專利名稱：：濃縮的液體酶添加劑的穩(wěn)定化的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及濃縮的液體酶添加劑的穩(wěn)定化以防止沉淀。本發(fā)明還涉及制備所述的液體酶添加劑的方法。
背景技術：
：在含酶液體中的存儲穩(wěn)定性問題是眾所周知的。特別是在含酶液體洗滌劑中，尤其當洗滌劑含有蛋白酶時，確保隨時間穩(wěn)定的酶活性是個大難題?，F(xiàn)有技術廣泛涉及到改進存儲穩(wěn)定性，例如通過添加蛋白酶抑制劑改進存儲穩(wěn)定性。已知硼酸(boricacid)和硼酸(boronicacids)可逆地抑制蛋白水解酶。對一種絲氨酸蛋白水解酶，即枯草桿菌蛋白酶(subtilisin)的抑制的討論在Molecular&CellularBiochemistry51,1983，pp.5-32中4是供。硼酸作為枯草桿菌蛋白酶抑制劑具有非常不同的能力。只含有烷基如曱基、丁基或2-環(huán)己基乙基的硼酸是弱抑制劑，其中曱基硼酸作為最弱的抑制劑，而含有芳基如苯基、4-曱氧基苯基或3，5-二氯苯基的硼酸是強抑制劑，其中3,5-二氯苯基硼酸作為特別有效的抑制劑(參見Kelleretal,Biochem.Biophys,Res.Com.176,1991，pp.401-405)。據(jù)稱含有相對于硼在3-位具有取代的芳基硼酸是出乎預料好的可逆蛋白酶抑制劑。特別地，據(jù)稱乙酰氨基苯基硼酸(acetamidophenylboronicacid)為蛋白水解酶的優(yōu)良抑制劑(參見WO92/19707)。在EP0832174中，發(fā)現(xiàn)在對位以鄰接于苯基硼酸的>0=0取代的苯基硼酸衍生物在液體中具有異常好的作為酶穩(wěn)定劑的能力。然而，當解決酶的穩(wěn)定化問題時，出現(xiàn)了另一個問題。當在液體酶添加劑中使用硼酸或硼酸衍生物諸如4-曱?；交鹚?4-FPBA)以穩(wěn)定酶時，出現(xiàn)了在制備過程中和儲存后形成沉淀，這當然是不需要的副作用。發(fā)明概述因此，本發(fā)明的一個目的是提供液體酶添加劑，其包括酶和硼酸或硼酸的衍生物，其在制備過程中或存儲后不形成沉淀。本發(fā)明的另一個目的是提供制備形成沉淀最少的所述液體酶添加劑的方法。令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，將表面活性劑加入液體酶添加劑顯著地降低存儲過程中形成的沉淀量。由此在本發(fā)明的第一方面中，本發(fā)明提供了濃縮的液體酶添加劑，其包括酶、苯基硼酸或其衍生物和表面活性劑，其中所述酶以多于1.5g/L的量存在。在第二方面中，本發(fā)明提供了用于制備濃縮的液體酶添加劑的方法，其包括下列步驟i)提供液體酶制劑；ii)將i)的液體與硼酸或其衍生物混合；iii)在步驟ii)之前或之后或者與硼酸或其衍生物一起，將表面活性劑加入液^SI^力口劑中。本發(fā)明還涉及所述濃縮的液體酶添加劑的用途。發(fā)明詳述定義HLB值HLB(親水-親脂平衡)值是一種標為1至20的指標(index)。親脂的]1020親水的(油溶性的)(水溶性的)HLB系統(tǒng)是預測分子結構將提什么類型的表面活性劑性質的半經(jīng)驗方法。HLB系統(tǒng)是基于如下觀念一些分子具有親水基團；另一些分子具有親脂基團；而一些分子兩者兼有。每種基團在分子或混合物中的重量百分比預示了分子結構將顯示何種特性(behavior)。油包水乳化劑具有低HLB數(shù)值，通常為大約4。增溶劑具有高的HLB數(shù)值。水包油乳化劑具有中間到高的HLB數(shù)值。HLB是親水-親脂平tf，如W.C.Griffin,"CalculationofHLBValuesofNon-IonicSurfactants,"JournaloftheSocietyofCosmeticChemists5(1954》p249所述。表面活性劑作為表面活性劑的化學藥品。此術語包括起到乳化劑、分散劑、油潤濕劑、水潤濕劑、起泡劑和消泡劑作用的多種材料。表面活性劑特性的類型，作為乳化劑或分散劑或其它，取決于分子(或分子混合物)上的結構基團。pH:在本發(fā)明中，使用來自Radiometer的pH計PHM93和Ross②半微量組合pH電極(Orion8103SC)測量pH。在使用pH電極前，用來自RadiometerAnalytical的標準緩沖液(pH4.005定購號S11M002;pH7.000定購號S11M004和pH10.012定購號S11M007)校準pH電極。pH在室溫23°C測定。酶濃縮物酶濃縮物是已經(jīng)除去液體和/或除去不需要的材料的酶發(fā)酵液。濃縮的液體酶添加劑濃縮的液體酶添加劑是在成品諸如洗滌劑的制備中用作原料或預混合料(premix)的產(chǎn)品。濃縮的液體酶添加劑在下文中稱為液體酶添加劑或濃縮的-;^體H添力口劑。概述已顯示在液體洗滌劑中使用硼酸和其衍生物作為蛋白酶穩(wěn)定劑會引起問題。當制備含所述蛋白酶穩(wěn)定劑的液體酶添加劑時和存儲所述的液體酶添加劑后，看到可形成沉淀。洗滌劑制造要求待加至它們的產(chǎn)品中的液體是澄清的液體。使用不澄清的液體在心理上給終端用戶洗滌劑被污染了的印象。因此理想的是液體洗滌劑是澄清的，且由此其包含的原料是澄清的。此外，更容易泵送(pump)不含沉淀的液體。在所述液體酶添加劑的制造中的一個問題是存儲后形成沉淀。我們出乎意料地發(fā)現(xiàn)將表面活性劑加入液體酶添加劑中能防止沉淀的形成。此外，可看到在液體酶添加劑的制備過程中形成沉淀。在找到避免形成此沉淀的方法的研究中，出乎預料地發(fā)現(xiàn)如果在加入穩(wěn)定劑前調節(jié)液體酶添加劑的pH，則液體酶添加劑中pH的調節(jié)防止大部分沉淀的形成，而如果在加入穩(wěn)定劑后調節(jié)液體酶添加劑的pH則溶解大部分沉淀。液體酶添加劑本發(fā)明的液體酶添加劑包括酶、硼酸或其^f汙生物和表面活性劑。在本發(fā)明的具體實施方式中，液體酶添加劑具有5.5至10的pH。在本發(fā)明更具體的實施方式中，該pH是7.5至10。在本發(fā)明的另一具體實施方式中，液體酶添加劑還包括^5成性物質使得液體酶添加劑具有由i成性物質提供的7.5至10的pH。液體酶添加劑可包括其它的材料。在本發(fā)明的具體實施方式中，液體酶添加劑不包括螯合劑(chelant)。在本發(fā)明的更優(yōu)選的實施方式中，液體酶添加劑不包括乙醇胺。在本發(fā)明的還更優(yōu)選的實施方式中，液體酶添加劑不包括膦酸酯(phosphonates)。在本發(fā)明的最優(yōu)選的實施方式中，液體酶添加劑不包括香料(perfume)。液體酶添加劑是待加入液體洗滌劑的濃縮產(chǎn)品。因此液體酶添加劑中所用的酶量是非常大的。在本發(fā)明具體的實施方式中，存在于液體酶添加劑中的酶量是至少1.5g/L。在本發(fā)明更具體的實施方式中，酶量是至少5g/L。在本發(fā)明還更具體的實施方式中，存在的酶量是至少10g/L。在本發(fā)明最具體的實施方式中，存在的酶量是至少20g/L,如甚至高于25g/L。在本發(fā)明具體的實施方式中，酶量不超過200g/L。在本發(fā)明更具體的實施方式中，酶量不超過150g/L。在本發(fā)明最具體的實施方式中，存在于液體酶添加劑中的酶量少于100g/L。在本發(fā)明的具體實施方式中，液體酶添加劑包括按重量計4%以上的酶蛋白。在本發(fā)明的更具體實施方式中，液體酶添加劑包括按重量計至少5%的酶蛋白。在本發(fā)明的最具體實施方式中，液體酶添加劑包括按重量計至少7.5%的酶蛋白。酶通常是由細菌或真菌的發(fā)酵產(chǎn)生，并隨后通過本領域已知的方法回收。通常的回收方法可由下列步驟組成通過離心或過濾除去細胞和其它固體并通過超濾和/或減壓蒸發(fā)來濃縮?？稍诩磳饪s步驟之前、濃縮步驟之中或濃縮步驟不久之后加入多元醇，諸如l，2-丙二醇、山梨醇、簡單碳水化合物(simplecarbohydrate)或甘油，以使酶穩(wěn)定。也可使用多元醇的組合?；厥辗椒砂ㄆ渌襟E，取決于最終產(chǎn)品的規(guī)格。為了增加過程中的穩(wěn)定性，例如減少蛋白質水解包括蛋白質自水解(autoproteolysis),通常在酶穩(wěn)定且它們活性低的pH(例如在pH4.0-6.5)進行所述過程。增加穩(wěn)定性(包括減少蛋白質水解)的另一方式是在低溫(例如10°C以下)進行所述過程。但是，有時在較高溫度進行是有利的，例如為了增加通過膜的流量而在較高溫度進行過濾。根據(jù)本發(fā)明，液體組合物含有至少一種酶。該酶可以是任何商業(yè)上可得到的酶，特別是選自下組的酶蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶、裂合酶、氧化還原酶和它們的任意混合物。也包括同類酶(例如蛋白酶)的混合物。根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選含蛋白酶的液體組合物。