一種內(nèi)層釋放no氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種內(nèi)層釋放NO氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架及其制備方法，該人工血管支架包括內(nèi)層、中層和外層，所述外層套設(shè)在所述中層的外部，所述中層套設(shè)在所述內(nèi)層的外部，所述內(nèi)層由靜電紡絲纖維制成，所述靜電紡絲纖維由水溶膠和釋放NO的物質(zhì)共混而成。該方法將釋放NO氣體的物質(zhì)均勻分散的包裹在水溶膠的靜電紡絲溶液中，然后通過微溶膠靜電紡絲的技術(shù)構(gòu)建納米纖維小口徑血管支架，從而制備出內(nèi)層含有釋放NO物質(zhì)的微溶膠靜電紡絲纖維膜，進(jìn)而得到內(nèi)層釋放NO氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架，該方法制備簡(jiǎn)單、操作方便，藥物裝載效率高，能夠?qū)崿F(xiàn)NO氣體的緩慢釋放。通過釋放NO氣體，到達(dá)抗血栓性和抑制內(nèi)膜增生的作用。
【專利說明】
一種內(nèi)層釋放NO氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)療領(lǐng)域，尤其涉及一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架及其制備方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]血管類疾病嚴(yán)重危害人類身體健康，全球每年都有數(shù)以萬(wàn)計(jì)的人由于血管老化、 損傷、病變等多方面原因患有血管類疾病。血管缺損修復(fù)，特別是小口徑血管(內(nèi)徑<6毫米)的修復(fù)一直是臨床的難點(diǎn)之一。
[0003]栓塞是小口徑血管移植術(shù)后失敗的主要原因。引起栓塞的原因是多方面的，而植入體內(nèi)后人工血管和宿主血管的順應(yīng)性不匹配是導(dǎo)致小口徑人工血管血栓形成和內(nèi)膜增生的主要誘因之一。
[0004]目前通過人工血管支架能夠有效解決這一問題。
[0005]N0是目前所知的最強(qiáng)的血管舒張因子和收縮因子，它能作為介質(zhì)、信使、遞質(zhì)或細(xì)胞功能調(diào)節(jié)因子參與集體許多生理或病理過程
[0006]在生理情況下血管內(nèi)皮細(xì)胞可產(chǎn)生內(nèi)皮衍化舒張因子和內(nèi)皮衍化收縮因子，調(diào)節(jié)血管舒縮，血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的N0，通過細(xì)胞膜迅速傳遞至血管平滑肌細(xì)胞，使平滑肌松弛，動(dòng)脈血管擴(kuò)張，從而調(diào)節(jié)血壓和血流分布。這種舒血管作用可被N0S抑制劑L-單甲基精氨酸(L-NMMA)阻斷。內(nèi)源性N0調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)，觸發(fā)血管活性物質(zhì)，促進(jìn)血管生長(zhǎng)與再生。血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的N0在生理、病理情況下均有保持血管內(nèi)皮細(xì)胞完整性的作用。實(shí)驗(yàn)證明，N0作為一種強(qiáng)有力的腦血管擴(kuò)張劑，參與腦血管基本張力的調(diào)節(jié)，腦血管內(nèi)皮細(xì)胞所釋放的N0可提高血管平滑肌細(xì)胞中的鳥苷酸環(huán)化酶的活性，導(dǎo)致環(huán)一磷酸鳥苷水平升高， 從而使血管松弛;相反，如給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用N0S抑制劑，則發(fā)現(xiàn)環(huán)一磷酸鳥苷含量下降，腦動(dòng)脈收縮。N0還通過抑制血小板和白細(xì)胞聚集以保護(hù)腦的血管內(nèi)皮。基礎(chǔ)含量的N0亦能阻止腦動(dòng)脈對(duì)去甲腎上腺素和5-羥色胺等物質(zhì)所致的收縮效應(yīng)?；谝陨显?，在缺血性腦損害發(fā)生的早期，N0對(duì)腦缺血的邊緣帶、腦側(cè)支循環(huán)的開放和腦微循環(huán)血流灌注及恢復(fù)有肯定的促進(jìn)作用。
[0007]人工血管內(nèi)中外，分別有不同的功能，其中內(nèi)層要初期促進(jìn)內(nèi)皮化，進(jìn)一步緩慢釋放N0氣體，到達(dá)抗血栓性和抑制內(nèi)膜增生的作用。
[0008]現(xiàn)有制備釋放N0氣體的人工血管的方法有很多，但都或多或少存在一些問題，下面列舉一些現(xiàn)有的技術(shù):
