一種富含dha的微生物油脂在2型糖尿病中的應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明具體公開了一種富含DHA的微生物油脂在預(yù)防和/或治療2型糖尿病中的應(yīng)用。一種富含DHA的微生物油脂，主要是通過發(fā)酵所得，所述的富含DHA的微生物油脂可通過促進(jìn)胰島β細(xì)胞增殖和抑制β細(xì)胞凋亡，有效促進(jìn)胰島素的分泌，從而降低血糖水平，可在制備預(yù)防和/或治療2型糖尿病中的藥物、食品、飲品或保健品中應(yīng)用，所述的富含DHA的微生物油脂生產(chǎn)過程簡單，生產(chǎn)成本低，對于預(yù)防和/或治療2型糖尿病效果明顯，具有重要的應(yīng)用和推廣價(jià)值。
【專利說明】
一種富含DHA的微生物油脂在2型糖尿病中的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及一種富含DHA的微生物油脂在2型 糖尿病中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 2型糖尿病是一種以高血糖水平為特征，由于胰島辟田胞所分泌的胰島素不足或靶 組織或細(xì)胞對胰島素不敏感所導(dǎo)致的內(nèi)分泌代謝疾病。近年來，糖尿病患者日益增多，預(yù)計(jì) 到2030年，全球糖尿病患者總量將超過3億人，而其中90%的為2型糖尿病。目前2型糖尿病最 常用的治療方法是藥物治療，它具有起效快，降血糖程度高等優(yōu)勢。但藥物治療除了治療作 用外，還會引起低血糖癥、肝損傷和體重增加等不良反應(yīng)，而肥胖會進(jìn)一步加重2型糖尿病 的病程。由于2型糖尿病的治療是不可間斷的，長期口服降血糖藥物會降低藥物順應(yīng)性和導(dǎo) 致藥物耐受性等問題。在降血糖藥物研究過程中，研究者發(fā)現(xiàn)高純度DHA(92%以上)能使2型 糖尿病患者的糖化血紅蛋白水平控制在7.1%左右，具有較好的降血糖作用。但因需要的是 DHA標(biāo)準(zhǔn)品，生產(chǎn)成本高，不易進(jìn)行普遍性推廣，尋找對2型糖尿病效果好，副作用小，價(jià)格低 的產(chǎn)品成為研究熱點(diǎn)。
[0003] 深海魚油富含DHA油脂，其品質(zhì)與深海魚種類、地域、季節(jié)差異直接相關(guān)，深海魚油 中重金屬離子、有毒物質(zhì)等富集，品質(zhì)顯著降低，且深海魚油處理工藝復(fù)雜，收率較低，資源 有限，不能滿足市場需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種富含DHA的微生物 油脂在預(yù)防和/或治療2型糖尿病中的應(yīng)用。本發(fā)明的另一目的在于提供所述富含DHA的微 生物油脂及一種含有該微生物油脂的組合物，該富含DHA的微生物油脂以及該油脂組合物 對于2型糖尿病的預(yù)防和/或治療具有很好的效果，不僅能顯著降低血糖，使血糖水平恢復(fù) 到正常水平，且能有效消除降血糖藥物單獨(dú)給藥時(shí)體重增加的副作用和常規(guī)降血糖藥物服 用后出現(xiàn)的低血糖癥。本發(fā)明為2型糖尿病的預(yù)防和/或治療提供了一條安全、有效、經(jīng)濟(jì)的 有效途徑。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)手段予以實(shí)現(xiàn)的。
[0006] -種富含DHA的微生物油脂在預(yù)防和/或治療2型糖尿病中的應(yīng)用，所述微生物油 脂是由裂殖壺菌發(fā)酵制備得到。
[0007] 發(fā)明人經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，裂殖壺菌發(fā)酵獲得的微生物油脂可有效促進(jìn)胰島細(xì)胞增 殖和抑制細(xì)胞凋亡，有效促進(jìn)胰島素的分泌，從而降低血糖水平。本發(fā)明首次將微生物油 脂直接應(yīng)用于2型糖尿病的預(yù)防和/或治療，具有重要的應(yīng)用價(jià)值。該微生物油脂應(yīng)用時(shí)可 單獨(dú)應(yīng)用或以一種油脂組合物進(jìn)行應(yīng)用。
