一種治療胃癌的藥物組合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種治療胃癌的藥物組合物及其制備方法，其特征在于：所述的藥物組合物是以藤梨根總皂苷、總黃酮、黃芪總皂苷為有效組分所制成的組合物。其制備方法是將二種藥材分別用乙醇提取，得到的提取物干燥粉碎后，按比例混合，得到的粉末經(jīng)中藥制劑常規(guī)制備方法即可制得臨床上適宜的各種口服固體制劑，包括膠囊劑、顆粒劑、片劑、滴丸劑等。本發(fā)明治療胃癌的中藥制劑，無副作用，能有效治療胃癌，提高胃癌患者的生活質(zhì)量。
【專利說明】
一種治療胃癌的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種藥物組合物，尤其涉及一種治療胃癌的藥物組合物及其制備方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 胃癌是消化系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，其死亡率居惡性腫瘤首位。胃癌發(fā)病有明顯 的地域性差別，在我國的西北與東部沿海地區(qū)胃癌發(fā)病率比南方地區(qū)明顯為高，這與上述 地區(qū)的飲食習(xí)慣密切相關(guān)。另一方面。我國胃癌高發(fā)區(qū)成人幽門螺桿菌感染率極高。其次， 胃癌的高發(fā)病率也與遺傳因素相關(guān)。目前，針對胃癌的治療多采取手術(shù)治療、藥物化療、及 放療、熱療、免疫治療、中醫(yī)中藥治療等其他治療方法，各種方法在挽救患者生命、提高患者 生活質(zhì)量方面均起到了一定的作用，但也存在一些問題，尤其是進(jìn)展期胃癌術(shù)后復(fù)發(fā)率高， 生存率低，許多化療藥物臨床治療效果并不理想，且毒副反應(yīng)大，使許多患者難以承受而放 棄治療，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和生存期。中醫(yī)藥治療癌癥，是我國獨(dú)特的治療方法，與 西醫(yī)的手術(shù)、放療、化療相比較，各有其所長。運(yùn)用得當(dāng)，可以取長補(bǔ)短，提高療效。
[0003] 藤梨根為獼猴桃科軟率獼猴桃Actinidia arguta (Sieb.et Zucc.) Planch的 根，曾收載于1987年版《中國藥典》。我國是主產(chǎn)區(qū)，主要分布于我國東北地區(qū)及河北、山西、 山東、安徽、浙江、江西、河南、湖北、云南等地，朝鮮和日本也有分布。藤梨根味酸、澀，性涼， 具有清熱解毒、清熱利濕、祛風(fēng)除濕、利尿止血、解毒消腫、止血等功效?，F(xiàn)代藥理研究表明 藤梨根提取物具有增強(qiáng)免疫功能、抗氧化、降血脂、抗突變、抗畸變和抗腫瘤等多種藥理作 用，廣泛應(yīng)用于消化系統(tǒng)癌癥、黃疸、消化不良、嘔吐、腹瀉等疾病的治療。
[0004] 黃芪為扶正固本的常用中藥，具有補(bǔ)氣固表、利尿、排毒、生肌之功效。黃芪中的主 要化學(xué)成分包括皂苷類、黃酮類、多糖類等，其中黃芪皂苷為其主要活性成分。臨床上廣泛 用于治療循環(huán)、神經(jīng)、消化、呼吸、內(nèi)分泌和血液系統(tǒng)等疾病。
[0005] 目前，以藤梨根為主藥配伍黃芪，提取精制二味中藥的有效成分，以藤梨根總皂 苷、總黃酮和黃芪總皂苷為藥物組成治療胃癌的藥物制劑未見報道。如現(xiàn)有技術(shù)授權(quán)公告 號:CN103585303B的中國發(fā)明專利，該發(fā)明涉及一種治療胃癌的藥物組合物及其制備方法， 其特征是:這種藥物組合物是按重量份由以下原料藥制成：阿莫尼亞脂3-5份、肉托果1-4 份、網(wǎng)眼瓦韋3-8份、松生等2-5份、鷲糞1-3份、螺厴0.8-1.5份、青金石1-3份。該發(fā)明的藥物 組合對治療胃癌具有良好的應(yīng)用價值。如現(xiàn)有技術(shù)授權(quán)公告號:CN101084982B的中國發(fā)明 專利，該本發(fā)明公開了一種黃芪總皂苷的制備方法，按順序包括如下步驟：（1)取黃芪藥材， 加入溶劑，將溶液調(diào)至堿性后再進(jìn)行提取，得提取液；（2)提取液上大孔型堿性陰離子交換 柱，先用堿水和純水沖洗，沖洗液棄去，再用含水乙醇洗脫，洗脫液濃縮，即得黃芪總皂苷。 該發(fā)明的黃芪總皂苷制備方法的提取分離效率高，黃芪總皂苷含量高，可保持更高的生理 活性。