專利名稱：協(xié)同作用的抗菌藥組合的制作方法
背景技術(shù)：
1.發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及協(xié)同作用的非陽離子的鹵代羥基二苯基醚與來源于啤酒花(beer hops)的氫化蛇麻酮的抗菌藥組合并且更特別地涉及包括這種組合的口腔用組合物，這種組合顯著提高抑制導(dǎo)致菌斑(plaque)的口腔細菌的抗菌作用。
2.先有技術(shù)一般很難預(yù)測抗菌藥在與任何釋藥載體結(jié)合時特別是在口服組合物中的效果。例如，齒菌斑是在牙齒上形成的松軟沉積物，這與牙垢是牙齒上堅硬的鈣化沉積物相反。與牙垢不同，菌斑在牙齒表面的任何部位形成，特別是在牙齦邊緣并且與牙齦炎的發(fā)生有關(guān)。陽離子抗菌化合物如洗必泰、氯化芐乙氧銨(benzthonium chloride)和氯化十六烷基吡啶鎓已經(jīng)在本領(lǐng)域內(nèi)被用于口服組合物中作為抗菌的抗菌斑藥。然而，當(dāng)口腔用組合物中還存在對于口腔用組合物如牙膏和口腔漱洗液的有效功能所需的陰離子表面活性劑時這些藥物通常無效。
非陽離子抗菌物質(zhì)在口腔用組合物中與陰離子表面活性劑相容，而且非陽離子鹵代羥基二苯基醚類如三氯生作為抗菌的抗菌斑藥與口腔用組合物配方中常規(guī)使用的中性成分如濕潤劑、研磨劑及增稠劑混合時，已被有效地用于商品化的口腔用組合物中。盡管三氯生具有抗菌藥效，在口腔用組合物技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)仍然需要與陰離子表面活性劑相容并且增強非陽離子鹵代羥基二苯基醚類如三氯生的效果的抗菌藥。
除三氯生之外，β-酸，又名蛇麻酮，其來源于啤酒花，在口腔用組合物中呈現(xiàn)出抗菌作用是本領(lǐng)域所知的。例如，US3932603公開了蛇麻花提取物漱洗劑，如蛇麻酮和律草酮，作為抑制生齲的(cariogenic)鏈球菌的抗微生物藥是有效的。US5370863公開了含有蛇麻酸的口腔用組合物，其抑制革蘭氏陽性菌和菌斑形成及牙周病。
已知β-酸還抑制食品致病菌的生長，如單核細胞增生李斯忒氏菌(美國專利號5286506；5455038)。此外其氫化形式，六氫蛇麻酮抑制某些乳乳桿菌的生長(美國專利No.5082975)。氫化蛇麻酮比其未氫化的母體化合物表現(xiàn)出更強的活性并且更穩(wěn)定。例如，一般相信六氫合蛇麻酮比合蛇麻酮的抗菌活性更強而且已經(jīng)發(fā)現(xiàn)六氫蛇麻酮比蛇麻酮更穩(wěn)定?？梢圆捎帽绢I(lǐng)域內(nèi)已知的多種方法通過對合蛇麻酮的化學(xué)氫化反應(yīng)制備六氫合蛇麻酮。例如，該氫化反應(yīng)可以如Riedl(Ber.891863(1956))或Carson(J.Am.Chem.Soc.731850(1951))所述的方法，用氧化鉑(IV)作為催化劑來實現(xiàn)。美國專利No.5082975描述了一種制備六氫蛇麻酮的方法。
本發(fā)明概述根據(jù)本發(fā)明，出乎意料地發(fā)現(xiàn)離子鹵代羥基二苯基醚如三氯生和一種氫化蛇麻酮的組合具有抑制革蘭氏陽性菌如粘液放線菌的生長的協(xié)同有效作用。在一種實施方案中，發(fā)現(xiàn)包括口腔用藥可接受的載體和存在于所述組合中的有效抗菌斑量的口腔用抗菌斑組合物的聯(lián)合用藥增強了抗菌斑活性，該活性遠遠超過單用非陽離子鹵代羥基二苯基醚或氫化蛇麻酮的加合抗菌斑活性之和。如后文所示，六氫蛇麻酮和六氫合蛇麻酮在與非陽離子的鹵代羥基二苯基醚如三氯生組合時尤其有效。
