組合物及其在防治肝臟損傷藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明設及有機合成和藥物化學領域，具體設及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術】
[0002] 引起肝損傷的原因有多個：1、病毒感染：由多種肝炎病毒引起，具有傳染性強，傳 播途徑復雜，流行面廣泛，發(fā)病率高等特點。2、藥物或化學毒物：許多藥物和化學毒物都可 引起肝臟損傷，發(fā)生藥物性肝炎或中毒性肝炎。3、醒酒：酒精對肝臟的損害是很嚴重的，損 害的后果包括酒精性肝炎、酒精性脂肪肝、酒精性肝硬化，主要是由于酒精（乙醇）及其代 謝產物乙醒的毒性對肝細胞直接損害造成的。4、其他原因：原發(fā)和繼發(fā)的肝臟腫瘤、屯、功 能不全導致肝臟渺血、某些先天性肝臟疾病、靜脈高價營養(yǎng)等，都可W造成不同程度的肝損 害，運些肝損害的早期表現(xiàn)往往是ALT(轉氨酶）或膽紅素的升高，不桂除病因，肝臟的損害 會進一步加重。目前在我國由于上述原因每年發(fā)生肝損傷的人數(shù)眾多，形勢不容樂觀。急 需研發(fā)高效低毒的防治肝臟損傷藥物。
[0003] 肝臟損傷的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問題，從天然產物中尋 找化合物或先導化合物并進行結構修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物具有 重要價值。
[0004] 本發(fā)明設及的化合物I是一個2011年發(fā)表（AntonellaMaggioetal. , 2011. Artalbicacid,asesquiterpenewithanunusualskeletonfromArtemisia a化a(Asteraceae)fromSicily.TetrahedronLetters, 52(201]_)4543 - 4545)的化合物， 我們對化合物I進行了結構修飾，獲得了兩個新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化 合物HI和化合物IV制備了組合物并對該組合物抗肝臟損傷活性進行了評價，其具有抗肝 臟損傷活性。

【發(fā)明內容】
陽0化]本發(fā)明公開了一個新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合 物中化合物III和化合物IV的質量百分數(shù)分別為10%和90%。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可W制成藥學上可接受的鹽或藥學上可接受的載體。
[0008] 藥效學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗肝臟損傷作用。本發(fā)明的藥學上 可接受的鹽具有同樣的藥效。
[0009] W下通過實施例對本發(fā)明作進一步詳細的說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實 施例的任何限制，而是由權利要求加W限定。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1化合物Arta化icacid的制備 |；0011] 化合物Arta化icacidG)的制備方法參照AntonellaMaggio等人發(fā)表的 文南犬(AntonellaMa邑邑ioetal. , 2011.Artalbicacid,asesquiterpenewithan unusualskeletonfromArtemisiaalba(Asteraceae)fromSicily.Tetrahedron Letters, 52 (2011) 4543 - 4545)的方法。
[0012]
陽01引實施例2Arta化icacid的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0014] 將化合物I(266mg，1.OOmmol)溶于10血苯，向溶液中加入四下基漠化錠燈BAB) (0.08旨)，1，2-二漠乙燒化760旨，20.00臟〇1)和6血的50%氨氧化鋼溶液?；旌衔镌?0 攝氏度攬拌16h。1化之后將反應液倒入冰水中，立即用二氯甲燒萃取兩次，合并有機相 溶液。然后對有機相溶液依次用水和飽和食鹽水洗涂5次，再用無水硫酸鋼干燥，最后減 壓濃縮去除溶劑得到產物粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬 =100:1.0,v/v)，收集棟色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棟色粉末（272mg， 73% )〇
[0015]電NMR巧00MHz，DMS0-de) 5 11.41(s, 1H)，6. 06(s, 1H)，5. 76(s, 1H)，4. 99(s, 1H)，4 .71 (s, IH), 4. 56 (s, IH), 3. 86 (s, 2H), 3. 54 (s, 2H), 2. 65 (s, IH), 2. 43 (s, 2H), 2. 33 (s, 2H), 2 .10 (s, IH)，1. 64 (s, 3H)，1. 54 (s, IH)，1. 44 (s, 2H)，0. 95 (s, 3H).
