抗巨細胞病毒的藥物組合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種抗巨細胞病毒的藥物組合物及其制備方法，該藥物包括以下重量份的組分：蟲草0.1～0.5份、靈芝1～2份、黑木耳0.5～1份和羅漢果8～10份。其制備方法為1)將蟲草、靈芝、黑木耳先用乙醇提取，其濾渣再用水提取，取濾液備用；2)將羅漢果先用乙醇提取，其濾渣加水提取，取濾液備用；3)將步驟2)的濾液過截留分子量為1000道爾頓的膜過濾裝置，收集流出液；4)將步驟1)的濾液過截留分子量為15000道爾頓的膜過濾裝置，收集濃縮液；5)將流出液和濃縮液混勻，濃縮，干燥，即得。本發(fā)明的藥物既可以阻止HCMV進入受體細胞，又可以阻遏HCMV的復(fù)制，保全面保障母嬰安全。
【專利說明】
抗巨細胞病毒的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種中藥組合物，具體設(shè)及一種抗巨細胞病毒的藥物組合物及其制備 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 人巨細胞病毒化CMV)在人群中感染非常普遍，大多數(shù)在臨床上呈隱形或潛伏感染 的特點。該病毒是引起先天性及圍產(chǎn)期感染的重要病原，妊娠期HCMV活動性感染可W通過 胎盤垂直傳播，導(dǎo)致流產(chǎn)、崎形、死胎及新生兒神經(jīng)系統(tǒng)和臟器損害。然而孕婦感染巨細胞 病毒后的自然轉(zhuǎn)陰率大約在40%左右，為了防止胎兒宮內(nèi)和經(jīng)產(chǎn)道感染巨細胞病毒，降低 感染幾率，預(yù)防早產(chǎn)、流產(chǎn)、胎兒崎形等出生缺陷，需要用藥物對該病毒在孕婦體內(nèi)的繁殖 進行干預(yù)和阻斷。HCMV圍產(chǎn)期感染的預(yù)防和治療時國內(nèi)外醫(yī)學(xué)研究的熱點，雖然西藥更昔 洛韋治療巨細胞病毒感染療效確切，但是更昔洛韋是在HCMV進入祀細胞后通過競爭性抑制 肥MV DNA多聚酶，并滲入病毒W(wǎng)及宿主細胞的DNA中，從而抑審化NA合成而起作用的，因此更 昔洛韋抗HCMV有效率較低，不僅如此，更昔洛韋有導(dǎo)致哺乳動物胎仔致崎的危險，因此不宜 應(yīng)用于孕婦。
[0003] 中藥在抗病毒方面尤其獨特的優(yōu)勢，特別是不良反應(yīng)相對較低，不易形成耐藥性， 目前在病毒性疾病的治療中占有重要地位。有文獻報道運用金葉敗毒顆粒治療育齡期婦女 巨細胞病毒感染取得了良好的臨床療效，前瞻性隨機對照臨床研究證實該藥可使孕婦 HCMV-IgM和HCMV晚期mRNA轉(zhuǎn)陰率從自然狀態(tài)下的42.64%提高到71.43%，宮內(nèi)傳播率從自 然狀態(tài)下47.5%下降至20.0%，并使流產(chǎn)、先天崎形、死胎等子代生長發(fā)育異常大大減少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種不僅可W防止HCMV侵入祀細胞，即阻斷HCMV 與祀細胞膜粘附、結(jié)合或融合，還可W抑制HCMV在侵入祀細胞后的復(fù)制與表達，全面阻斷巨 細胞病毒在母嬰之間傳遞。
[0005] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案是一種抗巨細胞病毒的藥物組合物，包括W下重量份的組 分;蟲草0.1~0.5份、靈芝1~2份、黑木耳0.5~1份和羅漢果8~10份。
[0006] 上述組方中各原料的功效如下：
[0007] 蟲草又名冬蟲夏草，是我國民間慣用的一種名貴滋補藥材，其營養(yǎng)成分高于人參， 可入藥，也可食用，是上乘的佳肴，具有很高的營養(yǎng)價值。冬蟲夏草可W增強機體的免疫力， 滋補肺腎，對肺癌、肝癌等有明顯的抑制作用。在臨床上對肺虛久咳，氣喘，肺結(jié)核咯血，盜 汗，腎虛腰膝酸痛，陽瘦遺精，神經(jīng)衰弱及化療、放療后的紅細胞下降都有療效。蟲草的活性 成分主要包括蟲草素、蟲草酸、蟲草多糖、醬醇等。