[0009]—.水溶性藥物是一類常規(guī)藥物，由于其親水性好，可以再水中快速溶解，從而在體內(nèi)被迅速吸收。但也正因?yàn)槠涓呷芙舛龋谌梭w內(nèi)快速溶解、擴(kuò)散的過程中會(huì)被人體迅速吸收、代謝的特點(diǎn)，導(dǎo)致很難達(dá)到長(zhǎng)效穩(wěn)定的釋放，達(dá)到理想的治療效果。為了提高水溶性藥物在臨床運(yùn)用中的效果，研究人員已經(jīng)制備了很多藥物的載體，例如:脂質(zhì)體，微膠囊，納米微球以及水凝膠等，利用這些載體攜載水溶性藥物，能夠治療各種病變損傷器官或組織。 然而，利用這些載體的給藥方式由于各種因素存在很多問題，例如，藥物的快速釋放、非三維支架、難以控制創(chuàng)傷部位的給藥量等問題，因此設(shè)計(jì)出一個(gè)新的給藥技術(shù)和藥物釋放體系仍然非常重要，希望通過此技術(shù)，能夠?qū)崿F(xiàn)水溶性藥物在組織或器官損傷部位維持穩(wěn)定可控的藥物釋放。
[0010]二.靜電紡絲作為一種新型、高效低耗的聚合物納米纖維制備方法，因工藝參數(shù)可調(diào)，制作過程可控，原料利用率高，操作過程簡(jiǎn)單方便，重現(xiàn)性好以及可批量生產(chǎn)等優(yōu)勢(shì)被廣泛應(yīng)用。其中，生物醫(yī)學(xué)方向越來越受研究人員的重視，而靜電紡絲在載藥方面的應(yīng)用更是深受青睞。現(xiàn)如今，已經(jīng)開發(fā)了很多種靜電紡絲技術(shù)，來制備裝載藥物的聚合物納米纖維膜，其中包括混紡、乳液靜電紡絲、同軸靜電紡絲、表面修飾靜電紡絲等。而針對(duì)水溶性藥物，主要采用的是乳液電紡、同軸電紡等來制備包裹水溶性藥物的聚合物微米纖維膜。同軸電紡能夠制備出具有芯殼結(jié)構(gòu)的電紡纖維，該結(jié)構(gòu)的纖維能夠很明顯的降低水溶性藥物的初期突釋情況，且能夠保持穩(wěn)定的釋放速率。但是，同軸電紡也存在著缺陷，噴絲設(shè)備要求復(fù)雜，紡絲過程不穩(wěn)定性也降低了這一技術(shù)的可操作性。乳液電紡作為制備攜載水溶性藥物電紡纖維膜的技術(shù)，其工藝更為簡(jiǎn)單，該技術(shù)首先通過乳化法制備載藥的乳液體系，然后加入聚合物形成靜電紡絲溶液并紡絲。這一技術(shù)所需要的紡絲設(shè)備簡(jiǎn)單，靜電紡過程也比同軸電紡要穩(wěn)定，但是也存在著無法避免的缺陷:藥物裝載效率低。因此，開發(fā)一項(xiàng)設(shè)備簡(jiǎn)單，制作過程方便，藥物裝載效率高的靜電紡絲技術(shù)來制備包裹水溶性藥物的纖維膜一直面臨著挑戰(zhàn)。
[0011]三.水溶膠是以水為分散介質(zhì)、透明或半透明、介于乳液和溶液之間的中間狀態(tài)交替分散液，其中分散的粒子可以是單個(gè)大分子，也可以是許多分子的聚集體。有較高的分散穩(wěn)定性。目前，水溶膠作為藥物載體有很多應(yīng)用，然而，我們發(fā)現(xiàn)，由于水溶膠體系內(nèi)水分子的自由進(jìn)出作用，單純的水溶膠體系中的藥物可以很快就溶解到水溶液中。不過，水溶膠體系可以有效抵制有機(jī)溶劑的進(jìn)入，從而將水溶膠作為一個(gè)隔離體系，保護(hù)內(nèi)部藥物的活性等。因此，基于水溶膠的優(yōu)點(diǎn)，有望通過靜電紡絲纖維包裹水溶膠可以有望實(shí)現(xiàn)靜電紡纖維攜載水溶性藥物。
[0012]四.透明質(zhì)酸(HA)是一種酸性粘多糖，1934年美國(guó)哥倫比亞大學(xué)眼科教授Meyer等首先從牛眼玻璃體中分離出該物質(zhì)。透明質(zhì)酸以其獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在機(jī)體內(nèi)顯示出多種重要的生理功能，如潤(rùn)滑關(guān)節(jié)，調(diào)節(jié)血管壁的通透性，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)，水電解質(zhì)擴(kuò)散及運(yùn)轉(zhuǎn)，促進(jìn)創(chuàng)傷愈合等。HA大量存在于細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)中，目前被廣泛運(yùn)用在載藥應(yīng)用中。將HA溶解在水中以后，由于HA分子鏈段互相交錯(cuò)纏繞，形成類似于三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，可以將藥物包裹束縛在里面，從而達(dá)到載藥給藥的效果。
[0013]有鑒于上述的缺陷，本設(shè)計(jì)人，積極加以研究創(chuàng)新，以期創(chuàng)設(shè)一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，使其更具有產(chǎn)業(yè)上的利用價(jià)值。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0014]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是提供一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架及其制備方法，該方法制備簡(jiǎn)單、操作方便，藥物裝載效率高，能夠?qū)崿F(xiàn)N0氣體的緩慢釋放。
