人類免疫缺陷病毒/獲得性免疫缺陷綜合癥的治療的制作方法
【專利摘要】公開了治療患有人類免疫缺陷病毒的患者的方法。該方法包括提供皮內(nèi)劑量和靜脈劑量的aTh1組合物，該組合物可以增加患者體內(nèi)抗HIV的CD4+細胞。該說明書包括病毒載量降低方法和病毒清除方法。該方案導(dǎo)致病毒載量的峰值，然后返回到病毒的基線以下水平，并可能導(dǎo)致潛在病毒貯存庫的減少和/或消除。根據(jù)該方案配置成提供皮內(nèi)劑量和靜脈劑量的試劑盒也包括在內(nèi)。
【專利說明】
人類免疫缺陷病毒/獲得性免疫缺陷綜合癥的治療
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法的治療，更具體地涉及HIV/AIDS的免疫治療。
【背景技術(shù)】
[0002]1981年在美國最早報道了 AIDS，至今已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)的主要流行病。AIDS是由人免疫缺陷病毒或HIV引起的。今天，生活在世界各地超過3千萬人被病毒感染(Cohen，Hellmann等人2008) AIV通過殺死或破壞機體免疫系統(tǒng)的細胞，特別是消除表達⑶4分子(如CD4+輔助T淋巴細胞(導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)的CD4/CD8T-細胞比)和單核細胞/巨噬細胞譜系的細胞(Fauci 1996))的免疫細胞而逐步破壞機體對抗感染和其它疾病的能力。
[0003]CD4T細胞成熟化為兩個極化功能型，稱為aThl和Th2(Mosmann和Coffman 1989 ；Mosmann和Sad 1996) Jhl型CD4+細胞負責(zé)調(diào)節(jié)細胞免疫而Th2CD4+細胞負責(zé)調(diào)節(jié)體液免疫(D’El1s和Del Prete 1998) AIV感染導(dǎo)致了產(chǎn)生逆轉(zhuǎn)的Thl/Th2細胞比的Thl亞群的逐漸喪失以及細胞免疫(Becker 2004)的喪失。HIV患者體內(nèi)Thl免疫的喪失和轉(zhuǎn)變到Th2為主的免疫與徹底的免疫抑制和從HIV陽性狀態(tài)到AIDS的進展相關(guān)聯(lián)(Klein ,Dobmeyer等人.1997)。患有AIDS的患者的死亡的主要原因之一是由于抑制細胞免疫系統(tǒng)的機會性感染(Baker和Leigh 1991)0
[0004]HIV具有多種免疫逃逸策略。這些策略包括突變逃逸、潛伏、病毒包膜上的抗體結(jié)合位點掩蔽、I型主要組織相容性復(fù)合體(MHC-1)的下調(diào)、受感染的細胞表面的Fas配體的上調(diào)(Piguet和Trono 2001)和誘導(dǎo)產(chǎn)生IL-10 (Leghmari , Bennasser等人2008 ； Brockman,Kwon等人2009)。此外，有些病毒基因(如vif、vpr、vpu和nef基因)翻譯起抑制抗病毒免疫應(yīng)答作用的蛋白質(zhì)(Kirchhoff 2010)。這些病毒逃逸機制使病毒逃避利用免疫學(xué)方法的控制(Migueles，Ti I ton 等人 2006 ； Bansal ,Yue 等人2007; Feinberg 和 Ahmed 2012; Teshome 等Assefa 2014)。
[0005]已對HIV病毒學(xué)進行了深入研究，并已對HIV的病毒結(jié)構(gòu)和生命周期進行了描述(Pomerantz 2002;Sierra,Kupfer等人2005;Li and Craigie 2006；Cohen 2008；Scherer,Douek等人2008;Fanales-Belas1 ,Raimondo等人2010)。單個HIV顆粒稱為病毒體。病毒體的形狀像尖的球體。球體的中央核心被稱為衣殼。衣殼含有稱為病毒RNA的兩條單鏈HIVRNA0當(dāng)在血清中檢測到病毒RNA時，病毒RNA的量稱為病毒載量。病毒RNA編碼對病毒的生命周期重要的三種酶，其稱為逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶。對人類免疫系統(tǒng)這些酶是外源的并能夠由⑶8+CTL殺傷細胞(Haas ,Samri等人1998)識別。以這種方式，表達這些病毒酶的細胞是免疫消除的目標(biāo)。然而，病毒RNA還含有生產(chǎn)病毒輔助蛋白的指令，其用于幫助病毒逃避免疫消除(Seelamgari ,Maddukuri等人2004;Mal im和Emerman2008)。
[0006]核心的周圍是形成圍繞衣殼的外殼的保護性脂質(zhì)(脂肪)雙層(Frankel1996；Bradbury 2013)。這個外殼叫做病毒包膜。嵌入病毒包膜中的是名為evn的HIV蛋白。evn蛋白是由從形成尖的病毒體突出來的兩種糖蛋白(gpl20和gp41)所組成。尖的帽是gpl20，莖是gp41蛋白。HIV侵入宿主細胞，它必須首先利用gpl20附著到CD4受體上(Pancera，Majeed等人2010;Guttman和Lee 2013)。
[0007]gP120成功附著到CD4細胞后，該分子可改變形狀以避免被中和抗體識別出來，該過程被稱為構(gòu)象掩蔽(KW0ng，D0yle等人2002)。8?120構(gòu)象變化使得它結(jié)合到⑶4細胞表面上稱為趨化因子受體的第二受體上。
[0008]用作HIV病毒體的共同受體的CD4細胞表面上的趨化因子受體為CCR5或CXCR4(Moore ,Trkola等人1997)。病毒對使用一個趨化因子的共同受體還是另一個的偏好稱為“病毒嗜性”。巨噬細胞嗜性(M-嗜性)HIV利用趨化因子受體5(CCR5)以結(jié)合到細胞上(Cohen ,Kinter等人1997)。所有HIV感染的約90%涉及M-嗜性HIV毒株。也稱為融合素的CXCR4是T-嗜性HIV所使用的趨化因子受體(那些優(yōu)先感染的CD4T細胞)以附著到宿主細胞上(Hoxie ,LaBranche等人1998)。稱為DC-SIGN的另一個共同受體表達于樹突狀細胞上并還結(jié)合gp 120以便促進參與細胞免疫的這些重要細胞的病毒感染(Cunningham ,Harman等人2007)。被病毒感染的巨噬細胞可與CD4T細胞相互作用以及使病毒通過細胞-細胞感染(Martin和Sattentau 2009；Poli 2013)。此外，HIV能誘導(dǎo)T細胞形成合胞體，以促進細胞-細胞病毒轉(zhuǎn)移^!11；[1丨6，]\^;[1101:等人1990;1(0 2已1，Ramachandran等人 1994 ； Margolis ,Glushakova等人 1995)。
[0009]從甚至單個病毒體顆粒開始，HIV傳播導(dǎo)致新感染的建立。HIV病毒體在宿主感染的細胞內(nèi)被復(fù)制并釋放到血漿中，這導(dǎo)致了病毒血癥和劑體內(nèi)所有的淋巴組織的免疫細胞的持續(xù)性感染。HIV優(yōu)先感染具有高水平的CD4表面表達的T細胞和那些共表達CCR5的T細胞的亞群。記憶T細胞的亞群是優(yōu)選的目標(biāo)(Helbert ,Walter等人1997)，特別是HIV特異性記憶T細胞(0。1161<:，1^6。11167等人2002)和1'112/1'110細胞(]\&〖〖丨，Mazzetti等人1994)。
[0010]隨著免疫缺陷的發(fā)生，病毒發(fā)展到感染新的細胞類型。這與涉及從CCR5共受體偏好轉(zhuǎn)換到替代的CXCR4共受體的嗜性變化相關(guān)聯(lián)。這種轉(zhuǎn)換與受感染細胞擴張到除了優(yōu)選的記憶細胞外還包括初始CD4+T細胞相關(guān)聯(lián)。同樣地，病毒進化侵入表面上具有低水平的CD4細胞的能力，這增強了感染單核細胞/巨噬細胞的能力。幾乎只在在次級淋巴器官發(fā)現(xiàn)初始細胞，而記憶細胞和巨噬細胞具有更廣泛的組織分布，包括腦、組織和器官系統(tǒng)。初始細胞和巨噬細胞的感染建立了遍及機體和在用藥物或免疫療法難以靶向的位點的病毒感染細胞庫。
[0011]HIV的M-嗜性菌株和T-嗜性菌株也可以共存于機體內(nèi)，進一步復(fù)雜化靶向病毒消除的能力。在感染的某些時候，gpl20能夠附著到CCR5或CXCR4。具有這種性質(zhì)的HIV病毒體稱為雙嗜性病毒或R5X4 HIV(Toma,Whitcomb等人2010;Loftin,Kienzle等人2011;Svicher ,Balestra等人2011)?？梢岳镁奘杉毎蚑細胞上的CXCR4受體的HIV也稱為雙嗜性 X4 HIV (Huang，Esh Ieman 等人 2009; Gouwy, Struyf 等人 2011; Xiang ,Pacheco 等人 2013)。當(dāng)個體具有兩個病毒群時產(chǎn)生混合的嗜性;一個使用CCR5而另一個使用CXCR4以結(jié)合到CD4+T細胞。由于T-嗜性病毒和M-嗜性病毒的病毒學(xué)行為不同，混合的嗜性造成了藥物設(shè)計的難題。
