賽特鉑的環(huán)糊精復(fù)合物及制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及鉑類抗腫瘤藥物賽特鉑的環(huán)糊精復(fù)合物及制備方法，屬于抗腫瘤藥物 及其制劑領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 賽特鉑（Satraplatin)代號JM216,化學(xué)名稱為順，反，順-二氯-二乙酸-氨， 環(huán)己胺合鉬（IV)，英文名稱為 bis(acetato)amminedichloro(cyclohexylamine) platinum(IV)。賽特鉬在水中的溶解度很小，低于0. 5mg/ml。
[0003] 賽特鉑是第一個進(jìn)入臨床研宄的具有口服活性的鉑類抗腫瘤藥物，目前已進(jìn)入III 期臨床研宄。
[0004] 賽特鉑是單核Pt (IV)混氨配合物，結(jié)構(gòu)式為：
[0005]
[0006] 環(huán)糊精（CDs)是由葡萄糖單元環(huán)合后由α (1，4)_葡萄糖苷單元組成的環(huán)狀低聚 糖。常見的有α-、β-、γ-環(huán)糊精以及取代獲得的環(huán)糊精，如羥丙基-β-環(huán)糊精等，其中 α_環(huán)糊精空腔最小，Y-環(huán)糊精空腔最大，而環(huán)糊精被認(rèn)為適合于大多數(shù)常見藥物的 包合。
[0007] 環(huán)糊精是一種環(huán)形圓錐臺狀分子，具有極性親水的外表面和一個疏水的非極性空 腔，由于這種特殊的結(jié)構(gòu)，環(huán)糊精的疏水空腔能夠容納適宜的客分子，通過非共價結(jié)合形成 復(fù)合物。這種主/客分子的相互結(jié)合是基于疏水性的分子間的相互作用力，形成的復(fù)合物 可以改善難溶藥物的溶解特性、穩(wěn)定性和生物活性。
[0008] 很多藥物的溶解特性可以通過環(huán)糊精包裹而得到改善，因此，本發(fā)明制備了賽特 鉑的環(huán)糊精復(fù)合物，可以改善賽特鉑的水溶性和穩(wěn)定性，同時保留或提高賽特鉑的抗腫瘤 活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明公開了一種賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物的空間結(jié)構(gòu)及制備方法，該復(fù)合物的結(jié)構(gòu) 通過核磁共振（NMR)、傅氏轉(zhuǎn)換紅外線光譜分析儀（FTIR)、熱重分析儀（TGA)、X射線衍射 (XRD)、掃描電鏡（SEM)以及量子化學(xué)計算方法等手段得到確證。
[0010] 上述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物制備方法為：將一定配比的賽特鉑和環(huán)糊精溶解在良溶 劑中，攪拌一段時間后過濾除去不溶物，然后將濾液進(jìn)行真空濃縮或者冷凍干燥即可獲得 賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物。
[0011] 上述一定配比的賽特鉑和環(huán)糊精指賽特鉑的物質(zhì)的量和環(huán)糊精的物質(zhì)的量之比， 可以等于、小于或者大于1:1，其中優(yōu)選2:1。
[0012] 上述良溶劑，可以指水、甲醇、乙醇、甘油、1，2-丙二醇、異丙醇和聚乙二醇等單一 或者混合溶劑，其中優(yōu)選乙醇水溶液，但不局限于此。
[0013] 上述乙醇水溶液優(yōu)選體積比為乙醇：水（V: V) = 1:5。
[0014] 上述過濾操作是指采用0. 45 μ m微孔薄膜過濾器過濾，可制得粒徑小于0. 5 μ m的 賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，但不局限于此。
[0015] 采用上述方法可以制備賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，該復(fù)合物的物理化學(xué)性質(zhì)不同于賽 特鉑和環(huán)糊精的物理混合物。
