一種藥物組合物及其應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種藥物組合物及其應(yīng)用，該藥物組合物由甘草次酸、人面子葉黃酮、土香薷香豆素組成，具有抑菌、抗病毒、解熱、抗炎等作用，用于治療腸炎痢疾、上呼吸道感染、敗血癥等細(xì)菌和病毒性感染等疾病。
【專利說(shuō)明】
一種藥物組合物及其應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種藥物組合物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]上呼吸道感染是常見(jiàn)的外感疾病，由人體感受外邪而引起?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，主要由細(xì)菌和病毒所致。常年發(fā)病，治療不及時(shí)會(huì)造成較重的并發(fā)癥。腸炎是由于腸道內(nèi)致病菌所引起的炎性反應(yīng)，輕者為里急后重，嚴(yán)重時(shí)可形成敗血癥。目前用于治療上呼吸道感染的藥物很多，包括復(fù)方中藥制劑和含有單一有效部位的中藥制劑。但是，目前大部分的抗炎和抗病毒中藥制劑，以復(fù)方混合物制劑較多，以有效部位組合而成的組合物制成的制劑較少。造成這種局面的重要原因是依據(jù)當(dāng)前的技術(shù)手段，難以從復(fù)方藥物制劑當(dāng)中尋找到能夠代表全方方劑功效的具體有效成分，以致于很多以從中藥當(dāng)中提取的有效部位為活性成分制備的制劑不能夠保留原方的功效，甚至還不如原方混合物制劑的療效。因此，如何以科學(xué)的方法和手段尋找復(fù)方藥物制劑當(dāng)中有代表性的有效部位，將其配伍組合，能夠保留原方功效，且因活性成分的純度提高而療效增加，是目前復(fù)方中藥制劑研究的重要課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明目的在于提供一種藥物組合物。
[0004]本發(fā)明還提供了該組合物在制備治療細(xì)菌和病毒感染性疾病的藥物中的用途。
[0005]本發(fā)明藥物組合物的組成按照重量份為:
[0006]甘草次酸60-130，人面子葉黃酮60-130，土香薷香豆素60-130。
[0007]本發(fā)明上述藥物組合物的優(yōu)選配比為:
[0008]甘草次酸90-110，人面子葉黃酮90-110，土香薷香豆素90-110。
[0009 ]本發(fā)明上述藥物組合物的優(yōu)選配比為:
[0010]甘草次酸100，人面子葉黃酮100，土香薷香豆素100。
[0011]本發(fā)明的藥物組合物按照常規(guī)的制劑工藝，可以制備成常用的藥物劑型，如片劑、丸劑、散劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、注射劑等。本發(fā)明藥物制劑當(dāng)中可以含有常用的賦形劑，例如，填充劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、調(diào)味劑、稀釋劑、粘合劑等。
[0012]本發(fā)明藥物膠囊劑的制備方法如下:
[0013]取上述處方量的甘草次酸、人面子葉黃酮和土香薷香豆素加入適量淀粉制粒，85°C干燥后，裝膠囊即得。
[0014]本發(fā)明藥物片劑的制備方法是:
[0015]取上述處方量的甘草次酸、人面子葉黃酮和土香薷香豆素加入適量淀粉制粒，85°c干燥后，打片即得。
[0016]本發(fā)明藥物顆粒劑的制備方法是:取上述處方量的甘草次酸、人面子葉黃酮和土香薷香豆素加入適量淀粉制粒，85 °C干燥后，S卩得顆粒劑。
[0017]本發(fā)明原料藥的生產(chǎn)工藝包括:
[0018]1、甘草次酸生產(chǎn)工藝
[0019](I)將甘草酸粗品和10?20%的硫酸混合后放入密封微波消解罐中，微波消解得到消解產(chǎn)物；(2)將消解產(chǎn)物用氨水調(diào)pH至8-9，經(jīng)有機(jī)溶劑提取后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，得到甘草次酸粗品；(3)采用甲醇和水做流動(dòng)相，使用半制備型高效液相色譜儀制備得到高純度甘草次酸。