[0008] 基于上述應(yīng)用，本發(fā)明提供了一種富含DHA的微生物油脂。
[0009] 優(yōu)選地，所述微生物油脂是由裂殖壺菌在以甘油為碳源，溫度25°C的條件下發(fā)酵 制備得到，其中DHA含量為45-55%，DPA含量5-10%。
[0010] 更優(yōu)選地，所述微生物油脂中的DHA含量為48~50%，DPA含量為8~9%。
[0011] 優(yōu)選地，將所述微生物油脂應(yīng)用于制備預(yù)防和/或治療2型糖尿病的藥物、食品、飲 品或保健品。
[0012] 優(yōu)選地，所述藥物、食品、飲品或保健品中還包含藥物、食品、飲品或保健品接受的 輔料。
[0013] 優(yōu)選地，將所述微生物油脂與西他列汀組成油脂組合物： A組分:含有DHA的微生物油脂，其中DHA的質(zhì)量份數(shù)為300-500份;所述微生物油脂由裂 殖壺菌在以葡萄糖或甘油為碳源的條件下發(fā)酵所得，其中DHA含量為30-55%，DPA含量5-10%； B組分:西他列汀，質(zhì)量份數(shù)為5-15份。
[0014] 基于上述應(yīng)用，本發(fā)明按照上述配比提供了一種功能性的油脂組合物。
[0015] 優(yōu)選地，所述A組分中DHA的質(zhì)量份數(shù)為400份，B組分西他列汀的質(zhì)量份數(shù)為10份。
[0016] 所述A組分含有DHA的微生物油脂可采用現(xiàn)有的發(fā)酵方法制備得到。優(yōu)選地，所述A 組分中含有DHA的微生物油脂由裂殖壺菌在以甘油為碳源，溫度25°C條件下發(fā)酵得到，或所 述A組分中含有DHA的微生物油脂由裂殖壺菌在以葡萄糖為碳源，溫度30°C條件下發(fā)酵得 到。
[0017] 優(yōu)選地，將所述油脂組合物應(yīng)用于制備預(yù)防和/或治療2型糖尿病的藥物。
[0018] 優(yōu)選地，所述藥物還包含藥品接受的輔料。
[0019] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：（1)該油脂中的DHA含量已達(dá)到有效給 藥濃度，單獨(dú)給2型糖尿病大鼠灌胃該油脂時(shí)，大鼠的血糖水平極顯著地降低，且大鼠的血 糖水平恢復(fù)正常，大大減少了油脂中DHA的分離提取過程和生產(chǎn)成本，擴(kuò)大了其在2型糖尿 病防治中的濃度應(yīng)用范圍。（2)該油脂與西他列汀聯(lián)合使用時(shí)，能消除西他列汀單獨(dú)給藥時(shí) 時(shí)引起體重增加的不良反應(yīng)，且在藥效學(xué)水平上，對西他列汀的作用效果無影響，未出現(xiàn)低 血糖的情況，有效提高了西他列汀在2型糖尿病上的應(yīng)用優(yōu)勢。
【附圖說明】
[0020] 圖1為應(yīng)用例1中HFD-STZ-fed組和NFD-fed組大鼠的平均體重變化結(jié)果。
[0021 ]圖2為應(yīng)用例2中不同組別對2型糖尿病大鼠體重的影響。
[0022] 圖3為應(yīng)用例2中不同組別對2型糖尿病大鼠體重增長量的影響。
[0023] 圖4為應(yīng)用例2中不同組別對2型糖尿病大鼠周體重增長量的影響。
[0024] 圖5為應(yīng)用例2中CK組和NC組大鼠的平均糖化血紅蛋白水平;a表示與空白對照組 比較，均值具有極顯著差異(P〈〇. 01)。
[0025] 圖6為應(yīng)用例2中不同組別對2型糖尿病大鼠平均糖化血紅蛋白水平的影響；c表示 與模型NC組比較，均值具有極顯著差異(P〈0.01)。
[0026] 圖7為應(yīng)用例2中CK組和NC組大鼠的平均胰島素水平;a表示與空白對照組比較，均 值具有極顯著差異(P〈〇.01)。
