納豆激酶組合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了納豆激酶組合物及其制備方法，該組合物包括納豆激酶、川芎和淫羊藿組成；每g組合物中納豆激酶的纖溶活性為200～400IU。其制備方法包括：1)利用產(chǎn)納豆激酶的枯草桿菌制備納豆激酶發(fā)酵液，離心，取上清液濃縮，得到納豆激酶濃縮液；2)將淫羊藿加水提取，將提取液濃縮成淫羊藿浸膏；3)將川芎加水提取，將提取液濃縮成川芎浸膏；4)將淫羊藿浸膏、川芎浸膏與納豆激酶濃縮液混合，即得。本發(fā)明以納豆激酶、川芎和淫羊藿為原料，這三種組分發(fā)揮協(xié)同增效的作用，具有較好的預(yù)防血栓形成以及溶栓效果。
【專利說明】
納豆激酶組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種藥物組合物，具體涉及納豆激酶組合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 血栓性疾病作為中老年人的高發(fā)病，是死亡威脅最大的疾病之一，目前60歲以上 的老人已達(dá)到1億以上，占人口比例的8.7 %，今后20年我國(guó)將進(jìn)入老齡化社會(huì)，血栓性疾病 的防治必須引起足夠的重視。全世界現(xiàn)有血栓塞病人約1500萬，所需的溶栓藥的潛在市場(chǎng) 價(jià)值約20億美元。國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上普遍使用的溶栓類藥物鏈激酶、尿激酶、組織型纖溶酶原激活 劑等都存在明顯的不足:抗再灌注、產(chǎn)生再栓塞和出血性副作用，且價(jià)格昂貴。
[0003] 納豆激酶(Nattokinase，NK)是一種枯草桿菌蛋白激酶，是在納豆發(fā)酵過程中由納 豆枯草桿菌產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶，具有溶解血栓、降低血粘度，改善血液循環(huán)，軟化和 增加血管彈性等作用。納豆激酶是1987年由日本生理學(xué)教授須見洋行博士從200多種食品 中首先發(fā)現(xiàn)并命名的一種分子量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于UK、SK、tPA的蛋白質(zhì)，等電點(diǎn)是8.7,分子量為 27724,具有很強(qiáng)的纖維蛋白溶解能力，并具有活化彈性酶和尿酸酶的活性，在此之后的相 關(guān)研究表明，納豆激酶能夠有效清除人體血液內(nèi)的血栓，是目前溶栓活力最高的蛋白酶，而 且對(duì)高血壓、衰老、中風(fēng)、肌肉痙攣和心腦血管疾病也有很好的療效，已被用作溶栓藥物。并 且，納豆激酶來源于日本傳統(tǒng)的食物納豆，安全性好，同時(shí)可由腸道吸收，在體內(nèi)作用持續(xù) 時(shí)間長(zhǎng)，最重要的一點(diǎn)是它還能激活人體內(nèi)重組型纖溶酶激活劑，使之溫和、持續(xù)地提高血 液的纖溶活性，因此，近年來，以納豆激酶為主要成分的藥品、功能性食品、食品添加劑的研 發(fā)工作進(jìn)展十分迅速。對(duì)于納豆激酶產(chǎn)品的應(yīng)用，營(yíng)養(yǎng)專家建議每日服用的預(yù)防量為1500 ~2000IU，然而這一用量也將帶來較高的成本，使得血栓患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)較重。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供納豆激酶組合物及其制備方法。
[0005] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案是納豆激酶組合物，該組合物包括納豆激酶、川芎、淫羊藿 組成;每g組合物中納豆激酶的纖溶活性為200~400IU。
[0006] 上述納豆激酶可以是由產(chǎn)納豆激酶的枯草桿菌的發(fā)酵液，也可以是納豆激酶凍干 粉。
[0007] 淫羊藿苷為淫羊藿的主要成分，在該組合物中淫羊藿苷的含量為0.03~0.04mg/ g°
[0008] 川考嗪為川考(學(xué)名：Ligusticum chuanxiong hort)的主要成分，在該組合物中 川芎嗪的含量為〇 · 02~0 · 03mg/g。
[0009] 本發(fā)明還提供了上述納豆激酶組合物的制備方法，包括以下步驟：