在具體的實施方式中，優(yōu)選含兩種或兩種以上的酶的液體組合物，其中第一種酶是蛋白酶，而第二種酶選自下組淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶、裂合酶和氧化還原酶。在更具體的實施方式中，第二種酶是脂肪酶。應當理解的是酶變體(例如通過重組技術產(chǎn)生的)包括在術語"酶"的含義中。這樣的酶變體的例子公開于如EP251,446(Genencor)、WO91/00345(NovoNordisk)、EP525,610(Solvay)和WO94/02618(Gist-BrocadesNV)中?？蓪⒚富趤碜訬C-IUBMB的酶命名手冊(1992)進行分類，也參見在因特網(wǎng)上的ENZYME站點http:〃www,expasy.ch/enzyme/。ENZYME是與酶命名有關的信息儲存庫。其主要是以生物化學和分子生物學國際聯(lián)合會(IUB-MB)命名委員會的建議(AcademicPress,Inc.,1992)為基礎，描述了已提供其EC(酶學委員會)號的每種已表征的酶(BairochA.TheENZYMEdatabase,2000,NucleicAcidsRes28:304-305)。該IUB-MB酶命名法是以它們的底物特異性以及有時以它們的分子機制為基礎的；這樣的分類不反映這些酶的結構特征。幾年前，已提出另一種基于氨基酸序列相似性以家族進行的某些糖苷水解酶，例如內切葡聚糖酶、木聚糖酶、半乳聚糖酶、甘露聚糖酶、葡聚糖酶和a-半乳糖芬酶的分類。它們目前分為90個不同的家族參見CAZy(ModO)因特網(wǎng)站點(Coutinho,P.M.&Henrissat,B.(1999)Carbohydrate-ActiveEnzymes服務器，在URL:http:〃afmb.cnrs-mrs.fr/cazy/CAZY/index.html(相應的文4牛Coutinho,P.M.&Henrissat,B.(1999)Carbohydrate-activeenzymes:anintegrateddatabaseapproach.在"RecentAdvancesinCarbohydrateBioengineering"中,H.J.Gilbert,G.Davies,B.Henrissat和B.Svensson編，TheRoyalSocietyofChemistry,Cambridge,pp.3-12;Coutinho,P.M.&Henrissat,B.(1999)Themodularstructureofcellulasesandothercarbohydrate-activeenzymes:anintegrateddatabaseapproach.在"Genetics,BiochemistryandEcologyofCelluloseDegradation"中.，K.Ohmiya,K.Hayashi，K.Sakka,Y.Kobayashi，S.Karita和T.Kimura編，UniPublishersCo,，Tokyo,pp.15-23)。液體酶添加劑優(yōu)選包括蛋白酶，諸如絲氨酸蛋白酶。蛋白酶合適的蛋白酶包括動物、植物或微生物來源的蛋白酶。微生物來源為優(yōu)選。包括化學或遺傳修飾的變體。蛋白酶可以是絲氨酸蛋白酶，優(yōu)選堿性微生物蛋白酶或胰蛋白酶-樣蛋白酶。堿性蛋白酶的例子是枯草蛋白酶，特別是源自芽孢桿菌屬的那些，如枯草蛋白酶Novo、枯草蛋白酶Carlsberg、枯草蛋白酶309、枯草蛋白酶147和枯草蛋白酶168(描述于WO89/06279)。胰蛋白酶-樣蛋白酶的實例是胰蛋白酶(例如，豬或牛來源的)和描述于WO89/06270中的鐮孢屬蛋白酶。在本發(fā)明的具體實施方式中，蛋白酶是絲氨酸蛋白酶。絲氨酸蛋白酶或絲氨酸內肽酶(更新的名稱)是一類肽酶，其特征在于在酶的活性中心存在絲氨酸殘基。絲氨酸蛋白酶絲氨酸蛋白酶是一種催化肽鍵水解且在活性位點存在必需的絲氨酸殘基的酶。(White,Handler和Smith,1973"PrinciplesofBiochemistry,"第五版，McGraw-HillBookCompany,NY,pp.271-272)。細菌絲氨酸蛋白酶具有20,000至45，000道爾頓的分子量。它們受二異丙基氟磷酸抑制。它們水解普通末端酯(simpleterminalester)且在活性上與同為絲氨酸蛋白酶的真核胰凝乳蛋白酶相似。更窄的術語，堿性蛋白酶，其包含了一個亞組，反映出某些絲氨酸蛋白酶高的最適pH,pH9.0至ll.O(關于綜述，參見Priest(1977)BacteriologicalRev.41711-753)?？莶莸鞍酌赣蒘iezen等，ProteinEng.4(1991)719-737提出的暫時定名為枯草蛋白酶的絲氨酸蛋白酶的亞組。它們通過對先前稱作枯草溶菌素-樣(subtilisin-like)蛋白酶的絲氨酸蛋白酶的超過40個氨基酸序列的同源性分析來定義。先前將枯草溶菌素(subtilisin)定義為由革蘭氏陽性細菌或真菌產(chǎn)生的絲氨酸蛋白酶，而根據(jù)Siezen等目前是枯草蛋白酶的亞組。已鑒定出多種枯草溶菌素，并且已經(jīng)測定許多枯草溶菌素的氨基酸序列。這些包括源自芽孢桿菌屬菌抹的多于六種的枯草溶菌素，即枯草溶菌素168、枯草溶菌素BPN'、枯草溶菌素Carlsberg、枯草溶菌素Y、枯草溶菌素amylosacchariticus、和腸系膜肽酶(mesentericopeptidase)(Kuriharaetal.(1972)J.Biol.Chem.2475629-5631;Wellsetal.(1983)NucleicAcidsRes.117911-7925;StahlandFerrari(1984)J.Bacteriol.159811-819;Jacobsetal.(1985)Nucl.AcidsRes.138913-8926;Nedkovetal.(1985)Biol.Chem.Hoppe-Seyler366421-430;Svendsenetal.(1986)FEBSLett.196228-232)，源自》文線菌目(actinomycetales)的一種枯草溶菌素、源自普通熱》文線菌(thermoactinomycesvulgaris)的熱酶(thermitase)(Melounetal.(1985)FEBSLett.198195-200)、和一種真菌枯草溶菌素、源自白麥軸霉(Tritirachiumalbum)的蛋白酶K(JanyandMayer(1985)Biol.Chem.Hoppe-Seyler366584-492)。以下復制來自Siezen等的表I以便進一步參考。在物理上和化學上很好表征了枯草溶菌素。除這些酶的一級結構(氨基酸序列)的知識外，已確定了枯草溶菌素的超過50種高分辨的X-射線結構，其描繪了底物、過渡態(tài)、產(chǎn)物、至少三種不同的蛋白酶抑制劑的結合，并描述了天然變體的結構后果(Kraut(1977)Ann.Rev.Biochem.46331-358)?？莶莸鞍酌傅囊粋€亞組I-Sl,包括"典型的"枯草溶菌素，諸如枯草溶菌素168,枯草溶菌素BPN',枯草溶菌素Carlsberg(ALCALASE,NovozymesA/S),和枯草溶菌素DY。Siezen等(見前文)識別出枯草蛋白酶的另一個亞組I-S2。亞組I-S2蛋白酶被描述為高堿性枯草溶菌素，并且包括酶諸如枯草溶菌素PB92(MAXACAL,Gist-BrocadesNV)、枯草溶菌素309(SAVINASE,NovozymesA/S)、枯草溶菌素147(ESPERASE,NovozymesA/S)和堿性彈性蛋白酶YaB?？莶莸鞍酌富虻碾S機和定點突變都產(chǎn)生于對該酶的物理和化學性質和涉及枯草蛋白酶的催化活性、底物特異性、三級結構等的輔助信息的知識(Wellsetal.(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.84;1219-1223;Wellsetal.(1986)Phil.Trans.R.Soc.Lond.A.317415-423;HwangandWarshel(1987)Biochem.262669-2673;Raoetal,，(1987)Nature328551-554)。更多涉及此領域的近期出版物有Carteretal.(1989)Proteins6240-248,其涉及在底物中切割特異靶序列(24位和64位)的變體的設計；Graycaretal.(1992)AnnalsoftheNewYorkAcademyofSciences67271-79,其討論了大量的先前發(fā)表的結果；和Takagi(1993)Int.J.Biochem.25307-312,其也綜述了先前的結果。商業(yè)上可得到的蛋白酶(肽酶)的實例包括KannaseTM、EverlaseTM、EspcraseTM、AlcalaseTM、N6utras6TM、DurazymTM、Savinas6TM、Ovozym6TM、PyraseTM、PancreaticTrypsinNOVO(PTN)、6io-FeedTMPro和Clear-LensPro(都可/人NovozymesA/S，Bagsvaerd,Denmark獲得)。