一種利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，該方法醇提后結(jié)合控溫泡沫分離和樹脂富集來提取海參內(nèi)臟皂苷，使分離更徹底，有效的保護(hù)了活性成分的生物活性，大大減少原料中海參多肽對(duì)皂苷純度的影響，得到的皂苷保存有完好的結(jié)構(gòu)和有效地生物活性，具有良好的抗自由基氧化作用，純度高，提取效率高，一步上樣，大大縮短提取時(shí)間、降低能耗。
【專利說明】
一種利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種海產(chǎn)品廢棄物再利用的方法，具體是一種利用海參內(nèi)臟提取高純 度海參內(nèi)臟皂苷的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 海參為高蛋白、低脂肪無脊椎動(dòng)物，明代以后被本草收錄，列為補(bǔ)益藥，是營養(yǎng)價(jià) 值極高的保健食品。隨著海參食用及藥用價(jià)值的日益顯現(xiàn)，海參的需求量與日倶增，其養(yǎng)殖 和銷售規(guī)模也逐漸擴(kuò)大，由此產(chǎn)生大量的下腳料，如內(nèi)臟(腸、卵等）?，F(xiàn)實(shí)生產(chǎn)進(jìn)程中，海參 內(nèi)臟往往被當(dāng)做加工的廢棄物丟棄，造成極大的資源浪費(fèi)和環(huán)境污染，如何對(duì)其中資源進(jìn) 行利用和加工，是深度開發(fā)的前提和依據(jù)。
[0003] 國內(nèi)外通過相關(guān)技術(shù)對(duì)海參內(nèi)臟中活性物質(zhì)的分離鑒定以及生物醫(yī)學(xué)作用進(jìn)行 了不斷深入的研究，證實(shí)海參內(nèi)臟中含有海參皂苷、海參粘多糖、活性肽等多種成分。海參 內(nèi)臟皂苷，又稱海參素，是海參防御外界不良環(huán)境所產(chǎn)生的主要次生代謝產(chǎn)物，具有抗腫 瘤、提高免疫力、抗新血管生成、抗凝血、促進(jìn)纖維蛋白溶解、抑制栓塞形成、抗炎、抗菌抗病 毒的作用。
[0004] 目前已知的海參皂苷按照苷元類型可分為以下兩種：海參烷型和非海參烷型，海 參烷型苷元一般為18(20)內(nèi)酯環(huán)，非海參烷型苷元有18(16)內(nèi)酯環(huán)或無內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)。從糖 鏈組成來看，植物源皂苷糖鏈可由2~3個(gè)支鏈構(gòu)成，而海參皂苷糖鏈多由單一直鏈構(gòu)成，糖 分子數(shù)目一般不超過6個(gè)，且常伴有硫酸化取代基團(tuán)的出現(xiàn)。
[0005] 海參內(nèi)臟和體壁所含的皂苷類成分在結(jié)構(gòu)上在母核結(jié)構(gòu)上基本相同，但是其基團(tuán) 有所不同。在含量上，體壁皂苷的含量較之內(nèi)臟要低且一年四季變化不明顯，海參內(nèi)臟中的 皂苷含量在其繁殖季節(jié)可增加至平時(shí)的 80~200倍，種類也比體壁皂苷豐富，是一種極具開 發(fā)潛力的天然活性資源。
[0006] 中國專利文獻(xiàn)CN 102512452A(申請(qǐng)?zhí)枺?01110384721.3)公開一種利用海參體腔 液制備海參皂苷的工藝方法，將海參體腔液過濾去除不溶物;清液進(jìn)行濃縮后拌入適量硅 膠粉，鼓風(fēng)干燥;所得固體物質(zhì)粉碎后采用石油醚提取脫脂;脫脂后用乙醇提取2~3次，收 集提取液濃縮后通過大孔吸附樹脂柱，而后用水沖洗大孔吸附樹脂柱去除雜質(zhì)，再用乙醇 洗脫吸附在大孔吸附樹脂上的海參皂苷成分，收集洗脫液減壓濃縮至浸膏狀，干燥，得海參 皂苷干品，經(jīng)過實(shí)際應(yīng)用發(fā)現(xiàn)，該方法提取效果差，提取效率低，純度低，夾雜其他雜質(zhì)成分 較多。