[0027] 圖8為應(yīng)用例2中不同組別對2型糖尿病大鼠平均胰島素水平的影響;a表示與空白 對照組比較，均值具有極顯著差異(P〈〇. 01); b表示與空白對照組比較，均值具有顯著差異 (P〈0.05); C表示與模型NC組比較，均值具有極顯著差異(P〈0.01);d表示與模型NC組比較， 均值具有顯著差異(P〈〇. 05)。
[0028]圖9為應(yīng)用例2中不同組別對2型糖尿病大鼠胰島細(xì)胞增殖和凋亡的影響；藍(lán)色表 示正常的胰島細(xì)胞，紅色表示正在有絲分裂的胰島細(xì)胞，綠色表示凋亡的胰島細(xì)胞;A為CK 組(空白對照組）;B為NC組(模型組）;C為PC組（陽性對照組）;D為DHA+S1組(DHA Gl與西他列 ?。?E為DHA+S2組(DHA G2與西他列汀）;F為DHA Gl組;G為DHA G2組;H為西他列汀組。
【具體實(shí)施方式】
[0029]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明 進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于 限定本發(fā)明。
[0030] 實(shí)施例1富含DHA的微生物油脂的獲得 本實(shí)施例按照以下兩種方法獲得DHA的微生物油脂，結(jié)果見表1。
[0031] 方法1:裂殖壺菌在以甘油為碳源，發(fā)酵溫度為25°C，發(fā)酵結(jié)束后，收集濕菌體并真 空干燥至菌體保持恒重后，對干燥的菌體進(jìn)行破壁，加入有機(jī)溶劑（如石油醚或正己烷等） 進(jìn)行萃取，從而得到富含DHA的微生物油脂UDHA G1)，進(jìn)行甲酯化后氣相檢測分析，確定所 述油脂1中DHA含量占總油脂的48.14%。
[0032]方法2:裂殖壺菌在以葡萄糖為碳源，發(fā)酵溫度為30°C，發(fā)酵結(jié)束后，收集濕菌體并 真空干燥至菌體保持恒重后，對干燥的菌體進(jìn)行破壁，加入有機(jī)溶劑（如石油醚或正己烷 等)進(jìn)行萃取，從而得到富含DHA的微生物油脂2(DHA G2)，進(jìn)行甲酯化后氣相檢測分析，確 定所述油脂2中DHA含量占總油脂的34.46%。
[0033] 實(shí)施例2油脂組合物 本實(shí)施例提供一種功能性油脂組合物，包括以下組分： A組分:實(shí)施例1獲得的微生物油脂I (DHA Gl )，其在組合物的質(zhì)量份數(shù)為831份，即其中 DHA的質(zhì)量份數(shù)為400份； B組分:西他列汀，其在組合物中的質(zhì)量份數(shù)10份。
[0034]實(shí)施例3油脂組合物 本實(shí)施例提供一種功能性油脂組合物，包括以下組分： A組分:實(shí)施例1獲得的微生物油脂2 (DHA G2)，其在組合物的質(zhì)量份數(shù)為1161份，即其 中DHA的質(zhì)量份數(shù)為400份； B組分:西他列汀，其在組合物中的質(zhì)量份數(shù)10份。
[0035]應(yīng)用例1 2型糖尿病的動物模型的構(gòu)建 取96只大小、體型相似的成年SD大鼠用于以下實(shí)驗(yàn)。
[0036] NFD-fed組：隨機(jī)分取出12只SD大鼠，喂予大鼠維持飼料和自來水，連續(xù)喂養(yǎng)四周 后，按30 mg/kg的劑量注射檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液，連續(xù)注射兩天，記為普食飼養(yǎng)組 (normal forage diet fed，NFD-fed)〇
[0037] HFD-STZ-f ed組:給剩余的雄性SD大鼠喂予高脂飼料和3%的果糖水，連續(xù)喂養(yǎng)四周 后，按30 mg/kg的劑量給SD大鼠腹腔注射STZ，連續(xù)注射兩天，記為高脂高糖聯(lián)合STZ注射組 (high fat diet-STZ fed,HFD-STZ-fed)〇