[0020]2、人面子葉黃酮生產(chǎn)工藝
[0021 ] 取人面子葉藥材，加50?90 %乙醇回流提取，提取液濃縮，水沉24h，抽濾，濾液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，采用醇水梯度洗脫，洗脫液濃縮、干燥，得到人面子葉黃酮。
[0022]3、土香薷香豆素生產(chǎn)工藝
[0023]土香薷提取具體為土香薷以5-10倍體積水加熱回流提取1-4次，每次0.5_2h，合并濾液，減壓濃縮至比重為1.133-1.137 (50-60 °C )，加95%乙醇使醇濃度至70-80%，靜置過(guò)夜，醇沉液減壓濃縮至無(wú)醇味后加水稀釋使溶液體積達(dá)到生藥重量的2倍，過(guò)濾，備用;所述上柱具體為將土香薷提取液上柱，控制流出液流速為lBV/h-3BV/h，上樣量為藥材重量:樹(shù)脂體積為I: 1-3:1，至提取液全部進(jìn)入樹(shù)脂床;所述洗脫具體為以3BV-8BV體積的10%-40%乙醇沖洗樹(shù)脂床，控制流出液流速為lBV/h-4BV/h，以除去雜質(zhì)，然后3BV-8BV體積的10 % -40%乙醇，控制流速為lBV/h-4BV/h，收集洗脫液，減壓濃縮至一定體積，進(jìn)行噴霧干燥，即得純化土香薷香豆素。
[0024]中醫(yī)理論認(rèn)為:甘草性平、味甘，具有和中緩急、潤(rùn)肺、解毒、止咳、通經(jīng)脈、利氣血等功效，甘草的主要成分為甘草酸和甘草次酸(GA)，甘草次酸又名甘草亭酸，收載于國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中，為白色結(jié)晶性粉末(C30H4606)，熔點(diǎn)288-297°C，不溶于水。甘草次酸能夠抑制巴豆油誘發(fā)的小鼠耳腫脹和鳥(niǎo)氨酸脫羧酶(ODC)的活性，同時(shí)降低強(qiáng)致癌劑苯并芘引起的非程序DNA合成，對(duì)由苯并芘所誘發(fā)的DNA損傷有一定的保護(hù)作用；人面子葉為為漆樹(shù)科植物人面子的葉，《廣志》:醒酒解毒。治鳳毒著人，遍身疙瘩成瘡，或痛或癢?！侗静萸笤?孕婦腹痛宜食?！稁X南采藥錄》:去喉痛，蝕爛肉?！蛾懘ū静荨?健胃。治食欲不振。人面子葉黃酮具有抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、治療骨質(zhì)疏松、抗輻射等多種藥理作用;土香薷為唇形科牛至屬植物，《貴州民間藥物:去皮膚濕熱，解表，止痛。治傷風(fēng)發(fā)熱，止嘔吐?！稄V西藥植名錄》:治黃疸，疳積，小兒熱瀉，水腫。《陜西中草藥》:活血祛瘀，止痛生肌，通竅利膈，調(diào)經(jīng)?！顿F州草藥》:解表，理氣，利濕。土香薷具有抗病原微生物、消炎、解熱、鎮(zhèn)痛、解痙、增強(qiáng)免疫等作用。土香薷對(duì)引起急性胃腸炎和細(xì)菌性痢疾的沙門氏桿菌、志賀氏桿菌、致病性大腸桿菌及金黃色葡萄球菌等都有較強(qiáng)的體外抗菌活性，尤其對(duì)引起痢疾的3類群志賀氏桿菌的殺滅作用十分明顯。
[0025]本發(fā)明藥物具有抑菌、抗病毒、解熱、抗炎等作用。用于治療腸炎痢疾、上呼吸道感染、敗血癥等細(xì)菌和病毒性感染。
[0026]因此，本發(fā)明還要求保護(hù)本發(fā)明所述藥物組合物在制備治療腸炎痢疾、上呼吸道感染、敗血癥等細(xì)菌和病毒性感染等疾病的藥物中的應(yīng)用。
【具體實(shí)施方式】
[0027]為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)的描述。顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所得到的所有其它實(shí)施方式，都屬于本發(fā)明所保護(hù)的范圍。
[0028]實(shí)施例1
[0029]甘草次酸的制備:
[0030]1、取2份甘草粗提物與15%硫酸混合，液固比(ml/g)為20:1，置于密封微波消解罐中，微波消解，20分鐘內(nèi)，升溫至160°C，保持15分鐘;2.將消解產(chǎn)物用氨水調(diào)pH至8后，加入等體積的乙酸乙酯萃取三次，后合并乙酸乙酯層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉乙酸乙酯后，得甘草次酸粗品；3.將甘草次酸粗品用Iml色譜純甲醇溶解，采用半制備型液相色譜儀進(jìn)行最后一步的分離純化，色譜柱規(guī)格為Φ 10 X250mm，反相C18硅膠填料為江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品，粒徑為1um，上樣量1mg，流動(dòng)相為70 %甲醇-水溶液，等度洗脫，流速4ml/min，柱溫20 °C，收集保留時(shí)間在50?55.5min的餾分。
[0031]人面子葉黃酮的制備:
[0032]將人面子葉加80%乙醇適量，提取I次，提取2小時(shí)，提取液過(guò)濾，濾液濃縮成60°C時(shí)相對(duì)密度為1.13?1.16的濃縮液，加適量水水沉24h，抽濾，濃縮至相應(yīng)體積，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，采用醇水梯度洗脫，水洗脫3個(gè)柱體積，10%及30%乙醇各洗脫3個(gè)柱體積，70%乙醇洗脫I個(gè)柱體積，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到人面子葉黃酮。
[0033]土香薷香豆素的制備:
[0034](I) 土香薷提取:土香薷以8倍體積水加熱回流提取三次，每次lh，合并三次濾液，減壓濃縮至比重為1.133-1.137 (50-600C )，加95%乙醇使醇濃度至80%，靜置過(guò)夜，醇沉液減壓濃縮至無(wú)醇味后加水稀釋使溶液體積達(dá)到生藥重量的2倍，過(guò)濾，備用；
[0035](2)上柱:將土香薷提取液上柱，控制流出液流速為lBV/h，上樣量為藥材重量:樹(shù)脂體積為1.5:1，至提取液全部進(jìn)入樹(shù)脂床；
[0036](3)洗脫:以5BV體積的10 %乙醇沖洗樹(shù)脂床，控制流出液流速為2BV/h，以除去雜質(zhì)，然后以5BV體積的40 %乙醇，控制流速為2BV/h，收集洗脫液，減壓濃縮至一定體積，進(jìn)行噴霧干燥，即得純化土香薷香豆素。
[0037]藥物組合物:甘草次酸60人面子葉黃酮130土香薷香豆素130
[0038]取上述處方量的甘草次酸、人面子葉黃酮、土香薷香豆素加入適量淀粉制粒，85°C干燥后，即得顆粒劑。
[0039]實(shí)施例2
[0040]甘草次酸的制備:
[0041 ] 1.取I份甘草酸單鉀鹽與20%稀硫酸混合，液固比(ml/g)為20:1，置于密封微波消解罐中，微波消解，20分鐘內(nèi)，升溫至160°C，保持10分鐘；2.將消解產(chǎn)物用氨水調(diào)pH至9后，加入等體積的丙酮萃取三次，后合并丙酮層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉丙酮后，得甘草次酸粗品；3.將甘草次酸粗品用Iml色譜純甲醇溶解，采用半制備型液相色譜儀進(jìn)行最后一步的分離純化，色譜柱規(guī)格為Φ 10 X 250mm，反相硅膠C18填料為江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品，粒徑為5um，上樣量15mg，流動(dòng)相為80 %甲醇-水溶液，等度洗脫，流速4ml/min，柱溫25 °C，收集保留時(shí)間在33?41.5min的飽分。
[0042]人面子葉黃酮的制備:
[0043]將人面子葉加50%乙醇適量，提取2次，提取3小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液濃縮成65°C時(shí)相對(duì)密度為1.13?1.16的濃縮液，加適量水水沉24h，抽濾，濃縮至相應(yīng)體積，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，采用醇水梯度洗脫，水洗脫3個(gè)柱體積，10%及30%乙醇各洗脫3個(gè)柱體積，70%乙醇洗脫I個(gè)柱體積，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到人面子葉黃酮。