[0007] 國內(nèi)對(duì)海參皂苷的研究和開發(fā)主要集中在體壁，對(duì)于內(nèi)臟特有的這類皂苷成分， 未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。另外，海參吐臟等生物學(xué)現(xiàn)象非常獨(dú)特，其強(qiáng)大的組織再生能力引起全 球的研究人員的關(guān)注，海參內(nèi)臟成分成為研究人員關(guān)注的焦點(diǎn)，因此如何提取高純度海參 內(nèi)臟皂苷至關(guān)重要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的 方法，本發(fā)明利用海參內(nèi)臟為原料，結(jié)合控溫泡沫分離和樹脂富集，提取得到的海參內(nèi)臟皂 苷純度高，提取效率高。
[0009] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0010] -種利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，包括步驟如下：
[0011] (1)收集海參內(nèi)臟瀝去水分，烘干、粉碎，然后加入乙醇，升溫至60~85°C進(jìn)行提取 60~240min，經(jīng)固液分離得到海參皂苷提取液，提取液采用減壓蒸餾回收乙醇后得海參皂 苷浸膏；
[0012] (2)將海參皂苷浸膏配制成懸浮液，懸浮液采用控溫泡沫分離進(jìn)行分離純化，得到 的泡沫經(jīng)破泡沫后得到海參皂苷破沫液;所述的控溫泡沫分離，鼓泡氣體為空氣，控溫溫度 為40~60°C，鼓泡氣體流速1~3mL/min，一個(gè)操作周期30~180min;
[0013] (3)將步驟(2)得到的海參皂苷破沫液稀釋后直接上樣至大孔樹脂柱頂端，吸附完 全后用不同濃度的乙醇進(jìn)行兩步洗脫，收集洗脫液，進(jìn)行干燥處理即得高純度海參內(nèi)臟皂 苷。
[0014] 本發(fā)明優(yōu)選的，步驟(2)，所述的控溫泡沫分離，控溫溫度為40~55°C，鼓泡氣體流 速1 ~2mL/min〇
[0015] 最為優(yōu)選的，步驟（2)，所述的控溫泡沫分離，控溫溫度為45°C，鼓泡氣體流速 1·5mL/min〇
[0016] 本發(fā)明優(yōu)選的，步驟(2)中，采用向浸膏中加入浸膏重量10~15倍的水進(jìn)行懸浮， 制得懸浮液。
[0017] 本發(fā)明優(yōu)選的，步驟(2)中，所述的破沫方法為溶劑破沫法，選擇無水乙醇作為破 沫劑，將無水乙醇經(jīng)噴嘴噴入進(jìn)行破沫。
[0018] 本發(fā)明優(yōu)選的，步驟(3)中，所述海參皂苷破沫液稀釋是采用向海參皂苷破沫液中 加入水進(jìn)行稀釋，使其乙醇質(zhì)量濃度為20%_30%，直接通過管路栗至大孔樹脂柱頂端，作 為上柱液。
[0019] 本發(fā)明優(yōu)選的，步驟(3)中，所述大孔樹脂柱內(nèi)填料為D101樹脂，上柱吸附方式為 動(dòng)態(tài)吸附，上柱液以1 bv~1 Obv/h的流速通入大孔樹脂柱。
[0020] 本發(fā)明優(yōu)選的，大孔樹脂柱內(nèi)填料用量為每小時(shí)料液流量的1/20~1/10。
[0021] 本發(fā)明優(yōu)選的，步驟(3)中，兩步洗脫為飽和吸附后先用2~4倍柱體積、與上柱液 同等濃度的乙醇溶液進(jìn)行初步洗脫，然后用4~6倍柱體積、質(zhì)量濃度60 %~90 %的乙醇進(jìn) 行再次洗脫。
[0022]本發(fā)明優(yōu)選的，步驟（1)中，所述的海參內(nèi)臟為鮮品或凍干品，凍干品使用前進(jìn)行 化凍，海參內(nèi)臟優(yōu)選刺參內(nèi)臟，烘干溫度為60~80°C，粉碎至60-120目。
[0023]本發(fā)明優(yōu)選的，步驟（1)中，所述的乙醇的質(zhì)量濃度為92~96 %，乙醇的加入量為 海參內(nèi)臟粉末質(zhì)量的4~8倍，升溫至70~85 °C進(jìn)行提取2~3次。