如現(xiàn)有技術(shù)授權(quán)公告號:CN103405586B的中國發(fā)明專利，該發(fā)明公開了一種浮萍草總 黃酮提取物，它是按照下述步驟制備而成的：1)取浮萍草全草粉末，加入8~15倍20~90%的乙 醇，加熱回流提取1~3次，每次0.5~2小時，合并提取液;2)將提取液減壓濃縮至無醇味，通過 大孔吸附樹脂，先用水或濃度不超過20%的乙醇溶液洗脫至流出液透明，然后用濃度為40~ 90%的乙醇溶液洗脫4~8倍柱體積，收集40~90%的乙醇洗脫液，濃縮，干燥，所述浮萍草總黃 酮提取物中含有質(zhì)量百分比為50~99%的總黃酮。該發(fā)明提取物具有抗變態(tài)反應(yīng)、消腫、止癢 的功效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明目的是提供一種無毒副作用，療效明顯的治療胃癌的藥物組合物及其制備 方法。
[0007] 本發(fā)明通過如下技術(shù)方案予以實施： 本發(fā)明所用原料： 藤梨根Actinidia arguta (Sieb.et Zucc.) Planch，獼猴桃科軟率獼猴桃的干燥根 藤梨根，黃苗Astragalus membranaceus (Fisch. ) Bge. var. mongholicus (Bge.)Hsiao 或Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge，豆科植物蒙古黃苗或膜莢黃苗的干燥根。
[0008] -種治療胃癌的藥物組合物，其藥物組合物的有效組分包括為：藤梨根總皂苷總 黃酮和黃芪總皂苷。
[0009] 藤梨根總皂苷總黃酮提取物和黃芪總皂苷提取物的重量比為為1-9:9_1。
[0010] 作為優(yōu)選，藤梨根總皂苷總黃酮和黃芪總皂苷提取物的重量比是8:2。
[0011] 所述的藥物組合物，與中藥或化學(xué)藥或天然藥物組成膠囊劑或片劑或顆粒劑或滴 丸劑治療胃癌的藥物。
[0012] -種治療胃癌的藥物組合物的制備方法，其包括以下步驟： 1) 取藤梨根藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為35%_97%的乙醇加熱回流提取1-4次，按重量計，每次乙 醇溶液的用量為原料用量的6-17倍，提取時間為2-6小時，合并乙醇提取液； 2) 采用大孔吸附樹脂富集純化，采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%_97%乙醇洗脫，洗脫速度為4-l〇BV/h，洗脫液減壓濃縮至相對密度在25-50°C為1.20-1.25的稠膏，再干燥，粉碎，得到藤 梨根總皂苷總黃酮提取物粉末，備用； 3) 取黃芪藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為35%-97%的乙醇加熱回流提取1-3次，按重量計，每次乙醇 溶液的用量為原料用量的8-12倍，提取時間為2-6小時，合并乙醇提取液； 4) 采用大孔吸附樹脂富集純化，采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%_97%乙醇洗脫，洗脫速度為4-l〇BV/h，洗脫液減壓濃縮至相對密度在25-50°C為1.20-1.25的稠膏，再干燥，粉碎，得到黃 芪總皂苷提取物粉末，備用； 5) 根據(jù)上述藥物組合物重量比混合上述步驟2)、4)分別得到的提取物粉末。
[0013] 作為優(yōu)選，所述步驟2)、4)中的干燥為解析物質(zhì)的真空干燥工藝，且干燥條件為 35_85°C，-0.56mpa至0· 10mpa下。
[0014] 所述的大孔吸附樹脂為DM-301型大孔吸附樹脂或HPD-100型大孔吸附樹脂或X-5 型大孔吸附樹脂或AB-8型大孔吸附樹脂或NKA-9型大孔吸附樹脂或D-101型大孔吸附樹脂。
[0015] 作為優(yōu)選。所述的大孔吸附樹脂為HPD-100型大孔吸附樹脂，可以高度富集藥效成 分，去除雜質(zhì)，降低服用劑量，提高原料藥的利用率。 具體實施例
