涉及粘液素的疾病治療的制作方法
【專利說明】涉及粘液素的疾病治療 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 大體上，本發(fā)明涉及用于治療涉及粘液素的疾病，特別是用于治療粘液素分泌癌 癥的組合物。此外，本發(fā)明的組合物涉及用于治療涉及血凝塊（血栓）的疾病的組合物。
[0002] 發(fā)明背景
[0003] 粘液素為由包括胃腸道、肺、腎臟、卵巢、乳腺和胰腺的上皮組織所產(chǎn)生的高分子 量、高度糖基化的蛋白家族。在正常生理條件下，粘液素對上皮組織發(fā)揮保護(hù)作用。然而， 粘液素也可涉及到疾病狀態(tài)（如囊胞性纖維癥）。無法咳出粘液可導(dǎo)致包括呼吸疾病和胰 腺病理的疾病。
[0004] 粘液素高水平的表達(dá)與診斷有癌癥的患者的新陳代謝和不良臨床結(jié)果有關(guān)。正常 情況下，上皮細(xì)胞的表面上粘液素的合成受到高度調(diào)節(jié)，但是在腫瘤中存在粘液素的產(chǎn)量 增加，部分原因是人粘液素（MUC1)的表達(dá)增加。粘液的表達(dá)和組成在上皮來源的癌癥中改 變，并且已知粘液的產(chǎn)生為一種負(fù)性預(yù)后因子。組成粘液屏障的分泌和跨膜粘液素被認(rèn)為 促進(jìn)腫瘤發(fā)展。
[0005] 腹膜假粘液瘤（"PMP"）是以腹部被由在闌尾中最常出現(xiàn)的腫瘤所產(chǎn)生的粘液素 逐漸填滿為特征的綜合癥。這種腹部填滿引起重大的不適，并且在嚴(yán)重的情況下可導(dǎo)致患 者的死亡。通常，進(jìn)行重復(fù)的減量手術(shù)。然而，這具有發(fā)病率增高并且甚至死亡的后果。
[0006] 血凝塊（血栓）的形成是一些嚴(yán)重疾病的基礎(chǔ)，如心肌梗塞、冠狀動脈疾病、中風(fēng)、 大塊肺栓塞和急性肢體缺血?；忌涎ㄐ纬傻目赡苄砸部赡茉谘b有支架的患者中增加。
[0007] 抗凝血藥物（如肝素和華法令）可以用來治療血栓形成。然而，這種抗凝血劑僅 抑制血栓的形成或抑制既有血栓的生長。
[0008] 因此，有需要治療涉及粘液素的疾病并且為患涉及粘液素疾病的患者提供更好的 結(jié)果。此外，有需要治療涉及血栓的病癥并且為患涉及血栓病癥的患者提供更好的結(jié)果。 目前意外地發(fā)現(xiàn)，包含菠蘿蛋白酶中的一種或多種化合物和至少一種粘液溶解劑的組合物 在降低粘液素的產(chǎn)生和幫助從體內(nèi)去除粘液素中是有效的，對腫瘤生長具有直接的抑制效 果，并且可增加化療藥物的細(xì)胞毒性。
[0009] 此外，意外地發(fā)現(xiàn)，包含菠蘿蛋白酶中的一種或多種化合物和至少一種粘液溶解 劑的組合物在血栓的溶解中是有效的。
[0010] 發(fā)明概述
[0011] 根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了組合物，其包含：
[0012] 菠蘿蛋白酶中的一種或多種化合物，或其代謝物、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或 前藥；和
[0013] 至少一種粘液溶解劑，或其代謝物、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥。
[0014] 菠蘿蛋白酶（"Br"）為菠蘿植物（Ananas Comosus)的提取物，其據(jù)信包含多種硫 醇蛋白酶并且已知具有體內(nèi)和體外的蛋白水解活性，和抗水腫、抗炎、抗血栓形成和纖維蛋 白溶解活性。Br中的活性因子在生物化學(xué)方面僅具有一部分的表征。由于口服給藥后它的 療效、它的安全性和缺乏不良副作用，Br具有作為治療藥物在患者之中好的依從性。
[0015] Br中的一種或多種化合物也被理解為Br中包含的全部化合物。