[0038] 在高糖高脂飼養(yǎng)階段，與NFD-fed組相比較，HFD-STZ-fed組大鼠體重增長較快，鼠 毛光滑有光澤，并出現(xiàn)多便多飲、糞便較稀和動作遲緩，反應(yīng)遲鈍等現(xiàn)象。腹腔注射STZ后， 大鼠體重快速下降，鼠毛失去光澤，鼠毛大量脫落，HFD-STZ-fed大鼠出現(xiàn)普食和飲用水?dāng)z 入量顯著性增加、糞便干燥、大小便頻繁等現(xiàn)象，但未觀察到死亡現(xiàn)象的發(fā)生。
[0039] 如表2所示，以FBG>7.8mmol/L為2型糖尿病建模成功的標(biāo)準(zhǔn)，造模結(jié)束后，HFD-STZ-f ed組大鼠的平均FBG水平（15.21 ± 2.69mmol/L)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于NFD-f ed大鼠的平均FBG水平 (6 · 47 ±0 · 74mmol/L)，HFD-STZ-fed組大鼠的FBG水平增加135 · 08%。同時(shí)，如圖 1 所示，HFD-STZ-f ed 組的平均體重（226 · 6 ± 12 · 5g)與 NFD-f ed 組的（276 · 0 ± 10 · 3g)相比，下降了 17.90%。造模實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，本次實(shí)驗(yàn)2型糖尿病大鼠的造模建模成功率達(dá)到了85.88%，為 實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行提供了科學(xué)有效的實(shí)驗(yàn)材料。
注；s表示與2自對'顏組比較> 均鍵異有極MlM異（Ρ<0.0?。
[0040] 應(yīng)用例2 將應(yīng)用例1中造模成功的模型大鼠分為8組，每組12只，按以下的給藥方式和相應(yīng)劑量 對8個(gè)分組的大鼠進(jìn)行灌胃，包括：1)空白對照組(00:12只NFD-fed組大鼠，喂予大鼠維持 飼料和自來水;2 ) 2型糖尿病模型組(NO : 12只HFD-STZ-f ed大鼠，喂予大鼠維持飼料和自來 水;3 )鹽酸二甲雙胍組（陽性對照，PC) : 12只HFD-STZ-f ed大鼠，按0.32g/kg的劑量給2型糖 尿病大鼠灌胃鹽酸二甲雙胍，飲用水為自來水;4)微生物油脂1+西他列汀組(DHA+S 1) : 12 只HFD-STZ-f ed大鼠，灌胃的油脂劑量以油脂中的DHA量計(jì)，按0.4g/kg的DHA微生物油脂1 + 10mg/kg的西他列汀劑量（即實(shí)施例2提供的油脂組合物)給2型糖尿病大鼠灌胃，飲用水為 自來水;5 )微生物油脂2+西他列汀組(DHA+S 2 ) : 12只HFD-STZ-f ed大鼠，灌胃的油脂劑量以 油脂中的DHA量計(jì)，按0.4g/kg的DHA微生物油脂2 +10mg/kg的西他列汀劑量（即實(shí)施例3提 供的油脂組合物)給2型糖尿病大鼠灌胃，飲用水為自來水;6)微生物油脂1組(DHA Gl):12 只HFD-STZ-f ed大鼠，灌胃的油脂劑量以油脂中的DHA量計(jì)，按0.4g/kg的劑量給2型糖尿病 大鼠灌胃DHA微生物油脂1(即實(shí)施例1的微生物油脂1)，飲用水為自來水;7)微生物油脂2組 (DHA G2): 12只HFD-STZ-f ed大鼠，灌胃的油脂劑量以油脂中的DHA量計(jì)，按0.4 g/kg的劑量 給2型糖尿病大鼠灌胃DHA油脂1(即實(shí)施例1的微生物油脂2)，飲用水為自來水;8)西他列汀 組(SG ) : 12只HFD-STZ-f ed大鼠，按10 mg/kg的劑量給2型糖尿病大鼠灌胃西他列汀，飲用水 為自來水。
