棕櫚酸在制備治療結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明屬于化合物新用途技術(shù)領(lǐng)域。涉及棕櫚酸(Palmitic Acid)的藥物新用途，具體涉及棕櫚酸在制備治療結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過體外CCK-8抗腫瘤活性評價試驗，結(jié)果顯示，所述的棕櫚酸對不同轉(zhuǎn)移潛能的人結(jié)腸癌細胞株SW-480，SW-620的生長具有顯著的抑制作用，尤其對高轉(zhuǎn)移潛能的SW-620的運動和遷移能力具有顯著的抑制作用。進一步，所述的棕櫚酸能用于制備抗結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移藥物，且具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。
【專利說明】
牛示桐目g在制備治療結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于化合物新用途技術(shù)領(lǐng)域。涉及棕櫚酸（Palmitic Acid)的藥物新用途， 具體涉及棕櫚酸（Palmitic Acid)在制備治療結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 報道公開了結(jié)腸癌是一種惡性腫瘤，據(jù)2012年數(shù)據(jù)顯示：美國估計有143460例 新發(fā)結(jié)腸癌病例，且有51690例死亡病例。在歐美，結(jié)腸癌已經(jīng)成為居肺癌及乳腺癌之后第 3位引起死亡的腫瘤相關(guān)性疾病。而中國抗癌協(xié)會結(jié)腸癌專業(yè)委員會（CACA)數(shù)據(jù)顯示：結(jié) 直腸癌的發(fā)病率由1999年的20. 4例/10萬人增長到2009年的36. 2例/10萬人，平均每 年增長6. 2%。中國2007年的發(fā)病率為29. 62例/10萬，死亡率為14. 15例/10萬。更值 得注意的是，迄今為止其發(fā)病率和死亡率仍然呈上升趨勢。業(yè)內(nèi)共識目前攻克癌癥有兩大 目標：一是"不生癌"，即研究正常細胞變成癌細胞的原因和機制，并加以預(yù)防；二是"讓癌 不轉(zhuǎn)移"，轉(zhuǎn)移是影響病人生存期的首要因素，約60%以上的惡性腫瘤患者初次診斷時已有 轉(zhuǎn)移。如能解決這一問題，癌癥即與良性腫瘤一樣，可得到治愈。有研究者將"癌轉(zhuǎn)移"列 為本世紀生命科學(xué)迫切要解決的重大問題之一；轉(zhuǎn)移同樣是結(jié)腸癌低治愈高死亡的主要原 因，然而有關(guān)領(lǐng)域?qū)Y(jié)腸癌轉(zhuǎn)移過程中磷脂代謝的變化及作用研究現(xiàn)在還基本空白。
[0003] 已知脂肪酸具有廣泛的代謝功能，不僅可以以自由脂肪酸的形式存在，還可以構(gòu) 成多種復(fù)雜的脂類化合物。在人體中，脂肪酸可以構(gòu)成三酰甘油儲存能量，可以構(gòu)成磷脂成 為細胞膜的磷脂雙分子層，可以作為第二信使（DAG、PIP2、LPA等）參與信號傳導(dǎo)，也可以作 為核受體的配體影響基因的表達。據(jù)報道，很多疾病都與脂代謝紊亂有關(guān)，如：糖尿病、肥胖 病、老年癡呆癥、癌癥等，因此，脂肪酸含量的變化對人體健康具有重要的影響，生命體中脂 類物質(zhì)及其代謝過程的研究成為疾病發(fā)病機理和診斷治療以及醫(yī)藥研發(fā)過程的重點課題 之一。
[0004] 研究顯示，細胞膜的脂質(zhì)組成和流動性對維持細胞拓撲結(jié)構(gòu)、運動能力、膜聯(lián)蛋白 活性以及保持細胞正常的生理功能具有重要的影響，
[0005] 本發(fā)明基于對結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移細胞系進行的脂組學(xué)篩查研究，擬提供棕櫚酸 (Palmitic Acid)的藥物新用途，具體涉及棕櫚酸（Palmitic Acid)在制備治療結(jié)腸癌和抗 結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用。
[0006] 與本申請有關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)有：
[0007] [1]Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Cancer statistics,2013. CA Cancer J Clin 2013;63 :11-30.
[0008] [2]Jemal A,Bray F,Center MM,et al. Global cancer statistics. CA ：a cancer journal for clinicians 2011 ；61 (2) :69-90.
[0009] [3]Desantis C，naishadham D，Jemal A. Cancer Statistics for African American,2013. CA Cancer J Clin 201363:151-166.
