一種具有解酒保肝作用的姜黃組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種以姜黃素、蝦青素、金銀花提取物為主要成分的組合物，該組合物具有解酒保肝作用。本發(fā)明組合物具有成分明確、以三種不同的藥效物質組成，利用不同的藥效物質作用原理和靶點發(fā)揮解酒保肝作用，具有服用劑量小、藥食同源的特點，是一種安全有效的解酒保肝的保健品。實驗證明，本發(fā)明組合物較單一姜黃素、蝦青素及金銀花提取物具有更強的解酒保肝活性。體現(xiàn)了復方組合物的協(xié)同作用的特點，可用于制備具有解酒保肝作用的藥品、保健食品。
【專利說明】
一種具有解酒保肝作用的姜黃組合物
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及一種以姜黃素、蝦青素、金銀花提取物為主要成分的組合物，該組合物 具有解酒保肝作用，可用于預防和治療由飲酒過量引起中毒性肝臟疾病。本發(fā)明也涉及該 藥物的藥物制劑，屬于醫(yī)藥技術領域。
【背景技術】
[0002] 酒精性肝損傷(ALD)是因長期過量飲酒引起的中毒性肝臟疾病，ALD是西方國家患 者導致肝硬化的最主要原因。在我國酒精性肝病近年來有逐漸增加的趨勢，目前已成為僅 次于病毒性肝炎的第二大肝病病因。酒精性肝病是由于長期大量飲酒所致的肝臟疾病，初 期通常表現(xiàn)為脂肪肝，進而可發(fā)展成酒精性肝炎、酒精性肝纖維化和酒精性肝硬化，嚴重酗 酒時可誘發(fā)廣泛肝細胞壞死甚或肝功能衰竭。至今臨床上還沒有有效防治肝臟疾病發(fā)生發(fā) 展的理想藥物。目前認為，酒精有直接損害肝細胞的毒性作用，是造成肝損害的基本原因， 氧化應激和脂質過氧化是酒精引起肝臟損傷的重要因素之一。連續(xù)大量飲酒（每日飲酒 150g)，一般均可造成肝損傷，有40%~50%會發(fā)生肝硬化。目前ALD的發(fā)病機制并不十分清 楚，自由基及其介導的脂質過氧化被認為是最主要的致病因素。乙醇在肝臟代謝時可產生 大量自由基:〇2_、H 2O2、0『、C2H5(T和C2H 5OiT，過量的自由基可引起肝細胞膜發(fā)生脂質過氧化 反應，使細胞膜和細胞器結構破壞，膜流動性失常;大量肝細胞內酶(ALT、AST)釋放入血，并 可使清除自由基酶(S0D、GPx)耗竭，肝細胞損傷進一步加重，肝功能異常，脂肪代謝紊亂，最 終導致肝細胞廣泛壞死，細胞腫脹死亡。因此，清除自由基抑制脂質過氧化反應，保護肝細 胞，恢復肝臟正常功能，是防治ALD發(fā)生和發(fā)展的關鍵。
[0003] 乙醇性脂肪肝（alcoholic fatty liver disease，AFLD)是指由于乙醇攝入過量 而導致的肝臟一系列損害病變。肝臟中過量的乙醇及其氧化代謝產物可誘導肝細胞微粒體 酶細胞色素 P450系統(tǒng)活性，特別是與乙醇代謝有關的高活性氧化代謝酶CYP2E1活性升高， 進而通過CYP2E1的氧化代謝產生大量活性氧自由基(reactive oxygen species，R0S) JOS 具有極強的氧化攻擊特性，可直接攻擊細胞器、DNA及具有重要功能的蛋白信號因子，導致 肝細胞損傷及肝功能異常等。
