青錢柳提取物在制備防治非酒精性脂肪肝的藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及青錢柳提取物的新用途，尤其涉及青錢柳提取物在制藥領域的新用 途，確切地說是青錢柳提取物在制備防治非酒精性脂肪肝的藥物/保健品中的用途。
【背景技術】
[0002] 非酒精性脂肪肝（non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD)是一種無過量飲 酒史而以肝實質(zhì)細胞脂肪變性和脂肪貯積為特征的臨床綜合征。它是目前最常見的慢性肝 病。其基本病程包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纖維化，最終可能發(fā)展成脂肪性 肝硬化及脂肪性肝癌，可能導致過早的死亡。全球約有20~40%的NAFLD患者，且數(shù)量在 不斷上升并呈現(xiàn)低齡化趨勢。NAFLD是肝臟對代謝綜合征的反應，與肥胖、二型糖尿病、心血 管疾病的發(fā)病息息相關，肥胖癥患者NAFLD患病率為65~95 %，2型糖尿病患者NAFLD患 病率為28~55%和27~92%。因NAFLD發(fā)病具有隱匿性、迀延性、普遍性，且其病變的危 害性較大，故對其病防治成為世界專業(yè)人士努力的方向。
[0003] 改變生活方式，干預飲食和運動能有效控制NAFLD，被普遍推薦用以疾病的初級階 段的改善，但實施有困難，往往無法達到預期的效果，且對肝纖維化，肝硬化患者療效不明 顯。因此，有效的藥物治療必不可少。臨床常通過增加胰島素敏感、改善胰島素抵抗（如類 雙胍、噻唑烷二酮類），降低血脂（他汀類、貝特類），抗氧化（維生素E)來治療非酒精性脂 肪肝。但因這些藥物或存在副作用，或加劇肝臟負擔，或藥效欠佳，使用上受到限制。目前 尚未有批準的治療NAFLD藥物。因此，開發(fā)安全有效的NAFLD治療藥物和保健產(chǎn)品具有重 要的創(chuàng)新意義及臨床使用價值。
[0004]青錢柳（CyclocaryapaliurusBatal.)為胡桃科（Juglandaceae)青錢柳屬植 物，廣泛分布于江西、廣西等地。它是一種高大速生落葉喬木，葉甘甜滋潤，能生津止渴、清 熱解暑。長期以來民間用青錢柳葉作茶湯，當?shù)厝嗣耖L壽，鮮有代謝類疾病，稱之為"甜茶"、 "神茶"，可見青錢柳具有多種對人體有益的生理活性和藥理功能，且無毒副作用。以青錢柳 為原料生產(chǎn)的保健茶是我國第1個獲得美國FDA認可的保健茶。近年來，國內(nèi)外學者對青 錢柳的理化成分及保健功能在動物水平及臨床試驗初步研究，表明青錢柳及相關保健產(chǎn)品 具有多種有益的藥理作用和保健效果，包括降壓、降血糖、減肥、抗腫瘤、抗過敏、增強機體 免疫、抑菌等作用。研究發(fā)現(xiàn)，青錢柳能顯著改善機體脂質(zhì)代謝，起到降低體重、改善血脂和 減少肝臟脂滴的作用，且具有良好的抗炎抗氧化活性，提示青錢柳可能對NAFLD的發(fā)生發(fā) 展起到積極的防治作用。目前，對青錢柳的藥品及保健品開發(fā)多集中于其降血糖功效，而青 錢柳能否有效防治NAFLD尚未有報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明針對NAFLD的治療現(xiàn)狀，提出一種青錢柳提取物的新用途，即青錢柳提取 物在制備防治非酒精性脂肪肝藥物/保健品中的應用，青錢柳提取物能有效改善高脂飼料 導致的NAFLD大鼠肝臟脂質(zhì)水平，對肝臟起到保護作用，為非酒精性脂肪肝的防治提供了 安全高效的選擇。
[0006] 所述的青錢柳提取物可按照各種文獻所記載的方法制備得到，這些都是本領域技 術人員所熟知的技術，此外，青錢柳提取物也可通過各種商業(yè)途徑購買得到。
[0007] 作為參考，青錢柳提取物可按照以下方法制備得到：
[0008] 青錢柳葉干燥藥材經(jīng)純水或0% -100%乙醇或者甲醇（C1-C5脂肪醇）作溶劑提 取，合并提取液，過濾，濃縮。
[0009] 上述提取方法可為：加熱回流、浸漬、滲漉、超聲提取等多種方法。
[0010] 本發(fā)明還提供了青錢柳提取物與藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學 上常用的制劑。
[0011] 本發(fā)明提供的以青錢柳提取物為原料制得的新藥，不僅包括單方制劑，還包括在 復方制劑中添加青錢柳提取物作為活性成分的藥物。
【附圖說明】
[0012] 圖1青錢柳提取物對高脂喂養(yǎng)大鼠肝臟脂質(zhì)積累的影響
【具體實施方式】
[0013] 實施例1:青錢柳提取物的制備
[0014] 青錢柳干燥葉100g，經(jīng)純水1L回流提取3次，每次2h，合并提取液，過濾，回收溶 劑，得青錢柳水提物。
