大黃酸在制備抗抑郁癥藥物中的用圖
【專利摘要】本發(fā)明涉及制藥技術(shù)，特別涉及大黃酸在制備抗抑郁癥藥物中的用途。本發(fā)明提供一種抗抑郁癥的藥物，其抗抑郁藥效成分為大黃酸或大黃酸的鹽。其藥效劑量為每千克體重0.01?100mg大黃酸或每千克體重0.01?100mg大黃酸相當(dāng)量的大黃酸的鹽；給藥后60分鐘內(nèi)即可產(chǎn)生抗抑郁效果。這種藥物具有抗抑郁效果顯著、用藥量少、起效快等優(yōu)點。在哺乳動物小鼠實驗中，大黃酸快速抗抑郁癥的功效比常規(guī)抗抑郁藥物丙咪嗪更強，有望成為快速、高效的抗抑郁新藥。
【專利說明】
大黃酸在制備抗抑郁癥藥物中的用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及制藥技術(shù)，特別涉及大黃酸在制備抗抑郁癥藥物中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002]抑郁癥又稱抑郁障礙，以顯著而持久的心境低落為主要臨床特征。臨床可見心境低落與其處境不相稱，情緒的消沉可以從悶悶不樂到悲痛欲絕，自卑抑郁，甚至悲觀厭世，可有自殺企圖或行為。部分病例有明顯的焦慮和運動性激越，嚴(yán)重者可出現(xiàn)幻覺、妄想等精神病癥狀。每次發(fā)作持續(xù)至少兩周以上，長達(dá)數(shù)年。多數(shù)病例有反復(fù)發(fā)作的傾向，每次發(fā)作大多數(shù)可以緩解，部分可有殘留癥狀或轉(zhuǎn)為慢性。
[0003]藥物治療是中度以上抑郁發(fā)作的主要治療措施。傳統(tǒng)的三環(huán)類、四環(huán)類抗抑郁藥和單胺氧化酶抑制劑由于不良反應(yīng)較大，應(yīng)用明顯減少。目前臨床上一線的抗抑郁藥主要包括選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑、5-羥色胺和去甲腎上腺素再攝取抑制劑等，但使用這類藥物起效慢，作用譜窄，停藥后易復(fù)發(fā)。目前，整個業(yè)界都在研發(fā)見效快、副作用小、更為有效的治療藥物。
[0004]大黃酸是一種化學(xué)物質(zhì)，為咖啡色針晶，熔點321_322°C，不溶于水，能溶于吡啶、碳酸氫鈉水溶液，微溶于乙醇、苯、氨仿、乙醚和石油醚。大黃酸來源于寥科植物掌葉大黃及何首烏、蕓香、番瀉葉等多種藥用植物的根莖或莢果等部位，具有(I)抗腫瘤活性:對小鼠黑色素瘤、艾氏腹水癌、肝癌、乳腺癌、P388白血病細(xì)胞都有一定的抑制作用；(2)抗菌活性:對葡萄球菌、鏈球菌、白喉桿菌、枯草桿菌、副傷寒桿菌、痢疾桿菌等均有抑制作用；(3)免疫抑制作用:能抑制生物體抗體產(chǎn)生，抑制碳粒廓清能力，減輕免疫器官的重量，降低白細(xì)胞數(shù)；
[4]利尿作用:能使尿中鈉、鉀離子濃度升高，促進(jìn)輸尿管蠕動，增加尿量；(5)瀉下作用:大黃酸本身無瀉下作用，其腸內(nèi)菌轉(zhuǎn)化產(chǎn)物大黃酸蒽酮有瀉下活性，能夠降低結(jié)腸對鈉和氯離子的吸收，增加鉀離子分泌；(6)治療糖尿病腎病:能夠改善糖代謝異常，逆轉(zhuǎn)胰島素抵抗，有效防止糖尿病腎病，并且安全性較好。
[0005]目前，應(yīng)用大黃酸作為藥效成分預(yù)防/治療抑郁癥還未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]基于發(fā)明人的偶然發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供一種以大黃酸或大黃酸的鹽作為藥效成分的抗抑郁藥，這種藥物具有抗抑郁效果顯著、用藥量少、起效快等優(yōu)點。
