專利名稱：茶樹油脂質(zhì)體及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬藥物制劑或化妝品領域，具體涉及一種茶樹油脂質(zhì)體及其制備方法。
背景技術：
茶樹油(tea tree oil)是從桃金娘科白千層屬的數(shù)種植物枝葉中提取的揮發(fā)性精油，可以通過激活單核細胞抑制炎癥介質(zhì)產(chǎn)生，也可以改變微生物膜的通透性從而抑制許多致病細菌和霉菌。經(jīng)國際上最嚴格的KST抗菌試驗(Keelsey-sykes test)證實，茶樹油對絕大多數(shù)革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、真菌和單純性皰疹病毒有很強的殺滅和抑制作用。被認為是當前最強有效且無毒，刺激性低，活性強的天然殺菌劑，在醫(yī)療上有超過100種急救用途，如用于治療花斑、粉刺、癬、指菌、婦科感染、口腔疼、癤子、粉刺、雞眼、齒齦炎、皰疹、凍疼、喉嚨疼、蟲咬、刀傷、擦傷、并且可以噴霧應用于家庭殺菌和衛(wèi)生等。
國內(nèi)外有很多關于茶樹油的醫(yī)療應用的專利申請。美國專利US5716625公開了抗皮膚刺激的用途，美國專利US6413555公開了治療指甲真菌的擦涂劑，美國專利US5009890公開了治療燒傷的用途，美國專利US5215748公開了治療炮疹的用途，中國專利02129299.X公開了一種含有茶樹油的消毒殺菌組合物，中國專利CN1461214A公開了一種含茶樹油的可治愈特應性皮炎及皮脂缺乏癥和抑制皮膚瘙癢的組合物，中國專利97194879公開了一種含有茶樹油的治療痤瘡的組合物。
茶樹油雖然有很多優(yōu)點，但其濃度較高時也可能對皮膚產(chǎn)生刺激，對上皮細胞和成纖維細胞產(chǎn)生毒性，其某些成分(如cineol)可引起過敏反應。因此有必要尋找合適的方法抑制或降低茶樹油的刺激性。
脂質(zhì)體能減少藥物的全身吸收，避免藥物的毒副作用，可被生物降解，對皮膚無刺激，還能在皮膚中形成貯庫緩釋藥物從而減少給藥劑量。但國內(nèi)外未見茶樹油脂質(zhì)體的研究報導。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是公開一種含有茶樹油的脂質(zhì)體及其制備方法，旨在通過茶樹油包入脂質(zhì)體中，實現(xiàn)降低茶樹油的刺激性、調(diào)控茶樹油的給藥速度、降低給藥劑量的目的，并期望開發(fā)一種茶樹油的新劑型。
本發(fā)明由茶樹油，磷脂和親脂性穩(wěn)定劑制備成茶樹油脂質(zhì)體。
本發(fā)明制備方法是將茶樹油、磷脂和親脂性穩(wěn)定劑充分溶于一定濃度的有機溶劑，減壓蒸干有機溶劑使原料成膜。再加入適量有機溶劑及水相介質(zhì)溶解膜狀物并超聲成乳，減壓蒸干有機溶劑，所得懸液繼續(xù)水合2～6小時。
本發(fā)明所述的磷脂是卵磷脂。
本發(fā)明選用親脂性穩(wěn)定劑來穩(wěn)定脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)，減少藥物的泄漏、變質(zhì)。所述穩(wěn)定劑包括，膽固醇，硬脂胺，磷脂酸，生育酚，維生素E，優(yōu)選膽固醇。
本發(fā)明的磷脂和親脂性穩(wěn)定劑質(zhì)量比為1∶1～7∶1；茶樹油的質(zhì)量和磷脂與親脂性穩(wěn)定劑二者總質(zhì)量的比，即藥脂質(zhì)量比為0.0015∶1～0.020∶1。
本發(fā)明所述的有機溶劑為氯仿、乙醚的混合物，其密度接近1g·L-1。
本發(fā)明所用的水相介質(zhì)是根據(jù)中國藥典2000版標準配制的磷酸鹽緩沖溶液，pH值6.5～7.4，優(yōu)選6.8。
本發(fā)明中水相介質(zhì)和有機溶劑的體積比為0.5∶1～3∶1。
采用本發(fā)明方法獲得的茶樹油脂質(zhì)體包封率可達84％以上，重現(xiàn)性好。脂質(zhì)體的粒徑不大于500nm。在冰箱中保存3個月后包封率，pH值均無明顯變化，粒徑略有增大，緩釋性好，殺菌效果顯著。