[0041]給8個(gè)實(shí)驗(yàn)組中的每只大鼠標(biāo)號，各組大鼠進(jìn)行自由進(jìn)食和飲水，觀察大鼠的自由 活動度、進(jìn)食量、毛色和大小便等情況，每天稱量大鼠體重并進(jìn)行記錄，并根據(jù)體重調(diào)整給 藥液的體積。每天灌胃一次，連續(xù)灌胃28天后，大鼠禁食12 h，用戊巴比妥鈉將大鼠麻醉，目艮 球取血并處死實(shí)驗(yàn)動物，將剛收集的血液自然凝固10-20 min，3000 rpm離心15 min，取上 清液于2 mL的離心管中，并存放于-80°C冰箱中備用。
[0042] (I)DHA油脂對2型糖尿病模型大鼠體重的影響 如圖2所示，給藥4周期后，各組大鼠的體重均大幅增加，但CK組的平均體重仍高于各個(gè) 治療組和模型組的平均體重。如圖4所示，給藥兩周后，DHA+S1組、DHA+S2組和DHA G1組的平 均體重增長緩慢，在給藥結(jié)束時(shí)，DHA+S1組和DHA Gl組的平均體重已低于NC組。與NC組相 比，各個(gè)治療組第一周的體重增量均是NC組體重增量的1.6倍以上，第2周后，NC組的體重增 量均大于各個(gè)治療組。由圖3可知，給藥4周后，各組大鼠的體重增量均高于75g。其中，SG組、 PC組、NC組和DHA G2組的體重增量均高于CK組（87.2g)的體重增量，分別增加了 100g、 95.78、94.38和91.78，體重增加較明顯。而0骱+31、0骱+32、0骱61的體重增量則均低于〇( 組的體重增量，分別為增加了 77.6g、80g、75.9g，且未發(fā)現(xiàn)這三組體重增加過快的現(xiàn)象。 [0043] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，低DHA含量的油脂（即實(shí)施例1的微生物油脂2)、鹽酸二甲雙胍和西 他列汀均會引起大鼠體重增加較快的副作用，降低大鼠的耐受性;而高DHA含量的油脂，或 當(dāng)將DHA油脂與西他列汀聯(lián)合等DDP-4抑制劑聯(lián)用（即實(shí)施例1的微生物油脂1，實(shí)施例2、3提 供的油脂組合物)時(shí)可消除體重增加的副作用。
[0044] (2)DHA油脂對2型糖尿病大鼠糖化血紅蛋白（HbAcl)水平的影響 HbAcl是血液中由血糖與紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白相結(jié)合所產(chǎn)生的物質(zhì)。血糖與血紅蛋白 間的結(jié)合過程是不可逆的，且HbAcl水平與血糖濃度成正比。它能反應(yīng)近8-12周的平均血糖 濃度，可在任何時(shí)間檢測其濃度，不需要任何條件限制，如空腹等。這種特性使其成為評價(jià) 糖尿病患者血糖控制的首選檢測方法。如圖5所示，4周的治療結(jié)束后，NC組的HbAlc值 (1596.03±145.09腦〇1/1)比0(組的肋八1(3值（1318.59±254.76腹〇1/1)高20.04%，由此可 知，造模成功的2型糖尿病大鼠在4周的治療期期間不能自愈，已形成了穩(wěn)定的2型糖尿病。 如圖6所示，4周的給藥治療結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與NC組相比，DHA G2組的HbAlc水平只下 降了5.76%，而其他各個(gè)治療組的HbAlc水平均明顯下降，下降了水平達(dá)到16.11%以上，基本 恢復(fù)到CK組的HbAc 1水平。
[0045] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，除DHA G2組之外，各個(gè)治療組的HbAcl水平均顯著性下降，恢復(fù)到 CK組的HbAcl水平;說明DHA油脂對于2型糖尿病的治療作用與DHA在油脂中的含量相關(guān)。高 DHA含量的油脂，或當(dāng)將DHA油脂與西他列汀等DDP-4抑制劑聯(lián)合使用（即實(shí)施例1的微生物 油脂1，實(shí)施例2、3提供的油脂組合物)時(shí)具有良好的降血糖作用。
