一種可控緩釋硒負(fù)離子的載硒殼聚糖微球及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種可控緩釋硒負(fù)離子的載硒殼聚糖微球及其制備方法，取Na2SeO3于醋酸溶液中，配制成硒醋酸溶液；再加入殼聚糖，配制成水相基質(zhì)；量取Span?80于液體石蠟中配制成油相基質(zhì)；將水相基質(zhì)緩慢滴加到油相基質(zhì)中攪拌，再緩慢滴加交聯(lián)劑，繼續(xù)攪拌，靜置分層，去除上層液相，收集沉淀物，用石油醚和無水乙醇分別抽濾洗滌直至濾液澄清透明，滴加丙酮，于45℃烘箱中烘干即得。載硒殼聚糖微球呈球性能良好，包封率在27.54％?75.82％范圍，載藥量在1.45％?9.01％范圍內(nèi)，載硒殼聚糖微球粒徑在50?600μm之間，有效緩釋時間可達(dá)116天，可控補(bǔ)硒量。本發(fā)明為抗癌藥物SeO32?離子構(gòu)建一個緩釋系統(tǒng)，通過模型藥物緩釋硒，拓寬給藥方式，可用于常規(guī)或靶向療法，提高藥物生物利用度。
【專利說明】
一種可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及生命科學(xué)、醫(yī)療靶向材料的天然高分子緩釋微球制造領(lǐng)域，具體是一種可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]近代研究已證實人體必須營養(yǎng)微量元素砸具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎癥、抗高血壓、降血糖、提高免疫力等廣泛的生物學(xué)功能和藥理作用，特別是其防癌抗癌功能。人體缺砸易導(dǎo)致免疫能力下降，威脅人類健康和生命的四十多種疾病都與缺砸相關(guān)。在砸元素的幾種存在形態(tài)中，無機(jī)亞砸酸負(fù)離子的活性生理功能尤為突出:作為藥物片劑，臨床上用于治療和防治癌癥、早衰、高血壓、心血管疾病、更年期癥狀、皮膚病、性功能障礙、克山病、大骨節(jié)病等疾病，與抗癌藥物(如氟尿嘧啶)聯(lián)合用藥療效增強(qiáng)，作為化療輔助藥物可以減輕患者的痛苦。細(xì)胞實驗證實亞砸酸負(fù)離子能顯著誘導(dǎo)鼻咽癌、結(jié)直腸癌、肝肺癌、乳腺胰腺癌等癌細(xì)胞的凋亡。但砸元素和人體其他生命元素一樣是把雙刃劍，缺少引發(fā)多種疾病，適量有益，超量反而引起機(jī)體中毒。一切砸產(chǎn)品如若短時間內(nèi)砸釋放量過大，反而有害身體。因此，無機(jī)亞砸酸負(fù)離子藥物雖治病、抗癌等效力強(qiáng)但用量難以把握，臨床上易過量而造成中毒，使得其廣泛應(yīng)用受到極大限制。怎樣讓砸產(chǎn)品材料能長時間緩慢釋放安全有效的砸作用濃度將是影響其應(yīng)用的瓶頸因素。
[0003]殼聚糖(chitosan，CS)是唯一一種天然聚陽離子弱堿性多糖，除具有體內(nèi)止血、抑菌等生理活性外，其無毒性、良好的生物相容性和可降解性，被譽(yù)為最具應(yīng)用前景的載藥材料之一。國內(nèi)外研究將殼聚糖制備成微/納米球等靶向給藥緩釋材料，在藥物運送、緩釋、控釋等方面發(fā)揮重要作用。根據(jù)反應(yīng)介質(zhì)和體系特性，目前殼聚糖微球的制備方法主要有乳化交聯(lián)法、離子凝膠法、噴霧干燥法、凝聚/沉淀法、溶劑蒸發(fā)法等。其中乳化交聯(lián)法可包載親水或疏水的多物種，且具有微球結(jié)構(gòu)較為致密，球形較規(guī)整，粒徑小、分散性好、載藥量較為理想等優(yōu)點，可用于普通藥物(如法莫替丁、奈普生、甲硝唑、引哚美辛、阿司匹林、布洛芬等)的載體，生物大分子藥物(如疫苗、蛋白質(zhì)、多肽)載體、抗癌藥物(如絲裂霉素、順鉑、紫杉醇、喜樹堿等)的載體，實驗證明微/納米球能提高藥物穩(wěn)定性，將藥物緩慢釋放并靶向送達(dá)體內(nèi)的作用部位，保持藥物長期活性，保護(hù)藥物免受消化道酶的破壞及PH值的影響。作為營養(yǎng)藥物(目前只有維生素)載體的研究報道相對較少。殼聚糖微球的制備工藝參數(shù)的優(yōu)化和應(yīng)用是未來藥緩釋功能材料研究的重要方向。而殼聚糖載砸緩釋微球的研究國內(nèi)外尚未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球及其制備方法，制得的載砸殼聚糖微球的粒徑范圍為40_600μπι，材料緩釋砸可達(dá)116天，每天釋砸量在57.58yg-0.606yg 區(qū)間范圍。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
