Salviskinone A衍生物的組合物在抗炎藥物中的應(yīng)用
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物在抗炎藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物、制備方法及其在制備抗炎藥物上的用途。本發(fā)明公開(kāi)了一種Salviskinone A的苯并咪唑基和二(2?甲硫基乙基)胺基衍生物的組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有抗炎的作用，具有開(kāi)發(fā)抗炎藥物的價(jià)值。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
Sa I v i sk i none A衍生物的組合物在抗炎藥物中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 炎癥發(fā)生在局部，同時(shí)也可影響全身。局部臨床特征是紅、熱、腫、痛和功能障礙。 紅、熱是由于炎癥局部血管擴(kuò)張、血流加快所致。腫是由于局部炎癥性充血、血流成分滲出 引起。研發(fā)具有抗炎作用的藥物對(duì)于緩解驗(yàn)證、減輕痛苦有重要意義。
[0003] 炎癥的治療目前已有的藥物存在毒性大、安全性低的問(wèn)題，從天然產(chǎn)物中尋找化 合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物有重要價(jià) 值。
[0004] 本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)2011年發(fā)表（Ayumi Ohsaki et al.， 20 11 · Sa 1 viskinone A , a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalski i · Tetrahedron Letters 52(2011) 1375-1377)的化合物，我們對(duì)化合物I進(jìn)行 了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV 制備了組合物并對(duì)該組合物抗炎癥活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，其具有抗炎癥活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開(kāi)了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物 中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為90%和10%。
[0007] 本發(fā)明公開(kāi)的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。所述的炎癥為無(wú)菌性炎 癥。
[0009] 本發(fā)明組合物在制備抗炎藥物中應(yīng)用的有益效果如下：
[0010] 首先證明了本發(fā)明組合物具有有效抗炎作用。采用了經(jīng)典的二甲苯所致的小鼠 耳腫脹模型以及大鼠瓊脂性足腫脹模型，觀察本發(fā)明組合物在一定時(shí)間內(nèi)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抗 炎作用。研究表明：
[0011] 1、本發(fā)明組合物對(duì)二甲苯所致的小鼠耳腫脹有明顯抑制作用。
[0012] 2、本發(fā)明組合物對(duì)大鼠瓊脂性足腫脹有明顯抑制作用。
[0013] 以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【具體實(shí)施方式】
[0014] 實(shí)施例1化合物Salviskinone A的制備
[0015] 化合物Salviskinone A(I)的制備方法參照Ayumi Ohsaki等人發(fā)表的文獻(xiàn)(Ayumi Ohsaki et al.,2011.Salviskinone A,a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalskii .Tetrahedron Letters 52(2011)1375-1377)的方法。
[0016]
[0017] 實(shí)施例2 Salviskinone A的o-溴乙基衍生物（II)的合成
[0018] 將化合物I(312mg，1.00mmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨（TBAB) (0.088)，1，2-二溴乙烷(3.76(^，20.00111111〇1)和61^的50%氫氧化鈉溶液。混合物在35攝氏 度攪拌12Κ12?!之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然 后對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌4次，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除 溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100:1.5，ν/ ν)，收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棕色粉末(327mg，78% )。
[0019] 4 MMR(500MHz，DMS0-d6)S6.63(s，lH)，6.37(s，lH)，5.81(s，lH)，4.51(s，2H)， 3.84(s，1H)，3.79(s，2H)，2.15(s，1H)，2.04(s，1H)，1.91(s，1H)，1.65(s，1H)，1.39(s，3H)， 1.08(s,6H),0.99(s,6H).
[0020] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)5l88.07(s),183.70(s),154.38(s),147.57(s),140.21 (s),136.40(s),134.71(s),131.25(s),128.40(s),118.83(s),72.12(s),45.49(s),37.54 (s),33.58(s),31.78(s),26.17(s),25.12(s),24.66(s),23.51(s),23.17(s),22.65(s).