鹵代羥基二苯基醚化合物如三氯生在用于各種口腔治療及個人保健產(chǎn)品時已經(jīng)被證明安全有效和氫化蛇麻酮類是食品級原料的事實表明，這些化合物作為日常使用的口腔衛(wèi)生產(chǎn)品如牙粉和口腔漱洗液制劑以及個人保健產(chǎn)品如軟膏、霜劑或洗劑的成分都是合適的。
優(yōu)選實施方案的詳述術(shù)語“氫化蛇麻酮”的意思包括氫化蛇麻酮類、其衍生物和類似物及其藥學(xué)上可接受的鹽。在實施本發(fā)明時優(yōu)選六氫蛇麻酮和六氫合蛇麻酮。
從藥效、安全性和配方考慮特別理想的典型的非陽離子鹵代二苯基醚的例子是2’，4，4’-三氯-2-羥基-二苯基醚(三氯生)和2，2’-二羥基-5.5’-二溴二苯基醚。
氫化蛇麻酮和非陽離子的鹵代二苯基醚的抗菌組合在其溶解或混懸于藥學(xué)上可接受的載體中時，可以向口腔或皮膚給藥。
當(dāng)非陽離子的鹵代羥基苯基醚和氫化蛇麻酮用于制備口腔用組合物如牙粉和口腔漱洗液時，每種藥物均以無毒、有效抗菌斑的量混合于口腔用組合物中，以重量計其量的典型范圍是約0.003至約2％，優(yōu)選約0.02至約1％。氫化蛇麻酮混合物，即六氫蛇麻酮(35％重量)和六氫合蛇麻酮(65％重量)，可以從商業(yè)上得自Haas HopProducts，Washington，D.C。
為進一步增強本發(fā)明的抗菌藥組合的協(xié)同抗菌活性，在口腔用組合物中可以包含抗菌增效劑。這些與非陽離子抗菌化合物聯(lián)用的抗菌增效劑的使用是本領(lǐng)域內(nèi)已知的，例如，見美國專利No.5188821和5192531。
在實施本發(fā)明時優(yōu)選采用的抗菌增效劑包括天然的或合成的分子量為約1000至約5000000，優(yōu)選約30000至約500000的陰離子聚羧酸鹽。合成的陰離子聚羧酸鹽通常采用其游離酸形式或優(yōu)選部分中和的或更優(yōu)選全部中和的水溶性堿金屬鹽(例如，鉀及優(yōu)選的鈉)或銨鹽。優(yōu)選1∶4至4∶1的馬來酸酐或酸與另一種可聚烯(ethylenically)的不飽和單體的共聚體，優(yōu)選分子量(M.W.)為約30000至約1000000，更優(yōu)選約30000至500000的甲基乙烯基醚/馬來酸共聚體。這些共聚物可以，例如，以商品名Gantrez AN139(M.W.500000)、AN119(M.W.250000)，及優(yōu)選Gantrez S-97藥用級(Pharmaceutical Grade)(M.W.70000)從GAF公司獲得。
在實施本發(fā)明時有用的其它陰離子聚羧酸鹽包括1∶1的馬來酸酐和丙烯酸乙酯、異丁烯酸羥乙酯、N-乙烯基-2-吡咯烷酮、或乙烯的共聚體，后者可以例如作為Monsanto EMA No1103，M.W.10000和Grade61獲得，以及1∶1的丙烯酸與異丁烯酸甲酯或異丁烯酸羥乙酯、丙烯酸甲酯或丙烯酸乙酯、異丁烯酸異丁酯、異丁基乙烯基醚或N-乙烯基-2-吡咯烷酮的共聚體。
其它有實施意義的聚羧酸根化合物包括馬來酸酐和苯乙烯、異丁烯或乙基乙烯基醚的共聚體、聚丙烯酸、聚陽離子(polycationic)和聚馬來酸，及可以商品名Uniroyal ND-2獲得的分子量低至1000的磺基丙烯酸寡聚體。
