的人類 及動物肝微粒體在37°C下將CFMQ溫育30或60分鐘。另外的參照化合物作為對照溫育。 在溫育之后，通過HPLC-MS/MS分析樣品。
[0324] CFMQ(HGT3711)在嚙齒類動物物種中具有可變的穩(wěn)定性，其中在較高級的物種中 穩(wěn)定性通常增加，在人類肝制劑中具有顯著更高的穩(wěn)定性。在猴中的低代謝穩(wěn)定性對應(yīng)于 低生物利用度，并且可以指示獨(dú)特的代謝途徑。參見表12。
[0325] 表12 CFMQ(HGT3711)的體外微粒體穩(wěn)定性的總結(jié)
[0326]
[0327]4干細(xì)朐代謝 ' '
' '
[0328] 在冷凍保存的雄性和雌性大鼠和迷你豬肝細(xì)胞中、以及在雄性和雌性小鼠肝細(xì)胞 中評估CFMQ(HGT3711)的氚標(biāo)記形式的體外代謝。也檢查人類肝細(xì)胞（男女混合）。
[0329] 采用1X 106個(gè)細(xì)胞（肝細(xì)胞）/mL的肝細(xì)胞將3H-CFMQ1 (5 y M或10 y M的的濃度； 約1. OmCi/mL)溫育為多達(dá)四個(gè)小時(shí)。通過采用陽性對照（14C-7-乙氧基香豆素和14C-睪 酮）溫育將來自所有物種的肝細(xì)胞表征為I期代謝能力和II期代謝能力。在〇? 5、1、L 5、 2和4小時(shí)的時(shí)間點(diǎn)，溫育樣品通過加入乙腈提取并通過液體閃爍（LSC)計(jì)數(shù)、然后通過 HPLC (高性能液相色譜）放射性檢測分析。通過LC-MS/MS (液相色譜質(zhì)譜）對選定的樣品 (4小時(shí)）進(jìn)行進(jìn)一步分析，以鑒定表示>5%的樣品放射性的那些代謝物。
[0330] 在這兩項(xiàng)研究中，在采用冷凍保存的肝細(xì)胞的3H_CFMQ的溫育中檢測到共16個(gè)感 興趣的主要放射性區(qū)域。這些組分中的一部分是天然多組分的。觀察到的主要代謝物的總 結(jié)列在表13中。
[0331]
[0332] 顯示母體3H_CFMQ在不存在肝細(xì)胞下是穩(wěn)定的，并且3H_CFMQ的代謝速率與小鼠、 雌性大鼠、迷你豬和人類中的類似（圖10)。5 yM的3H-CFMQ的體外代謝在雄性大鼠肝細(xì) 胞中是最廣泛的，其中4小時(shí)代謝了母體的約95%。代謝速率在雌性大鼠（約32%)以及 其他物種的兩個(gè)性別（微型豬52-57%且人類25-35%)中是明顯較低的。在更高的濃度 (10uM)下，雄性和雌性小鼠和人類中的4小時(shí)代謝分別為22%和21%。
[0333] CFMQ(HGT3711)在人類肝細(xì)胞中的溫育產(chǎn)生一種主要的代謝物MET1，并且是單氧 化結(jié)構(gòu)，其以母體的10-11 %或7-8%的水平形成。MET1也是在采用小鼠（2. 0-3. 7% )和 微型豬（18-20. 56% )肝細(xì)胞溫育中觀察到的主要代謝物，并在用大鼠的溫育中觀察到。其 他次要代謝物在人類肝細(xì)胞以及在動物物種中檢測到。在一些物種中還檢測到多個(gè)次要代 謝物片段，然而這些都以低于認(rèn)為的正確的定量限（〈1 %的樣品放射性）的水平產(chǎn)生，并因 此沒有進(jìn)一步詳細(xì)說明。不存在關(guān)于人類特異性代謝物的證據(jù)。
[0334] 采用3H_CFMQ(5和10 y M)溫育4小時(shí)的樣品進(jìn)一步通過LC-MS/MS分析，以鑒定 代謝物。這些研究表明I期代謝物和II期代謝物兩者都在所有物種中被觀察到，包括單和 二羥基化代謝物（MET1)、酸代謝物、葡糖醛酸和CFMQ的I期代謝物的硫酸鹽綴合物。此外， 僅在小鼠肝細(xì)胞中觀察到脫氯且單羥基、脫氯的谷胱甘肽綴合物和谷胱甘肽綴合物。
[0335] 從每個(gè)物種（包括迷你豬）鑒定的主要代謝物為單氧化產(chǎn)物，具有少量的二氧化 產(chǎn)物。通過人類肝細(xì)胞的代謝比大鼠和迷你豬中所看到的更不廣泛，正如基于先前代謝穩(wěn) 定性測定預(yù)期的那樣。
[0336] 存在三種主要的人類代謝物M1、M2和M3 (圖11)。Ml以母體的10%所見，而M2和 M3分別分別以母體的5%和3%形成。
[0337] 這兩項(xiàng)研究的結(jié)果表明，3H_CFMQ的主要人類肝代謝物是在所有檢查的其他動物 物種中很重要地產(chǎn)生的單羥基和二氧化分子。有可能在CFMQ的代謝物中存在顯著的性別 差異，這在大鼠的血液藥代動力學(xué)曲線中也可看到。通常，在非臨床物種中形成的代謝物的 量更大，可能由于肝制劑中的較低穩(wěn)定性導(dǎo)致?？傮w而言，這些研究表明相比于人類在不同 物種中類似的代謝。重要的是，在人類肝細(xì)胞中形成的這些代謝物中的每個(gè)也可以在小鼠 和迷你豬溫育中觀察到，這使它們有資格作為用于安全性研究的相關(guān)非臨床物種。