[0024]本發(fā)明的特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn)：
[0025]本發(fā)明利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法結(jié)合控溫泡沫分離和樹脂 富集來提取海參內(nèi)臟皂苷，得到的皂苷保存有完好的結(jié)構(gòu)和有效地生物活性，具有良好的 抗自由基氧化作用，純度高，提取效率高。升溫至70~85°C進(jìn)行提取2~3次使細(xì)胞破碎充 分、強(qiáng)化胞內(nèi)物質(zhì)釋放和擴(kuò)散，提取更徹底、充分，控溫泡沫分離使懸浮液內(nèi)的表面活性物 質(zhì)聚集在氣泡的表面上，控溫溫度為40~60°C，鼓泡氣體流速1~3mL/min，使泡沫更加豐 富，使海參皂苷更多的聚集在氣泡的表面上，使分離更徹底，有效的保護(hù)了活性成分的生物 活性，大大減少原料中海參多肽對(duì)皂苷純度的影響，兩級(jí)分步純化對(duì)海參內(nèi)臟中皂苷實(shí)施 更進(jìn)一步的精制，D101樹脂吸附，海參皂苷破沫液稀釋后直接一步上樣，無需重新收集泡沫 進(jìn)行配制上柱液，大大縮短提取時(shí)間、降低能耗的同時(shí)提高提取效率。終產(chǎn)品海參內(nèi)臟皂苷 含量可達(dá)到85%以上，適合開展工業(yè)化生產(chǎn)；分離得到的皂苷保存有完好的結(jié)構(gòu)和有效地 生物活性，實(shí)驗(yàn)表明其具有良好的抗自由基氧化作用;變廢為寶，減少海參加工過程中副產(chǎn) 品對(duì)環(huán)境的污染，技術(shù)簡單、生產(chǎn)成本低，產(chǎn)品具有極高的利用價(jià)值。
【具體實(shí)施方式】
[0026]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0027] 實(shí)施例1
[0028] -種利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，具體步驟如下：
[0029] (1)海參內(nèi)臟鮮品100kg常溫解凍后100目濾布瀝去水分，80°C烘干、粉碎。加入海 參內(nèi)臟粉末質(zhì)量4倍量質(zhì)量濃度95 %的乙醇，升溫至60°C進(jìn)行醇提，時(shí)間為240min，提取2 次;合并提取液采用減壓蒸餾回收乙醇后得海參皂苷浸膏；
[0030] (2)浸膏加入浸膏重量10倍的水進(jìn)行懸浮混勻，制得懸浮液，將獲得的懸浮液用控 溫型泡沫分離器進(jìn)行分離，溫度為40°C，鼓泡氣體流速為1.5mL/min，分離時(shí)間180min，將無 水乙醇經(jīng)噴嘴噴入進(jìn)行破沫，得到海參皂苷破沫液；
[0031] (3)海參皂苷破沫液加入水稀釋為含乙醇20%的溶液，通過管路栗入D101大孔樹 脂柱床頂端，先以6倍柱體積、質(zhì)量濃度20 %的乙醇沖洗大孔樹脂柱去除鹽分、糖類、色素等 雜質(zhì)成分，然后用4倍柱體積(BV)、濃度90%的乙醇將吸附在大孔樹脂柱上的海參皂苷成分 洗脫下來，收集洗脫液減壓濃縮、烘干，得1.5kg類白色海參內(nèi)臟皂苷產(chǎn)品，經(jīng)檢測純度為 90% 〇
[0032] 實(shí)施例2
[0033] -種利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，包括步驟如下：
[0034] (1)海參內(nèi)臟鮮品100kg常溫解凍后100目濾布瀝去水分，80 °C烘干、粉碎；加入海 參內(nèi)臟粉末質(zhì)量8倍量質(zhì)量濃度95%乙醇，升溫至85°C進(jìn)行醇提，時(shí)間為60min，提取2次;合 并提取液采用減壓蒸餾回收乙醇后得海參皂苷浸膏；
