一種針對雞胚的禽呼腸孤病毒抑制方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及畜牧養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種針對雞胚的禽呼腸孤病毒抑制方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 禽類蛋源性疾病是指禽類在胚胎階段由傳染性病原微生物所引起、可經(jīng)由受精卵 垂直傳播的疾病。雞病毒性關(guān)節(jié)炎是由禽呼腸孤病毒（Avian reovirus，ARV)引起的一種 雞傳染病。主要癥狀是病雞跛行、蹲坐、不愿走動，脛跗關(guān)節(jié)上方腱索腫大、趾屈腱鞘和趾伸 肌腱腫脹，嚴(yán)重者腓腹肌腱斷裂，可導(dǎo)致死亡。由于病雞運(yùn)動障礙、生長停滯、淘汰率增加， 使喪失經(jīng)濟(jì)價(jià)值的雞高達(dá)30 %~50%。它是蛋源性垂直傳播的疾病，尤其當(dāng)ARV與其他病 原體混合感染時(shí)，病死率顯著升高，給養(yǎng)雞業(yè)造成了嚴(yán)重危害和巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
[0003] 傳染性疾病是目前危害我國禽類養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要疾病，尤其是病毒性疾病的危 害嚴(yán)重。在禽病防治中，各種藥物的應(yīng)用對降低禽病的發(fā)生和禽病的治療起到了積極的作 用，但是新型藥物的開發(fā)相對滯后?，F(xiàn)有技術(shù)中，雞a干擾素作為重要的細(xì)胞因子，擁有抗 腫瘤以及免疫調(diào)節(jié)等作用，是針對相關(guān)疾病比較理想的治療藥物?，F(xiàn)有技術(shù)認(rèn)為，干擾素并 不直接殺傷或抑制病毒，而主要是通過細(xì)胞表面受體作用使細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白，也就是 說，干擾素通常依托于獨(dú)立生命體的成熟免疫系統(tǒng)發(fā)揮作用、并非像抗生素那樣獨(dú)立具有 抗菌性質(zhì)，因此現(xiàn)有技術(shù)中對干擾素的應(yīng)用普遍僅限于對機(jī)體免疫功能的輔助和調(diào)節(jié)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明旨在針對現(xiàn)有技術(shù)的技術(shù)缺陷，提供一種針對雞胚的禽呼腸孤病毒抑制方 法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中難以在雞胚階段對禽呼腸孤病毒進(jìn)行有效抑制的技術(shù)問題。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)以上技術(shù)目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
[0006] -種針對雞胚的禽呼腸孤病毒抑制方法，該方法是對雞胚注射雞a干擾素。
[0007] 優(yōu)選的，所述雞胚處于9~11日齡。
[0008] 優(yōu)選的，注射劑量為20~40 y g，更優(yōu)的是30 y g。
[0009] 優(yōu)選的，所述雞胚為已經(jīng)感染禽呼腸孤病毒的雞胚。
[0010] 優(yōu)選的，所述雞胚為SPF雞胚。
[0011] 本發(fā)明創(chuàng)新性的通過對雞胚注射雞a干擾素，使得雞胚對禽呼腸孤病毒的抵御 作用顯著增強(qiáng)，明顯抑制了禽呼腸孤病毒的增殖。在優(yōu)選技術(shù)方案中，優(yōu)選為9~11日齡 是發(fā)現(xiàn)該條件下注射雞a干擾素對病毒的抑制效果最好；優(yōu)選為20~40 yg的劑量既能 夠保證優(yōu)異的病毒抑制效果又確保安全性；此外，本發(fā)明方法既可以用于染病雞胚的病毒 抑制，也可以用于健康雞胚對病毒的預(yù)防。本發(fā)明巧妙的利用雞a干擾素對雞胚中禽呼腸 孤病毒進(jìn)行抑制，能夠在避免耐藥性問題的基礎(chǔ)上加強(qiáng)畜禽免疫能力，本發(fā)明效果突出，同 時(shí)成本較低、易于實(shí)現(xiàn)，因此具有突出的推廣前景。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 以下將對本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】進(jìn)行詳細(xì)描述。為了避免過多不必要的細(xì)節(jié)，在 以下實(shí)施例中對屬于公知的結(jié)構(gòu)或功能將不進(jìn)行詳細(xì)描述。除有定義外，以下實(shí)施例中所 用的技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與本發(fā)明所屬領(lǐng)域技術(shù)人員普遍理解的相同含義。
[0013] 實(shí)施例1
[0014] 1、禽呼腸孤病毒的EID5。的測定
