一種生物活性微包納膠囊及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種生物活性微包納膠囊及其制備方法，通過(guò)離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結(jié)合的方法制得，粒徑為100～1000um，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細(xì)胞及負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。本發(fā)明的生物活性微包納膠囊通過(guò)微包納的結(jié)構(gòu)，采用二級(jí)緩釋的系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)遙控緩釋更為細(xì)致的調(diào)控，并避免了突釋效應(yīng)，可用于藥物與細(xì)胞空間分配與搭載。
【專利說(shuō)明】
一種生物活性微包納膠囊及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明具體涉及一種生物活性微包納膠囊及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來(lái)，微囊/球等微粒性藥物緩釋體系得到飛速發(fā)展，在臨床上也得到了廣泛的應(yīng)用。此外，很多疾病，比如I型糖尿病，帕金森綜合征等，單一的藥物治療往往難以達(dá)到理想的治療效果，并且長(zhǎng)期持續(xù)的注射胰島素等方式，給患者帶來(lái)巨大的痛苦同時(shí)，也造成了巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。而細(xì)胞治療一次治療后能給患者帶來(lái)長(zhǎng)期的療效，減輕了患者痛苦，減小經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)與心理壓力。但是細(xì)胞治療在細(xì)胞失去活性后，患者仍將回到治療前的狀態(tài)，此時(shí)需要再次進(jìn)行細(xì)胞治療。此外，目前藥物緩釋微囊/球常常面臨著藥物突釋效應(yīng)、調(diào)節(jié)藥物溶出速率的手段單一、對(duì)藥物活性保護(hù)不夠等問(wèn)題。對(duì)于藥物緩釋微囊/球負(fù)載藥物的釋放速率的調(diào)控手段，也只主要包括微囊/球表面多層覆膜、更替材料、以及對(duì)載體或者藥物進(jìn)行修飾等。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種生物活性微包納膠囊。
[0004]本發(fā)明的另一目的在于提供上述生物活性微包納膠囊的制備方法。
[0005]本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下:
[0006]—種生物活性微包納膠囊，通過(guò)離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結(jié)合的方法制得，粒徑為100?ΙΟΟΟμπι，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細(xì)胞及負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。
[0007]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述粒徑為200?320μπι。
[0008]—種上述生物活性微包納膠囊的制備方法，包括如下步驟:
[0009](I)配制殼聚糖水溶液和三聚磷酸鈉水溶液；
[0010](2)在殼聚糖水溶液中加入適量的小分子藥物，得第一混合液；
[0011](3)在500?700rpm的高速勻漿的條件下，將三聚磷酸鈉水溶液逐滴滴入步驟(2)所得的第一混合液中，滴完后繼續(xù)攪拌，然后經(jīng)超純水洗滌和凍干后，得平均粒徑為50±20nm，粒徑分布為15?115nm的負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒；
[0012](4)培養(yǎng)分泌型細(xì)胞，得到密度為2?8 X 17ceIlsAiL的細(xì)胞懸浮液，并配制海藻酸鈉水溶液；
[0013](5)將海藻酸鈉水溶液、負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒的懸浮液和細(xì)胞懸浮液按比例混合均勻，得第二混合液；
[0014](6)通過(guò)注射栗和高壓微膠囊成型裝置，將第二混合液滴入成型液中發(fā)生凝膠化反應(yīng)，再經(jīng)孵育后，即得所述生物活性微包納膠囊，上述高壓微膠囊成型裝置的具體參數(shù)為:電壓6.9?7.2kv、22#針頭、液面距18?22mm、推進(jìn)速度95?102mm/h，使用茶漏收集;成型液中含有45?55mM CaCl2和0.8?1.2mM BaCl2o
[0015]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述成型液中含有50mM CaCl2和ImM BaCl2。
[0016]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述步驟(6)中高壓微膠囊成型裝置的具體參數(shù)為:電壓7.0kv、22#針頭、液面距20mm、推進(jìn)速度100mm/h，使用茶漏收集。