其它優(yōu)選的蛋白酶包括在WO01/58275和WO01/58276中所述的那些。其它商業(yè)上可得到的蛋白酶包括RonozymePro、Maxatase、MaxacalTM、MaxapemTM、OpticleanTM、PropeaseTM、Purafect和PurafectOx(可從GenencorInternationalInc,、Gist-Brocades、BASF或DSMNutritionalProducts獲得)。脂肪酶合適的脂肪酶包括細菌或真菌來源的那些脂肪酶。包括化學或遺傳修飾的突變體。有用的脂肪酶的實例包括疏棉狀腐質霉(//wm/co/a/朋wg/mwa)脂肪酶(例如EP258068和EP305216所述)，曼赫根毛霉(i/z/zowwcorw/e/^)脂肪酶(例如EP238023所述)，念珠菌屬(OwW/^)脂肪酶，諸如南極念珠菌(C.a"torc"ca)脂肪酶，例如EP214761所迷的南極念珠菌脂肪酶A或B，假單胞菌屬CP"M^ww加力脂肪酶，諸如類產(chǎn)堿假單胞菌CP戸^^^/<^//^"&)和產(chǎn)堿假單胞菌(戶a/ca"ge"&s)脂肪酶(例如EP218272所述)，蔥頭假單胞菌(Pc印ac/a)脂肪酶(例如EP331376所述)，施氏假單胞菌(PWwteen')脂肪酶(例如BP1,372,034所述)，熒光假單胞菌脂肪酶，芽孢桿菌屬(5acz7/w)脂肪酶，例如枯草芽孢桿菌(及swto7&)脂肪酶(Dar-toisetal"(1993),BiochemicaetBiophysicaacta1131,253-260)，嗜熱脂肪芽孢桿菌(及W^raAermo/7/^7w力脂肪酶(JP64/744992)和短小芽孢桿菌(及；W7w7w)脂肪酶(WO91/16422)。而且，許多克隆的脂肪酶可以是有用的，包括沙門柏干酪青霉(尸em'c〃"wmcame"&W")脂肪酶(Yamaguchi等所述，(1991)，Gene103,61-67)，白地霉(Geofn'cwmcawW血w)脂肪酶(Schimada，Y.等，(1989),J.Biochem"106,383-388)和各種根霉屬(7/^opw)脂肪酶諸如德列馬根霉(六.^/emw)脂肪酶(Hass,M.J等，(1991)，Gene109，117-113),雪白根霉(i."zVe""脂肪酶(Kugimiya等，(1992)，Biosci.Biotech.Biochem.56,716-719)和米根霉(兄o，ae)月旨肪酵。其它種類的脂解酶諸如角質酶也可以是有用的，源自門多薩假單胞菌C^ei^owo"twmem/oc/"a)的角質酶(如WO88/09367所述)，或源自豌豆腐皮鐮孑包(Fw^n'wwTO/am';^0的角質酶(例如WO90/09446中所述)。商業(yè)上可得到脂肪酶的例子包括LipexTM、LipoprimeTM、LipopanTM、LipolaseTM、LipolaseTMUltra、LipozymeTM、PalataseTM、ResinaseTM、Novozym435和Ledtase(所有都可從NovozymesA/S獲得)。其它商業(yè)上可得到脂肪酶包括LumafastTM(來自GenencorInternationalInc.的門多薩假單胞菌脂肪酶)；Lipomax(來自Gist-Brocades/GenencorInt.Inc.的類產(chǎn)堿假單胞菌脂肪酶)；和來自Solvayenzymes的芽孢桿菌屬菌種的脂肪酶。更多的脂肪酶可由其它供應商獲得諸如LipaseP"Amano"(AmanoPharmaceuticalCo.Ltd.)。淀粉酶合適的淀粉酶(a和/或P)包括細菌或真菌來源的那些淀粉酶。包括化學或遺傳修飾的突變體。淀粉酶包括，例如，由地衣芽孢桿菌(B.//c&m/o^m》的特殊菌抹獲得的a-淀粉酶，在英國專利說明書號1,296，839中有更詳細的描述。商業(yè)上可得到的淀粉酶是DuramylTM、Termamyl、Fungamyl和BAN(產(chǎn)自NovozymesA/S)以及Rapidase和MaxamylPTM(產(chǎn)自Gist-Brocades)。纖維素酶合適的纖維素酶包括細菌或真菌來源的那些纖維素酶。包括化學或遺傳修飾的突變體。在US4，435，307公開了合適的纖維素酶，其公開了產(chǎn)自特異腐質霉(/7wm/co/a/rao/e"力的真菌纖維素酶。尤其合適的纖維素酶是具有顏色保護(colorcare)益處的纖維素酶。這些纖維素酶的實例是在歐洲專利申請?zhí)?495257中所述的纖維素酶。氧化還原酶本文可使用適用于液體組合物的任何氧化還原酶，例如過氧化物酶或氧化酶諸如漆酶。本文合適的過氧化物酶包括植物、細菌或真菌來源的那些，包括化學或遺傳修飾的突變體。合適的過氧化物酶的實例是那些源自鬼傘屬(Co/W"w力菌抹例如灰蓋鬼傘(C.c/"en'^)或長根鬼傘(C.macrar/2&w力，或源自芽孢桿菌屬菌4朱，例如短小芽孢桿菌的過氧化物酶，尤其是才艮據(jù)WO91/05858的過氧化物酶。本文合適的漆酶包括細菌或真菌來源的那些，包括化學或遺傳修飾的突變體。合適的漆酶的實例是可從如下菌抹獲得的那些漆酶栓菌屬(rrametes)的菌抹，例如絨毛栓菌(7:vz'〃o^)或變色栓菌(7:v^s/co/or)，或者鬼傘屬的菌抹，例如灰蓋鬼傘，或者毀絲霉屬(聊"http://0;/7^0^3)的菌才朱，例如嗜熱毀絲霉(Mf/7erwop/z//a)?？纱嬖谟诒景l(fā)明的液體中的酶類包括氧化還原酶(EC1.-,,)、轉移酶(EC2,,,)、水解酶(EC3.-.-,)、裂合酶(EC4,.-.-)、異構酶(EC5.-.-,)和連接酶(EC6.-.-,)。本發(fā)明上下文中特定的氧化還原酶是過氧化物酶(EC1.11.1)、漆酶(ECU0.3.2)和葡糖氧化酶(EC1丄3.4)]。商業(yè)上可得到的氧化還原酶(EC的實例是Gluzyme(該酶可從NovozymeA/S獲得)。更多的氧化還原酶可從其他供應商獲得。優(yōu)選的轉移酶是以下任何一種亞類的轉移酶a轉移一碳基團的轉移酶(EC2.1);b轉移醛基或酮基的轉移酶(EC2.2);酰基轉移酶(EC2.3);c糖基轉移酶(EC2.4);d轉移脂族烴基(alkyl)或芳基，不包括曱基的轉移酶(EC2.5);和e轉移含氮基團的轉移酶(EC2.6)。本發(fā)明上下文中最優(yōu)選的轉移酶類型是轉谷氨酰胺酶(蛋白質-谷氨酰胺丫-谷氨?；D移酶；EC2.3.2.13)。合適的谷氨酰胺轉移酶的其它例子在WO96/06931中描述(NovoNordiskA/S)。本發(fā)明上下文中優(yōu)選的水解酶是羧酸酯水解酶(EC3丄1.-)如脂肪酶(EC3.1.1.3);肌醇六磷酸酶(phytase)(EC3丄3,),如3-肌醇六磷酸酶(EC3.1.3.8)和6-肌醇六磷酸酶(EC3.1.3.26);糖苷酶(EC3.2,它落入本文"糖酶"表示的組中)，如a-淀粉酶(EC3.2.1.1);肽酶(EC3.4,也稱作蛋白酶)；以及其它羰基水解酶。商業(yè)上可得到的肌醇六磷酸酶的例子包括Bio-FeedPhytase(Novozymes)、RonozymeP(DSMNutritionalProducts)、NatuphosTM(BASF)、Finase(ABEnzymes)以及PhyzymeTM產(chǎn)品系列(Danisco)。其它優(yōu)選的肌醇六磷酸酶包括WO98/28408，WO00/43503，和WO03/066847中描述的那些。在本上下文中，術語"糖酶"不僅用來表示能夠打斷糖鏈(如淀粉或纖維素)，特別是五元或六元環(huán)結構的糖鏈的酶(即糖苷酶，EC3.2)，還表示能夠使糖異構化的酶，比如將六元環(huán)結構諸如D-葡萄糖異構化為五元環(huán)結構諸如D-果糖。相關的糖酶包括下列物質(圓括號內為EC號)a-淀粉酶(EC3.2丄1)、卩-淀粉酶(EC3.2丄2)、葡聚糖1,4-a-糖苷酶(EC3.2丄3)、內-1,4-卩-葡聚糖酶(纖維素酶，EC3.2.1.4)、內-l,3(4)-卩-葡聚糖酶(EC3.2.1.6)、內-1,4-[卩]-木聚糖酶(EC3.2丄8)、葡聚糖酶(EC3.2.1.11)、幾丁質酶(EC3.2.1.14)、多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)、溶菌酶(EC3.2.1.17)、卩-糖苦酶(EC3.2.1.21)、a-半乳糖苷酶(EC3.2.1.22)、(3-半乳糖苦酶(EC3.2.1.23)、淀粉-l,6-糖苷酶(EC3.2.1.33)、木聚糖1,4-卩-木糖苷酶(EC3.2.1.37)、葡聚糖內-l,3-P-D-糖苷酶(EC3.2.1.39)、a-糊精內-l，6-a-糖普酶(EC3.2丄41)、蔗糖a-糖苷酶(EC3.2.1.48)、葡聚糖內-1，3-a-糖普酶(EC3.2.1.59)、葡聚糖1，4-卩-糖苷酶(EC3.2.1.74)、葡聚糖內-l,6-卩-糖苷酶(EC3.2.1.75)、半乳聚糖酶(EC3.2丄89)、阿拉伯聚糖內-l，5-a-L-阿拉伯糖苷酶(EC3.2.1.99)、乳糖酶(EC3.2.1.108)、殼聚糖酶(chitosanases)(EC3.2.1.132)和木糖異構酶(EC5.3.1.5)。