一種包含脂溶性茶多酚的化妝品和/或護(hù)膚品的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種脂溶性茶多酚，該脂溶性茶多酚中總茶多酚的含量為60％?95％。本發(fā)明還公開(kāi)了該脂溶性茶多酚的制備方法，以及該脂溶性茶多酚在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用，該脂溶性茶多酚以綠茶為原料，以極性或非極性溶劑為溶媒，在一定溫度條件下多次提取制備得到水溶性茶多酚，然后再向水溶性茶多酚?；玫健１景l(fā)明提供的脂溶性茶多酚，具有優(yōu)良的抗衰老能力，能夠促進(jìn)膠原蛋白的分泌，還可以清除皮膚細(xì)胞中的自由基。另外，本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚還具有優(yōu)良的保濕和美白作用，可以作為添加劑加入到化妝品中。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種包含脂溶性茶多酚的化妝品和/或護(hù)膚品
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種化妝品和/或護(hù)膚品，尤其涉及一種包含脂溶 性茶多酚的化妝品和/或護(hù)膚品。
【背景技術(shù)】
[0002] 衰老是指機(jī)體各器官功能普遍的、逐漸降低的過(guò)程，隨著年齡的增長(zhǎng)，衰老不可避 免，但是，良好的生活習(xí)慣和保健措施可以有效地延緩衰老。目前市場(chǎng)上抗衰老的產(chǎn)品也層 出不窮。
[0003] 皮膚老化最主要的表現(xiàn)是產(chǎn)生皺紋，皮膚老化主要是由于年齡的增長(zhǎng)或外界因素 的干擾，真皮層細(xì)胞分泌的I型膠原蛋白減少或膠原水解酶類(lèi)增加，細(xì)胞缺乏膠原蛋白的支 撐，角質(zhì)層和表皮層發(fā)生內(nèi)陷而形成皺紋。目前一般認(rèn)為，因自由基攻擊生物膜多不飽和脂 肪酸、DNA、蛋白質(zhì)和其他生物大分子而引發(fā)的氧化損傷，是導(dǎo)致機(jī)體老化及許多老年疾病 的主要因素。
[0004] 遠(yuǎn)古時(shí)代起，化妝品配方已有本草成分。隨著科學(xué)發(fā)展，目前已有很多新型技術(shù)可 用于治療皮膚老化。然而，天然本草產(chǎn)品因其高效低毒等特點(diǎn)仍然具有很大的吸引力和廣 闊的市場(chǎng)。研究已證實(shí)越來(lái)越多的本草化學(xué)物質(zhì)對(duì)皮膚具有益處，很多提取物和化合物具 有顯著的治療皮膚老化的潛力，并已初步闡明其機(jī)制。
[0005] 綠茶(Green Tea)，是中國(guó)的主要茶類(lèi)之一，是指采取茶樹(shù)的新葉或芽，未經(jīng)發(fā)酵， 經(jīng)殺青、整形、烘干等工藝而制作的飲品。常飲綠茶能防癌，降脂和減肥，對(duì)吸煙者也可減輕 其受到的尼古丁傷害。
[0000]綠茶中含有的茶多?KTea polyphenols)是一種天然抗氧化劑，對(duì)防衰老、防癌、 抗癌、殺菌、消炎等具有特殊效果，但是由于茶多酚易溶于水、乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯等 溶劑，難溶于油脂的特性使其應(yīng)用受到了限制。目前解決茶多酚難溶于油脂的方法主要有 溶劑法、乳化法和分子修飾法，但是現(xiàn)有技術(shù)制備的產(chǎn)品要不脂溶性不穩(wěn)定，要不制備方法 復(fù)雜，且產(chǎn)品純度不高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供一種脂溶性茶多酚，并研究了該脂溶性茶 多酚在化妝品領(lǐng)域中的應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明的第一個(gè)方面在于提供一種日化用品，所述日化用品包括脂溶性茶多酚， 優(yōu)選為所述化妝品和/或護(hù)膚品中，還可以包括營(yíng)養(yǎng)性添加劑。
[0009] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述化妝品和/或護(hù)膚品中，所述脂溶性茶多酚的 含量為0.001%-60%，如0.003%，50%，優(yōu)選為0.005%-40%，如20%、30%等。
[0010] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述脂溶性茶多酚的通式為式(I):
[0011
[0012 ] 其中：Ri、R3、R4、R5獨(dú)立地，為Η、C6-&4脂肪酰基中的任意一種；
[0013 ] RAH、-OH、C6-&4脂肪?；械娜我庖环N；
[0014] R!、R2、R3、R4、Rs中至少有一個(gè)為C6-&4脂肪?；?。
[0015] 本發(fā)明的第二個(gè)方面在于提供上述任意一種脂溶性茶多酚的應(yīng)用。
[0016] 所述脂溶性茶多酚優(yōu)選為施用于皮膚外表面，更優(yōu)選為應(yīng)用于制備涂覆于皮膚外 表面的制品。
[0017] 其中，本發(fā)明所述脂溶性茶多酚應(yīng)用于制備日化用品，優(yōu)選為應(yīng)用于制備化妝品 和/或護(hù)膚品。
[0018] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述脂溶性茶多酚包括通式(I):
[0019；
[0020] 其中：Ri、R3、R4、Μ蟲(chóng)立為Η、C6-&4脂肪酰中的任意一種；
[0021] 1?2為!1、-0!1、(：6-(：14脂肪酰中的任意一種；
[0022] 、R2、R3、R4、Rs中至少有一個(gè)為C6-&4脂肪?；?。
[0023]本發(fā)明的第三個(gè)方面在于提供一種脂溶性茶多酚，所述脂溶性茶多酚包括通式 (I)：
[0024]
[0025] 其中：Ri、R3、R4、Μ蟲(chóng)立為Η、Cs-Cw脂肪酰中的任意一種；
[0026] RAH、-OH、C6-&4脂肪酰中的任意一種；
[0027]辦、1?2、1?3、1?4、1^中至少有一個(gè)為〇5-&4脂肪?；?br>[0028] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述脂溶性茶多酚中總茶多酚的含量為60%-95%，如65%、90%，優(yōu)選為70%-85%，如75%、80%等。