[0007]本發(fā)明請求保護(hù)的技術(shù)方案如下:
[0008]—種抗抑郁癥的藥物，其特征在于，其抗抑郁藥效成分為大黃酸或大黃酸的鹽。
[0009]—種抗抑郁癥的藥物組合物，其特征在于，其抗抑郁藥效組分包括大黃酸或大黃酸的鹽。
[0010]—種快速抗抑郁癥的藥物，其特征在于，其藥效成分為大黃酸或大黃酸的鹽。
[0011 ]所述快速抗抑郁癥的藥物，其特征在于，其藥效劑量為每千克體重0.01-1 OOmg大黃酸或每千克體重0.0l-1OOmg大黃酸相當(dāng)量的大黃酸的鹽;給藥后60分鐘內(nèi)可產(chǎn)生抗抑郁效果。
[0012]任一所述的藥物，其特征在于，還包括與大黃酸同時施用后對治療抑郁癥有積極作用的藥物成分和/或使大黃酸穩(wěn)定性提高的藥學(xué)上可接受的成分。
[0013]任一所述的藥物，其特征在于，還包括制藥學(xué)上可接受的輔助成分。
[0014]任一所述的藥物，其特征在于，其劑型為粉劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、溶液、懸浮液或注射液。
[0015]大黃酸在制備抗抑郁癥藥物中的用途，其特征在于，以大黃酸或大黃酸的鹽為藥效成分制備抗抑郁癥藥物。
[0016]所述用途中，所述抗抑郁癥藥物的藥效劑量為每千克體重0.0l-1OOmg大黃酸或每千克體重0.0l-1OOmg大黃酸相當(dāng)量的大黃酸的鹽;給藥后60分鐘內(nèi)可產(chǎn)生抗抑郁效果。
[0017]—種治療/預(yù)防抑郁癥的方法，其特征在于，使受試者攝入權(quán)利要求1?7任一所述的藥物。
[0018]給藥劑量為:每天每千克體重提供0.0l-1OOmg大黃酸，或0.0l-1OOmg大黃酸相當(dāng)量的大黃酸的鹽。
[0019]本發(fā)明的研究發(fā)現(xiàn)，在哺乳動物小鼠實驗中，大黃酸具有快速抗抑郁癥的功效，且比常規(guī)抗抑郁藥物丙咪嗪更有效。
[0020]在小鼠動物模型懸尾實驗中發(fā)現(xiàn)，大黃酸的高劑量組(10mg/kg)與I%DMSO對照組相比，在注射60分鐘就能明顯縮短小鼠懸尾不動時間。低劑量組不動時間也顯示出降低趨勢；而注射60分鐘后丙咪嗪和生理鹽水相比不動時間沒有明顯縮短。結(jié)果表明高劑量的大黃酸在很短的時間內(nèi)即可起效，且效果極顯著，可以對抗小鼠因強迫懸尾造成的抑郁癥狀。且大黃酸在劑量低于丙咪嗪的情況下，比丙咪嗪更早地顯示出抗抑郁效果。實施例1中列出了在注射60分鐘之后各組小鼠在所觀察的6分鐘內(nèi)，后4分鐘內(nèi)的累計不動時間，結(jié)果如圖2所示。
[0021]并且，在強迫游泳實驗中，大黃酸劑量10mg/kg時的不動時間與丙咪嗪陽性對照組(15mg/kg)的不動時間相當(dāng)(如圖3所示)ο和丙咪嗪相比，大黃酸有效劑量更低。由此表明，大黃酸對模型小鼠具有較強的抗抑郁作用，具有作為快速抗抑郁癥藥物的潛力。
[0022]本發(fā)明抗抑郁藥物的有效成分大黃酸，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如圖1所示，還具有抗腫瘤、抗菌、消炎、有效防止糖尿病、腎病等功效，安全性好。因此，大黃酸有望成為快速、高效抗抑郁新藥。
[0023]基于本發(fā)明的實驗數(shù)據(jù)，本發(fā)明請求保護(hù)以大黃酸為藥效成分的抗抑郁癥藥物或藥物組合物，即任何標(biāo)識著以大黃酸為藥效成分且標(biāo)識著其適應(yīng)癥包含抑郁癥的藥物或快速抗抑郁癥的藥物，或以大黃酸為藥效組分的藥物組合物都是本發(fā)明請求保護(hù)的專利抗抑郁癥藥物。本發(fā)明還請求保護(hù)大黃酸在制備抗抑郁癥藥物中的用途，任何以大黃酸為藥效成分制備抗抑郁癥藥物、快速抗抑郁癥藥物、抗抑郁癥藥物組合物的以盈利為目的生產(chǎn)行為都屬于本發(fā)明請求保護(hù)的范圍。