商業(yè)上可得到的糖酶的實例包括Alpha-GalTM、Bio-FeedTMAlpha、Bio-FeedBeta、Bio-FeedPlus、Bio-FeedWheat、Bio-FeedTMZ、Novozyme188、CarezymeTM、Celluclast、CellusoftTM、CelluzymeTM、CeremylTM、CitrozymTM、DenimaxTM、DezymeTM、Dextrozyme、DuramylTM、EnergexTM、FinizymTM、FungamylTM、GamanaseTM、GlucanexTM、Lactozym「M、Liquezyme、Maltogenase、Natalase、Pentopan、Pectinex、Promozyme、Pulpzyme、Novamyl、Termamyl、AMG(AmyloglucosidaseNovo)、■Maltogenase、Sweetzyme和Aquazym(都可自NovozymesA/S獲得)。更多的糖酶可從其它供應商獲得，諸如Roxazyme及Ronozyme產(chǎn)品系列(DSMNutritionalProducts)、Avizyme、Porzyme及Grindazyme產(chǎn)品系列(Danisco,Finnfeeds)、Natugrain(BASF)、PurastarTM及PurastarTMOxAm(Genencor)。其它商業(yè)上可得到的酶包括MannawayTM、PectawayTM、Stainzyme和HenozymeTM。表面活性劑在液體酶添加劑中避免沉淀的合適的表面活性劑可以是任何表面活性劑。本發(fā)明的表面活性劑可以是陰離子的、非離子的、陽離子的或兩性的(amphoteric)(兩')"生離子的(zwitterionic))。已發(fā)現(xiàn)具有大于8的HLB值的表面活性劑是尤其合適的。在本發(fā)明的具體的實施方式中，HLB值是至少9諸如是至少10。在本發(fā)明的更具體的實施方式中，HLB值為10-20。在本發(fā)明的更具體的實施方式中，該表面活性劑的HLB值是11-15。在本發(fā)明的具體的實施方式中，該表面活性劑在0至40。C的溫度范圍內可溶于酶液體添加劑且未發(fā)生相分離。在本發(fā)明的更具體的實施方式中，可將表面活性劑作為兩種或多種表面活性劑的混合物加入。加入的表面活性劑的量特定地是全部液體添加劑的0.1至10%w/w，更特定地是0.25至8%w/w，諸如甚至更特定的是0.5至5%w/w。在本發(fā)明的具體的實施方式中，該表面活性劑的量少于全部液體酶添加劑的1%w/w。在本發(fā)明的具體的實施方式中，該表面活性劑的量少于全部液體酶添加劑的0.7%w/w。在本發(fā)明的具體的實施方式中，加至酶液體添加劑的表面活性劑的量是至少0.1%w/w。在本發(fā)明的更具體的實施方式中，加至液體酶添加劑的表面活性劑是至少0.25%w/w。在本發(fā)明的還更具體的實施方式中，加至液體酶添加劑的表面活性劑是至少0.5%w/w。在本發(fā)明的最具體的實施方式中，力口至液體酶添加劑的表面活性劑是至少1%w/w。在本發(fā)明的具體的實施方式中，加至酶液體添加劑的表面活性劑的量是少于20。/。w/w。在本發(fā)明的更具體的實施方式中，加至酶液體添加劑的表面活性劑的量是少于15%w/w。在本發(fā)明還更具體的實施方式中，加至酶液體添加劑的表面活性劑的量是少于10%w/w。在本發(fā)明的最具體的實施方式中，加至酶液體添加劑的表面活性劑的量是少于5%w/w。在本發(fā)明的具體的實施方式中，該表面活性劑是非離子表面活性劑。非離子表面活性劑包括醇乙氧基化物(alcoholethoxylate)(AEO或AE)、醇丙氧基化物(alcoholpropoxylate)、羧訐匕的醇乙氧基化物(carboxylatedalcoholethoxylates)、壬基酚乙氧基化物(nonylphenolethoxylate)、烷基多聚4唐苷(alkylpolyglycoside)、烷基二曱基氧化胺(alkyldimethylamineoxide)、乙氧基化脂肪酸單乙醇酰胺(ethoxylatedfattyacidmonoethanolamide)、脂肪酸單乙醇酰胺(fattyacidmonoethanolamide)、或多羥基烷基脂肪酸酰胺(polyhydroxyalkylfattyacidamide)(例如WO92/06154中所述)。烷基酚的聚環(huán)氧乙烷、聚環(huán)氧丙烷和聚環(huán)氧丁烷縮合物。這些化合物包括烷基酚與烯化氧(alkyleneoxide)的縮合產(chǎn)物，所述烷基酚具有以直鏈或支鏈構型含約6至14個碳原子，優(yōu)選約8至14個碳原子的烷基。在優(yōu)選實施方案中，環(huán)氧乙烷以等于每摩爾烷基酚約2至約25摩爾，更優(yōu)選每摩爾烷基酚約3至約15摩爾環(huán)氧乙烷的量存在。商業(yè)上可得到的這類非離子表面活性劑包括lgepalCO-630(由GAFCorporation銷售),及TritonX陽45、X-114、X-100和X-102(均由Rohm&HassCompany銷售)。這些表面活性劑一般稱為烷基酚烷氧基化物(例如烷基酚乙氧基化物)。優(yōu)選將伯和仲脂族醇與約1至約25摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物作為非離子表面活性劑。脂族醇的烷基鏈可以是直鏈或'支鏈，伯或仲，并通常含有約8至約22個碳原子。優(yōu)選的是具有烷基的醇與每摩爾醇約3摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物。所述烷基含有約8至約20個碳原子，更優(yōu)選約10至約18個碳原子。商業(yè)上可得到的這類非離子表面活性劑的實例包括Tergitol15-S-9(C-C15直鏈醇與9摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)，Tergitol24-L-6NNW(C，2-C,4伯醇與6摩爾環(huán)氧乙烷的具有窄的分子量分布的縮合產(chǎn)物)，上述兩者均由UnionCarbideCorporation銷售；NeodolTM45-9(C14-C15直鏈醇與9摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)，NeodolTM23-3(<:12-(:13直鏈醇與3.0摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)，NeodolTM45-7(CM-Qs直鏈醇與7摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)，NeodolTM45-5(d4-C。直鏈醇與5摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)，它們均由ShellChemicalCompany銷售；KyroEOB(C13-C15醇與9摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)，由Procter&GambleCompany銷售；以及GenapolLA050(Ci2-C14醇與5摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物)由Hoechst銷售。LutensolAN、AT、AO和TO型由BASF銷售。這些產(chǎn)品的HLB的優(yōu)選范圍為8-20,最優(yōu)選為8-18。尤其是優(yōu)選具有下列通式的表面活性劑<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中n+m=9-ll，x表示環(huán)氧乙烷基團的平均數(shù)而y表示環(huán)氧丙烯基團的平均數(shù)。商業(yè)上可得到的這類非離子表面活性劑的實例包括來自IneosOxide,Belgium的Softanol。公開于US4，566，647中的烷基多糖也可用作本發(fā)明的非離子表面活性劑，它具有疏水基團和多糖(例如多聚糖苷)親水基團，所述疏水基團含約6至約30個碳原子，優(yōu)選約IO至約16個碳原子；而所述親水基團含有約1.3至約10，優(yōu)選約1.3至約3,最優(yōu)選約1.3至約2.7個糖單元。可以使用含有5或6個碳原子的任何還原糖(reducingsaccharide),例如葡萄糖、半乳糖，并且可用半乳糖基部分代替葡萄糖基部分(任選地將疏水基團連接在2-、3-、4-等位置，因此得到與葡糖苷或半乳糖苷不同的(asopposedto)葡萄糖或半乳糖)。糖間的4建可以處于，例如在附加糖單元的一個位置和在前的糖單元上的2-、3-、4-和/或6"立之間。