一種活性多肽組合物及其在動(dòng)物疫苗中的應(yīng)用
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種活性多肽組合物及其在動(dòng)物疫苗中的應(yīng)用，包括Lys?His?Gly?NH2和Salpichrolide O，專(zhuān)用于提高動(dòng)物諸如雞、鴨、兔、豬、羊、犬、牛、鹿等家畜、家禽及各類(lèi)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的免疫能力，并能提高疫苗的免疫效果。由于活性多肽是動(dòng)物體內(nèi)存在的純天然物質(zhì)，分子量小，單獨(dú)或與疫苗同時(shí)使用沒(méi)有毒性，不產(chǎn)生抗活性多肽的抗體，它是通過(guò)提高宿主自身的免疫應(yīng)答能力而提高機(jī)體免疫力，十分安全、可靠?；钚远嚯幕瘜W(xué)合成制造方便，成本低廉，使用藥用級(jí)活性多肽更加安全、可靠。Salpichrolide O也是一種純天然物質(zhì)，分子量小，單獨(dú)或與疫苗同時(shí)使用沒(méi)有毒性，與活性多肽配合使用可以進(jìn)一步提高宿主自身的免疫應(yīng)答能力從而提高進(jìn)一步機(jī)體免疫力。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種活性多肽組合物及其在動(dòng)物疫苗中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于動(dòng)物疫苗領(lǐng)域，具體涉及一種活性多肽組合物及其在動(dòng)物疫苗中的應(yīng) 用，專(zhuān)用于提高動(dòng)物諸如雞、鴨、兔、豬、羊、犬、牛等家畜、家禽及各類(lèi)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的免疫能力， 并能提高疫苗的免疫效果。
【背景技術(shù)】
[0002] 佐劑按其作用方式可分為兩大類(lèi)，一是作用于疫苗，改善疫苗本身的性能，如傳統(tǒng) 的化學(xué)佐劑氫氧化鋁膠和油類(lèi)可以減緩疫苗抗原在體內(nèi)的釋放速率，但往往引起注射部位 腫脹甚至感染化濃等不良反應(yīng)。皂素糖苷可以與某些抗原蛋白及膽固醇結(jié)合形成免疫刺激 復(fù)合物，使非顆粒性的抗原形成顆粒結(jié)構(gòu)，從而增強(qiáng)疫苗的免疫效果，但因來(lái)源有限而使成 本較高。另一類(lèi)是直接作用于動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞，增強(qiáng)機(jī)體的自主免疫應(yīng)答能力，如胸腺素直接 作用于T淋巴細(xì)胞、白介素作用于T、B淋巴細(xì)胞及其它細(xì)胞，但均因其成本太高而無(wú)法用于 動(dòng)物。
[0003] 目前佐劑的品種較多，分別來(lái)自動(dòng)物（如胸腺素、白介素、干擾素、蜂蠟等）、植物 (如植物血凝素、黃芪多糖、人參皂甙等）、微生物(如真菌多糖、分枝桿菌細(xì)胞壁等)及化學(xué) 合成物(如左旋咪唑、氫氧化鋁、聚肌一胞等）。上述各種佐劑中，有些還在研究階段，尚未應(yīng) 用于生產(chǎn)，如白介素、真菌多糖等;有些雖然已應(yīng)用于人類(lèi)如胸腺素和干擾素，但因其價(jià)格 較昂貴或來(lái)源有限而不可能用于動(dòng)物。目前動(dòng)物疫苗所用佐劑主要還是從物理學(xué)角度提高 其免疫效果，例如氫氧化鋁、油類(lèi)、蜂蠟等，但這些佐劑不但性質(zhì)粘稠，不易注射，而且容易 引起局部腫脹、甚至感染化濃等副作用。因此目前還沒(méi)有具有直接增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體自身免疫 應(yīng)答能力的生物活性佐劑來(lái)從治本角度提高免疫效果。