[0029] 本發(fā)明的第四個(gè)方面在于提供一種脂溶性茶多酚的制備方法，所述制備方法包 括：
[0030] 向綠茶中加入5-20體積倍率的溶媒提取，得到提取液；
[0031 ]純化制備的所述提取液，并減壓濃縮得到濃縮液；
[0032 ]皂化所述濃縮液，過(guò)濾、干燥，得到中間產(chǎn)物；
[0033]?；虚g產(chǎn)物，向?；瘎┲芯徛尤胨鲋虚g產(chǎn)物，反應(yīng)一定時(shí)間，得到所述脂溶 性茶多酚。
[0034]作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述溶媒為水、乙醇、甲醇、乙醚、超臨界二氧化碳 中的任意一種或幾種組合。
[0035] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述提取的次數(shù)至少為2次，優(yōu)選為3-5次，提取結(jié) 束后合并每次的提取液，得到混合提取液。
[0036] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述皂化過(guò)程中，加入的皂化劑可以為無(wú)機(jī)堿、有 機(jī)堿中的任意一種或幾種組合，如氨水、尿素、乙醇胺等，優(yōu)選為無(wú)機(jī)堿，如氫氧化鈉的水溶 液或乙醇溶液、氫氧化鉀的水溶液或醇溶液、氨水等。
[0037] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述?；瘎┑闹苽湓噭┌轸人帷Ⅳ人狒?、酰氯 等中的任意一種或幾種組合，如乙酸、乙二酸、苯甲酸、醋酸酐等，優(yōu)選為酰氯，如五氯化磷、 三氯化磷、氧氯化磷、亞硫酰氯等。
[0038] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述?；瘎┰谟袡C(jī)堿條件下，以酰氯和C6-C1Q脂肪 酸制備。
[0039] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述脂肪酸優(yōu)選為C6-C1Q飽和脂肪酸，更優(yōu)選為直 鏈飽和脂肪酸。
[0040] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述?；^(guò)程的溫度條件為20°C-50°C。
[0041 ]作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，在所述?；^(guò)程之后還包括萃取純化工藝，所述 萃取純化工藝的萃取劑可以為乙酸乙酯、磷酸三丁酯、苯、四氯化碳等中的任意一種或幾種 組合。
[0042]作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，?；鲋虚g產(chǎn)物后，還可以包括濃縮反應(yīng)液、干 燥濃縮后的反應(yīng)液中的任意一種或其組合。
[0043]作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，所述濃縮反應(yīng)液的條件為5-20kPa、20_50°C旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā) 10_50min〇
[0044] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，干燥濃縮后的反應(yīng)液的條件為噴霧干燥，所述噴 霧干燥的條件為:60-120MPa壓力下，將濃縮液噴射成100-400μπι的微粒，將微粒通過(guò)50-90 。(:的熱空氣干燥5-30s。
[0045] 本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚，具有優(yōu)良的抗衰老能力，能夠促進(jìn)膠原蛋白的分泌， 還可以清除皮膚細(xì)胞中的自由基。另外，本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚還具有優(yōu)良的保濕性 能，可以作為添加劑加入到化妝品中。
【附圖說(shuō)明】
[0046] 圖1為自然狀態(tài)下脂溶性茶多酚對(duì)I型膠原蛋白分泌的影響；
[0047] 圖2為過(guò)氧化氫對(duì)細(xì)胞存活率的影響；
[0048] 圖3為脂溶性茶多酚對(duì)過(guò)氧化氫損傷的HDF細(xì)胞存活率的影響；
[0049] 圖4為脂溶性茶多酚對(duì)過(guò)氧化氫損傷的HDF細(xì)胞ΜΜΡ-1含量的影響；
[0050] 圖5為脂溶性茶多酚對(duì)過(guò)氧化氫損傷的HDF細(xì)胞MDA含量的影響；
[00511圖6為脂溶性茶多酚對(duì)DPPH清除率的影響；
[0052] 圖7為脂溶性茶多酚對(duì)L0R含量的影響；
[0053] 圖8為脂溶性茶多酚對(duì)絡(luò)氨酸酶的抑制率。
【具體實(shí)施方式】
[0054] 脂溶性茶多酚的制備 [0055] 實(shí)施例一
[0056]將新采摘的綠茶葉，清水清洗2次，清洗時(shí)向清水中注入濃度為lOOppm的二氧化 氯，對(duì)綠茶葉清洗、殺菌，并使用65°C熱風(fēng)干燥清洗過(guò)的綠茶葉，得到含水量在5%以下的干 綠茶葉，并將制備的干綠茶葉粉碎，過(guò)60目篩，備用。
[0057]取粉碎后的干綠茶10kg，并向其中加入10倍體積的水，在80 °C、1.0 IMPa壓力下提 取2h，提取結(jié)束后再加入8倍體積的60%乙醇水溶液，在80°C、1.01MPa壓力下進(jìn)行二次提 取，提取2h，提取結(jié)束后，合并兩次提取液，將混合后的提取液在D-101型大孔吸附樹(shù)脂中、 25 °C吸附至飽和，然后分別用無(wú)水乙醇、60 %乙醇水溶液、50 %乙醇水溶液、30 %乙醇水溶 液洗脫，洗脫液的流速為3BV/h，常溫常壓洗脫大孔吸附樹(shù)脂，洗脫結(jié)束后，在5kPa、微沸狀 態(tài)下濃縮洗脫液，去除其中的乙醇，至6kg，向濃縮液中加入1.5L 0. lmol/L的氫氧化鈉水溶 液，在90 °C、1.0 IMPa反應(yīng)2h，過(guò)濾，得到濾餅，將濾餅在0.5MPa、60 °C熱風(fēng)干燥至質(zhì)量不變， 得到中間產(chǎn)物。