[0006]—種可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，包括以下步驟:
[0007](I)水相基質(zhì)的制備:稱取Na2SeO3于2% (v/v)的醋酸溶液中，配制成砸醋酸溶液；稱取殼聚糖固體粉末于砸醋酸溶液中，磁力攪拌使殼聚糖完全溶解，配制成含砸殼聚糖溶液，靜置過夜使其澄清透明，即為制備載砸殼聚糖微球所需的水相基質(zhì)；
[0008](2)油相基質(zhì)的制備:量取Span-80于液體石蠟中，攪拌均勻，配制成含5% (v/v)Span-80的石錯油體系，此為制備載砸殼聚糖微球所需的油相基質(zhì)；
[0009](3)載砸殼聚糖微球的乳化、交聯(lián)、固化及精制:在一定溫度條件下，按水:油(V: V)= 1:5將水相基質(zhì)緩慢滴加到油相基質(zhì)中，邊滴加邊磁力攪拌，待水相基質(zhì)滴加完全后，繼續(xù)攪拌Ih，使水油兩相充分乳化，緩慢滴加交聯(lián)劑，繼續(xù)攪拌2h，使交聯(lián)劑與殼聚糖充分交聯(lián)，靜置分層，去除上層液相，收集沉淀物，用石油醚和無水乙醇分別抽濾洗滌直至濾液澄清透明，此即為載砸殼聚糖微球半成品；滴加丙酮，使載砸殼聚糖微球相互分散，于45°C烘箱中烘干，得載砸殼聚糖微球。
[0010]作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案:步驟(I)中，含砸殼聚糖溶液中殼聚糖質(zhì)量濃度為0.5%-3%。
[0011 ]作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案:步驟(I)中，含砸殼聚糖溶液中殼聚糖質(zhì)量濃度為I %-
[0012]作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案:步驟(I)中，砸醋酸溶液中Na2SeO3的質(zhì)量濃度為0.2%-1.6%。
[0013]作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案:步驟(I)中，砸醋酸溶液中Na2SeO3的質(zhì)量濃度為0.4%-0.8%。
[0014]作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案:步驟(3)中，反應(yīng)溫度為35°C_65°C。
[0015]作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案:步驟(3)中，反應(yīng)溫度為45°C_55°C。
[0016]作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案:步驟(3)中，交聯(lián)劑用量為2.5%_15%。
[0017]作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案:步驟(3)中，交聯(lián)劑用量為5%_10%。
[0018]作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案:交聯(lián)劑為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12.5%的戊二醛溶液。
[0019]本發(fā)明的另一目的是根據(jù)上述制備方法制得載砸殼聚糖微球。制備的載砸殼聚糖微球呈球性能良好，包封率在27.54 % -75.82 %范圍，載藥量在1.45 % -9.01 %范圍內(nèi)，載砸殼聚糖微球粒徑在50-600μπι之間，有效緩釋時間可達(dá)116天。