[0004] 阻礙畜禽養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要問(wèn)題是疾病，尤其是傳染病。疫苗接種是預(yù)防傳染病 最基本、最有效的方法，但是由于多種原因，目前許多疫苗的免疫效果還不十分理想，不能 對(duì)動(dòng)物提供完全保護(hù)。因此人們進(jìn)行了大量的研究工作，試圖通過(guò)不同途徑來(lái)提高疫苗的 效果，這些途徑包括提高疫苗質(zhì)量(如增加抗原含量、增強(qiáng)免疫原性、使用高效佐劑、優(yōu)化制 苗工藝等）、改進(jìn)免疫方法(如采用粘膜免疫、胚胎免疫、超前免疫等)及增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體自身 的免疫應(yīng)答能力(如使用免疫增強(qiáng)劑、減少有毒物質(zhì)對(duì)免疫系統(tǒng)的損害、控制免疫抑制性病 原微生物的侵染、提供良好的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件等）。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種用作動(dòng)物疫苗佐劑的活性多肽組合物，專(zhuān)用于提高動(dòng) 物諸如雞、鴨、兔、豬、羊、犬、牛、鹿等家畜、家禽及各類(lèi)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的免疫能力，并提高疫苗的 免疫效果。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過(guò)下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] -種組合物，包括活性多肽Lys-His-Gly-NH2和Salpichrolide 0。
[0008] 進(jìn)一步地，所述組合物中活性多肽1^8-把8-617-顯2和33]^；[(3111'011(160重量份比 為8~12:1。
[0009] 進(jìn)一步地，所述組合物中活性多肽1^8-把8-617-順2和3&]^;[(3111'011(160重量份之 比為10:1。
[0010] 進(jìn)一步地，所述組合物中活性多肽1^8-把8-617-顯2和33]^；[(3111'011(160重量份之 比為8:1。
[0011] 進(jìn)一步地，所述組合物中活性多肽Lys_His_Gly_NH2和Salpichrolide 0重量份之 比為12:1。
[0012]上述組合物在增強(qiáng)動(dòng)物免疫力方面的應(yīng)用。
[0013] 進(jìn)一步地，所述活性多肽為藥用級(jí)活性多肽。
[0014] 上述組合物用作動(dòng)物疫苗佐劑的用途。
[0015] 進(jìn)一步地，所述活性多肽為藥用級(jí)活性多肽。
[0016] 進(jìn)一步地，每1000ml的動(dòng)物疫苗與6~10yg組合物配合使用，按疫苗常規(guī)劑量用于 動(dòng)物。
[0017] 活性多肽(LyS-HiS-Gly-NH2)是存在于禽類(lèi)法氏囊(也叫囊上腔)組織中的一種免 疫活性物質(zhì)，由法氏囊的濾泡和樹(shù)突網(wǎng)狀上皮細(xì)胞產(chǎn)生。其化學(xué)本質(zhì)是由賴氨酸、組氨酸和 甘氨酸組成的天然三肽，對(duì)熱及滅活劑穩(wěn)定。Salpichrolide 0是一種從真菌中分離得到的 天然產(chǎn)物，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，對(duì)熱及滅活劑穩(wěn)定。
[0018] 由于活性多肽是動(dòng)物體內(nèi)存在的純天然物質(zhì)，分子量小，單獨(dú)或與疫苗同時(shí)使用 沒(méi)有毒性，不產(chǎn)生抗活性多肽的抗體，它是通過(guò)提高宿主自身的免疫應(yīng)答能力而提高機(jī)體 免疫力，十分安全、可靠?；钚远嚯幕瘜W(xué)合成制造方便，成本低廉，使用藥用級(jí)活性多肽更加 安全、可靠。Salpichrolide 0也是一種純天然物質(zhì)，分子量小，單獨(dú)或與疫苗同時(shí)使用沒(méi)有 毒性，與活性多肽配合使用可以進(jìn)一步提高宿主自身的免疫應(yīng)答能力從而提高進(jìn)一步機(jī)體 免疫力。
[0019] 本發(fā)明組合物單獨(dú)用于動(dòng)物既可注射，也可口服，注射比□服效果更好，口服比注 射更方便，增強(qiáng)免疫效果。本發(fā)明組合物作為疫苗佐劑，可以有針對(duì)性地提高疫苗的免疫保 護(hù)率。由于本發(fā)明組合物是通過(guò)提高宿主自身免疫應(yīng)答能力而達(dá)到增強(qiáng)疫苗免疫效果的目 的，絕無(wú)毒副作用、藥物殘留及接種部位局部損傷等，是一種理想佐劑。
[0020] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0021] 1、本發(fā)明提供的組合物可以增強(qiáng)動(dòng)物免疫力；