[000引靈芝，學(xué)名:Ganode;rma Lucidum Karst,是多孔菌科真菌靈芝的子實體。具有補氣 安神、止咳平喘的功效，用于眩暈不眠、屯、惇氣短、神經(jīng)衰弱、虛勞咳喘，延年益壽的功效。
[0009]黑木耳，又名黑菜，桑耳、本菌、樹雞、木蛾、木茸，因形似耳，加之其顏色黑褐色而 得名，黑木耳為木耳科植物，其性平味甘，人胃、大腸經(jīng)。具有滋補、潤燥、養(yǎng)血益胃、活血止 血、潤肺、潤腸的作用。
[0010] 羅漢果，葫蘆科多年生藤本植物的果實，主要產(chǎn)于廣西壯族自治區(qū)桂林市永福縣 龍江鄉(xiāng)、龍勝和百壽等鎮(zhèn)。羅漢果是桂林名貴的±特產(chǎn)，也是國家首批批準的藥食兩用材料 之一，其主要功效是能止咳化疲。果實營養(yǎng)價值很高，含豐富的維生素 C(每100克鮮果中含 400毫克~500毫克）W及糖武、果糖、葡萄糖、蛋白質(zhì)、脂類等。
[0011] 作為優(yōu)選，各組分的重量份為:蟲草0.1~0.2份、靈芝1~1.5份、黑木耳0.5~0.6 份和羅漢果8~10份。
[0012] 本發(fā)明還公開了上述可阻斷巨細胞病毒在母嬰之間傳遞的藥物組合物的制備方 法，包括W下步驟：
[0013] 1)將配方量的蟲草、靈芝、黑木耳粉碎，W乙醇為溶媒進行提取，將提取液過濾，取 濾渣備用；
[0014] 2)將步驟1)的濾渣加水提取，將提取液過濾，取濾液備用；
[0015] 3)將羅漢果粉碎，W乙醇為溶媒進行提取，將提取液過濾，取濾渣備用；
[0016] 4)將步驟3)的濾渣加水提取，將提取液過濾，取濾液備用；
[0017] 5)將步驟4)的濾液過截留分子量為1000道爾頓的膜過濾裝置，收集流出液；
[0018] 6)將步驟2)的濾液過截留分子量為15000道爾頓的膜過濾裝置，收集濃縮液；
[0019] 7)將步驟5)的流出液和步驟6)的濃縮液混勻，濃縮，干燥，即得。
[0020] 步驟1)和步驟3)中，由于蟲草、靈芝、黑木耳和羅漢果中含有蛋白質(zhì)和碳水化合 物，采用乙醇為溶媒，不利于蛋白質(zhì)和碳水化合物的溶解，可減少雜質(zhì)成分的溶出。
[0021] 步驟1)和步驟3)中，乙醇的用量為藥材粉末重量的8~10倍，回流提取1~3次，每 次1~化。即步驟1)中，乙醇的用量為蟲草、靈芝和黑木耳混合粉末重量的8~10倍，回流提 取1~3次，每次1~化。步驟3)中，乙醇的用量為羅漢果粉末重量的8~10倍，回流提取1~3 次，每次1~化。
[0022] 作為優(yōu)選，乙醇的體積濃度為90~95%。
[0023] 步驟2)和步驟4)中，W水為溶媒，可W提取濾渣中的大分子多糖和小分子糖巧，水 的加入量為濾渣重量的8~10倍，回流提取1~3次，每次1~化。
[0024] 步驟5)中，將羅漢果的多糖和小分子糖巧提取液過截留分子量為1000道爾頓的膜 過濾裝置，收集流出液是分子量小于1000的小分子糖巧。羅漢果小分子糖巧可W將阻遏 HCMV糖蛋白與祀細胞膜結(jié)合，阻止HCMV進入受體細胞，形成了抗HCMV病毒的第一道防線。
[0025] 步驟6)中，將蟲草、靈芝和黑木耳的多糖和小分子糖巧的提取液過截留分子量為 15000道爾頓的膜過濾裝置，收集的濃縮液中含有分子量大于15000道爾頓的大分子多糖， 可保護宿主細胞的HFF細胞，明顯抑制宿主細胞內(nèi)早期立即蛋白IE1、IE2及早期蛋白化84的 表達，由于IEUIE2作為轉(zhuǎn)錄因子，其表達在HCMV的早期復(fù)制中具有重要作用，IEUIE2的表 達缺失，導(dǎo)致HCMV某些基因不表達，故抑制HCMV多種復(fù)制啟動因子的轉(zhuǎn)錄。此外，早期蛋白 化84的表達是形成HCMV病毒復(fù)制中屯、體的必經(jīng)途徑，由于濃縮液中混合大分子多糖的作 用，早期蛋白化84表達缺失，導(dǎo)致化44、IE2不參與肥MV復(fù)制體，從而導(dǎo)致肥MV在宿主細胞內(nèi) 不能復(fù)制。
[0026] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的藥物組合物既可W阻止HCMV進入受體細胞，形成了抗 HCMV病毒的第一道防線，又可W全面阻遏HCMV在宿主細胞內(nèi)的復(fù)制，可有效阻遏巨細胞病 毒在母嬰之間傳遞，保證母嬰安全。