[0004] 降低體內血中乙醇及其代謝產物的濃度是解酒藥物的作用關鍵，減輕其對各器官 的損傷。當前的解酒藥物主要以下兩個方面發(fā)揮解酒作用。第一，解酒藥物抑制酒精的胃腸 吸收，加強乙醇在胃腸道首過效應，降低血中乙醇濃度;第二，解酒藥物直接作用于肝代謝 的酶系，加速乙醇及其代謝產物的消除速率，減輕其對細胞和組織的損害。長期以來，通過 化學合成的方法研制解酒護肝藥物并未取得大的突破。
[0005] 因此研究一種可以降低酒精毒性，并可對酒精所致肝損傷有恢復作用的藥物有著 較大的社會效益及應用前景。
[0006] 本發(fā)明就是將從天然植物中發(fā)現(xiàn)和提取的一種具有防治酒精性肝損傷的天然藥 物組合物。該組合物是由有效成分創(chuàng)新組合成天然產物組合物，從幾種不同作用機制上入 手治療酒精性肝損傷，多組分多靶點協(xié)同作用，達到長短結合，標本兼治的效果，以期從療 效和安全性上有顯著的突破和提高。
[0007]姜黃素（Curcumin)為姜科植物姜黃(Curcuma longa L.)的干燥根莖提取純化得 到，姜黃素具有抗心血管疾病、抗腫瘤、抗微生物、抗抑郁、抗纖維化、保肝等藥理作用。姜黃 素通過抗炎、抗氧化應激和保護線粒體等功能抵抗急性肝損傷。王政研究表明，姜黃素具有 減輕酒精和脂肪導致的肝臟損傷的作用(食品科學，2007年第10期）；彭景華綜述說明了，姜 黃素抗肝損傷的作用機理主要表現(xiàn)在清除肝臟自由基、抑制肝臟炎癥反應以及抑制肝星狀 細胞活化等幾大方面，姜黃素具有阻斷、延緩肝損傷病理進程的作用（國外醫(yī)學，消化系疾 病分冊，2005年06期）；姜黃素對四氯化碳導致的酒精性肝損傷具有保護作用（中華現(xiàn)代臨 床醫(yī)學雜志，2009年第7卷第1期）；尹蓉研究表明，姜黃素對酒精性肝損傷具有保護作用，姜 黃素能通過抑制酒精中毒大鼠脂質過氧化和肝組織中NF-kB的表達，從而減輕或防治酒精 誘導的肝損傷(蘭州大學，2008年碩士論文）；沃興德研究表明，姜黃素的毒性研究表明，其 短期及長期用于正常動物未見不良反應、致畸及致癌反應（浙江中醫(yī)學報，2000，24: 55-56)〇
[0008] 4下青素是從紅球藻屬雨生紅球藻(Haematococcus pluvialis)中提取分離得到。 蝦青素是一種類胡蘿卜素，主要以全反式異構體形式存在于海洋動物體、藻體及多數(shù)陸生植 物體內并具有多種生物學功能，如抗氧化、防止心血管疾病、提高免疫力和抗癌等作用，其 中總抗氧化能力為維生素 E的近20倍(Trends Biotechnol，2003,21(5):210)。裴凌鵬研究 表明，蝦青素可以降低血清ALT，AST活性和肝臟組織中MDA含量，升高血清與肝組織中SOD， GSH-px活性，并降低肝細胞脂肪堆積，有效緩解乙醇對肝臟組織的損傷(江蘇大學學報，醫(yī) 學版，2008年8月18卷4期）；裴凌鵬研究表明，蝦青素對四氯化碳引起的肝損傷具有防治作 用（中國公共衛(wèi)生，2009年5月25卷5期）。
[0009] 金銀花提取物為忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或帶初開的花經過提取得到。具有清 熱、解毒、涼風散熱的功效，具有廣譜抗菌及抗氧化的作用。周春暉研究表明，金銀花提取物 對小鼠化學性肝損傷具有保護作用（現(xiàn)代食品科技，2010年第26卷第4期）；陳紅蓮研究表 明，金銀花對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷具有保護作用，金銀花提取物能顯著降低血清 中ALT、AST水平(P〈0·05或P〈0.01)，提高肝組織勻漿S0D、GSH-Px水平(P〈0·05或P〈0.01)，減 少TNF-α、MDA含量(Ρ〈0.05或P〈0.01)(中國老年學雜志，2011年第16期）；王東升研究表明， 金銀花提取物對對乙酰氨基酚所致的小鼠肝損傷具有保護作用(醫(yī)藥導報，2011年第8期）。