[0015] 將禽呼腸孤病毒液用滅菌生理鹽水分別作10倍系列稀釋，取10 6、10 7、10 8和 10 94個(gè)稀釋度各絨毛尿囊膜內(nèi)接種9~11日齡SPF雞胚5個(gè)，每胚0. 2ml，置37°C繼續(xù)孵 育7日，24小時(shí)以前死亡的雞胚棄去不計(jì)，在48~120小時(shí)死亡的雞胚隨時(shí)取出，觀察判定 病變，計(jì)算ELD 5°。
[0016] 禽呼腸孤病毒含量經(jīng)計(jì)算為l(f°ELD5Q/0. 2ml。
[0017] 2、雞a干擾素在雞胚中對禽呼腸孤病毒復(fù)制的影響
[0018] 將10日齡SPF的雞胚分成4組，每組6枚。第1組同時(shí)接種30ug的雞a干擾素 和IOOEID 5。的禽呼腸孤病毒液；第2組先接種100EID 5。的禽呼腸孤病毒液，30小時(shí)后接種 30ug雞a干擾素；第3組只接種IOOEID5。的禽呼腸孤病毒液作為對照；第4組接種30ug 干擾素。放入孵箱中孵化，記錄雞胚死亡情況。結(jié)果如表1所示：
[0019] 表1雞a干擾素在雞胚中對禽呼腸孤病毒復(fù)制的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0020]
[0022] 如表1所示，第1組雞胚的平均死亡時(shí)間在54小時(shí)左右；第2組的平均死亡時(shí)間 在43小時(shí)左右，第3組陽性對照組的平均死亡時(shí)間在37h左右；第4組雞胚生長正常。加 入了雞a干擾素的雞胚平均死亡時(shí)間都比陽性對照組晚。隨著接入雞a干擾素時(shí)間的不 同，第1組和第2組的平均死亡時(shí)間也有不同；接入雞a干擾素后能延長感染雞胚的死亡 時(shí)間，且雞a干擾素接入時(shí)間的不同，死亡時(shí)間也有不同。同時(shí)接入雞a干擾素和病毒液 的雞胚死亡時(shí)間比先接入病毒后接入雞a干擾素的存活時(shí)間要長一些。由此可見，對雞胚 注射雞a干擾素能夠顯著抑制禽呼腸孤病毒的增殖。
[0023] 實(shí)施例2
[0024] -種針對雞胚的禽呼腸孤病毒抑制方法，該方法對雞胚注射雞a干擾素。其中所 述雞胚處于9日齡；注射劑量為20 y g ;所述雞胚為已經(jīng)感染禽呼腸孤病毒的雞胚。
[0025] 實(shí)施例3
[0026] -種針對雞胚的禽呼腸孤病毒抑制方法，該方法對雞胚注射雞a干擾素。其中所 述雞胚處于11日齡；注射劑量為40 y g ;所述雞胚為SPF雞胚。
[0027] 實(shí)施例4
[0028] -種針對雞胚的禽呼腸孤病毒抑制方法，該方法對雞胚注射雞a干擾素。
[0029] 以上對本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)說明，但所述內(nèi)容僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例， 并不用以限制本發(fā)明。凡在本發(fā)明的申請范圍內(nèi)所做的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng) 包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種針對雞胚的禽呼腸孤病毒抑制方法，其特征在于對雞胚注射雞a干擾素。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述雞胚處于9~11日齡。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于注射劑量為20~40yg。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述雞胚為已經(jīng)感染禽呼腸孤病毒的雞 胚。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述雞胚為SPF雞胚。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種針對雞胚的禽呼腸孤病毒抑制方法，該方法創(chuàng)新性的通過對雞胚注射雞α干擾素，使得雞胚對禽呼腸孤病毒的抵御作用顯著增強(qiáng)，明顯抑制了禽呼腸孤病毒的增殖。在優(yōu)選技術(shù)方案中，優(yōu)選為9～11日齡是發(fā)現(xiàn)該條件下注射雞α干擾素對病毒的抑制效果最好；優(yōu)選為20～40μg的劑量既能夠保證優(yōu)異的病毒抑制效果又確保安全性；此外，本發(fā)明方法可用于染病雞胚的病毒抑制。本發(fā)明巧妙的利用雞α干擾素對雞胚中禽呼腸孤病毒進(jìn)行抑制，能夠在避免耐藥性問題的基礎(chǔ)上加強(qiáng)畜禽免疫能力，本發(fā)明效果突出，同時(shí)成本較低、易于實(shí)現(xiàn)，因此具有突出的推廣前景。
【IPC分類】A61K38/21, A61P31/14
【公開號】CN105031620
【申請?zhí)枴緾N201510411853
【發(fā)明人】張永欣, 蘇建東, 楊保收, 付旭彬, 梁武
【申請人】天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司
【公開日】2015年11月11日
【申請日】2015年7月14日