一種佛甲草總黃酮的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種佛甲草總黃酮的制備方法，具體涉及一種采用酶解?超臨界CO2提取佛甲草總黃酮的方法。其處理步驟包括：（1）原料的酶解；（2）超臨界CO2萃??；（3）大孔吸附樹脂純化。本發(fā)明具有快速、高效、溶劑使用量少、環(huán)保等優(yōu)點，且重現(xiàn)性好，樹脂可重復使用。
【專利說明】
一種佛甲草總黃酮的制備方法
[0001 ] 技術領域:
本發(fā)明涉及一種佛甲草總黃酮的制備方法，屬于中藥有效成分提取領域。
[0002]【背景技術】:
佛甲草又名鼠牙半支蓮、禾雀劂、佛指甲、鐵指甲、狗牙菜，為景天科佛甲草屬多年生草本植物。全草用藥，有清熱解毒、散瘀消腫、止血之功效，民間常用佛甲草治療咽喉腫痛、癰月中、丹麥、燙傷、蛇咬傷、黃疸、痢疾等癥。
[0003]黃酮類化合物是佛甲草的主要藥效成分之一。研究表明，黃酮類化合物在生理學、醫(yī)學和營養(yǎng)學上都有較高的應用價值，特別是在心血管疾病的臨床治療方面顯示了良好的生理藥理作用，具有擴張血管、強心且抗心律失常、防止心肌缺血、可有效地降低血脂、預防動脈粥樣硬化等多種作用，并且能有效抑制血小板聚集防止血栓形成。此外，黃酮類化合物還具有較強的天然抗氧化性，及強有力的自由基清除性，還有抗病毒、抗癌、抗炎、抗衰老等多方面的作用。
[0004]超臨界流體萃取技術是近年發(fā)展起來的一種新的萃取技術，和傳統(tǒng)的溶劑萃取相比，具有易于分離，萃取速度快，產(chǎn)品無殘留毒性，不損害活性物質的結構等優(yōu)點。
[0005]
【發(fā)明內容】
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本發(fā)明是針對現(xiàn)有技術的不足，旨在提供一種高效性和選擇性、操作簡便、產(chǎn)率高、副產(chǎn)物少、可工業(yè)化實現(xiàn)的制備佛甲草總黃酮的方法。
[0006]本發(fā)明的技術方案按照下列步驟進行:
(1)原料的酶解:取佛甲草粉末加入到其等量的溶有生物酶的緩沖溶液中，攪拌均勻，密封，于40?50 °C發(fā)酵3天；
(2)超臨界CO2萃取:將酶解后的物料加入萃取釜中，以流速為25?35L/h的CO2作為萃取劑，設置萃取壓力為20~30MPa、溫度45?55°C，分離釜的溫度10?15°C、壓力6?lOMPa，收集萃取液；
(3)大孔吸附樹脂純化:將所得萃取液濃縮上大孔吸附樹脂柱，先用2?3BV的蒸餾水洗脫，后用3?5BV的75?85%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥至恒重，即得佛甲草總黃酮。
[0007 ]步驟(I)中所述的生物酶用量為原料質量的4%。
[0008]步驟(I)中所述的生物酶為質量比3:1的纖維素酶和半纖維素酶。
[0009]步驟(I)中所述的緩沖溶液為pH4.5?5.5的醋酸/醋酸鈉緩沖溶液。
[0010]步驟(2)中所述的萃取劑CO2最適流速為28L/h。
[0011]步驟(3)中所述的大孔吸附樹脂類型為NKA-9、D-201、XDA-1。
[0012]本發(fā)明的優(yōu)點在于:
1.本發(fā)明選用酶液來分解構成細胞壁和細胞質的纖維素、半纖維素，使其疏松、膨脹、崩潰，從而增大了有效成分的擴散面積，減小了阻力，提高了有效成分的得率。
[0013]2.本發(fā)明采用酶解-超臨界⑶2法提取佛甲草總黃酮，具有生產(chǎn)成本低、快速、高效、提取率尚的優(yōu)點。
[0014]下面將結合【具體實施方式】進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
[0015]【具體實施方式】:
實施例1:
取Ikg的佛甲草粉末加入到其等量的溶有生物酶(用量為原料質量4%的質量比3:1的纖維素酶與半纖維素酶)的緩沖溶液(PH5.0的醋酸/醋酸鈉緩沖溶液)中，攪拌均勻，密封，于40°C發(fā)酵3天;將酶解后的物料加入萃取釜中，以流速為25L/h的CO2作為萃取劑，設置萃取壓力為20MPa、溫度45 °C，分離釜的溫度10 °C、壓力6MPa，收集萃取液;將所得萃取液濃縮上AB-8大孔吸附樹脂柱，先用2BV的蒸餾水洗脫，后用3BV的75%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥至恒重，即得佛甲草總黃酮，經(jīng)UV檢測，其總黃酮的含量為80.45%。
[0016]實施例2:
取Ikg的佛甲草粉末加入到其等量的溶有生物酶(用量為原料質量4%的質量比3:1的纖維素酶與半纖維素酶)的緩沖溶液(PH4.5的醋酸/醋酸鈉緩沖溶液)中，攪拌均勻，密封，于45°C發(fā)酵3天;將酶解后的物料加入萃取釜中，以流速為28L/h的CO2作為萃取劑，設置萃取壓力為25MPa、溫度50°C，分離釜的溫度15 °C、壓力1MPa，收集萃取液;將所得萃取液濃縮上XDA-1大孔吸附樹脂柱，先用3BV的蒸餾水洗脫，后用5BV的80%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥至恒重，即得佛甲草總黃酮，經(jīng)UV檢測，其總黃酮的含量為88.94%。
[0017]實施例3:
取Ikg的佛甲草粉末加入到其等量的溶有生物酶(用量為原料質量4%的質量比3:1的纖維素酶與半纖維素酶)的緩沖溶液(PH5.5的醋酸/醋酸鈉緩沖溶液)中，攪拌均勻，密封，于50°C發(fā)酵3天;將酶解后的物料加入萃取釜中，以流速為35L/h的CO2作為萃取劑，設置萃取壓力為30MPa、溫度55°C，分離釜的溫度12°C、壓力8MPa，收集萃取液;將所得萃取液濃縮上NKA-9大孔吸附樹脂柱，先用3BV的蒸餾水洗脫，后用4BV的85%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥至恒重，即得佛甲草總黃酮，經(jīng)UV檢測，其總黃酮的含量為85.12%。
【主權項】
1.一種佛甲草總黃酮的制備方法，其特征在于: (1)原料的酶解:取佛甲草粉末加入到其等量的溶有生物酶的緩沖溶液中，攪拌均勻，密封，于40?50 °C發(fā)酵3天； (2)超臨界CO2萃取:將酶解后的物料加入萃取釜中，以流速為25?35L/h的CO2作為萃取劑，設置萃取壓力為20~30MPa、溫度45?55°C，分離釜的溫度10?15°C、壓力6?lOMPa，收集萃取液； (3)大孔吸附樹脂純化:將所得萃取液濃縮上大孔吸附樹脂柱，先用2?3BV的蒸餾水洗脫，后用3?5BV的75?85%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，干燥至恒重，即得佛甲草總黃酮。2.根據(jù)權利要求1所述的一種佛甲草總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述的生物酶用量為原料質量的4%。3.根據(jù)權利要求1所述的一種佛甲草總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述的生物酶為質量比3:1的纖維素酶和半纖維素酶。4.根據(jù)權利要求1所述的一種佛甲草總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述的緩沖溶液為PH4.5-5.5的醋酸/醋酸鈉緩沖溶液。5.根據(jù)權利要求1所述的一種佛甲草總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的萃取劑CO2流速為28L/h。6.根據(jù)權利要求1所述的一種佛甲草總黃酮的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述的大孔吸附樹脂類型為NKA-9、D-201 ,XDA-1。
【文檔編號】A61K36/41GK106038664SQ201610299667
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年5月9日
【發(fā)明人】楊成東
【申請人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司