酸角殼提取物及其制備方法和降血脂中的應用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種酸角殼提取物及其制備方法和應用。本發(fā)明所述的酸角殼提取物，其含有槲皮素、山奈酚、桑色素、芹菜素、柚皮素和木犀草素等成分，能夠抑制脂肪酶的活性，降低血脂水平，減輕體重，有效預防、減輕和治療因肥胖導致的高血脂癥及其并發(fā)癥。
【專利說明】
酸角殼提取物及其制備方法和降血脂中的應用
技術(shù)領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物提取物及其制備方法和應用，特別是涉及一種酸角殼提取物 及其制備方法和應用。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來隨著物質(zhì)生活的豐富，人們的脂肪水平也在逐年上升。過多的脂肪攝入已 被認為是導致肥胖、高血脂癥、動脈硬化及糖尿病等生活習慣病增加的原因之一。肥胖盡管 受遺傳因素、飲食因素、生活習慣因素、精神因素、中樞性因素、代謝性因素、運動不足等多 種因素的影響，但對多數(shù)肥胖者來講，營養(yǎng)攝取過度引起的體內(nèi)能量蓄積是其主要原因之 一。根椐流行病學調(diào)查，與正常人相比，多數(shù)肥胖者的體內(nèi)組織脂肪蓄積異常。此外，高血脂 癥已被證明是加速全身動脈粥樣硬化的主要病因，同時也是腦卒中、冠心病、心肌梗死、心 臟猝死等疾病的重要危險因素。由肥胖導致的各種生活習慣病已成為人們十分關(guān)注的問 題。已知食品中脂肪成分含有的熱量最高，過量攝取脂肪是導致肥胖的直接原因。脂肪的吸 收需要通過胰臟分泌的脂肪酶的作用，分解成游離脂肪酸后經(jīng)小腸吸收，在體內(nèi)再合成中 性脂肪被蓄積和利用。中性脂肪在肝臟中過量蓄積會誘發(fā)脂肪肝。中性脂肪酸在肝臟中轉(zhuǎn) 換成超低密度脂蛋白（Very low density lipoprotein,VLDL)進入血液，血液中過量的 VLDL是尚脂血癥的臨床指標之一。尚脂血癥不僅是動脈硬化的主要病因，還會引起血檢癥， 以及誘發(fā)腦梗塞、心肌梗塞等多種循環(huán)系統(tǒng)疾患。對于預防動脈硬化，一般認為通過限制脂 肪吸收或促進體內(nèi)脂肪代謝來減少血液脂質(zhì)，特別是減少VLDL是非常有效的方法。
[0003] 酸角（Tamarindus indica Linn.)，又名酸豆，是蘇木科(Caesalpiniaceae)酸角 屬(Tamarindus)的一種亞熱帶常綠大喬木植物。酸角原產(chǎn)于非洲熱帶，經(jīng)蘇丹引入印度后 開始大規(guī)模種植，現(xiàn)在全世界熱帶、南亞熱帶地區(qū)都有引種和栽培，尤以蘇丹、印度、印度尼 西亞、越南、巴西、泰國、巴基斯坦等國種植最普遍。我國云南、四川、海南、廣東、廣西、福建、 臺灣等?。▍^(qū)）南部、中部和北部(金沙江干熱河谷)亦有大量種植。酸角果肉可直接食用，或 加工成果汁、果醬、糖果、調(diào)料、咖喱和冰淇淋等食品及食品添加劑。酸角果肉還具有悠久的 藥用歷史，為非洲、印度、孟加拉國、尼日利亞和巴基斯坦等國的傳統(tǒng)常用藥，用于治療糖尿 病、高血脂、肥胖、細菌感染等疾病。然而，酸角果肉中含有大量果糖和蔗糖，熱量較高，一定 程度上也會造成肥胖和血脂升高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 基于此，本發(fā)明的目的在于，提供一種酸角殼提取物，其能夠抑制脂肪酶的活性， 有效降低血脂水平。
[0005] 本發(fā)明的另一個目的在于，提供所述酸角殼提取物的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的再一個目的在于，提供所述酸角殼提取物在制備降血脂藥物、食品中的 應用。