[0058]向300g CH3(CH2)5⑶0H中加入285g S0C12和7.3g二甲基甲酰胺，在30-50°C反應(yīng) 5h，反應(yīng)結(jié)束后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的S0C12，得到CH3 (CH2)5C0C1。
[0059] 將得到的CH3 (CH2) 5C0C1溶解于25L乙酸乙酯中，室溫下緩慢加入得到的中間產(chǎn)物， 反應(yīng)2h，升溫至35°C，反應(yīng)至無(wú)酸性氣體產(chǎn)生，反應(yīng)結(jié)束。經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮除去其中的乙酸 乙酯，然后向濃縮液中加入與濃縮液等體積的去離子水和乙酸乙酯，攪拌混合后靜置分層， 去除上層液體，再向下層液體加入與下層液體等體積的乙酸乙酯，萃取下層液體3次，合并 萃取液，5kPa、20°C旋蒸濃縮至2.51^，然后于85°(：經(jīng)噴霧干燥至恒重，得到脂溶性茶多酚。 [0060]其中，噴霧干燥的條件為：lOOMPa壓力下，將濃縮液噴射成150μπι的微粒，將微粒通 過(guò)70°C的熱空氣干燥15s。
[0061 ]經(jīng)紫外掃描儀檢測(cè)，確定該脂溶性茶多酚中總多酚含量為90%。
[0062] 經(jīng)液質(zhì)聯(lián)用儀分析，該脂溶性茶多酚中包括C22H26〇7的離子峰，m/e = 402.17。
[0063] 實(shí)施例二
[0064]將新采摘的綠茶葉，清水清洗2次，清洗時(shí)向清水中注入濃度為lOOppm的二氧化 氯，對(duì)綠茶葉清洗、殺菌，并使用65°C熱風(fēng)干燥清洗過(guò)的綠茶葉，得到含水量在5%以下的干 綠茶葉，并將制備的干綠茶葉粉碎，過(guò)80目篩，備用。
[0065]取粉碎后的干綠茶10kg，并向其中加入5倍體積的無(wú)水乙醇，在80°C、1.5MPa壓力 下提取2h，提取結(jié)束后，再加入8倍體積的60 %乙醇水溶液在80 °C、1. IMPa壓力下進(jìn)行二次 提取，提取2h，提取結(jié)束后，混合兩次得到的提取液，將混合后的提取液在5kPa、微沸條件下 蒸發(fā)濃縮lh，得到濃縮液，濃縮液在AB-8型大孔吸附樹(shù)脂中、25°C吸附至飽和，然后分別用 無(wú)水乙醇、60 %乙醇水溶液、50 %乙醇水溶液、30 %乙醇水溶液洗脫，洗脫液的流速為3BV/ h，常溫常壓洗脫大孔吸附樹(shù)脂。
[0066]洗脫結(jié)束后，在5kPa、微沸狀態(tài)下濃縮洗脫液，去除其中的乙醇，至6kg，得到濃縮 液二，將濃縮液二在AB-8型大孔吸附樹(shù)脂中與本實(shí)施例中相同的條件二次純化，洗脫結(jié)束 后，在5kPa微沸條件下濃縮二次洗脫液，得濃縮液三，向濃縮液三中加入0.8L 0 . lmol/L的 氫氧化鉀水溶液，在90 °C、1.0 IMPa反應(yīng)2h，過(guò)濾，得到濾餅，將濾餅在0.5MPa、60 °C熱風(fēng)干燥 至質(zhì)量不變，得到中間產(chǎn)物。
[0067] 向0.75kg CH3(CH2)9C00H中加入0.5kg PC13和3.7g二甲基甲酰胺，在30-50°C反應(yīng) 5h，反應(yīng)結(jié)束后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的PC1 3，得到CH3 (CH2) 9C0C1。
[0068] 將得到的CH3 (CH2) 9C0C1溶解于15L乙酸乙酯中，室溫下緩慢加入得到的中間產(chǎn)物， 反應(yīng)2h，升溫至35°C，反應(yīng)至無(wú)酸性氣體產(chǎn)生，反應(yīng)結(jié)束。經(jīng)20°C、5kPa旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮除去其 中的乙酸乙酯，得到脂溶性茶多酚。
[0069] 經(jīng)紫外掃描儀檢測(cè)，確定該脂溶性茶多酚中總多酚含量為60%。
[0070] 經(jīng)液質(zhì)聯(lián)用儀分析，該脂溶性茶多酚中包括C26H34〇7的離子峰，m/e = 458.54。
[0071] 實(shí)施例三
[0072]將新采摘的綠茶葉，清水清洗2次，清洗時(shí)向清水中注入濃度為lOOppm的二氧化 氯，對(duì)綠茶葉清洗、殺菌，并使用65°C熱風(fēng)干燥清洗過(guò)的綠茶葉，得到含水量在5%以下的干 綠茶葉，并將制備的干綠茶葉粉碎，過(guò)100目篩，備用。
[0073]取粉碎后的干綠茶10kg，并向其中加入20倍體積的乙醚，在40°C、1.2MPa壓力下提 取2h，提取結(jié)束后，再加入10倍體積的30 %乙醇水溶液在80 °C、1. IMPa壓力下進(jìn)行二次提 取，提取2h，提取結(jié)束。
[0074]重復(fù)上述提取方法，共提取4次。
[0075]合并每次的提取液，使用200目硅膠柱純化，以2BV/h流速的乙酸乙酯作為流動(dòng)相， 在25°C、常壓洗脫濃縮層，向濃縮液中加入1L 0. lmol/L的氨水溶液，在70°C、1. OIMPa反應(yīng) 2h，過(guò)濾，得到濾餅，將濾餅在0.5MPa、60°C熱風(fēng)干燥至質(zhì)量不變，得到中間產(chǎn)物。
[0076] 向1.5kg QMCftOnCOOH中加入0.8kg P0C13和7.3g二甲基甲酰胺，在30_50°C反應(yīng) 5h，反應(yīng)結(jié)束后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去其中的P0C1 3，得到CH3 (CH2) nCOCl。
[0077] 將得到的CH3(CH2)η⑶Cl溶解于25L乙酸乙酯中，室溫下緩慢加入得到的中間產(chǎn) 物，反應(yīng)2h，升溫至35°C，反應(yīng)至無(wú)酸性氣體產(chǎn)生，反應(yīng)結(jié)束。經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮除去其中的乙 酸乙酯，然后向濃縮液中加入與濃縮液等體積的去離子水和乙酸乙酯，攪拌混合后靜置分 層，去除上層液體，乙酸乙酯萃取下層液體3次，合并萃取液，濃縮得到脂溶性茶多酚。
