其特征在于，所述的超濾膜孔徑為10kDa~30kDa，超濾溫度4~20°C，壓力為0.2-0.6MPa。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種特異性黃芪多糖配方顆粒的制備方法，包括以下步驟：（1）將黃芪根粉碎過(guò)篩，加入酶液水解，獲得水解產(chǎn)物；（2）將水解混合物加入到亞臨界萃取釜中萃取，過(guò)濾得萃取液；（3）將萃取液經(jīng)過(guò)膜過(guò)濾，獲得特異性黃芪多糖濾過(guò)液；（4）濃縮，加入輔料，噴霧干燥，得特異性黃芪多糖配方顆粒。本發(fā)明具有工藝簡(jiǎn)單，成本低，選擇性好等優(yōu)點(diǎn)，克服了黃芪粗多糖的特異性差，用量多的缺點(diǎn)，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。
【IPC分類】A61P1/12, A61K36/481, A61K31/715, A61P17/02, A61P7/10, A61P1/14, A61P3/10, A61K9/16, A61P39/02, A61P15/00, A61P7/04
【公開(kāi)號(hào)】CN104958347
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510321783
【發(fā)明人】高波, 羅川
【申請(qǐng)人】安徽華潤(rùn)金蟾藥業(yè)股份有限公司
【公開(kāi)日】2015年10月7日
【申請(qǐng)日】2015年6月12日