優(yōu)選的烷基多聚糖苷具有下式R20(CnH2。0)t(糖基)x其中W選自下組烷基、烷基苯基、幾基烷基、鞋基烷基苯基及它們的混合物，其中烷基含有約10至約18,優(yōu)選約12至約14個碳原子；n為2或3，優(yōu)選2;t為0至約10,優(yōu)選0;x為約1.3至約10，優(yōu)選約1.3至約3,最優(yōu)選約1.3至約2.7。糖基優(yōu)選源自葡萄糖。為制備這些化合物，首先形成醇或烷基聚乙氧基醇，然后將其與葡萄糖或葡萄糖源反應形成葡糖苷(連在1位)。于是可將附加糖基單元連在其1位和在前的糖基單元2-、3-、4-和/或6-位(優(yōu)選主要為2.位)之間。環(huán)氧乙烷與疏水堿的縮合產(chǎn)物也是合適的表面活性劑，其中疏水堿是由環(huán)氧丙烷與丙二醇縮合而形成的。這些化合物的疏水部分將優(yōu)選具有約1500至約1800的分子量，并且將顯示水不溶性。將聚氧乙烯(polyoxyethylene)部分加到這種疏水部分往往會增加分子作為整體的水溶性，且產(chǎn)物的液體特性被保持在這樣的程度，以使聚氧乙烯含量是縮合產(chǎn)物總重量的約50%，這相當于與多至約40摩爾環(huán)氧乙烷縮合。這類化合物的實例包括某些商業(yè)上可得到的Pluronic表面活性劑，由BASF銷售。環(huán)氧乙烷與由環(huán)氧丙烷和乙二胺反應所得產(chǎn)物的縮合產(chǎn)物也是適合用作本發(fā)明的非離子表面活性劑體系的非離子表面活性劑。這些產(chǎn)物的疏水部分由乙二胺和過量環(huán)氧丙烷的反應產(chǎn)物組成，通常具有約2500至約3000的分子量。該疏水部分與環(huán)氧乙烷縮合達到一定程度，以使縮合產(chǎn)物含有按重量計約40%至約80%的聚氧乙烯，并具有約5,000至約11,000的分子量。這類非離子表面活性劑的實例包括某些商業(yè)上可得到的TetronicTM化合物，由BASF銷售。其它合適的表面活性劑可以是烷基酚的聚環(huán)氧乙烷縮合物，伯和仲脂族醇與約1至約25摩爾環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，烷基多糖以及它們的混合物。最優(yōu)選的是具有3至15個乙氧基的Cs-Cw烷基酚乙氧基化物。其它合適的非離子表面活性劑可以是下式的多羥基脂肪酸酰胺表面活性劑R2畫C-N-Z，IIIOR其中R"為H，或R"為Cm徑基、2-羥乙基、2-羥丙基、或其混合物，W為Cw,烴基，且Z為具有直鏈烴基鏈及至少3個直接連在該鏈上的輕基的多羥基烴基，或其烷氧基化衍生物。優(yōu)選RJ為曱基，R"為直鏈Cu^烷基或C16.18的烷基或烯基鏈如椰子烷基(coconutalkyl)或它們的混合物，且Z在還原胺化反應中衍生自還原糖(諸如葡萄糖、果糖、麥芽糖或乳糖)。在本發(fā)明的具體實施方式中，表面活性劑選自下組R-O-(CH2CH20)nH其中R為具有8至22個碳原子的支鏈或直鏈烷基(alkane)，且n等于或大于3。在具體實施方式中n等于或大于4,在更具體實施方式中n等于或大于5。n可以是^f旦不限于3、7、8、15和80。在具體實施方式中，平均鏈長為C12至C18，在更優(yōu)選的實施方式中平均鏈長為C13至C16，在更具體的實施方式中平均鏈長為C13至C15。CH3(CH2)mCH(CH2)nCH3IO-(CH2CH20)xH式中x=5，m+n=9-ll,CH3(CH2)mCH(CH2)nCH3I0-(CH2CH20)xH式中x=9，n+m=9-ll,CH3(CH2)mCH(CH2)nCH310-(CH2CH20)x(CH2CH(CH3)0)yH式中m+『12-14,x=7，y=2.5，在本發(fā)明的另一具體實施方式中，表面活性劑選自下組CAS.No.68131-40-8,其包括具有下列類似物(synonym)的一組化合物Cll-15-仲-烷基陽(o-羥基多(氧-l,2-聯(lián)二曱基)(Cll-15畫sec-alkyl-omega-hydroxypoly(oxy-l，2-ethanediyl));Cll-15-仲醇，乙氧基化物(Cll-15-secondaryalcohols,ethoxylated);乙氧基化仲醇(EthoxylatedSecondaryAlcohols);SM-9;Tergitol15-S-9以及CAS.No.69227-20-9,其包括乙氧基化醇-(C16-C22)，在具體的實施方式中，表面活性劑選自下組表面活性劑也可以是胺、酰胺和酸的乙氧基化物。而且，表面活性劑可以是乙氧基化物和丙氧基化物的共聚物，包括但不限于醇、胺、酰胺和酸的乙氧-丙氧嵌,殳共聚物(ethoxy-propoxyblockco-polymers)。合適的陰離子表面活性劑包括烷基烷氧基化硫酸鹽表面活性劑。其實例是式RO(A)mS03M的水溶性鹽或酸，式中R為未取代的do-C24烷基或具有C,o-C24烷基部分的羥基烷基，優(yōu)選C,2-C20烷基或羥基烷基，更優(yōu)選d2-C,s烷基或羥基烷基，A為乙氧基或丙氧基單元，m大于0，通常為約0.5至約6,更優(yōu)選約0.5至約3，且M為H或陽離子，所述陽離子可以是例如金屬陽離子(如鈉、鉀、鋰、4丐、鎂等)，銨或取代的銨陽離子。烷基乙氧基化的硫酸鹽以及烷基丙氧基化硫酸鹽包括在本文中。取代的銨陽離子的具體實例包括曱基、二曱基、三曱基銨陽離子和季銨陽離子，如四曱基銨、二甲基哌啶鐵陽離子(dimethylpiperdiniumcation)，及由烷基胺如乙胺、二乙胺和三乙胺及其混合物等得到的那些陽離子。例示的表面活性劑是C12-C18烷基多乙氧基化物(1.0)硫酸鹽(C,2-d8E(1.0)M),C12-C18烷基多乙氧基化物(2.25)硫酸鹽(C12-C18(2.25)M),&2《18烷基多乙氧基化物(3.0)硫酸鹽(d2-dsE(3.0)M),及C,2-C^烷基多乙氧基化物(4.0)硫酸鹽(d2-dsE(4.0)M),其中M方便地選自4內—。其它合適的待使用的陰離子表面活性劑可以是烷基苯磺酸鹽(LAS)、a-烯烴石黃酸鹽(AOS)、烷基硫酸鹽(脂肪醇硫酸鹽)(AS)、脂肪醇乙氧基石克酸鹽(AEOS或AES)、仲烷基磺酸鹽(SAS)、a-磺基脂肪酸甲酯、烷基-或烯基-琥珀酸、二曱苯磺酸鹽或肥皂、烷基酯磺酸鹽表面活性劑，所述烷基酯磺酸鹽表面活性劑包括C8-C2Q羧酸(即脂肪酸)的直鏈酯，將所述直鏈酯根據(jù)"TheJournaloftheAmericanOilChemistsSociety",52(1975),pp.323-329用氣體SOs磺化。合適的起始原料將包括如由動物脂(tallow)、椋櫚油等得到的天然脂肪物質。一種優(yōu)選的陰離子表面活性劑是二甲苯磺酸的鈉、鉀或銨鹽，例如((^3)2(:6恥03亂合適的烷基酯磺酸鹽表面活性劑包括如下結構式的烷基酯磺酸鹽表面活性劑<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>其中113為Cs-C2o烴基，優(yōu)選烷基，或其組合，R"為d-C6烴基，優(yōu)選烷基，或其組合，且M為與烷基酯磺酸酯形成水溶性鹽的陽離子。合適的成鹽陽離子包括金屬如鈉、鉀及鋰，和取代或未取代的銨陽離子，如單乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺。優(yōu)選R為CurC!6烷基，而R"為曱基、乙基或異丙基。特別優(yōu)選的是曱基酯磺酸鹽其中R為Curd6烷基。其它合適的陰離子表面活性劑包括烷基硫酸鹽表面活性劑，其是式ROS03M的水溶性鹽或酸，式中R優(yōu)選為CurC24烴基，優(yōu)選具有(^0-<:2()烷基部分的烷基或羥基烷基，更優(yōu)選C。-ds烷基或羥基烷基，且M為H或陽離子，例如堿金屬陽離子(如鈉、鉀、鋰)，或銨或取代的銨(例如曱基、二曱基和三曱基銨陽離子及季銨陽離子，諸如四曱基銨和二曱基哌啶鑰陽離子，以及由烷基胺如乙胺、二乙胺、三乙胺及其混合物得到的季銨陽離子，等等)。通常，對于較低洗滌溫度(如低于約50°C)，優(yōu)選C,2-C,6烷基鏈，而對于較高洗滌溫度(如高于約5(TC)，優(yōu)選Q6-(^8烷基鏈。其它陰離子表面活性劑可以包括肥皂的鹽(包括例如鈉、鉀、銨及耳又代的銨鹽如單、二和三乙醇胺鹽)，Cs-C22伯或仲烷基磺酸鹽，Q-C24烯屬磺酸鹽，通過堿土金屬檸檬酸鹽的熱解產(chǎn)物的磺化所制備的磺化多羧酸(例如在英國專利說明書1,082,179號中所述)，(:8《24烷基聚乙二醇醚硫酸鹽(含多至10摩爾的環(huán)氧乙烷)，烷基甘油磺酸鹽，脂肪?；视突撬猁}，脂肪油基甘油硫酸鹽，烷基酚環(huán)氧乙烷醚硫酸鹽，鏈烷(paraffin)磺酸鹽，烷基磷酸鹽；羥乙基磺酸鹽(isethionate)諸如酰基羥乙基磺酸鹽，N-?；；撬猁}，烷基琥珀酰胺酸鹽和磺基琥珀酸鹽，磺基琥珀酸鹽的單酯(特別是飽和與不飽和的C,2-C,8單酯)，磺基琥珀酸鹽的二酯(特別是飽和與不飽和的CVC,2二酯)，?