[0016] "cNMR(i25MHz，DMS0-d6) 5 201. 95(s), 175. 93(s), 149. 13(s), 148. 15(s), 117. 0 5 (s)，109. 43 (s)，81. 86 (s)，70. 27 (s)，57. 68 (s)，41. 26 (s)，39. 07 (s)，38. 86 (s)，35. 69 (s) ,33. 36 (s), 30. 72 (s), 20. 44 (s), 18. 42 (s).
[0017] HRMS(ESUm/z[M+H]+calcd for C口H2sBr〇4:373. 1014 ;found 373. 1017.
[0018]
[0019] 實施例3Arta化icacid的0-(二乙胺基）乙基衍生物（III)的合成
[0020]將化合物II(187mg，0.5mmol)溶于15血乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘 (345mg，2. 5mmol)，艦化鐘（84mg，0. 5mmol)和二乙胺（1460mg，20mmol)，混合物加熱回流 12h。反應結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲燒萃取4次，合并有機相。依次用水 和飽和食鹽水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物 粗品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬=100:0.5,v/v)，收集棟色 集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物III的棟色粉末（111. 3mg，61% )。
[0021] 電NMR巧00MHz，DMS0-d6) 5 11.52(s, 1H), 5 6. 13(s, 1H)，5. 81(s, 1H)，4. 73(s, 1H) ，4. 62 (d,J= 10. 9Hz, 2H)，3. 59 (s, 2H)，2. 92 (s, 4H)，2. 68 (d,J= 10. 5Hz, 3H)，2. 56 (s, 2H)， 2. 48 (s, 2H)，2. 22 (s,IH)，1. 70 (s, 3H)，1. 54 (d,J= 10. 2Hz, 3H)，1. 16 (s, 6H)，1. 00 (s, 3H).
[0022] "cNMR(i25MHz，DMS0-d6) 5 201. 95(s), 175. 93(s), 149. 13(s), 148. 15(s), 117. 0 5 (s)，109. 43 (s)，81. 86 (s)，67. 06 (s)，57. 68 (s)，52. 53 (s)，47. 72 (s)，41. 30 (s)，39. 06 (s) ,38. 85 (s), 35. 68 (s), 30. 72 (s), 20. 44 (s), 18. 42 (s), 12. 35 (s).
[0023] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC2化sN〇4:366. 2644 ;found:366. 2640。
[0024]
[0025] 實施例4Arta化icacid的0-(四氨化咯基）乙基衍生物（IV)的合成
[0026] 將化合物II(187mg，0. 5mmol)溶于15血乙臘當中，向其中加入無水碳酸鐘 (345111邑，2.51111]1〇1)，艦化鐘（84111邑，0.51111]1〇1)和11比咯燒（142〇111邑，2〇1111]1〇1)，混合物加熱回流 8h。反應結束后將反應液倒入冰水中，用等量二氯甲燒萃取3次，合并有機相。依次用水和 飽和食鹽水洗涂合并之后的有機相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產物粗 品。產物粗品用硅膠柱層析純化（流動相為：石油酸/丙酬=100:1. 0,v/v)，收集棟色集 中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物IV的棟色粉末（107.Img，59% )。 W27]iHNMR巧OOMHz,DMS0-d6) 5 14. 01(S,1H), 6. 15(s, 1H), 5. 83(s, 1H), 4. 7 5 (s,IH), 4. 63 (s,IH), 3. 96 (s,IH), 3. 58 (s, 2H), 2. 70 (d,J= 6.IHz, 3H), 2. 56 -2. 49 (m, 8H)，2. 09 (s,IH)，1. 68 (d,J= 10.OHz, 7H)，1. 58 (s, 2H)，1. 44 (s,IH)，1. 02 (s, 3H). [0028]"cNMR(i25MHz，DMS0-d6) 5 201. 85(s), 175. 85(s), 149. 07(s), 148.ll(s), 117. 0 3 (s)，109. 33 (s)，81. 78 (s)，67. 00 (s)，57. 64 (s)，54. 44 (d,J= 17.IHz)，41. 20 (s)，38. 98 ( s), 38. 79 (s), 35. 64 (s), 30. 70 (s), 25. 21 (s), 20. 35 (s), 18. 36 (s).