[0035] (2)浸膏加入浸膏重量10倍的水進(jìn)行懸浮混勻，制得懸浮液;將獲得的懸浮液用控 溫型泡沫分離器進(jìn)行分離，溫度為60°C，鼓泡氣體流速為lmL/min，分離時(shí)間30min，將無水 乙醇經(jīng)噴嘴噴入進(jìn)行破沫，得到海參皂苷破沫液；
[0036] (3)海參皂苷破沫液加入水稀釋為含乙醇30%的溶液，通過管路栗入D101大孔樹 脂柱床頂端，以2倍柱體積、質(zhì)量濃度30 %的乙醇沖洗大孔樹脂柱去除鹽分、糖類、色素等雜 質(zhì)成分，最后用6倍柱體積(BV)、濃度60%的乙醇將吸附在大孔樹脂柱上的海參皂苷成分洗 脫下來，收集洗脫液減壓濃縮、烘干，得1.1kg類白色海參內(nèi)臟皂苷產(chǎn)品，經(jīng)檢測純度為 85%〇
[0037] 實(shí)施例3
[0038] -種利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，包括步驟如下：
[0039] (1)海參內(nèi)臟100kg常溫解凍后100目濾布瀝去水分，80 °C烘干、粉碎；加入海參內(nèi) 臟粉末質(zhì)量6倍量質(zhì)量濃度95 %乙醇，升溫至70 °C進(jìn)行醇提，時(shí)間為90min，提取2次;合并提 取液采用減壓蒸餾回收乙醇后得海參皂苷浸膏；
[0040] (2)浸膏加入浸膏重量10倍的水進(jìn)行懸浮混勻，制得懸浮液;將獲得的懸浮液用控 溫型泡沫分離器進(jìn)行分離，溫度為50°C，鼓泡氣體流速為2mL/min，分離時(shí)間60min，將無水 乙醇經(jīng)噴嘴噴入進(jìn)行破沫，得到海參皂苷破沫液；
[0041 ] (3)海參皂苷破沫液液加入水稀釋為含乙醇25%的溶液，通過管路栗入D101大孔 樹脂柱床頂端，以3倍柱體積、質(zhì)量濃度25 %的乙醇沖洗大孔樹脂柱去除鹽分、糖類、色素等 雜質(zhì)成分，最后用5倍柱體積(BV)、濃度80%的乙醇將吸附在大孔樹脂柱上的海參皂苷成分 洗脫下來，收集洗脫液減壓濃縮、烘干，得1.6kg類白色海參內(nèi)臟皂苷產(chǎn)品，經(jīng)檢測純度為 88% 〇
[0042] 實(shí)驗(yàn)例：
[0043] 按實(shí)施例1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，條件同實(shí)施例 1，其不同之處在于：
[0044] 實(shí)驗(yàn)例1:步驟(2)控溫型泡沫分離，溫度為10°C。
[0045] 實(shí)驗(yàn)例2:步驟(2)控溫型泡沫分離，溫度為20°C。
[0046] 實(shí)驗(yàn)例3:步驟(2)控溫型泡沫分離，溫度為30°C。；
[0047] 實(shí)驗(yàn)例4:步驟(2)控溫型泡沫分離，溫度為70°C。
[0048] 實(shí)驗(yàn)例5:步驟(2)控溫型泡沫分離，溫度為80°C。
[0049] 實(shí)驗(yàn)例6:步驟(2)控溫型泡沫分離，溫度為90°C。
[0050] 實(shí)驗(yàn)例7:步驟(2)控溫型泡沫分離，溫度為100°C
[0051] 將上述實(shí)驗(yàn)例1-實(shí)驗(yàn)例7、及實(shí)施例1-3觀察控溫泡沫分離處理的泡沫量，處理后 制得的海參內(nèi)臟皂苷，檢測其提取效率，作一張對(duì)比試驗(yàn)表，對(duì)比結(jié)果如下表1所示。
[0052] 表 1
[0053]
[0054]
[0055] 通過上表1數(shù)據(jù)及效果對(duì)比可以看出，本發(fā)明控溫泡沫分離使懸浮液內(nèi)的表面活 性物質(zhì)聚集在氣泡的表面上，控溫溫度為40~60°C，鼓泡氣體流速1~3mL/min，使泡沫更加 豐富，使海參皂苷更多的聚集在氣泡的表面上，使分離更徹底，提取效率高，而實(shí)驗(yàn)例1-實(shí) 驗(yàn)例7提取效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于本發(fā)明的，這是由于泡沫不多，影響了海參皂苷的分離及純化，溫 度過低，泡沫稀少、粗大，海參皂苷不能很好的聚集在氣泡的表面上，聚集量少，分離不徹 底，導(dǎo)致提取效率過低，溫度過高，泡沫高度低、粗大，很快消失，海參皂苷聚集時(shí)間短，分離 不充分，提取效率低。本發(fā)明的方法建立在其化學(xué)成分的基礎(chǔ)上，基于海參內(nèi)臟皂苷與其他 皂苷在化學(xué)結(jié)構(gòu)上不同，設(shè)計(jì)出了醇提后，結(jié)合控溫泡沫分離和樹脂富集，大大提高了提取 效率。