[0078]經(jīng)紫外掃描儀檢測(cè)，確定該脂溶性茶多酚中總多酚含量為75%。
[0079] 經(jīng)液質(zhì)聯(lián)用儀分析，該脂溶性茶多酚中包括C28H38〇7的離子峰，m/e = 486.60。
[0080] 對(duì)比實(shí)施例
[0081 ]稱(chēng)取l〇kg過(guò)30目篩的綠茶末置于提取槽中，向其中加入200L 30%乙醇水溶液，回 流3h，抽濾，得到茶多酚提取液，向茶多酚提取液中加入0.415mol/L的氯化鋅水溶液，搖勻， 用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15 %的碳酸氫鈉水溶液調(diào)節(jié)酸度至pH值=5.0，離心得到茶多酚-鋅鹽沉淀， 向茶多酚-鋅鹽沉淀中加入一定量硫酸溶液，溶解沉淀，離心去除少量膠狀沉淀，得到茶多 酚酸轉(zhuǎn)液，使用15%的碳酸氫鈉水溶液調(diào)節(jié)酸度，再用乙酸乙酯在室溫下分兩次萃取，合并 萃取液，在乙酸乙酯相中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的VC水溶液，兩者體積比未2:1，洗滌兩次，在 60°C下進(jìn)行真空干燥，得到1.3kg包含茶多酚的綠茶提取物。
[0082]經(jīng)紫外掃描儀檢測(cè)，確定該綠茶提取物中總多酚含量為60%。
[0083]經(jīng)液質(zhì)聯(lián)用儀分析，該綠茶提取物中包括C15H14〇6的離子峰，其摩爾質(zhì)量為290.26。 [0084] 脂溶性茶多酚對(duì)HDF細(xì)胞和Hacat細(xì)胞存活率的影響
[0085]取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、濃度為105個(gè)/mL的人HDF細(xì)胞，將細(xì)胞接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中， 每孔細(xì)胞液lOOyL。最終所鋪的細(xì)胞孔數(shù)取決于樣品數(shù)，每個(gè)樣品設(shè)3個(gè)復(fù)孔。
[0086]將96孔板置于37 °C的細(xì)胞培養(yǎng)箱中貼壁培養(yǎng)6h。
[0087] 將終濃度為lmg/mL、0.1mg/mL和0.01mg/mL的脂溶性茶多酚加入到96孔細(xì)胞培養(yǎng) 板中，向?qū)φ战M加入等體積的細(xì)胞培養(yǎng)液。于37°C、包含5%C02的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育48h。
[0088] 然后向每孔中加入〇.5mg/mL的MTTlOOyL，于37°C、包含5%⑶2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中黑 暗條件下孵育4h。去除上清液，加入150yL DMS0，震蕩以570nm為實(shí)驗(yàn)波長(zhǎng)，630nm為參照波 長(zhǎng)，檢測(cè)吸光度。
[0089]計(jì)算細(xì)胞存活率，結(jié)果如表1所示：
[0090] 表1，脂溶性茶多酚對(duì)HDF細(xì)胞和Hacat細(xì)胞存活率的影響
[0091]
[0092]
[0093]以細(xì)胞存活率高于80%為對(duì)人HDF細(xì)胞和Hacat細(xì)胞無(wú)毒的標(biāo)準(zhǔn)，由表1可知，本發(fā) 明提供的脂溶性茶多酚對(duì)人HDF細(xì)胞無(wú)毒的最高濃度為0.0 lmg/mL，本發(fā)明提供的脂溶性茶 多酚對(duì)人HDF細(xì)胞無(wú)毒的最高濃度為0.01mg/mL，因此，確定脂溶性茶多酚的最高濃度 0.0 lmg/mL為后續(xù)的試驗(yàn)濃度。
[0094] 脂溶性茶多酚的抗衰老性能
[0095]自然狀態(tài)下脂溶性茶多酚對(duì)HDF膠原蛋白分泌的影響
[0096]為了考察本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚對(duì)HDF膠原蛋白分泌的影響，本實(shí)施例將試 驗(yàn)分為空白組、實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照實(shí)驗(yàn)組和標(biāo)準(zhǔn)組。
[0097]取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、濃度為105個(gè)/mL細(xì)胞，每孔100yL，于37°C、含有C02的細(xì)胞培養(yǎng)箱中 培養(yǎng)24h，之后取出上清液，以3000rpm的速度離心10min，取上清液。
[0098]向標(biāo)準(zhǔn)組中加入50yL標(biāo)準(zhǔn)液，向?qū)嶒?yàn)組中加入10yL上清液和40yL本發(fā)明提供的脂 溶性茶多酚的稀釋液，向?qū)φ諏?shí)驗(yàn)組中加入l〇yL上清液和40yL對(duì)比實(shí)施例提供的綠茶提取 物的稀釋液，空白組中不加樣品，分別于37°C孵育lh，并洗板5次，每組樣品設(shè)3個(gè)復(fù)孔。 [0099]向四組樣品中分別加入生物素標(biāo)記的抗-lgG抗體50yL，于37°C溫育30min，洗滌5 次。
[0100]向四組樣品中分別加入50yL的鏈霉素和素-HRP，輕輕震蕩混勻，于37 °C溫育 30min，洗滌5次。
[0101] 向四組樣品中分別加入顯色劑A和顯色劑B各50yL，輕輕震蕩混勻，于37°C避光孵 育30min，向四組樣品中加入終止液50yL。
[0102] 以空白組調(diào)零，在終止反應(yīng)后15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各組的吸光度，結(jié)果如表 2所示。
[0103] 表2，脂溶性茶多酚對(duì)HDF細(xì)胞I型膠原蛋白分泌的影響
[0104]
[0105]
