一種海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒及其制備方法和應(yīng)用、一種載藥納米粒子的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種海藻酸鈉?植物甾醇?乳糖酸靶向納米粒及其制備方法和應(yīng)用、一種載藥納米粒子，此靶向納米粒以植物甾醇作為載體的基本骨架，植物甾醇作為疏水配基，構(gòu)建兩親性的抗腫瘤藥物載體?海藻酸鈉?植物甾醇納米粒，同時(shí)將乳糖酸通過酯化作用連接在納米粒上，作為具有靶向作用的信號(hào)分子。該靶向納米粒能夠包載治療腫瘤的藥物形成載藥納米粒子，并將其靶向輸送到肝癌細(xì)胞中，增加肝癌組織和細(xì)胞中的藥物濃度，減少藥物對(duì)正常組織的損害，提高藥物的利用率，從而達(dá)到更好的治療效果。
【專利說明】
_種海藻酸鈉-植物留酵-乳糖酸朝向納米粒及其制備方法和應(yīng)用、一種載藥納米粒子
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒及其制備方法和應(yīng)用及一種海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒包載鹽酸多柔比星制成的載藥納米粒子。
【背景技術(shù)】
[0002]癌癥是世界上死亡率極高的一種疾病，其中肝癌被稱為“癌中之王”，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全世界每年有超過700000人被診斷為肝癌患者，大約有600000人死于肝癌，我國(guó)的肝癌發(fā)病人數(shù)約占全球的55%，每年的死亡率達(dá)20.4/10萬。肝癌組織和細(xì)胞不規(guī)則的脈管系統(tǒng)，組織間液高壓等構(gòu)成肝癌復(fù)雜的生理屏障，傳統(tǒng)的抗癌藥物由于藥物的分子量低，在體內(nèi)容易擴(kuò)散，對(duì)肝癌細(xì)胞的選擇性差，因此在殺死肝癌細(xì)胞的同時(shí)也對(duì)正常的組織和細(xì)胞產(chǎn)生毒副作用。同時(shí)在體內(nèi)是非特異性分布，經(jīng)代謝等步驟過程后，只有少部分藥物進(jìn)入肝靶向細(xì)胞。
[0003]因此，開發(fā)一種具有肝靶向功能的納米藥物載體十分有必要，目前公認(rèn)的納米藥物載體包括脂質(zhì)體、脂質(zhì)微粒、納米囊和納米球以及聚合物膠束等。其中，脂質(zhì)體因具有良好的組織相容性、安全性、靶向性、緩釋性、實(shí)用性等特點(diǎn)而倍受關(guān)注，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，已經(jīng)有16個(gè)脂質(zhì)體藥物成功上市。
[0004]近年來，科學(xué)家在對(duì)原有的處方工藝技術(shù)的不斷改良下，已獲得長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體、免疫脂質(zhì)體、溫度敏感脂質(zhì)體等。但是針對(duì)脂質(zhì)體的不穩(wěn)定性、包封率低等缺點(diǎn)，近年來針對(duì)納米藥物載體的研究已經(jīng)向低毒、低免疫性、高包封率、高穩(wěn)定性等的納米球發(fā)展，此類的研究具有較好的應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒，此靶向納米粒以植物留醇作為載體的基本骨架，植物留醇作為疏水配基，構(gòu)建兩親性的抗腫瘤藥物載體-海藻酸鈉-植物留醇納米粒，同時(shí)將乳糖酸通過酯化作用連接在納米粒上，作為具有靶向作用的信號(hào)分子。
[0006]本發(fā)明還提供了一種海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒的制備方法，該制備方法步驟簡(jiǎn)單。
[0007]本發(fā)明還提供了海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒在制備具有肝靶向功能的納米藥物載體中的應(yīng)用，可定向的將抗腫瘤的藥物輸送到肝癌細(xì)胞中，從而達(dá)到更好的治療效果。
[0008]本發(fā)明還提供了一種載藥納米粒子，通過海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒采用物理滲透的方法包載鹽酸多柔比星制得。
[0009]本發(fā)明采取的技術(shù)方案為:
[0010]—種海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒，海藻酸鈉作為載體的基本骨架，植物甾醇作為疏水配基，乳糖酸作為具有靶向作用的信號(hào)分子，三者通過酯鍵連接，并在水中超聲自組裝成核殼式納米顆粒。