[0010] 1)利用產(chǎn)納豆激酶的枯草桿菌制備納豆激酶發(fā)酵液，離心，取上清液濃縮，得到納 豆激酶濃縮液；
[0011] 2)將淫羊藿加水提取，將提取液濃縮成淫羊藿浸膏；
[0012 ] 3)將川芎加水提取，將提取液濃縮成川芎浸膏；
[0013] 4)將淫羊藿浸膏、川芎浸膏與納豆激酶濃縮液混合，即得。
[0014] 本發(fā)明的納豆激酶來自能夠產(chǎn)納豆激酶的枯草桿菌的發(fā)酵產(chǎn)物，枯草桿菌作為一 種益生菌，市場(chǎng)上可以直接購買ji^nBacillusSubtilisAK(PN2003-210136，F(xiàn)ERMP-182391JP).Bacillus Subtilis MR141(PN 08-154616,FERM P-14692JP),Baci1lus Subtilis IAM1026(PN 5486467，F(xiàn)ERM BP-6713US)等，這些菌種在發(fā)酵過程中除能產(chǎn)生納 豆激酶外，各級(jí)代謝產(chǎn)物均含有對(duì)人體有益的成分，因此都可以作為本發(fā)明的菌種。本發(fā)明 優(yōu)選納豆桿菌，其能夠通過固體或液體基質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)生高效纖溶活性的納豆激酶。
[0015] 根據(jù)選定的菌種，選擇其適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，其中，可以選用固體發(fā)酵 法，把菌種制成菌懸液，接種到固體培養(yǎng)基中，在適宜的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)酵結(jié)束后將發(fā) 酵產(chǎn)生的的納豆激酶溶解提取出來得到發(fā)酵液，將發(fā)酵液離心，上清液濃縮，得到濃縮液。 由于固體發(fā)酵法為常規(guī)方法，本發(fā)明在此處就不做詳細(xì)說明。
[0016] 也可以采用液體發(fā)酵法，其具體工藝如下：
[0017] 1)選用納豆激酶高產(chǎn)菌株，直接在平板上進(jìn)行分離篩選，分離平板優(yōu)選LB-瓊脂 糖-纖維蛋白平板:LB培養(yǎng)基配制時(shí)用0.01M磷酸鉀緩沖液(PB pH7.4)溶解，制作平板時(shí)，將 人血纖維蛋白原和凝血酶溶解于其中，其制作方法同瓊脂糖-纖維蛋白平板。
[0018] 2)根據(jù)所選用的不同菌種的最佳培養(yǎng)條件，所用到的發(fā)酵培養(yǎng)基中的氮源、碳源 和無機(jī)鹽可以進(jìn)行選擇，氮源可以選擇大豆蛋白胨、胰蛋白胨、酵母粉、酪蛋白酸水解物以 及干大豆粉末等中的一種或多種，使用的質(zhì)量濃度為0.5~4%左右;碳源可以是葡萄糖、木 糖、可溶性淀粉、麥芽糖、乳糖和蔗糖中的一種或多種，其質(zhì)量濃度優(yōu)選在1. 〇~10. 〇 %左 右;無機(jī)鹽可以選擇KH2P〇4約0 · 2%、K2HP〇4約0 · 4%、MgS〇4約0 · 05%、CaC12約0 · 02% 等。 [0019]根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的方法，使用納豆桿菌進(jìn)行發(fā)酵制備種子液，發(fā)酵至0D = 0.3~ 1.0，以1.0~2.0 %左右的接種量進(jìn)行液體深層發(fā)酵，發(fā)酵溫度25~40°C，發(fā)酵周期12~35 小時(shí)，pH為6~8。
[0020] 作為優(yōu)選，納豆激酶組合物的制備方法為：
[0021] 1)利用產(chǎn)納豆激酶的枯草桿菌制備納豆激酶發(fā)酵液，以3000~6000rpm離心，取上 清液濃縮，得到納豆激酶濃縮液；
[0022] 2)將淫羊藿加水提取，將提取液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.10~1.20的淫羊藿浸 膏；
[0023] 3)將川芎加水提取，將提取液濃縮成60 °C下相對(duì)密度為1.20~1.45的川芎浸膏；
[0024] 4)將淫羊藿浸膏、川芎浸膏與納豆激酶濃縮液混合，即得。
[0025]納豆激酶發(fā)酵液要進(jìn)行離心，轉(zhuǎn)速以3000~6000rpm為優(yōu)，可除去發(fā)酵液中的大部 分菌體和雜質(zhì)。由于納豆激酶為熱敏性物質(zhì)，濃縮一般選用常溫超濾濃縮，超濾膜的截留分 子量為50000~200000，超濾壓力為0.1~0.3MPa，截留率多90%，濃縮倍數(shù)視發(fā)酵液中納豆 激酶的纖溶活性而定。