[0012]一旦HIV包膜附著到了⑶4分子上并結(jié)合于共同受體，HIV包膜利用gp41包膜蛋白的結(jié)構(gòu)變化而與細胞膜融合并逃避中和抗體(Chen，Kwon等人2009)。然后HIV病毒體能夠穿透靶細胞膜。
[0013]一旦在宿主細胞內(nèi)，病毒逆轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)化病毒RNA至病毒DNA。將逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑開發(fā)為抗HIV療法(Nurutdinova和0verton2009 ； Chowers ,Ghowers ,Gottesman等人2010 ；Zhang和Liu2011)。一旦病毒RNA轉(zhuǎn)錄為DNA，然后該DNA能夠侵入宿主細胞的核中。使用另一種稱為整合酶的病毒酶，病毒DNA能夠整合到宿主細胞的染色體DNA中。整合酶抑制是抗病毒藥物開發(fā)的另一個革El標(biāo)(Geretti ,Armenia等人2012 ;0kello ,Nishonov等人2013)。整合病毒DNA稱為原病毒，當(dāng)宿主細胞分裂時與宿主染色體一起復(fù)制。原病毒整合到宿主DNA中提供了使病毒有效逃避宿主的免疫反應(yīng)的潛伏。
[0014]當(dāng)宿主細胞被激活分裂時，由于原病毒與宿主DNA—起被轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生病毒蛋白和病毒RNA。然后利用宿主細胞的蛋白質(zhì)制造機構(gòu)組裝病毒蛋白。該病毒的蛋白酶允許將新翻譯的病毒多肽加工成構(gòu)成病毒的蛋白質(zhì)。然后這些各種蛋白質(zhì)最終被組裝成病毒顆粒。蛋白酶抑制劑是另一類用于治療HIV感染的抗病毒藥物(Wattanutchariya ,Sirisanthana等人2013)。組裝的病毒使用名為gag的核衣殼蛋白與宿主蛋白機構(gòu)相互作用，從而使病毒出芽并從宿主細胞釋放全病毒(Dussupt ,Javid等人2009)。可替代地，出芽的病毒可從細胞-細胞相互作用直接轉(zhuǎn)移(Fais ,Capobianchi等人1995)。隨著時間的推移許多病毒顆?？蓮膯蝹€細胞出芽，最終裂解細胞膜殺死細胞。
[0015]細胞積極生產(chǎn)病毒易受CD8細胞(細胞毒性T淋巴細胞或CTL)的攻擊。CTL細胞需要來自Thl細胞⑶4細胞的幫助以殺死那些正在生產(chǎn)病毒的細胞(Wodarz2001 KHIV感染中，以來自感染細胞的病毒顆粒的釋放速率平衡的生產(chǎn)病毒的細胞的免疫介導(dǎo)的破壞速度可以將病毒載量保持在穩(wěn)定狀態(tài)下。在此穩(wěn)定狀態(tài)下，病毒載量被維持在設(shè)定值水平(KorthalsAltes ,Ribeiro等人2003 ;Kaul ,MacDonald等人2010)。當(dāng)CD4計數(shù)減少足以喪失其對CTL的輔助功能，失去設(shè)定值控制，病毒載量攀升。最終這導(dǎo)致CD4計數(shù)減少，細胞免疫喪失，并最終導(dǎo)致AIDS。在出現(xiàn)AIDS臨床癥狀之前HIV感染可能在這樣的穩(wěn)定狀態(tài)八到十年(Jurriaans和Goudsmit 1996; CalIaway和Perelson2002;Maenet je ,R1u等人2010)。
[0016]HIV感染中最明顯的實驗室觀測是在血液中發(fā)現(xiàn)的⑶4+T細胞數(shù)量下降和⑶4/⑶8比下降。通過靈敏的PCR試驗可以檢測病毒載量(病毒RNA)的增加。
[0017]HIV復(fù)制的慢性抑制的高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(HAART)已經(jīng)是在HIV/AIDS醫(yī)學(xué)中的重大成就。HAART雞尾酒含有設(shè)計在不同點阻斷天然病毒的生命周期的具有不同作用機制的藥物。例如，HAART可含有逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶、蛋白酶和結(jié)合(Carter 2003 ； Laurence2004; 2007)抑制劑。許多患者現(xiàn)在處在他們治療的第二個十年，具有低于臨床試驗檢測限(例如，〈50拷貝/ml)的血漿HIV RNA(病毒載量)水平。正在開發(fā)新HAART藥物治療以干涉病毒的生命周期。例如，由于CCR5已確定為主要的HIV共同受體，這已導(dǎo)致開發(fā)靶向病毒-CCR5相互作用的藥物，包括第一類批準(zhǔn)的藥物，馬拉韋羅(Rusconi ,Vitiello等人2013)。
[0018]由于HAART不能完全清除病毒，需要終生抗病毒治療以控制HIV感染。這種治療是昂貴的并容易產(chǎn)生耐藥性、累積性副作用和長期治療的未知影響。HAART治療具有幾個長期的副作用，包括腎、肝和胰腺問題和脂肪代謝的變化，其導(dǎo)致膽固醇和甘油三酯水平升高以及中風(fēng)和心臟病的風(fēng)險增加(Carter 2003 ； Laurence 2004 ； 2007)。此外，一些病毒具有進化的對HAART的抗性(Fumero和Podzamczer 2003 ； Tebit, Sangare等人2008 ； Loulergue ,Delaugerre等人2011)。
[0019]盡管如在停止HAART療法時病毒血癥的快速反彈所證明的有效HAART療法，HIV感染最通常持續(xù)在3-10天內(nèi)(Neumann，Tubiana等人 1999; Van Gulck，Heyndrickx等人2011)。這種現(xiàn)象被認(rèn)為是由于早期建立了具有經(jīng)整合病毒DNA的潛伏感染的細胞的穩(wěn)定貯存，該經(jīng)整合的病毒在HAART停止后催化(seed)病毒體生產(chǎn)。
[0020]HIV感染患者中HAART治療的目標(biāo)是降低血漿HIV病毒載量(HIV RNA)至檢測不到的水平并增加CD4細胞計數(shù)。實現(xiàn)這一目標(biāo)降低了疾病發(fā)展和死亡的速度。然而，一些患者經(jīng)歷短暫地可檢測HIV RNA或病毒反彈的孤立事件(Staszewski，Milller等人1998;Butler ,Gavin等人2014)。病毒反彈的原因目前仍不清楚。在已經(jīng)實現(xiàn)檢測不到的HIV RNA的HAART中的患者之中已報道病毒反彈率為25-53%。病毒反彈，然后持續(xù)如低水平病毒血癥(設(shè)定值水平)，可能導(dǎo)致引發(fā)耐藥性的病毒基因突變。
[0021]具有持續(xù)的低水平的病毒血癥的患者具有較高的病毒學(xué)失敗率。持續(xù)的低水平的病毒血癥被定義為至少三個月并在至少兩次連續(xù)臨床檢查中血漿HIV RNA水平在51-1000拷貝/mL范圍內(nèi)。病毒學(xué)失敗被定義為連續(xù)兩次的血漿HIV RNA水平>1000拷貝/mL。
[0022]HAART開始后，大部分患者經(jīng)歷提高的免疫功能并保持病毒抑制;然而，仍然存在具有次優(yōu)免疫應(yīng)答的患者的亞群，定義為盡管使用HAART療法未能實現(xiàn)和保持充足CD4應(yīng)答。HAART治療中具有不充足的CD4計數(shù)的患者被認(rèn)為具有免疫學(xué)失敗。充足的CD4計數(shù)通常被定義為在特定的一段時間(例如，4至7年)>500個細胞/mm3。免疫學(xué)失敗增加了 AIDS發(fā)病率和死亡率以及與AIDS無關(guān)的發(fā)病率和死亡率的風(fēng)險。例如，〈500的低CD4計數(shù)與心血管、肝和腎臟疾病及癌癥的風(fēng)險增加相關(guān)。
[0023]細胞毒性T淋巴細胞(CTL)和自然殺傷細胞(NK)應(yīng)答對在急性感染后最初幾個月看到的HIV病毒載量的初始下降是重要的(Borrow ,Lewicki等人1997; Fan ,Huang等人1997 ；Smalls-Mantey ,Connors等人2013)。這些有益的細胞免疫應(yīng)答減少了疾病發(fā)展，并且單獨用抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法不能恢復(fù)。CTL應(yīng)答一般需要CD4細胞輔助才能有效(Wodarz 2001)。
[0024]最近的研究表明治療性疫苗可有助于恢復(fù)細胞免疫和對病毒的CTL和NK應(yīng)答。將治療性HIV疫苗設(shè)計為通過增強機體的天然免疫應(yīng)答來控制HIV感染。在預(yù)防和治療設(shè)置中已廣泛研究了基于HIV特異性T細胞的疫苗，大多數(shù)研究未能顯示益處，一些暗示傷害(Papagno，A1 ter等人2011)。目前沒有任何FDA批準(zhǔn)的治療性HIV疫苗。