[0106] 膠原蛋白主要包括I型膠原和III型膠原，外界誘導(dǎo)促使真皮細(xì)胞中氧化水平提高 是細(xì)胞損傷的主要因素，氧化水平提高的直接結(jié)果是降低了 I型膠原蛋白的表達(dá)及I型膠原 蛋白被基質(zhì)金屬蛋白酶MPP-1降解，兩種情況造成的結(jié)果均為I型膠原蛋白在皮膚中的含量 減少，而I型膠原蛋白含量減少是皮膚形成皺紋的主要原因。由表2和圖1可知，向HDF細(xì)胞中 添加本發(fā)明提供的濃度為〇.〇lmg/mL脂溶性茶多酚后，皮膚中的I型膠原蛋白含量為 129.93 %，比現(xiàn)有技術(shù)制備的茶多酚中，I型膠原蛋白的含量106.52%，高出23 %，說(shuō)明本發(fā) 明提供的脂溶性茶多酚能夠極顯著的促進(jìn)I型膠原蛋白的表達(dá)。
[0107] 過(guò)氧化氫對(duì)HDF細(xì)胞存活率的影響
[0108] 選取不同濃度的過(guò)氧化氫，如50μΜ、100μΜ、200μΜ、400μΜ、600μΜ、800μ]\^Ρ1000μΜ， 與HDF細(xì)胞共同孵育不同時(shí)間，如3h、6h和9h等，采用ΜΤΤ法檢測(cè)不同濃度的過(guò)氧化氫對(duì)HDF 細(xì)胞存活率的影響。
[0109] 取培養(yǎng)至濃度為1〇5個(gè)/mL的HDF細(xì)胞，接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔100yL。于37 °C、含有C〇2的培養(yǎng)箱中貼壁培養(yǎng)6h，每板做復(fù)孔3個(gè)。
[0110] 使用不同濃度的過(guò)氧化氫分別孵育造模3h、6h和9h;向每個(gè)樣品孔中加入濃度為 0.5mg/mL的MTT 100yL，于37°C、含有C02的培養(yǎng)箱中，黑暗條件下孵育4h。
[0111] 去除上清液，向樣品中加入150yL DMS0,震蕩，以570nm為實(shí)驗(yàn)波長(zhǎng)，630nm為參照 波長(zhǎng)，檢測(cè)每個(gè)樣品的吸光度，計(jì)算細(xì)胞存活率。
[0112] 測(cè)試結(jié)果如圖2所示，人HDF細(xì)胞于濃度為50-800μΜ的過(guò)氧化氫共孵育3-9h后，人 HDF細(xì)胞的存活率明顯下降，當(dāng)孵育濃度超過(guò)400μΜ時(shí)，細(xì)胞存活率低于50% dOOyM過(guò)氧化 氫作用6h后，細(xì)胞存活率降到70 %。
[0113] 脂溶性茶多酚對(duì)經(jīng)過(guò)過(guò)氧化氫損傷的HDF細(xì)胞存活率的影響
[0114] 取培養(yǎng)至密度為105個(gè)/mL的HDF細(xì)胞接種于96孔板，每孔100yL。于37°C，含有C0 2的 培養(yǎng)箱中貼壁培養(yǎng)6h。
[0115] 向?qū)嶒?yàn)組加入本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚，向?qū)φ諏?shí)驗(yàn)組加入對(duì)比實(shí)施例提供的 綠茶提取物，利用過(guò)氧化氫損傷建模，并向每孔加入〇. 5mg/mL的MTT 100yL，于37 °C、5 % C02 的黑暗條件下孵育4h。去除上清液，加入DMS0 150yL，震蕩檢測(cè)吸光度。計(jì)算細(xì)胞存活率，并 以供試物不同濃度和細(xì)胞的存活率作圖，結(jié)果如圖3所示。
[0116] 經(jīng)過(guò)過(guò)氧化氫孵育后，HDF細(xì)胞的存活率降低至70%以下，而向經(jīng)過(guò)氧化氫損傷過(guò) 的HDF細(xì)胞中加入本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚后，人HDF細(xì)胞的存活率達(dá)到80%，向經(jīng)過(guò)氧 化氫損傷過(guò)的HDF細(xì)胞中加入現(xiàn)有技術(shù)制備的茶多酚后，人HDF細(xì)胞的存活率為73%，即本 發(fā)明提供的脂溶性茶多酚相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)制備的茶多酚能夠顯著減輕過(guò)氧化氫對(duì)HDF細(xì)胞 的損傷。
[0117] 脂溶性茶多酚對(duì)過(guò)氧化氫損傷的HDF細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)的影響
[0118] 材料與試劑
[0119]細(xì)胞培養(yǎng)液 24孔細(xì)胞培養(yǎng)板
[0120] 細(xì)胞培養(yǎng)箱 過(guò)氧化氫
[0121] 離心機(jī) ELISA試劑盒
[0122] 測(cè)試步驟
[0123 ] 分為標(biāo)準(zhǔn)組、空白組、實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照實(shí)驗(yàn)組。
[0124] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的濃度為105個(gè)/mL的HDF細(xì)胞接種于24孔培養(yǎng)板中，每孔lmL，于37 °C，含有C0 2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h。
[0125] 向?qū)嶒?yàn)組加入本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚，向?qū)φ諏?shí)驗(yàn)組加入對(duì)比實(shí)施例提供的 綠茶提取物，向標(biāo)準(zhǔn)組加入標(biāo)準(zhǔn)物，空白組不添加其他樣品。
[0126] 誘導(dǎo)建立過(guò)氧化氫損傷模型。小心吸取上清液培養(yǎng)基，離心，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)， 取10yL細(xì)胞懸液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。以空白孔調(diào)零，在反應(yīng)終止后15min內(nèi)，用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的 吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)的MMP-1的濃度及對(duì)應(yīng)的吸光度值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方 程，再根據(jù)樣本的吸光度值，在回歸方程上計(jì)算出實(shí)驗(yàn)組中MMP-1的濃度。