[0046] (3)DHA油脂對2型糖尿病大鼠胰島素水平的影響 在正常的代謝過程中，胰島素是機(jī)體進(jìn)食后由胰島辟田胞分泌的，并傳遞信號給胰島素 感應(yīng)組織，促進(jìn)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收，降低血糖濃度。在2型糖尿病患者體內(nèi)，正常水平的胰 島素已無法激發(fā)胰島素感應(yīng)組織來吸收葡萄糖，因此，細(xì)胞會代償性分泌大量的胰島素， 以維持血糖的正常水平，但由于胰島細(xì)胞長期高負(fù)荷作用，會造成胰島細(xì)胞損傷或死亡， 從而使胰島細(xì)胞失去功能。對比NC組與CK組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果（如圖7)，NC組的INS水平上升了 20.04%，而兩組大鼠的INS水平無明顯差異，由此可知，模型組大鼠已形成胰島素抵抗。如圖 8所示，與NC組相比，給藥4周后，各個(gè)治療組的INS水平均上升11.87%以上，其中DHA G2組和 SG組的INS水平最高，說明各個(gè)治療組所用的藥物均能促進(jìn)胰島素的分泌，DHA油脂2(即實(shí) 施例1的微生物油脂2)單獨(dú)使用即可達(dá)到陽性藥物西他列汀的效果。
[0047] (4)DHA油脂對2型糖尿病大鼠的IR和ISI的影響 提高胰島素敏感性(ISI)和改善胰島素抵抗(IR)是評論2型糖尿病治療藥物是否有效 的重要指標(biāo)。如表3所示，經(jīng)過長期高脂高糖膳食喂養(yǎng)和腹腔注射STZ后，模型大鼠的ISI下 降了 20.25%，IR值增加了 25.32%，導(dǎo)致模型大鼠血糖升高。給藥4周后，與NC組的I SI值相比， DHA Gl組的ISI增加最明顯，增加了 12.37%，？(：組、0擬+51組和0骱+52組的151值也有一定的 增加，但增幅無 DHA Gl組的高，其余各組的ISI值則與NC組無明顯差別。與NC組的IR值相比， PC組、DHA+S1組、DHA+S2組和DHA G1組的IR值均下降，其中DHA G1組下降最明顯，下降了 11.04%，而DHA G2組的IR值有一定的升高。
[0048]由此可知，PC組、DHA+S 1組（即實(shí)施例2的油脂組合物）、DHA+S2組（即實(shí)施例3的油 脂組合物）和DHA Gl組（即實(shí)施例1的微生物油脂1)的藥物能提高2型糖尿病大鼠的ISI，并 減少IR，具有良好的治療2型糖尿病的作用，其中，DHA Gl組的治療效果最佳，說明DHA油脂 成分和含量會影響其對2型糖尿病的治療作用，當(dāng)DHA含量較高時(shí)，給藥的油脂量較小，表現(xiàn) 出良好的治療效果。當(dāng)DHA含量較低，給大鼠灌胃的非DHA成分明顯較大，它們會影響DHA對 ISI和IR的改善作用。
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[0049] (5)DHA油脂對2型糖尿病大鼠胰島細(xì)胞增殖和凋亡的影響 β_細(xì)胞因其調(diào)節(jié)胰島素釋放和精確調(diào)節(jié)的能力備受矚目。β_細(xì)胞釋放的胰島素量是根 據(jù)其性質(zhì)、細(xì)胞數(shù)量和刺激通路、葡萄糖濃度而變化的，因此，β-細(xì)胞對將血糖濃度保持在 相對狹小的健康生理范圍內(nèi)具有至關(guān)重要的作用。在健康個(gè)體中，胰島素敏感組織和β_細(xì) 胞之間存在著反饋回路，細(xì)胞會通過響應(yīng)肌肉、肝臟和脂肪組織的需求而增加胰島素的 釋放。事實(shí)上，胰島素敏感和胰島素水平是非線性互惠的。細(xì)胞對胰島素敏感性發(fā)生變化 后的適應(yīng)能力似乎是兩個(gè)因素的結(jié)果:細(xì)胞的功能性響應(yīng)性和β細(xì)胞的數(shù)量。如圖9所示，與 CK組相比，為了響應(yīng)高脂高糖膳食和STZ的破壞，NC組正常的胰島細(xì)胞數(shù)量、有絲分裂的胰 島細(xì)胞數(shù)量和凋亡的胰島細(xì)胞數(shù)量有明顯增加。