[0015]本發(fā)明提出的一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架，包括內(nèi)層、中層和外層，所述外層套設(shè)在所述中層的外部，所述中層套設(shè)在所述內(nèi)層的外部，其特征在于:所述內(nèi)層由靜電紡絲纖維制成，所述靜電紡絲纖維由水溶膠和釋放NO的藥物共混而成。
[0016]進(jìn)一步的，所述釋放N0的藥物選自氮醇、亞硝基硫醇、硝普鹽、有機(jī)或無機(jī)亞硝酸鹽和硝酸鹽、亞硝胺、氮芥、聯(lián)氨中的一種或幾種。
[0017]本發(fā)明提出的一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，其特征在于:包括以下步驟:
[0018]步驟(1)制備水溶膠靜電紡絲溶液；
[0019]步驟(1.1)將水溶性高分子聚合物加到水中，攪拌使其全部溶解，制得水溶膠；
[0020]步驟(1.2)在水溶膠中加入釋放N0的藥物，并完全溶解，得到攜載釋放N0藥物的水溶膠；
[0021]步驟(1.3)向有機(jī)溶劑中加入乳化劑，再將步驟(2)制備的攜載釋聚放N0藥物的水溶膠緩慢滴加到其中，高速攪拌，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系；
[0022]步驟(1.4)向所述乳液體系中加入可降解材料，攪拌溶解完全后，再加入有機(jī)溶劑，持續(xù)攪拌，制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液；[〇〇23]步驟(2)制備微溶膠靜電紡絲纖維膜；
[0024]步驟(2.1)用連接了針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電性連接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，設(shè)定好電壓和微量注射栗的推進(jìn)速度，調(diào)整好注射器針頭與接收器之間的距離，進(jìn)行紡絲，制備出微溶膠靜電紡絲纖維膜，該微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層含有釋放N0氣體物質(zhì)的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。
[0025]進(jìn)一步的，步驟(1.1)中所述水溶性高分子聚合物與水的質(zhì)量比為1:99,所述水溶膠的濃度為lwt%，所述水溶性高分子聚合物選自透明質(zhì)酸、膠原、殼聚糖、纖維素、明膠、纖維蛋白原、絲素蛋白等天然高分子聚合物中的一種或幾種。[〇〇26]進(jìn)一步的，步驟(1.2)中，水溶膠與在加入水溶膠中的釋放N0的藥物的質(zhì)量比為 100:5?100:15，所述釋放N0的藥物選自氮醇、亞硝基硫醇、硝普鹽、有機(jī)或無機(jī)亞硝酸鹽和硝酸鹽、亞硝胺、氮芥、聯(lián)氨中的一種或幾種。[〇〇27]進(jìn)一步的，步驟(1.3)中，所述有機(jī)溶劑與所述乳化劑的質(zhì)量比為400:1，所述高速攪拌時(shí)間為10-20分鐘，所述乳化劑選自司盤80、氫氧化鈣、氫氧化鋅、硬脂酸鎂中的一種或幾種。
[0028]進(jìn)一步的，步驟(1.4)中，所述可降解材料與所述有機(jī)溶劑的質(zhì)量比為1:2,所述可降解材料選自聚羥基乙酸、聚乳酸、聚L-乳酸、聚羥基烷酸酯和聚-4-羥基丁酸中的一種或幾種。
[0029]進(jìn)一步的，步驟(1.3)和步驟(1.4)中，所述的有機(jī)溶劑選自氯苯、二氯苯、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、三乙醇胺中的一種或幾種。
[0030]進(jìn)一步的，步驟(2.1)中，所述電壓設(shè)定為10-15kv，所述微量注射栗推進(jìn)的速度設(shè)定為0.6-1.0mL/min，所述注射器針頭與接收器之間的距離為10-20cm。[〇〇31]進(jìn)一步的，步驟(2.1)中所述電壓設(shè)定為12kV，所述微量注射栗推進(jìn)的速度設(shè)定為 0.8mL/min，所述注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。
[0032]借由上述方案，本發(fā)明至少具有以下優(yōu)點(diǎn):該人工血管支架的中層和外層與現(xiàn)有的人工血管支架一樣，但是內(nèi)層是通過微溶膠靜電紡絲的技術(shù)，將釋放NO氣體的物質(zhì)，通過在水溶膠溶解，再?gòu)?fù)合到靜電紡絲體系中，構(gòu)建出裝載釋放NO氣體的水溶性物質(zhì)到纖維內(nèi)， 實(shí)現(xiàn)NO氣體的緩慢釋放，釋放時(shí)間可達(dá)20天-30天。可通過微透析結(jié)合分光光度法進(jìn)行檢測(cè)。