[0024]本發(fā)明采用的藥物篩選實驗為:強迫游泳實驗和小鼠懸尾實驗，是常用的兩種動物行為絕望抑郁癥模型實驗，能較好地保證篩選結(jié)果的可靠性。
[0025]小鼠強迫游泳實驗已用于很多抗抑郁藥物的篩選。而且大多數(shù)有臨床治療作用的抗抑郁藥也被證實在強迫游泳實驗中能有效減少不動時間。所謂不動是指“動物在水中停止掙扎，或呈漂浮狀態(tài)，僅露出鼻孔保持呼吸，僅有細(xì)小的肢體運動，以保持頭部浮在水面”。在試驗前給予擬篩選的藥物。由于動物在強迫狀態(tài)下游泳使動物不能逃出惡劣環(huán)境，導(dǎo)致動物行為絕望。此種模型方法簡便，可靠，已廣泛用于抗抑郁藥劑的篩選和評價。
[0026]小鼠懸尾實驗是小鼠在懸尾狀態(tài)下不再掙扎，呈現(xiàn)特有的安靜不動狀態(tài)，抗抑郁藥可明顯縮短不動狀態(tài)的持續(xù)時間。試驗時，將小鼠尾部固定、倒懸。勿使小鼠尾部扭曲折疊。計錄不動時間。不動指標(biāo)為:“動物除呼吸外所有肢體均不動”。懸尾實驗對各種抗抑郁藥均很敏感，而且避免了游泳實驗中溫度和動物運動功能障礙的干擾，因而在用一些鼠種篩選抗抑郁藥物時，可以有效地驗證和補充強迫游泳實驗的結(jié)果。
[0027]本發(fā)明提供的大黃酸在制備抗抑郁癥藥物中的用途，所制備而得的抗抑郁癥藥物，可以基于制藥領(lǐng)域的技術(shù)人員的常識而加入不影響藥物藥效的輔助成分，如載體、賦形劑、矯味劑等。由于該藥物通過口服、注射、皮下包埋等方式均可見效，因此，劑型可以是多樣的，包括但不限于粉劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、溶液、懸浮液或注射液。
[0028]本發(fā)明提供的抗抑郁癥藥物還可以混合有其它與大黃酸或其衍生物配合使用對治療抑郁癥有積極作用的藥物成分。
[0029]本領(lǐng)域技術(shù)人員可以加入使大黃酸穩(wěn)定性提高的穩(wěn)定劑，只要不影響藥效的發(fā)揮，所得的抗抑郁癥藥物均在本發(fā)明要求保護(hù)的范圍內(nèi)。
[0030]本發(fā)明所提供的抗抑郁癥藥物，所述抗抑郁癥包括預(yù)防和治療兩個階段。
[0031 ]所述抗抑郁癥藥物的用量為:每天每千克體重提供0.0l-1OOmg大黃酸，或0.01-1OOmg大黃酸相當(dāng)量的大黃酸的鹽。
[0032]所述抗抑郁癥藥物的給藥方式為口服、滴注或注射;給藥對象為哺乳動物，所述哺乳動物包括人。
[0033]由于經(jīng)典抑郁動物模型中動物不動時間的縮短可能是由于藥物的中樞興奮性作用所引起，因此本發(fā)明還同時進(jìn)行了小鼠開野實驗(Open field test)，以檢驗小鼠的自主活動性，避免中樞興奮藥的干擾。結(jié)果表明，與對照組相比，高濃度大黃酸對小鼠自主活動無顯著影響，故可排除假陽性結(jié)果的可能性，證明大黃酸確實具有顯著的抗抑郁作用。
[0034]本發(fā)明請求保護(hù)的藥物組合物，是指人工復(fù)配的以兩種及以上藥效組分混合在一起制得的藥物。例如這種組合物比如本發(fā)明采用的大黃酸與
【申請人】之前申請并公布的蟲草素、香菇多糖、蝦青素等物質(zhì)組合而成的抗抑郁癥藥物組合物。區(qū)別于包含某種藥效成分但是成分復(fù)雜的天然植物。
【附圖說明】