[0026]納豆激酶組合物的制備方法還可以是：
[0027] 1)利用產(chǎn)納豆激酶的枯草桿菌制備納豆激酶發(fā)酵液，以3000~6000rpm離心，取上 清液濃縮，真空冷凍干燥，得到納豆激酶凍干粉；
[0028] 2)將淫羊藿加水提取，將提取液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1~1.20的浸膏，干燥， 得到淫羊藿干粉；
[0029] 3)將川芎加水提取，將提取液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.20~1.45的浸膏，干燥， 得到川考干粉；
[0030] 4)將淫羊藿干粉、川芎干粉與納豆激酶凍干粉混合，即得。
[0031] 本發(fā)明的組合物可以包括藥學(xué)可接受的輔料，按常規(guī)的制劑工藝制成藥劑學(xué)可接 受的任何常規(guī)劑型，包括膠囊劑、片劑、顆粒劑、凝膠劑、緩釋劑等。藥學(xué)可接受的輔料包括 填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括:淀 粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括:淀粉、預(yù)膠化淀 粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維 素鈉等;潤(rùn)滑劑包括:硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等;助懸劑包括:聚乙烯 吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等;粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯 烷酮、輕丙基甲基纖維素等;甜味劑包括:糖精鈉、阿斯帕坦、鹿糖、甜蜜素、甘草次酸等;矯 味劑包括:甜味劑及各種香精;防腐劑包括:尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、 苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等;基質(zhì)包括:PEG6000，PEG4000，蟲蠟等。為使上述劑型能夠 實(shí)現(xiàn)中藥藥劑學(xué)，需在制備這些劑型時(shí)加入藥學(xué)可接受的其它輔料(范碧亭《中藥藥劑學(xué)》， 上海科學(xué)出版社1997年12月第1版中各劑型記載的輔料）。
[0032] 本發(fā)明所述的納豆激酶組合物的日服用量為lg，其中l(wèi)g組合物中納豆激酶的纖溶 活性僅為200~400IU，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于常規(guī)用量，但完全可以達(dá)到甚至超過納豆激酶纖溶活性 2000IU的溶栓效果，因此可大大節(jié)約成本，減輕血栓性疾病患者的經(jīng)濟(jì)壓力。
[0033]根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)可知，淫羊藿和川芎均有一定的溶栓作用，其活性成分分別為淫羊 藿苷和川芎嗪，要達(dá)到較好的溶栓效果，川芎嗪的用量為每日0.1~〇.5mg，淫羊藿苷的用量 為每日0.48~2mg。而服用本發(fā)明的組合物，川考嗪的日服用量?jī)H為0.02~0.03mg，淫羊藿 苷的日服用量?jī)H為0.03~0.04mg，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于常規(guī)用量。
[0034]本發(fā)明的納豆激酶組合物由納豆激酶、川芎和淫羊藿三種組分組成，這三種組分 發(fā)揮協(xié)同增效的作用，能夠延長(zhǎng)動(dòng)脈血栓形成時(shí)間，降低靜脈血栓重量，加速體外血栓溶解 的作用。
【具體實(shí)施方式】
[0035]以下具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但不作為對(duì)本發(fā)明的限定。
[0036]以下實(shí)施例中所述納豆激酶發(fā)酵液均按下述方法制得：