[0007] -種酸角殼提取物，其含有槲皮素、山奈酚、桑色素、芹菜素、柚皮素和木犀草素等 黃酮類化合物。
[0008] -種酸角殼提取物的制備方法，其包括以下步驟:取酸角果殼，經(jīng)粉碎后，采用溶 劑提取、超聲波提取或微波提取制備而成。
[0009] 在其中一個實施例中，所述的溶劑提取為水加熱回流提取或者含水乙醇加熱回流 提取;其中，酸角殼與溶劑的質(zhì)量比為1:5~1:10。
[0010] 在其中一個實施例中，所述溶劑提取的提取時間為30分鐘至24小時。
[0011] 本發(fā)明所述的酸角殼提取物，可用于制備降血脂的藥物、食品。
[0012] -種降血脂的藥物，其活性成分包括有酸角殼提取物。
[0013] 在其中一個實施例中，所述藥物的劑型為顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、滴丸劑、口 服液、泡騰片、浸膏劑、糖漿劑、注射劑、緩釋劑、控釋劑或靶向制劑。
[0014] -種降血脂的食品，其包括有酸角殼提取物。
[0015] 本發(fā)明所述的酸角殼提取物，含有大量的黃酮類多酚化合物，而不含果糖、蔗糖等 糖類成分，其熱量低，還能促進排便，其能夠有效降低血脂水平，減輕體重，有效預防、減輕 和治療因肥胖導致的高血脂癥及其并發(fā)癥。動物實驗證明，本發(fā)明所述的酸角殼提取物能 夠抑制大鼠腸道脂肪酶的活性，減少食物來源脂肪的分解，減少腸道脂肪的吸收，降低脂肪 負荷大鼠血液中的甘油三酯水平，進而達到減輕體重和降低血脂的作用。
【具體實施方式】
[0016] 實施例一:酸角殼乙醇提取物的制備
[0017] 準確稱取干燥酸角殼500g，用粉碎機粉碎后回收細粉化的酸角殼，加入10倍量 50v/v%的含水乙醇，加熱回流提取120分鐘，提取液經(jīng)紗布過濾后，濾餅再用相同條件提取 1次，再經(jīng)紗布過濾，合并兩次提取物濾液。濾液回收溶劑，得到酸角殼乙醇提取物浸膏。
[0018] 實施例二:酸角殼水提取物的制備
[0019] 準確稱取干燥酸角殼500g，用粉碎機粉碎后回收細粉化的酸角殼，加入5倍量的純 化水，加熱回流提取120分鐘，提取液經(jīng)紗布過濾后，濾餅再用相同條件提取1次，再經(jīng)紗布 過濾，合并兩次提取物濾液。濾液濃縮后，經(jīng)冷凍干燥，得到酸角殼水提取物浸膏。
[0020] 實施例三:酸角殼提取物的化學成份分析
[0021] 取實施例一制得的酸角殼乙醇提取物浸膏240mg，溶于5%甲醇中，采用液相色 譜一質(zhì)譜(LC-MS)法對其化學成份進行分析，其中，液相色譜柱采用Cosmosil 5 C18-MS-II 色譜柱(4.6IDX250mm，購自日本半井公司），流動相為甲醇-水(0.2%HC1)。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，酸 角殼提取物中含有大量的黃酮類成分，包括有槲皮素、山奈酚、桑色素、芹菜素、柚皮素和木 犀草素等。
[0022] 取實施例二制得的酸角殼水提取物浸膏，按照上述方法對其化學成分進行分析。 經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，酸角殼水提取物中同樣含有大量的黃酮類活性化合物，包括有槲皮素、山奈 酚、桑色素、芹菜素、柚皮素和木犀草素等。
[0023]實施例四：酸角殼提取物的活性成分含量測定
[0024] 精密稱取10.3mg蘆丁對照品（購自中國生物制品檢定所），置50ml容量瓶中，加入 適量甲醇溶解后定容至刻度，制得〇.206mg/ml的蘆丁對照品溶液。