[0033]本發(fā)明方法利用油包水乳液體系是將連續(xù)相為油相，分散相為水相的特性，將能夠釋放N0氣體的物質(zhì)均勻分散的包裹在水溶膠的靜電紡絲溶液中，然后通過微溶膠靜電紡絲的技術(shù)構(gòu)建納米纖維小口徑血管支架，從而制備出內(nèi)層含有釋放N0物質(zhì)的微溶膠靜電紡絲纖維膜，進(jìn)而得到內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架，該方法制備簡(jiǎn)單、操作方便， 藥物裝載效率高，能夠?qū)崿F(xiàn)N0氣體的緩慢釋放。[〇〇34]上述說明僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段， 并可依照說明書的內(nèi)容予以實(shí)施，以下以本發(fā)明的較佳實(shí)施例并配合附圖詳細(xì)說明如后?！靖綀D說明】
[0035]圖1為本發(fā)明水溶膠靜電紡絲溶液的電鏡圖；[〇〇36]圖2為本發(fā)明內(nèi)層含有釋放N0物質(zhì)的微溶膠靜電紡絲纖維膜的電鏡圖；[〇〇37]圖3為本發(fā)明內(nèi)層含有釋放N0物質(zhì)的微溶膠靜電紡絲纖維膜單個(gè)纖維的電鏡圖； [〇〇38]圖4為本發(fā)明內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架制備流程示意圖；
[0039]圖5為本發(fā)明內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的結(jié)構(gòu)示意圖?！揪唧w實(shí)施方式】
[0040]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0041]實(shí)施例一:[〇〇42]首先，將0.lg透明質(zhì)酸(HA)加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出 lwt %濃度的水溶膠。取0.lg的lwt %水溶膠，在其中加入0.005g的氮醇，并使其完全溶解。 [〇〇43]接著，先在4g二氯甲烷(DCM)中加入0.0lg的司盤80(Span-80)，再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘， 從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。[〇〇44]然后在此乳液體系中加入l.0g的聚L-乳酸，攪拌溶解完全后再加入2g的二甲基甲酰胺(DMF)，持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。
[0045]靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0046]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。
[0047]實(shí)施例二:所述乳化劑選自司盤80、氫氧化鈣、氫氧化鋅、硬脂酸鎂中的一種或幾種。氯苯、二氯苯、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、三乙醇胺中的一種或幾種。
[0048]首先，將0.lg絲素蛋白加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出lwt%濃度的水溶膠。取〇.lg的lwt %水溶膠，在其中加入0.010g的氮醇，并使其完全溶解。
[0049]接著，先在4g氯苯中加入0.0lg的氫氧化鈣，再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。
[0050]然后在此乳液體系中加入1.0g的聚羥基乙酸，攪拌溶解完全后再加入2g的二氯甲烷，持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。
[0051]靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0052]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。[〇〇53] 實(shí)施例三:[〇〇54]首先，將0.lg膠原加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出lwt %濃度的水溶膠。取〇.lg的lwt %水溶膠，在其中加入0.015g的氮醇，并使其完全溶解。[〇〇55]接著，先在4g二氯苯中加入0.0lg的氫氧化鋅，再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。[〇〇56]然后在此乳液體系中加入l.0g的聚乳酸，攪拌溶解完全后再加入2g的三乙醇胺， 持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。[〇〇57]靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0058]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。