[0021] HRMS(ESI)m/z[M+H]+calcd for C22H28Br03:419.1222；found 419.1220.
[0022]
[0023] 實(shí)施例3 Salviskinone A的0-(苯并咪唑基）乙基衍生物（III)的合成 [0024] 將化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于20mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無(wú)水碳酸鉀(345mg， 2 · 5mmol)，鵬化鉀(84mg，0 · 5mmol)和苯并咪唑（1180mg，lOmmol)，混合物加熱回流5h。反應(yīng) 結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽 水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100:1.5，v/v)，收集棕色集中洗脫帶，濃縮 即得到化合物ΠI的棕色固體(215mg，43 % )。
[0025] 咕匪R(500MHz，DMS0-d6)S8.15(s，1H)，7.54((1, J = 25.0Hz，2H)，7· 15(s，lH)， 7.06(s，lH)，6.33(d，J = 84.1Hz，lH)，6.26(s，lH)，5.66(s，lH)，4.38(d，J=15.8Hz，4H)， 3.57(s，1H)，1.96(s，1H)，1.90(s，1H)，1.77(s，1H)，1.51(s，1H)，1.20(s，3H)，0.99(s，6H)， 0.81(s,6H).
[0026] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)Sl87.90(s),183.51(s),154.17(s),147.37(s),146.27 (s),139.98(s),139.63(s),136.22(s),134.51(s),133.48(s),131.05(s),128.18(s), 123.93(s),123.35(s),118.56(d,J=9.6Hz),110.85(s),68.55(s),45.29(s),44.74(s), 37.34(s),33.36(s),25.96(s),24.94(s),24.46(s),23.32(s),22.96(s),22.42(s).
[0027] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C29H33N2〇3:457.2491;found:457.2493〇
[0028]
[0029] 實(shí)施例4 Salviskinone A的0-(二輕乙胺基）乙基衍生物的合成 [0030] 將化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于30mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無(wú)水碳酸鉀(690mg， 5.0mmol)，碘化鉀（252mg，1.5mmol)和二乙醇胺（1051mg，lOmmol)，混合物加熱回流9h。反應(yīng) 結(jié)束后將反應(yīng)液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和 食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn) 物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油醚/丙酮= 100:0.5，v/v)，收集黃色集中洗脫帶 并揮去溶劑即得到Salviskinone A的0-(二輕乙胺基）乙基衍生物的淡黃色固體（159.5mg, 72%)。
[0031] ΧΗ NMR(500MHz,DMS0-d6)56.52(s,lH),6.40(s,lH),5.71(s,lH),4.15(s,2H), 3.70(s,1H),3.37(s,4H),3.00(s,2H),2.50(s,4H),2.07(s,1H),1.96(s,1H),1.83(s,1H), 1.57(d ,J = 1.4Hz,3H),1.30(s,3H),0.99(s,6H),0.90(s,6H).
[0032] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)5l88.01(s),183.52(s),154.08(s),147.15(s),140.11 (s),136.23(s),134.42(s),130.84(s),128.31(s),118.62(s),68.93(s),58.73(s),56.61 (s),53.94(s),45.20(s),37.13(s),33.49(s),25.96(s),24.84(s),24.26(s),23.43(s), 22.97(s),22.33(s).
[0033] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C26H38N〇5:444.2750;found:444.2746〇
[0034]
[0035] oti丄 ν??κ丄??υ??? 口、」^)
[0036] 實(shí)施例5 Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物的合成 [0037] 將實(shí)施例4制備的Salviskinone A的0_(二羥乙胺基）乙基衍生物（0.222g， 0 · 5mmol)溶于6mL氯仿，逐滴加入氯化亞砜(0 · 238g，2mmol)，反應(yīng)物加熱回流lh。將反應(yīng)物 冷卻至室溫，滴加甲醇分解過(guò)量的氯化亞砜，減壓濃縮除去溶劑。產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化 (石油醚/丙酮100:0.3，v/v)，得到Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物的淡黃色 固體（170.0mg，71%)。
[0038] 咕 NMR(500MHz，Chloroform-dl)S6.51(s，lH)，6.22(s，lH)，5.72(s，lH)，4.16(s， 1H)，3.66(s，1H)，3.44(s，4H)，3.01(s，2H)，2.80(s，2H)，2.64(s，2H)，2.04(s，1H)，1.98(s， 1H)，1.85(s，1H)，1.59(s，1H)，1.28(s，3H)，0.97(s，6H)，0.93(s，6H).