[0035]圖1.大黃酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。
[0036]圖2.大黃酸對小鼠懸尾實驗的影響，
[0037]其中，縱坐標(biāo):懸尾實驗小鼠不動時間(S)；橫坐標(biāo):從左到右依次為:I %DMS0對照組，大黃酸低劑量組(5mg/kg)，大黃酸高劑量組(10mg/kg)，生理鹽水對照組，丙咪嗪陽性對照組(15mg/kg)。
[0038]結(jié)果:CDl雄性小鼠經(jīng)不同劑量的大黃酸腹腔注射60分鐘后，高劑量組在小鼠懸尾實驗中顯示出極顯著的抗抑郁效果(每組動物~=24，1:檢驗噸<0.05，*噸<0.01)。
[0039]圖3.大黃酸對小鼠強迫游泳實驗的影響，
[0040]其中，縱坐標(biāo):強迫游泳實驗小鼠不動時間(s)，橫坐標(biāo):從左到右依次為:I %DMSO對照組，大黃酸低劑量組(5mg/kg)，大黃酸高劑量組(10mg/kg)，生理鹽水對照組，丙咪嗪陽性對照組(15mg/kg) ο
[0041]結(jié)果:CDl雄性小鼠經(jīng)不同劑量的大黃酸腹腔注射五天后，在小鼠強迫游泳實驗中顯示出顯著抗抑郁效果(每組動物N=8-10，t檢驗*p<0.05，**p<0.01)。
【具體實施方式】
[0042]以下通過具體實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明，需要理解的是，下述實施例僅作為解釋和說明，不以任何形式限制本發(fā)明的范圍。
[0043]下述實施方式中，未特別說明的生物化學(xué)試劑均為本領(lǐng)域常規(guī)試劑，可以按照本領(lǐng)域常規(guī)方法配制而得或商購獲得，規(guī)格為實驗室純級即可。
[0044]實施例1.大黃酸對小鼠懸尾實驗的影響
[0045]實驗動物:
[0046]CDl種小鼠，雄性，重量30-40克，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，許可證號:SCXK(京)2012-0001。實驗前一周將動物分籠飼養(yǎng)，明暗周期12h/12h，室溫20?220C，食水自由，飼料由中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所實驗動物中心提供。
[0047]實驗藥品:
[0048]大黃酸，購自上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，貨號04-2008。
[0049]鹽酸丙咪嘆(Imipraminehydrochloride)為Sigma公司產(chǎn)品，貨號 17379，批號056K1380。
[0050]實驗器材:
[0051 ] 橫桿；膠布；Sumsung Intelli_200m數(shù)碼攝像機(韓國三星公司)；JUNSO多功能計時器。
[0052]實驗步驟:
[0053]雄性⑶I小鼠經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，分成5組，每組24只。分別為
[0054]I %DMS0對照組(DMS0溶于生理鹽水)、
[0055]大黃酸低劑量組(5mg/kg，溶于1%DMS0)、
[0056]大黃酸高劑量組(10mg/kg，溶于I %DMS0)、
[0057]傳統(tǒng)抗抑郁藥物丙咪嗪陽性對照組(15mg/kg丙咪嗪，生理鹽水溶解)、
[0058]生理鹽水對照組。
[0059]上午10時按0.3ml/30g體重腹腔注射給藥。
[0060]注射60分鐘后，每組隨機選取12只小鼠進(jìn)行懸尾實驗；