【具體實施方式】
[0027] W下具體實施例對本發(fā)明作進一步闡述，但不作為對本發(fā)明的限定。
[0028] 實施例1
[0029] 配方:蟲草0.1份、靈芝1份、黑木耳0.5份和羅漢果8份。
[0030] 制備方法：
[0031] 1)將配方量的蟲草、靈芝、黑木耳粉碎，W90V%乙醇為溶媒進行提取，乙醇的用量 為混合粉末重量的8倍，回流提取化，將提取液過濾，取濾渣備用；
[0032] 2)將步驟1)的濾渣加水提取，水的加入量為濾渣重量的8倍，回流提取化，將提取 液過濾，取濾液備用；
[0033] 3)將羅漢果粉碎，W90V%乙醇為溶媒進行提取，乙醇的用量為羅漢果粉末重量的 8倍，回流提取化，將提取液過濾，取濾渣備用；
[0034] 4)將步驟3)的濾渣加水提取，水的加入量為濾渣重量的8倍，回流提取化，將提取 液過濾，取濾液備用；
[0035] 5)將步驟4)的濾液過截留分子量為1000道爾頓的膜過濾裝置，收集流出液；
[0036] 6)將步驟2)的濾液過截留分子量為15000道爾頓的膜過濾裝置，收集濃縮液；
[0037] 7)將步驟5)的流出液和步驟6)的濃縮液混勻，濃縮，干燥，即得。
[003引實施例2
[0039] 配方:蟲草0.5份、靈芝2份、黑木耳1份和羅漢果10份。
[0040] 制備方法：
[0041] 1)將配方量的蟲草、靈芝、黑木耳粉碎，W95V%乙醇為溶媒進行提取，乙醇的用量 為混合粉末重量的10倍，回流提取3次，每次化，將提取液合并，過濾，取濾渣備用；
[0042] 2)將步驟1)的濾渣加水提取，水的加入量為濾渣重量的10倍，回流提取3次，每次 3h，將提取液合并，過濾，取濾液備用；
[0043] 3)將羅漢果粉碎，W95V%乙醇為溶媒進行提取，乙醇的用量為羅漢果粉末重量的 10倍，回流提取3次，每次化，將提取液合并，過濾，取濾渣備用；
[0044] 4)將步驟3)的濾渣加水提取，水的加入量為濾渣重量的10倍，回流提取3次，每次 3h，將提取液過濾，取濾液備用；
[0045] 5)將步驟4)的濾液過截留分子量為1000道爾頓的膜過濾裝置，收集流出液；
[0046] 6)將步驟2)的濾液過截留分子量為15000道爾頓的膜過濾裝置，收集濃縮液；
[0047] 7)將步驟5)的流出液和步驟6)的濃縮液混勻，濃縮，干燥，即得。
[004引實施例3
[0049]配方:蟲草0.2份、靈芝1.5份、黑木耳0.6份和羅漢果9份。
[(K)加]制備方法：
[0051] 1)將配方量的蟲草、靈芝、黑木耳粉碎，W90V%乙醇為溶媒進行提取，乙醇的用量 為混合粉末重量的9倍，回流提取2次，每次化，將提取液合并，過濾，取濾渣備用；
[0052] 2)將步驟1)的濾渣加水提取，水的加入量為濾渣重量的9倍，回流提取2次，每次 2h，將提取液合并，過濾，取濾液備用；
[0053] 3)將羅漢果粉碎，W95V%乙醇為溶媒進行提取，乙醇的用量為羅漢果粉末重量的 9倍，回流提取2次，每次化，將提取液合并，過濾，取濾渣備用；
[0054] 4)將步驟3)的濾渣加水提取，水的加入量為濾渣重量的9倍，回流提取2次，每次 2h，將提取液合并，過濾，取濾液備用；
[0055] 5)將步驟4)的濾液過截留分子量為1000道爾頓的膜過濾裝置，收集流出液；
[0056] 6)將步驟2)的濾液過截留分子量為15000道爾頓的膜過濾裝置，收集濃縮液；
[0057] 7)將步驟5)的流出液和步驟6)的濃縮液混勻，濃縮，干燥，即得。
[0化引實施例4
[0059] 配方:蟲草0.1份、靈芝2份、黑木耳0.5份和羅漢果10份。
[0060] 制備方法：
[0061] 1)將配方量的蟲草、靈芝、黑木耳粉碎，W90V%乙醇為溶媒進行提取，乙醇的用量 為混合粉末重量的10倍，回流提取化，將提取液過濾，取濾渣備用；
[0062] 2)將步驟1)的濾渣加水提取，水的加入量為濾渣重量的8倍，回流提取3次，每次 化，將提取液合并，過濾，取濾液備用；
[0063] 3)將羅漢果粉碎，W95V%乙醇為溶媒進行提取，乙醇的用量為羅漢果粉末重量的 8倍，回流提取3次，每次化，將提取液合并，過濾，取濾渣備用；