[0016] 粘液溶解劑為溶解粘液的物質(zhì)并且通常用來幫助減輕呼吸困難。這樣的粘液溶 解劑的實例包括N-乙酰半胱氨酸（"NAC"）、nac ystelyn，巰基乙基磺酸、羧甲半胱氨酸、 N-acystelyn、厄多司坦、阿法鏈道酶、凝溶膠蛋白、胸腺素、葡聚糖和肝素。
[0017] NAC也是抗氧化劑和抗遺傳毒性劑，并且在人中，主要對呼吸疾病，很好地建立了 長期高劑量的安全性。優(yōu)選地，本發(fā)明的粘液溶解劑為NAC。
[0018] 根據(jù)第一方面的組合物，其中組合為協(xié)同組合。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明的第二方面，提供了根據(jù)本發(fā)明的第一方面所述的組合物，還包含至 少一種其他生物活性化合物，或其代謝物、藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或前藥。
[0020] 化療劑為癌癥的治療中使用的藥劑。這樣的化療劑的實例包括放線菌素、全反式 維甲酸、阿扎胞苷、咪唑硫嘌呤、博來霉素、硼替佐米、順羧酸鉑、卡培他濱、順鉬、苯丁酸氮 芥、環(huán)磷酰胺、阿糖胞苷、柔毛霉素、多西他賽、去氧氟尿苷、阿霉素、表阿霉素、埃博霉素、依 托泊苷、氟尿嘧啶（5-FU)、吉西他濱、羥基脲、去甲氧基柔紅霉素、伊馬替尼、二氯甲基二乙 胺、巰嘌呤、甲氨蝶呤、米托蒽醌、奧沙利鉑、紫杉醇、培美曲塞、替尼泊苷、硫鳥嘌呤、戊柔比 星、長春花堿、長春新堿、長春地辛、長春瑞濱和5FU。
[0021] 優(yōu)選地，本發(fā)明的化療劑為順鉑。
[0022] 根據(jù)第二方面所述的組合物，其中組合為協(xié)同組合。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明的第三方面，提供了菠蘿蛋白酶中的一種或多種化合物，根據(jù)本發(fā)明 的第一方面的至少一種粘液溶解劑，和任選的根據(jù)本發(fā)明的第二方面的至少一種生物活性 化合物的組合制劑，用于在治療中同時、分別或依次使用。
[0024] 根據(jù)本發(fā)明的第四方面，提供作為藥物使用的根據(jù)本發(fā)明的第一或第二方面所述 的組合物。
[0025] 根據(jù)本發(fā)明的第五方面，提供用于治療一種或多種涉及粘液素的疾病或用于治療 一種或多種涉及血栓的疾病的根據(jù)本發(fā)明的第一或第二方面的組合物。
[0026] 根據(jù)本發(fā)明的第六方面，提供本發(fā)明的第一或第二方面的組合物在制備用于治療 一種或多種涉及粘液素的疾病或用于治療一種或多種涉及血栓的疾病的藥物中的用途。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明的第七方面，提供了治療一種或多種涉及粘液素的疾病或治療一種或 多種涉及血栓的疾病的方法，所述方法包括對有需要的患者施用治療有效量的本發(fā)明的第 一或第二方面所述的組合物。
[0028] 本發(fā)明的組合物可以用來治療任何涉及粘液素的疾病，如癌癥、腹膜假粘液瘤、 膠耳、囊胞性纖維癥、痰滯留、胸腔感染和與膽/胰腺支架有關(guān)的粘液，并且可以用來治療 任何涉及血栓的疾病，如血友病、心肌梗塞、冠狀動脈疾病、中風(fēng)、大塊肺栓塞和急性肢體缺 血、支架相關(guān)的血栓形成或關(guān)節(jié)血腫。
[0029] 本發(fā)明的組合物可以用來治療任何粘液素分泌癌癥，如肺癌、乳腺癌、結(jié)腸直腸 癌、甲狀腺癌、前列腺癌、胃癌、胰腺癌、闌尾的癌癥和卵巢癌。
[0030] 本發(fā)明的組合物可以用來治療腺癌。特別地，腺癌可為印戒細(xì)胞癌。
[0031] 根據(jù)本發(fā)明的第八方面，提供了使用根據(jù)本發(fā)明的第一或第二方面所述的組合物 從有需要的患者中去除粘液素的方法。