[0061 ]注射90分鐘后，對每組剩下的12只小鼠進(jìn)行懸尾實驗；
[0062]小鼠懸尾實驗時，用膠布將小鼠尾在距尾尖2厘米處粘在一根水平橫桿上，使動物成倒掛狀態(tài)，其頭部離桌面約15厘米。觀察6分鐘，記錄后4分鐘內(nèi)的累計不動時間。不動指標(biāo)為:動物除呼吸外所有肢體均不動。
[0063]實驗結(jié)果:
[0064]統(tǒng)計方法:實驗結(jié)果用均值土SE表示，兩個樣本平均數(shù)比較用t檢驗。
[0065]大黃酸高劑量組小鼠在注射后60分鐘抑郁癥狀開始緩解，即活動量相對空白對照組越來越頻繁，明顯在縮短不動時間。而丙咪嗪陽性對照組在注射后60分鐘內(nèi)，活動量與生理鹽水對照組無差別，直至60分鐘之后，才開始有相對頻繁地活動。
[0066]丙咪嗪陽性對照組和生理鹽水組的小鼠相比，注射60分鐘后不動時間沒有明顯縮短，注射90分鐘后開始明顯縮短懸尾不動時間。
[0067]注射60分鐘之后觀察結(jié)果，如圖2所示，大黃酸高劑量組的不動時間與I %DMSO對照組相比由102.29±12.378降低為20.33±5.528(?<0.01)，縮短了80.1%。大黃酸低劑量組的小鼠不動時間也顯示出降低趨勢。
[0068]由此表明，高劑量的大黃酸在很短的時間內(nèi)即可起效，且效果極顯著，可以對抗小鼠因強迫懸尾造成的抑郁癥狀。
[0069]實施例2.大黃酸對動物抑郁模型強迫游泳實驗的影響
[0070]實驗動物:
[0071]CDl種小鼠，雄性，由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，許可證號:SCXK(京)2012-0001。實驗前一周將動物分籠飼養(yǎng)，明暗周期12h/12h，室溫20?22°C，食水自由，飼料由中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所實驗動物中心提供。
[0072]實驗藥物:
[0073]大黃酸，購自上海中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究中心，貨號04-2008。
[0074]鹽酸丙咪嘆(Imipraminehydrochloride)為Sigma公司產(chǎn)品，貨號 17379，批號056K1380。
[0075]試驗儀器:
[0076]玻璃圓筒(高40cm，直徑14cm);小鼠開闊箱(長和寬分別為50cm，高40cm，底部16等分)；溫度計;JUNSO多功能計時器。
[0077]實驗步驟:
[0078]動物藥物注射:
[0079]CDl雄性小鼠，年齡7周，重量30-40克，適應(yīng)環(huán)境一周后開始實驗。動物隨機分為5組，每組8-10只，分別為I %DMS0對照組(DMS0溶于生理鹽水)、大黃酸低劑量組(5mg/kg，溶于I %DMS0)、大黃酸高劑量組(10mg/kg，溶于I %DMS0)、傳統(tǒng)抗抑郁藥物丙咪嗪陽性對照組(15mg/kg丙咪嗪，生理鹽水溶解)、生理鹽水對照組。每天上午10點開始腹腔注射，注射量為
0.3毫升/30克，每天腹腔注射一次，注射五天后開始強迫游泳實驗。
[0080]強迫游泳實驗:
[0081 ] 將各組⑶I鼠單個垂直地放入有機玻璃圓筒中(40cm高X 14cm直徑)，水深25cm，水溫21-23°C。各給藥組和對照組錄像6分鐘，比較各組小鼠在后4分鐘內(nèi)的累計不動時間。不動時間判定:小鼠漂浮在水面，不努力爬出圓筒，僅做一些必須保持其頭部在水面的動作。
[0082]統(tǒng)計分析方法:
[0083]實驗結(jié)果用均值土SE表示，兩個樣本平均數(shù)比較用t檢驗。