圖1為茶樹油脂質(zhì)體電鏡照片，放大12000倍。
圖2為茶樹油脂質(zhì)體電鏡照片，放大50000倍。
圖3為茶樹油脂質(zhì)體體積粒徑分布。
圖4為茶樹油脂質(zhì)體的體外釋放曲線。
具體實施例方式
通過下面實施例說明本發(fā)明的具體實施方式
，但本發(fā)明的保護范圍，不局限于此。
實施例1 茶樹油脂質(zhì)體制備將茶樹油、卵磷脂、膽固醇充分溶于氯仿、乙醚的混合有機溶劑(密度約為1g·L-1)，減壓蒸干有機溶劑使原料成膜。再往膜狀物中加入混合有機溶劑及pH為6.8的PBS進行溶解，以超聲5秒停5秒的強度冷水浴超聲120s，減壓蒸干有機溶劑，所得懸液繼續(xù)水合4小時，制得茶樹油脂質(zhì)體，其包封率如表1所示。
表1 茶樹油脂質(zhì)體的包封率

包封率測定方法如下稱取一定質(zhì)量產(chǎn)物，按其占總產(chǎn)物的比例計算其中所含茶樹油的量作為M總。向其中加入適量石油醚萃取，離心，石油醚層用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓回收，殘留物用無水乙醇溶解定容為50ml，于294nm處測定吸光度，按茶樹油標準曲線(實驗測得A＝0.09063C+0.1001(r＝0.99976，n＝5，濃度范圍0～4ul·ml-1))計算其所對應的茶樹油的量作為M游。按下式計算得產(chǎn)物的包封率EN％＝(M總-M游)×100％/M總實施例2 茶樹油脂質(zhì)體形態(tài)學觀察形態(tài)觀察取1g茶樹油脂質(zhì)體產(chǎn)物以PBS稀釋20倍后，滴于銅網(wǎng)上放置至成膜均勻，多余液體揮干，透射電鏡下觀察，產(chǎn)物為球形大單室脂質(zhì)體，外觀圓整，外圈為包含茶樹油的脂層，厚而均一連續(xù)，脂質(zhì)體顆粒間彼此分散，獨立，見圖1，圖2。
粒徑分布測定取2g茶樹油脂質(zhì)體產(chǎn)物以PBS稀釋50倍測定體積粒徑分布，如圖3新鮮制備樣a曲線，所得產(chǎn)物的粒徑范圍為(284.7±121.5)nm。產(chǎn)物保存3個月后同法處理，粒徑略有增大，為(361.5±212.2)nm，見圖3樣a冰箱放置3個月曲線。
實施例3 體外釋放取1ml茶樹油，含1ml茶樹油的脂質(zhì)體及空白脂質(zhì)體用釋放介質(zhì)(體積比為無水乙醇∶吐溫-80∶茶樹油∶PBS＝1∶1∶1∶15的溶液)稀釋2.5倍裝入經(jīng)釋放介質(zhì)浸泡24h的透析袋內(nèi)，兩端扎緊(袋內(nèi)除氣泡)，懸置于盛有20ml釋放介質(zhì)的具塞錐形瓶中，37±1℃恒溫水浴恒速攪拌(120r/min)，不同時間取樣5ml，同時補加同溫同體積新鮮釋放介質(zhì)。每個時間點茶樹油的UV值以接收液的UV值作校正，茶樹油脂質(zhì)體的UV值用相應時間點的空白脂質(zhì)體的UV值作校正，同一樣品取3次實驗平均值。按公式Qn＝20Cn+5∑Cn-1計算累積釋藥量Qn(C為根據(jù)標準曲線計算所得的藥物濃度，n為取樣次數(shù))。以累積釋藥百分率對時間作圖得圖4。
結(jié)果顯示茶樹油溶液釋放速度較快，4h時累積釋放率就達到92.6％，6h后趨于平衡。而6h時脂質(zhì)體中茶樹油的釋放率僅為54.37％，18h時才趨于平衡，表明茶樹油脂質(zhì)體在體外具有明顯的緩釋效果。
實施例4茶樹油脂質(zhì)體的穩(wěn)定性取3批茶樹油脂質(zhì)體產(chǎn)物各三等分，分別置于冰箱、常溫和37℃恒溫培養(yǎng)箱中保存，觀測樣品的包封率，外觀、色澤及pH值的變化，如表2所示。結(jié)果表明，茶樹油脂質(zhì)體在冰箱中保存3個月后，包封率、pH值均無明顯變化，外觀形態(tài)也較穩(wěn)定；常溫保存的產(chǎn)物一個月內(nèi)比較穩(wěn)定，一個月后表面出現(xiàn)深黃色，pH也開始降低，說明脂質(zhì)體已有部分被氧化；37℃保存的脂質(zhì)體極不穩(wěn)定，20d時完全氧化變質(zhì)，這說明茶樹油脂質(zhì)體低溫儲存穩(wěn)定好。