可以從商業(yè)上獲得的所謂羧乙烯聚合物，例如，來自B.F.Goodrich的商品名Carbopol 934，940和941，對于本發(fā)明實施也是有用的，這些聚合物由用約0.75％至約2.0％的聚烯丙基蔗糖或聚烯丙基季戊四醇作為交聯(lián)劑交聯(lián)的聚丙烯酸的水溶性膠體聚合物組成，通常其分子量高達4-5百萬或更高。
用于口腔用組合物中時，加入組合物中的抗菌增效劑的重量約為0.05至約5％，優(yōu)選約0.1至約3％。
氟離子也可以包括在本發(fā)明的口腔用組合物中以發(fā)揮防齲作用。在這些物質(zhì)中有無機氟化物鹽，如水溶性堿金屬的氟化物鹽，例如，氟化鈉、氟化鉀、一氟磷酸鈉和六氟硅酸鈉。優(yōu)選堿金屬和錫的氟化物鹽，如氟化鈉和氟化錫，一氟磷酸鈉及其混合物。
可提供氟的鹽存在于口腔用組合物中的量通常是約0.0005至約3.0％重量的濃度?？梢圆捎萌魏魏线m的最小量的這些鹽，但優(yōu)選采用足以釋放約300至2000ppm，更優(yōu)選釋放約800至約1500ppm氟離子的氟化物鹽。
本發(fā)明的口腔用組合物可以是組成成分的溶液如口腔漱洗液或者其可以是半固體如牙膏或膠體牙粉或口香糖或固體錠劑。
在本發(fā)明的一個方面，其中口腔用組合物是凝膠或軟膏，可以存在口腔用可接受的載體，包括含濕潤劑(優(yōu)選甘油或山梨糖醇或烷撐二醇如聚乙二醇或丙二醇，其中水的通常存在的量約為15-40％重量，而甘油、山梨糖醇和/或烷撐二醇(優(yōu)選丙二醇)總量通常約為口腔用組合物20-75％重量，更常見為約25-60％重量。
當(dāng)口腔用組合物在特征上基本為半固體或膏狀，如牙膏或凝膠時，其牙粉載體可以含有牙科上可接受的磨蝕材料如碳酸氫鈉或水不溶性磨蝕材料如偏磷酸鈉、偏磷酸鉀、磷酸三鈣、二水合磷酸二鈣、無水磷酸二鈣、焦磷酸鈣、碳酸鈣、硅酸鋁、水合氧化鋁、煅燒氧化鋁、硅膠、皂土、以及它們的混合物。
以重量計，磨蝕材料通常以約10％至約60％重量的濃度存在于軟膏或凝膠組合物中，在凝膠中優(yōu)選以約10％至約30％重量存在而在軟膏中優(yōu)選以約25％至約60％重量存在。
牙膏及凝膠牙粉中通常含有約0.1％至約10％重量，優(yōu)選約0.5％至約5％重量比的天然或合成的增稠劑或膠凝劑。合適的增稠劑或膠凝劑包括愛爾蘭蘚(Irish moss)、ι-角叉菜膠、Κ-角叉菜膠、黃蓍膠、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、羥乙基丙基纖維素、羥丁基甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素和羧甲基纖維素鈉。
在本發(fā)明的一個方面，其中口腔用組合物在特征方面基本上是液體如漱口藥或漱洗液，其代表性載體是水-醇混合液。一般地，其水與醇的重量比范圍是從約3∶1至10∶1并優(yōu)選約4∶1至約6∶1。所述醇為無毒醇如乙醇或異丙醇。濕潤劑如甘油、山梨醇或一種烷撐二醇如聚乙二醇或優(yōu)選丙二醇的存在量可以是約10-30％重量?？谇皇匆和ǔ：屑s50-85％水、約0-20％重量的無毒醇和約10-40％重量的濕潤劑。
本發(fā)明組合物采用表面活性劑以獲得增加的預(yù)防作用及輔助4-烷氧基取代的2-羥基二苯甲酮抗菌劑完全和徹底擴散到整個口腔。優(yōu)選陰離子的表面活性物質(zhì)，合適的實例包括高級脂肪酸的單甘油酯一硫酸酯的水溶性鹽，如氫化椰油脂肪酸的一硫酸甘油單酯的鈉鹽，高級烷基硫酸鹽如十二烷基硫酸鈉，烷基芳基磺酸鹽如十二烷基苯磺酸鈉，高級烷基磺基乙酸鹽，1，2-二羥基丙磺酸鹽的高級脂肪酸酯，以及完全飽和的低級脂肪族氨基羧酸化合物的高級脂族酰胺，如那些含有12至16個碳原子的脂肪酸，烷基或?；屯檠貂；?alkoyl)?；撬岬取Ｗ詈筇峒暗孽０芳芭；撬猁}的實例有N-月桂酰肌氨酸，和N-月桂酰、N-肉豆蔻酰、N-棕櫚酰肌氨酸的鈉、鉀和乙醇胺鹽，它們基本上不含皂或類似的高級脂肪酸物質(zhì)以及N-甲基-N-椰油基(或油?；蜃貦磅??；撬?。