[0025]到目前為止，盡管在HAART中長期抑制病毒，它已經(jīng)不可能治愈HIV。盡管強大的病毒抑制和病毒侵入阻斷，快速反彈被認(rèn)為是由于不受病毒抑制影響的潛伏感染細胞的貯存和無法被免疫消除靶向，以及來自淋巴結(jié)和組織中的某些細胞的連續(xù)亞臨床病毒生產(chǎn)和作為替代的侵入途徑的病毒通過細胞-細胞接觸傳播的能力，所有都起到保持病毒持續(xù)感染的作用。
[0026]雖然有某些在無HAART的情況下可以保持檢測不到的病毒的患者的描述，這些所謂的“次級控制者”感染了較低感染性類型的HIV(Lobritz ,Lassen等人2011; Van Gulck,Bracke等人2012)。對于大多數(shù)患者，HAART對于疾病控制是一輩子的要求。
[0027]停止HAART治療后長期病毒抑制的唯一報告是所謂的“柏林患者”。該柏林患者接受同種異體干細胞移植用于治療他的白血病。供體具有特殊遺傳特性(隱性CCR5A 32等位基因的兩個拷貝)，這導(dǎo)致無法在CD4細胞表面上表達CCR5受體。因此，供移植的供體細胞抵抗病毒侵入。移植后，患者能夠停止所有HAART抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療并在移植后3年半保持檢測不到的病毒載量(Hutter ,Nowak等人2009)。
[0028]可能的是，由供體的免疫系統(tǒng)遞送的先天或獲得性免疫可能有助于消除具有活性HIV復(fù)制的細胞?；颊呓?jīng)歷了移植物抗宿主病(GVHD)，并且可能的是針對宿主淋巴細胞的同種異體免疫應(yīng)答具有對淋巴細胞中潛伏的HIVIC存的清除效果。
[0029]同種異體干細胞移植是具有高治療相關(guān)死亡率和發(fā)病率的高毒性程序。高毒性與化療調(diào)節(jié)機制的需要相關(guān)并和經(jīng)常致死的GVHD副作用有關(guān)。GVHD毒性將同種異體移植程序的臨床使用限于沒有其它治療選擇的末期病人。然而，在對HAART藥物治療穩(wěn)定的HI V+患者中，用同種異體干細胞移植進行治療在臨床上不可行的。
[0030]此外，同種異體移植需要HLA組織匹配的供體。只有1/3個體具有相關(guān)的HLA匹配供體，并且?guī)缀醪荒軐ふ也幌嚓P(guān)的HLA匹配供體。此外，即使可以識別匹配供體，供體必須是CCR5A 32突變純合子，這是極為罕見的遺傳表型(Jiang ,Wang等人1999; Williamson,Loubser等人2000)。因此，缺乏合適的供體和同種異體移植程序的毒性使其無法從該柏林患者轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)以使大多數(shù)HIV感染患者受益。
[0031]因此，為了開發(fā)能夠使該柏林患者享受長期HAART停止的機制需要另外的無毒療法。此外，迫切需要HAART治療中病毒學(xué)失敗和免疫學(xué)失敗的治療選擇。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0032]本說明書涉及免疫治療藥物和治療性疫苗組合物和用于治療HAART藥物治療中經(jīng)歷病毒學(xué)和/或免疫學(xué)失敗的患有HIV感染的患者的方法。另外，本說明書描述了清除HIV患者體內(nèi)潛在的病毒庫至足以能夠延長HAART藥物治療日常所需的休息日的水平的方法。
[0033]本說明書的組合物包括活細胞或其組分的組合，含有至少一種高免疫原性抗原，結(jié)合表面CD40受體以遞送細胞激活信號和在時間上一起或單獨遞送的一種或多種炎性I型細胞因子和/或趨化因子(以下簡稱為“aThl”)^Thl組合物還可以包括至少一種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物。包括抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物的aThl組合物本文中可稱作AVI組合物。aThl組合物和抗病毒藥物可以通過不同的途徑遞送，但兩者的影響必須同時實施。aThl組合物的組分可以在溶液中組合或附著到表面上，諸如可生物降解載體，以用于給藥。示例性aThl組合物被稱為“AlloStim?”，可以從Immunovative Therapies有限公司獲得。
[0034]本說明書包括用于在增加患者體內(nèi)⑶4+T細胞的方法。此“⑶4增加方法”包括使用aThl組合物提高HIV患者體內(nèi)循環(huán)⑶4+Thl細胞(包括由于具有記憶表型和表面CCR5表達的下調(diào)或/和由于產(chǎn)生趨化因子激動劑阻斷CCR5而抗HIV感染的CD4+細胞)的效價。該方法還可以在經(jīng)歷免疫學(xué)失敗的HIV患者體內(nèi)與HAART—同使用。
[0035]本說明書還包括治療性疫苗方法。該方法包括使用aThl組合物作為佐劑與形成治療性疫苗的HIV抗原，該治療性疫苗導(dǎo)致提高了HIV特異性T細胞的效價和病毒的免疫控制。該方法可在HIV患者體內(nèi)用作治療性疫苗，包括經(jīng)歷病毒學(xué)失敗的HAART藥物治療的患者。
[0036]本說明書還包括病毒清除方法。該方法包括使用用于激活潛伏感染HIV遺傳物質(zhì)的細胞的AVI組合物，使它們生產(chǎn)病毒顆粒，并由此成為免疫介導(dǎo)清除的目標(biāo)。AVI組合物中的抗病毒藥物防止了被喚醒的潛伏病毒庫擊潰和摧毀剩余的CD4細胞。該方法可以用來減少或消除潛伏病毒庫。潛伏病毒庫的清除是最終治愈的必要步驟。
[0037]在本說明書的另一個方面，描述了HIV治療方法，該方法結(jié)合了 CD4增加方法與病毒清除法(“HAART休息日法” )eHAART休息日方法也可以與治療性疫苗方法相結(jié)合。HAART休息日方法為HIV患者提供了HAART藥物治療日常所需的延長的休息日。這樣的休息日優(yōu)選地超過30天，更優(yōu)選地至少90天，并最優(yōu)選地超過一年。
[0038I在一個方面，本說明書包括治療患有HIV患者的方法。該方法包括通過向患者給予至少一次皮內(nèi)劑量的aThl組合物來提高抗HIV感染的循環(huán)CD4+Thl記憶細胞的效價，其中所述患者感染了 HIV。該方法還包括通過給予至少一次靜脈劑量的aThl組合物來擴增和激活患者體內(nèi)的⑶4+Th I記憶細胞。該方法還可以包括通過給予至少兩次皮內(nèi)劑量的aTh I組合物來提高所述效價，其中兩次劑量都在同一部位，皮內(nèi)劑量之間的間隔為在約3天至約一周之間。該方法還可以包括在與頭兩次皮內(nèi)劑量的位置不同的位置上的另外兩次皮內(nèi)劑量的aThl組合物。該方法還可以包括同時用高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(HAART)對患者進行治療。
[0039]在另一個方面，本說明書還包括降低患有HIV的患者體內(nèi)病毒載量的方法。該方法包括給予至少一次劑量的aThl組合物和至少一次劑量的一種或多種HIV抗原，其中提高了患者體內(nèi)抗HIV感染的循環(huán)CD4+Thl記憶細胞的效價并且降低了患者體內(nèi)病毒載量。該方法可包括其中分開給予aThl組合物和HIV抗原，以皮內(nèi)方式給予aThl組合物和一種或多種HIV抗原。
[0040]在又一方面，本說明書還包括從患者中減少或消除HIV病毒的方法。該方法包括向患者給予逐步增加的靜脈劑量的aThl組合物，其中同時用HAART對患者進行治療。該方法還可以包括這樣的步驟，其中停止HAART并監(jiān)測患者的⑶4+細胞和病毒載量，并且其中如果在患者中檢測到病毒峰值則恢復(fù)HAART。
[0041 ]在另外的方面，本說明書包括試劑盒，該試劑盒包括治療性HIV疫苗的組分，其中該試劑盒包括皮內(nèi)劑量的aThl組合物、靜脈劑量的aThl組合物和一種或多種HIV抗原。該試劑盒可進一步包括HAART的組分。
[0042]在又一個另外的方面，本說明書包括組合物，該組合物包括aThl組合物，其包含同種抗原，與CD40表面受體和I型細胞因子相互作用的分子和至少一種或多種HIV抗原。
[0043]在又一個另外的方面，本說明書包括AVI組合物，該AVI組合物包括aThI組合物，其包含同種抗原、與CD40表面受體和I型細胞因子相互作用的分子和至少一種或多種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物。該組合物還可以包括一種或多種HIV抗原。
【具體實施方式】
