5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于結(jié)腸癌定位治療藥物和高分子材料的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及載5?氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法，本發(fā)明通過(guò)將功能單體對(duì)苯乙烯磺酸鈉、模板分子5?氟尿嘧啶、交聯(lián)劑N,N’?亞甲基雙丙烯酰胺溶于蒸餾水中構(gòu)成的水相加入到乙基纖維素與甲苯構(gòu)成的油相中，在一定條件下反應(yīng)生成5?氟尿嘧啶印跡凝膠微球。本發(fā)明靶向制劑載藥量大，能夠在結(jié)腸部位定位釋放，增強(qiáng)療效，減少藥物的副作用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于結(jié)腸癌定位治療藥物和高分子材料的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，結(jié)、直腸癌的發(fā)病率逐年上升，位居腫瘤的第4?6位。而5-氟尿嘧啶是治療結(jié)、直腸癌的明星藥物，可以單獨(dú)用藥，也可以聯(lián)合用藥。但是5-氟尿嘧啶具有生物利用度低，毒副作用大，目前多以注射劑給藥，病人的依從性差。為了克服5-氟尿嘧啶的上述缺點(diǎn)，提高結(jié)、直腸癌的治療效果，5-氟尿嘧啶的結(jié)腸定位釋藥系統(tǒng)備受關(guān)注(Rai G., Yadav A.K., Jain N.K.,Agrawal G.P., DrugDelivery, 2016,23:328)。該釋藥系統(tǒng)將藥物定位于結(jié)、直腸部位釋放，可以避免5-氟尿啼啶的全身吸收，大大提高病變部位局部的藥物濃度，減少用藥劑量，提高療效，降低全身副作用，減少醫(yī)療費(fèi)用。
[0003]凝膠微球是一類(lèi)內(nèi)部具有交聯(lián)結(jié)構(gòu)、在水介質(zhì)中可充分溶脹而不溶解的微米級(jí)聚合物微球。凝膠微球不僅具有大尺寸宏觀凝膠的環(huán)境響應(yīng)性特點(diǎn)，當(dāng)外界環(huán)境(如溫度、PH、溶劑等)條件發(fā)生改變，凝膠微球會(huì)快速產(chǎn)生溶脹-消脹響應(yīng)行為，而且具有獨(dú)特的界面效應(yīng)、表面效應(yīng)、尺寸效應(yīng)、體積效應(yīng)、滲流效應(yīng)等，因此凝膠微球在許多領(lǐng)域如藥物控制釋放、物質(zhì)分離、環(huán)境治理等(Bekhit M., Sanchez-
Gonzalez L., Ben Messaoud G., Desobry S.Journal of Food Engineering,2016,180:1)領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用。
[0004]目前報(bào)道的利用凝膠構(gòu)建5-氟尿嘧啶結(jié)腸定位釋藥系統(tǒng)多為大尺寸水凝膠，吸水溶脹性強(qiáng)，但是載藥量少(肖玉良，段桂運(yùn)，李玉琴，夏成才，鄭連英.高等化學(xué)工程學(xué)報(bào)，2011,25:123)。本發(fā)明采用“反相懸浮聚合法與分子印跡同步進(jìn)行”的方法制備一種印跡凝膠微球，該微球既具有凝膠的吸水溶脹性，又具有強(qiáng)的負(fù)電荷，可以高效的載藥，還可以實(shí)現(xiàn)結(jié)腸定位釋藥。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是:如何解決5-氟尿嘧啶結(jié)腸定位釋藥過(guò)程存在吸水溶脹性強(qiáng)，但是載藥量少的問(wèn)題。
[0006]本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:5_氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法，其步驟如下:第一步，將乙基纖維素與甲苯置于容器中構(gòu)成油相，于一定溫度下加熱數(shù)小時(shí)。