[0022] 2、本發(fā)明提供的組合物可以用作動(dòng)物疫苗佐劑提高疫苗的免疫效果。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0024] 本發(fā)明化合物Salpichrolide 0的制備方法參見(jiàn)文獻(xiàn)：Withanolides with Phytotoxic Activity from Two Species ofthe Genus Salpichroa:S.origanifolia and S.tristis var.Lehmannii,J.Nat.Prod.2013,76,2219-2225〇
[0025] 下述實(shí)施例中，活性多肽組合物中活性多肽Lys-His-Gly_NH2和Salpichrolide 0 的重量份之比均為10:1。但經(jīng)試驗(yàn)證明，活性多肽Lys-His-Gly-NH2和Salpichrolide 0的 重量份之比為8~12:1時(shí)，均有明顯效果。
[0026]實(shí)施例1:對(duì)麻鴨的免疫增強(qiáng)作用
[0027] 2月齡麻鴨，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0028] 活性多肽組合物組注射組合物50納克，活性多肽組單獨(dú)注射活性多肽50納克，對(duì) 照組注射等量無(wú)菌水。3天后用鴨疫巴氏桿菌攻毒，各組死亡率見(jiàn)下表。
[0030]實(shí)施例2:對(duì)肉雞的免疫增強(qiáng)作用
[0031] 1日齡艾維茵肉雞，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0032] 活性多肽組合物組口服組合物30納克，活性多肽組單獨(dú)口服活性多肽30納克，對(duì) 照組口服等量純化水。1周后用傳染性支氣管炎病毒攻擊，各組發(fā)病率見(jiàn)下表。
[0034]實(shí)施例3:提高疫苗對(duì)肉鴿的免疫效果
[0035] 1月齡肉鴿，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0036] 活性多肽組合物組注射組合物20納克，活性多肽組單獨(dú)注射活性多肽20納克，對(duì) 照組注射等量無(wú)菌水。3天后，再用雞新城疫病毒LaSota株疫苗點(diǎn)眼免疫。免疫后2周用新城 疫F48E8株強(qiáng)毒攻擊，各組保護(hù)率見(jiàn)下表。
[0038]實(shí)施例4:提高疫苗對(duì)珍珠雞的免疫效果
[0039] 1月齡珍珠雞，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0040]各組注射新城疫IV系疫苗后3天，活性多肽組合物組再注射組合物20納克，活性多 肽組單獨(dú)注射活性多肽20納克，對(duì)照組僅注射等量無(wú)菌水。2周后用新城疫F48E8株強(qiáng)毒攻 擊，，各組保護(hù)率見(jiàn)下表。

[0042]實(shí)施例5:提高疫苗對(duì)白兔的免疫效果
[0043] 1月齡新西蘭大耳白兔，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0044] 活性多肽組合物組口服組合物50納克，活性多肽組單獨(dú)口服活性多肽50納克，對(duì) 照組口服等量純化水。3天后注射兔出敗疫苗，免疫后3周用兔多殺性巴氏桿菌強(qiáng)毒攻擊，各 組保護(hù)率見(jiàn)下表。
[0046]實(shí)施例6:提高疫苗對(duì)水貂的免疫效果
[0047] 1月齡水貂，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0048] 活性多肽組合物組口服組合物50納克，活性多肽組單獨(dú)口服活性多肽50納克，對(duì) 照組口服等量純化水。2天后注射水貂病毒性腸炎疫苗，免疫后3周用貂細(xì)小病毒強(qiáng)毒攻擊， 各組保護(hù)率見(jiàn)下表。
[0050] 實(shí)施例7:提高疫苗對(duì)雛雞的免疫效果
[0051] 15日齡伊莎蛋用雛雞，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0052] 活性多肽組合物組注射含有8微克組合物/千毫升的雞傳染性法氏囊病疫苗0.2毫 升，活性多肽組注射含有8微克活性多肽/千毫升的雞傳染性法氏囊病疫苗0.2毫升，對(duì)照組 僅注射雞傳染性法氏囊病疫苗0.2毫升。免疫后4周用強(qiáng)毒攻擊，各組保護(hù)率見(jiàn)下表。
[0054] 實(shí)施例8:提高疫苗對(duì)家兔的免疫效果