[0044]本說明書包括用于感染了逆轉(zhuǎn)錄病毒尤其人類免疫缺陷病毒(HIV)的患者的組合物。該組合物可以包括用于引起患者的免疫應(yīng)答的aThl組合物。本說明書還包括抗病毒免疫療法藥物組合物(aThl+抗病毒藥物)以及用于利用該抗病毒組合物治療感染了HIV的患者的方法。描述了這樣的方法，其中所述組合物可用于:(I)通過增加CD4計數(shù)治療免疫失敗(CD4增加方法)；(2)通過恢復(fù)對病毒載量的免疫控制治療病毒學(xué)失敗(治療性疫苗法)；(3)從潛伏的病毒庫清除病毒(病毒清除方法)。所有這些方法的組合或CD4增加方法和病毒清除方法的組合可以消除日常HAART藥物治療所需要的一段延長的時間(HAART休息日法)。
[0045 ]包括aTh I和抗病毒藥物的抗病毒免疫療法組合物本文中可稱為AVI組合物。
[0046]感染了HIV的病人可以用本文描述的組合物和方法來治療?？芍委熢贖AART治療中經(jīng)歷免疫學(xué)或病毒失敗的患者?？梢耘c同時與HAART藥物或不同時與HAART藥物治療來治療患者。通過本文描述的組合物和方法成功治療的生物標(biāo)記物可以以HIV患者血漿中的IL-12血清水平的增加來表征。IL-12可增強HIV特異性細胞免疫。通過給予aThl組合物至少120天，優(yōu)選地90天，更優(yōu)選地30天，甚至更優(yōu)選地7天，本說明書的方法一般可導(dǎo)致血清中存在IL-12<JL-12可以作為早期生物標(biāo)記來指示在建立抗HIV免疫中該方法獲得成功。
[0047]該aThl組合物可以包括:1)活細胞，或它們的組分，含有至少一種具有高免疫原性的抗原，ii)通過結(jié)合到表面CD40受體上傳遞信號的分子，和iii)一種或多種炎性I型細胞因子和/或趨化因子。aThl組合物的所有這些組分可一起或同時單獨遞送或在時間上分別遞送。
[0048]aThl組合物的高免疫原性的抗原成分可以是天然蛋白或肽、合成蛋白或肽或具有可以使它們對于人類免疫系統(tǒng)是可識別的某些外源組分的重組蛋白質(zhì)或肽。免疫原性抗原可以是，例如，同種異體或異種蛋白抗原。被改變以被識別為外來物的自體蛋白質(zhì)也在本說明書的范圍內(nèi)。自體蛋白質(zhì)的改變可以通過重組或化學(xué)方法或通過自體蛋白與佐劑混合。在優(yōu)選的實施方案中，高免疫原性抗原是活細胞的一部分，優(yōu)選地同種異體活細胞的一部分，更優(yōu)選地同種異體免疫活細胞的一部分，最優(yōu)選地同種異體Thl免疫活細胞的一部分。同種異體抗原是優(yōu)選的包含在aThl組合物中的高免疫原性的抗原。
[0049]該組合物的高免疫原性抗原可以能夠由用于在MHCI和/或MHCII分子上呈遞的專職抗原呈遞細胞(APC)處理。高免疫原性的抗原的例子還可以包括KLH、病毒蛋白、細菌蛋白、酵母蛋白、真菌蛋白或它們的組合。
[0050]可以增加蛋白如自身蛋白質(zhì)(諸如自體蛋白)免疫原性的佐劑的實例包括致使未成熟樹突狀細胞成熟為IL-12+DC1細胞的試劑。實例包括佐劑危險信號諸如LPS、BCG和Toll樣受體激動劑(例如，TLR4和TLR7)。所有高免疫原性的肽和蛋白質(zhì)在本說明書的范圍之內(nèi)。
[0051]aThl組合物還可以包括I型細胞因子和/或趨化因子。優(yōu)選的aThl組合物的I型細胞因子可以包括單獨的干擾素丫、11^-2、1,-€^肥-0、61-03卩、幾-1、11^-7、幾-15、幾-23和IL-12或者包括它們的組合。優(yōu)選的aThl組合物的趨化因子可包括單獨的RANTES、MIP-la、MIP-Ιβ和MCP-1或包括它們的組合。這些I型細胞因子可以是aThl組合物的一部分，或者可以通過aTh I組合物在患者體內(nèi)誘導(dǎo)。
[0052]該aThl組合物還可以包括通過表面⑶40受體分子遞送信號的分子。aThl組合物中通過⑶40遞送信號的一個優(yōu)選的分子是固定化的⑶40L(⑶154) XD40L(也稱為⑶154)是TNF超家族的成員。CD40L可以充當(dāng)與在樹突狀細胞(DC)上表達的CD40相互作用的共刺激分子以支持它們成熟為IL-12+表型。CD40L優(yōu)選通過表達于細胞表面上以被固定化以便通過⑶40提供正信號。可替代地，CD40的激動劑可用于遞送⑶40信號，如融合蛋白或抗⑶40抗體。可以共同或分開遞送并以各種順序遞送以及在時間上各種時間點上遞送aThl組合物的組分，并且都在本說明書的范圍之內(nèi)。
[0053]在優(yōu)選的實施方案中，aThl組合物可以包括激活的同種異體CD4+T細胞，在更優(yōu)選的實施方案中，使用具有CD40L高表面表達且產(chǎn)生干擾素γ的激活的同種異體記憶CD4+T細胞。
[0054]HIV感染(HIV+)的個體體內(nèi)IL-12產(chǎn)生和CD40L表達可能嚴(yán)重受損。CD40-CD40L相互作用是參與抗原呈遞細胞(APC)(如DC)的T細胞依賴性激活以產(chǎn)生IL-12的主要機制。而CD40(⑶40L的反受體)表達于來自HIV+個體的單核細胞，IL-12產(chǎn)生可能仍受到抑制。在給予aThl組合物后血漿中IL-12的出現(xiàn)可以指示該方法的免疫機制的成功啟動。
[0055]不同形式的⑶40L也可以通過CD40發(fā)信號。例如，可溶三聚體CD40L激動劑蛋白(CD40LT)、可溶CD40L，插入HIV病毒中的CD40L也可以提供相同的信號和相同的效果。各種形式的CD40激動劑在本說明書的范圍之內(nèi)。
[0056]在一些優(yōu)選的實施方案中，aThl組合物可以是AlloStim? JlloStim?是來自正常供體血液的經(jīng)生物工程改造的⑶4免疫細胞。AlloStimTM具有激活的Thl記憶表型:CD4+、CD45R0+、CD62LlQ、CD40Lh1、CD25+、干擾素 γ +和IL-4-。通過持續(xù)附著到CD3/CD28單克隆抗體包被的微粒上AlloStim?可保持在激活狀態(tài)。AlloStim?的關(guān)鍵效應(yīng)分子是高表面表達的CD40L和所產(chǎn)生的大量的炎性細胞因子，如干擾素-γ、腫瘤壞死因子-α和粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF) AlloStim?和制備AlloStim?的方法描述于，例如，第7435592號美國專利、第7678572號美國專利號和第7402431號美國專利，所有均通過引用并入本文。其它同種異體或異種免疫細胞也可以用作aThl組合物組分。參考AlloStim?描述本公開的一些方法，但是這并不意味著將本方法僅限制于使用AlloStim?，在所描述的方法中還可以使用其它組合物。
[0057]本文描述的aThl組合物也可包括抗病毒或抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物(AVI組合物)。先前已公開組合物如AlloStim?，其含有aThl組合物的必要成分。在一些實施方案中，單獨使用AlloStim?或aThl組合物可能不足以治療HIV感染。AVI組合物包括與aThl組合物一起的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物。
[0058]雖然aThl組合物對于癌癥治療可能是有益的，該組合物對HIV患者可能是有害的。這是由于HIV生命周期的獨特性質(zhì)。例如，當(dāng)AlloStim?用作aThl組合物，AlloStim?的皮內(nèi)注射可以提高特異于同種異體抗原的CD4+記憶細胞的效價。HIV感染中，CD4+記憶細胞的這種單獨增加會增加病毒感染的CD4+靶標(biāo)的數(shù)量。如果患者未被病毒抑制到具有低于檢測限的病毒載量，循環(huán)病毒體會感染新形成的CD4細胞，其增加潛在的病毒庫。因此，單獨皮內(nèi)注射AlloStim?會導(dǎo)致增加潛在的病毒庫。本發(fā)明方法的特點-可以保護這些新形成的⑶4+細胞免受病毒侵入-是這樣的步驟:使用靜脈輸注可以激活這些細胞。由于CCR5激動劑細胞因子的上調(diào)和CCR5受體的下調(diào)，激活的記憶細胞可以抗病毒侵入。然而，記憶細胞的大量激活可喚醒潛伏感染細胞的病毒生產(chǎn)。Al loStim?靜脈輸注可引起T細胞和單核細胞的激活，其可導(dǎo)致任何潛伏感染細胞開始病毒生產(chǎn)。這可導(dǎo)致血漿病毒載量增加并可以最終導(dǎo)致CD4+細胞計數(shù)減少。另外，靜脈輸注AlloStim?后潛伏的病毒庫的激活和隨后病毒復(fù)制的增加可能導(dǎo)致發(fā)展為耐HAART藥物雞尾酒的病毒逃逸突變體的風(fēng)險增加。為了治療HIV，使用如AlloStim?的aThl組合物，當(dāng)與如在HAART中所使用的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物組合時，可能需要小心地按劑量和途徑仔細地順序給藥。這可以減緩病毒生產(chǎn)，并可以允許建立對病毒的免疫控制?？梢赃M行對CD4計數(shù)和HIV RNA病毒載量的頻繁監(jiān)測，以保證維持適當(dāng)?shù)钠胶狻？梢酝ㄟ^監(jiān)測細胞病毒DNA水平和血漿病毒DNA水平對潛在的病毒載量進行監(jiān)測。