還可以采用任何合適的矯味劑或甜味物質(zhì)。合適的矯味劑成分有香精油，例如，留蘭香、薄荷、冬青、檫木、丁香、洋蘇草、桉樹、肉桂、檸檬、和柑橘油，以及水楊酸甲酯。合適的甜味劑包括蔗糖、乳糖、麥芽糖、木糖醇、環(huán)磺酸鈉、紫蘇亭(perillartine)、天冬氨酰苯丙氨酸甲酯、糖精等。矯味劑和甜味劑分別或共同構(gòu)成制劑的約0.1％至5％或以上的量較為合適。
抗牙垢劑如三聚磷酸鈉、焦磷酸四鉀或四鈉，或它們的混合物可以以約0.5至約8％重量的濃度存在于本發(fā)明的口腔用組合物中。
用于牙齒脫敏的藥物如氯化鉀、硝酸鉀和檸檬酸鉀也可以以約0.1至約10％重量的濃度包含于本發(fā)明的口腔用組合物中。
可以并用于本發(fā)明口腔用組合物的各種其它材料包括防腐劑，如苯甲酸鈉、維生素和葉綠素化合物。當(dāng)這些輔助劑存在時，以對所希望的性質(zhì)和特性基本無不利影響的量存在于組合物中。
本發(fā)明的口腔用組合物可以通過將各組分適當(dāng)混合而制備。例如，在漱口劑的制備中，將非陽離子的鹵代羥基苯基醚和氫化蛇麻酮抗菌藥組合分散于各組分的混合物，例如，醇、濕潤劑、表面活性劑中，然后加入矯味劑并混合。然后在真空下將這些組分混合15-30分鐘。然后包裝所得漱洗產(chǎn)品?？深愃频刂苽溲婪?，在最后步驟或其前一步驟再添加另外的增稠劑和拋光劑。
本發(fā)明的抗菌藥物組合可以結(jié)合于錠劑中，或口香糖或其它產(chǎn)品中，例如，通過攪拌到熱的香口膠基質(zhì)中或包裹香口膠基質(zhì)的外表面，其可提及的實例包括結(jié)路頓膠(jelutone)、橡膠乳膠和乙烯基樹脂與所需的常規(guī)成型劑或軟化劑、糖或其它甜味劑或碳水化合物如葡萄糖、山梨糖醇等等。
片劑或錠劑中的賦形劑或載體是不產(chǎn)生齲齒的水溶性固體多元醇(多羥基化合物)如甘露糖醇、木糖醇、山梨糖醇、malitol、氫化淀粉羥基化物(hydrozylate)、氫化葡萄糖、氫化雙糖或氫化多糖，其量為全部組合物約90％-98％重量。鹽如碳酸氫鈉、氯化鈉、碳酸氫鉀或氯化鉀可以完全或部分地替代多元醇載體。少量的片劑潤滑劑，其量約0.1至5％重量，可以結(jié)合于片劑或錠劑制劑中以易化片劑和錠劑兩者的制備。合適的潤滑劑包括植物油如椰子油、硬脂酸鎂、硬脂酸鋁、滑石粉、淀粉和碳蠟。
錠劑制劑含有約2％作為載體的樹膠以提供與片劑磨光表面相反的光亮表面。合適的不產(chǎn)生齲齒的樹膠包括k-角叉菜膠、羧甲基纖維素、羥乙基纖維素等。
錠劑或片劑可以任選以包衣材料如蠟、蟲膠、羧甲基纖維素、聚乙烯/馬來酸酐共聚體或k-角叉菜膠包衣，以進一步延長片劑或錠劑在口腔內(nèi)的溶解時間。無包衣的片劑或錠劑緩慢溶解，提供約3至5分鐘的活性成分的延緩釋放速率。因此，本發(fā)明的固體劑型的片劑和錠劑組合物提供的活性成分在口腔內(nèi)與牙齒的接觸的時間段相對更長。
對于表皮局部給藥，可以將非陽離子的鹵代羥基二苯基醚和氫化蛇麻酮的抗菌藥的組合制備成軟膏、霜劑或洗劑。軟膏和霜劑可以，例如，用添加了合適的增稠劑和/或凝膠劑的含水或油性基質(zhì)進行配制。洗劑可以用含水或油性基質(zhì)配制并且通常還含有一種或一種以上的乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、懸浮劑或著色劑。