[0007]第二步，將功能單體對(duì)苯乙烯磺酸鈉，模板分子5-氟尿嘧啶，交聯(lián)劑N，N’ -亞甲基雙丙烯酰胺溶于蒸餾水中構(gòu)成水相，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加入至第一步中的容器中；再加入引發(fā)劑，恒溫?cái)嚢柘路磻?yīng)數(shù)小時(shí)，用含有l(wèi)mol/L NaCl的pH=ll的水溶液反復(fù)洗滌，直至紫外檢測(cè)不出洗脫液中有模板分子5-氟尿嘧啶，再用乙醇，蒸餾水依次洗滌，干燥至恒重，制得5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球。
[0008]作為一種優(yōu)選方式:第一步中甲苯的質(zhì)量是乙基纖維素的23?26倍，加熱溫度為60?70 °C，加熱時(shí)間為0.5?2h。
[0009]作為一種優(yōu)選方式:第二步中油相與水相的體積比為:1.3/1?1.7/1，所述的單體對(duì)苯乙烯磺酸鈉為強(qiáng)陰離子電解質(zhì)，蒸餾水的質(zhì)量為所述對(duì)苯乙烯磺酸鈉質(zhì)量的6?7.5倍，N，N’_亞甲基雙丙烯酰胺的摩爾數(shù)為所述對(duì)苯乙烯磺酸鈉的1/14?1/12，5_氟尿嘧啶的摩爾數(shù)為所述對(duì)苯乙烯磺酸鈉的1/9?1/5，水相逐滴加入至油相中，滴加時(shí)間約為5分鐘。
[0010]作為一種優(yōu)選方式:第二步中所用引發(fā)劑為過(guò)硫酸銨，過(guò)硫酸銨的質(zhì)量為對(duì)苯乙烯磺酸鈉的1.1%?1.3%，加入方式為逐滴加入，滴加時(shí)間約為3分鐘。
[0011]作為一種優(yōu)選方式:第二步中所述攪拌速度為250?400 rpm，反應(yīng)溫度為60?70°C，反應(yīng)時(shí)間為6?7h。
[0012]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及效益在于:(1)首次以對(duì)苯乙烯磺酸鈉為功能單體，5-氟尿嘧啶為模板分子，N，N’_亞甲基雙丙烯酰胺為交聯(lián)劑，過(guò)硫酸銨為引發(fā)劑及蒸餾水構(gòu)成水相；甲苯和乙基纖維素構(gòu)成油相;采用反相懸浮聚合法制得5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球；(2)5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球隨著pH增大，載藥量減少；(3)載藥凝膠微球具有pH敏感性和時(shí)滯性，可以避免5-氟尿嘧啶在胃中釋放，在小腸中略有釋放，在結(jié)腸部位定位釋放；(4)本發(fā)明制備工藝簡(jiǎn)單，原料價(jià)廉易得，病人的依從性高。
【具體實(shí)施方式】
[0013]本發(fā)明提供了一種新型的、制備工藝簡(jiǎn)單的口服結(jié)腸癌定位制劑，以對(duì)苯乙稀磺酸納(SSS)為功能單體，N，N’_亞甲基雙丙烯酰胺(MBA)為交聯(lián)劑，5-氟尿嘧啶為模板分子，過(guò)硫酸銨為引發(fā)劑，構(gòu)成水相，甲苯為分散介質(zhì)、乙基纖維素為分散劑構(gòu)成油相，采用反相懸浮聚合法與分子印跡同步進(jìn)行的方法制備凝膠微球，洗脫模板分子，獲得5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球。通過(guò)靜電相互作用和凝膠微球的溶脹性負(fù)載藥物5-氟尿嘧啶，載藥印跡凝膠微球在胃中基本不釋放藥物，在小腸中釋藥量很少，在結(jié)腸部位大量釋放。該方法可降低5-氟尿嘧啶的用藥量，提高藥物的生物利用度，降低藥物的毒副作用。制備工藝簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，容易操作，具有很好地穩(wěn)定性等優(yōu)點(diǎn)。
[0014]下面以實(shí)例來(lái)說(shuō)明5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法。
[0015]實(shí)例1:
將0.7g乙基纖維素與20mL甲苯置于四口瓶中構(gòu)成油相，于65°C下，加熱1.5小時(shí)。將2.0g對(duì)苯乙烯磺酸鈉，0.13g 5-氟尿嘧啶，0.1142 g N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺溶于10 mL蒸餾水中構(gòu)成水相，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，滴加至上述四口瓶中，約滴5min ；再將0.0243 g過(guò)硫酸銨溶于3mL蒸餾水，滴加法連續(xù)加入四口瓶中，約滴加3min，恒溫70°C，以250 rpm/分，反應(yīng)時(shí)間為7h。用含有l(wèi)mol/L NaCl的pH=lI的水溶液反復(fù)洗滌，直至紫外檢測(cè)不出洗脫液中有模板分子5-氟尿嘧啶，再用乙醇，蒸餾水依次洗滌，干燥至恒重，制得5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球。
[0016]實(shí)例2:
將0.7g乙基纖維素與20mL甲苯置于四口瓶中構(gòu)成油相，于70°C下，加熱I小時(shí)。將2.0g對(duì)苯乙烯磺酸鈉，0.24g 5-氟尿嘧啶，0.1150 g N，N’_亞甲基雙丙烯酰胺溶于10 mL蒸餾水中構(gòu)成水相，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，滴加至上述四口瓶中，約滴5min；再將0.0247 g過(guò)硫酸銨溶于5mL蒸餾水，滴加法連續(xù)加入四口瓶中，約滴加3min，恒溫60°C，以400 rpm/分，反應(yīng)時(shí)間為6h。用含有ImoI/L NaCl的pH=l I的水溶液反復(fù)洗滌，直至紫外檢測(cè)不出洗脫液中有模板分子5-氟尿嘧啶，再用乙醇，蒸餾水依次洗滌，干燥至恒重，制得5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球。
[0017]實(shí)例3:
將0.7g乙基纖維素與20mL甲苯置于四口瓶中構(gòu)成油相，于60°C下，加熱2小時(shí)。將2.0g對(duì)苯乙烯磺酸鈉，0.2g 5-氟尿嘧啶，0.1147 g N，N’_亞甲基雙丙烯酰胺溶于10 mL蒸餾水中構(gòu)成水相，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，滴加至上述四口瓶中，約滴5min；再將0.0245 g過(guò)硫酸銨溶于2mL蒸餾水，滴加法連續(xù)加入四口瓶中，約滴加3min，恒溫65 °C，以300 rpm/分，反應(yīng)時(shí)間為6.5h。用含有l(wèi)mol/L NaCl的pH=lI的水溶液反復(fù)洗滌，直至紫外檢測(cè)不出洗脫液中有模板分子5-氟尿嘧啶，再用乙醇，蒸餾水依次洗滌，干燥至恒重，制得5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球。
[0018]實(shí)例4:
將0.7g乙基纖維素與20mL甲苯置于四口瓶中構(gòu)成油相，于65°C下，加熱1.5小時(shí)。將2.0g對(duì)苯乙烯磺酸鈉，0.22g 5-氟尿嘧啶，0.1150 g N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺溶于10 mL蒸餾水中構(gòu)成水相，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，滴加至上述四口瓶中，約滴5min ；再將0.0245 g過(guò)硫酸銨溶于4 mL蒸饋水，滴加法連續(xù)加入四口瓶中，約滴加3min，恒溫65°C，以350 rpm/分，反應(yīng)時(shí)間為6.5h。用含有l(wèi)mol/L NaCl的pH=lI的水溶液反復(fù)洗滌，直至紫外檢測(cè)不出洗脫液中有模板分子5-氟尿嘧啶，再用乙醇，蒸餾水依次洗滌，干燥至恒重，制得5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球。
[0019]5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球載藥性能研究
準(zhǔn)確稱(chēng)量上述實(shí)例2制備的50 mg 5-氟尿嘧啶凝膠微球加入至25mL初始濃度為1.4mg/mL的pH=l的5-氟尿嘧啶溶液中，25°C恒溫振蕩2h，過(guò)濾，測(cè)定上清液中5-氟尿嘧啶的吸光度，計(jì)算得到5-氟尿嘧啶凝膠微球?qū)λ幬?-氟尿嘧啶的載藥量為86.7mg/g。再用