[0059]AlloStim?或其它aThl組合物最初可與病毒抑制藥物一起使用以減緩病毒擴散到健康細胞和防止病毒突變。
[0060]多種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥品或藥物可以包含在AVI組合物中。AVI組合物可以包括，例如，來自任何類別的抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物的一種或多種藥物?？鼓孓D(zhuǎn)錄病毒藥物，例如，可以包括來自以下類別的藥物。來自其它類別的藥物也包括在本說明書的范圍之內(nèi)。
[0061]核苷/核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTI):有時稱為“核武器”。這些抗HIV藥物可以起到阻斷HIV使用逆轉(zhuǎn)錄酶來將病毒RNA正確地改變成DNA的能力的作用。宿主細胞可以使用DNA以生產(chǎn)病毒需要自身復(fù)制的蛋白。
[0062]非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTI):這些稱為“非核武器”。它們可以以與“核武器”非常相似的方式工作。非核武器也可以阻斷酶，逆轉(zhuǎn)錄酶，并且也可以阻止HIV制備其自身的DNA拷貝。但不像核武器(其在遺傳物質(zhì)上起作用)，非核武器可以直接在酶本身以阻止其正確發(fā)揮作用。
[0063]蛋白酶抑制劑(PI):當(dāng)HIV在細胞內(nèi)復(fù)制時，它可以建立自己的RNA遺傳物質(zhì)長鏈。需要將這些長鏈切成短鏈以便HIV建立更多自己的拷貝。其作用是切碎這些長鏈的酶稱為蛋白酶。蛋白酶抑制劑可阻斷這種酶，并防止遺傳物質(zhì)的那些長鏈被切成功能性片段。
[0064]侵入/融合抑制劑:這些藥物可以起到阻斷病毒侵入細胞的作用。HIV通過受體位點附著并結(jié)合到CD4細胞。在HIV和CD4細胞上都發(fā)現(xiàn)了受體位點(在其它類型的細胞中也發(fā)現(xiàn)它們)。融合抑制劑可以靶向HIV或CD4細胞上的這些位點，并能防止HIV“停泊”到健康細胞上。CCR5是HIV的受體位點的一個例子。
[0065]可以包含在AVI組合物中的抗HIV藥物的實例可包括以下多類別組合=Atripla(依非韋倫+富馬酸替諾福韋酯+恩曲他濱)；Complera(Eviplera，利匹韋林+富馬酸替諾福韋酯+恩曲他濱)；StribilcK原來的Quad)(埃替拉韋+可比司他+富馬酸替諾福韋酯+恩曲他濱)；Triumeq(原來的Trii)(多替拉韋鈉+阿巴卡韋+拉米夫定)。
[0066]抗HIV藥物的實例包括如下NNRT:Edurant(利匹韋林，RPV，TMC-278);Intelence(依曲韋林，ETR，TMC-125); Rescriptor(地拉韋啶，DLV) ;Sustiva(Stocrin，依非韋倫，EFV);Viramune和Viramune XR(奈韋拉平，NVP) ；Lersivirine(UK-453061)。
[0067]抗HIV藥物的實例包括如下NRTI =Combivir(齊多夫定+拉米夫定，AZT+3TC)；Emtriva(恩曲他濱，F(xiàn)TC);Epivir(拉米夫定，3TC) ;Epzicom(克為滋，阿巴卡韋+拉米夫定，八8〇+31'0;1^壯0￥化(齊多夫定421'，20￥);1^2丨￥化(阿巴卡韋+齊多夫定+拉米夫定48〇+AZT+3TC) ;Truvada(富馬酸替諾福韋酯+恩曲他濱，TDF+FTC) ；Videx EC和Videx(地達諾新，ddl) ;Viread(富馬酸替諾福韋酯，TDF) ;Zerit(司他夫定，d4T) ;Ziagen(阿巴卡韋，ABC);細(1(?0￥化(410?，04?0);替諾福韋艾拉酚胺富馬酸，了八卩。
[0068]抗HIV藥物的實例包括下列蛋白酶抑制劑= Aptivus(替拉那韋，TPV) ;Crixivan(茚地那韋，IDV) ； Invirase(沙奎那韋，SQV) ;Kaletra(克力芝，洛匹那韋/利托那韋LPV/r)；Lexiva(Telzir，夫沙那韋，F(xiàn)PV) ;Norvir(利托那韋，RTV) ;Prezista(達蘆那韋，DRV)；Reyataz(阿扎那韋,ATV) ;Viracept(奈非那韋,NFV);Prezcobix(RezoIsta，達蘆那韋/cobicistat);阿扎那韋+可比司他。
[0069]抗HIV藥物的實例包括下列整合酶抑制劑= Isentress(雷特格韋，MK-0518)；Tivicay(度魯特韋，S/GSK-72); Vitekta(埃替格韋，GS_9137)。
[0070]抗HIV藥物的實例包括下列融合抑制劑:FUZEON(恩夫韋，ENF，T_20); Selzentry(Celsentri，馬拉韋羅，UK-427,857) ο
[0071 ]上面所述的抗HIV藥物是示例性的，其它抗HIV藥物也在本說明書的范圍之內(nèi)。
[0072]本文所述的aThl組合物和/或AVI組合物可以在方法中使用以從患者中減少和或消除HIV。本文描述的方法可增加患者體內(nèi)CD4+細胞。該方法也可以降低病毒載量和/或從患者中清除病毒。
[0073]⑶4增加方法
[0074]包括在本說明書中的方法可以包括⑶4增加方法。該⑶4增加方法可以在服用抗病毒藥物的HIV患者中使用aThl組合物。這樣可以增加HIV患者的⑶4+細胞計數(shù)，優(yōu)選地增加Thl記憶(CD4+CD45R0+)細胞。由該方法產(chǎn)生的新的⑶4+細胞可以抗病毒復(fù)制和病毒侵入。CD4增加方法可以在HAART藥物治療中具有免疫學(xué)失敗的患者中使用。
[0075]⑶4增加方法可以通過在循環(huán)中產(chǎn)生激活的⑶4+aThl記憶細胞來增加⑶4+細胞計數(shù)。激活的⑶4+aThl記憶細胞可以抗HIV復(fù)制。這種HIV抗性狀態(tài)可能是由于增加了從激活的記憶細胞釋放的趨化因子的生產(chǎn)，其反過來與CCR5受體(S卩，RANTES，MIP-la和MIP-Ιβ)相互作用以及由于下調(diào)了被激活的⑶4記憶細胞上的CCR5表達。
[0076]抗病毒的⑶4+細胞的產(chǎn)生可以是⑶4增加方法的重要方面。會增加初始⑶4細胞、Th2細胞、ThO細胞或休眠CD4記憶細胞的數(shù)量的方法只會“火上澆油”。這些不需要的CD4亞型容許病毒復(fù)制?！盎鹕系挠汀笔侵笗懈嗟牟《厩秩氲腃D4靶標(biāo)，并因此更多的細胞可以生產(chǎn)病毒體進入血漿，這可導(dǎo)致更多的具有潛伏感染的細胞，增加病毒載量并最終導(dǎo)致增加CD4細胞死亡。最終CD4細胞的損失將CD4計數(shù)減少至原始基線以下，從而導(dǎo)致與治療之前相比病人病情惡化。
[0077]CD4增加方法可以產(chǎn)生高效價的激活的Th I記憶細胞，這些激活的Th I記憶細胞由于以⑶28共刺激進行激活(通過共刺激配體⑶80和⑶86配體在APC上上調(diào))而抗病毒侵入和復(fù)制，以⑶28共刺激可導(dǎo)致原始CCR5配體表達的增強以及表面CCR5表達隨之下調(diào)。為產(chǎn)生這些抗HIV細胞，該方法可包括多次注射aThl組合物(致敏劑量)，和激活A(yù)PC以表達⑶80和CD86共刺激分子。可以以皮內(nèi)、皮下、肌內(nèi)或靜脈內(nèi)的方式給藥致敏劑量的aThl組合物。該aThl組合物還可以通過這些途徑的組合給藥。
[0078]在一個實施方案中，多次皮內(nèi)給藥致敏劑量的aThl組合物。為了使記憶細胞發(fā)育，需要至少2次皮內(nèi)注射或劑量，例如給予約4次以上劑量。該劑量一般可是頻繁的。該劑量可相距長達約2周給藥或相距約I周，甚至相距約3-4天。將相距小于約2天的劑量合并，并仍然認(rèn)為是單個劑量。一旦在循環(huán)中可以檢測到CD4+記憶細胞，可以說是患者被致敏(S卩，對aThl組合物中的抗原免疫)。
[0079]⑶4增加方法可以導(dǎo)致絕對⑶4+細胞計數(shù)的增加。由于⑶8細胞隨之增加，⑶4/⑶8比可以增加或保持與基線幾乎相同。此外，該方法可以導(dǎo)致aThl/Th2平衡中移向Thl AIV感染導(dǎo)致Thl細胞損失，這導(dǎo)致在循環(huán)中Th2免疫細胞占優(yōu)勢。本文描述的方法可通過增加Thl細胞組分糾正這種不平衡。
[0080]在一個實施方案中，在同一部位給予至少兩次劑量的aThl組合物。在同一部位至少兩次劑量之后，可選擇用于后續(xù)劑量給藥的新的位置?？商娲?，所有劑量可以在同一部位給藥。如果選擇新的位置，在各個新的位置應(yīng)給予至少兩次劑量。aThl組合物的給藥劑量的這種循環(huán)可以繼續(xù)直到獲得所需要的CD4+細胞計數(shù)。