[0338] MM
[0339] 制備CFMQ的不同制劑。
[0340] 將CFMQ的脂質(zhì)制劑制備成含有10 % N-甲基吡咯烷酮（NMP)、10 % TRANSCUT0L HP(高度純化的2-(2_乙氧基乙氧基）乙醇）、30%聚乙二醇（PEG400)和50%GELUCIRE 44/14(月桂酰聚氧甘油酯）。發(fā)現(xiàn)制劑提供將允許動物給藥實(shí)驗(yàn)的溶解度、穩(wěn)定性和暴露 參數(shù)。此外，在展示出多達(dá)5mL/kg的制劑耐受性的尤卡坦迷你豬中實(shí)施體內(nèi)研究。就食物 消耗、體重和臨床觀察而言，該研究的結(jié)果表明在迷你豬中制劑被較好地耐受。
[0341] 除了脂質(zhì)制劑之外，還采用了若干種方法來配制。分別制備CFMQ的三種鹽： 1，2-乙烷二磺酸（半）鹽、1，5-萘二磺酸鹽和1，2-乙烷二磺酸（單）鹽。1，2-乙烷二磺 酸（單）鹽大幅增加了 CFMQ的溶解度。
[0342] 此外，將CFMQ研磨至具有納米級粒度。
[0343] 還評估了其中CFMQ與聚合物復(fù)合的噴霧干燥的分散體的方法。當(dāng)CFMQ在醋酸羥 丙基甲基纖維素琥珀酸酯（HPMCAS)上被噴霧干燥時(shí)，該發(fā)現(xiàn)組合具有優(yōu)異的溶解度。噴霧 干燥過程由3個(gè)步驟組成：漿料制備、噴霧干燥和二次干燥。通過使HPMCAS聚合物溶解在 甲醇/水溶劑混合物（90v/10v)中制備漿料，然后將當(dāng)量量的CFMQ懸浮于聚合物溶劑混合 物中。然后將該漿料加熱并在噴霧干燥器中通過閃蒸噴嘴噴霧干燥成氮?dú)夥諊?。噴霧干燥 器的粉劑輸出保留了少量的水/甲醇，在二次干燥步驟中將其除去，其在對流托盤干燥器 中于40°C /15%的相對濕度（RH)下發(fā)生。HPMCAS中的活性成分的50:50的固體分散體被 用在本文所述的動物研究中。
[0344] 實(shí)施例34通討物種間和藥代動力學(xué)樽擬的CFMQ 口服劑量的椎筧
[0345] 對于人類口服劑量的藥代動力學(xué)推算使用清除和分布體積的異速生長實(shí)施。人類 藥代動力學(xué)值由體內(nèi)小鼠、大鼠、犬和猴藥代動力學(xué)研究推算。由于跨臨床前物種的生物利 用度的可變性，對25%至50%的一系列生物利用度值建模。此藥代動力學(xué)模型預(yù)測為在 0. 8mg/kg的人類當(dāng)量劑量下，當(dāng)生物利用度是25%、50%或75%時(shí)，對于介于大于5、10和 12小時(shí)而言血漿水平將保持在預(yù)測的有效水平以上。模型以人類中的所有清除途徑被捕獲 在臨床前物種中的假設(shè)為基礎(chǔ)。
[0346] 盡管已經(jīng)關(guān)于一種或多種實(shí)現(xiàn)說明了本教導(dǎo)，在不偏離所附權(quán)利要求的精神和范 圍下，可以對所公開的實(shí)施方案作出改變和/或修飾。此外，此外，盡管僅關(guān)于多種實(shí)現(xiàn)之 一公開了本發(fā)明的特定特征，這種特征可如所需地與其它實(shí)現(xiàn)的一種或多種其它特征聯(lián) 合，如對于任何給定或特定應(yīng)用可能是期望和有利的。
[0347] 在術(shù)語"包含"、"包括（including) "、"包括（includes) "、"具有（having) "、"具有 (has) "、"具有（with) "或其變型用于詳細(xì)描述和權(quán)利要求中的情況下，這樣的術(shù)語旨在以 類似于術(shù)語"包含"的方式為包容性。如本文所使用的，關(guān)于一系列項(xiàng)目的術(shù)語"中的一個(gè) 或多個(gè)"，例如，A和B，意味著單獨(dú)的A、單獨(dú)的B或A和B。術(shù)語"中的至少一個(gè)"用于指可 以選擇所列項(xiàng)目中的一個(gè)或多個(gè)。
[0348] 盡管闡明本發(fā)明廣泛范圍的數(shù)字范圍和參數(shù)是近似值，但具體實(shí)例中闡述的數(shù)值 應(yīng)盡可能予以精確報(bào)道。然而，任何數(shù)值固有地包含由發(fā)現(xiàn)于它們各自的測試測量中的標(biāo) 準(zhǔn)偏差必然導(dǎo)致的某些誤差。此外，本文公開的所有范圍應(yīng)被理解為涵蓋包含在其中的任 何及所有子范圍。例如，"小于10"的范圍可以包括在零的最小值和10的最大值之間（和 包括）的任何和所有子范圍，即，具有等于或大于零的最小值和等于或小于10的最大值的 任何和所有子范圍，例如1至5。在某些情況下，表述的參數(shù)的數(shù)值可以取負(fù)值。在這種情 況下，表述為"小于10"的范圍的示例值可以假設(shè)如前文定義的值加負(fù)值，例如，-1、-1.2、_ 1. 