[0016] 上述環(huán)糊精包括未經(jīng)修飾或者天然的α -、β -、γ -環(huán)糊精，以及通過化學(xué)修飾獲 得的環(huán)糊精，其中優(yōu)選環(huán)糊精。
[0017] 上述物理混合物是通過將一定量粉末狀的賽特鉑與固體環(huán)糊精混勻而成，其中比 例優(yōu)選1:1。
[0018] 上述復(fù)合物的物理化學(xué)性質(zhì)指光譜性質(zhì)、熱穩(wěn)定等。
[0019] 上述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物中，賽特鉑和環(huán)糊精按1:1結(jié)合而成。
[0020] 上述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，賽特鉑部分或者全部基團(tuán)嵌入到環(huán)糊精疏水腔內(nèi)，形 成穩(wěn)定的復(fù)合物，其中通過賽特鉑的環(huán)己烷部分嵌入形成的復(fù)合物更穩(wěn)定。
[0021] 上述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物中，賽特鉑保留了原有的結(jié)構(gòu)。
[0022] 核磁共振（NMR)、傅氏轉(zhuǎn)換紅外線光譜分析儀（FTIR)、Χ射線衍射（XRD)、掃描電鏡 (SEM)等研宄結(jié)果表明，采用上述制備方法，賽特鉑與環(huán)糊精確實形成了復(fù)合物，不同于一 般的物理混合物。
[0023] 熱重分析結(jié)果進(jìn)一步表明上述制備方法可以獲得賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，形成的復(fù) 合物熱穩(wěn)定性發(fā)生改變。
[0024] 上述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物可以改善賽特鉑的溶解特性，室溫下，復(fù)合物與賽特鉑 相比，在水中的溶解度顯著提升。
[0025] 上述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物可以提高賽特鉑的穩(wěn)定性，包括在酸性或者堿性溶液中 的穩(wěn)定性。
[0026] 上述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物可以改善或者保留賽特鉑的抗腫瘤活性。
[0027] 上述抗腫瘤活性是指對肺癌、乳腺癌等癌細(xì)胞株或異種移植瘤的體外或者體內(nèi)抗 癌活性，例如Α549和MCF-7細(xì)胞株。
[0028] 上述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物可用于制備賽特鉑注射劑、口服制劑等，包括干粉、凍干 粉、水針劑、混懸劑、固體口服劑等多種劑型。
【附圖說明】
[0029] 附圖1 :賽特鉑和環(huán)糊精形成的較穩(wěn)定的復(fù)合物結(jié)構(gòu)。
[0030] 附圖2 :XRD圖像（a)賽特鉬、(b) β -環(huán)糊精、（c)賽特鉑和β -環(huán)糊精復(fù)合物、（d) 賽特鉑和β-環(huán)糊精的物理混合物。
[0031] 附圖3 :FTIR圖像（a)賽特鉬、（b) β -環(huán)糊精、（c)賽特鉑和β -環(huán)糊精復(fù)合物、 (d)賽特鉑和β-環(huán)糊精的物理混合物。
[0032] 附圖4 :SEM圖（a)賽特鉬、（b) β -環(huán)糊精、（c)賽特鉑和β -環(huán)糊精復(fù)合物、（d) 賽特鉑和β-環(huán)糊精的物理混合物。
【具體實施方式】
[0033] 本實施例在于說明本發(fā)明創(chuàng)造的可行性，而非限制本發(fā)明。在本發(fā)明方法的前提 下，對發(fā)明的任何改動均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。
[0034] 實施例1
[0035] 賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物的制備及確證