[0081]可以在同一部位給予皮內(nèi)劑量的aThl組合物，以確保移動向注射部位的專職抗原呈遞細胞(APC)，例如郎格罕氏細胞(LC)、巨噬細胞(M)和未成熟樹突狀細胞(DC)在它們吞噬高免疫原性的抗原的時候暴露于aThl組合物中的I型細胞因子和CD40L。在這些APC移動到給藥位置之前這可能需要2-3天。皮內(nèi)注射給藥后，皮膚的LC可以吞噬并加工來自aThl組合物的抗原，這導(dǎo)致抗原特異性T細胞的激活和致敏。
[0082]aThl組合物中的I型細胞因子和⑶40L能引起加工aThl抗原至成熟且表達MHCI/I1、⑶80/86和IL-12的專職APC。然后這些成熟的APC可轉(zhuǎn)移到引流淋巴結(jié)與初始T細胞相互作用導(dǎo)致對aThl組合物中的抗原特異性的新效應(yīng)器⑶4+Thl細胞和⑶8+CTL(Tcl)殺傷細胞的激活、分化和增殖。多次給藥可以將效應(yīng)器Thl/Tcl細胞轉(zhuǎn)化為記憶細胞。在抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物存在下，隨著aThl組合物的給藥劑量的次數(shù)增加，可以實現(xiàn)新的較高的CD4設(shè)定值。在aThl注射過程中，可以對CD4細胞計數(shù)和病毒載量進行監(jiān)控。
[0083]CD4增加方法可以導(dǎo)致患者被致敏和對aThl組合物中的抗原免疫。這可以導(dǎo)致激活時抗病毒侵入的CD4記憶細胞的增加。aThl組合物的多次致敏注射是優(yōu)選的。這樣將抗原“脈沖”引進免疫系統(tǒng)可導(dǎo)致注射部位增強的遲發(fā)型超敏(DTH)反應(yīng)。DTH反應(yīng)由Thl記憶細胞介導(dǎo)，并且注射部位的DTH反應(yīng)的出現(xiàn)可以確認(rèn)對aThl抗原特異性的CD4記憶細胞存在。增強的皮膚DTH反應(yīng)也可以與HIV+患者的循環(huán)中CD4記憶細胞的效價增加相關(guān)聯(lián)。
[0084]aThl組合物中的⑶40L和I型細胞因子可以非特異性地(多克隆地)激活記憶T細胞。當(dāng)記憶Thl細胞以多克隆的方式被激活時，它們可以擴增并維持抗HIV記憶CCR5-表型。抗HIV CD4記憶細胞的擴增可導(dǎo)致CD4計數(shù)有益地持續(xù)性增加。為了以多克隆的方式激活循環(huán)CD4記憶細胞，可以以靜脈內(nèi)的方式輸注aThl組合物。
[0085]aThl組合物的靜脈內(nèi)輸注也可以激活潛伏感染的記憶細胞。以多克隆的方式激活時，這些激活的細胞可以開始生產(chǎn)病毒。本文中所描述的方法可以建立抗病毒的CD4記憶細胞庫，這些細胞可以為HIV特異性CTL殺傷細胞提供幫助以消除正在積極生產(chǎn)病毒的細胞。如果患者仍在HAART藥物治療中，可減緩病毒生產(chǎn)以使得CD4計數(shù)可以保持足夠高以支持抗HIV免疫應(yīng)答。以這種方式，可以識別固有的抗HIV免疫應(yīng)答并殺死生產(chǎn)病毒的激活的記憶細胞而新的抗病毒記憶細胞正在替換這些細胞。生產(chǎn)病毒的激活的細胞的免疫消除與抗病毒記憶細胞的增加之間的平衡最終導(dǎo)致絕對CD4計數(shù)增加以及潛伏病毒載量降低。在達到更高的CD4+細胞的設(shè)定值水平之前可發(fā)生CD4細胞計數(shù)的波動。
[0086]患者被致敏且⑶4計數(shù)增加之后，并且通過同時皮內(nèi)注射aThI組合物和靜脈輸注aThl組合物記憶細胞可以進一步增加⑶4計數(shù)并從HIV消除而對記憶細胞連續(xù)保護。循環(huán)中Thl記憶細胞的多克隆式激活可導(dǎo)致建立持久性I型細胞因子風(fēng)暴。靜脈輸注可引起HIV患者血液中⑶4記憶細胞激活，這反過來這又可導(dǎo)致I型炎性細胞因子的產(chǎn)生增加，這建立了1-型細胞因子風(fēng)暴。I型細胞因子可以以多克隆的方式激活旁觀者記憶細胞從而為維持激活的記憶細胞建立正反饋回路。
[0087]在I型細胞因子的存在下激活的記憶細胞可擴增，從而加速循環(huán)CD4計數(shù)的增加。已知在含有I型細胞因子(如TNF-α和IFN-γ )的細胞因子風(fēng)暴的同時發(fā)生突然且猛烈的免疫反應(yīng)。這種細胞因子風(fēng)暴對HIV患者可以是有益的。I型細胞因子(如IFN-γ和IL-12)也可增強記憶細胞的功能和天然免疫活性。
[0088]在其中所使用的aThl組合物是AlloStim?的優(yōu)選實施方案中，由于在該組合物中包被了 CD3/CD28的附著到細胞的微珠，靜脈輸注進一步增加了抗HIV記憶細胞的CD4細胞計數(shù)。這些微珠還可以相互作用并激活宿主記憶細胞使它們增殖。以包被了⑶3/⑶28的微珠激活的記憶細胞可以抗HIV感染。
[0089]在一個實施方案中，將AlloStim?細胞用作aThl組合物。AlloStim?細胞以介于約
0.2 X 16個細胞至約2 X 16個細胞之間，優(yōu)選地約I X 16個細胞的劑量進行皮內(nèi)注射。加速CD4細胞計數(shù)的優(yōu)選靜脈劑量為約在I X 17至3 X 17個細胞之間(低劑量)。將AlloStim?細胞懸浮在濃度約I X 17個細胞/ml的緩沖液(例如，具有I %人血清白蛋白的PlasmaLyte A)中。
[0090]加速CD4計數(shù)增加的一種方法可包括在皮內(nèi)致敏期間一次或多次靜脈輸注低劑量的AlloStim??？梢栽谧詈笠淮纹?nèi)注射的7天內(nèi)或在24小時內(nèi)或與皮內(nèi)注射同一時間進行低劑量靜脈輸注。直到已經(jīng)給予至少兩次皮內(nèi)致敏劑量或者在4次皮內(nèi)致敏劑量或超過4次皮內(nèi)致敏劑量之后，才啟動靜脈劑量。
[0091 ]給藥的時間、量和途徑的變化可以不同，并且所有都在本說明書的范圍之內(nèi)。
[0092]病毒載量降低方法
[0093]病毒載量降低方法可以通過增強對病毒的細胞免疫控制來降低病毒載量。該方法在HAART藥物治療中病毒學(xué)失敗的患者體內(nèi)是有幫助的XD4增加方法和該方法的加速也可以完成病毒載量的降低。然而，所形成的方法可以要求可以通過增加的CD4細胞計數(shù)喚醒的固有的抗HIV免疫應(yīng)答存在。有些患者可能不具有有效的、固有的抗HIV免疫應(yīng)答，并因此不能介導(dǎo)已被激活以生產(chǎn)病毒的細胞的免疫消除。在這種情況下，病毒載量降低方法可能是有幫助的，因為它影響了缺失的抗HIV免疫應(yīng)答以使得可以增加CD4計數(shù)以及降低病毒載量。
[0094]該病毒載量降低方法可包括與aThl組合物一起給藥的一種或多種HIV抗原組分。HIV抗原組分可以包括，例如，完全減毒病毒以及天然或重組的HIV病毒蛋白。這些HIV抗原以與aThl組合物相同的給藥途徑和頻率一起給藥。
[0095]以皮內(nèi)的方式向先前已被致敏的患者一同給藥HIV抗原和aThI組合物，或彼此緊接著給藥。由于之前的致敏，aThl抗原可以引起有力的記憶應(yīng)答。然后，病毒抗原和aThl抗原可被清道夫APC(如LC或DC)吞噬。這些細胞可以加工和呈遞抗原來激活HIV抗原特異性T細胞。通過這種方法，aThl組合物與由于之前的致敏到達注射部位的Thl記憶細胞一起可以充當(dāng)佐劑來引導(dǎo)Thl/Tcl抗HIV免疫的發(fā)展。
[0096]病毒載量降低方法一般包括與aThl組合物一起使用的HIV抗原。這些HIV抗原可以是天然或重組病毒蛋白，包括tat、env和gpl20。也可以使用完全減毒病毒或由nef取代減弱的病毒。蛋白質(zhì)可以在載體如痘病毒中表達。在優(yōu)選的實施方案中，HIV病毒蛋白是gag蛋白。HIV抗原與aThl組合物一起重復(fù)給藥可以建立高效價的對HIV特異性的⑶4Thl記憶細胞和⑶8記憶CTL。通過靜脈輸注aThl組合物，這些記憶細胞可以保持在激活狀態(tài)。
[0097]病毒清除方法
[0098]病毒清除方法可以包括逐步增加抗病毒藥物治療中的患者體內(nèi)aThl組合物的靜脈劑量。此方法用于已經(jīng)首先經(jīng)受CD4增加方法和/或病毒載量降低方法的患者。病毒清除方法給予到已實現(xiàn)由抗病毒記憶細胞組成的增加的CD4設(shè)定值的患者。如果患者具有高潛在的病毒載量，通過靜脈輸注激活這些細胞可能導(dǎo)致病毒釋放的爆發(fā)，并可能導(dǎo)致CD4計數(shù)立即下降。因此，更安全的是，從盡可能高的CD4設(shè)定值開始該方法。作為一個例子，患者處于CD4設(shè)定值>300個細胞/ml或設(shè)定值>500個細胞/ml或設(shè)定值>700個細胞/ml。