[0056] 對(duì)比實(shí)驗(yàn)
[0057] 對(duì)比例1
[0058] 按實(shí)施例1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，條件同實(shí)施例 1，其不同之處在于：
[0059]大孔樹脂柱內(nèi)的填料為大孔樹脂AB-8。
[0060] 對(duì)比例2
[0061] 按實(shí)施例1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，條件同實(shí)施例 1，其不同之處在于：
[0062]大孔樹脂柱內(nèi)的填料為大孔樹脂ADS-7。
[0063]將上述實(shí)驗(yàn)例1-實(shí)驗(yàn)例7、實(shí)施例1-3及對(duì)比例1-2，綜合評(píng)斷其提取效率，產(chǎn)品純 度及抗自由基氧化作用，作一張對(duì)比試驗(yàn)表，對(duì)比結(jié)果如下表2所示。
[0064]自由基(02- ·)清除率/%的檢測
[0065]分別稱取實(shí)驗(yàn)例1 -實(shí)驗(yàn)例7、實(shí)施例1 - 3及對(duì)比例1 - 2的產(chǎn)品加水配制成濃度 0.5mg/mL 溶液；
[0066] 將以上配制好的0.5mg/mL各取2mL于具塞試管中，每支試管中加入50mmol/L的 Tris-HCl緩沖溶液(pH 8.2)2mL，混勻并于25°C水浴中預(yù)熱lOmin，后加入10mmol/L的鄰苯 三酚溶液〇.4mL，于25°C水浴中反應(yīng)5min后，加入12mol/L的HC1溶液0.2mL終止反應(yīng)，然后于 325nm處測定吸光度，按現(xiàn)有常規(guī)方法計(jì)算清除率，每組測定3次并取其平均值。
[0067] 表 2
[0068]

[0069] 通過上表2數(shù)據(jù)及效果對(duì)比可以看出，實(shí)驗(yàn)例1-實(shí)驗(yàn)例7提取效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于本發(fā)明 實(shí)施例1-3的，對(duì)比例1、對(duì)比例2的提取效率雖然和本發(fā)明實(shí)施例的相當(dāng)，但純度遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于 本發(fā)明的，實(shí)驗(yàn)例1-實(shí)驗(yàn)例7隨著溫度的升高，自由基(02-·)清除率也逐漸降低，由于溫度 的升高海參皂苷的結(jié)構(gòu)和有效地生物活性得到破壞，不能很好的發(fā)揮其作用，綜上，本發(fā)明 醇提后結(jié)合控溫泡沫分離和樹脂富集來提取海參內(nèi)臟皂苷，使分離更徹底，有效的保護(hù)了 活性成分的生物活性，大大減少原料中海參多肽對(duì)皂苷純度的影響，得到的皂苷保存有完 好的結(jié)構(gòu)和有效地生物活性，具有良好的抗自由基氧化作用，純度高，提取效率高，一步上 樣，大大縮短提取時(shí)間、降低能耗。