[0017]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒的平均粒徑為50.4±18.711111，粒徑分布為20?11011111。
[0018]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述第二混合液和成型液的體積比為4?6:100。
[0019]本發(fā)明的有益效果是:
[0020]1、本發(fā)明的生物活性微包納膠囊通過(guò)微包納的結(jié)構(gòu)，采用二級(jí)緩釋的系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)遙控緩釋更為細(xì)致的調(diào)控，并避免了突釋效應(yīng)，可用于藥物與細(xì)胞空間分配與搭載。
[0021]2、本發(fā)明的生物活性微包納膠囊利用海藻酸鹽為材料，具有良好的生物相容性，能夠?qū)Πd的細(xì)胞進(jìn)行免疫隔離保護(hù)，免遭免疫系統(tǒng)攻擊，保持良好的生物活性。
[0022]3、本發(fā)明的生物活性微包納膠囊采用微囊內(nèi)部包埋有殼聚糖納米粒的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，保證了不同藥物的空間分配，提高了藥物的長(zhǎng)效釋放和精細(xì)調(diào)控，降低了單純使用藥物的毒副作用。
[0023]4、本發(fā)明的納米粒利用堿性的殼聚糖為材料，降解產(chǎn)物具有營(yíng)養(yǎng)作用與藥理功效。
[0024]5、本發(fā)明的制備方法結(jié)合了離子凝膠法和高壓靜電液滴法，工藝簡(jiǎn)單，操作方便。
【具體實(shí)施方式】
[0025]以下通過(guò)【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行進(jìn)一步的說(shuō)明和描述。
[0026]實(shí)施例1
[0027]—種生物活性微包納膠囊，通過(guò)離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結(jié)合的方法制得，粒徑為100?ΙΟΟΟμπι，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細(xì)胞及負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。本實(shí)施例以Y -氨基丁酸作為小分子藥物代表，以i3-TC-6細(xì)胞作為分泌型細(xì)胞模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
[0028]制備方法具體包括如下步驟:
[0029](I)配制0.1 % (w/v)的殼聚糖水溶液和0.1 % (w/v)的三聚磷酸鈉水溶液；
[0030](2)在殼聚糖水溶液中加入適量的γ -氨基丁酸，終濃度為20yg/mL，得第一混合液；
[0031](3)在600rpm高速勻漿的條件下，將三聚磷酸鈉水溶液逐滴滴入步驟(2)所得的第一混合液中，滴完后繼續(xù)攪拌lOmin，然后經(jīng)超純水洗滌和凍干后，得平均粒徑為50.4土18.7nm，粒徑分布為20?I 1nm的負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒；
[0032](4)無(wú)菌環(huán)境下培養(yǎng)β-TC-e細(xì)胞，得到密度為2?8 X 17ceIlsAiL的細(xì)胞懸浮液，并配制1.8% (w/v)的海藻酸鈉水溶液；
[0033](5)將1.8 %海藻酸鈉水溶液、負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒的懸浮液(lmg/mL)和細(xì)胞懸浮液按8:1:1的比例混合均勻，得第二混合液；
[0034](6)通過(guò)微量注射栗(AJ5805，上海安吉電子設(shè)備有限公司)和高壓微膠囊成型裝置(WJN-50，上海理工大學(xué))，將5mL第二混合液滴入10mL成型液中發(fā)生凝膠化反應(yīng)，再經(jīng)孵育1min后，即得平均粒徑為245.52±22.ΟΟμπι，粒徑分布為200?320μπι的所述生物活性微包納膠囊，上述高壓微膠囊成型裝置的具體參數(shù)為:電壓7.0kv、22#針頭、液面距20mm、推進(jìn)速度100mm/h，使用茶漏收集;成型液中含有50mM CaCl2和ImM BaCl2。
[0035]將上述生物活性微包納膠囊給藥小鼠，在2周內(nèi)使I型糖尿病小鼠的血糖值降低到正常值，并在3周后測(cè)定小鼠的胰腺辟田胞量有一定增加。
[0036]本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可知，本發(fā)明的技術(shù)參數(shù)在下述范圍內(nèi)變化時(shí)，仍然能夠得到與上述實(shí)施例相同或相近的技術(shù)效果，仍然屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍:
[0037]—種生物活性微包納膠囊，通過(guò)離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結(jié)合的方法制得，粒徑為100?ΙΟΟΟμπι，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細(xì)胞及負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。