[0029] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcd for Cz化4N04:364. 24 88 ;found:364. 2491。
[0030]
[0031] 實施例4組合物防治肝損傷的作用 陽〇3引（一）組合物對D-氨基半乳糖胺值-galactosamine，D-GalN)誘導的小鼠急性肝 損傷的防護作用
[0033] 組合物的制備：將lOmg化合物III的粉末和90mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小 管中并用滿輪攬拌儀混合即得到lOOmg組合物。 W34] 小鼠分5組。對照組W生理鹽水灌胃（0. 3血?(! 1)，連續(xù)7d;且于第7d還要腹腔注 射生理鹽水化15血?lOg1)，腹腔注射1化后取血，測AST及ALT活力。D-GalN組、組合物 3.Omg，kg1組、化合物III組和化合物IV組分別W生理鹽水、組合物、化合物HI和化合物 IV灌胃（0. 3血.d1)，連續(xù)7d;且于第7d還要腹腔注射D-GalN(800mg.kg1,0. 15血.lOg1)， 腹腔注射1化后取血，測AST及ALT活力。
[0035] 表1組合物對D-GalN誘導的急性肝損傷的防護作用
[0036]
[0037]
[0038]注："!)<0.0 lvs對照組，Olvs D-GalN組
[0039] 由表1可知，組合物能有效抑制D-GalN引起的小鼠AST及ALT活性的顯著上升。 化合物III和化合物IV無此作用。 W40](二）組合物對CC1滿導的小鼠急性肝損傷的防護作用
[OOW小鼠分5組，對照組W生理鹽水灌胃（0.3血.d1)，連續(xù)5d，第6d腹腔注射植物油 每只0. 1血?lOgi;CCl4組及組合物、化合物III和化合物IV給藥組（3.Omg?kg1)分別W 生理鹽水及組合物、化合物III和化合物IV灌胃（0.3血?d1)，連續(xù)5d，于第6d腹腔注射 0. 1%CCI4O. 1血?lOg1。2地后處死動物，取血清測AST及ALT活力。
[0042] 表2組合物對CCI4誘導的急性肝損傷的防護作用
[0043]
[0044] 注："!)<0.Olvs對照組，2)j)<〇.OlvsCCI4組 W45] 由表2可知，組合物能抑制CCI4引起的小鼠AST及ALT活性的顯著上升?；衔颕II和化合物IV無此作用。
[0046] 結論：組合物能有效保護D-GalN引起的小鼠肝損傷，組合物能有效保護CCI4引起 的小鼠肝損傷，可W用來制備抗肝損傷藥物?；衔颒I和化合物IV不能有效保護D-GalN 引起的小鼠肝損傷，不能有效保護CCI4引起的小鼠肝損傷，不可W用來制備抗肝損傷藥物。
[0047] 實施例6本發(fā)明所設及組合物片劑的制備
[0048] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機制成100片。
[0049] 實施例7本發(fā)明所設及組合物膠囊的制備
[0050] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100 粒。
【主權項】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質量百分數(shù)分別為10%和90%，2. 如權利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為：將化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照質量百分數(shù)分別為10%和90%充分混合。3. -種如權利要求1所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用。4. 如權利要求3所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，其特征為：所述肝臟損 傷為化學物質誘導所致的肝臟損傷。5. 如權利要求4所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，其特征為：所述化學物 質為D-氨基半乳糖胺。6. 如權利要求4所述的組合物在防治肝臟損傷藥物中的應用，其特征為：所述化學物 質為四氯化碳。
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機合成和藥物化學領域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備防治肝臟損傷藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學實驗表明，本發(fā)明的組合物具有防治肝臟損傷的作用，具有開發(fā)防治肝臟損傷藥物的價值。
【IPC分類】A61K31/40, A61K31/195, A61P1/16
【公開號】CN105213376
【申請?zhí)枴緾N201510421020
【發(fā)明人】丁秋菊
【申請人】南京海澳斯生物醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年1月6日
【申請日】2015年7月16日