下列實施例進一步闡述本發(fā)明，但是應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明不受其限制。除另有說明外本文及其附屬權(quán)利要求書的所有量和比例都是指重量比。
表I組合物 A B CD成分名稱 重量百分比去離子水-幅照48.94048.97048.970 49.000甘油(99.5％) 10.00010.00010.000 10.000山梨糖醇(70％溶液) 10.00010.00010.000 10.000丙二醇 15.00015.00015.000 15.000乙醇(96％) 15.00015.00015.000 15.000十二烷基硫酸鈉 0.250 0.250 0.250 0.250普盧蘭尼克F-127 0.250 0.250 0.250 0.250甲基椰油基?；撬徕c(95％) 0.250 0.250 0.250 0.250矯味劑 0.100 0.100 0.100 0.100氫氧化鉀(45％溶液) 1.050 0.050 0.050 0.050磷酸氫二鉀 0.100 0.100 0.100 0.100三氯生 0.030 0.030 - -HHBA*(純度96％) 0.030 -0.030- -全部成分 100.000 100.000 100.000100.000*六氫蛇麻酮(35％重量)和六氫合蛇麻酮(65％重量)的混合物采用微生物分析，即最小抑制濃度(MIC)和羥基磷灰石圓片上的細菌生長抑制檢測表1所列漱洗組合物。
使口腔革蘭氏陽性細菌粘液放線菌(Actinomyces viscosus)在37℃下的胰胨豆胨肉湯培養(yǎng)基(Difco Labs，Detroit，MI)中常規(guī)過夜生長。在漱洗組合物的體外檢測之前制備一種革蘭氏菌株的培養(yǎng)物以測定培養(yǎng)物的純度。MIC測定在MIC測定之前以新鮮肉湯稀釋在37℃下的胰胨豆胨肉湯培養(yǎng)基(TSB)中生長18小時的菌株，使其在610nm處的光密度調(diào)節(jié)至0.1和0.2的吸收單位之間。
漱洗液以TSB稀釋并按照標(biāo)準(zhǔn)程序(Manual of ClinicalMicrobiology，1995)采用微量滴定格式板測定MIC。結(jié)果記錄于下列表II中。羥基磷灰石圓片上的細菌生長抑制測定評價漱洗液的抗菌斑作用是采用漱洗液處理的羥基磷灰石圓片而檢測粘液放線菌的生長抑制并且在處理羥基磷灰石圓片后2小時和24小時時通過測定610nm處的光密度監(jiān)測細菌生長來進行的。在該實驗中，將羥基磷灰石圓片放置在含有澄清的人唾液的試管中并在37℃下孵育過夜。然后去除試管中的唾液而以漱洗液替代并在37℃下孵育0.75小時，再將羥基磷灰石圓片放入含有以TSB稀釋至610nm處的OD值為0.2的菌株的透明塑料管中。微生物學(xué)分析結(jié)果記錄在下列表II中。
盡管表II記錄的MIC結(jié)果表明，HHBA漱洗液(組合物C)具有抗粘液放線菌的活性，但是同時含有三氯生和HHBA的漱洗組合物(組合物A)的MIC比僅僅只含三氯生或HHBA的漱洗液(組合物B和C)低5至10倍。
表III記錄的結(jié)果表明，在處理后2小時和24小時，同時含有三氯生和HHBA的漱洗組合物A比只含三氯生或HHBA的漱洗液具有更好的抗菌活性。