[0025]精密量取蘆丁對照品溶液 1 · 0ml、2 · 0ml、3 · 0ml、4 · 0ml、5 · 0ml、6 · 0ml、7 · 0ml 與 8. Oml，分別置于25ml量瓶中，各加水至8. Oml，分別加入5 %亞硝酸鈉溶液1.0ml，搖勻后放 置6min，再分別加入10%硝酸鋁溶液1.〇1111，搖勻后放置61^11，再分別加入1111〇1/1氫氧化鈉 溶液10.0ml，然后分別加水定容至刻度，搖勻后放置15min，以相應的試劑為空白對照，采用 紫外可見分光光度計在510nm處測定各溶液的吸光度。以各溶液的濃度為橫坐標，吸光度為 縱坐標，繪制標準曲線，所得的線性回歸方程為A = 0.46197411m-0.00675(r = 0.9995)，其 中m為溶液濃度，A為溶液吸光度。
[0026] 分別稱取酸角殼粉末6份，其中3份按照實施例一的方法制備酸角殼乙醇提取物浸 膏，另外3份按照實施例二的方法制備酸角殼水提取物浸膏。分別將制得的浸膏置于10ml容 量瓶中，加入甲醇溶解并定容至刻度。分別精密量取1 .〇ml溶液置于10ml容量瓶中，加入甲 醇定容至刻度，再分別精密量取1.0ml置于10ml容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，再分別精 密量取3.0ml置于25ml容量瓶中，然后分別加入5%亞硝酸鈉溶液1.0ml，搖勻后放置6min， 再分別加入10 %硝酸鋁溶液1. 〇ml，搖勻后放置6min，再分別加入lmol/L氫氧化鈉溶液 10.0ml，然后分別加水定容至刻度，搖勻后放置15min，以相應的試劑為空白對照，采用紫外 可見分光光度計在510nm處測定各溶液的吸光度。根據(jù)上述的標準曲線計算各樣品溶液中 的蘆丁含量，結(jié)果如表一所不。
[0027] 實驗結(jié)果表明，酸角殼提取物中含有大量的黃酮類活性成分，黃酮類化合物的總 含量在6. Ow/w%以上，且乙醇的提取率略高于水的提取率。
[0028] 表一酸角殼提取物的活性成分含量測定值
[0031]實施例五:酸角殼提取物對大鼠小腸內(nèi)脂肪酶(lipase)活性的影響 [0032]實驗動物采用雄性、體重200~240g的SPE級7周齡SD大鼠（購自廣東省醫(yī)學實驗動 物中心，許可證號SCXK(粵)2013-0002)。實驗動物在清潔級層流架中飼養(yǎng)，環(huán)境溫度為23土 2°C，相對濕度為75 ± 10 %，照明時間為12小時/天(7:00~19:00)。
[0033]實驗動物隨機分為對照組、酸角殼乙醇提取物50mg/kg組、酸角殼乙醇提取物 100mg/kg組、酸角殼乙醇提取物200mg/kg組以及酸角殼水提取物200mg/kg組，每組8只。于 實驗開始前禁食12小時，各給藥組經(jīng)灌胃給藥，對照組灌胃給等體積蒸餾水。給藥30分鐘 后，實驗動物經(jīng)戊巴比妥鈉麻醉后開腹，取出小腸從上端起均分三等份，記為小腸_1、小腸_ 2和小腸-3,分別將腸內(nèi)容物取出置于蓋玻片上，并取下小腸內(nèi)粘膜置于載玻片上。分別測 定不同部位的小腸內(nèi)粘膜及腸內(nèi)容物中的脂肪酶活性，同時測定其蛋白質(zhì)含量，并計算和 比較同等蛋白質(zhì)量中的酶活性。實驗數(shù)據(jù)以Mean 土 S. E. Μ表示，應用SPSS 19.0軟件進行數(shù) 據(jù)處理，采用ANOVA檢驗進行統(tǒng)計學分析，p〈0.05有統(tǒng)計學意義。
[0034] 實驗結(jié)果如表二、表三所示，小腸管腔內(nèi)容物中的脂肪酶活性遠遠高于小腸粘膜 中的脂肪酶活性，不同劑量的酸角殼提取物對小腸管腔內(nèi)的脂肪酶的活性均有顯著的抑制 作用，并顯示出明顯的量效關(guān)系，其中，l〇〇mg/kg酸角殼提取物的脂肪酶抑制率為48%， 200mg/kg酸角殼提取物的脂肪酶抑制率為72%。酸角殼乙醇提取物和水提取物對脂肪酶活 性的抑制作用沒有顯著差異。
[0035] 表二實驗動物小腸內(nèi)粘膜中脂肪酶活性的測定(U/mg蛋白質(zhì)）