[0010] 本發(fā)明完成前，還未發(fā)現(xiàn)由姜黃素、蝦青素及金銀花提取物組成的組合物具有防 治酒精性肝損傷的作用，也未發(fā)現(xiàn)本發(fā)明組合物在防治酒精性肝損傷的藥品和保健品中的 應用。

【發(fā)明內容】

[0011] 本發(fā)明人依據(jù)科學理論、經過反復試驗，選用了姜黃素、蝦青素及金銀花提取物組 方，通過增強肝臟解毒和酶解，以利尿作用加速體內乙醇的分解和排泄，阻止消化道對乙醇 的吸收及中樞神經系統(tǒng)的作用，降低乙醇對肝臟的損害，促肝細胞再生，增加腦及冠狀血管 流量，緩解中毒癥狀等作用。本制劑具有原料天然可長期服用、易吸收、效果顯著等特點。
[0012] 本組合物與歐美、日本暢銷的以添加興奮劑、止痛劑、維生素和礦物質等類型解酒 劑具有明顯的不同，這些解酒劑只能暫時緩解醉酒引起的癥狀，但對于酒精引起的肝損傷 并無確切療效；同時與目前已有的護肝解酒類保健食品相比，具有作用更確切，藥效物質組 成更清楚的優(yōu)勢，具有明顯的特色，這是本發(fā)明的突出貢獻。
[0013] 本發(fā)明的突出貢獻在于:本發(fā)明組合物在相同劑量下較各單一組分活性更強。體 現(xiàn)了該組合物復方藥效成分相互協(xié)同、多靶點、多途徑作用，也體現(xiàn)了中醫(yī)傳統(tǒng)復方用藥的 特點。本發(fā)明適用于飲酒較多造成酒精性肝損傷者，通過降低乙醇在血中的濃度，促進乙醇 的清除，消除酒后體內產生的過量自由基，阻礙過氧化脂質的形成，從而減輕了乙醇對肝組 織的損傷，起到對肝損傷的輔助保護功能。具有明顯的創(chuàng)新性和技術進步。
[0014] 本發(fā)明另一突出貢獻在于:本發(fā)明組合物配方設計科學合理，制劑工藝簡單可行， 質量可控，安全性高，比相同劑量下的單一的姜黃素、蝦青素及金銀花提取物具有更優(yōu)的改 善酒精性肝損傷癥狀的作用，適宜于廣大酒精性肝損傷人群的使用。
[0015] 本發(fā)明所要解決的技術問題在于從天然植物姜黃、雨生紅球藻及金銀花中提取具 有防治酒精性肝損傷作用的活性組分、制備天然產物組合物。
[0016] 本發(fā)明提供了一種具有防治酒精性肝損傷的天然藥物組合物，該組合物包括姜黃 素20-150份，蝦青素10-80份，金銀花提取物30-300份。優(yōu)選姜黃素100份，蝦青素25份，金銀 花提取物250份。按照上述比例混合組成活性成份與藥用輔料制成的。
[0017] 本發(fā)明的另一目的是提供了本組合物的制備方法：
[0018] (1)將姜黃粉碎成粗粉，用6-10倍量50-90 %食用乙醇提取2-3次，每次提取2-3小 時，提取溫度為50~80°C，提取液過濾，濾液回收乙醇，濃縮到含醇量為20%，通過預先處理 好的D-101大孔樹脂柱，先用20%乙醇洗脫，再用80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，回收 乙醇，干燥，得姜黃素；