[0039] 13C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl87.90(s),183.41(s),153.97(s),147.04(s),140.00 (s),136.12(s),134.31(s),130.73(s),128.20(s),118.51(s),68.82(s),55.57(s),53.94 (s),45.20(s),39.10(s),37.02(s),33.39(s),25.87(s),24.76(s),24.19(s),23.33(s), 22.88(s),22.25(s).
[0040] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C26H36Ci2N03:480.2072;found:480.2070〇
[0041]
[0042] Salviskinone A的〇-(二氯乙胺基）乙基衍生物
[0043] 實(shí)施例6 Salviskinone A的0_(二(2-甲硫基乙基)胺基）乙基衍生物的合成 [0044] 將實(shí)施例5制備的Salviskinone A的0-(二氯乙胺基）乙基衍生物（0.240g， 0 · 5mmo 1)溶于15mL乙醇，室溫下加入甲硫醇鈉(0 · 2lg，3mmo 1)，反應(yīng)物加熱回流lh。減壓濃 縮除去溶劑，所得產(chǎn)物用硅膠柱層析進(jìn)行純化(石油醚/丙酮100:0.5，v/v)，得到黃色固體 物，即化合物 IV(0.169g，67%)。
[0045] 4 NMR(500MHz，Chloroform-dl)S6.48(s，lH)，6.41(s，lH)，5.65(s，lH)，4.12(s， 2H)，3.99(s，lH)，2.94(s，2H)，2.53(d，J=15.4Hz，8H)，1.99(s，lH)，1.94(s，6H)，1.90(s， 1H)，1.77(s，lH),1.51(s，lH)，1.23(s，3H)，0.92(s，6H)，0.83(s，6H).
[0046] 13C NMR(125MHz,DMS0-d6)5l87.81(s),183.42(s),154.08(s),147.28(s),139.90 (s),136.12(s),134.44(s),130.96(s),128.09(s),118.53(s),68.94(s),53.83(s),52.15 (s),45.21(s),37.24(s),33.29(s),31.87(s),25.85(s),24.86(s),24.38(s),23.21(s), 22.88(s),22.34(s),14.38(s).
[0047] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for C28H42N03S2:504.2606;found:504.2603〇
[0048]
123456789101112 實(shí)施例7組合物抗炎藥效學(xué)研究 2 試驗(yàn)材料 3
[00511 1.昆明(KM)種小鼠：雄性，6周，18.5-22.5g，由江蘇省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。 4
[0052] 2.大鼠 (Wistar):雄性，體質(zhì)量140~160g，由江蘇省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。 5
[0053] 3.組合物的制備：將研磨之后過(guò)200目網(wǎng)的90mg化合物III的粉末和研磨之后過(guò) 6 200目網(wǎng)的10mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組合 7 物，使用時(shí)用水溶解這1 〇〇mg的組合物即得到組合物的溶液。 8
[0054]試驗(yàn)方法 9
[0055] 1.灌胃組合物對(duì)小鼠耳部炎癥的作用：取體質(zhì)量18.5~22.5g健康雄性小鼠50只， 10 隨機(jī)分成5組，每組10只。分組為：組合物2.5mg · kg_\化合物III 2.5mg · kg_\化合物IV 11 2.5mg · kg'阿司匹林組(200mg · kg<)、空白對(duì)照組(生理鹽水）。各組分別灌胃給藥，連續(xù) 12 7d，第七天灌胃后lh，3組小鼠均在小鼠右耳前、后面均勻涂二甲苯0.02mL，制備耳廓炎癥模 型。lh后后頸脫臼處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑8mm打孔器分別在兩耳的同一部 位打下圓耳片，稱(chēng)重精確到O.OOOlg。立即用電子天平分別稱(chēng)質(zhì)量，以左右兩耳質(zhì)量差作為 腫脹度，并計(jì)算其腫脹度。