89、-2、-2. 5、-3、-10、-20 和-30 等。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種治療受試者中B2-緩激肽受體介導(dǎo)的血管性水腫的方法，所述方法包括： 向有需要的受試者施用治療有效量的包含具有式（I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的 鹽、立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物的組合物其中Ri是其中私是其中私是Cl或CN; 其中R4是其中R5選自由H、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基組成的組，并且 其中在施用所述化合物或或其藥學(xué)上可接受的鹽、立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物后， 所述受試者中的血漿外滲減少。2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述B2_緩激肽受體介導(dǎo)的血管性水腫是遺傳性血 管性水腫（HAE)。3. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中將所述組合物口服或舌下施用至所述受試者。4. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述組合物還包含藥用載體物質(zhì)、賦形劑和/或佐 劑。5. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中按每劑量約3.Omg的所述具有式⑴的化合物/kg 至約35mg的所述具有式（I)的化合物/kg將所述組合物施用至所述受試者，并且在初始劑 量后的約5小時(shí)至約12小時(shí)內(nèi)重復(fù)所述劑量。6. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法還包括將艾替班特、艾卡拉肽、新鮮冷凍血 漿、Cl-抑制劑或激肽釋放酶抑制劑施用至所述受試者。7. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述具有式（I)的化合物具有小于約50納摩爾的針 對與標(biāo)記的緩激肽結(jié)合人類B2-緩激肽受體的競爭的半最大抑制濃度（IC5。）。8. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中組合物還包含表面活性劑、張度劑、緩沖液、鹽、防腐 劑、共溶劑和粘度構(gòu)建劑中的一種或多種。9. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中組合物呈氣溶膠、霜劑、凝膠、丸劑、膠囊、糖漿、溶液 或經(jīng)皮貼劑形式。10. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述組合物具有小于約5的pH。11. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述化合物具有小于約650的分子量。12. -種治療受試者中B2-緩激肽受體介導(dǎo)的血管性水腫的方法，所述方法包括： 向有需要的受試者施用治療有效量的包含具有式（II)的化合物或其藥學(xué)上可接受的 鹽、立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物的組合物從而減少所述受試者中的血漿外滲。13. 如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述B2-緩激肽受體介導(dǎo)的血管性水腫是遺傳性 血管性水腫（HAE)。14. 如權(quán)利要求12所述的方法，其中將所述組合物口服或舌下施用至所述受試者。15. 如權(quán)利要求12所述的方法，其中按每劑量約3.Omg的所述具有式（II)的化合物/ kg至約35mg的所述具有式（II)的化合物/kg將所述組合物施用至所述受試者，并且在初 始劑量后的約5小時(shí)至約12小時(shí)內(nèi)重復(fù)所述劑量。16. 如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述方法還包括將艾替班特、艾卡拉肽、新鮮冷凍 血漿、Cl-抑制劑或激肽釋放酶抑制劑施用至所述受試者。17. -種治療受試者中B2-緩激肽受體介導(dǎo)的血管性水腫的方法，所述方法包括： 向有需要的受試者施用治療有效量的組合物，從而減少所述受試者中的血漿外滲，所 述組合物包含： 11-((4-氯-3-(((4-(4-氟-IH-吡唑-1-基）-2-甲基喹啉-8-基）氧基）甲基）-6-甲 基吡啶-2-基）甲基）-2-氧代-1，2-二羥基吡啶-3-甲腈； (2E) -3- [6-(乙?