由表II記錄結(jié)果確定的部分抑菌濃度(factional inhibitoryconcentration，F(xiàn)IC)值表明由三氯生和HHBA組合產(chǎn)生的協(xié)同抗菌活性。
FIC值(部分抑菌濃度)用于表明協(xié)同活性并且被描述于L.B.Quesnel，A.R.Al-Naijar和P.Buddhavudhikrai在Journal of AppliedBacteriology，1978，Vol.45，397-405頁，L.O.Garrod，H.P.Lambert，F(xiàn).O’Grady和P.M.Water worth在Antibiotic and Chemotherapy，282-286及514-518頁中。 FIC 意義＜＝0.7 協(xié)同1+/-0.3 加和＞＝1.3 拮抗根據(jù)這個公式，三氯生+HHBA的FIC為0.373，表明該組合作為抗菌混合物顯示出協(xié)同作用。
權(quán)利要求
1.一種口腔用抗菌斑組合物，它包括一種口腔用可接受的載體和有效抗菌斑量的非陽離子鹵代羥基二苯基醚和氫化蛇麻酮組合。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中非離子鹵代二苯基醚在口腔用組合物中的存在量在約0.003至約2.0％重量范圍內(nèi)。
3.權(quán)利要求1的組合物，其中非離子鹵代二苯基醚化合物是三氯生。
4.權(quán)利要求6的組合物，其中氫化蛇麻酮在口腔用組合物中的存在量在約0.003至約2.0％重量范圍內(nèi)。
5.權(quán)利要求1的組合物，其中氫化蛇麻酮是六氫蛇麻酮。
6.權(quán)利要求1的組合物，其中氫化蛇麻酮是六氫合蛇麻酮。
7.權(quán)利要求1的組合物，其中氫化蛇麻酮是六氫合蛇麻酮和六氫蛇麻酮的混合物。
8.一種抗菌組合物，它包括有效量的非陽離子鹵代羥基二苯基醚和氫化蛇麻酮的組合。
9.權(quán)利要求8的組合物，其中非陽離子鹵代二苯基醚化合物是三氯生。
10.權(quán)利要求8的組合物，其中氫化蛇麻酮是六氫蛇麻酮。
11.權(quán)利要求8的組合物，其中氫化蛇麻酮是六氫合蛇麻酮。
12.權(quán)利要求8的組合物，其中氫化蛇麻酮是六氫蛇麻酮和六氫合蛇麻酮的混合物。
13.一種抑制革蘭氏陽性細菌生長方法，該方法包括使所述細菌與組合物接觸，所述組合物包括藥學(xué)上可接受的載體和有效抗菌量的非陽離子鹵代羥基二苯基醚和氫化蛇麻酮的組合。
14.權(quán)利要求13的方法，其中非離子鹵代二苯基醚在載體中的存在量在約0.003至約2.0％重量范圍內(nèi)。
15.權(quán)利要求13的方法，其中非離子鹵代二苯基醚化合物是三氯生。
16.權(quán)利要求13的方法，其中氫化蛇麻酮在載體中的存在量在約0.003至約2.0％重量范圍內(nèi)。
17.權(quán)利要求13的方法，其中氫化蛇麻酮是六氫蛇麻酮。
18.權(quán)利要求13的方法，其中氫化蛇麻酮是六氫合蛇麻酮。
19.權(quán)利要求13的方法，其中氫化蛇麻酮是六氫合蛇麻酮和六氫蛇麻酮的混合物。
全文摘要
一種非離子的鹵代二苯基醚化合物如三氯生和氫化蛇麻酮的抗菌藥組合,這種組合在抑制革蘭氏陽性細菌的生長和制備抗菌斑口腔用組合物方面是特別有效的。
文檔編號A61Q11/00GK1370064SQ00811671
公開日2002年9月18日 申請日期2000年6月14日 優(yōu)先權(quán)日1999年6月15日
發(fā)明者H·M·特里維迪, S·M·赫爾勒斯, L·H·謝萊斯, A·加法 申請人:高露潔-棕欖公司