[0127] 如圖4所示，經(jīng)過(guò)過(guò)氧化氫刺激后，HDF細(xì)胞中的MMP-1水平顯著上升至正常細(xì)胞水 平的170%，向經(jīng)過(guò)過(guò)氧化氫刺激的HDF細(xì)胞中加入本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚后，MMP-1的 含量降低至100%以下，為93.45%。而加入采用現(xiàn)有技術(shù)制備的綠茶提取物后，MMP-1的含 量為120.38%。這說(shuō)明，在氧化應(yīng)激條件下，本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚與現(xiàn)有技術(shù)制備的 茶多酚相比，具有更優(yōu)異的抑制MMP-1表達(dá)的性能。
[0128] 脂溶性茶多酚對(duì)過(guò)氧化氫損傷的HDF細(xì)胞中丙二醛(MDA)的影響
[0129] MDA在酸性條件下加熱時(shí)，可與硫代巴比妥酸(TBA)縮合，形成紅色產(chǎn)物3，5，5-三 甲基惡唑-2，4-二酮，在532nm處有最大吸收峰。因底物為硫代巴比妥酸(TBA)，故稱(chēng)此法為 TBA 法。
[0130]取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、濃度為105個(gè)/mL的HDF細(xì)胞，接種于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔2mL，培養(yǎng) 6h，向?qū)嶒?yàn)組加入經(jīng)新鮮培養(yǎng)基稀釋的本發(fā)明制備的脂溶性茶多酚，向?qū)φ諏?shí)驗(yàn)組加入對(duì) 比實(shí)施例制備的綠茶提取物，誘導(dǎo)建立過(guò)氧化氫損傷模型。以lOOOrpm離心10min，收集培養(yǎng) 基上清液中的細(xì)胞及貼壁細(xì)胞，在細(xì)胞沉淀中加入500yL PBS，輕輕顛倒混勻，于4°C下，以 2000rpm離心10min，棄除上清液留存底部沉淀。向沉淀中加入500yL PBS，超聲破碎細(xì)胞 (400A，5s/次，間隙10s反復(fù)3~5次），制備細(xì)胞勻漿；
[0131]按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將試劑混勻，用保鮮膜將試管口扎緊，用針頭刺孔透 氣，用鍋開(kāi)蓋煮沸40min，取出后流水冷卻，以4000rpm離心10min，使沉淀完全。取上清液，采 用分光光度法測(cè)定532nm波長(zhǎng)處的吸光度;利用BCA蛋白檢測(cè)試劑盒，按照說(shuō)明書(shū)方法將本 發(fā)明制備的脂溶性茶多酚稀釋適當(dāng)倍數(shù)，測(cè)定細(xì)胞中的蛋白質(zhì)含量；
[0132] 表3，脂溶性茶多酚對(duì)過(guò)氧化氫損傷的HDF細(xì)胞MDA含量的影響
[0133]
[0134] 由表3和圖5可知，過(guò)氧化氫損傷后，MDA濃度快速上升，6h時(shí)MDA含量增加至正常細(xì) 胞的326.33 %，如陰性對(duì)照組所示。而加入維甲酸后MDA的增加得到抑制，最后穩(wěn)定在 262.35%。向經(jīng)過(guò)過(guò)氧化氫損傷的HDF細(xì)胞中加入本發(fā)明和對(duì)比實(shí)施例提供的茶多酚后， MM含量均比加入維甲酸后的低，說(shuō)明脂溶性茶多酚具有優(yōu)異的抑制MDA增加的能力，且本 發(fā)明提供的脂溶性茶多酚抑制MDA的能力也優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)制備的茶多酚。
[0135] 脂溶性茶多酚去除自由基的性能
[0136] 1，1_二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)是一種很穩(wěn)定的氮中心的自由基，它的穩(wěn)定性 主要來(lái)自3個(gè)苯環(huán)的共振穩(wěn)定作用及空間障礙，使夾在中間的氮原子上不成對(duì)的電子不能 發(fā)揮其應(yīng)有的電子成對(duì)作用。作為一種穩(wěn)定的自由基，其可以清除其他的自由基。目前廣泛 用于定量測(cè)定生物試樣和食品的抗氧化能力。此法是根據(jù)DPPH自由基有單電子，在517nm處 有一強(qiáng)吸收，其醇溶液呈紫色的特性。當(dāng)有自由基清除劑存在時(shí)，由于與其單電子配對(duì)而使 其吸收逐漸消失，其褪色程度與其接受的電子數(shù)量成定量關(guān)系，因而可用分光光度計(jì)進(jìn)行 快速的定量分析。
[0137] 材料與試劑
[0138] DPPH 無(wú)水乙醇
[0139] dd 水 200yL 吸頭
[0140] 96孔板 8通道加樣槍
[0141] 酶標(biāo)儀
[0142] 測(cè)試步驟
[0143] 用無(wú)水乙醇配置0.2mmol/L的DPPH溶液，避光保存，配置0.01mg/mL的表沒(méi)食子兒 茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)溶液。
[0144] 向?qū)嶒?yàn)組添加20uL濃度為0.01mg/mL本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚溶液和0.2mmol/ L的DPPH乙醇溶液180uL至96孔板中，向空白組1中添加180uL無(wú)水乙醇與20uL本發(fā)明提供的 脂溶性茶多酚溶液，向標(biāo)準(zhǔn)組中添加180uL DPPH溶液與20uL蒸餾水，每孔設(shè)置至少3個(gè)復(fù) 孔，分別搖勻，室溫下暗處?kù)o置30min，測(cè)定各組的吸光度。
[0145] 向?qū)φ赵囼?yàn)組添加20uL濃度為0.01mg/mL采用現(xiàn)有技術(shù)制備的綠茶提取物溶液和 0.2mmol/L的DPPH乙醇溶液180uL至96孔板中，向空白組2中添加180uL無(wú)水乙醇與20uL采用 現(xiàn)有技術(shù)制備的綠茶提取物溶液，每孔設(shè)置至少3個(gè)復(fù)孔，分別搖勻，室溫下暗處?kù)o置 30min，測(cè)定各組的吸光度。