[0019] (2)將雨生紅球藻置閃式提取器中用60-95%食用乙醇提取2-3次，每次提取2-3小 時，提取溫度為50-80°C，過濾，回收乙醇，干燥得得紅球藻蝦青素；
[0020] (3)將金銀花用8-12倍的去離子水煮沸提取2-3次，每次提取2-3小時，濾取濾液， 濃縮，干燥，得金銀花提取物；
[0021] (4)將姜黃、蝦青素及金銀花提取物按照比例混合均勻后加入輔料均勻，制成口服 制劑。
[0022] 由于本發(fā)明首次公開了由姜黃素、蝦青素及金銀花提取物組成的組合物具有防治 酒精性肝損傷的作用，因此，將本組合物單獨或與其它活性組份或輔料配合制成藥劑，只要 是該藥劑用于預防和治療酒精性肝損傷，均屬于本發(fā)明的保護范圍。本發(fā)明的組合物在制 成任何一種劑型時，均具有預防和治療酒精性肝損傷的作用。
[0023] 由姜黃素、蝦青素及金銀花提取物組成的組合物(簡稱組合物)具有防治酒精性肝 損傷作用，通過以下藥效學實驗得到證實。
[0024] 本發(fā)明需要的組合物（由實例4制備得到，姜黃素:蝦青素:金銀花提取物= 2:0.5: 5)、姜黃素、蝦青素、金銀花提取物均由吉林省中醫(yī)藥科學院植物化學研究所提供。陽性對 照藥聯(lián)苯雙酯滴丸由北京協(xié)和藥廠生產(20151001)、東寶肝泰由吉林通化東寶藥業(yè)股份有 限公司生產（20151202)。
[0025] 1、本發(fā)明組合物對酒精性肝損傷的保護作用
[0026] 小鼠90只，隨機分為9組，即本發(fā)明組合物分別按80、160及320mg/kg三個劑量組， 姜黃素劑量組、蝦青素劑量組、金銀花提取物劑量組各320mg/kg灌胃小鼠，酒精模型組，空 白對照組和陽性對照組(聯(lián)苯雙酯滴丸）50mg/kg，l次/d，共14d，酒精模型組和空白組對照 組分別灌胃等體積蒸餾水，1次/d，共14d。末次給藥后禁食12小時，除空白對照組仍然灌胃 等量蒸餾水外，其他8組動物(本發(fā)明組合物低、中、高三個劑量組，姜黃素劑量組、蝦青素劑 量組、金銀花提取物劑量組，陽性藥對照組，酒精模型組)分別灌胃50%乙醇15mL/kg，6h后 眼靜脈取血，測定血清中ALT和AST含量，取小鼠肝臟稱重，測定肝器指數(shù)，取右葉測定SOD， GSH-PX活性，MDA含量。
[0027] 表1本發(fā)明組合物對酒精損傷小鼠血清ALT、AST及肝臟系數(shù)的影響士λ')
[0028]
[0029] 與空白對照組比較:*P〈0 · 05，**P〈0 · 01，***P〈0 · 001;
[0030] 與酒精組比較 Δρ<〇·〇5, Δ Δρ<〇·〇1。
[0031 ]從表1可知，灌胃酒精使小鼠肝指數(shù)顯著增加，灌胃本發(fā)明組合物可使酒精損傷小 鼠肝臟指數(shù)顯著降低。灌胃酒精使小鼠血清ALT、AST顯著增加，灌胃本發(fā)明組合物可使酒精 損傷小鼠血清ALT、AST顯著降低。陽性對照藥可使小鼠血清ALT、AST顯著降低，也可顯著降 低小鼠肝臟指數(shù)。相同劑量下組合物較各單一組分活性更強。
[0032 ] 表2本發(fā)明組合物對酒精損傷小鼠肝臟MDA、GSH-PX、SOD的影響G
[0033]
[0034] 與空白對照組比較:*P〈0 · 05，**P〈0 · 01，***P〈0 · 001;
[0035] 與酒精組比較 Δρ<〇·〇5, Δ Δρ<〇·〇1。