[0016] 以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0017] 實施例1: 膠囊劑的制備 1)取藤梨根藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為75%的乙醇加熱回流提取2次，按重量計，每次乙醇溶液 的用量為原料用量的12倍，提取時間為3小時，合并乙醇提取液。采用HPD-100型大孔吸附樹 脂富集純化，用原料用量12倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為45%乙醇洗脫，洗脫速度為6BV/h。洗脫液減壓 濃縮至相對密度在45°(：為1.20-1.25的稠膏，在35-45°(：，-0.09111? &-0.101^&下真空干燥，粉 碎，得到藤梨根總皂苷總黃酮提取物粉末，備用； 2 )取黃芪藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇加熱回流提取3次，按重量計，每次乙醇溶液的 用量為原料用量的10倍，提取時間為2小時，合并乙醇提取液。采用HPD-100型大孔吸附樹脂 富集純化，用原料用量10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%乙醇洗脫，洗脫速度為8BV/h。洗脫液減壓濃 縮至相對密度在50°C為1.2〇-1.25的稠膏，在35-45°(：，-〇.8〇111? &-〇.1〇111?&下真空干燥，粉 碎，得到黃芪總皂苷提取物粉末，備用； 3)按藤梨根總皂苷總黃酮提取物粉末、黃芪總皂苷提取物粉末的重量比為8:2的比例 混合二種細(xì)粉，干燥保存。
[0018] 4)細(xì)粉中加入淀粉、硬脂酸鎂混勻，使用常規(guī)加工設(shè)備制成膠囊，膠囊每粒裝 0·30g〇
[0019] 實施例2 顆粒劑的制備 1)取藤梨根藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇加熱回流提取3次，按重量計，每次乙醇溶液 的用量為原料用量的10倍，提取時間為3小時，合并乙醇提取液。采用HPD-100型大孔吸附樹 脂富集純化，用原料用量8倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%乙醇洗脫，洗脫速度為8BV/h。洗脫液減壓 濃縮至相對密度在50°(：為1.20-1.25的稠膏，在45-50°(：，-0.09111? &-0.101^&下真空干燥，粉 碎，得到藤梨根總皂苷總黃酮提取物粉末，備用； 2 )取黃芪藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為75%的乙醇加熱回流提取2次，按重量計，每次乙醇溶液的 用量為原料用量的10倍，提取時間為3小時，合并乙醇提取液。采用HPD-100型大孔吸附樹脂 富集純化，用原料用量12倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%乙醇洗脫，洗脫速度為10BV/h。洗脫液減壓 濃縮至相對密度在50°C為1 · 20-1 · 25的稠膏，在45-48°C，-0 · 80mpa-0 · lOmpa下真空干燥，粉 碎，得到黃芪總皂苷提取物粉末，備用； 3)按藤梨根總皂苷總黃酮提取物粉末黃芪總皂苷提取物粉末的重量比為8:2的比例混 合二種細(xì)粉，干燥保存。
[0020] 4)細(xì)粉中加入糖粉、糊精混勻，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶液制粒、干燥、整粒，裝 袋，每袋重l〇g。
[0021] 實施例3 片劑的制備 1)取藤梨根藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%的乙醇加熱回流提取3次，按重量計，每次乙醇溶液 的用量為原料用量的8倍，提取時間為2小時，合并乙醇提取液。采用HPD-100型大孔吸附樹 脂富集純化，用原料用量12倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%乙醇洗脫，洗脫速度為10BV/h。洗脫液減 壓濃縮至相對密度在50°C為1 · 20-1 · 25的稠膏，在45-48°C，-0 · 08mpa-0 · lOmpa下真空干燥， 粉碎，得到藤梨根總皂苷總黃酮提取物粉末，備用； 2 )取黃芪藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%的乙醇加熱回流提取3次，按重量計，每次乙醇溶液的 用量為原料用量的12倍，提取時間為2小時，合并乙醇提取液。采用HPD-100型大孔吸附樹脂 富集純化，用原料用量8倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%乙醇洗脫，洗脫速度為6BV/h。洗脫液減壓濃 縮至相對密度在50 °C為1 · 20-1 · 25的稠膏，在45-50 °C，-0 · 90mpa-0 · lOmpa下真空干燥，粉 碎，得到黃芪總皂苷提取物粉末，備用； 3)按藤梨根總皂苷總黃酮提取物粉末黃芪總皂苷提取物粉末的重量比為8:2的比例混 合二種細(xì)粉，干燥保存。