[0099]在某些實施方案中，已經(jīng)預(yù)先致敏并有至少6個月病史的低于檢測限的病毒載量的患者接受靜脈劑量增加的aThl組合物而保持活躍的抗病毒抑制。靜脈輸注可以相距至少約3天發(fā)生。每次輸注后，可測定病毒載量以確定是否存在病毒峰值。峰值是超過低檢測限的任何讀數(shù)。在每次輸注時可以增加aThl的劑量直到病毒峰值出現(xiàn)。病毒峰值的出現(xiàn)可以指示來自已被激活的潛伏庫的細胞。在病毒峰值出現(xiàn)后，可以密切注意CD4計數(shù)和病毒載量，直至病毒載量返回到檢測不到的水平。當(dāng)病毒載量是檢測不到的時，可以給予與引起病毒峰值的劑量相同劑量的另一次IV輸注。如果再次檢測到病毒峰值，密切注意患者直到病毒載量返回到基線，并且可以重復(fù)該方法直到靜脈輸注之后不在出現(xiàn)病毒峰值。在檢測不到病毒峰值的任何時間，可以再次逐步增加靜脈劑量。如果逐步增加的劑量導(dǎo)致病毒峰值，重復(fù)該過程直到?jīng)]有峰值產(chǎn)生。在該逐步增加的靜脈劑量不會導(dǎo)致病毒峰值的任何時候，可以停止靜脈內(nèi)給藥。
[0100]一旦停止靜脈劑量，可以繼續(xù)監(jiān)測患者⑶4和病毒載量。當(dāng)就相隔一周至少兩個計數(shù)的CD4穩(wěn)定在基線CD4值之上且病毒載量是檢測不到的時候，病人可以中斷抗病毒藥物。然而應(yīng)監(jiān)測在抗病毒藥物治療的休息期中的患者體內(nèi)CD4計數(shù)和病毒載量?；颊邞?yīng)保持不服用抗病毒藥物直至出現(xiàn)病毒載量峰值。當(dāng)病毒載量峰值出現(xiàn)時，應(yīng)再次立即開始服用抗病毒藥物。在抗病毒藥物休息期中的病毒載量峰值之后，可以重新開始逐步增加的靜脈劑量過程。每次病人處于抗病毒藥物治療的休息期，病毒峰值出現(xiàn)所花的時間會增加。
[0101]在其中將AlloStim?用作aThl組合物的實施方案中，逐步增加的靜脈劑量可在約3X 17個細胞開始，可以逐步增加到約5 X 17個細胞，到約1 X 17個細胞，到約15 X 17個細胞，到約20 X 17個細胞。劑量遞增可以在5 X 17個細胞的區(qū)間繼續(xù)至多100 X 17個細胞。
[0102]如以上所討論的，可給予CD 4增加方法、病毒載量降低方法和病毒清除方法的組合。在一些實施方案中，視情況而定可以給予患者HAART連同aThl組合物。
[0103]實施例
[0104]實施例1
[0?05]在最初治療方案階段，患者都保持HAART治療。檢測到病毒載量的峰值后，指示成功激活潛伏病毒，隨后病毒載量降低至基線，表明免疫控制患者可以適合于HAART中斷階段。
[0106]為了使治療中斷的風(fēng)險最小化，密切監(jiān)測患者，檢測到病毒復(fù)制應(yīng)恢復(fù)治療。
[0107]在HAART的患者體內(nèi)，方案在皮內(nèi)給藥AlloStim?和逐步增加的靜脈給藥AlloStim?之間交替。皮內(nèi)給藥的目的是增加抗HIV感染性的循環(huán)⑶4+Thl記憶細胞的效價。靜脈輸注的目的是提供炎性細胞因子風(fēng)暴和激活的CD4記憶細胞和巨噬細胞(通過CD40-CD40L)。激活應(yīng)刺激這些貯存庫內(nèi)的潛伏的病毒復(fù)制。此外，靜脈輸注應(yīng)激活NK細胞，其將靶向并殺死提供病毒抗原來源的病毒復(fù)制細胞。樹突狀細胞將加工脫落病毒抗原并在炎癥環(huán)境中刺激抗HIV特異性免疫。連續(xù)炎癥風(fēng)暴會使病毒免疫逃逸機制喪失能力，允許清除具有病毒復(fù)制的細胞。皮內(nèi)注射以增加CD4細胞以及在靜脈注射以激活潛伏的病毒并刺激抗HIV免疫之間的循環(huán)有望清除潛伏的病毒。每個IV輸注應(yīng)引起病毒載量的峰值，然后后續(xù)的免疫控制應(yīng)逐漸降低病毒載量。如果在病毒載量返回到基線中存在困難，將添加病毒阻斷藥物(如馬拉韋羅和/或恩夫韋肽)。
[0108]
[0109]初始治療方案是28天。
[0110]第O天:皮內(nèi)AlloStim?
[0111]第3天:皮內(nèi) AlloStim?
[0112]第7天:靜脈AlloStim?(lml)
[0113]第10 天:皮內(nèi) AlloStim?
[0114]第14 天:皮內(nèi) AlloStim?
[0115]第17 天:靜脈 AlloStim?(3ml)
[0116]第21 天:皮內(nèi) AlloStim?
[0117]第24 天:皮內(nèi) AlloStim?
[0118]第28 天:靜脈 AlloStim?(5ml)
[0119]在基線(第O天)和第10、21和29天以及隨后6個月的每28-32天測量病毒載量及0)4/0)8比。
[0120]在IV輸注之前，在基線(第O天)、第7天、第17天、第27天或在基線(第O天)、第7天、第17天、第27天之前抽取研究血液(45毫升)。冷凍儲存PBMC和血漿直至對其分析Thl/Th2平衡(ELISPOT)、HIV特異性免疫(ELISP0T)、細胞因子珠陣列。
[0121]在基線和第60天(+/-2天)之前進行表型分析，包括:
[0122]CD3、CD4、CD8、CD45RA、CD45R0、CD62L、CD25
[0123]CD14、HLA-DR、CD80、CD86、CD16、CD38、CD117
[0124]為安全在基線、第7天、第14天、第21天和第28天進行CBC、CMP、CRP實驗室測試。
[0125]HAART 中斷
[0126]為了確定潛伏感染的水平，接近淋巴組織或在其它方面健康的HIV受試者中大多數(shù)組織隔室是困難的。此外，即使這樣的研究無法檢測被感染的貯存庫，它們無法證明潛在病毒的消除。功效的最終測試只能撤銷HAART。
[0127]為經(jīng)歷病毒載量峰值然后恢復(fù)到基線以下并保持在基準(zhǔn)以下至少60天的患者提供了進入HAART中斷階段方案的選擇。在此階段，撤銷所有病毒抑制藥物，在開始的7天每天測量病毒載量。如果檢測到病毒載量升尚，將重新啟動HAART。如果沒有檢測到病毒載量升高，HAART中斷繼續(xù)并在7周中每周測量病毒載量。如果沒有檢測到病毒載量升高，每月進行病毒載量測試直到HAART中斷I周年。在檢測到病毒載量增加的任何時間，重新開始HAART。
[0128]主要療效評價:
[0129]在基線和同時保持HAART的28天實驗方案完成后6個月的每月，穩(wěn)定狀態(tài)病毒血癥的變化(所謂的病毒設(shè)定值)。
[0130]安全性和耐受性
[0131 ] CD4和CD8初始和記憶T細胞的基線和絕對計數(shù)以及激活狀態(tài)的變化
[0132]單核細胞/巨噬細胞絕對計數(shù)和激活狀態(tài)的變化
[0133]如通過細胞內(nèi)細胞因子染色(ICS)或ELISPOT測定的產(chǎn)生干擾素(IFN)-γ (響應(yīng)于HIV抗原)的CD4T細胞/百萬外周血單核細胞(PBMC)的數(shù)量的變化。
[0134]次要療效評價:
[0135]HAART中斷后病毒載量從基線增加的時間
[0136]入選標(biāo)準(zhǔn):
[0137]HIV-1 感染
[0138]至少12周無改變或無中斷的穩(wěn)定的HAART治療方案。在侵入研究之前?；颊吣壳氨仨毑捎煤兄辽賰煞N不同類別的藥物的療程。
[0139]在侵入研究之前30天內(nèi)血漿HIV-1病毒載量的兩個讀數(shù)小于50拷貝/ml。
[0140]在侵入研究之前12周內(nèi)⑶4計數(shù)大于350個/mnf 3。
[0141 ]在侵入研究之前的任何時間最低⑶4計數(shù)大于250個/_~3。
[0142]愿意使用可接受方式的避孕。
[0143]在侵入研究之前30天內(nèi)獲得的卡氏評分90以上。
[0144]排除標(biāo)準(zhǔn):
[0145]年齡〈18歲。
[0146]患者具有對HAART的失敗。
[0147]在侵入研究前24周內(nèi)HIV-1病毒載量大于500拷貝/ml。
[0148]任何慢性自身免疫性疾病史(如Graves病)。在侵入研究前2周內(nèi)過度暴露于陽光(例如，日光浴、日曬床)。
[0149]先前的⑶CB類或C類事件。
[0150]在侵入研究前6個月內(nèi)使用免疫調(diào)節(jié)療法，包括環(huán)孢菌素、含IgG制品、白細胞介素、干擾素或全身性糖皮質(zhì)激素(包括吸入的那些)。
[0151]暴露于試驗性HIV疫苗。
[0152]在侵入研究前30天內(nèi)的任何疫苗。
[0153]在侵入研究之前12周內(nèi)試驗用藥品。
[0154]在研究者看來將干擾研究的當(dāng)前藥物或酒精使用或依賴。
[0155]需要全身治療和/或住院治療的嚴(yán)重疾病。在侵入研究之前完成治療或?qū)χ委熢谂R床上穩(wěn)定至少14天的參與者不能被排除。
[0156]在篩查時陽性乙型肝炎表面抗原或陽性抗丙型肝炎抗體。
[0157]懷孕或哺乳。
[0158]適當(dāng)?shù)钠鞴俟δ埽?