[0015] 實施例2 :青錢柳提取物的制備
[0016] 青錢柳干燥葉250g，經(jīng)80 % (體積/體積）乙醇2L回流提取3次，每次2h，合并 提取液，過濾，揮干后得青錢柳醇提物干燥浸膏。提取率約為20%。
[0017] 實施例3青錢柳提取物對NAFLD的改善作用
[0018]1?材料
[0019] 1.1 動物
[0020] 雄性SD大鼠，180~220g，SPF級，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，許 可證號：SCXK(HU) 2008-0016。
[0021] 1.2 試劑
[0022] 甘油三酯（TG)、總膽固醇（TC)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST)檢測試劑盒 購自南京建成生物工程研究所。
[0023] 1. 3 藥材
[0024] 取青錢柳水提物和醇提物浸膏粉末，分別稀釋或溶解于適量0. 5%羧甲基纖維素 鈉溶液，配制一定濃度的灌胃溶液。
[0025] 2?實驗方法
[0026] 80只健康雄性SD大鼠，適應性喂養(yǎng)一周后按體重隨機分為兩組。其中10只為正常 對照組（NC組），給予正常飼料，其余大鼠飼喂高脂飼料（膽固醇2%，豬油10%，蛋黃10%， 膽酸鈉0. 5%，基礎飼料77. 5% )。6周造模后，將高脂喂養(yǎng)的70只大鼠隨機分為高脂造模 組（HC組）、青錢柳水提物低劑量組（SL組）、中劑量組（SM組）、高劑量組（SH組），青錢柳 醇提物低劑量組（CL組）、中劑量組（CM組）、高劑量組（CH組），每組10只。第七周起，NC 組和HC組每天灌胃0. 5%羧甲基纖維素鈉溶液。SL、SM、SH組每天灌胃青錢柳水提物溶液 (劑量分別為2,4,8g/kg)，CL，CM，CH組每天灌胃青錢柳醇提物溶液（劑量分別為2,4,8g/ kg)。飲食不變。灌胃4周后，所有大鼠禁食12小時，稱重，腹主動脈采血，分離血清，檢測 血清中ALT、AST水平。收集肝臟，測定肝TC、TG水平，并進行肝臟組織學觀察（H&E染色）。
[0027] 3?結(jié)果
[0028] 3. 1大鼠肝功能指標變化
[0029] 如表1所示，HC組大鼠ALT、AST水平較NC組顯著升高（p< 0. 01)，而青錢柳提取 物給藥相比HC組，ALT、AST顯著降低，且呈劑量依賴性。說明青錢柳提取物給藥能有效預 防肝損傷，改善肝功能。
[0030] 表1.青錢柳提取物對高脂喂養(yǎng)大鼠肝功能的影響
[0031]
[0032] 3. 2大鼠肝臟脂質(zhì)水平變化
[0033] 如表2所示，高脂飼料喂養(yǎng)顯著提高大鼠肝臟TC、TG水平（p<0.01)，而青錢柳 提取物給藥顯著降低大鼠肝臟脂質(zhì)水平，且呈現(xiàn)劑量依賴性。說明青錢柳提取物給藥能有 效改善肝臟脂質(zhì)水平。
[0034] 表2.青錢柳提取物對高脂喂養(yǎng)大鼠肝臟脂質(zhì)水平的影響
[0035] LUU36」i；3入畝肝朋；H&b栄巴
[0037]圖1為特征的大鼠肝臟H&E染色結(jié)果。相比正常肝組織，HC組顯示脹大的肝細胞， 不規(guī)則的肝索排列，以及大量脂滴。然而，青錢柳提取物給藥極大程度地改善了肝結(jié)構(gòu)，減 少了高脂飲食導致的肝臟脂質(zhì)堆積，且高劑量肝臟脂滴接近正常水平。說明青錢柳提取物 能有效改善肝臟脂質(zhì)積累，起到治療NAFLD的作用。
【主權項】
1. 青錢柳提取物在制備防治非酒精性脂肪肝的藥物中的應用。2. 權利要求1中所述青錢柳提取物，其制備方法為：青錢柳葉干燥藥材用純水或 0%-100%乙醇或者甲醇（C1-C5脂肪醇）作溶劑提取，合并提取液，過濾，回收溶劑，濃縮。3. 權利要求2中所述提取方法可為：加熱回流、浸漬、滲漉、超聲提取等多種方法。
【專利摘要】本發(fā)明屬于制藥領域，涉及青錢柳提取物在制備防治非酒精性脂肪肝的藥物中的應用。本發(fā)明中青錢柳提取物能有效降低高脂飲食引起的大鼠肝臟脂質(zhì)堆積程度、甘油三酯水平，改善肝組織學、肝功能，說明青錢柳能對非酒精性脂肪肝起到顯著的改善作用，可用于制備防治非酒精性脂肪肝藥物及保健品。本發(fā)明拓展了青錢柳制劑在醫(yī)藥領域的應用范圍，為非酒精性脂肪肝的防治提供了新的選擇。
【IPC分類】A61P1/16, A61K36/52, A23L1/29
【公開號】CN105106300
【申請?zhí)枴緾N201510449789
【發(fā)明人】殷志琦, 林孜, 吳正鳳, 操蘭潔
【申請人】中國藥科大學
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年7月24日