用超聲波從貝母花中提取貝母總生物堿的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及貝母總生物堿的提取，具體涉及用超聲波從貝母花中提取貝母總生物堿的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]貝母是百合科(ZiWaceae)貝母屬{Fritillarii)植物，傳統(tǒng)藥用部位為其鱗莖，貝母主治傷寒煩熱、咳嗽止氣、安五臟、利骨髓、消痰潤心肺，兼有消炎退腫、治療痛癤腫毒等功效。1982年版《中藥志》述:有“清熱潤肺、化痰止咳、散結(jié)功能等功效”，臨床用于痰熱咳嗽、臉色悶痰，治瘰癘和瘡瘍腫毒。貝母主要藥用成份為貝母生物堿，包括貝母甲素、貝母乙素等，貝母生物堿具有自由基清除活性。目前從貝母中提取總生物堿的方法為傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑萃取，如公告號(hào)為CN1146425的發(fā)明專利，就公開了先將貝母用95%乙醇回流，加2%鹽水溶解后，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取多次，再用氯仿萃取，得到貝母總生物堿。但傳統(tǒng)方法萃取復(fù)雜，需反復(fù)萃取，萃取時(shí)間長，萃取效率低，且是以貝母鱗莖作為原料，而貝母花大多腐爛在田野中，得不到利用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種提取簡單、時(shí)間短、效率高的用超聲波從貝母花中提取貝母總生物堿的方法。
[0004]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為:用超聲波從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，其步驟如下:
a、將當(dāng)日摘取的鮮貝母花風(fēng)干后粉碎，過45?60目篩，得到貝母花粉末；
b、將貝母花粉末裝入超聲萃取釜中，再加入質(zhì)量百分濃度0.5?1%的乙酸水溶液，在超聲發(fā)生方式為:超聲波功率為140W，超聲頻率為28?30kHz，它激式超聲發(fā)聲，徑向振動(dòng)柱狀換能器，間隔3min超聲一次，每次超聲6min，于35?45°C氣升式攪拌條件下，超聲提取90?120min，過濾，得到貝母花提取液，上述貝母花粉末與乙酸水溶液的質(zhì)量體積比為IKg: 18 ?20 L ；
C、將上述貝母花提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮90?120min，將濃縮液用質(zhì)量百分濃度5%氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至10，用DlOl型大孔樹脂層析柱層析，層析后以每小時(shí)兩個(gè)柱床體積的流速用蒸餾水洗層析柱，洗至流出液無色，再用2個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度50%乙醇洗層析柱，然后用8個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度95%乙醇洗脫層析柱，收集95%乙醇洗脫的洗脫液得到貝母花洗脫液，貝母花洗脫液在450?500Pa的條件下減壓濃縮至近干，然后105°C下干燥24h，得到主要成份為貝母總生物堿的淺黃色貝母花提取物。
[0005]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于用超聲波從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，將貝母花粉末裝在超聲萃取釜中，用乙酸水溶液為溶劑，它激式超聲發(fā)聲，徑向振動(dòng)柱狀換能器，間隔3min超聲一次，每次超聲6min，于35?45°C氣升式攪拌條件下，超聲提取得到貝母花提取液，然后用大孔樹脂層析柱層析，乙醇洗脫，95%乙醇洗脫的貝母花洗脫液減壓濃縮，再105°C條件下干燥24h，得到主要成份為貝母總生物堿的淺黃色貝母花提取物。該方法步驟簡單，提取時(shí)間縮短，提取效率較高，每公斤貝母花可以提取貝母花提取物15g左右，純度也較高，貝母總生物堿重量占45%以上，且將貝母花充分利用，提高種植貝母的價(jià)值。
【具體實(shí)施方式】
[0006]以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0007]實(shí)施例1
將當(dāng)日摘取的鮮貝母花(可以是浙貝母、川貝母等)風(fēng)干后粉碎，過45?60目篩，得到貝母花粉末，將IKg貝母花粉末裝入超聲萃取釜中，加入質(zhì)量百分濃度0.5?1%乙酸水溶液18?20 L，在超聲發(fā)生方式為:超聲波功率為140W，超聲頻率為29kHz，它激式超聲發(fā)聲，徑向振動(dòng)柱狀換能器，間隔3min超聲一次，每次超聲6min，于40°C氣升式攪拌條件下超聲提取lOOmin，過濾，得到貝母花提取液，將貝母花提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮120min，將濃縮液用質(zhì)量百分濃度5%氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至10，上DlOl型大孔樹脂層析柱層析，以每小時(shí)兩個(gè)柱床體積的流速用蒸餾水洗脫至流出液無色，再用2個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度50%乙醇洗滌層析柱，然后用8個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度95%乙醇洗脫層析柱，收集95%乙醇洗脫的洗脫液得到貝母花洗脫液，貝母花洗脫液在450?500Pa的條件下減壓濃縮至近干，105°C下干燥24h，得到淺黃色的貝母花提取物15.6g，采用溴甲酚綠顯色的紫外可見分光光度法測定每克提取物中貝母總生物堿含量為475mg。
