60 %乙醇富集人參總皂巧，并采用高效液相法 測定人參總皂巧中的R的的含量(W/W)，對S個(gè)因素進(jìn)行分析。根據(jù)表2中的R值，可W看出各 因素對微波輔助萃取人參皂巧提取率的影響程度分別為B〉A(chǔ)〉C，維生素 C的濃度影響最顯 著，微波功率次之，提取時(shí)間的影響最小。優(yōu)選的方案為A2B2C2，即微波功率為300W，維生素 C 濃度為1.2(g/100ml)，提取時(shí)間為20分鐘。
[0032] 表1 L9(34)正交試驗(yàn)因素與水平

[0(X3日]表2正交試驗(yàn)結(jié)果
[0037] 實(shí)施例2提取物中人參皂巧成分的含量分析
[0038] 人參皂巧提取物A的制備:稱取2.5克人參樣品，用5〇111170%(￥/^)乙醇在室溫下超 聲提取2次，每次60分鐘，將提取液在40°C條件下減壓回收溶劑，濃縮為水溶液，采用大孔吸 附樹脂富集純化人參總皂巧，首先W5BV去離子水洗脫去雜，然后W7BV 60%乙醇富集人參 總皂巧，進(jìn)行皂巧的純化，洗脫速度為1.5ml/min。收集乙醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去適量乙醇 后，將濃縮液置于不誘鋼盤中，于水浴上蒸干，60°C減壓干燥，得人參皂巧提取物A。
[0039] 人參皂巧提取物B的制備:稱取2.5克人參樣品，置于微波萃取儀的萃取罐中，加入 50ml 70% (V/V)乙醇溶液W及0.6克維生素 C，將萃取功率設(shè)置為300W，提取時(shí)間為20分鐘， 提取完成后，收集過濾液，濾渣中再次加入50ml 70%(V/V)乙醇溶液W及0.6克維生素 C，同 樣的萃取條件提取完成后收集濾液。將兩次濾液合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至體積約為20ml，用濃氨水 調(diào)節(jié)抑值至7.0,采用DlOl大孔吸附樹脂富集純化人參總皂巧，首先W5BV去離子水洗脫去 雜，然后W7BV 60%乙醇富集人參總皂巧，進(jìn)行皂巧的純化，洗脫速度為1.5ml/min。收集乙 醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去適量乙醇后，將濃縮液置于不誘鋼盤中，于水浴上蒸干，60°C減壓 干燥，得人參皂巧提取物B。
[0040] 采用高效液相色譜法測定所得人參皂巧提取物A、B中人參皂巧肺1、人參皂巧肺2、 人參皂巧肺3、人參皂巧RC、人參皂巧Rg3的質(zhì)量百分比。
[0041 ] 混合對照品溶液的配制：精密稱取人參皂巧Rbi對照品、人參皂巧肺2對照品、人參 皂巧肺3對照品、人參皂巧RC對照品和人參皂巧Rg3適量，精密稱定，置于同一5ml量瓶中，用 甲醇溶解并定容，制成混合對照品溶液。
[0042] 供試品溶液的配制：
[0043] 取人參皂巧提取物A約30mg，精密成定，置于IOml量瓶中，加甲醇溶解并定容，搖 勻，過0.45WI1濾膜，續(xù)取濾液，即為供試品溶液A;
[0044] 取人參皂巧提取物B約30mg，精密成定，置于IOml量瓶中，加甲醇溶解并定容，搖 勻，過0.45WI1濾膜，續(xù)取濾液，即為供試品溶液B。
[0045] 色譜條件:Lunna畑2色譜柱(4.6mmX 150mm，5]im);流動相乙臘-水梯度洗脫;流速 1.0血? min-i;檢測波長203皿;柱溫:30°C ;進(jìn)樣量20化。梯度洗脫條件為:流動相：乙臘(A): 水（B)，梯度洗脫（0-20min，A: 25一40;20-33min，A:40一60;33-37min，A:46;37-45min，A:46 一50;45-62min，A:50一70;62-65min，A:70一90)。
[0046] 結(jié)果:測定人參皂巧提取物A組、B組中人參皂巧成分的含量如表3所示，可見，維生 素 C的加入W及微波輔助萃取方法的使用在人參皂巧的提取物過程中有效地將人參二醇組 皂巧轉(zhuǎn)化為稀有人參皂巧Rg3。
[0047] 表3提取物中人參皂巧成分含量(質(zhì)量百分含量）
[0049] 實(shí)施例3
[0050] 稱取3克人參樣品，置于微波萃取儀的萃取罐中，加入45ml 70% (V/V)乙醇溶液W 及0.9克維生素 C，將萃取功率設(shè)置為350W，提取時(shí)間為30分鐘，提取完成后，收集過濾液，濾 渣中再次加入45ml 70%(V/V)乙醇溶液W及0.6克維生素 C，同樣的萃取條件提取完成后收 集濾液。將兩次濾液合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至體積約為20ml，用濃氨水調(diào)節(jié)pH值至7.0，采用大孔吸 附樹脂富集純化人參總皂巧，首先W4BV去離子水洗脫去雜，然后W9BV 60%乙醇富集人參 總皂巧，進(jìn)行皂巧的純化，洗脫速度為1.5ml/min。收集乙醇洗脫液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去適量乙醇 后，將濃縮液置于不誘鋼盤中，于水浴上蒸干，60°C減壓干燥，得人參皂巧提取物。參照實(shí)施 例2的高效液相色譜法測定所得人參皂巧提取物中人參皂巧肺1、人參皂巧肺2、人參皂巧 肺3、人參皂巧RC、人參皂巧Rg3的質(zhì)量百分比，結(jié)果如表4所示。