[0020]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:
[0021]本發(fā)明創(chuàng)造的有益效果是:本發(fā)明以天然殼聚糖為壁材基質(zhì)，采用乳化交聯(lián)法在不同的條件下制備載砸負(fù)離子殼聚糖微球，以石蠟油為分散介質(zhì)，Span-80為乳化劑，戊二醛為交聯(lián)劑，以粒徑分布和包封率為評價指標(biāo)對制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，將引入的藥物封裝在微球中，通過調(diào)控載藥物量、微球的粒徑和材質(zhì)等方式，實現(xiàn)對材料緩釋活性砸量的控制。
[0022]本發(fā)明可控補(bǔ)砸量。載砸殼聚糖微球，緩釋安全的活性砸作用濃度，有效解決了一直以來補(bǔ)砸量難以把握的難題，可防止盲目補(bǔ)砸可能造成的急/慢性砸中毒現(xiàn)象，使砸的多種生理活性功能能夠充分合理應(yīng)用；涉及一種科學(xué)補(bǔ)砸的應(yīng)用模式，作為某些需要長效釋放砸藥物的載體，給藥方式可采用常規(guī)或靶向療法，提高藥物生物利用度;將砸和殼聚糖復(fù)合于一體的微球，兼具二者的活性功能，應(yīng)用中可發(fā)揮二者的活性功效。
[0023]本發(fā)明結(jié)合殼聚糖和砸的優(yōu)良特性，制備可控緩釋砸的殼聚糖微球，為抗癌藥物Se032—離子構(gòu)建一個緩釋系統(tǒng)，通過模型藥物緩釋砸，避免Se032—藥物在體內(nèi)的過量而引發(fā)的中毒難題，且拓寬給藥方式，可用于常規(guī)或靶向療法，使砸的多種生理活性功能能夠充分合理應(yīng)用，提高藥物生物利用度。
【具體實施方式】
[0024]下面將結(jié)合本發(fā)明實施例，對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0025]實施例1
[0026]本發(fā)明實施例中，不同的殼聚糖濃度制備載砸殼聚糖微球:(I)載砸殼聚糖基質(zhì)水相的制備:準(zhǔn)確稱取一定質(zhì)量亞砸酸鈉于2% (v/v)的醋酸溶液中，配制含Na2SeO3為0.2%的砸醋酸溶液;稱取一定量的殼聚糖固體粉末于砸醋酸溶液中，磁力攪拌使殼聚糖完全溶解，配制成殼聚糖濃度為0.5%、1%、2%、3%的載砸殼聚糖溶液，靜置過夜至澄清透明；(2)油相基質(zhì)的制備:量取一定量的Span-80于液體石錯中，攪拌均勾，配制成含5% (v/v)Span-80的石蠟油體系；(3)載砸殼聚糖微球的乳化、交聯(lián)、固化及精制:在35°C溫度下，按水:油(V:V) = 1:5將水相緩慢滴加到油相中，邊滴加邊磁力攪拌，待水相滴加完全后，繼續(xù)攪拌Ih，使水油兩相充分乳化，緩慢滴加質(zhì)量濃度為12.5 %的戊二醛，使其量達(dá)到總體積的5 %，攪拌交聯(lián)2h，靜置分層，去除上層液相，收集沉淀物，用石油醚和無水乙醇分別抽濾洗滌數(shù)次直至濾液澄清透明，此即為載砸殼聚糖微球。滴加數(shù)滴丙酮，使微球顆粒相互分散，于45°C烘箱中烘干，得載砸殼聚糖微球。當(dāng)殼聚糖濃度為0.5%、1%、2%、3%的條件下，微球的包封率為 37.61%、56.62%、68.11%、75.82%范圍，載藥量為3.27%、2.14%、1.92%、1.45%。
[0027]實施例2
[0028]本發(fā)明實施例中，不同的Na2SeO3濃度制備載砸殼聚糖微球:(I)載砸殼聚糖基質(zhì)水相的制備:準(zhǔn)確稱取一定質(zhì)量亞砸酸鈉于2% (v/v)的醋酸溶液中，配制含Na2Se03為0.2%、
0.4%、0.8%、1.6%的砸醋酸溶液;稱取一定量的殼聚糖固體粉末于砸醋酸溶液中，磁力攪拌使殼聚糖完全溶解，配制成殼聚糖濃度為2%的載砸殼聚糖溶液，靜置過夜至澄清透明；