[0146] DPPH自由基的清除能力按下式表示：
[0147]
[0148] 其中，計(jì)算實(shí)驗(yàn)組的DPPH清除率時(shí)，測(cè)試樣吸光度為實(shí)驗(yàn)組的吸光度，空白組吸光 度分別為空白組1的吸光度；
[0149] 計(jì)算對(duì)照實(shí)驗(yàn)組的DPPH清除率時(shí)，測(cè)試樣吸光度為對(duì)照實(shí)驗(yàn)組的吸光度，空白組 吸光度為空白組2的吸光度；
[0150]清除率越大表明抗氧化能力越強(qiáng)，結(jié)果如圖6所示，當(dāng)溶液中不存在DPPH自由基 時(shí)，空白組的DPPH清除率為0，EGCG對(duì)DPPH自由基的去除率為47.23%，本發(fā)明提供的脂溶性 茶多酚對(duì)DPPH自由基的去除率為80.63%，采用現(xiàn)有技術(shù)制備的茶多酚對(duì)DPPH自由基的去 除率不足70%，說(shuō)明脂溶性茶多酚具有非常強(qiáng)的去除DPPH自由基的能力，且相對(duì)于現(xiàn)有技 術(shù)提供的茶多酚，本發(fā)明制備的脂溶性茶多酚具有更優(yōu)異的DPPH清除率。
[0151] 脂溶性茶多酚的保濕性能
[0152] 皮膚內(nèi)水分的含量的多少，直接影響皮膚的彈性、光澤度等，皮膚的表皮、真皮、皮 下組織均對(duì)皮膚維持水分起著不同的作用。在皮膚保濕過(guò)程中，主要有兩種機(jī)制影響皮膚 對(duì)水的維持作用：
[0153] 1)皮膚作為天然屏障，避免水分流失；
[0154]皮膚表皮是人的天然屏障，其中透明層、顆粒層和角質(zhì)層對(duì)皮膚鎖水能力起到重 要作用。透明層含有磷脂類(lèi)物質(zhì)和角質(zhì)蛋白，能夠防止水分及電解質(zhì)等透過(guò)皮膚。顆粒層的 細(xì)胞排列致密，對(duì)貯存水分、防止水分滲透具有重要的作用。角質(zhì)層是由角質(zhì)形成細(xì)的堅(jiān) 韌、有彈性的板層結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)充滿(mǎn)了角蛋白。
[0155] 2)皮膚中存在許多保濕因子，吸收和鎖住水分。
[0156]在皮膚真皮層中，透明質(zhì)酸(HA)是含量較多的氨基多糖，HA粘稠度極高且能高比 例地結(jié)合水分子，HA的含量直接影響皮膚中水分的含量。作為皮膚內(nèi)重要的保濕成分，它對(duì) 皮膚細(xì)胞的增殖、分化有顯著作用，對(duì)維持皮膚細(xì)胞的正常新陳代謝至關(guān)重要。
[0157] 角質(zhì)層是由角質(zhì)形成細(xì)胞構(gòu)成的堅(jiān)韌有彈性的板層結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)充滿(mǎn)了角蛋白。 角蛋白是非水溶性的硬蛋白，有阻止化學(xué)物質(zhì)內(nèi)滲和體液外滲的作用，其中含量最高的角 蛋白叫做兜甲蛋白，約占角蛋白的80 %，兜甲蛋白的含量會(huì)直接影響皮膚水分的流失狀況。
[0158] 本試驗(yàn)通過(guò)考察Hacat細(xì)胞兜甲蛋白（L0R)的表達(dá)來(lái)考察本發(fā)明提供的脂溶性茶 多酚的保濕性能。本測(cè)試分為空白組、實(shí)驗(yàn)組、試驗(yàn)對(duì)照組和標(biāo)準(zhǔn)組。
[0159] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的濃度為105個(gè)/mL的Hacat細(xì)胞，將培養(yǎng)的細(xì)胞接種于24孔板中，每 孔細(xì)胞液lmL，于37°C、含有C0 2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6h。
[0160] 向?qū)嶒?yàn)組細(xì)胞液中加入一定量本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚，向?qū)φ諏?shí)驗(yàn)組細(xì)胞液 中加入一定量對(duì)比實(shí)施例提供的綠茶提取物，置于37 °C、含有5 % C02及飽和濕度的細(xì)胞培 養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)24h;
[0161] 棄除上清液，用預(yù)冷ros沖洗細(xì)胞兩次，在培養(yǎng)孔中加入100yL裂解液，冰上裂解細(xì) 胞lOmin，收集細(xì)胞裂解液，以13000rpm離心10min，取上清液備用。
[0162] 按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)，取細(xì)胞裂解液進(jìn)行試驗(yàn)；
[0163] 利用BCA試劑盒檢測(cè)不同組別蛋白質(zhì)含量，各組L0R表達(dá)量采用蛋白量矯正，結(jié)果 如表4所示。
[0164]表4，脂溶性茶多酚對(duì)L0R表達(dá)的影響
[0165]
[0166] 由表4和圖7可知，添加本發(fā)明和對(duì)比實(shí)施例提供的綠茶提取物后，人Hacat細(xì)胞中 L0R含量均有所增高，說(shuō)明茶多酚具有促進(jìn)L0R分泌的功效，本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚與 對(duì)比實(shí)施例提供的茶多酚的活性相近。
[0167] 脂溶性茶多酚提取物的美白作用
[0168] 酪氨酸酶是黑素合成的主要限速酶，通過(guò)抑制酪氨酸酶的活性，可以減少黑素的 生成，酪氨酸酶活性檢測(cè)方法有:放射性同位素法、免疫學(xué)法和生化酶學(xué)法，以生化酶學(xué)法 較為簡(jiǎn)單成熟。生化酶學(xué)法測(cè)定酪氨酸酶活性抑制的原理是:酪氨酸或多巴酸在酪氨酸酶 的作用下轉(zhuǎn)化為多巴醌，通過(guò)比色法測(cè)定判斷酪氨酸酶活性的抑制率，該方法通過(guò)體外測(cè) 定酪氨酸酶的活性，簡(jiǎn)單快捷。
[0169] 材料與試劑
[0170] 蘑菇酪氨酸酶 PH值=6.8的磷酸鹽緩沖液
[0171] 左旋多巴（L-DOPA) 200yL 吸頭
[0172] 96孔板 8通道加樣槍