[0010] [4]Corley, Douglas A., Christopher D.Adenoma Detection Rate and Risk of Colorectal Cancer and Death.New England Journal of Medicine 2014(14)： 1298-1306.
[0011] [5]Hirsch HA，Iliopoulos D，Joshi A，et al. A transcriptional signature and common gene networks link cancer with lipid metabolism and diverse human diseases. Cancer cell 2010 ;17(4) :348_36L
[0012] [6]Nguyen HP，Schug KA. The advantages of ESI-MS detection in conjunction with HILIC mode separations fundamentals and applications. Journal of separation science 2008 ;31 (9) :1465-1480.
[0013] [7]Falconer J，Ross J，F(xiàn)earon K，et aL Effect of eicosapentaenoic acid and other fatty acids on the growth in vitro of human pancreatic cancer cell lines. British journal of cancer 1994 ；69 (5) :826-832.
[0014] [8]Anneken DJ，Both S，Christoph R，et al. Fatty Acids. Ullmann ' s Encyclopedia of Industrial Chemistry 2006 ; Pub Iished Online，DOI : 10. 1002/14356007. alO-245. pub2.

【發(fā)明內(nèi)容】

[0015] 本發(fā)明的目的在于基于目前脂類物質(zhì)及其代謝對生命體疾病發(fā)病的重要影響，尤 其針對結(jié)腸癌低治愈高死亡的現(xiàn)狀，提供棕櫚酸（Palmitic Acid)的藥物新用途，具體涉及 棕櫚酸（Palmitic Acid)在制備治療結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明基于高通量、高分辨率、高精度的脂質(zhì)分離鑒定技術(shù)與生物信息學(xué)工具結(jié) 合，全景式地展現(xiàn)結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移潛能遞增的情況下脂質(zhì)表達譜差異；基于此，進一步對結(jié)腸癌 轉(zhuǎn)移細胞系進行脂組學(xué)篩查，結(jié)果顯示，含棕櫚酸（Palmitic Acid)的磷脂在結(jié)腸癌細胞和 轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌細胞中的表達呈現(xiàn)降低趨勢，證實，可以通過外加棕櫚酸（Palmitic Acid)殺 死腫瘤細胞，抑制腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。
[0017] 具體的，本發(fā)明通過體外CCK-8抗腫瘤活性評價試驗，結(jié)果顯示，棕櫚酸 (Palmitic Acid)對不同轉(zhuǎn)移潛能的人結(jié)腸癌細胞株SW-480，SW-620的生長具有顯著的抑 制作用；棕櫚酸（Palmitic Acid)尤其對具有高轉(zhuǎn)移潛能的SW-620的運動和迀移能力具 有顯著的抑制作用，因此，棕櫚酸（Palmitic Acid)能用于制備抗結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移藥 物。
[0018] 更具體的，本發(fā)明提供了化合物棕櫚酸（Palmitic Acid)的新用途，尤其是棕櫚酸 (Palmitic Acid)在制備治療結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移藥物中的用途。
[0019] 本發(fā)明所述化合物棕櫚酸（Palmitic AcicOcas號：57-10-3,分子式：C16H3202， 結(jié)構(gòu)如式（I)所示：
[0020]
[0021] 本發(fā)明中，采用shotgun技術(shù)對兩種不同轉(zhuǎn)移潛能的人結(jié)腸癌細胞系SW_480(低 轉(zhuǎn)移潛能）、SW-620(高轉(zhuǎn)移潛能）進行脂質(zhì)組成分析，結(jié)果顯示，含棕櫚酸（Palmitic Acid)的磷脂在高轉(zhuǎn)移潛能細胞系SW0620相比低轉(zhuǎn)移潛能細胞系SW-480中含量有降低；
[0022] 本發(fā)明中，通過體外CCK-8抗腫瘤活性評價試驗，結(jié)果表明，棕櫚酸（Palmitic Acid)對人結(jié)腸癌細胞株SW-480，SW-620的生長具有顯著的抑制作用，進一步，所述的棕櫚 酸（Palmitic Acid)能用于制備抗結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移藥物，且具有良好的開發(fā)應(yīng)用前 景。