[0044]土香薷香豆素的制備:
[0045](I) 土香薷提取:土香薷以5倍體積水加熱回流提取I次，提取0.5h，濾液減壓濃縮至比重為1.133-1.137(50-600C )，加95%乙醇使醇濃度至70%，靜置過(guò)夜，醇沉液減壓濃縮至無(wú)醇味后加水稀釋使溶液體積達(dá)到生藥重量的2倍，過(guò)濾，備用；
[0046](2)上柱:將土香薷提取液上柱，控制流出液流速為3BV/h，上樣量為藥材重量:樹(shù)脂體積為I: I，至提取液全部進(jìn)入樹(shù)脂床；
[0047](3)洗脫:以3BV體積的40%乙醇沖洗樹(shù)脂床，控制流出液流速為lBV/h，以除去雜質(zhì)，然后以3BV體積的10 %乙醇，控制流速為lBV/h，收集洗脫液，減壓濃縮至一定體積，進(jìn)行噴霧干燥，即得純化土香薷香豆素。
[0048]藥物組合物:甘草次酸130人面子葉黃酮60土香薷香豆素60
[0049]取上述處方量的甘草次酸、人面子葉黃酮、土香薷香豆素加入適量淀粉制粒，85°C干燥后，打片即得。
[0050]實(shí)施例3
[0051 ]甘草次酸的制備:
[0052]1、取2份甘草粗提物與15%硫酸混合，液固比(ml/g)為20:1，置于密封微波消解罐中，微波消解，20分鐘內(nèi)，升溫至160°C，保持20分鐘;2.將消解產(chǎn)物用氨水調(diào)pH至8后，加入等體積的乙酸乙酯萃取三次，后合并乙酸乙酯層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉乙酸乙酯后，得甘草次酸粗品；3.將甘草次酸粗品用Iml色譜純甲醇溶解，采用半制備型液相色譜儀進(jìn)行最后一步的分離純化，色譜柱規(guī)格為Φ 10 X250mm，反相C18硅膠填料為江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品，粒徑為1um，上樣量1mg，流動(dòng)相為70 %甲醇-水溶液，等度洗脫，流速4ml/min，柱溫20 °C，收集保留時(shí)間在50?55.5min的餾分。
[0053]人面子葉黃酮的制備:
[0054]將人面子葉加90%乙醇適量，提取3次，提取I小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液濃縮成60°C時(shí)相對(duì)密度為1.13?1.16的濃縮液，加適量水水沉24h，抽濾，濃縮至相應(yīng)體積，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，采用醇水梯度洗脫，水洗脫3個(gè)柱體積，10%及30%乙醇各洗脫3個(gè)柱體積，70%乙醇洗脫I個(gè)柱體積，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到人面子葉黃酮。
[0055]土香薷香豆素的制備:
[0056](I) 土香薷提取:土香薷以10倍體積水加熱回流提取4次，每次2h，合并4次濾液，減壓濃縮至比重為1.133-1.137 (50-60 °C )，加95%乙醇使醇濃度至80%，靜置過(guò)夜，醇沉液減壓濃縮至無(wú)醇味后加水稀釋使溶液體積達(dá)到生藥重量的2倍，過(guò)濾，備用；
[0057](2)上柱:將土香薷提取液上柱，控制流出液流速為2BV/h，上樣量為藥材重量:樹(shù)脂體積為3: I，至提取液全部進(jìn)入樹(shù)脂床；
[0058](3)洗脫:以8BV體積的30 %乙醇沖洗樹(shù)脂床，控制流出液流速為3BV/h，以除去雜質(zhì)，然后以6BV體積的30 %乙醇，控制流速為3BV/h，收集洗脫液，減壓濃縮至一定體積，進(jìn)行噴霧干燥，即得純化土香薷香豆素。
[0059]藥物組合物:甘草次酸90人面子葉黃酮110土香薷香豆素110
[0060]取上述處方量的甘草次酸、人面子葉黃酮、土香薷香豆素加入適量淀粉制粒，85°C干燥后，打片即得。
[0061 ] 實(shí)施例4
[0062]甘草次酸的制備:
[0063]1.取2份甘草酸單鉀鹽與10%稀硫酸混合，液固比(ml/g)為20:1，置于密封微波消解罐中，微波消解，20分鐘內(nèi)，升溫至160°C，保持10分鐘；2.將消解產(chǎn)物用氨水調(diào)pH至9后，加入等體積的丙酮萃取三次，后合并丙酮層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉丙酮后，得甘草次酸粗品；3.將甘草次酸粗品用Iml色譜純甲醇溶解，采用半制備型液相色譜儀進(jìn)行最后一步的分離純化，色譜柱規(guī)格為Φ 10 X 250mm，反相硅膠C18填料為江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品，粒徑為5um，上樣量15mg，流動(dòng)相為80 %甲醇-水溶液，等度洗脫，流速4ml/min，柱溫25 °C，收集保留時(shí)間在33?41.5min的飽分。
[0064]人面子葉黃酮的制備:
[0065]將人面子葉加70%乙醇適量，提取3次，提取I小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液濃縮成60°C時(shí)相對(duì)密度為1.13?1.16的濃縮液，加適量水水沉24h，抽濾，濃縮至相應(yīng)體積，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，采用醇水梯度洗脫，水洗脫3個(gè)柱體積，10%及30%乙醇各洗脫3個(gè)柱體積，70%乙醇洗脫I個(gè)柱體積，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到人面子葉黃酮。
[0066]土香薷香豆素的制備:
[0067](I) 土香薷提取:土香薷以7倍體積水加熱回流提取2次，每次2h，合并2次濾液，減壓濃縮至比重為1.133-1.137 (50-60 °C )，加95%乙醇使醇濃度至75%，靜置過(guò)夜，醇沉液減壓濃縮至無(wú)醇味后加水稀釋使溶液體積達(dá)到生藥重量的2倍，過(guò)濾，備用；
[0068](2)上柱:將土香薷提取液上柱，控制流出液流速為2BV/h，上樣量為藥材重量:樹(shù)脂體積為I: I，至提取液全部進(jìn)入樹(shù)脂床；
[0069](3)洗脫:以6BV體積的20%乙醇沖洗樹(shù)脂床，控制流出液流速為3BV/h，以除去雜質(zhì)，然后以5BV體積的20 %乙醇，控制流速為2BV/h，收集洗脫液，減壓濃縮至一定體積，進(jìn)行噴霧干燥，即得純化土香薷香豆素。
[0070]藥物組合物:甘草次酸110人面子葉黃酮90土香薷香豆素90
[0071]取上述處方量的甘草次酸、人面子葉黃酮和土香薷香豆素加入適量淀粉制粒，85°C干燥后，裝膠囊即得。
[0072]實(shí)施例5
[0073]甘草次酸的制備:
[0074]1.取2份甘草酸單鉀鹽與18%稀硫酸混合，液固比(ml/g)為20:1，置于密封微波消解罐中，微波消解，20分鐘內(nèi)，升溫至160°C，保持10分鐘；2.將消解產(chǎn)物用氨水調(diào)pH至8后，加入等體積的丙酮萃取三次，后合并丙酮層，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)掉丙酮后，得甘草次酸粗品；3.將甘草次酸粗品用Iml色譜純甲醇溶解，采用半制備型液相色譜儀進(jìn)行最后一步的分離純化，色譜柱規(guī)格為Φ 10 X 250mm，反相硅膠C18填料為江蘇漢邦科技有限公司產(chǎn)品，粒徑為5um，上樣量15mg，流動(dòng)相為80 %甲醇-水溶液，等度洗脫，流速4ml/min，柱溫25 °C，收集保留時(shí)間在33?41.5min的飽分。
[0075]人面子葉黃酮的制備:
[0076]將人面子葉加60%乙醇適量，提取3次，提取2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液濃縮成60°C時(shí)相對(duì)密度為1.13?1.16的濃縮液，加適量水水沉24h，抽濾，濃縮至相應(yīng)體積，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，采用醇水梯度洗脫，水洗脫3個(gè)柱體積，10%及30%乙醇各洗脫3個(gè)柱體積，70%乙醇洗脫I個(gè)柱體積，洗脫液濃縮、干燥、粉碎后得到人面子葉黃酮。
[0077]土香薷香豆素的制備:
[0078](I) 土香薷提取:土香薷以9倍體積水加熱回流提取3次，每次lh，合并3次濾液，減壓濃縮至比重為1.133-1.137 (50-60 °C )，加95%乙醇使醇濃度至80%，靜置過(guò)夜，醇沉液減壓濃縮至無(wú)醇味后加水稀釋使溶液體積達(dá)到生藥重量的2倍，過(guò)濾，備用；
[0079](2)上柱:將土香薷提取液上柱，控制流出液流速為3BV/h，上樣量為藥材重量:樹(shù)脂體積為I: I，至提取液全部進(jìn)入樹(shù)脂床；
[0080](3)洗脫:以7BV體積的30 %乙醇沖洗樹(shù)脂床，控制流出液流速為2BV/h，以除去雜質(zhì)，然后以4BV體積的30 %乙醇，控制流速為3BV/h，收集洗脫液，減壓濃縮至一定體積，進(jìn)行噴霧干燥，即得純化土香薷香豆素。
[0081]藥物組合物:甘草次酸100人面子葉黃酮100土香薷香豆素100
[0082]取上述處方量的甘草次酸、人面子葉黃酮、土香薷香豆素加入適量淀粉制粒，85°C干燥后，打片即得。
[0083]本發(fā)明對(duì)細(xì)菌的影響藥效試驗(yàn)資料
[0084]藥物與試劑:按上述實(shí)施例5制備本發(fā)明，規(guī)格:4g生藥/g，頭孢氨芐膠囊(哈爾濱藥業(yè)集團(tuán)三精制藥有限公司，批號(hào):1301072)。
[0085]菌種:溶血性乙型鏈球菌、金黃色葡萄球菌，由江蘇省人民醫(yī)院微生物室臨床分離培養(yǎng)提供。4.5%胃膜素懸液的配制:稱取胃膜素(上海市食品制藥廠，批號(hào):100808)5g，放于研缽內(nèi)，加少量生理鹽水研磨，隨磨隨加水，最后加至10ml，于68.95kPa( 10鎊)加壓滅菌1min，用時(shí)調(diào)整pH值至7.0。
[0086]方法與結(jié)果
[0087]分組:小鼠隨機(jī)分為5組，每組20只，空白對(duì)照組(等容積生理鹽水)，頭孢氨芐膠囊(0.2g/kg)，本發(fā)明高(16.38g生藥/kg)、中(8.19g生藥/kg)、低(2.73g生藥/kg)三個(gè)劑量組。
[0088]方法:菌液的制備:將溶血性乙型鏈球菌菌種接種至含20%小牛血清的液體培養(yǎng)基;金黃色葡萄球菌接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管內(nèi)，37°C孵育箱內(nèi)培養(yǎng)，將培養(yǎng)18小時(shí)的菌液用5%胃膜素懸液以10倍順序依次稀釋為10-1、10-2、10-3、10-4等不同濃度的菌液做預(yù)試驗(yàn)，取預(yù)試驗(yàn)時(shí)致小鼠死亡率達(dá)80 %的菌液濃度乙型鏈球菌10-2、金黃色葡萄球菌10-1進(jìn)行試驗(yàn)。各組小鼠分別灌胃給藥，連續(xù)5天，第3天給藥后Ih給各組小鼠腹腔注射菌液，每只0.5ml (活菌計(jì)數(shù)溶血性乙型鏈球菌為284 X 108個(gè)/ml，金黃色葡萄球菌為345 X 108個(gè)/ml)。觀察I周內(nèi)各組的動(dòng)物死亡情況，計(jì)算死亡率。
[0089]結(jié)果:
[0090]對(duì)腹腔感染溶血性乙型鏈球菌小鼠死亡率的影響:對(duì)照組死亡率為95%，頭孢氨芐組死亡率為O，高劑量組死亡率為20%，中劑量組死亡率為30 %，低劑量組死亡率為80 %，結(jié)果表明本發(fā)明高、中劑量和陽(yáng)性藥均能減少腹腔注射溶血性乙型鏈球菌引起的小鼠死亡只數(shù)，其死亡率較對(duì)照組明顯下降，差異均有高度顯著性。
[0091]對(duì)腹腔感染金黃色葡萄球菌小鼠死亡率的影響:對(duì)照組死亡率為85%，頭孢氨芐組死亡率為O，高劑量組死亡率為10 %，中劑量組死亡率為20 %，低劑量組死亡率為70 %，結(jié)果表明頭孢氨芐膠囊和本發(fā)明高、中劑量有減少金黃色葡萄球菌引起的小鼠死亡只數(shù)，其死亡率較對(duì)照組明顯下降，差異有高度顯著性，本發(fā)明低劑量雖然也能使小鼠死亡率下降，但與對(duì)照組比較差異無(wú)顯著性。