[0008]實(shí)施例2
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是超聲頻率為28kHz，于35 °C氣升式攪拌條件下超聲提取120min，貝母花提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮105min，得到淺黃色的貝母花提取物15.2g，每克提取物中貝母總生物堿含量為462mg。
[0009]實(shí)施例3
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是超聲頻率為30kHz，于45 °C氣升式攪拌條件下超聲提取90min，貝母花提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮90min，得到淺黃色的貝母花提取物14.9g，每克提取物中貝母總生物堿含量為471mg。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用超聲波從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，其特征在于步驟如下: a、將當(dāng)日摘取的鮮貝母花風(fēng)干后粉碎，過45?60目篩，得到貝母花粉末； b、將貝母花粉末裝入超聲萃取釜中，再加入質(zhì)量百分濃度0.5?1%的乙酸水溶液，在超聲發(fā)生方式為:超聲波功率為140W，超聲頻率為28?30kHz，它激式超聲發(fā)聲，徑向振動(dòng)柱狀換能器，間隔3min超聲一次，每次超聲6min，于35?45°C氣升式攪拌條件下，超聲提取90?120min，過濾，得到貝母花提取液，上述貝母花粉末與乙酸水溶液的質(zhì)量體積比為IKg: 18 ?20 L ； C、將上述貝母花提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮90?120min，將濃縮液用質(zhì)量百分濃度5%氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至10，用DlOl型大孔樹脂層析柱層析，層析后以每小時(shí)兩個(gè)柱床體積的流速用蒸餾水洗層析柱，洗至流出液無色，再用2個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度50%乙醇洗層析柱，然后用8個(gè)柱床體積的質(zhì)量百分濃度95%乙醇洗脫層析柱，收集95%乙醇洗脫的洗脫液得到貝母花洗脫液，貝母花洗脫液在450?500Pa的條件下減壓濃縮至近干，然后105°C下干燥24h，得到主要成份為貝母總生物堿的淺黃色貝母花提取物。2.如權(quán)利要求1所述的用超聲波從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，其特征在于步驟b中，超聲頻率為29kHz，于40°C氣升式攪拌條件下，超聲提取lOOmin，步驟c中，貝母花提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮120min。3.如權(quán)利要求1所述的用超聲波從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，其特征在于步驟b中，超聲頻率為30kHz，于45°C氣升式攪拌條件下，超聲提取90min，步驟c中，貝母花提取液在壓力為450?500Pa的條件下，減壓濃縮90min。
【專利摘要】本發(fā)明公開了用超聲波從貝母花中提取貝母總生物堿的方法，將貝母花粉末裝在超聲萃取釜中，用乙酸水溶液為溶劑，它激式超聲發(fā)聲，徑向振動(dòng)柱狀換能器，間隔3min超聲一次，每次超聲6min，于35～45℃氣升式攪拌條件下，超聲提取得到貝母花提取液，然后用大孔樹脂層析柱層析，乙醇洗脫，95%乙醇洗脫的貝母花洗脫液減壓濃縮，再105℃條件下干燥24h，得到主要成份為貝母總生物堿的淺黃色貝母花提取物。該方法步驟簡單，提取時(shí)間縮短，提取效率較高，每公斤貝母花可以提取貝母花提取物15g左右，純度也較高，貝母總生物堿重量占45%以上，且將貝母花充分利用，提高種植貝母的價(jià)值。
【IPC分類】A61K133/00, A61K36/8966
【公開號(hào)】CN105213756
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510677267
【發(fā)明人】阮曉, 王強(qiáng)
【申請(qǐng)人】浙江大學(xué)寧波理工學(xué)院
【公開日】2016年1月6日
【申請(qǐng)日】2015年10月20日