[0051] 表4提取物中人參皂巧成分含量(質(zhì)量百分含量）
[0化3] 實(shí)施例4
[0054] 稱取5克人參樣品，置于微波萃取儀的萃取罐中，加入80ml 60% (V/V)乙醇溶液W 及1.0克維生素 C，將萃取功率設(shè)置為600W，提取時(shí)間為30分鐘，提取完成后，收集過濾液，濾 渣中再次加入60ml 60% (V/V)乙醇溶液W及0.6克維生素 C，萃取功率為600W，提取時(shí)間為 20分鐘，提取完成后收集濾液。將兩次濾液合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至體積約為30ml，用濃氨水調(diào)節(jié) pH值至7.0,采用大孔吸附樹脂富集純化人參總皂巧，首先W6BV去離子水洗脫去雜，然后W 8BV 60 %乙醇富集人參總皂巧，進(jìn)行皂巧的純化，洗脫速度為1.5ml/min。收集乙醇洗脫液， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去適量乙醇后，將濃縮液置于不誘鋼盤中，于水浴上蒸干，60°C減壓干燥，得人 參皂巧提取物。參照實(shí)施例2的高效液相色譜法測定所得人參皂巧提取物中人參皂巧Rbi、 人參皂巧肺2、人參皂巧肺3、人參皂巧RC、人參皂巧Rg3的質(zhì)量百分比，結(jié)果如表5所示。
[0055] 表5提取物中人參皂巧成分含量(質(zhì)量百分含量）
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種富含人參皂苷Rg3的人參總皂苷提取物，其特征在于，該提取物中人參皂苷Rh、 Rb2、Rb3、RC、Rg3的質(zhì)量百分比分別為：1·0%-3 ·0%、0· 2%-1 ·0%、0· 5-2.5%、0· 5%-2.5%、28%-40%〇2. -種權(quán)利要求1所述的富含人參皂苷Rg3的人參總皂苷提取物的制備方法，其特征在 于包含以下步驟： (1) 以乙醇作為提取溶劑采用微波提取法對人參進(jìn)行提取，提取溶液中加入一定量的 維生素 C，經(jīng)過一定時(shí)間的微波加熱提取獲得人參總皂苷的粗提液； (2) 人參總皂苷的粗提液采用大孔樹脂吸附法進(jìn)一步地富集純化獲得人參總皂苷提取 物。3. 權(quán)利要求2所述的一種富含人參皂苷Rg3的人參總皂苷提取物的制備方法，其特征在 于，步驟(1)中所述的乙醇濃度為50 %-80 %，優(yōu)選為60 %-70 % ;提取液中維生素 C的濃度為 0.6-2.0g/100ml;乙醇的用量為人參重量的8-20倍(ml/g)。4. 權(quán)利要求3所述的一種富含人參皂苷Rg3的人參總皂苷提取物的制備方法，其特征在 于，步驟(1)中提取液中維生素 C的濃度為1.2g/100ml。5. 權(quán)利要求3所述的一種富含人參皂苷Rg3的人參總皂苷提取物的制備方法，其特征在 于，步驟(1)中乙醇的用量為人參重量的15倍(ml/g)。6. 權(quán)利要求3所述的一種富含人參皂苷Rg3的人參總皂苷提取物的制備方法，其特征在 于，微波提取的功率為200-600W。7. 權(quán)利要求6所述的一種富含人參皂苷Rg3的人參總皂苷提取物的制備方法，其特征在 于，微波提取的功率為300W。8. 權(quán)利要求3所述的一種富含人參皂苷Rg3的人參總皂苷提取物的制備方法，其特征在 于，微波提取的時(shí)間為15_30min，優(yōu)選為20min。9. 權(quán)利要求2所述的一種富含Rg3的人參總皂苷提取物的制備方法，其特征在于，步驟 (2)中，用去離子水、乙醇分別洗脫吸附皂苷的大孔樹脂，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥 得反應(yīng)產(chǎn)物，即人參總皂苷。10. 權(quán)利要求4所述的一種富含Rg3的人參總皂苷提取物的制備方法，其特征在于，步驟 (2)中，所用去離子水的體積為3-6BV，乙醇的體積為5-7BV，濃度為50%-70%。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種富含人參皂苷Rg3的人參總皂苷及其提取方法。該提取物中人參皂苷Rb1、Rb2、Rb3、RC、Rg3的質(zhì)量百分比分別為：1.0％-3.0％、0.2％-1.0％、0.5-2.5％、0.5％-2.5％、28％-40％。該方法包括以下步驟：以乙醇作為提取溶劑采用微波提取法對人參進(jìn)行提取，提取溶液中加入一定量的維生素C，經(jīng)過一定時(shí)間的微波加熱提取獲得人參總皂苷的粗提液；人參總皂苷的粗提液采用大孔樹脂吸附法進(jìn)一步地富集純化獲得人參總皂苷提取物。
【IPC分類】A61P25/00, A61P35/00, A61K36/258, B01J31/02, A61P39/00, A61P9/00, A61P37/04, A61P5/00, A61K31/704
【公開號】CN105663195
【申請?zhí)枴緾N201610236817
【發(fā)明人】陳火林, 萬學(xué)斌
【申請人】江西樟樹市慶仁保健品有限公司
【公開日】2016年6月15日
【申請日】2016年4月18日