[0173] 酶標(biāo)儀
[0174] 操作步驟
[0175] 測(cè)定本發(fā)明提供的脂溶性提取物的酪氨酸酶抑制作用
[0176] 本測(cè)試分為空白組、空白參照組、實(shí)驗(yàn)組和實(shí)驗(yàn)參照組。
[0177] 配制質(zhì)量濃度為0.1 %的L-D0PA水溶液，配制pH值=6.8的磷酸鹽緩沖溶液。
[0178]向?qū)嶒?yàn)組中加入5yL濃度為0. lmg/mL的本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚提取物，向?qū)?驗(yàn)參照組中加入5yL濃度為0.1mg/mL的本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚提取物和45yL pH值= 6.8的磷酸鹽緩沖溶液，向空白參照組加入5yL蘑菇酪氨酸酶的磷酸鹽溶液，和45yL pH值= 6.8的磷酸鹽緩沖溶液，向空白組加入50yL pH值=6.8的磷酸鹽緩沖溶液。
[0179] 置于37 °C空氣浴中20min，向每孔加入50yL、質(zhì)量濃度為0.1 %的L-D0PA水溶液，于 37°C空氣浴中靜置20min，于475nm下測(cè)定每組的吸光度值，并計(jì)算本發(fā)明提供的脂溶性茶 多酚提取物對(duì)蘑菇酪氨酸酶的活性抑制率。
[0180]
[0181] 采用相同的測(cè)試方法計(jì)算采用對(duì)比實(shí)施例(現(xiàn)有技術(shù))制備的脂溶性茶多酚提取 物以及陽(yáng)性對(duì)照組曲酸對(duì)酪氨酸酶的抑制率。
[0182] 結(jié)果如圖8所示，本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚提取物對(duì)蘑菇酪氨酸酶的抑制率為 80.63%，采用現(xiàn)有技術(shù)制備的綠茶提取物對(duì)蘑菇酪氨酸酶的抑制率為63.28%，說(shuō)明本發(fā) 明提供的脂溶性茶多酚提取物具有優(yōu)異的美白作用，可以作為添加劑添加到化妝品中。
[0183] 綜上，本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚具有優(yōu)良的抗衰老性能，和去除自由基的能力， 此外，還具有保濕性能和美白作用，本發(fā)明提供的脂溶性茶多酚可以作為添加劑加入到化 妝品中。
[0184] 以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)描述，但其只是作為范例，本發(fā)明并不限 制于以上描述的具體實(shí)施例。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，任何對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的等同修改和 替代也都在本發(fā)明的范疇之中。因此，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍下所作的均等變換和 修改，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種化妝品和/或護(hù)膚品，其特征在于，所述化妝品和/或護(hù)膚品中包含脂溶性茶多 酚，所述脂溶性茶多酚的含量為0.001 %-60 %。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的化妝品和/或護(hù)膚品，其特征在于，所述脂溶性茶多酚包括通 式⑴：其中:辦、1?3、1?4、1?5獨(dú)立為11、(：6-&4脂肪?；械娜我庖环N； R2為H、-〇H、C6-C14脂肪酰基中的任意一種； Ri、R2、R3、R4、R5中至少有一個(gè)為C 6-C14脂肪酰基。3. -種脂溶性茶多酚，其特征在于，所述脂溶性茶多酚包括通式(I):其中：辦、1?3、1?4、1?5獨(dú)立為11、(：6-&4脂肪酰中的任意一種； R2為Η、-0ΗΧ6-&4脂肪酰中的任意一種； Ri、R2、R3、R4、R5中至少有一個(gè)為C 6-C14脂肪?；?。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的脂溶性茶多酚，其特征在于，所述脂溶性茶多酚中總茶多酚的 含量為60 %-95 %。5. -種如權(quán)利要求3或4所述的脂溶性茶多酚的制備方法，其特征在于，所述方法包括： 向綠茶中加入5-20體積倍率的溶媒提取，得到提取液； 純化制備的所述提取液，并減壓濃縮得到濃縮液； 皂化所述濃縮液，過(guò)濾、干燥，得到中間產(chǎn)物； 酰化中間產(chǎn)物，向?；瘎┲芯徛尤胨鲋虚g產(chǎn)物，反應(yīng)一定時(shí)間，得到所述脂溶性茶 多酚。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，在所述?；^(guò)程之后還包括萃取純化 工藝，所述萃取純化工藝的萃取劑可以為乙酸乙酯、磷酸三丁酯、苯、四氯化碳等中的任意 一種或幾種組合。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，?；鲋虚g產(chǎn)物后，還可以包括濃 縮反應(yīng)液、干燥濃縮后的反應(yīng)液中的任意一種或其組合，所述濃縮反應(yīng)液的條件為5-20kPa、20-50°C 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 10_50min。8. -種如權(quán)利要求3或4所述的脂溶性茶多酚的應(yīng)用，其特征在于，所述脂溶性茶多酚 應(yīng)用于制備涂覆于皮膚外表面的制品。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的脂溶性茶多酚的應(yīng)用，其特征在于，所述制品中脂溶性茶多酚 的含量為0.001 %-60 %。
【文檔編號(hào)】A61K8/49GK105997556SQ201610520129
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年7月5日
【發(fā)明人】洪民華, 劉丹, 趙兆, 洪奇, 呂智, 盧艷花, 何浩
【申請(qǐng)人】上海相宜本草化妝品股份有限公司, 華東理工大學(xué)