[0011]本發(fā)明還提供了上述海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒的制備方法，所述制備方法包括以下步驟:
[0012](a)通過二環(huán)己基碳二亞胺和4-二甲基氨基吡啶介導(dǎo)的酯化反應(yīng)將植物甾醇連到海藻酸鈉上，形成海藻酸鈉-植物留醇聚合物；
[0013](b)將乳糖酸活化，然后與海藻酸鈉-植物甾醇進(jìn)行聚合物反應(yīng)，制備連有乳糖酸的海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸聚合物分子；
[0014](c)將海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子在水中超聲自組裝成核殼式納米顆粒。
[0015]步驟(a)中，所述海藻酸鈉、植物留醇、二環(huán)己基碳二亞胺、4-二甲基氨基吡啶之間的物質(zhì)的量之比為1: (I?2):(0.2?0.22):(0.1?0.12)。
[0016]所述步驟(a)進(jìn)一步包括:在25?30 °C反應(yīng)24?48小時(shí)，通過透析袋透析3次，所述透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，形成海藻酸鈉-植物留醇聚合物。
[0017]所述步驟(b)具體包括:先將乳糖酸在碳酰二亞胺鹽酸鹽和4-二甲基氨基吡啶作用下活化，然后與海藻酸鈉-植物留醇進(jìn)行聚合物反應(yīng)。
[0018]所述海藻酸鈉-植物甾醇聚合物和乳糖酸質(zhì)量之比為(1.5?2.0):1。
[0019]所述乳糖酸、碳酰二亞胺鹽酸鹽、4-二甲基氨基吡啶之間的物質(zhì)的量之比為1:(0.2?0.22):(0.1?0.12)。
[0020]所述聚合反應(yīng)的溫度為25?30°C，時(shí)間為24?48小時(shí)。
[0021]所述聚合反應(yīng)后進(jìn)一步包括使用透析袋透析3次，所述透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子。
[0022]所述步驟(c)具體包括:海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸聚合物分子溶于水，36?38°C下超聲震蕩40?55小時(shí)，自組裝成具有靶向功能的核殼式納米顆粒。
[0023]本發(fā)明還提供了根據(jù)上述制備方法制備得到的藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒在制備具有肝革El向功能的納米藥物載體中的應(yīng)用。
[0024]本發(fā)明還提供了一種載藥納米粒子，所述載藥納米粒子由海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒采用物理滲透的方法包載鹽酸多柔比星制得。
[0025]所述載藥納米粒子的制備方法包括以下步驟:鹽酸多柔比星溶于二甲基乙酰胺溶液，加入三乙胺，鹽酸多柔比星與三乙胺的物質(zhì)的量之比為1:(3.0?3.9)，然后將其與海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒在避光條件下反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，經(jīng)pH = 7.4，l/15mol/L、20?30°C的磷酸緩沖液透析，再經(jīng)微孔濾膜過濾、凍干，即可制得載藥納米粒子。
[0026]所述鹽酸多柔比星在二甲基乙酰胺溶液中的濃度為1.0?1.lmol/L。
[0027]所述鹽酸多柔比星與所述海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納粒子的質(zhì)量之比為(1.5?3.0):1。
[0028]所述避光條件下反應(yīng)的反應(yīng)溫度為4°C，時(shí)間為36?72小時(shí)。
[0029]所述微孔濾膜的孔徑為1.0um。
[0030]所述透析所用透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子。
[0031]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過自組裝的海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸的納米藥物載體作為肝靶向藥物載體，能夠?qū)⒖拱┧幬锇邢虻妮斔偷礁伟┘?xì)胞中，增加肝癌組織和細(xì)胞中的藥物濃度，減少藥物對(duì)正常組織的損害，提高藥物的利用率。具有安全性、有效性、靶向性等，為將來其作為一種新型藥物載體應(yīng)用于臨床提供理論基礎(chǔ)。
【附圖說明】
[0032]圖1為海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒的透射電鏡圖；