[0037] 1)選用納豆桿菌高產(chǎn)菌株，直接在平板上進(jìn)行分離篩選，分離平板優(yōu)選LB-瓊脂 糖-纖維蛋白平板:LB培養(yǎng)基配制時(shí)用0.01M磷酸鉀緩沖液(PB pH7.4)溶解，制作平板時(shí)，將 人血纖維蛋白原和凝血酶溶解于其中，其制作方法同瓊脂糖-纖維蛋白平板。
[0038] 2)發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源選擇大豆蛋白胨，使用的質(zhì)量濃度為0.5~4%左右;碳源為 葡萄糖，其質(zhì)量濃度優(yōu)選在1. 〇~10. 〇 %左右；無機(jī)鹽可以選擇KH2P〇4約0.2 %、K2HP〇4約 0.4%、1^304約0.05%工&(：12約0.02%。使用納豆桿菌進(jìn)行發(fā)酵制備種子液，發(fā)酵至00 = 0.3~1.0,以1.0~2.0%左右的接種量進(jìn)行液體深層發(fā)酵，發(fā)酵溫度25~40°C，發(fā)酵周期12 ~35小時(shí)，pH為6~8，得到納豆激酶發(fā)酵液。
[0039] 實(shí)施例1
[0040]該組合物由納豆激酶、川芎和淫羊藿組成，其中，納豆激酶的用量以納豆激酶纖溶 活性計(jì)，每g組合物中納豆激酶的纖溶活性為200IU;淫羊藿的用量以淫羊藿苷計(jì)，該組合物 中淫羊藿苷的含量為0. 03mg/g;川芎的用量以川芎嗪計(jì)，該組合物中川芎嗪的含量為 0.02mg/g〇
[0041 ]該組合物的制備方法為：
[0042] 1)將納豆激酶發(fā)酵液以3000rpm離心，將上清液常溫超濾濃縮，超濾膜的截留分子 量為50000，超濾壓力為0.1 MPa，得到納豆激酶濃縮液；
[0043] 2)將淫羊藿加水提取，將提取液過濾，濾液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.10的淫羊 藿浸膏；
[0044] 3)將川芎加水提取，將提取液過濾，濾液濃縮成60 °C下相對(duì)密度為1.20的川芎浸 膏；
[0045] 4)將淫羊藿浸膏、川芎浸膏與納豆激酶濃縮液按比例進(jìn)行混合，以確保每g組合物 中納豆激酶的纖溶活性為200IU，淫羊藿苷的含量為0.03mg，川芎嗪的含量為0.02mg。
[0046] 實(shí)施例2
[0047] 該組合物由納豆激酶、川芎和淫羊藿組成，其中，納豆激酶的用量以納豆激酶纖溶 活性計(jì)，每g組合物中納豆激酶的纖溶活性為400IU;淫羊藿的用量以淫羊藿苷計(jì)，該組合物 中淫羊藿苷的含量為〇. 〇4mg/g;川芎的用量以川芎嗪計(jì)，該組合物中川芎嗪的含量為 0.03mg/g〇
[0048] 該組合物的制備方法為：
[0049] 1)將納豆激酶發(fā)酵液以6000rpm離心，將上清液常溫超濾濃縮，超濾膜的截留分子 量為200000，超濾壓力為0.3MPa，得到納豆激酶濃縮液；
[0050] 2)將淫羊藿加水提取，將提取液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.20的淫羊藿浸膏；
[0051 ] 3)將川芎加水提取，將提取液濃縮成60 °C下相對(duì)密度為1.45的川芎浸膏；
[0052] 4)將淫羊藿浸膏、川芎浸膏與納豆激酶濃縮液進(jìn)行混合，以確保每g組合物中納豆 激酶的纖溶活性為400IU、淫羊藿苷的含量為0.04mg、川芎嗪的含量為0.03mg。
[0053] 實(shí)施例3
[0054]該組合物由納豆激酶、川芎和淫羊藿組成，其中，納豆激酶的用量以納豆激酶纖溶 活性計(jì)，每g組合物中納豆激酶的纖溶活性為300IU;淫羊藿的用量以淫羊藿苷計(jì)，該組合物 中淫羊藿苷的含量為〇.〇35mg/g;川芎的用量以川芎嗪計(jì)，該組合物中川芎嗪的含量為 0.025mg/g〇
[0055]該組合物的制備方法為：
[0056] 1)將納豆激酶發(fā)酵液以5000rpm離心，將上清液常溫超濾濃縮，超濾膜的截留分子 量為100000，超濾壓力為0.2MPa，得到納豆激酶濃縮液；
[0057] 2)將淫羊藿加水提取，將提取液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.15的淫羊藿浸膏；
[0058] 3)將川芎加水提取，將提取液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.35的川芎浸膏；
[0059] 4)將淫羊藿浸膏、川芎浸膏與納豆激酶濃縮液按比例進(jìn)行混合，以確保每g組合物 中納豆激酶的纖溶活性為300IU、淫羊藿苷的含量為0.035mg、川芎嗪的含量為0.025mg。