[0064] 4)將步驟3)的濾渣加水提取，水的加入量為濾渣重量的10倍，回流提取化，將提取 液過濾，取濾液備用；
[0065] 5)將步驟4)的濾液過截留分子量為1000道爾頓的膜過濾裝置，收集流出液；
[0066] 6)將步驟2)的濾液過截留分子量為15000道爾頓的膜過濾裝置，收集濃縮液；
[0067] 7)將步驟5)的流出液和步驟6)的濃縮液混勻，濃縮，干燥，即得。
[006引實驗例
[0069] 選婦產(chǎn)科口診病例2800例進行篩查，檢測血清中人巨細胞病毒HCMV-IgG、HCMV- IgM，發(fā)現(xiàn)HCMV-IgM陽性者150例作為研究對象，隨機分為5組，每組30人，分為實驗組1~4， 對照組。
[0070] 1、病例納入標準
[0071] 年齡為22-35歲懷孕婦女，均為非素食者，全身一般情況W及營養(yǎng)狀況良好。
[0072] 2、排除標準
[0073] 排除屯、、肝、腎、肺等臟器重大疾病患者，煙酒嗜好者和重金屬元素接觸史者。
[0074] 3、對照組1用金葉敗毒顆粒(武漢中聯(lián)藥業(yè)集團股份有限公司生產(chǎn)，組成為大青 葉、蒲公英、金銀花、魚腥草，每袋lOg)治療，每日3次，每次1袋;實驗組服用實施例1~4制得 的藥物，一日3次，每次用量5mg。兩組連續(xù)服用14天，停藥1周后無菌抽取靜脈血4ml，取血清 于-20°C保存，復(fù)查肥MV-IgM轉(zhuǎn)陰率。
[0075] 待嬰兒出生2周后，無菌抽取嬰兒靜脈血4ml，取血清于-20°C保存，復(fù)查肥MV-IgM， 統(tǒng)計嬰兒陽性病例數(shù)。
[0076] 4、實驗結(jié)果
[0077]
[007引
[0079] 注：與對照組相比，沖<0.05;*沖<0.01。
【主權(quán)項】
1. 抗巨細胞病毒的藥物組合物，其特征在于：包括以下重量份的組分：蟲草0.1~0.5 份、靈芝1~2份、黑木耳0.5~1份和羅漢果8~10份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗巨細胞病毒的藥物組合物，其特征在于：各組分的重量份 為:蟲草0.1~0.2份、靈芝1~1.5份、黑木耳0.5~0.6份和羅漢果8~10份。3. 權(quán)利要求1或2所述的抗巨細胞病毒的藥物組合物的制備方法，其特征在于:包括以 下步驟： 1) 將配方量的蟲草、靈芝、黑木耳粉碎，以乙醇為溶媒進行提取，將提取液過濾，取濾渣 備用； 2) 將步驟1)的濾渣加水提取，將提取液過濾，取濾液備用； 3) 將羅漢果粉碎，以乙醇為溶媒進行提取，將提取液過濾，取濾渣備用； 4) 將步驟3)的濾渣加水提取，將提取液過濾，取濾液備用； 5) 將步驟4)的濾液過截留分子量為1000道爾頓的膜過濾裝置，收集流出液； 6) 將步驟2)的濾液過截留分子量為15000道爾頓的膜過濾裝置，收集濃縮液； 7) 將步驟5)的流出液和步驟6)的濃縮液混勻，濃縮，干燥，即得。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗巨細胞病毒的藥物組合物的制備方法，其特征在于:步驟1) 和步驟3)中，乙醇的用量為藥材粉末重量的8~10倍，回流提取1~3次，每次1~3h。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的抗巨細胞病毒的藥物組合物的制備方法，其特征在于：乙醇的 體積濃度為90~95 %。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的抗巨細胞病毒的藥物組合物的制備方法，其特征在于:步驟2) 和步驟4)中，水的加入量為濾渣重量的8~10倍，回流提取1~3次，每次1~3h。
【文檔編號】A61K36/42GK105998142SQ201610623874
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年7月29日
【發(fā)明人】蘇華
【申請人】桂林淮安天然保健品開發(fā)有限公司