[0038] 注表示P〈0.05，**表示P〈0.01，與對照組相比有統(tǒng)計學差異。
[0039] 表三實驗動物小腸管腔內(nèi)容物中脂肪酶活性的測定(U/mg蛋白質(zhì)）
[0040]
[0041 ] 注:*表示?〈0.05，**表示?〈0.01，***表示?〈0.001，與對照組相比有統(tǒng)計學差異。
[0042]實施例六:酸角殼提取物對脂肪負荷大鼠血液中甘油三酯(TG)水平的影響 [0043]實驗動物采用雄性、體重200~240g的SPE級7周齡SD大鼠（購自廣東省醫(yī)學實驗動 物中心，許可證號SCXK(粵)2013-0002)。實驗動物在清潔級層流架中飼養(yǎng)，環(huán)境溫度為23土 2°C，相對濕度為75 ± 10 %，照明時間為12小時/天(7:00~19:00)。
[0044]實驗動物隨機分為對照組、酸角殼乙醇提取物100mg/kg組、酸角殼乙醇提取物 200mg/kg組、酸角殼水提取物100mg/kg組以及酸角殼水提取物200mg/kg組，每組8只。于實 驗開始前禁食12小時，各給藥組經(jīng)灌胃給藥，對照組灌胃給等體積蒸餾水。給藥30分鐘后， 分別灌胃給予5ml/kg橄欖油，并分別于橄欖油負荷前、蔗糖負荷后2、4、6、8小時的不同時間 點經(jīng)尾靜脈取血，測定其不同時間的甘油三酯水平。實驗數(shù)據(jù)以Mean±S.E.Μ表示，應用 SPSS 19.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，采用ANOVA檢驗進行統(tǒng)計學分析，ρ〈0.05有統(tǒng)計學意義。 [0045]實驗結(jié)果如表四所示，給予大鼠5ml/kg橄欖油后，血液中的甘油三酯水平顯著升 高，并在6小時后達到峰值，隨后逐漸下降，不同劑量的酸角殼乙醇提取物和水提取物均能 在一定程度上抑制TG值的上升，乙醇提取物與水提物之間沒有明顯差異。
[0046] 表四實驗大鼠于蔗糖負荷后的血糖水平測定值(mmol/L)
[0047]
[0048] 注表示P〈0.05，#表示P〈0.01，與對照組相比有統(tǒng)計學差異。
[0049] 實施例七:酸角殼提取物對高糖、高脂飲食大鼠體重的影響
[0050] 實驗動物采用雄性、體重200~240g的SPE級7周齡SD大鼠（購自廣東省醫(yī)學實驗動 物中心，許可證號SCXK(粵)2013-0002)。實驗動物在清潔級層流架中飼養(yǎng)，環(huán)境溫度為23土 2°C，相對濕度為75 ± 10 %，照明時間為12小時/天(7:00~19:00)。
[0051]實驗動物隨機分為對照組、酸角殼乙醇提取物l〇〇mg/kg組、酸角殼乙醇提取物 200mg/kg組、酸角殼水提取物100mg/kg組以及酸角殼水提取物200mg/kg組，每組10只。喂養(yǎng) 飼料為含豬油10 %、膽固醇2 %、蛋黃粉5 %、丙基硫氧嘧啶0.2 %、蔗糖10 %、基礎飼料 72.8 %的高糖高脂肪飼料。各給藥組每天灌胃給藥一次，對照組灌胃給等體積蒸餾水，實驗 持續(xù)24天。實驗期間每天測定并記錄大鼠的體重。實驗數(shù)據(jù)以Mean 土 S. E. Μ表示，應用SPSS 19.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，采用AN0VA檢驗進行統(tǒng)計學分析，p〈0.05有統(tǒng)計學意義。
[0052]實驗結(jié)果如表五所示，連續(xù)給予高糖、高脂飲食24天后，實驗大鼠的體重明顯增 加，與對照組相比，給予酸角殼乙醇提取物或水提取物均能顯著抑制大鼠體重增加。
[0053]表五高糖、高脂飲食大鼠體重的影響(g)
[0054]
[0055] 注:**表示P〈0.01，與對照組相比有統(tǒng)計學差異。
[0056]實施例八:酸角殼提取物的應用