0.lmol/L鹽酸反復(fù)洗滌以除去附在凝膠微球表面的5-FU，直至紫外檢測(cè)不到溶液中存在5-FU，真空干燥得到5-FU載藥印跡凝膠微球。
[0020]5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球的pH敏感性釋藥研究
將0.05g載藥印跡凝膠微球放置在pH=l(37°C、100mL、攪拌速度為100rpm/min)的釋放介質(zhì)中12h，藥物基本不釋放。
[0021]將0.058載藥印跡凝膠微球放置在?!1=6.8(37°(:、1001^、攪拌速度為100印111/1^11)的釋放介質(zhì)中12h，藥物的累積釋放率為48%。
[0022]將0.058載藥印跡凝膠微球放置在?!1=6.8(37°(:、1001^、攪拌速度為100印111/1^11)的釋放介質(zhì)中12h，藥物的累積釋放率為80%。
[0023 ] 5-氟尿嘧啶載藥印跡凝膠微球的pH敏感性和時(shí)滯性研究
將0.05g載藥印跡凝膠微球依次放置在100 mL溫度為37°C、攪拌速度為100rpm/min的PH=I的HCl (模擬胃液)中2 h、pH=6.8 PBS(模擬小腸液)中3 h和pH=7.4 PBS(模擬結(jié)腸液)中10 h。載藥印跡凝膠微球在模擬胃液中2h基本不釋藥，在模擬小腸液中3h累積釋放率為16%，而轉(zhuǎn)入模擬結(jié)腸液中的5?7h累積釋放率為42%，之后藥物持續(xù)緩慢的釋放直至75%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法，其特征在于，按照如下步驟進(jìn)行: 第一步，將乙基纖維素與甲苯置于容器中構(gòu)成油相，于一定溫度下加熱數(shù)小時(shí)； 第二步，將功能單體對(duì)苯乙烯磺酸鈉，模板分子5-氟尿嘧啶，交聯(lián)劑N，N’_亞甲基雙丙烯酰胺溶于蒸餾水中構(gòu)成水相，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加入至第一步中的容器中；再加入引發(fā)劑，恒溫?cái)嚢柘路磻?yīng)數(shù)小時(shí)，用含有l(wèi)mol/L NaCl的pH=ll的水溶液反復(fù)洗滌，直至紫外檢測(cè)不出洗脫液中有模板分子5-氟尿嘧啶，再用乙醇，蒸餾水依次洗滌，干燥至恒重，制得5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法，其特征在于:第一步中甲苯的質(zhì)量是乙基纖維素的23?26倍，加熱溫度為60?70°C，加熱時(shí)間為0.5?2h。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法，其特征在于:第二步中油相與水相的體積比為:1.3/1?1.7/1，所述的單體對(duì)苯乙烯磺酸鈉為強(qiáng)陰離子電解質(zhì)，蒸餾水的質(zhì)量為所述對(duì)苯乙烯磺酸鈉質(zhì)量的6?7.5倍，N，N’_亞甲基雙丙烯酰胺的摩爾數(shù)為所述對(duì)苯乙烯磺酸鈉的1/14?1/12，5_氟尿嘧啶的摩爾數(shù)為所述對(duì)苯乙烯磺酸鈉的1/9?I/5，水相逐滴加入至油相中，滴加時(shí)間約為5分鐘。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法，其特征在于:第二步中所用引發(fā)劑為過(guò)硫酸銨，過(guò)硫酸銨的質(zhì)量為對(duì)苯乙烯磺酸鈉的1.1%?1.3%，加入方式為逐滴加入，滴加時(shí)間約為3分鐘。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的5-氟尿嘧啶印跡凝膠微球制備方法，其特征在于:第二步中所述攪拌速度為250?400 rpm，反應(yīng)溫度為60?70°C，反應(yīng)時(shí)間為6?7h。
【文檔編號(hào)】A61K47/38GK105997937SQ201610516103
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年7月4日
【發(fā)明人】門(mén)吉英, 陳建軍, 史楠, 陳濤, 李歡, 王蕊欣
【申請(qǐng)人】中北大學(xué)