[0036] 從表2結果表明，酒精能引起小鼠肝臟MDA含量顯著升高、引起GSH-PX酶、SOD活性 顯著降低，而本發(fā)明組合物能顯著降低MDA含量，能顯著升高GSH-PX酶、SOD活性。陽性對照 藥也能顯著降低MDA含量、顯著升高GSH-PX酶、SOD活性。相同劑量下本發(fā)明組合物較各單一 組分活性更強。
[0037] 2、本發(fā)明組合物對酒精引起的脂肪肝的改善功能
[0038] 試驗大鼠90只，隨機分為正常對照組;脂肪肝模型組；陽性對照藥東寶肝泰500mg/ kg，給藥劑量組:本發(fā)明組合物設80mg/kg、160mg/kg和320mg/kg三個劑量組，姜黃素劑量 組、蝦青素劑量組、金銀花提取物劑量組各320mg/kg。共9組，每組10只。除正常對照組外，其 余各組大鼠每日上午8:30灌胃給予（56 %乙醇+0.5mL魚油）1次，乙醇劑量開始為7g/kg，隨 后每周遞增0.2g/kg，連續(xù)4周。正常對照組大鼠灌胃給予等熱量的56%葡萄糖+0.5mL魚油。 受試藥物用蒸餾水配制成混懸液，每日灌胃給予1次，正常對照組與模型對照組大鼠灌胃給 予等量的蒸餾水，灌胃體積為l〇ml/kg/d。試驗過程中大鼠自由攝食飲水，每周稱量體重1 次，以調整給藥劑量。于給藥第四周末處死動物。標本采集及觀測指標，試驗結果以均數(shù)加 減標準差表示，統(tǒng)計學處理方法采用組間t檢驗。實驗結果見表3和表4。
[0039] 表3本發(fā)明組合物對酒精性脂肪肝大鼠血清ALT、AST和LDH活性的影響
[0042] 與正常對照組比較:*Ρ〈0 · 05，**Ρ〈0 · 01，***Ρ〈0 · 001;
[0043] 與模型組比較Δρ<〇·〇5, Δ Δρ<〇·〇1，Δ Δ Δρ<〇·〇〇1。
[0044] 本發(fā)明組合物高、中劑量組動物血清ALT和AST活性非常明顯的低于模型組，本試 驗結果表明，本發(fā)明組合物可明顯降低酒精性脂肪肝大鼠血清中異常升高的ALT、AST的活 性，說明本發(fā)明組合物對肝細胞具有良好的保護作用。本發(fā)明組合物高、中劑量組對酒精性 脂肪肝動物血清LDH水平的異常升高具有明顯的降低作用，此項試驗結果表明，本發(fā)明組合 物對酒精所致脂肪肝有很好的保護作用。相同劑量下本發(fā)明組合物較各單一組分活性更 強。
[0045] 表4本發(fā)明組合物對酒精性脂肪肝大鼠血清TC、TG和MDA含量及肝組織TG含量的影 響.(.V 土Λ')
[0047] 與正常對照組比較:*P〈0 · 05，**P〈0 · 01，***P〈0 · 001;
[0048] 與模型組比較 Δρ<〇·〇5, Δ Δρ<〇·〇1。
[0049] 本發(fā)明組合物可降低脂肪肝模型動物血清MDA含量，抑制脂肪肝時肝細胞的脂質 過氧化反應，從而發(fā)揮保護肝細胞免受損傷的作用。本發(fā)明組合物高、中兩個劑量組動物血 清中TC、TG含量及肝組織TG含量顯著低于模型對照組。表明本發(fā)明組合物可以降低酒精所 致脂肪肝大鼠血脂含量及肝臟脂類含量的升高，具有抑制肝臟脂肪堆積的作用。相同劑量 下本發(fā)明組合物較各單一組分活性更強。
[0050] 從以上的藥效學實驗可知，本發(fā)明組合物具有預防和治療酒精性肝損傷、酒精性 脂肪肝的作用，并且長期服用沒有副作用。
[0051] 本發(fā)明是通過下面的實施例進行詳細的說明，但不意味著本發(fā)明僅限于此，具體 實施方案如下：
[0052]實施例1、姜黃素的制備