[0023] 本發(fā)明的優(yōu)點在于：
[0024] 1，本發(fā)明首次公開了棕櫚酸（Palmitic Acid)在制備治療結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移 藥物中的新用途；迄今為止，尚未見有棕櫚酸（Palmitic Acid)具有抗結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌 轉(zhuǎn)移的活性的研究報道；
[0025] 2,本發(fā)明來自于對結(jié)腸癌細胞系進行的Iipidomics篩選，不存在由其它化合物 給出任何提示的可能，同時所述的棕櫚酸用于結(jié)腸癌的治療具有顯著的效果。
[0026] 為了便于理解，以下將通過具體的附圖和實施例對本發(fā)明進行詳細地描述。需要 特別指出的是，具體實例和附圖僅是為了說明，顯然本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以根據(jù)本文 說明，在本發(fā)明的范圍內(nèi)對本發(fā)明做出各種各樣的修正和改變，這些修正和改變也納入本 發(fā)明的范圍內(nèi)。另外，本發(fā)明引用了公開文獻，這些文獻是為了更清楚地描述本發(fā)明，它們 的全文內(nèi)容均納入本文進行參考，就好像它們的全文已經(jīng)在本文中重復(fù)敘述過一樣。
【附圖說明】
[0027] 圖1 :本發(fā)明的SW-480和SW-620細胞在含不同濃度棕櫚酸（Palmitic Acid)的 培養(yǎng)基培養(yǎng)下的增殖曲線。
【具體實施方式】
[0028] 本發(fā)明所涉及的化合物棕櫚酸（Palmitic Acid)的制備方法參見現(xiàn)有技術(shù)文獻8。
[0029] 實施例1 :制備化合物棕櫚酸（Palmitic Acid)片劑或膠囊劑
[0030] 取20克化合物棕櫚酸（Palmitic Acid)，加入制備片劑的常規(guī)輔料180克，混勻， 常規(guī)壓片機制成1000片；或，
[0031] 取20克化合物棕櫚酸（Palmitic Acid)，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉180 克，混勻，裝膠囊制成1000粒；
[0032] 采用CCK-8法評價棕櫚酸（Palmitic Acid)對人結(jié)腸癌細胞株的生長抑制作用及 其藥物活性：
[0033] 取對數(shù)生長期的待測細胞SW-480和SW620(細胞來源于復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院）， 接種于96孔板中，接種細胞濃度為2000個細胞/孔，處理組加入不同體積棕櫚酸（Palmkic Acid)稀釋液，使終濃度分別為0 μ M，50 μ M，100 μ M，200 μ M和300 μ M ;CCK-8法分析不同 時間點（ld、3d、5d、7d)的細胞活力，每個時間點分別檢測6個復(fù)孔，每孔待測樣品中加入 10 μ L CCK-8細胞增殖與活性檢測試劑（日本同仁化學(xué)公司產(chǎn)品），CCK-8試劑與待測細胞 在培養(yǎng)箱內(nèi)共孵育2h，然后用酶標儀（Thermo公司產(chǎn)品）進行檢測，激發(fā)光波長為450nm， 發(fā)射光波長為630nm，96孔板讀板，記錄A 45。吸光值，A 63。為校正值；吸光值測定后繪制細胞 增殖曲線，比較不同實驗組增殖曲線的變化；
[0034] 結(jié)果顯示：隨著培養(yǎng)基中棕櫚酸（Palmitic Acid)濃度的依次增加，SW-480 和SW-620的生長速度逐漸減慢，抑制效應(yīng)在SW-620細胞系中更為強烈，補充棕櫚酸 (PalmiticAcid)可以抑制結(jié)腸癌細胞的增殖能力（如圖1所示）；
[0035] 上述實驗結(jié)果表明，棕櫚酸（Palmitic Acid)對人結(jié)腸癌細胞株SW-480, SW-620 的生長具有顯著的抑制作用；特別是對于高轉(zhuǎn)移潛能的SW-620的運動和迀移能力都具有 顯著的抑制作用；因此，所述的棕櫚酸（Palmitic Acid)能用于制備抗結(jié)腸癌和抗結(jié)腸癌 轉(zhuǎn)移的藥物，其具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。
【主權(quán)項】
1. 蹤桐酸巧almitic Acid)在制備治療結(jié)腸癌藥物中的用途； 所述化合物蹤桐酸cas號：57-10-3,分子式：C16H3202,結(jié)構(gòu)如式（I)所不： 、i/ O2. 按權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的棟桐酸（Palmitic Acid)用于制備抗 結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移的藥物。3. 按權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的棟桐酸抑制人結(jié)腸癌細胞系SW-480 或SW-620的生長，運動或遷移能力。
【文檔編號】A61P35/04GK105982883SQ201510087609
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年2月17日
【發(fā)明人】申華莉, 王真昕, 林靈, 楊芃原
【申請人】復(fù)旦大學(xué)