；“彼猁}(sarcosinates)，烷基多糖的硫酸鹽如烷基多聚糖苷的硫酸鹽(下面描述的非離子未硫酸化的化合物)，支鏈化的伯烷基硫酸鹽，和烷基聚乙氧基羧酸鹽如式RO(CH2CH20)k-CH2COO-M+的那些羧酸鹽，式中R為(:8《22烷基，k為0至10的整數(shù)，M為可溶性成鹽陽離子。樹脂酸和氫化樹脂酸也是合適的，如松香(rosin)、氫化松香、存在于或由妥爾油(talloil)得到的樹脂酸和氫化樹脂酸。烷基苯磺酸鹽可為合適的。尤其是線性直鏈烷基苯磺酸鹽(LAS),其中烷基優(yōu)選含有10至18個碳原子。另外一些實例在"SurfaceActiveAgentsandDetergents(表面活性劑和洗滌劑)"(Vol.I和II,由Schwartz,Perrry和Berch著)中描述。多種這樣的表面活性劑還一般公開在美國專利3,929,678中(第23欄58行至第29欄23行中，引入本文作為參考)。合適的陽離子表面活性劑是具有一個長鏈烴基的那些。此類陽離子表面活性劑的實例包括銨鹽表面活性劑諸如烷基三曱基卣化銨，和具有下式的那些表面活性劑[R^OR^yhRWx-式中Fe為在烷基鏈中具有約8至約18個碳原子的烷基或烷基千基；每個R3選自下組-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-、-CH2CH(CH2OH)-、-CH2CH2CH2-、及它們的混合物；每個W選自下組d-C4烷基，CrQ輕基烷基，通過連接兩個R4基團而形成的千基環(huán)結構，-CH2CHOHCHOHCOR6CHOHCH2OH(式中RS為任意己糖或具有小于約1000的分子量的己糖聚合物)，和氫(當y不是0時)；尺5與R"相同或是烷基鏈，其中112和115的碳原子總數(shù)不超過約18;每個y是0至約10,且各y值的總和是0至約15;而X是任何相容的陰離子。季銨鹽化合物RiRWN^-(i)式中R'為Q-d6烷基，每個R2、113和R4是獨立的CrQ烷基，d-C4羥基烷基，節(jié)基，及-(C2H40)xH，其中x值為2至5，且X是陰離子。R2、R3或W中不超過一個應是千基。優(yōu)選RJ的烷基鏈長為C12-CI5，尤其其中烷基是源自椰子或棕櫚仁脂肪的鏈長的混合物或者通過烯烴增長(olefinbuildup)或OXO醇合成而合成得到的。優(yōu)選的R2、113和114基團是曱基和羥基乙基，而X陰離子可選自卣素、甲基硫酸鹽、醋酸鹽和磷酸鹽離子。本文所用式(i)的合適的季銨化合物的實例為椰子三曱基氯化銨或椰子三曱基溴化銨(coconuttrimethy1ammoniumchlorideorbromide);椰子曱基二羥基乙基氯化銨或椰子曱基二羥基乙基溴化銨(coconutmethyldihydroxyethylammoniumchlorideorbromide);發(fā)基三乙基氯化按(decyltriethylammoniumchloride);癸基二曱基羥基乙基氯化銨或癸基二甲基羥基乙基溴化銨(decyldimethylhydroxyethylammoniumchlorideorbromide);Cirl5二曱基羥基乙基氯化銨或溴化銨(<:12-15dimethylhydroxyethylammoniumchlorideorbromide);椰子二曱基羥基乙基氯化銨或椰子二甲基羥基乙基溴化銨(coconutdimethylhydroxyethylammoniumchlorideorbromide);十四烷基三曱基曱基>5克酸銨(myristyltrimethylammoniummethylsulphate);十二烷基二甲基千基氯化銨或十二烷基二曱基千基溴化銨(lauryidimethylbenzylammoniumchlorideorbromide);十二烷基二曱基(乙烯氧基)4氯化銨或十二烷基二曱基(乙烯氧基)4溴化餘(lauryldimethyl(ethen0xy)4ammoniumchlorideorbromide);膽堿S旨(式(i)的化合物，式中W為CH2-CH2-0-C-C12-14烷基而R2R3R4為曱基)。IIo二-烷基咪唑啉(di-alkylimidazolines)[式(i)的化合物]。本文中有用的其它陽離子表面活性劑也在US4,228,044和EP000224中描述。兩性表面活性劑也可以是合適的?？蓪⑦@些表面活性劑廣泛地描述為仲胺或叔胺的脂族衍生物，或雜環(huán)仲胺和叔胺的脂族衍生物，其中的脂族基(aliphaticradical)可以是直鏈或支鏈的。脂族取代基之一含有至少約8個碳原子，通常約8至約18個碳原子，且至少一個脂族取代基含有陰離子水溶性基團，例如羧基、磺酸基、硫酸基。兩性表面活性劑的實例參見US3,929,678(第19欄，第18-35行)。兩性離子表面活性劑也可以是合適的?？蓪⑦@些表面活性劑廣泛地描述為仲胺或叔胺的衍生物，雜環(huán)仲胺和叔胺的衍生物，或季銨、季磷総(quaternaryphosphonium)或誄又4克(tertiarysulfonium)4匕合物的書亍生物。兩'I"生離子表面活性劑的實例參見US3,929,678(第19欄，第38行至第22欄，第48行)。半極性非離子表面活性劑是非離子表面活性劑中的特殊的一類，其包括水溶性氧化胺、水溶性氧化膦(phosphineoxide)和水溶性亞砜(sulfoxide)，所述水溶性氧化胺含有約10至約18個碳原子的一個烷基部分和選自含有約1至約3個碳原子的烷基和羥基烷基的兩個部分，所述水溶性氧化膦含有約10至約18個碳原子的一個烷基部分和選自含有約1至約3個碳原子的烷基和羥基烷基的兩個部分，而所述水溶性亞砜含有約10至約18個碳原子的一個烷基部分和選自含有約1至約3個碳原子的烷基和羥烷基的部分。半極性非離子表面活性劑包括具有下式的氧化胺表面活性劑<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>式中W為含有約8至約22個碳原子的烷基、羥基烷基、或烷基苯基或它們的混合物；W為含有約2至約3個碳原子的亞烷基或羥基亞烷基或者它們的混合物；x為0至約3;且每個R5是含有約1至約3個碳原子的烷基或羥基烷基，或者含有約1至約3個環(huán)氧乙烷基團的多環(huán)氧乙烷基。RS基團可以相互連接，例如通過氧或氮原子相互連接，形成環(huán)形結構。這些氧化胺表面活性劑尤其包括C,o-C!8烷基二曱基氧化胺和Q-C,2烷氧基乙基二羥基乙基氧化胺。酶穩(wěn)定劑本發(fā)明的酶穩(wěn)定劑是硼酸和/或其衍生物。在本發(fā)明的具體實施方式中，穩(wěn)定劑是苯基硼酸和/或其衍生物。本發(fā)明包括含硼酸或其衍生物的液體酶添加劑。在具體實施方式中，本發(fā)明包括含苯基硼酸或其衍生物的液體酶添加劑。在本發(fā)明的具體實施方式中，穩(wěn)定劑是萘硼酸衍生物。存在于液體酶添加劑中的穩(wěn)定劑的量取決于存在于液體酶添加劑中的酶量。加入的穩(wěn)定劑量具體為總液體添加劑的0.1至20Q/。(w/w)，更具體為0.5至8%(w/w),如甚至更具體為1至5%(w/w)。在本發(fā)明的具體實施方式中，穩(wěn)定劑量大于總液體添加劑的l%(w/w)。在本發(fā)明的更具體實施方式中，穩(wěn)定劑量大于總液體添加劑的1.5%(w/w)。在本發(fā)明的最具體實施方式中，穩(wěn)定劑量大于總液體添加劑的2%(w/w)。在本發(fā)明的具體實施方式中，加至酶液體添加劑的穩(wěn)定劑量是至少0.1%(w/w)。在本發(fā)明更具體的實施方式中，加至液體酶添加劑的穩(wěn)定劑是至少0.5°/。(w/w)。在本發(fā)明還更具體的實施方式中，加至液體酶添加劑的穩(wěn)定劑是至少1%(w/w)。在本發(fā)明最具體的實施方式中，加至液體酶添加劑的穩(wěn)定劑是至少1.5%(w/w)。在本發(fā)明的具體實施方式中，加至酶液體添加劑的穩(wěn)定劑量小于20%(w/w)。在本發(fā)明更具體的實施方式中，加至酶液體添加劑的穩(wěn)定劑量小于15%(w/w)。在本發(fā)明還更具體的實施方式中，加至酶液體添加劑的穩(wěn)定劑量小于10。/。(w/w)。在本發(fā)明最具體的實施方式中，加至酶液體添加劑的穩(wěn)定劑量小于5%(w/w)。在本發(fā)明的具體實施方式中，苯基硼酸衍生物具有下式式中R選自下組氫、羥基、C,-C6烷基、取代的Q-C6烷基、d-Q烯基和取代的d-C6烯基。本發(fā)明的優(yōu)選實施方式提供液體組合物，其含有酶和上式的苯基硼酸衍生物酶穩(wěn)定劑，式中R為CrQ烷基，尤其是其中R為CH3、CH3CH2或CH3CH2CH2,或者其中R是氫。在本發(fā)明的具體實施方式中，酶的穩(wěn)定劑是4-甲酰-苯基-硼酸(4-FPBA)。