[0053]姜黃5kg，粉碎成粗粉，用8倍量70 %食用乙醇提取2次，每次提取2小時，提取溫度 為80°C，提取液過濾，濾液回收乙醇，濃縮到含醇量為20%，通過預先處理好的D-101大孔樹 脂柱，先用20%乙醇洗脫，再用80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，回收乙醇，干燥，得姜 黃素。
[0054]實施例2、蝦青素的制備
[0055]雨生紅球藻5kg，置閃式提取器中用80%食用乙醇提取3次，每次提取2小時，提取 溫度為65 °C，過濾，回收乙醇，干燥得得紅球藻蝦青素。
[0056]實施例3、金銀花提取物的制備
[0057]金銀花5kg，用10倍的去離子水煮沸提取2次，每次提取2小時，濾取濾液，濃縮，干 燥，得金銀花提取物。
[0058]實施例4、組合物的制備
[0059]取姜黃素 20g，蝦青素 10g，金銀花提取物50g，混合均勻，即得本發(fā)明組合物。
[0060]實施例5、膠囊劑的制備
[0061]取姜黃素80g，蝦青素40g，金銀花提取物200g，混合均勻，加入適量淀粉，用80 %乙 醇制粒，干燥，裝膠囊，制成1 〇〇〇粒。
[0062]實施例6、片劑的制備
[0063]取姜黃素80g，蝦青素40g，金銀花提取物200g，混合均勻，加入適量淀粉，用80 %乙 醇制粒，干燥，壓片，制成1000 片。
【主權項】
1. 一種具有解酒保肝作用的組合物，其特征在于：活性成分由姜黃素，蝦青素，金銀花 提取物組成。2. 根據(jù)權利要求1所述的一種具有解酒保肝作用的組合物，其特征在于，它是由下述重 量份的原料制成:姜黃素20-150份，蝦青素5-50份，金銀花提取物30-300份。3. 根據(jù)權利要求2所述的一種具有解酒保肝作用的組合物，其特征在于，它是由下述重 量份的原料制成:姜黃素100份，蝦青素25份，金銀花提取物250份。4. 根據(jù)權利要求1-3任意之一所述的具有解酒保肝作用組合物的制備方法，包括如下 步驟： (1) 將姜黃粉碎成粗粉，用6-10倍量50-90 %食用乙醇提取2-3次，每次提取2-3小時，提 取溫度為50~80°C，提取液過濾，濾液回收乙醇，濃縮到含醇量為20%，通過預先處理好的 D-101大孔樹脂柱，先用20%乙醇洗脫，再用80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，回收乙 醇，干燥，得姜黃素； (2) 將雨生紅球藻置閃式提取器中用60-95%食用乙醇提取2-3次，每次提取2-3小時， 提取溫度為50-80°C，過濾，回收乙醇，干燥得得紅球藻蝦青素； (3) 將金銀花用8-12倍的去離子水煮沸提取2-3次，每次提取2-3小時，濾取濾液，濃縮， 干燥，得金銀花提取物； (4) 將姜黃、蝦青素及金銀花提取物按照比例混合均勻后加入輔料均勻，制成口服制 劑。5. -種具有解酒保肝作用的組合物口服制劑，其特征在于該制劑是由權利要求1-4任 意之一所述的組合物與藥用輔料制成，該口服制劑為選自膠囊、片劑，丸劑、顆粒劑中的任 意一種。
【文檔編號】A61K31/12GK106074662SQ201610718289
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年8月24日
【發(fā)明人】胡銘, 南敏倫, 赫玉芳, 姜文月, 曲佳樂, 王孝方, 趙全成
【申請人】胡銘