[0092]結(jié)論:本發(fā)明高、中劑量對(duì)腹腔感染溶血性乙型鏈球菌和金黃色葡萄球菌小鼠均有保護(hù)作用，可明顯降低其死亡率，增加存活只數(shù)，與對(duì)照組比較差異均有顯著性。提示本發(fā)明有一定的抗感染作用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種藥物組合物，其特征在于，該組合物含有下述重量份的組分:甘草次酸60-130，人面子葉黃酮60-130，土香薷香豆素60-130。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該組合物含有下述重量份的組分:甘草次酸90-110，人面子葉黃酮90-110，土香薷香豆素90-110。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該組合物含有下述重量份的組分:甘草次酸100，人面子葉黃酮100，土香薷香豆素100。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，還含有藥物賦形劑。5.—種藥物組合物的制備方法，其特征在于，甘草次酸的制備:(I)將甘草酸粗品和10?20%的硫酸混合后放入密封微波消解罐中，微波消解得到消解產(chǎn)物；(2)將消解產(chǎn)物用氨水調(diào)pH至8-9，經(jīng)有機(jī)溶劑提取后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除有機(jī)溶劑，得到甘草次酸粗品；(3)采用甲醇和水做流動(dòng)相，使用半制備型高效液相色譜儀制備得到甘草次酸； 人面子葉黃酮的制備方法如下:取人面子葉藥材，加50?90%乙醇回流提取，提取液濃縮，水沉24h，抽濾，濾液通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱，采用醇水梯度洗脫，洗脫液濃縮、干燥，得到人面子葉黃酮； 土香薷香豆素的制備:通過(guò)土香薷提取，上柱，洗脫制備而成； 將甘草次酸、人面子葉黃酮以及土香薷香豆素混合，即得。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物制備方法，其特征在于，所述土香薷香豆素的制備方法如下:土香薷以5-10倍體積水加熱回流提取1-4次，每次0.5-2h，合并濾液，減壓濃縮至比重為1.133-1.137(50-60°C )，加95%乙醇使醇濃度至70-80%，靜置過(guò)夜，醇沉液減壓濃縮至無(wú)醇味后加水稀釋使溶液體積達(dá)到生藥重量的2倍，過(guò)濾，備用;所述上柱具體為將土香薷提取液上柱，控制流出液流速為lBV/h-3BV/h，上樣量為藥材重量:樹(shù)脂體積為I: 1-3:I，至提取液全部進(jìn)入樹(shù)脂床;所述洗脫具體為以3BV-8BV體積的10 % -40 %乙醇沖洗樹(shù)脂床，控制流出液流速為I BV/h-4BV/h，以除去雜質(zhì)，然后以3BV-8BV體積的1 % -40 %乙醇，控制流速為lBV/h-4BV/h，收集洗脫液，減壓濃縮至一定體積，進(jìn)行噴霧干燥，即得純化土香薷香豆素。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物的劑型是片劑、丸劑、散劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液或者注射劑當(dāng)中的一種。8.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的藥物組合物在制備治療腸炎痢疾、上呼吸道感染、敗血癥等細(xì)菌和病毒性感染性疾病的藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P31/12GK106074688SQ201610662368
【公開(kāi)日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年8月12日 公開(kāi)號(hào)201610662368.3, CN 106074688 A, CN 106074688A, CN 201610662368, CN-A-106074688, CN106074688 A, CN106074688A, CN201610662368, CN201610662368.3
【發(fā)明人】何穎
【申請(qǐng)人】何穎