[0038]上述生物活性微包納膠囊的制備方法，包括如下步驟:
[0039](I)配制殼聚糖水溶液和三聚磷酸鈉水溶液；
[0040](2)在殼聚糖水溶液中加入適量的小分子藥物，得第一混合液；
[0041 ] (3)在500?700rpm的高速勻漿的條件下，將三聚磷酸鈉水溶液逐滴滴入步驟(2)所得的第一混合液中，滴完后繼續(xù)攪拌，然后經(jīng)超純水洗滌和凍干后，得平均粒徑為50±20nm，粒徑分布為15?115nm的負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒；
[0042](4)培養(yǎng)分泌型細(xì)胞，得到密度為2?8 X 17ceIlsAiL的細(xì)胞懸浮液，并配制海藻酸鈉水溶液；
[0043](5)將海藻酸鈉水溶液、負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒的懸浮液和細(xì)胞懸浮液按比例混合均勻，得第二混合液；
[0044](6)通過(guò)注射栗和高壓微膠囊成型裝置，將第二混合液滴入成型液中發(fā)生凝膠化反應(yīng)，再經(jīng)孵育后，即得所述生物活性微包納膠囊，上述高壓微膠囊成型裝置的具體參數(shù)為:電壓6.9?7.2kv、22#針頭、液面距18?22mm、推進(jìn)速度95?102mm/h，使用茶漏收集;成型液中含有45?55mM CaCl2和0.8?1.2mM BaCl2。
[0045]以上所述，僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，故不能依此限定本發(fā)明實(shí)施的范圍，SP依本發(fā)明專利范圍及說(shuō)明書(shū)內(nèi)容所作的等效變化與修飾，皆應(yīng)仍屬本發(fā)明涵蓋的范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種生物活性微包納膠囊，其特征在于:通過(guò)離子凝膠法和高壓靜電液滴法相結(jié)合的方法制得，粒徑為100?ΙΟΟΟμπι，其由一海藻酸鹽微包納膠囊和位于其中的分泌型細(xì)胞及負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒組成。2.如權(quán)利要求1所述的生物活性微包納膠囊，其特征在于:所述粒徑為200?320μπι。3.—種權(quán)利要求1或2所述的生物活性微包納膠囊的制備方法，其特征在于:包括如下步驟: (1)配制殼聚糖水溶液和三聚磷酸鈉水溶液； (2)在殼聚糖水溶液中加入適量的小分子藥物，得第一混合液； (3)在500?700rpm的高速勻漿的條件下，將三聚磷酸鈉水溶液逐滴滴入步驟(2)所得的第一混合液中，滴完后繼續(xù)攪拌，然后經(jīng)超純水洗滌和凍干后，得平均粒徑為50 土 20nm，粒徑分布為15?115nm的負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒； ⑷培養(yǎng)分泌型細(xì)胞，得到密度為2?8X 17ceIlsAiL的細(xì)胞懸浮液，并配制海藻酸鈉水溶液； (5)將海藻酸鈉水溶液、負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒的懸浮液和細(xì)胞懸浮液按比例混合均勻，得第二混合液； (6)通過(guò)注射栗和高壓微膠囊成型裝置，將第二混合液滴入成型液中發(fā)生凝膠化反應(yīng)，再經(jīng)孵育后，即得所述生物活性微包納膠囊，上述高壓微膠囊成型裝置的具體參數(shù)為:電壓6.9?7.21^、22#針頭、液面距18?22111111、推進(jìn)速度95?102111111/11，使用茶漏收集;成型液中含有45?55mM CaCl2和0.8?I.2mM BaCl2。4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述成型液中含有50mMCaCl2和ImMBaCl2o5.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述步驟(6)中高壓微膠囊成型裝置的具體參數(shù)為:電壓7.0kv、22#針頭、液面距20mm、推進(jìn)速度100mm/h，使用茶漏收集。6.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述負(fù)載小分子藥物的殼聚糖納米粒的平均粒徑為50.4±18.711111，粒徑分布為20?11011111。7.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述第二混合液和成型液的體積比為4?6:1OO0
【文檔編號(hào)】A61K31/197GK106074443SQ201610417848
【公開(kāi)日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月15日 公開(kāi)號(hào)201610417848.3, CN 106074443 A, CN 106074443A, CN 201610417848, CN-A-106074443, CN106074443 A, CN106074443A, CN201610417848, CN201610417848.3
【發(fā)明人】劉源崗, 王士斌, 翁偉績(jī), 李惠惠, 李騰騰
【申請(qǐng)人】華僑大學(xué)