[0036] 乙醇和水按1:5(v/v)混合配制7ml乙醇水溶液，將0. 02mM賽特鉑和0. ΟΙΜπιβ -環(huán) 糊精溶于其中，室溫攪拌5天后蒸發(fā)除去乙醇，采用0. 45 μ m微孔薄膜過濾器過濾除去不溶 物，濾液真空濃縮并干燥獲得賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物。
[0037] 依據(jù)相溶解特性和等摩爾濃度變化法可以確定，賽特鉑和β-環(huán)糊精按1:1結(jié)合 而成。
[0038] 對比賽特鉑、β -環(huán)糊精、物理混合物和復(fù)合物的核磁共振譜中（1H-NMR)氫化學(xué)位 移可以確定，賽特鉑和β-環(huán)糊精確實形成了復(fù)合物，不同于簡單的物理混合物。
[0039] 對比賽特鉑、β -環(huán)糊精、物理混合物和復(fù)合物的紅外光譜圖可以確定，賽特鉑和 β-環(huán)糊精確實形成不同于物理混合物的復(fù)合物。
[0040] 對比賽特鉑、β -環(huán)糊精、物理混合物和復(fù)合物的掃描電鏡圖像可以確定，賽特鉑 為不規(guī)則晶體，β-環(huán)糊精是不規(guī)則粒狀結(jié)構(gòu)，兩者的物理混合物同時呈現(xiàn)出兩者的形態(tài)， 而復(fù)合物則表現(xiàn)為緊湊均勻的片狀結(jié)構(gòu)，賽特鉑和β-環(huán)糊精各自的晶態(tài)均消失。
[0041] 對比賽特鉑、β -環(huán)糊精、物理混合物和復(fù)合物的X射線衍射圖像，可以確定該制 備方法確實獲得了兩者的復(fù)合物，其XRD圖像不同于物理混合物的XRD圖像。
[0042] 熱重分析結(jié)果顯示，賽特鉑、β -環(huán)糊精、物理混合物和復(fù)合物的熱分解溫度均不 相同，說明形成復(fù)合物后熱穩(wěn)定性發(fā)生改變。
[0043] 實施例2
[0044] 賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物的制備及確證
[0045] 乙醇和水按1:5 (v/v)混合配制7ml乙醇水溶液，將0. 02mM賽特鉑和0.0 lMm羥丙 基-β -環(huán)糊精溶于其中，室溫攪拌5天后蒸發(fā)除去乙醇，采用0. 45 μ m微孔薄膜過濾器過 濾除去不溶物，濾液真空濃縮并干燥獲得賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物。
[0046] 依據(jù)相溶解特性和等摩爾濃度變化法可以確定，賽特鉑和羥丙基環(huán)糊精按 1:1結(jié)合而成。
[0047] 對比賽特鉑、羥丙基-β -環(huán)糊精、物理混合物和復(fù)合物的核磁共振譜中（1H-NMR) 氫化學(xué)位移可以確定，賽特鉑和羥丙基-β-環(huán)糊精確實形成了復(fù)合物，不同于簡單的物理 混合物。
[0048] 對比賽特鉑、羥丙基環(huán)糊精、物理混合物和復(fù)合物的紅外光譜圖可以確定， 賽特鉑和β-環(huán)糊精確實形成不同于物理混合物的復(fù)合物。
[0049] 對比賽特鉑、羥丙基環(huán)糊精、物理混合物和復(fù)合物的X射線衍射圖像，可以確 定該制備方法確實獲得了兩者的復(fù)合物，其XRD圖像不同于物理混合物的XRD圖像。
[0050] 熱重分析結(jié)果顯示，賽特鉑、羥丙基-β-環(huán)糊精、物理混合物和復(fù)合物的熱分解 溫度均不相同，說明形成復(fù)合物后熱穩(wěn)定性發(fā)生改變。
[0051] 實施例3
[0052] 賽特鉑/ β -環(huán)糊精復(fù)合物溶解度測定
[0053] 取過量的賽特鉑/ β -環(huán)糊精復(fù)合物于2ml水中，攪拌lh，過濾除去不溶物后減壓 濃縮干燥，稱量殘留物的重量計算溶解度。
[0054] 上述賽特鉑/ β -環(huán)糊精復(fù)合物在水中的溶解度是7. 4mg/ml (室溫）。
【主權(quán)項】