(2)油相基質(zhì)的制備:量取一定量的Span-80于液體石錯中，攪拌均勾，配制成含5% (v/v)Span-80的石蠟油體系；(3)載砸殼聚糖微球的乳化、交聯(lián)、固化及精制:在35°C溫度下，按水:油(V: V) = 1:5將水相緩慢滴加到油相中，邊滴加邊磁力攪拌，待水相滴加完全后，繼續(xù)攪拌使水油兩相乳化Ih，緩慢滴加質(zhì)量濃度為12.5 %的戊二醛，使其量達(dá)到總體積的5 %，攪拌交聯(lián)2h，靜置分層，去除上層液相，收集沉淀物，用石油醚和無水乙醇分別抽濾洗滌數(shù)次直至濾液澄清透明，此即為載砸殼聚糖微球。滴加數(shù)滴丙酮，使微球顆粒相互分散，于450C烘箱中烘干，得載砸殼聚糖微球。當(dāng)Na2SeO3濃度為0.2%、0.4%、0.8%、1.6%的條件下，微球的包封率為 63.51%、56.72%、56.30%、27.54%，載藥量為2.17%、3.42%、5.52%、9.01%。
[0029]實施例3
[0030]本發(fā)明實施例中，不同的反應(yīng)溫度制備載砸殼聚糖微球。(I)載砸殼聚糖基質(zhì)水相的制備:準(zhǔn)確稱取一定質(zhì)量亞砸酸鈉于2% (v/v)的醋酸溶液中，配制含Na2SeO3為0.2%的砸醋酸溶液;稱取一定量的殼聚糖固體粉末于砸醋酸溶液中，磁力攪拌使殼聚糖完全溶解，配制成殼聚糖濃度為2%的載砸殼聚糖溶液，靜置過夜至澄清透明；(2)油相基質(zhì)的制備:量取一定量的Span-80于液體石錯中，攪拌均勾，配制成含5% (v/v)Span_80的石錯油體系；(3)載砸殼聚糖微球的乳化、交聯(lián)、固化及精制:在反應(yīng)溫度為35°(:、45°(:、55°(:、65°(:的條件下進(jìn)行試驗，按水:油(V: V) = 1:5將水相緩慢滴加到油相中，邊滴加邊磁力攪拌，待水相滴加完全后，繼續(xù)攪拌Ih，使水油兩相充分乳化，緩慢滴加質(zhì)量濃度為12.5 %的戊二醛，使其量達(dá)到總體積的5%，攪拌交聯(lián)2h，靜置分層，去除上層液相，收集沉淀物，用石油醚和無水乙醇分別抽濾洗滌數(shù)次直至濾液澄清透明，此即為載砸殼聚糖微球。滴加數(shù)滴丙酮，使微球顆粒相互分散，于45°(:烘箱中烘干，得載砸殼聚糖微球。當(dāng)反應(yīng)溫度為35°(:、45°(:、55°(:、651€的條件下，微球的包封率為62.30%、64.68%、69.26%、64.35%，載藥量為2.09%、2.12%、2.08%、1.90%ο[0031 ] 實施例4
[0032]本發(fā)明實施例中，不同的交聯(lián)劑用量制備載砸殼聚糖微球:(I)載砸殼聚糖基質(zhì)水相的制備:準(zhǔn)確稱取一定質(zhì)量亞砸酸鈉于2% (v/v)的醋酸溶液中，配制含Na2SeO3為0.2%的砸醋酸溶液;稱取一定量的殼聚糖固體粉末于砸醋酸溶液中，磁力攪拌使殼聚糖完全溶解，配制成殼聚糖濃度為2%的載砸殼聚糖溶液，靜置過夜至澄清透明；(2)油相基質(zhì)的制備:量取一定量的Span-80于液體石錯中，攪拌均勾，配制成含5% (v/v)Span_80的石錯油體系；
(3)載砸殼聚糖微球的乳化、交聯(lián)、固化及精制:在35 °C溫度下，按水:油(V: V) = 1:5將水相緩慢滴加到油相中，邊滴加邊磁力攪拌，待水相滴加完全后，繼續(xù)攪拌Ih，使水油兩相充分乳化，緩慢滴加質(zhì)量濃度為12.5%的戊二醛作為交聯(lián)劑，且分別在交聯(lián)劑的用量為2.5%、5 %、10 %、15 %的條件下進(jìn)行試驗，攪拌交聯(lián)2h，靜置分層，去除上層液相，收集沉淀物，用石油醚和無水乙醇分別抽濾洗滌數(shù)次直至濾液澄清透明，此即為載砸殼聚糖微球。滴加數(shù)滴丙酮，使微球顆粒相互分散，于45°C烘箱中烘干，得載砸殼聚糖微球。當(dāng)交聯(lián)劑用量為2.5%、5%、10%、15%的條件下，微球的包封率為57.33%、67.31%、75.40%、54.92%，載藥量為1.96%、2.40%、2.29%、1.70%。
[0033]上述實施例雖對本發(fā)明的設(shè)計思路作了詳細(xì)的文字?jǐn)⑹觯@些文字描述只是對本發(fā)明設(shè)計思路的簡單文字描述，而非對本發(fā)明設(shè)計思路的限制，任何不超出本發(fā)明設(shè)計思路的組合、增加或修改，比如其它高分子(如魔芋葡甘聚糖、聚乳酸等)載砸的載體，交聯(lián)劑改為甲醛、焦磷酸等，油相或乳化劑作適當(dāng)修改等等，均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