在本發(fā)明的另一個具體實施方式中，穩(wěn)定劑選自下組噻吩-2硼酸(thiophene-2boronicacid),蓬分畫3硼酸(thiophene畫3boronicacid),乙酰氨基苯基硼酸，苯并吹喃-2硼酸(benzoforan-2boronicacid)，萘-1硼酸(naphtalene-1boronicacid)，萘-2硼酸(naphtalene-2boronicacid),2-FPBA,3-FBPA,4-FPBA，l-p塞蒽硼酸(l-thianthreneboronicacid),4-氧藥硼酸(4-dibenzofuranboronicacid),5-曱基p羞吩-2硼酸，石危茚硼酸(thionaphtreneboronicacid),吹喃-2硼酸，呋喃-3硼酸，4，4聯(lián)苯-二硼酸，6-羥基-2-萘(6-hydroxy-2-naphtalene),4-(曱硫基)笨基硼酸(4-(methylthio)phenylboronicacid),4(三甲基-曱硅烷基)苯基硼酸(4(trimethyl-silyl)phenylboronicacid),3-溴p塞喻硼酸，4-曱基p塞吩硼酸，l萘基硼酸Onaphtylboronicacid),5-溴噻吩硼酸，；5-氯遙吩硼酸，二曱基漆吩硼酸，2-溴苯基硼酸，3-氯苯基硼酸，3-曱氧基-2-嗜吩，對-曱基-苯基乙基硼酸，2-瘞蒽硼酸，二-苯并p塞吩硼酸，4-羰基苯基硼酸，9-蒽基硼酸，3，5二氯苯基硼酸，聯(lián)苯基硼酸酐，鄰-氯苯基硼酸，對-氯苯基硼酸，間-溴苯基硼酸，對-溴苯基硼酸，對-氟苯基硼酸，對-曱苯基硼酸，鄰-曱苯基硼酸，辛基硼酸，1，3,5三曱基苯基硼酸，3-氯-4-氟苯基硼酸，3-氨基苯基硼酸，3，5-雙-(三氟曱基)苯基硼酸，2,4二氯苯基硼酸，4-曱氧基苯基硼酸。更多的適合作為穩(wěn)定劑的合適的硼酸衍生物描述于US4,963,655，US5,159,060，WO95/12655,WO95/29223,WO92/19707，WO94/04653，WO94/04654,US5442100，US5488157和US5472628中。堿性化合物將4是供大于7的pH的任何化合物加至液體酶添加劑時，可將其用于調節(jié)該含酶混合物的pH。合適的化合物可以是堿，例如氫氧化鈉、氳氧化鉀或堿性緩沖鹽。合適的緩沖鹽可以是碳酸氫鉀、碳酸鉀、焦磷酸四卸、三聚磷酸鉀、碳酸氬鈉和碳酸鈉?？墒褂媚芴峁A性pH的其它合適的鹽或化合物。制造液體酶添加劑的方法本發(fā)明還涉及液體酶添加劑的制備。該液體酶添加劑包括酶、硼酸或其書f生物和表面活性劑?？砂措S機次序或全部同時混合這些化合物。在本發(fā)明的具體的實施方式中，本發(fā)明的方法包括步驟i)提供液體酶制劑；H)將i)的液體酶制劑與表面活性劑和硼酸或其衍生物混合；在本發(fā)明的更具體的實施方式中，本發(fā)明的方法包括步驟i)提供液體酶制劑；ii)將i)的液體酶制劑和硼酸或其^f汙生物混合；以及iii)在加入硼酸或其書f生物同時、之前或之后，將表面活性劑加入液體酵-添力口劑。在本發(fā)明的更具體的實施方式中，在加入硼酸或其衍生物前，將表面活性劑與液體酶制劑混合。在本發(fā)明的具體的實施方式中，制造含1.5g/L酶的濃縮的液體酶添加劑的方法包括步驟i)提供液體酶制劑；ii)將i)的液體酶制劑和硼酸或其書f生物混合；以及iU)在加入硼酸或其書f生物之前或之后，將表面活性劑加入液體酶添加在加入硼酸或其衍生物之前，可將表面活性劑加至發(fā)酵液、無細胞的發(fā)酵液、或含一種或多種酶的濃縮物。在本發(fā)明的具體的實施方式中，將表面活性劑加至發(fā)酵液。在本發(fā)明的更具體的實施方式中，將表面活性劑加至無細胞的發(fā)酵液。在本發(fā)明的最優(yōu)選的實施方式中，將表面活性劑加至酶濃縮物。我們還發(fā)現(xiàn)在一些情況下液體酶添加劑制備方法可對添加劑的穩(wěn)定性有影響，從而對其中沉淀的形成有影響。在本發(fā)明的具體實施方式中，酶添加劑的pH為4.5至11。在本發(fā)明更具體的實施方式中，酶添加劑的pH為5.5至10。我們發(fā)現(xiàn)調節(jié)pH和該調節(jié)發(fā)生的時間對液體酶添加劑中沉淀的形成有影響。我們發(fā)現(xiàn)可將含酶液體的pH調節(jié)到pH7.5至10以避免沉淀，更具體為8至9。優(yōu)選在混合含酶液體與硼酸或其衍生物之前調節(jié)pH由此避免形成沉淀。也可在混合含酶液體與硼酸或其衍生物之后進行調節(jié)由此將形成的沉淀溶解。在本發(fā)明的具體實施方式中，本發(fā)明的方法包括步驟i)提供液體酶制劑；ii)將i)的液體酶制劑和硼酸或其衍生物混合；在加入硼酸或其衍生物之前或之后，將液體的pH調節(jié)到7.5至10。因此在本發(fā)明的具體實施方式中，本發(fā)明的方法包括步驟i)提供液體酶制劑；ii)將i)的液體酶制劑和硼酸或其衍生物混合；在加入硼酸或其衍生物之前或之后，將液體的pH調節(jié)到7.5至10,和在加入硼酸或其書t生物之前或之后，將表面活性劑加入該液體?？捎萌魏魏线m的堿性物質調節(jié)pH。在具體的實施方式中，用NaOH調節(jié)pH。在具體的實施方式中，制造液體酶添加劑的方法包括如下步驟i)提供含有一種或多種酶的液體酶制劑；ii)將i)的液體酶制劑與表面活性劑混合；iii)將ii)的液體酶制劑的pH調節(jié)到7.5至10;iv)將ii)的液體組合物與硼酸或其衍生物混合?；蛘遡)提供含有一種或多種酶的液體酶制劑；ii)將i)的液體酶制劑的pH調節(jié)到7.5至10;iii)將ii)的液體酶制劑與表面活性劑混合；iv)將ii)的液體組合物與硼酸或其衍生物混合。在更具體的實施方式中，制造液體酶添加劑的方法包括下列步驟i)提供含有一種或多種酶的液體酶制劑；ii)將i)的液體酶制劑與表面活性劑混合；iii)將ii)的液體酶制劑的pH調節(jié)到7.5至10;iv)將ii)的液體組合物與苯基硼酸或其衍生物混合。或者i)提供含有一種或多種酶的液體酶制劑；ii)將i)的液體酶制劑的pH調節(jié)到7.5至10;iii)將ii)的液體酶制劑與表面活性劑混合；iv)將ii)的液體組合物與苯基硼酸或其衍生物混合?？蓪⑴鹚峄蚱鋇f汙生物作為固體或作為以部分溶解或完全溶解的形式含有硼酸或其衍生物的液體加至液體酶制劑。在本發(fā)明的具體實施方式中，硼酸或其^f汙生物溶解于甘油或1，2-丙二醇中，其在添加前用氫氧化鈉或氬氧化鉀調節(jié)至pH8.5-10。含本發(fā)明的液體酶添加劑的組合物本發(fā)明也涉及含本發(fā)明的液體酶添加劑的組合物。該組合物可以是任何組合物，zf旦特別合適的組合物是洗滌組合物(cleaningcomposition)、個人護理組合物、織物處理組合物例如漂白組合物、藥物組合物、皮革處理組合物、紙漿或紙?zhí)幚斫M合物、食物及飲料組合物和動物飼料組合物。在本發(fā)明的具體實施方式中，將液體酶添加劑用作液體洗滌劑(例如洗衣洗滌劑)中的原材料。本發(fā)明還涉及液體酶添加劑在液體洗滌劑組合物中的用途。根據(jù)本發(fā)明，含液體酶添加劑的液體組合物(例如液體洗滌劑)中，液體酶添加劑可以0.01-20%w/w的濃度存在，優(yōu)選該組合物可含有0.05-10%w/w的液體酶添加劑，更優(yōu)選該液體組合物可含有0.1-5%w/w的液體酶添加劑，最優(yōu)選該液體組合物可含有0.1-3°/。w/w的液體酶添加劑。將本發(fā)明的液體酶添加劑用于液體組合物(諸如洗滌劑)時，每種酶量以純酶蛋白計算通常為1-1000mg/L，具體為5-750mg/L，尤其為10-500mg/L。才艮據(jù)本發(fā)明，含液體酶添加劑的液體組合物(例如液體洗滌劑)中，液體組合物可含有0.001-7.5%w/w的硼酸或其衍生物，優(yōu)選組合物可含有0.005-4%w/w的硼酸或其書f生物，更優(yōu)選組合物可含有0.005-1.2%w/w的硼酸或其書f生物，最優(yōu)選組合物可含有0.01-0.15%w/w的硼酸或其纟汙生物。硼酸或其衍生物可以是酸或所述酸的堿金屬鹽。本發(fā)明通過下列的實施例進行進一步描述，不應理解為限定本發(fā)明的范圍。實施例實施例1用4-FPBA和表面活性劑配制蛋白酶。蛋白酶為含約40g酶蛋白/L和55%的1，2-丙二醇，pH5.5的濃縮的Savin3S6溶液。在實施例中試驗的表面活性劑參見表1。表1.<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>*親水-親脂-平4軒將表面活性劑加入蛋白酶中(在最終組合物中2%w/w)?；旌虾笥?0MNaOH將pH調節(jié)至8.7。4吏用產(chǎn)自Radiometer的pH計PHM93和Ross⑧半《鼓量組合pH電才及(Orion8103SC)測量pH。使用前，使用來自Radiometeranalytical的標準緩沖液(pH4.005定購號S11M002;pH7.000定購號S11M004和pH10.012定購號S11M007)校準pH電極。在室溫測定pH。將用10MNaOH調節(jié)至pH9.6的30%4-FPBA的1,2-丙二醇溶液加入酶/表面活性劑混合物中直到4-FPBA的最終濃度為1.6%w/w。最終酶濃度是36mg/ml。然后將樣品轉移至兩小瓶中，密封后分別在5。和40。C溫育4星期。儲藏后，通過目測確定樣品的物理穩(wěn)定性。作為對照，按同樣的方法制備樣品，只是沒有加入表面活性劑。