1. 賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，其特征在于：賽特鉑和環(huán)糊精按1:1的化學(xué)計量比結(jié)合而成。2. 權(quán)利要求1所述的賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，其特征在于：所述的環(huán)糊精包括未經(jīng)修飾 或者天然的a-、0-、y -環(huán)糊精，以及通過化學(xué)修飾獲得的環(huán)糊精，例如羥丙基-0 -環(huán)糊 精等，其中優(yōu)選環(huán)糊精。3. 權(quán)利要求1所述的賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，其特征在于：賽特鉑部分或者整體嵌入到 環(huán)糊精疏水腔內(nèi)，形成穩(wěn)定的復(fù)合物，其中賽特鉑的環(huán)己烷部分嵌入形成的復(fù)合物更穩(wěn)定。4. 權(quán)利要求1所述的賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，其特征在于：提高賽特鉑的水溶性和穩(wěn)定 性的同時保留或者提高了賽特鉑的抗腫瘤活性。5. 權(quán)利要求1所述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物在制備抗肺癌、乳腺癌等癌細(xì)胞株或者異種移 植瘤的體內(nèi)或者體外抗癌活性藥物中的應(yīng)用。6. 賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物的制備方法，其特征在于：將一定配比的賽特鉑和環(huán)糊精溶解 在良溶劑中，攪拌一段時間后過濾除去不溶物，然后將濾液進(jìn)行真空濃縮或者冷凍干燥即 可獲得賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物。7. 權(quán)利要求6所述的賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物的制備方法，其特征在于：所述的一定配比 的賽特鉑和環(huán)糊精指賽特鉑的物質(zhì)的量和環(huán)糊精的物質(zhì)的量之比，可以等于、小于或者大 于1:1，其中優(yōu)選2:1。8. 權(quán)利要求6所述的賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物的制備方法，其特征在于：所述的良溶劑，可 以是水、甲醇、乙醇、甘油、1，2-丙二醇、異丙醇和聚乙二醇等單一或者混合溶劑，其中優(yōu)選 乙醇水溶液。9. 權(quán)利要求8賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物的制備方法，其特征在于：所述的乙醇水溶液優(yōu)選 體積比為乙醇：水（v:v) = 1:5。10. 權(quán)利要求1所述的賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，可用于制備賽特鉑注射劑、口服制劑等， 包括干粉、凍干粉、水針劑、混懸劑、固體口服劑等多種劑型。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種賽特鉑的環(huán)糊精復(fù)合物及制備方法,屬于鉑類抗腫瘤藥物。采用一種特定的方法以及一種特定的環(huán)糊精可以制得上述賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物，此復(fù)合物由賽特鉑和環(huán)糊精按1:1的化學(xué)計量比結(jié)合而成，賽特鉑部分或全部嵌入到環(huán)糊精空腔內(nèi)形成穩(wěn)定的復(fù)合物，不僅提高了賽特鉑的水溶性和穩(wěn)定性，而且保持或者增加了賽特鉑的體內(nèi)或體外抗腫瘤活性。此復(fù)合物的制備方法為：將一定配比的賽特鉑和環(huán)糊精溶解在良溶劑中，攪拌一段時間后過濾除去不溶物，然后將濾液進(jìn)行真空濃縮或者冷凍干燥即可獲得賽特鉑環(huán)糊精復(fù)合物。
【IPC分類】C12N5/09, A61P35/00, A61K31/282, A61K47/40
【公開號】CN104984356
【申請?zhí)枴緾N201510250273
【發(fā)明人】王應(yīng)飛, 金毅, 陳宏 , 林軍, 張琪, 李宗浩, 黃天俊, 繆祥宏
【申請人】昆明貴研藥業(yè)有限公司
【公開日】2015年10月21日
【申請日】2015年5月14日