[0055] 30日齡家兔，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0056] 活性多肽組合物組接種含有10微克組合物/千毫升的兔巴氏桿菌滅活疫苗1毫升， 活性多肽組接種含有10微克活性多肽/千毫升的兔巴氏桿菌滅活疫苗1毫升，對(duì)照組僅接種 兔巴氏桿菌滅活疫苗1毫升。免疫后4周用強(qiáng)毒菌攻擊，各組保護(hù)率見(jiàn)下表。

[0058]實(shí)施例9:提高疫苗對(duì)仔豬的免疫效果
[0059] 1日齡杜洛克商品仔豬，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0060]活性多肽組合物組接種含有15微克組合物/千毫升的豬肺疫菌苗2毫升，活性多肽 組接種含有15微克活性多肽/千毫升的豬肺疫菌苗2毫升，對(duì)照組接種豬肺疫菌苗2毫升。免 疫后3周用強(qiáng)毒菌株攻擊，各組保護(hù)率見(jiàn)下表。
[0062]實(shí)施例10:提高疫苗對(duì)土種犬的免疫效果
[0063] 1月齡土種犬，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0064]活性多肽組合物組接種含有20微克組合物/千毫升的細(xì)小病毒疫苗0.6毫升，活性 多肽組接種含有20微克活性多肽/千毫升的細(xì)小病毒疫苗0.6毫升，對(duì)照組接種細(xì)小病毒疫 苗0.6毫升。免疫后3周用強(qiáng)毒攻擊，各組保護(hù)率見(jiàn)下表。
[0066]~實(shí)施例11:提高疫苗對(duì)犢牛的免疫效果
[0067] 6月齡犢牛，分為三組:活性多肽組合物組、活性多肽組和對(duì)照組。
[0068]活性多肽組合物組接種含有40微克組合物/千毫升的牛出敗疫苗3毫升，活性多肽 組接種含有40微克活性多肽/千毫升的牛出敗疫苗3毫升，對(duì)照組接種牛出敗疫苗3毫升。免 疫后4周用強(qiáng)毒攻擊，各組保護(hù)率見(jiàn)下表。
[0070] 上述試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的組合物不僅可以增強(qiáng)動(dòng)物免疫力，還可以用作 動(dòng)物疫苗佐劑提高疫苗的免疫效果，作用效果優(yōu)于單獨(dú)的活性多肽。
[0071] 上述實(shí)施例的作用在于說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征在于:包括活性多肽Lys-His-Gly-Mfc和Salpichrolide 0。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于：活性多肽Ly s -Η i s -G1 y-NH2和 Salpichrolide 0的重量份之比為8~12:1。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其特征在于：活性多肽Ly s -H i s -G1 y-NH2和 Salpichrolide 0的重量份之比為10:1。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其特征在于：活性多肽Ly s -H i s -G1 y-NH2和 Salpichrolide 0的重量份之比為8:1。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其特征在于：活性多肽Ly s -H i s -G1 y-NH2和 Salpichrolide 0的重量份之比為12:1。6. 權(quán)利要求1~5任一所述的組合物在增強(qiáng)動(dòng)物免疫力方面的應(yīng)用。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于:所述活性多肽為藥用級(jí)活性多肽。8. 權(quán)利要求1~5任一所述的組合物用作動(dòng)物疫苗佐劑的用途。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，其特征在于:所述活性多肽為藥用級(jí)活性多肽。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于:每1000ml的動(dòng)物疫苗與6~10yg所述組合 物配合使用，按疫苗常規(guī)劑量用于動(dòng)物。
【文檔編號(hào)】A61K39/39GK105853992SQ201610200817
【公開(kāi)日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年4月1日
【發(fā)明人】崔長(zhǎng)友
【申請(qǐng)人】崔長(zhǎng)友