[0059] 實(shí)施例四:
[0060]首先，將0.lg纖維素加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出lwt%濃度的水溶膠。取〇.lg的lwt %水溶膠，在其中加入0.005g的亞硝基硫醇，并使其完全溶解。
[0061]接著，先在4g二甲基甲酰胺中加入0.0lg的硬脂酸鎂，再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。[〇〇62]然后在此乳液體系中加入l.0g的聚羥基烷酸酯，攪拌溶解完全后再加入2g的氯苯，持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。
[0063] 靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0064]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。
[0065]實(shí)施例五:[〇〇66]首先，將0.lg明膠加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出lwt %濃度的水溶膠。取0.lg的lwt %水溶膠，在其中加入0.010g的亞硝基硫醇，并使其完全溶解。
[0067]接著，先在4g三乙醇胺中加入0.01 g的Span-80，再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。[〇〇68]然后在此乳液體系中加入l.0g的聚-4-羥基丁酸，攪拌溶解完全后再加入2g的氯苯，持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。
[0069]靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0070]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。[〇〇71]實(shí)施例六:[〇〇72]首先，將0.lg殼聚糖加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出lwt%濃度的水溶膠。取〇.1 g的lwt %水溶膠，在其中加入0.015g的亞硝基硫醇，并使其完全溶解。 [0〇73]接著，先在4g氯苯中加入0.0 lg的Span-80，再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。[〇〇74]然后在此乳液體系中加入1.0g的聚L-乳酸，攪拌溶解完全后再加入2g的DMF，持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。
[0075]靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0076]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。[〇〇77] 實(shí)施例七:[〇〇78]首先，將0.lg明膠加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出lwt %濃度的水溶膠。取〇.lg的lwt %水溶膠，在其中加入0.015g的硝普鹽，并使其完全溶解。[〇〇79]接著，先在4g二氯苯中加入0.0lg的Span-80,再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。
[0080]然后在此乳液體系中加入l.0g的聚羥基乙酸，攪拌溶解完全后再加入2g的DMF，持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。
[0081]靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0082]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。
[0083]實(shí)施例八:[〇〇84]首先，將0.lg膠原加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出lwt %濃度的水溶膠。取〇.lg的lwt%水溶膠，在其中加入0.015g的有機(jī)或無機(jī)亞硝酸鹽，并使其完全溶解。[〇〇85]接著，先在4gDCM中加入0.0lg的Span-80,再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。[〇〇86]然后在此乳液體系中加入l.0g的聚乳酸，攪拌溶解完全后再加入2g的DMF，持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。