經(jīng)過4周治療后，DHA+S2組正常細(xì)胞密度下 降，觀察不到細(xì)胞凋亡的現(xiàn)象，而DHA G2組正常細(xì)胞密度下降同時(shí)細(xì)胞凋亡現(xiàn)象加劇。其他 實(shí)驗(yàn)組同NC組相比，正常細(xì)胞密度增加，細(xì)胞有絲分裂的數(shù)量增加，且分裂更集中，而細(xì)胞 凋亡的現(xiàn)象有明顯改善。說明鹽酸二甲雙胍、高品質(zhì)DHA油脂和西他列汀（即實(shí)施例1的微生 物油脂1，實(shí)施例2、3提供的油脂組合物)均能促進(jìn)胰島細(xì)胞的增殖，抑制胰島細(xì)胞凋亡。 [0050]綜上，發(fā)明人經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn):單獨(dú)使用時(shí)，微生物油脂中DHA的含量不僅 會影響其降血糖作用，當(dāng)DHA含量較低時(shí)，還會引起體重增加的副作用，當(dāng)微生物油脂中DHA 含量高于45%以上時(shí)，其對2型糖尿病的降血糖程度與純度為92%的高純度DHA無明顯差異， 患者的血糖水平均基本恢復(fù)正常水平；當(dāng)微生物油脂與西他列汀聯(lián)合使用時(shí)，微生物油脂 中DHA含量為30%以上，即可對2型糖尿病具有良好的治療效果，且可有效降低西他列汀的副 作用。因此，基于本發(fā)明研究結(jié)果和已報(bào)道的研究結(jié)果，可推測油脂中DHA含量在30%以上， 即可通過與西他列汀聯(lián)合使用或DHA含量高于45%單獨(dú)使用的方式對于2型糖尿病都具有良 好的治療效果。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種富含DHA的微生物油脂在預(yù)防和/或治療2型糖尿病中的應(yīng)用，其特征在于，所述 微生物油脂是由裂殖壺菌發(fā)酵制備得到。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述微生物油脂是由裂殖壺菌在以甘油為 碳源，溫度25 °C的條件下發(fā)酵制備得到，其中DHA含量為45-55%，DPA含量5-10%。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，將所述微生物油脂應(yīng)用于制備預(yù)防和/ 或治療2型糖尿病的藥物、食品、飲品或保健品。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物、食品、飲品或保健品中還包含藥 物、食品、飲品或保健品接受的輔料。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，將所述微生物油脂與西他列汀組成油脂組 合物： A組分:含有DHA的微生物油脂，其中DHA的質(zhì)量份數(shù)為300-500份;所述微生物油脂由裂 殖壺菌在以葡萄糖或甘油為碳源的條件下發(fā)酵制備得到，其中DHA含量為30-55%，DPA含量 5-10%； B組分:西他列汀，質(zhì)量份數(shù)為5-15份。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，將所述油脂組合物應(yīng)用于制備預(yù)防和/或 治療2型糖尿病的藥物。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物還包含藥品接受的輔料。
【文檔編號】A61K31/202GK106074619SQ201610459189
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月23日
【發(fā)明人】余龍江, 朱圓敏, 寸育琴, 金文聞, 代鵬飛, 余金龍
【申請人】武漢華士特工業(yè)生物技術(shù)開發(fā)有限公司, 華中科技大學(xué)