[0060] 實(shí)驗(yàn)例1對(duì)大鼠體內(nèi)動(dòng)脈血栓形成的影響實(shí)驗(yàn)
[0061 ] 取SD大鼠70只，體重在180~220g，雌雄各半，將其隨機(jī)分為7組，每組10只，雌雄各 5只，分別為實(shí)驗(yàn)組1、2、3,對(duì)照組1、2、3,以及空白對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組1、2、3分別給藥實(shí)施例1、 2、3的組合物，給藥劑量為lg/kg;對(duì)照組1給藥納豆激酶凍干粉(2000IU/g)、對(duì)照組2給藥淫 羊藿提取物（淫羊藿苷的含量為〇.〇4mg/g)、對(duì)照組3給藥川芎提取物（川芎嗪的含量為 0.03mg/g)，對(duì)照組給藥劑量均為lg/kg;空白對(duì)照組給予lg/kg的生理鹽水。采用灌胃給藥， 每天一次，連續(xù)七天，末次給藥后30分鐘，將大鼠用20%烏拉但麻醉，剝離大鼠頸總動(dòng)脈，在 遠(yuǎn)心端進(jìn)行動(dòng)脈插管用四道生理記錄儀加測(cè)血壓，在近心端用45%的三氯化鐵溶液浸泡的 0.5cm寬的濾紙條包裹動(dòng)脈，記錄從包裹到血壓降為0時(shí)的時(shí)間為動(dòng)脈血栓形成時(shí)間，記錄 數(shù)據(jù)，各組進(jìn)行組間t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果見表2
[0062]表1本發(fā)明藥物組合物膠囊對(duì)大鼠體內(nèi)動(dòng)脈血栓形成的影響(X 土 SD)
[0063]
[0064] 注：與空白對(duì)照組比較，Δρ<〇·〇5Δ Δρ<〇·〇1。
[0065] 實(shí)驗(yàn)組1~3與對(duì)照組和空白對(duì)照組比較均能延長(zhǎng)動(dòng)脈血栓形成時(shí)間。統(tǒng)計(jì)結(jié)果分 析表明，本發(fā)明的納豆激酶組合物具有延長(zhǎng)動(dòng)脈血栓形成時(shí)間的作用。
[0066] 實(shí)驗(yàn)例2對(duì)大鼠體內(nèi)靜脈血栓形成的影響實(shí)驗(yàn)
[0067] 取SD大鼠70只，體重在180~220g，雌雄各半，將其隨機(jī)分為7組，每組10只，雌雄各 5只，分別為實(shí)驗(yàn)組1、2、3,對(duì)照組1、2、3,以及空白對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組1、2、3分別給藥實(shí)施例1、 2、3的組合物，給藥劑量為lg/kg;對(duì)照組1給藥納豆激酶凍干粉(2000 IU/g )、對(duì)照組2給藥淫 羊藿提取物（淫羊藿苷的含量為〇.〇4mg/g)、對(duì)照組3給藥川芎提取物（川芎嗪的含量為 0.03mg/g)，對(duì)照組給藥劑量均為lg/kg;空白對(duì)照組給予lg/kg的生理鹽水。采用灌胃給藥， 每天一次，連續(xù)七天，末次給藥后30分鐘，將大鼠用20%烏拉但麻醉，剝離大鼠下腔總靜脈， 在左腎靜脈下端用線結(jié)扎下腔總靜脈，3h后打開下腔總靜脈取出血栓稱重，記錄數(shù)據(jù)，各組 進(jìn)行組間t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果見表2
[0068]表2本發(fā)明藥物組合物膠囊對(duì)大鼠體內(nèi)靜脈血栓形成的影響(X土SD)
[0069]

[0070] 注：與空白對(duì)照組比較Δρ<〇·〇5Δ Δρ<〇·〇1。
[0071] 由上表可知，本發(fā)明的納豆激酶組合物的血栓重量與空白對(duì)照組比較均有所降 低，且明顯低于對(duì)照組1~3。統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析表明，本發(fā)明藥物組合物具有降低靜脈血栓重量 的作用。
[0072] 實(shí)驗(yàn)例3對(duì)家兔體內(nèi)外血栓溶解的影響實(shí)驗(yàn)