[0084]結(jié)果如圖3所示，與1%DMS0對照組比較，大黃酸高劑量組小鼠強迫游泳4分鐘內(nèi)的不動時間顯著縮短，且具有一定的劑量依賴性，大黃酸劑量1 m g / k g時的不動時間與I %DMSO對照組相比，由98.86± 19.67s降低為48.44± 13.69s(p<0.05)，縮短 J51%；和傳統(tǒng)抗抑郁藥丙咪嗪相比，有效劑量更低。由此表明，大黃酸具有較強的抗抑郁作用。
[0085]實施例3.小鼠開野實驗
[0086]由于經(jīng)典抑郁動物模型中動物不動時間的縮短可能是由于藥物的中樞興奮性作用引起，所以我們進(jìn)行了小鼠開野實驗來檢驗大黃酸的中樞興奮性。
[0087]實驗結(jié)果顯示，小鼠I小時在開闊箱中運動的總距離在大黃酸高劑量處理后(66.41+5.33111)與對照組(56.40±3.53111)相比，無明顯變化(厶110￥3 4>0.05小=8-10)，故可排除其引發(fā)躁狂狀態(tài)的可能性，因此，大黃酸確實具有顯著的抗抑郁效果。
[0088]實施例4藥物組合物藥效實驗
[0089]重復(fù)實施例1-3的實驗，只是實驗藥物為冬凌草甲素與蟲草素、香菇多糖、蝦青素、靈芝酸A等在先公開的抗抑郁有效成分的1:1組合。
[0090]實驗結(jié)果顯示小鼠懸尾實驗、強迫游泳實驗、開野實驗結(jié)果與實施例1-3顯示相同的趨勢和顯著性。
【主權(quán)項】
1.一種抗抑郁癥的藥物，其特征在于，其抗抑郁藥效成分為大黃酸或大黃酸的鹽。2.一種抗抑郁癥的藥物組合物，其特征在于，其抗抑郁藥效組分包括大黃酸或大黃酸的鹽。3.一種快速抗抑郁癥的藥物，其特征在于，其藥效成分為大黃酸或大黃酸的鹽。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速抗抑郁癥的藥物，其特征在于，其藥效劑量為每千克體重0.0l-1OOmg大黃酸或每千克體重0.0l-1OOmg大黃酸相當(dāng)量的大黃酸的鹽;給藥后60分鐘內(nèi)可產(chǎn)生抗抑郁效果。5.根據(jù)權(quán)利要求1?4任一所述的藥物，其特征在于，還包括與大黃酸同時施用后對治療抑郁癥有積極作用的藥物成分和/或使大黃酸穩(wěn)定性提高的藥學(xué)上可接受的成分。6.根據(jù)權(quán)利要求1?4任一所述的藥物，其特征在于，還包括制藥學(xué)上可接受的輔助成分。7.根據(jù)權(quán)利要求1?4任一所述的藥物，其特征在于，其劑型為粉劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、溶液、懸浮液或注射液。8.大黃酸在制備抗抑郁癥藥物中的用途，其特征在于，以大黃酸或大黃酸的鹽為藥效成分制備抗抑郁癥藥物。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用途，所述抗抑郁癥藥物的藥效劑量為每千克體重0.01-1OOmg大黃酸或每千克體重0.0l-1OOmg大黃酸相當(dāng)量的大黃酸的鹽;給藥后60分鐘內(nèi)可產(chǎn)生抗抑郁效果。10.一種治療/預(yù)防抑郁癥的方法，其特征在于，使受試者攝入權(quán)利要求1?7任一所述的藥物； 給藥劑量為:每天每千克體重提供0.0l-1OOmg大黃酸，或0.0l-1OOmg大黃酸相當(dāng)量的大黃酸的鹽。
【文檔編號】A61P25/24GK106038522SQ201610494641
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月28日
【發(fā)明人】杜若甫, 陳正華, 單麗萍
【申請人】北京冠瑞金生物科技有限公司