[0057] 本發(fā)明所述的酸角殼提取物，可用于制備降血脂、減肥的藥品或保健食品，用以預 防、減輕和治療因肥胖導致的高血脂癥及其并發(fā)癥。
[0058] 本發(fā)明所述的酸角殼提取物，可以制備成多種藥物制劑，包括顆粒劑、片劑、膠囊 劑、丸劑、滴丸劑、口服液、泡騰片、浸膏劑、糖漿劑、注射劑、緩釋劑、控釋劑或靶向制劑等。 酸角殼提取物的藥物制劑中，可以采用常規(guī)的賦形劑、潤滑劑、抗氧化劑、防腐劑、著色劑、 甜味劑等添加劑。其中，優(yōu)選的賦形劑有乳糖、白糖、D-甘露醇、淀粉、結(jié)晶纖維素等;優(yōu)選的 潤滑劑有硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、滑石粉等;優(yōu)選的抗氧化劑有亞硫酸鹽、抗壞血酸等;優(yōu)選的 防腐劑有二羥基乙酸、氯丁醇等。
[0059] 本發(fā)明所述的酸角殼提取物為酸角殼的活性提取物，在實際應用中，酸角殼的原 料、粉末制品等，同樣可以用于制備降血脂、減肥的藥品或保健食品。
[0060] 以上所述實施例的各技術(shù)特征可以進行任意的組合，為使描述簡潔，未對上述實 施例中的各個技術(shù)特征所有可能的組合都進行描述，然而，只要這些技術(shù)特征的組合不存 在矛盾，都應當認為是本說明書記載的范圍。
[0061] 以上所述實施例僅表達了本發(fā)明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并 不能因此而理解為對發(fā)明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術(shù)人員來 說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發(fā)明的保護 范圍。因此，本發(fā)明專利的保護范圍應以所附權(quán)利要求為準。
【主權(quán)項】
1. 一種酸角殼提取物，其含有槲皮素、山奈酚、桑色素、芹菜素、柚皮素和木犀草素。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的酸角殼提取物，其特征在于:所述的酸角殼提取物由酸角果殼 經(jīng)粉碎后，采用溶劑提取、超聲波提取或微波提取制備而成。3. -種酸角殼提取物的制備方法，其包括以下步驟:取酸角果殼，經(jīng)粉碎后，采用溶劑 提取、超聲波提取或微波提取制備而成。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述的溶劑提取為水加熱回流提取或 者含水乙醇加熱回流提取;其中，酸角殼與溶劑的質(zhì)量比為1:5~1:10。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述溶劑提取的提取時間為30分鐘至 24小時。6. 酸角殼提取物在制備用于降血脂的藥物、食品中的應用。7. -種降血脂的藥物，其特征在于:其活性成分包括有酸角殼提取物。8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物，其特征在于:所述藥物的劑型為顆粒劑、片劑、膠囊劑、 丸劑、滴丸劑、□服液、泡騰片、浸膏劑、糖漿劑、注射劑、緩釋劑、控釋劑或靶向制劑。9. 一種降血脂的食品，其特征在于:其包括有酸角殼提取物。10. 酸角殼提取物在制備用于減肥的藥物、食品中的應用。
【文檔編號】A61P3/06GK105902601SQ201610235306
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年4月14日
【發(fā)明人】李維熙, 王文靜, 蘇薇薇, 栗原博, 袁春平, 郭靜, 高永堅
【申請人】國藥集團廣東環(huán)球制藥有限公司