[0056] 腫脹度=右耳片重一左耳片重
[0057] 2.灌胃組合物對(duì)大鼠瓊脂性足腫脹的作用：取體質(zhì)量140~160g健康雄性Wistar 大鼠40只，隨機(jī)分成5組。組合物2.5mg · kg-\化合物III 2.5mg · kg-\化合物IV 2.5mg · kg'阿司匹林組(200mg · kg，、空白對(duì)照組(生理鹽水）。分別灌胃給藥，連續(xù)7d，第七天灌 胃后lh，大鼠的右后足跎皮下注射10g/L瓊脂O.lmL制備足腫急性炎癥模型，用大鼠足容量 測(cè)量?jī)x測(cè)其右后足正常容積。致炎后l、5、8h分別測(cè)量各鼠右后足容積，并計(jì)算腫脹度。 [0058]腫脹度=右后足容積一左后足容積
[0059] 試驗(yàn)結(jié)果
[0060] 1、組合物對(duì)小鼠耳部炎癥的影響
[0061] 致炎后，各組小鼠右耳立刻出現(xiàn)高度紅腫現(xiàn)象。阿司匹林組和組合物組對(duì)二甲苯 所致的小鼠耳腫脹均有顯著抑制作用，而化合物III和化合物IV則對(duì)二甲苯所致的小鼠耳 腫脹沒(méi)有顯著抑制作用，結(jié)果見(jiàn)表1。
[0062] 表1組合物對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響
[0063]
1234 與模型組比較*Ρ〈0·01 2 2、組合物對(duì)大鼠瓊脂性足腫脹的影響 3 注射瓊脂后，各組大鼠足爪均有一定程度的腫脹現(xiàn)象。在肉眼觀察下，模型組腫脹 發(fā)紅最明顯，阿司匹林組稍有腫脹無(wú)明顯發(fā)紅現(xiàn)象，組合物組有腫脹無(wú)明顯發(fā)紅現(xiàn)象。組合 物對(duì)大鼠足腫有顯著抑制作用，而化合物III和化合物IV則對(duì)大鼠足腫無(wú)顯著抑制作用，見(jiàn) 表2。 4 表2組合物對(duì)大鼠瓊脂性足趾腫脹度的影響
[0068]
[0069] 與模型組比較*Ρ〈0·05
[0070] 結(jié)論:組合物對(duì)二甲苯所致的小鼠耳腫脹有明顯抑制作用；組合物對(duì)大鼠瓊脂性 足腫脹有明顯抑制作用。而化合物III和化合物IV則對(duì)二甲苯所致的小鼠耳腫脹無(wú)明顯抑 制作用;化合物III和化合物IV則對(duì)大鼠瓊脂性足腫脹無(wú)明顯抑制作用。組合物可以用于制 備抗炎藥物，化合物III和化合物IV不能用于制備抗炎藥物。
[0071] 實(shí)施例8本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備
[0072] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0073] 實(shí)施例9本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備
[0074] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為90%和IO%，2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為：將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為90%和10%充分混合。3. 如權(quán)利要求1所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述炎癥為無(wú)菌性炎 癥。5. 如權(quán)利要求4所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述無(wú)菌性炎癥為化 學(xué)品刺激引起的D6. 如權(quán)利要求5所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為：所述化學(xué)品為二甲 苯D7. 如權(quán)利要求5所述的組合物在抗炎癥藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述化學(xué)品為瓊脂。
【文檔編號(hào)】A61K31/145GK105997997SQ201610258181
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年4月22日
【發(fā)明人】王卓婷
【申請(qǐng)人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司