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，包括步驟如下： (1) 收集海參內(nèi)臟瀝去水分，烘干、粉碎，然后加入乙醇，升溫至60~85°C進(jìn)行提取60~ 240min，經(jīng)固液分離得到海參皂苷提取液，提取液采用減壓蒸餾回收乙醇后得海參皂苷浸 膏； (2) 將海參皂苷浸膏配制成懸浮液，懸浮液采用控溫泡沫分離進(jìn)行分離純化，得到的泡 沫經(jīng)破泡沫后得到海參皂苷破沫液;所述的控溫泡沫分離，鼓泡氣體為空氣，控溫溫度為40 ~60°C，鼓泡氣體流速1~3mL/min，一個(gè)操作周期30~180min; (3) 將步驟(2)得到的海參皂苷破沫液稀釋后直接上樣至大孔樹脂柱頂端，吸附完全后 用不同濃度的乙醇進(jìn)行兩步洗脫，收集洗脫液，進(jìn)行干燥處理即得高純度海參內(nèi)臟皂苷。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，其特征在于， 步驟(2)，所述的控溫泡沫分離，控溫溫度為40~55°C，鼓泡氣體流速1~2mL/min，優(yōu)選的， 所述的控溫泡沫分離，控溫溫度為45°C，鼓泡氣體流速1.5mL/min。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，其特征在于， 步驟(2)中，采用向浸膏中加入浸膏重量10~15倍的水進(jìn)行懸浮，制得懸浮液。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，其特征在于， 步驟(2)中，所述的破沫方法為溶劑破沫法，選擇無水乙醇作為破沫劑，將無水乙醇經(jīng)噴嘴 噴入進(jìn)行破沫。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，其特征在于， 步驟(3)中，所述海參皂苷破沫液稀釋是采用向海參皂苷破沫液中加入水進(jìn)行稀釋，使其乙 醇質(zhì)量濃度為20 % -30 %，直接通過管路栗至大孔樹脂柱頂端，作為上柱液。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，其特征在于， 步驟(3)中，所述大孔樹脂柱內(nèi)填料為D101樹脂，上柱吸附方式為動(dòng)態(tài)吸附，上柱液以lbv~ 10bv/h的流速通入大孔樹脂柱。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，其特征在于， 大孔樹脂柱內(nèi)填料用量為每小時(shí)料液流量的1/20~1/10。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，其特征在于， 步驟(3)中，兩步洗脫為飽和吸附后先用2~4倍柱體積、與上柱液同等濃度的乙醇溶液進(jìn)行 初步洗脫，然后用4~6倍柱體積、質(zhì)量濃度60 %~90 %的乙醇進(jìn)行再次洗脫。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，其特征在于， 步驟（1)中，所述的海參內(nèi)臟為鮮品或凍干品，凍干品使用前進(jìn)行化凍，海參內(nèi)臟優(yōu)選刺參 內(nèi)臟，烘干溫度為60~80 °C，粉碎至60-120目。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用海參內(nèi)臟提取高純度海參內(nèi)臟皂苷的方法，其特征在 于，步驟(1)中，所述的乙醇的質(zhì)量濃度為92~96 %，乙醇的加入量為海參內(nèi)臟粉末質(zhì)量的4 ~8倍，升溫至70~85 °C進(jìn)行提取2~3次。
【文檔編號(hào)】A61P39/06GK106038602SQ201610466093
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年6月23日
【發(fā)明人】韓利文, 張軒銘, 陳玉峰, 何秋霞, 侯海榮, 李曉彬, 張姍姍, 郭敬蘭, 黨立, 劉可春, 孫博, 隋曉明, 于濤, 彭德杰
【申請(qǐng)人】蓬萊海洋（山東）股份有限公司, 山東省科學(xué)院生物研究所