[0033]圖2為海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒子的粒徑分布圖；
[0034]圖3為載藥納米粒子在不同PH值環(huán)境下，其藥物釋放量與時(shí)間的關(guān)系圖；
[0035]圖4為鹽酸多柔比星、載藥納米粒子一和載藥納米粒子二與HepG2細(xì)胞作用后的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)圖，圖中DOX.HCl為鹽酸多柔比星;PA/D0X為載藥納米粒子二;GPA/D0X為載藥納米粒子一 O
【具體實(shí)施方式】
[0036]實(shí)施例1
[0037]—種海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒的制備方法，所述制備方法包括以下步驟:
[0038](a)海藻酸鈉-植物甾醇合成:通過二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)介導(dǎo)的酯化反應(yīng)將植物留醇連到海藻酸鈉上，海藻酸鈉、植物留醇、二環(huán)己基碳二亞胺、4-二甲基氨基吡啶之間的物質(zhì)的量之比為1:1: 0.2:0.1，在30 °C反應(yīng)24小時(shí)，通過透析袋透析3次，所述透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，形成海藻酸鈉-植物甾醇聚合物。
[0039](b)海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸的制備:先將乳糖酸在碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCL)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)下活化，然后與海藻酸鈉-植物甾醇聚合物反應(yīng)，海藻酸鈉-植物留醇聚合物和乳糖酸質(zhì)量之比為1.5:1，乳糖酸、碳酰二亞胺鹽酸鹽、4-二甲基氨基吡啶之間的物質(zhì)的量之比為1:0.2:0.1，在25°C反應(yīng)48小時(shí)，通過透析袋透析3次，所述透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，制備連有乳糖酸的海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子。
[0040](c)上述兩種聚合物溶于水，在37°C下超聲震蕩48小時(shí)。兩種聚合物分子分別自組裝形成非靶向功能的海藻酸鈉-植物留醇納米粒和海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒。
[0041 ] 實(shí)施例2
[0042]—種海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒的制備方法，所述制備方法包括以下步驟:
[0043](a)海藻酸鈉-植物甾醇合成:通過二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)介導(dǎo)的酯化反應(yīng)將植物留醇連到海藻酸鈉上，海藻酸鈉、植物留醇、二環(huán)己基碳二亞胺、4-二甲基氨基吡啶之間的物質(zhì)的量之比為1:1.5:0.21:0.11，在28°C反應(yīng)32小時(shí)，通過透析袋透析3次，所述透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，形成海藻酸鈉-植物甾醇聚合物。
[0044](b)海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸的制備:先將乳糖酸在碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCL)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)下活化，然后與海藻酸鈉-植物甾醇聚合物反應(yīng)，海藻酸鈉-植物留醇聚合物和乳糖酸質(zhì)量之比為1.8:1，乳糖酸、碳酰二亞胺鹽酸鹽、4-二甲基氨基吡啶之間的物質(zhì)的量之比為1:0.21:0.11，在28°C反應(yīng)35小時(shí)，通過透析袋透析3次，所述透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，制備連有乳糖酸的海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子。
[0045](C)上述兩種聚合物溶于水，在36°C下超聲震蕩55小時(shí)。兩種聚合物分子分別自組裝形成非靶向功能的海藻酸鈉-植物留醇納米粒和海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒。
[0046]實(shí)施例3