[0159]骨髓:
[0160]WBC>3000/mm3
[0161]血小板>100000/mm3。
[0162]絕對中性粒細胞計數(shù)2 1500/mm3
[0163]血紅蛋白2 10.0g/dL(允許輸血)
[0164]肝:
[0165]血清總膽紅素〈1.5\1]1^11^/乩，
[0166]ALT(谷丙轉(zhuǎn)氨酶，SGPT)/AST(谷草轉(zhuǎn)氨酶，SG0T) < I X標(biāo)準(zhǔn)上限(ULN)。
[0167]腎:
[0168]血清肌酐(SCRKl.0XULN!
[0169]肌酐清除率(CCR)>30mL/min。
[0170]在研究人員來看，會危害研究參與的心、肺、胃腸道、肝、腎、胰腺或神經(jīng)系統(tǒng)疾病史。
[0171]實施例#1
[0172]進行了19年HAART藥物治療的具有病毒載量總是低于檢測限的HIV+男性進入病毒增加方案。
[0173]該患者在基線具有250-350個絕對⑶4細胞計數(shù)。
[0174]在進行HAAR T藥物治療的第O天、第3天在相同部位向他皮內(nèi)給予I X107AlloStim?。然后再在第7天和10天在另一個部位。在這段時間，他的絕對⑶4計數(shù)從350個細胞增加至450個細胞。
[0175]第14天開始給予逐步增加的靜脈劑量的AlloStim?。在第14天，輸注IX 17個細胞。不存在可檢測的病毒載量。在第17天，輸注5 X 17個細胞。不存在可檢測的病毒載量。第21天，輸注1X 17個細胞。病毒載量飆升至66并當(dāng)它再次回到檢測不到時保持在檢測值之上10天。在此期間，CD4計數(shù)增加到超過500并且繼續(xù)上升，在接下來的60天穩(wěn)定在超過600。
[0176]實施例#1
[0177]進行了至少6年的HAART藥物治療的具有檢測不到的病毒載量的HIV陽性男性。在2年的時間內(nèi)他的絕對CD4計數(shù)在100-230的范圍內(nèi)。
[0178]患者在基線具有250個⑶4計數(shù)。
[0179]在第O天、第3天、第10天和第14天向他皮內(nèi)給予IX 107AlloStim?。他的CD4計數(shù)增加到293個。在第17天，他接受了 I X 17皮內(nèi)注射和3 X 17靜脈輸注。在第21天，他接受了 I X17皮內(nèi)注射和1X 17靜脈輸注。在第24天，他接受了1X 17靜脈輸注。在第28天和第31天他了接受10 X 17靜脈輸注。在第31天，他的病毒載量飆升至300，到第42天回到基線。在此期間，到第42天他的⑶4計數(shù)慢慢地降至的低于200。
[0180]從第49天開始直到第63天，他每3-4天接受IX 17皮內(nèi)注射的AlloStim?。他的⑶4計數(shù)從低于200逐漸升高到300以上。他的病毒仍保持檢測不到。
[0181]在第84天、第87天、第91天和第94天，他接受了10 X 17靜脈輸注的AlloStim?。在97天，他的病毒載量飆升至86。到第101天，他的病毒載量恢復(fù)到基線，他的CD4計數(shù)仍保持超過300，將他從HAART藥物治療中去除。在無HAART藥物治療的情況下他保持檢測不到的病毒載量31天。在第32天，病毒載量為300，CD4為230。重新啟動HAART并且病毒回到檢測不到，⑶4穩(wěn)定在約250個。
[0182]盡管已經(jīng)參考優(yōu)選實施例描述本說明書，本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的情況下在形式和細節(jié)上可以作出變化。
【主權(quán)項】
1.一種治療患HIV患者的方法，包括: 通過向所述患者給予至少一次皮內(nèi)劑量的aThl組合物來提高抗HIV感染的循環(huán)⑶4+Th I記憶細胞的效價，其中所述患者感染有HIV;以及 通過給予至少一次靜脈劑量的所述aThl組合物使患者體內(nèi)所述⑶4+Thl記憶細胞擴增并激活。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中通過給予至少兩次皮內(nèi)劑量的aThl組合物來提高所述效價，其中兩次劑量都在相同部位。3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述皮內(nèi)劑量之間的間隔為約3天至約一周之間。4.如權(quán)利要求2所述的方法，還包括在與頭兩次皮內(nèi)劑量的部位不同的部位上的另外兩次皮內(nèi)劑量的aThl組合物。5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中在最后一次皮內(nèi)劑量的約3天內(nèi)給予至少一次靜脈劑量。6.如權(quán)利要求4所述的方法，其中在與所述最后一次皮內(nèi)劑量大約相同的時間給予所述靜脈劑量。7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中以高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法(HAART)同時對所述患者進行治療。8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述aThI組合物包含同種異體激活的CD4+T細胞。9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中降低或消除所述患者體內(nèi)潛在病毒載量。10.一種降低患HIV患者體內(nèi)病毒載量的方法，包括: 給予至少一次劑量的aThl組合物和至少一次劑量的一種或多種HIV抗原，其中提高了患者體內(nèi)抗HIV感染的循環(huán)CD4+Thl記憶細胞的效價，并且降低了患者體內(nèi)的所述病毒載量。11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中分開給予所述aThl組合物和所述HIV抗原。12.如權(quán)利要求10所述的方法，其中皮內(nèi)給予所述aThl組合物和所述一種或多種HIV抗原。13.如權(quán)利要求10所述的方法，其中皮內(nèi)給予兩次以上劑量的所述aThl組合物和所述HIV抗原。14.如權(quán)利要求10所述的方法，還包括給予靜脈劑量的所述aThl組合物。15.如權(quán)利要求10所述的方法，其中循環(huán)給予劑量之間的周期在約3天至約5天之間。16.如權(quán)利要求10所述的方法，其中同時用HAART治療所述患者。17.如根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中降低了或消除了患者體內(nèi)潛在病毒載量。18.—種從患者中降低或消除HIV病毒的方法，包括 向患者給予逐步增加的靜脈劑量的aThl組合物，其中同時用HAART治療所述患者。19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中已根據(jù)權(quán)利要求1治療所述患者。20.如權(quán)利要求18所述的方法，其中已根據(jù)權(quán)利要求10治療所述患者。21.如權(quán)利要求18所述的方法，其中已根據(jù)權(quán)利要求1和10治療所述患者。22.如權(quán)利要求18所述的方法，其中停止所述HAART并且對所述患者的CD4+細胞和病毒載量進行監(jiān)測。23.如權(quán)利要求2 2所述的方法，其中如果在所述患者體內(nèi)檢測到病毒峰值，則恢復(fù)HAARTo24.一種試劑盒，包括治療性HIV疫苗的組分，其中所述試劑盒包括皮內(nèi)劑量的aThl組合物、靜脈劑量的aThl組合物和一種或多種HIV抗原。25.如權(quán)利要求24所述的試劑盒，其中所述試劑盒進一步包括HAART的組分。26.如權(quán)利要求24所述的試劑盒，其中將皮內(nèi)組合物分成在每個包裝中具有相同量的組合物的單劑量包裝。27.如權(quán)利要求24所述的試劑盒，其中將靜脈組合物分成在每個包裝中具有不同量的組合物的單劑量包裝。28.如權(quán)利要求24所述的試劑盒，其中對每次循環(huán)的所述單劑量包裝進行標(biāo)記并將其配置為具有遞增量的所述組合物。29.—種組合物，包括: aThl組合物，其包含同種異體抗原，與CD40表面受體和I型細胞因子相互作用的分子；和 至少一種或多種HIV抗原。30.—種AVI組合物，包括: aThl組合物，其包含同種異體抗原，與CD40表面受體和I型細胞因子相互作用的分子；和 至少一種或多種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物。31.如權(quán)利要求30所述的組合物，進一步包括一種或多種HIV抗原。
【文檔編號】A61K35/17GK105899219SQ201580004106
【公開日】2016年8月24日
【申請日】2015年1月8日
【發(fā)明人】邁克爾·哈爾-諾伊
【申請人】免疫創(chuàng)新治療有限公司