[0032] 粘液素家族包括含有串聯(lián)重復(fù)序列結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，所述結(jié)構(gòu)具有尚比例的腫氣 酸、蘇氨酸和絲氨酸（其構(gòu)成PTS結(jié)構(gòu)域）。粘液素由PTS結(jié)構(gòu)域通過在蘇氨酸和絲氨酸殘 基上的GalNAC 0-連接以及其它連接的廣泛糖基化來進(jìn)一步界定。人粘液素（MUC)家族由 命名MUC1-MUC2的成員組成，它們已經(jīng)被亞分類為分泌型和跨膜型。
[0033] 分泌型粘液素（例如，MUC2、MUC5AC、MUC5B和MUC6)可形成物理屏障，其作為粘液 膠質(zhì)為襯于呼吸道和胃腸道以及形成如肝臟、乳腺、胰腺和腎臟的器官的導(dǎo)管表面的上皮 細(xì)胞提供保護(hù)。
[0034] 跨膜型粘液素（例如，MUC1、MUC4、MUC13和MUC16)具有單跨膜區(qū)，并且有助于保 護(hù)的粘液膠質(zhì)穿過它們〇-糖基化的串聯(lián)重復(fù)序列的胞外區(qū)域，形成桿狀結(jié)構(gòu)，從細(xì)胞表面 延伸大于l〇〇nm并且超出多糖蛋白質(zhì)復(fù)合物~10nm〇
[0035] MUC1在高比例的癌和某些血液學(xué)惡性腫瘤中異常表達(dá)，使MUC1過表達(dá)成為人類 癌癥中多種常見改變之一。
[0036] 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)具有不同粘液素分泌類型的HT29結(jié)腸癌的克隆對常見化療藥物5FU和 甲氨蝶呤具有不同程度的抗性。在具有結(jié)腸直腸癌粘液性組織學(xué)的患者中，具有賦予對5FU 的抗性的結(jié)腸免疫反應(yīng)性的粘液素（大部分為MUC2)和具有賦予對甲氨蝶呤的抗性的胃部 反應(yīng)性的粘液素與對化療和存活的不良應(yīng)答率有關(guān)。已知粘液素阻礙5FU針對人胰腺癌細(xì) 胞生長的細(xì)胞毒性效應(yīng)。因此，粘液素可作為限制化療作用的細(xì)胞屏障。這通過以下事實 被進(jìn)一步證明：抑制粘液素0-糖基化增強(qiáng)5FU針對胰腺癌細(xì)胞系的細(xì)胞毒性效應(yīng)，但對粘 液素缺陷細(xì)胞系沒有這樣的增強(qiáng)效果。
[0037] 附圖簡述
[0038] 圖1顯示NAC、Br以及NAC和Br的組合對PMP粘液素的作用。
[0039] 圖2顯示用NAC和Br的組合處理后三個小時，剩余的粘液素的重量百分比。
[0040] 圖3顯示NAC和Br的組合對軟粘液素的作用。
[0041] 圖4-6顯示在裸鼠中NAC和Br的組合的體內(nèi)功效。
[0042] 圖7顯示NAC和Br的組合對不同細(xì)胞系的體外生長的效果。
[0043] 圖8-10顯示NAC和Br的組合對化療的效果。
[0044] 圖11和12顯示NAC和Br的組合對MUC1細(xì)胞系的細(xì)胞毒性化療的效果。
[0045] 定義
[0046] "鹵素"表示氟、氯、溴或碘，優(yōu)選氟或氯。
[0047] "烴基"表示脂肪族碳?xì)浠鶊F(tuán)，其可以是直鏈的或分支的，并且在鏈中包含約1至約 20個碳原子。優(yōu)選的烴基基團(tuán)在鏈中含有約1-約12個碳原子。更優(yōu)選的烴基基團(tuán)在鏈中 含有約1-約6個碳原子。分支表示一種或多種低級烴基基團(tuán)（如甲基、乙基或丙基）附接 于直鏈烴基鏈。"低級烴基"表示在鏈中含有約1-約6個碳原子的基團(tuán)，其可以為直鏈的或 分支的。
[0048] "芳基"，自身或作為另一取代基的一部分，表示芳香族環(huán)狀碳?xì)浠鶊F(tuán)。優(yōu)選的芳基 具有6-10個碳原子。術(shù)語"芳基"包括多環(huán)系以及單環(huán)系。在本發(fā)明中使用的優(yōu)選的芳基 包括苯基和萘基。術(shù)語"芳基"也包括部分為芳香族的稠合的環(huán)狀碳?xì)洵h(huán)（即，稠合的環(huán)之 一為芳香族的并且另一為非芳香族的）。部分為芳香族的示例性芳基為茚滿基。
[0049] "雜芳基"，自身或作為另一取代基的一部分，表示含有5至12個選自C、N