[0034]對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實施例的細(xì)節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實現(xiàn)本發(fā)明。因此，無論從哪一點來看，均應(yīng)將實施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)水相基質(zhì)的制備:稱取Na2SeO3于2%(v/v)的醋酸溶液中，配制成砸醋酸溶液;稱取殼聚糖固體粉末于砸醋酸溶液中，磁力攪拌使殼聚糖完全溶解，配制成含砸殼聚糖溶液，靜置過夜使其澄清透明，即為制備載砸殼聚糖微球所需的水相基質(zhì)； (2)油相基質(zhì)的制備:量取Span-80于液體石錯中，攪拌均勾，配制成含5%(v/v)Span_80的石蠟油體系，此為制備載砸殼聚糖微球所需的油相基質(zhì)； (3)載砸殼聚糖微球的乳化、交聯(lián)、固化及精制:在一定溫度條件下，按水:油(V:V) = 1:5將水相基質(zhì)緩慢滴加到油相基質(zhì)中，邊滴加邊磁力攪拌，待水相基質(zhì)滴加完全后，繼續(xù)攪拌Ih，使水油兩相充分乳化，緩慢滴加交聯(lián)劑，繼續(xù)攪拌2h，使交聯(lián)劑與殼聚糖充分交聯(lián)，靜置分層，去除上層液相，收集沉淀物，用石油醚和無水乙醇分別抽濾洗滌直至濾液澄清透明，此即為載砸殼聚糖微球半成品；滴加丙酮，使載砸殼聚糖微球相互分散，于45°C烘箱中烘干，得載砸殼聚糖微球。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，其特征在于，步驟(I)中，含砸殼聚糖溶液中殼聚糖質(zhì)量濃度為0.5%-3%。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，其特征在于，步驟(I)中，含砸殼聚糖溶液中殼聚糖質(zhì)量濃度為1%_2%。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，其特征在于，步驟(I)中，砸醋酸溶液中Na2SeO3的質(zhì)量濃度為0.2 % -1.6 %。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，其特征在于，步驟(I)中，砸醋酸溶液中Na2SeO3的質(zhì)量濃度為0.4%-0.8%。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，反應(yīng)溫度為35 °C -65 °C。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，反應(yīng)溫度為45 0C -55 °C。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，交聯(lián)劑用量為2.5 % -15 %。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的可控緩釋砸負(fù)離子的載砸殼聚糖微球的制備方法，其特征在于，交聯(lián)劑采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為12.5%的戊二醛溶液。10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一所述的制備方法制得載砸殼聚糖微球。
【文檔編號】A61K47/36GK105832675SQ201610176687
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年3月24日
【發(fā)明人】劉信平, 張馳, 商龍臣, 李光大
【申請人】湖北民族學(xué)院