[0087]靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0088]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。
[0089]實(shí)施例九:
[0090]首先，將0.lg明膠加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出lwt %濃度的水溶膠。取〇.lg的lwt %水溶膠，在其中加入0.015g的亞硝胺，并使其完全溶解。
[0091]接著，先在4g二甲基甲酰胺中加入0.0lg的Span-80,再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。[〇〇92]然后在此乳液體系中加入l.0g的聚羥基烷酸酯，攪拌溶解完全后再加入2g的DMF， 持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。
[0093]靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0094]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放NO氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。
[0095] 實(shí)施例十:[0〇96]首先，將0.lg纖維蛋白原加到9.9g的蒸餾水中，攪拌使其全部溶解，制備出lwt% 濃度的水溶膠。取〇.1 g的lwt %水溶膠，在其中加入0.015g的氮芥，并使其完全溶解。[〇〇97]接著，先在4g三乙醇胺中加入0.01 g的Span-80，再將制備好的攜載釋放N0物質(zhì)的水溶膠緩慢的滴加到其中，并在室溫下用磁力攪拌器上高速攪拌約20分鐘，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/0)乳液體系。[〇〇98]然后在此乳液體系中加入l.0g的聚-4-羥基丁酸，攪拌溶解完全后再加入2g的 DMF，持續(xù)攪拌，最后制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液。
[0099]靜電紡絲的過程在室溫下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括:高壓直流電源、精確微量注射栗， 電動(dòng)攪拌機(jī)。
[0100]用連接了內(nèi)徑為9mm針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電壓接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，開始紡絲，其中使用的電壓為12kV，微量注射栗推進(jìn)的速度為0.8mL/min，注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。制備出的微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架。
[0101]本發(fā)明方法利用油包水乳液體系是將連續(xù)相為油相，分散相為水相的特性，將能夠釋放N0氣體的物質(zhì)均勻分散的包裹在水溶膠的靜電紡絲溶液中，然后通過微溶膠靜電紡絲的技術(shù)構(gòu)建納米纖維小口徑血管支架，從而制備出內(nèi)層含有釋放N0物質(zhì)的微溶膠靜電紡絲纖維膜，進(jìn)而得到內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架，該方法制備簡(jiǎn)單、操作方便， 藥物裝載效率高，能夠?qū)崿F(xiàn)N0氣體的緩慢釋放。
[0102]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，并不用于限制本發(fā)明，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和變型，這些改進(jìn)和變型也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種內(nèi)層釋放NO氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架，包括內(nèi)層、中層和外層，所述外層套設(shè) 在所述中層的外部，所述中層套設(shè)在所述內(nèi)層的外部，其特征在于:所述內(nèi)層由靜電紡絲纖 維制成，所述靜電紡絲纖維由水溶膠和釋放NO的藥物共混而成。