表2 茶樹油脂質(zhì)體的穩(wěn)定性

注表中外觀表征符號為乳白均一混懸液(--)；乳白混懸液，表面有油滲出，微黃(-)；下層乳白混懸液，表面深黃(+)；下層乳白混懸液，表面深黃過半(++)；深黃色混懸液，變質(zhì)(+++)。
實施例5 殺菌實驗茶樹油脂質(zhì)體殺菌試驗采用瓊脂稀釋法。
取10ml茶樹油脂質(zhì)體(含茶樹油2ml)，用釋放介質(zhì)(體積比為無水乙醇∶吐溫-80∶茶樹油∶PBS＝1∶1∶1∶15的溶液)稀釋至50ml，依次取適量，以營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基稀釋，使茶樹油脂質(zhì)體濃度分別為0.24％、0.48％、0.64％、0.8％和1.6％。實驗菌種為大腸桿菌和金黃色葡萄球菌。
結(jié)果顯示上述茶樹油脂質(zhì)體各濃度下均未見菌種生長，表明茶樹油脂質(zhì)體殺菌效果顯著。
權(quán)利要求
1.一種含茶樹油的脂質(zhì)體及其制備方法，其特征在于將茶樹油、磷脂和親脂性穩(wěn)定劑溶于有機溶劑中，減壓蒸干有機溶劑成膜后，加入適量有機溶劑及水相介質(zhì)溶解膜狀物并超聲成乳，減壓蒸干有機溶劑，所得懸液繼續(xù)水合2～6小時。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷脂是卵磷脂。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的親脂性穩(wěn)定劑包括，膽固醇，硬脂胺，磷脂酸，生育酚，維生素E中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述的親脂性穩(wěn)定劑優(yōu)選膽固醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，磷脂和親脂性穩(wěn)定劑的質(zhì)量比為1∶1～7∶1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，茶樹油的質(zhì)量與磷脂和親脂性穩(wěn)定劑二者總質(zhì)量的比，即藥脂質(zhì)量比，為0.0015∶1～0.020∶1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的有機溶劑為氯仿和乙醚的混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，優(yōu)選有機溶劑的密度接近1g·L-1。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，水相介質(zhì)是pH為6.5～7.4的磷酸鹽緩沖溶液，優(yōu)選pH＝6.8。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，水相介質(zhì)和有機溶劑的體積比為0.5∶1～3∶1。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含茶樹油的脂質(zhì)體及其制備方法。本發(fā)明由茶樹油，磷脂和親脂性穩(wěn)定劑制備成茶樹油脂質(zhì)體。其方法是先將茶樹油、磷脂和親脂型穩(wěn)定劑溶于一定濃度的有機溶劑中，減壓蒸干有機溶劑；再加入適量有機溶劑及水相介質(zhì)溶解剩余物，超聲成乳，減壓蒸干有機溶劑，所得懸液繼續(xù)水合2－6小時。本發(fā)明制備工藝重現(xiàn)性好，茶樹油脂質(zhì)體包封率可達84％以上；產(chǎn)物形態(tài)圓整、粒徑均一，低溫儲存穩(wěn)定好，緩釋性能優(yōu)，殺菌效果顯著。
文檔編號A61Q19/00GK1785258SQ20051011031
公開日2006年6月14日 申請日期2005年11月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月11日
發(fā)明者徐云龍, 楊欣欣, 錢秀珍 申請人:上海微納科技有限公司