[0073]取健康家兔一只，頸動(dòng)脈采血，靜止2小時(shí)，用手術(shù)刀仔細(xì)分取0.5g血塊70粒，稱重 后分別放入7只試管中，每只試管放入10粒血塊。將試管分為7組，分別為實(shí)驗(yàn)組1、2、3,對(duì)照 組1、2、3，以及空白對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組1、2、3分別給藥實(shí)施例1、2、3的組合物0.14g+4.86g蒸餾 水;對(duì)照組1添加納豆激酶凍干粉(2000IU/g)0.14g以及4.86g蒸餾水、對(duì)照組2添加淫羊藿 提取物(淫羊藿苷的含量為0.04mg/g)0.14g以及4.86g蒸餾水、對(duì)照組3添加川芎提取物（川 芎嗪的含量為〇. 〇3mg/g)0.14g以及4.86g蒸餾水，對(duì)照組分別添加給藥劑量為0.14g;空白 對(duì)照組給予5ml蒸餾水。放入37°C水浴箱中水浴3h，取出吸去水分后稱重，按下列公式計(jì)算 溶解率:溶解率=(溶解前重量-溶解后重量)/溶解前重量X 100%，結(jié)果見表3。
[0074]表3本發(fā)明藥物組合物膠囊對(duì)體外血栓溶解的影響(X 土 SD)
[0075]
L〇〇76J 注：與空白對(duì)照組比較Δρ<〇·〇5Δ Δρ<〇·〇1，
[0077]本發(fā)明的納豆激酶組合物與空白對(duì)照組比較均能增加體外血栓溶解率，且溶栓效 果明顯優(yōu)于對(duì)照組。統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析表明，本發(fā)明的納豆激酶組合物具有加速體外血栓溶解 的作用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 納豆激酶組合物，其特征在于:該組合物包括納豆激酶、川芎和淫羊藿組成;每g組合 物中納豆激酶的纖溶活性為200~400IU。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的納豆激酶組合物，其特征在于:該組合物中淫羊藿苷的含量為 0.03~0.04mg/g。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的納豆激酶組合物，其特征在于：該組合物中川芎嗪的含量為 0.02~0.03mg/g。4. 權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的納豆激酶組合物的制備方法，其特征在于:包括以下 步驟： 1) 利用產(chǎn)納豆激酶的枯草桿菌制備納豆激酶發(fā)酵液，離心，取上清液濃縮，得到納豆激 酶濃縮液； 2) 將淫羊藿加水提取，將提取液濃縮成淫羊藿浸膏； 3) 將川芎加水提取，將提取液濃縮成川芎浸膏； 4) 將淫羊藿浸膏、川考浸膏與納豆激酶濃縮液混合，即得。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的納豆激酶組合物的制備方法，其特征在于:包括以下步驟： 1) 利用產(chǎn)納豆激酶的枯草桿菌制備納豆激酶發(fā)酵液，以3000~6000rpm離心，取上清液 濃縮，得到納豆激酶濃縮液； 2) 將淫羊藿加水提取，將提取液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.10~1.20的淫羊藿浸膏； 3) 將川芎加水提取，將提取液濃縮成60 °C下相對(duì)密度為1.20~1.45的川芎浸膏； 4) 將淫羊藿浸膏、川考浸膏與納豆激酶濃縮液混合，即得。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的納豆激酶組合物的制備方法，其特征在于:包括以下步驟： 1) 利用產(chǎn)納豆激酶的枯草桿菌制備納豆激酶發(fā)酵液，以3000~6000rpm離心，取上清液 濃縮，真空冷凍干燥，得到納豆激酶凍干粉； 2) 將淫羊藿加水提取，將提取液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.10~1.20的浸膏，干燥，得 到淫羊藿干粉； 3) 將川芎加水提取，將提取液濃縮成60°C下相對(duì)密度為1.20~1.45的浸膏，干燥，得到 川考干粉； 4) 將淫羊藿干粉、川芎干粉與納豆激酶凍干粉混合，即得。7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的納豆激酶組合物的制備方法，其特征在于:所述枯草桿菌為納 豆桿菌。
【文檔編號(hào)】A61P7/02GK106039296SQ201610486905
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年6月24日
【發(fā)明人】方捷, 方鵬程, 康萍
【申請(qǐng)人】方捷, 方鵬程, 康萍