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種內(nèi)層釋放NO氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架，其特征在于:所 述釋放NO的藥物選自氮醇、亞硝基硫醇、硝普鹽、有機(jī)或無機(jī)亞硝酸鹽和硝酸鹽、亞硝胺、氮 芥、聯(lián)氨中的一種或幾種。3.—種內(nèi)層釋放NO氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，其特征在于:包括以下步 驟:步驟(1)制備水溶膠靜電紡絲溶液；步驟(1.1)將水溶性高分子聚合物加到水中，攪拌使其全部溶解，制得水溶膠；步驟(1.2)在水溶膠中加入釋放NO的藥物，并完全溶解，得到攜載釋放NO藥物的水溶 膠；步驟(1.3)向有機(jī)溶劑中加入乳化劑，再將步驟(2)制備的攜載釋聚放NO藥物的水溶膠 緩慢滴加到其中，高速攪拌，從而制備出相對(duì)均一的并包含載藥的水溶膠顆粒的油包水(W/ 〇)乳液體系；步驟(1.4)向所述乳液體系中加入可降解材料，攪拌溶解完全后，再加入有機(jī)溶劑，持 續(xù)攪拌，制備出均一穩(wěn)定的水溶膠靜電紡絲溶液；步驟(2)制備微溶膠靜電紡絲纖維膜；步驟(2.1)用連接了針頭的注射器吸入制備好的靜電紡絲溶液，然后放到微量注射栗 上，針頭處接上高壓電源裝置，另外一端電性連接在包裹了鋁箱紙的滾筒接收器上，設(shè)定好 電壓和微量注射栗的推進(jìn)速度，調(diào)整好注射器針頭與接收器之間的距離，進(jìn)行紡絲，制備出 微溶膠靜電紡絲纖維膜，該微溶膠靜電紡絲纖維膜即為內(nèi)層含有釋放N0氣體物質(zhì)的多結(jié)構(gòu) 人工血管支架。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，其 特征在于:步驟(1.1)中所述水溶性高分子聚合物與水的質(zhì)量比為1:99,所述水溶膠的濃度 為lwt%，所述水溶性高分子聚合物選自透明質(zhì)酸、膠原、殼聚糖、纖維素、明膠、纖維蛋白 原、絲素蛋白等天然高分子聚合物中的一種或幾種。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，其 特征在于:步驟(1.2)中，水溶膠與在加入水溶膠中的釋放N0的藥物的質(zhì)量比為100:5? 100:15，所述釋放N0的藥物選自氮醇、亞硝基硫醇、硝普鹽、有機(jī)或無機(jī)亞硝酸鹽和硝酸鹽、 亞硝胺、氮芥、聯(lián)氨中的一種或幾種。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，其 特征在于:步驟(1.3)中，所述有機(jī)溶劑與所述乳化劑的質(zhì)量比為400:1，所述高速攪拌時(shí)間 為10-20分鐘，所述乳化劑選自司盤80、氫氧化鈣、氫氧化鋅、硬脂酸鎂中的一種或幾種。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，其 特征在于:步驟(1.4)中，所述可降解材料與所述有機(jī)溶劑的質(zhì)量比為1:2，所述可降解材料 選自聚羥基乙酸、聚乳酸、聚L-乳酸、聚羥基烷酸酯和聚-4-羥基丁酸中的一種或幾種。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種內(nèi)層釋放N0氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，其 特征在于:步驟(1.3)和步驟(1.4)中，所述的有機(jī)溶劑選自氯苯、二氯苯、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、三乙醇胺中的一種或幾種。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種內(nèi)層釋放NO氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，其 特征在于:步驟(2.1)中，所述電壓設(shè)定為10-15kV，所述微量注射栗推進(jìn)的速度設(shè)定為0.6-1.0mL/min，所述注射器針頭與接收器之間的距離為10-20cm。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種內(nèi)層釋放NO氣體的多結(jié)構(gòu)人工血管支架的制備方法，其 特征在于:步驟(2.1)中，所述電壓設(shè)定為12kV，所述微量注射栗推進(jìn)的速度設(shè)定為0.8mL/ min，所述注射器針頭與接收器之間的距離為15cm。
【文檔編號(hào)】A61L27/50GK105963778SQ201610397559
【公開日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2016年6月7日
【發(fā)明人】倪慶, 吳巍, 趙昕, 崔文國(guó), 戴勇, 萬(wàn)麗萍
【申請(qǐng)人】揚(yáng)州市第人民醫(yī)院, 揚(yáng)州市第一人民醫(yī)院