[0047]—種海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒的制備方法，所述制備方法包括以下步驟:
[0048](a)海藻酸鈉-植物甾醇合成:通過二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)介導(dǎo)的酯化反應(yīng)將植物留醇連到海藻酸鈉上，海藻酸鈉、植物留醇、二環(huán)己基碳二亞胺、4-二甲基氨基吡啶之間的物質(zhì)的量之比為1:2:0.22:0.12，在25 °C反應(yīng)48小時(shí)，通過透析袋透析3次，所述透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，形成海藻酸鈉-植物甾醇聚合物。
[0049](b)海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸的制備:先將乳糖酸在碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCL)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)下活化，然后與海藻酸鈉-植物甾醇聚合物反應(yīng)，海藻酸鈉-植物留醇聚合物和乳糖酸質(zhì)量之比為2.0:1，乳糖酸、碳酰二亞胺鹽酸鹽、4-二甲基氨基吡啶之間的物質(zhì)的量之比為I =0.22:0.12,在30 °C反應(yīng)24小時(shí)，通過透析袋透析3次，所述透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，制備連有乳糖酸的海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子。
[0050](c)上述兩種聚合物溶于水，在38°C下超聲震蕩40小時(shí)。兩種聚合物分子分別自組裝形成非靶向功能的海藻酸鈉-植物留醇納米粒和海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒。
[0051 ] 實(shí)施例4
[0052]—種載藥納米粒子，所述載藥納米粒子的制備方法包括以下步驟:
[0053]采用物理滲透的方法進(jìn)行包載。將鹽酸多柔比星溶于二甲基乙酰胺(DMAC)，加入三乙胺，鹽酸多柔比星與三乙胺的物質(zhì)的量之比為1:3，鹽酸多柔比星在DMAC中的濃度為1.0mol/L，然后將其與實(shí)施例1制備得到的海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒，4°C條件下避光反應(yīng)48小時(shí)，鹽酸多柔比星與海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納粒子的質(zhì)量之比為 1.5:1。
[0054]在pH= 7.4，1/15M的磷酸緩沖液中透析3天，所用透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，并每隔4小時(shí)換一次新鮮介質(zhì)，最后將所得的溶液經(jīng)1.0um微孔濾膜過濾、凍干，即可得到包載有藥物的載藥納米粒子一。
[0055]采用與上述相同的方法，只是將海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒替換為非革巴向功能的海藻酸鈉-植物留醇納米粒，制得包載有藥物的載藥納米粒子二。
[0056]實(shí)施例5[0057 ] 一種載藥納米粒子，所述載藥納米粒子的制備方法包括以下步驟:
[0058]采用物理滲透的方法進(jìn)行包載。將鹽酸多柔比星溶于二甲基乙酰胺(DMAC)，加入三乙胺，鹽酸多柔比星與三乙胺的物質(zhì)的量之比為1:3.5，鹽酸多柔比星在DMAC中的濃度為1.0mol/L，然后將其與實(shí)施例2制備得到的海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒，4°C條件下避光反應(yīng)60小時(shí)，鹽酸多柔比星與海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納粒子的質(zhì)量之比為2.0:10
[0059]在pH= 7.4，1/15M的磷酸緩沖液中透析3天，所用透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，并每隔4小時(shí)換一次新鮮介質(zhì)，最后將所得的溶液經(jīng)1.0um微孔濾膜過濾、凍干，即可得到包載有藥物的載藥納米粒子一。
[0060]采用與上述相同的方法，只是將海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒替換為非革巴向功能的海藻酸鈉-植物留醇納米粒，制得包載有藥物的載藥納米粒子二。
[0061 ] 實(shí)施例6
[0062]—種載藥納米粒子，所述載藥納米粒子的制備方法包括以下步驟:
[0063]采用物理滲透的方法進(jìn)行包載。將鹽酸多柔比星溶于二甲基乙酰胺(DMAC)，加入三乙胺，鹽酸多柔比星與三乙胺的物質(zhì)的量之比為1:3.9，鹽酸多柔比星在DMAC中的濃度為
1.lmol/L，然后將其與實(shí)施例3制備得到的海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒，4°C條件下避光反應(yīng)72小時(shí)，鹽酸多柔比星與海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納粒子的質(zhì)量之比為3.0:10
[0064]在pH= 7.4，1/15M的磷酸緩沖液中透析3天，所用透析袋能夠截留分子量為8000?14000的大分子，并每隔4小時(shí)換一次新鮮介質(zhì)，最后將所得的溶液經(jīng)1.0um微孔濾膜過濾、凍干，即可得到包載有藥物的載藥納米粒子一。
[0065]采用與上述相同的方法，只是將海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒替換為非革巴向功能的海藻酸鈉-植物留醇納米粒，制得包載有藥物的載藥納米粒子二。
[0066]實(shí)施例7
[0067]海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸的表征及載藥納米粒的載藥、釋藥性能測(cè)試
[0068]1.透射電鏡檢測(cè)納米載體的大小及形態(tài)
[0069]將實(shí)施例1制備得到的海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒溶液滴于載有碳膜的銅網(wǎng)上，用濾紙吸干表面液體，用pH = 6.0的2%磷鎢酸負(fù)染，25-32°C自然干燥后在透射電鏡下對(duì)納米粒的形態(tài)進(jìn)行觀察，結(jié)果如圖1所示，利用激光動(dòng)態(tài)光散射儀對(duì)海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸靶向納米粒的粒徑分布進(jìn)行觀察，結(jié)果如圖2所示。
[0070]使用實(shí)施例4制得的載藥納米粒子一和載藥納米粒子二進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn):
[°071 ] 2.載藥納米粒的體外釋放測(cè)試
[0072]采用不同pH值的PBS緩沖液作為釋放介質(zhì)，pH值分別為7.4,6.5和5.5，探究載藥納米粒子一在不同環(huán)境下的藥物釋放效率。如圖3所示，比較發(fā)現(xiàn)，在低pH值的環(huán)境下載藥納米粒子一的釋放效率更高，大多數(shù)腫瘤組織的PH比正常組織低，約為5.0-6.0之間，可以說明腫瘤組織更能有效的促進(jìn)載藥納米粒子一中藥物的釋放。
[0073]3.體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)
[0074]此實(shí)驗(yàn)采用的是肝癌細(xì)胞膜表面特異的脫唾液酸糖蛋白受體(asialoglycoprotein receptor，ASGPR)過表達(dá)的HepG2細(xì)胞。
[0075]取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HepG2細(xì)胞，調(diào)整濃度為lX104/ml，接種于96孔板。分別將含有相同藥物濃度的游離鹽酸多柔比星、載藥納米粒子一和載藥納米粒子二與HepG2細(xì)胞作用24、48、72h，取出培養(yǎng)板，每孔加入CCK8 10μ1，37 °C繼續(xù)培養(yǎng)4h后，離心棄上清，在酶標(biāo)儀450nm下測(cè)定各孔的吸光度A，按下式計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率、細(xì)胞存活率。(細(xì)胞增殖抑制率(% )=(A對(duì)照-A實(shí)驗(yàn))/A對(duì)照X 100%，細(xì)胞存活率=A實(shí)驗(yàn)/A對(duì)照X 100% )比較三種藥物的半致死濃度發(fā)現(xiàn)，載藥納米粒子一的半致死濃度最低，其次是載藥納米粒子二，最高的是游離的鹽酸多柔比星，如圖4所示，這個(gè)結(jié)果表明海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒具有靶向輸送藥物的功能。
[0076]4.激光共聚焦實(shí)驗(yàn)
[0077]此實(shí)驗(yàn)采用的是肝癌細(xì)胞膜表面特異的脫唾液酸糖蛋白受體(as ialogly coprotein receptor，ASGPR)過表達(dá)的HepG2 細(xì)胞。