目測的結果參見表3。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>*:澄清:未出現(xiàn)可見固體；渾濁出現(xiàn)的固體懸浮于液體中；沉淀:出現(xiàn)的固體沉淀在小瓶的底部。實施例2用4-FPBA和表面活性劑配制蛋白酶。試驗了與實施例1所用相同的三種表面活性劑。蛋白酶為含44g酶/L和30%的1，2-丙二醇，pH5.2的濃縮的Alcalase溶液。將表面活性劑加入蛋白酶(在最終組合物中2%w/w)?；旌虾笥?0MNaOH將pH調節(jié)至8.7。將用10MNaOH調節(jié)至pH9.6的30%4-FPBA的1,2-丙二醇溶液加入酶/表面活性劑混合物直到最終濃度為1.6%w/w。最終酶濃度是40mg/ml。然后將樣品轉移至兩小瓶中，密封后分別在5。和40°C溫育4星期。儲藏后，通過目測確定樣品的物理穩(wěn)定性。作為對照，按同樣的方法制備樣品，只是沒有加入表面活性劑。目測結果參見表4。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>*:澄清:未出現(xiàn)可見固體；渾濁出現(xiàn)的固體懸浮于液體中；沉淀:出現(xiàn)的固體沉淀在小瓶的底部。實施例3按實施例1和2所概述的進行本實驗，只是改變表面活性劑的濃度。結果顯示于表5。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>*:最終濃度結論是不同的蛋白酶需要加入不同量的表面活性劑以完全防止沉淀。實施例4使用下列方法用4-FPBA配制蛋白酶(與實施例1中相同)1)將表面活性劑加入液體蛋白酶樣品中至最終濃度為2。/。w/w(參見表l)。2)混合后，用10MNaOH將pH調節(jié)至8.7。3)然后加入4-FPBA至最終濃度為1.6%w/w。4)然后將樣品轉移至兩小瓶中，密封后分別在5。和40。C溫育4星期。5)儲藏后，通過目測確定樣品的物理穩(wěn)定性。作為對照，按步驟l-5制備樣品，只是沒有加入表面活性劑。成份4-FPBA溶液用10MNaOH將30o/。4-FPBA的1,2-丙二醇溶液調節(jié)至pH9.6含有約40g酶蛋白/L和55%的1,2-丙二醇，pH5.5的濃縮的Savinase溶液用10MNaOH將30。/。4-FPBA的1,2-丙二醇溶液調節(jié)至pH9.6表面活性劑C(來自實施例1)表面活性劑D:R-0-(CH2CH20)nH，兩種表面活性劑的混合物，式中R是平均鏈長為13-15個碳原子的烷烴且n-3表面活性劑E:如表面活性劑D,只是n二7表面活性劑F:如表面活性劑D，只是R是平均鏈長為13個碳原子的烷烴且11=8表面活性劑G:如表面活性劑F,只是n-15表面活性劑H:R-0-(CH2CH20)nH，兩種表面活性劑的混合物，式中R是平均鏈長為13個碳原子的烷烴且11=3和8試驗結果顯示于表6表6.<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>*:澄清:未出現(xiàn)可見固體；渾濁出現(xiàn)的固體或油相懸浮于液體中；沉淀:出現(xiàn)的固體沉淀在小瓶的底部。**:HLB值依據(jù)W.C.Griffin試驗顯示HLB值低于9的表面活性劑不起作用。酶蛋白測定可通過許多方法可確定酶溶液的酶蛋白濃度。如果已知酶的比活性，可通過如下方法測定酶蛋白濃度首先在選定的一組條件下測定酶活性(以單位/g原料表示)，并除以該比活性(以單位/mg酶蛋白表示)。通過如下方法測定酶的比活性首先使用本領域已知的方法將酶純化至同質(homogeneity),然后在與用于測量酶蛋白濃縮物中的酶活性相同的一組條件下測定純化的樣品中的酶活性。也測定了純化的樣品中的總蛋白質濃度，然后用純化的樣品的酶活性除以蛋白質濃度而得到比活性?？赏ㄟ^本領域熟知的多種總蛋白質測定的一種來測定總蛋白濃度(不同的比色蛋白質測定的綜述由ChristineV.Sapan，RogerL.LundbladandNicholasC.PriceinBiotechnol.Appl.Biochem.(1999)29，p99-108給出)。如果含酶溶液只含有活性形式的目的蛋白，則可通過測量總蛋白質濃度來直接測定酶蛋白濃度。本發(fā)明所用的方法是基于N,N-二曱基酪蛋白(DMC)水解的試驗。簡單地，在8分鐘的預溫育期之后通過分光光度法在420nm監(jiān)測蛋白酶活性10分鐘。試驗在pH8.3和37。C進行。將下列溶液用于試驗DMC-底物0.4%N,N-二甲基酪蛋白在卯mM四硼酸鈉、120mM磷酸鈉、0.2%Brij35中，調節(jié)至pH8.0。TNBS溶液1.73mM的2，4，6-三硝基笨磺酸水溶液。稀釋緩沖液0.15MKC1,0.05M硼酸，0.16M亞硫酸鈉，0.2%Brij35，調節(jié)至pH9.0。對于試驗，將80TNBS溶液與45|aL樣品或標準物(稀釋于稀釋緩沖液中)混合，并通過加入160DMC-底物開始反應。總蛋白質測定參考文獻M.Matsushita,'T.Irino，T.KomodaandY,Sakagishi"Determinationofproteinsbyareversebiuretmethodcombinedwiththecopper-bathocuproinechelatereaction",ClinicaChimicaActa,216(1993),p103-111。權利要求1.一種濃縮的液體酶添加劑，其包括酶、硼酸或其衍生物和表面活性劑，其中所述的酶以大于1.5g/L的量存在。2.權利要求1的液體酶添加劑，其中所述酶以大于5g/L的量存在。3.權利要求1的液體酶添加劑，其中pH為5至10。4.權利要求1的液體酶添加劑，其還包括石咸性物質以使液體酶添加劑的pH為7.5至10。5.權利要求1的液體酶添加劑，其中所述表面活性劑的HLB值為至少9。6.權利要求1的液體酶添加劑，其中所述表面活性劑的HLB值是10-20。7.權利要求1的液體酶添加劑，其中該酶是蛋白酶。8.權利要求7的液體酶添加劑，其還包括第二種酶，尤其是淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶或氧化還原酶，或它們的任意混合物。9.權利要求8的液體酶添加劑，其中所述第二種酶為淀粉酶。10.權利要求1-9的液體酶添加劑，其中所述苯基硼酸或其衍生物以總液體添加劑的多至20%w/w的量存在。11.權利要求1-10的液體酶添加劑，其中以總液體添加劑的0.1至10%w/w的量加入所述苯基硼酸或苯基硼酸衍生物。12.權利要求1的液體酶添加劑，其中所述硼酸或其衍生物是苯基硼酸或其衍生物。13.權利要求12的液體酶添加劑，其中所述苯基硼酸的衍生物是下式的苯基硼酸衍生的酶穩(wěn)定劑式中R選自下組氫、羥基、C廣C6烷基、取代的C,-C6烷基、C廣C6烯基和取代的Q-C6烯基。14.權利要求13的液體酶添加劑，其中R為C!-Q烷基。15.才艮據(jù)權利要求13的液體酶添加劑，其中R為氫。16.權利要求1的液體酶添加劑，其中所述表面活性劑選自下組R-0-(CH2CH20)nH式中R為具有8至22碳原子的支鏈或直鏈烷基而n等于或大于3,CH3(CH2)mCH(CH2)nCH3I0-(CH2CH20)xH式中x=5，m+n=9-ll，CH3(CH2)mCH(CH2)nCH3I0-(CH2CH20)xH式中x=9，n+m=9-ll,CH3(CH2)mCH(CH2)nCH3IO-(CH2CH20)x(CH2CH(CH3)0)yH式中m+n=12-14，x=7，y=2.5以及(CH3)2C6H3S03Na。17.權利要求1-16的液體酶添加劑，其中以總液體添加劑的0.1至10%的量加入所述表面活性劑。18.#>據(jù)權利要求1-16的液體酶添加劑，其中以總液體添加劑的0.25至8%的量加入所述表面活性劑。19.制備權利要求1的液體酶添加劑的方法，包括步驟提供液體酶制劑；ii)將i)的液體酶制劑與表面活性劑和硼酸或其衍生物混合。20.權利要求19的方法，其中所述液體酶添加劑的pH為5至10。21.權利要求19的方法，其還包括加入堿性物質以將液體酶添加劑的pH調節(jié)為7.5至10的步驟。22.權利要求21的方法，其中在權利要求19的步驟ii)前加入堿性物質。23.權利要求21的方法，其中i成性物質為NaOH。24.權利要求1至18的液體酶添加劑在液體洗滌劑組合物中的用途。25.液體組合物，其包括根據(jù)權利要求1-18的液體酶添加劑。26.權利要求25的液體組合物，其中所述液體組合物是洗滌劑。27.權利要求26的液體組合物，其中液體酶添加劑以液體酶添加劑總量的0.01-20%w/w的量存在于所述洗滌劑中。全文摘要本發(fā)明涉及濃縮液體酶添加劑，包括酶、硼酸或其衍生物和表面活性劑，其中酶按大于1.5g/L的量存在。該添加劑應用于液體洗滌劑組合物中。文檔編號C11D3/386GK101297025SQ200680039998公開日2008年10月29日申請日期2006年9月1日優(yōu)先權日2005年9月2日發(fā)明者漢尼·P·尼爾森申請人:諾維信公司