[0022] 4)細(xì)粉中加入糖粉、糊精混勻，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%的乙醇溶液制粒、干燥、整粒，加 入硬脂酸鎂混勻，使用常規(guī)加工設(shè)備制成片劑，每片重〇. 35g。
[0023] 實驗例1: 細(xì)胞實驗 1、實驗細(xì)胞株:BGC-823細(xì)胞由中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心提供。
[0024] 2、實驗藥物:本發(fā)明藥物組合物粉末(按照實施例1提取方法提取的藤梨根總皂苷 總黃酮提取物以及黃芪總皂苷提取物，按藤梨根總皂苷總黃酮提取物、黃芪總皂苷提取物 的重量比為8:2的重量比例混合二種細(xì)粉。） 3、實驗方法:取BGC-823細(xì)胞，用含10%胎牛血清的相應(yīng)培養(yǎng)基在37°C，5%C02條件 下培養(yǎng)，傳3代后，取對數(shù)生長期細(xì)胞用于實驗。將細(xì)胞配成單細(xì)胞懸液，以IX 106/mL接種 于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加入腫瘤細(xì)胞懸液100yL，再分別加入各100yL的6種不同濃度藤 梨根提取液(本發(fā)明藥物組合物粉末稀釋液，濃度分別為200、100、50、25、12.5、6.25ug/ ml )，設(shè)空白對照孔加1640培養(yǎng)液，實驗對照孔加腫瘤細(xì)胞，每組均為3復(fù)孔。將96孔板置 5%C02培養(yǎng)箱（37 °C )培養(yǎng)48h，加入5mg/mlMTT20yL，繼續(xù)培養(yǎng)4h后，棄上清，加入DMS0150yL， 振蕩溶解l〇min，酶標(biāo)儀檢測每孔在490nm處吸收值，按抑制率計算公式計算藥物組合物抑 制胃癌細(xì)胞的百分率，結(jié)果見表1，確定最佳藥物濃度。
[0025] 抑瘤率計算公式抑瘤率=1-(0D實驗組-0D空白組)/( 0D實驗對照組-0D空白組） X100% 表1不同濃度的本發(fā)明藥物組合物對BGG-233細(xì)胞的抑制率
表1結(jié)果表明，按照實施例1提取方法提取的藤梨根總皂苷總黃酮提取物以及黃芪總皂 苷提取物，按重量比為8:2的重量比例混合細(xì)粉，在5〇-20〇1^/1111濃度范圍內(nèi)對腫瘤細(xì)胞具 有較好的抑制率，尤其是50ug/ml濃度抑制率最大。
[0026] 實驗例2: 藥效學(xué)實驗 1、動物分組及造模方法:90只KM大鼠（雌雄各半，體重200~220g，北京維通利華實驗動 物技術(shù)有限公司提供，許可證編號：SCXK(京）2012-0001)，按隨機(jī)數(shù)表法分為正常組、模型 組、低劑量組、中劑量組、高劑量組，陽性藥物組，每組15只。正常組，不造模，供給普通飼料 及自由飲水，共30周。模型組每日1次灌服自來水4mL/kg，6h后，給予120μg/ml甲基硝基亞硝 基胍和10%NaCl混合液，同時予40%酒精灌胃，2mL/只，每周2次，共20周，繼續(xù)飼養(yǎng)10周，處理 方法同正常組。陽性藥物組，從造模第1天起，每日1次灌服全反式維甲酸，每只4mL/kg，6h 后，其余處理方法與模型組相同。按動物體表面積以70kg成人用量折算，組合物組低、中、高 劑量分別為〇 · 20g/kg、0 · 40g/kg、0 · 80g/kg;灌胃劑量1 mL/100g體重，其余處理方法與維甲 酸治療組相同。所有大鼠均在第30周末處死，常規(guī)剖驗。肉眼觀察各臟器病變后，取胃、肝、 脾、肺、腎等臟器固定于10%中性福爾馬林液中。24h后，常規(guī)脫水，石蠟包埋，制備切片，觀察 有無癌轉(zhuǎn)移及其它病變。根據(jù)文獻(xiàn)方法和公式，計算癌變抑制率。實驗結(jié)果見表2。
[0027] 癌變抑制率=(對照組癌發(fā)生率一實驗組癌發(fā)生率)/對照組癌發(fā)生率X 100% 表2本發(fā)明藥物組合物對致胃癌小鼠癌變抑制率的影響
*注:與對照組相比較P〈〇. 05 實驗過程中，動物一般狀況良好。動物活潑，皮毛光澤，飲食無異常。90只大鼠在實驗過 程中因灌喂不當(dāng)（穿破食道等）、受壓等原因共死亡15只，無1例因其它疾病和癌轉(zhuǎn)移而死亡 者。30周末對照組處死的13只小鼠，全部發(fā)生癌前病變，癌前病變誘發(fā)率為100%，表明本模 型是穩(wěn)定可靠的。給予本發(fā)明的藥物組合物可以顯著抑制癌變率。