；被┻拎?3-基]-N- {2- [ (2, 4-二氯-3- {[ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基]甲基}苯基）（甲基）氨基]-2-氧代乙基}丙-2-烯酰胺； (2E) -3- [6-(乙酰基氨基）吡啶-3-基]-N- {2- [ (2, 4-二氯-3- {[ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基]甲基}苯基）氨基]-2-氧代乙基}丙-2-稀酰胺； (2E)-N-{2-[(4-氯-2-氰基-3-{[(2-甲基喹啉-8-基）氧基]甲基}苯基）（甲基） 氨基]-2-氧代乙基}-3-[4-(三氟甲基）苯基]丙-2-烯酰胺； N- [4-氯-2-氰基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-2-(乙基氨基甲?；?氨基）-N-甲基乙酰胺； 2_ (4-氨基丁基氨基甲?；被?N- [4-氯-2-氰基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基 甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； 4_ [ [2- [4-氯-2-氰基-N-甲基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺基]-2-氧 代乙基]氨基甲酰基氨基]丁酸； (E)-N-[2-[4-氯-2-氰基-N-甲基-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺 基]-2-氧代乙基]-3- (3-甲氧基苯基）丙-2-烯酰胺； (E)-N-[2-[4-氯-2-氰基-N-甲基-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺 基]-2-氧代乙基]-3-[4-(三氟甲基）苯基]丙-2-烯酰胺； N-[2,4-二氯-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-2-[5-(2,2-二甲基丙酰 基）-1-甲基吡咯-2-基]-N-甲基乙酰胺； 4_ [ (E) -3- [[ (Z) -3- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]丙-2-烯 基]氨基]-3-氧代丙-1-烯基]-N-甲基苯甲酰胺； (E) -N- [2- [2, 4-二氯-N-甲基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺基]-2-氧 代乙基]-3-苯基丙_2_稀酰胺鹽酸鹽； 2-(5-苯甲?；?1-甲基吡咯-2-基）-N-[2, 4-二氯-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基 甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； (E) -3- (6-乙酰氨基吡啶-3-基）-N- [2- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲 基]苯胺基]_2_氧代乙基]丙-2-稀酰胺； N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基-2- [ 1-甲基-5-(噻 吩_2_羰基）吡略-2-基]乙酰胺； 2-[5-(環(huán)己烷羰基）-1-甲基吡咯-2-基]-N-[2, 4-二氯-3-[ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； 2_[5-(4-氰基苯甲?；?1-甲基吡咯-2-基]-N-[2, 4-二氯-3-[(2-甲基喹 啉-8-基）氧基甲基]苯基]乙酰胺； 2_ [5- (4-氰基苯甲?