[0078]細(xì)胞培養(yǎng)基中加入含有相同藥物濃度的游離的鹽酸多柔比星、載藥納米粒子一和載藥納米粒子二，在激光共聚焦顯微鏡下，觀察HepG2細(xì)胞中鹽酸多柔比星的分布情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果是，加入游離鹽酸多柔比星的細(xì)胞，藥物只要分布于細(xì)胞核中；加入載藥納米粒子一和載藥納米粒子二的細(xì)胞，藥物主要分布在細(xì)胞膜上，且加入載藥納米粒子一的細(xì)胞熒光強(qiáng)度比不連接乳糖酸的載體的熒光強(qiáng)度要強(qiáng)。該結(jié)果表明，細(xì)胞對(duì)三種藥物的攝取方式存在差異，更進(jìn)一步表明了海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒的靶向功能。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒，其特征在于:海藻酸鈉作為載體的基本骨架，植物留醇作為疏水配基，乳糖酸作為具有靶向作用的信號(hào)分子，三者通過酯鍵連接，并在水中超聲自組裝成核殼式納米顆粒。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟: (a)通過二環(huán)己基碳二亞胺和4-二甲基氨基吡啶介導(dǎo)的酯化反應(yīng)將植物留醇連到海藻酸鈉上，形成海藻酸鈉-植物留醇聚合物； (b)將乳糖酸活化，然后與海藻酸鈉-植物留醇進(jìn)行聚合物反應(yīng)，制備連有乳糖酸的海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸聚合物分子； (c)將海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸聚合物分子在水中超聲自組裝成核殼式納米顆粒。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法，其特征在于，所述步驟(b)具體包括:先將乳糖酸在碳酰二亞胺鹽酸和4-二甲基氨基吡啶作用下活化，然后與海藻酸鈉-植物留醇進(jìn)行聚合物反應(yīng)。4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述制備方法，其特征在于，所述步驟(c)具體包括:海藻酸鈉-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子溶于水，36?38°C下超聲震蕩40?55小時(shí)，自組裝成具有革El向功能的核殼式納米顆粒。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法制備得到的海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒在制備具有肝靶向功能的納米藥物載體中的應(yīng)用。6.—種載藥納米粒子，其特征在于，所述載藥納米粒子由權(quán)利要求1所述的海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒采用物理滲透的方法包載鹽酸多柔比星制得。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的載藥納米粒子，其特征在于，所述載藥納米粒子的制備方法包括以下步驟:鹽酸多柔比星溶于二甲基乙酰胺溶液，加入三乙胺，鹽酸多柔比星與三乙胺的物質(zhì)的量之比為1:(3.0?3.9)，然后將其與海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納米粒在避光條件下反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，經(jīng)pH=7.4，l/15mol/L、20?30°C的磷酸緩沖液透析，再經(jīng)微孔濾膜過濾、凍干，即可制得載藥納米粒子。8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的載藥納米粒子，其特征在于:所述鹽酸多柔比星與所述海藻酸鈉-植物留醇-乳糖酸靶向納粒的質(zhì)量之比為(1.5?3.0):1。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的載藥納米粒子，其特征在于:所述避光條件下反應(yīng)的反應(yīng)溫度為4°C，時(shí)間為36?72小時(shí)，所述透析的時(shí)間為三天，并每隔4小時(shí)換一次新鮮介質(zhì)。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的載藥納米粒子，其特征在于:所述微孔濾膜的孔徑為1.0um。
【文檔編號(hào)】A61K31/704GK105902521SQ201610423692
【公開日】2016年8月31日
【申請(qǐng)日】2016年6月15日
【發(fā)明人】黃美玲, 龔仁敏
【申請(qǐng)人】安徽師范大學(xué)