[0028] 實驗例3: 本發(fā)明中藥組合物膠囊的動物急性毒性研究 選擇健康昆明種小白鼠，以灌胃方法給藥，觀察制備的膠囊劑的急性毒性反應(yīng)，結(jié)果給 藥的最大耐受量> 12.5g/kg，相當(dāng)于臨床用藥量的250倍。對照組給同等劑量的蒸餾水，連續(xù) 服藥7d。結(jié)果小白鼠的一般健康狀況良好，毛色光滑，食欲正常，大便無異常，整個給藥期間 未出現(xiàn)動物死亡現(xiàn)象，實驗結(jié)束后，給藥組小白鼠平均體重增長率與對照組相同。
[0029] 本發(fā)明具有療效明顯、組合物精簡、無毒副作用的優(yōu)點(diǎn)。
[0030] 上述實施例僅是個案，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下對本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié) 和形式進(jìn)行修改或替換，均落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 一種治療胃癌的藥物組合物，其特征在于：藥物組合物的有效組分為藤梨根總皂苷 總黃酮和黃芪總皂苷。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于:所述的藤梨根總皂苷總黃酮提取物 和黃芪總皂苷提取物的重量比為1-9:9-1。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于:所述的藤梨根總皂苷總黃酮和黃芪 總皂苷提取物的重量比是8:2。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的藥物組合物，所述的藥物組合物可與中藥或化學(xué)藥或 天然藥物組成膠囊劑或片劑或顆粒劑或滴丸劑治療胃癌的藥物。5. -種治療胃癌的藥物組合物的制備方法，其特征在于以下步驟： 取藤梨根藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為35%-97%的乙醇加熱回流提取1-4次，按重量計，每次乙醇 溶液的用量為原料用量的6-17倍，提取時間為2-6小時，合并乙醇提取液； 采用大孔吸附樹脂富集純化，采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1〇%_97%乙醇洗脫，洗脫速度為4-10BV/ h，洗脫液減壓濃縮至相對密度在25-50°C為1.20-1.25的稠膏，再干燥，粉碎，得到藤梨根總 皂苷總黃酮提取物粉末，備用； 取黃芪藥材加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為35%-97%的乙醇加熱回流提取1-3次，按重量計，每次乙醇溶 液的用量為原料用量的8-12倍，提取時間為2-6小時，合并乙醇提取液； 采用大孔吸附樹脂富集純化，采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1〇%_97%乙醇洗脫，洗脫速度為4-10BV/ h，洗脫液減壓濃縮至相對密度在25-50°C為1.20-1.25的稠膏，再干燥，粉碎，得到黃芪總皂 苷提取物粉末，備用； 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的藥物組合物重量比混合上述步驟2)、4)分別得到的提取物粉 末。6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于:所述的干燥為解析物質(zhì) 的真空干燥工藝，且干燥條件為35_85°C，_0.56mpa至0. lOmpa下。7. 按照權(quán)利要求4所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于:所述的大孔吸附樹脂為 DM-301型大孔吸附樹脂或HPD-100型大孔吸附樹脂或X-5型大孔吸附樹脂或AB-8型大孔吸 附樹脂或NKA-9型大孔吸附樹脂或D-101型大孔吸附樹脂。8. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于:所述的大孔吸附樹脂為 HPD-100型大孔吸附樹脂。
【文檔編號】A61P35/00GK106038680SQ201610462763
【公開日】2016年10月26日
【申請日】2016年6月24日
【發(fā)明人】滕坤, 阮洪升, 張海豐, 劉雪坤, 臧皓, 孫仁爽
【申請人】通化師范學(xué)院