；?IH-吡咯-2-基]-N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； N-[2,4-二氯-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基-2-[l-甲 基-5-(2-苯基乙酰基）吡略_2_基]乙酰胺； 2_[5-(4-氨基苯甲酰基）-1-甲基吡咯-2-基]-N-[2, 4-二氯-3-[(2-甲基喹 啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基-3- [ 1-甲基-5-(吡 啶_3_羰基）啦略-2-基]丙酰胺； 4-[(E)-3-[[2-[2,4-二氯-N-甲基-3-[(2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯胺 基]-2-氧代乙基]氨基]-3-氧代丙-1-烯基]-N-甲基苯甲酰胺； (E) -3- (6-乙酰氨基吡啶-3-基）-N- [2- [2, 4-二氯-N-甲基-3- [ (2-甲基喹啉-8-基） 氧基甲基]苯胺基]-2-氧代乙基]丙-2-烯酰胺； N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基-3- [ 1-甲基-5-(噻 吩_2_羰基）啦略-2-基]丙酰胺； 2_[5-(4-氰基苯甲?；?1-甲基吡咯-2-基]-N-[2, 4-二氯-3-[(2-甲基喹 啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； 2_ [5- (6-氰基吡啶-3-羰基）-1-甲基吡咯-2-基]-N- [2, 4-二氯-3- [ (2-甲基喹 啉-8-基）氧基甲基]苯基]-N-甲基乙酰胺； 或其藥學(xué)上可接受的鹽、立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物。18. 如權(quán)利要求17所述的方法，其中將所述組合物口服或舌下施用至所述受試者。19. 一種口服制劑，其包含治療有效量的具有式（I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、 立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物以及藥學(xué)上可接受的載體，其中所述治療有效量介于所述 口服制劑的約〇.OOl重量％和約60重量％之間并且式（I)是如下：其中Ri是其中私是其中私是Cl或CN; 其中R4是其中R5選自由H、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基組成的組。20.如權(quán)利要求19所述的口服制劑，其還包含醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯。21. 如權(quán)利要求19所述的口服制劑，其中所述口服制劑呈噴霧干燥的分散體形式。22. 包含具有式（I)的化合物、或其鹽、立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物的組合物用于 制造用于治療和/或預(yù)防B2-緩激肽受體介導(dǎo)的血管性水腫的藥劑的用途，其中式（I)是 如下： C⑴， 其中Ri是其中私是其中私是Cl或CN; 其中R4是其中R5選自由H、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基組成的組。23. -種口服制劑，其包含治療有效量的具有式（II)的化合物或其藥學(xué)上可接受的 鹽、立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物以及藥學(xué)上可接受的載體，其中所述治療有效量介于所 述口服制劑的約〇.OOl重量％和約60重量％之間并且式（II)是如下：24. 如權(quán)利要求23所述的口服制劑，其還包含醋酸羥丙基甲基纖維素琥珀酸酯。25. 如權(quán)利要求23所述的口服制劑，其中所述口服制劑呈噴霧干燥的分散體形式。
【專利摘要】通過施用包含8-(雜芳基甲氧基)喹諾酮化合物、8-(芳基甲氧基)喹啉化合物、或其鹽、立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物的組合物治療受試者中B2-緩激肽受體介導(dǎo)的血管性水腫的方法。用于治療B2-緩激肽受體介導(dǎo)的血管性水腫的包含8-(雜芳基甲氧基)喹諾酮化合物、8-(芳基甲氧基)喹啉化合物、或其鹽、立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物的口服制劑。包含8-(雜芳基甲氧基)喹諾酮化合物、8-(芳基甲氧基)喹啉化合物、或其鹽、立體異構(gòu)體、水合物或溶劑化物的組合物用于制造用于治療和/或預(yù)防B2-緩激肽受體介導(dǎo)的血管性水腫的藥劑的用途。
【IPC分類】A61P17/00, C07D413/00, A61K31/47
【公開號】CN105228623
【申請?zhí)枴緾N201480027533
【發(fā)明人】K·利奇, T·萊特, B·菲利斯, R·菲佛, P·加萊斯, T·麥考利
【申請人】夏爾人類遺傳性治療公司
【公開日】2016年1月6日
【申請日】2014年3月12日
【公告號】CA2904052A1, EP2968308A1, US20160030416, WO2014159637A1